Çalışma Ulusal Sağlık Enstitüleri hibe 1P01DA028555-01A1, 2R01 NS034239 2R37 NS36126, P01 NS31492, P20RR 15635, P01MH64570 ve P01 NS43985 (HEG) tarafından da desteklenmiştir. Yazarlar eleştirel okuma yazması ve üstün grafik ve edebi destek için teşekkür ederim Bayan Robin Taş. Biz onun ıslak freze uzmanlık Steve Grzelak teşekkür etmek istiyorum. Ayrıca tarama ve transmisyon elektron mikroskobu görüntüleri sağlamak için, Nebraska-Lincoln elektron mikroskobu çekirdek tesisin Üniversitesi Dr Han Chen teşekkür etmek istiyorum. Son olarak, canlı konfokal mikroskobi kullanarak onun uzmanlık için Megan Marquart teşekkür etmek istiyorum.

<ol>
	<li>Gendelman, H. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+isolation+and+propagation+of+human+immunodeficiency+virus+on+recombinant+colony-stimulating+factor+1-treated+monocytes.">Efficient isolation and propagation of human immunodeficiency virus on recombinant colony-stimulating factor 1-treated monocytes.</a> J Exp Med. 167 (4), 1428-1441 (1988).</li><li>Dou, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+macrophage-based+nanoparticle+platform+for+antiretroviral+drug+delivery.">Development of a macrophage-based nanoparticle platform for antiretroviral drug delivery.</a> Blood. 108 (8), 2827-2835 (2006).</li><li>Dou, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+investigations+for+the+morphologic,+pharmacokinetic,+and+anti-retroviral+properties+of+indinavir+nanoparticles+in+human+monocyte-derived+macrophages.">Laboratory investigations for the morphologic, pharmacokinetic, and anti-retroviral properties of indinavir nanoparticles in human monocyte-derived macrophages.</a> Virology. 358, 148-158 (2007).</li><li>Dou, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Macrophage+delivery+of+nanoformulated+antiretroviral+drug+to+the+brain+in+a+murine+model+of+neuroAIDS.">Macrophage delivery of nanoformulated antiretroviral drug to the brain in a murine model of neuroAIDS.</a> J Immunol. 183 (1), 661-669 (2009).</li><li>Nowacek, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanoformulated+Antiretroviral+Drug+Combinations+Extend+Drug+Release+and+Antiretroviral+Responses+in+HIV-1-Infected+Macrophages:+Implications+for+NeuroAIDS+Therapeutics.">Nanoformulated Antiretroviral Drug Combinations Extend Drug Release and Antiretroviral Responses in HIV-1-Infected Macrophages: Implications for NeuroAIDS Therapeutics.</a> J Neuroimmune Pharmacol. , (2010).</li><li>Nowacek, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NanoART+synthesis,+characterization,+uptake,+release+and+toxicology+for+human+monocyte-macrophage+drug+delivery.">NanoART synthesis, characterization, uptake, release and toxicology for human monocyte-macrophage drug delivery.</a> Nanomed. 4 (8), 903-917 (2009).</li><li>Kalter, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhanced+HIV+replication+in+macrophage+colony-stimulating+factor-treated+monocytes.">Enhanced HIV replication in macrophage colony-stimulating factor-treated monocytes.</a> J Immunol. 146 (1), 298-306 (1991).</li></ol>

NanoART HIV-1 terapötikler geliştirmek için tasarlanmıştır. Biz klinik kullanım için bu teknolojiler geliştirmek için bir ilk adım olarak nanoformulated ilaç geliştirme için bir laboratuvar test sistemi olarak monosit-makrofaj bazlı bir ilaç dağıtım sistemi önerdi. Bizim geçmiş çalışmaları sistemi böyle bir uygulama 5,6 için geçerli olduğunu göstermiştir. Cari rapor, HIV-1 yaygın olarak kullanılan ilaçlar (ritonovir RTV; efavirenz, EFV ve atazanavir, ATV indinavir IDV) NP sentezleme yöntemleri gösterilmektedir. Bu ıslak öğütme, homojenizasyon ve ultrasonik sağlandı. Önemlisi, bizim yaklaşımımız nanoART fiziksel özellikleri, boyut, şekil ve şarj 5,6 gibi değişiklikler için izin verir . Yüzey dikkatli seçimi, bir nötr son derece olumlu, son derece olumsuz bir parçacığın şarj kontrol edebilirsiniz. Işlem süresi ve yoğunluğu değiştirerek, bir boyutu kontrolü ve ≥ 3 mm olarak ≤ 200 nm gibi küçük veya büyük parçacıklar hale. Parçacık şekli de diğer fiziksel özelliklerine göre daha az bir ölçüde kontrol altına alınabilir. Örneğin, küresel parçacıklar çok taraflı geometrik şekiller, ıslak öğütme ve homojenizasyon ile imal edilebilir polimerler ile sonication yoluyla yapılabilir. Islak öğütme ve homojenizasyon farklı şekilli parçacıklar üretmek, ancak bu sürecin fraksiyonasyon yöntemi bağımlı ve doğrudan kontrol edilemez. Bu özellikler üretim yöntemleri, araştırmalar tam tasarım özellikleri kolayca nanoART üretmek etkinleştirebilirsiniz. NanoART fizikokimyasal özellikleri, istikrar, gerek üzerinde güçlü bir etkisi var ve nasıl hücrelerle etkileşime beri Bu hayati önem taşımaktadır. Örneğin, biz nanoART, yaklaşık 1 mikron boyutunda olan güçlü bir pozitif yüke sahip bir multisided geometrik şekil makrofajlar tarafından bir kez hücrelerin içinde daha istikrarlı daha hızlı bir şekilde ele alınması ve daha uzun bir süre boyunca yayımlanan göstermiştir süresi 6. Test nanoART için bir yöntem, alınacak parçacıklar yeteneği basit bir tarama için izin veren gelişmiş muhafaza ve viral replikasyon inhibe etme kapasitesine ek olarak, makrofajlar, HIV-1 ilkesini hedef hücreleri tarafından yayımlanan oldu. Bu kolaylıkla performansa dayalı nanoART farklılaştırmak ve beşeri nanoART gelişmekte verimlilik ve hız hem de artan, bu nedenle, in vivo modelde başarılı en iyi şans olduğunu tespit için sağlar. NanoART ile ex vivo fare kemik iliği makrofajlar yüklenir ve adoptively humanize HIV-1 enfekte olmuş fareler, merkezi sinir sistemi de dahil olmak üzere, aktif enfeksiyon sitelerine seyahat ve serbest ilaçlar için 2 hafta içinde intravenöz enjeksiyon yoluyla transfer olduğu kanıtlanmıştır 2-4 viral replikasyon inhibe etmek. Buna ek olarak, bu nanoART yüklü hücreler de etkili plazma virüs bulaşmış hücrelerin sayısını azaltmak mümkün, hem de CD4 + hücreler 2 korumak gibi lenf düğümleri, dalak, karaciğer ve akciğer. Bu çalışmalar, ön rağmen, hücre-aracılı nanoART dağıtım sistemi, kan ve enfekte dokuların hem de klinik olarak anlamlı miktarda ilaç dağıtabilirsiniz göstermektedir. Çünkü HIV-1 enfekte fare çalışmalardan cesaret ön sonuçlar, şu anda, klinik kullanım için nanoART potansiyelini daha test etmek için bir maymun immün yetmezlik virüsünün enfekte makak modeli geliştiriyoruz.

Tabloda kullanılan kısaltmalar: IDV: İndinavir; RTV: ritonavir, ATV: atazanavir; EFV: effavirenz; PVA: polyvinylalcohol; SDS sodyum dodesil sülfat; P188: poloxamer 188 (aynı zamanda Pluronic F68 olarak adlandırılır), MPEG-2000-DSPE: metil-poli (etilen-glikol) 1,2-distearoyl fosfatidil-etanolamin; DOTAP: (1-oleoyl-2-[6 - [(7-nitro-21 ,3-benzoxadiazol-4-il) amino] hexanoyl] - 3-trimethylammonium propan); PLGA: poli (laktik-ko-glikolik asit); CTAB: cetyltrimethyl amonyum bromür; DMEM: Dulbecco&#39;nun Modifiye Kartalı Orta; MCSF: Makrofaj Koloni-Uyarıcı Faktör; HPLC: Yüksek basınçlı sıvı kromatografi; HIV-1 : Human Immunodeficiency Virus-1

methods development for blood borne macrophage carriage of nanoformulated antiretroviral drugs

Antiretroviral (ART) ilaçlar için ilaç toksisiteleri azaltmak için de hizmet verirken Nanoformulated ilaçların farmakodinamik ve biyoyararlanımını artırabilir. Bu amaçla, bizim laboratuar ART rejimleri basitleştirmek için nanotıp, ilkeleri uygulanır ve uyum ve ilaç farmakokinetiği artırırken gibi toksisiteleri azaltmak. Üretim nanoformulated ART (nanoART) için basit ve güvenilir bir yöntem gösterilmiştir. Saf ilaç parçacıkları surfaktan lipid kaplama ince bir tabaka ile sarmalanır ve ıslak öğütme veya yüksek basınçlı homojenizasyon küçük olanları içine büyük ilaç kristalleri fraksiyonasyon tarafından üretilmektedir. Alternatif bir yöntem serbest ilacın bir polimer bir damlacık askıya alınır. Burada, ilaç bireysel nano boyuttaki damlacıkları oluşana kadar sonra ultrasonik çalkalanırken bir polimer içinde çözülür. Dinamik ışık saçılımı ve mikroskobik muayene parçacıklar (partikül boyutu, şarj ve şekli) fiziksel özelliklerini karakterize eder. Onların biyolojik özellikleri (hücre alımı ve tutma, sitotoksisite ve antiretroviral etkinliği) insan monosit kökenli makrofajlar (MDM) ile belirlenir. MDM, arıtma için santrifüj Yıkayarak tasviye kullanarak leukopacks izole edilmiş insan periferik kan monositler türetilmiştir. Bu tür kan kaynaklı makrofajlar nanoART dağıtım insan immün yetmezlik virüsü (HIV) enfekte organların hücresel taşıyıcılar olarak kullanılıyor olabilir. Biz bağ, klinik kullanıma antiretroviral ilaçları, HIV-1 tedaviler için nanopartiküller içine ambalajladığını uyumu geliştirmek ve hastalık sonuçları olumlu etkileyebilir.

Watch this Scientific Journal Video about Methods Development for Blood Borne Macrophage Carriage of Nanoformulated Antiretroviral Drugs at JoVE.com

Methods Development for Blood Borne Macrophage Carriage of Nanoformulated Antiretroviral Drugs

Indinavir, ritonavir, efavirenz ve atazanavir Nanopartiküller ıslak öğütme, homojenizasyon ve ultrasonik kullanılarak imal edildi. Bu nanoformulations, toplu nanoformulated makrofaj tabanlı ilaç dağıtım değerlendirildi antiretroviral tedavi (nanoART) olarak adlandırılır. Monosit türevi makrofaj nanoART alımı, saklama ve sürekli salım belirlendi. Bu ön çalışmalar, klinik kullanım için nanoART potansiyel öneririz.

Kan Bazlı Makrofaj Taşıma Nanoformulated antiretroviral ilaçlar Geliştirme Yöntemleri

Nanoformulated drugs can improve pharmacodynamics and bioavailability while serving also to reduce drug toxicities for antiretroviral (ART) medicines. To ...

methods-development-for-blood-borne-macrophage-carriage

Research

JoVE Journal

Bioengineering

13.1K Görüntüleme.  University of Nebraska Medical Center. Indinavir, ritonavir, efavirenz ve atazanavir Nanopartiküller ıslak öğütme, homojenizasyon ve ultrasonik kullanılarak imal edildi. Bu nanoformulations, toplu nanoformulated makrofaj tabanlı ilaç dağıtım değerlendirildi antiretroviral tedavi (nanoART) olarak adlandırılır. Monosit türevi makrofaj nanoART alımı, saklama ve sürekli salım belirlendi. Bu ön çalışmalar, klinik kullanım için nanoART potansiyel öneririz.