Biofábrica Moscamed Brasil, Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) ve Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnologia'ya (CNPq) finansal destek için teşekkür ederiz.  Ayrıca aşağıdaki kişilere yardımları için teşekkür ederiz; Miriam dos Santos, Gildeane Silva, Gessilane dos Santos, Fabio Gonçalves, John Paul Oliveira, Luiza Garziera, José Carlos Valença.

Böcek Gereksinimleri
1. Genel Bakış
<ol><li>Kütle yetiştirme, her biri kütle yetiştirme ünitesinin ayrı bir alanında gerçekleştirilen birkaç aşamaya sahiptir. Şekil 1, yetiştirmenin ana aşamasını ve toplu yetiştirme tesisinde nerede meydana geldiklerini göstermektedir.</li>
</ol>2. Böcekçi için Biyogüvenlik Hususları
<ol><li>Proje, Brezilya São Paulo Üniversitesi'nden hayvan etiği komitesi tarafından onaylandı ve gerekli tüm izinler ve onaylar alındı.</li>
	<li>RIDL sistemi koşullu öldürücülük kullanır; bir diyet takviyesi (tetrasiklin), böceklerin kitlesel olarak yetiştirilmesine izin vererek RIDL sisteminin ifadesini önler; tetrasiklin olmadan sivrisinekler ölür. Tetrasiklin, vahşi doğada Ae. aegypti üreme alanlarında bulunmaz, bu nedenle kaçaklardan üretilen herhangi bir yavru hayatta kalamaz.  Bu, diğer yöntemlerle(yani radyasyon) sterilize edilen vahşi tip (WT) böcekleri kullanma konusunda ekstra bir güvenlik seviyesi ekler.</li>
	<li>Böcek ilacında çift kapılı giriş, "Sadece Yetkili Personel" işaretleri ve böcek ekranları kullanın. Koloninin WT böcekleri ile kirlenmesini önlemek ve böcek ilacının içinden kaçışları önlemeye yardımcı olmak için herhangi bir pencere kapatılmalıdır.</li>
	<li>Yerel yönetmeliklerin ve yetkililerin belirli ek veya alternatif gereksinimleri olabilir. Erken bir aşamada bilgi / rehberlik için ilgili makamlarla iletişime geçin ve RIDL suşunu bir böcek ilacında kurmadan önce gerekli tüm izinleri ve onayları güvence altına alın.</li>
	<li>Kütle yetiştirme insektisiti sadece RIDL yetiştirme için kullanılmalıdır. Başka hiçbir suş veya böcek bulunmamalıdır. Bu, RIDL suşu ve kirlenmesinin fitness ve hayatta kalmayı etkileyebilecek patojenlerle kirlenmesini önlemek, serbest bırakılan erkeklerin verimliliğini ve etkinliğini azaltmaktır.</li>
</ol>3. Böcek Tasarımı
<ol><li>
Şekil 2, Brasil'deki Biofábrica Moscamed'de kullanılan böcek ilacının bir planını göstermektedir.</li>
	<li>Tüm odaların sıcaklığı 26 °C ± 2) idi ve yaklaşık% 70-80 bağıl nem ve floresan ışık şeritleri kullanılarak 12:12 saat ışık: karanlık döngü.</li>
	<li>Bu şema belirli alan gereksinimlerine göre değiştirilebilir, örneğin sürümün ölçeği genel boyutu belirleyecektir. Bununla birlikte, yumurta üretimi, yetiştirme ve ayıklama, Kalite Kontrol (QC) ve serbest bırakmalar dört ayrı alana ayrılmalıdır: Yumurta Üretim Kolonisi, Serbest Bırakma Üretimi, QC ve Serbest Bırakma için Yetişkin Depolama.</li>
	<li>Yumurta Üretim Kolonisi odası (yaklaşık 20 m2)salınım üretimi için yumurta üretmek için kullanılır.</li>
	<li>Kalite Kontrol alanı, tarama oranı, pupa sayıları, pupa boyutu ve kadınların sıralanma ve çıkarılmasının etkinliğinin ölçülmesi de dahil olmak üzere PROSEDÜRLERI ve RIDL hattının uygunluğunu kontrol etmek için deneylerin yapıldığı yerdir. WT kontaminasyonu için testler, ölümcüllüğü ölçen ofset tahlilleri kullanılarak floresan belirteci ve fenotip bunların varlığını kontrol ederek de yapılır.</li>
	<li>Serbest Bırakma Oluşturma odası (yaklaşık 36 m2),tepsiler ve larva ve pupaların sıraya dizilimi için yeterli alan gerektirir. Tepsiler amaca uygun alüminyum raflarda tutulur. Yetiştirme ve ayıklama için geniş bir çalışma alanı ve lavabo, tepsilerin ve kafeslerin yıkanması için ise başka bir büyük lavabo gereklidir. Canlı sivrisineklerin kanalizasyondan kaçışını azaltmak için lavabolardan atık su çıkışına bir filtre yakalama tuzağı dahil edilmiştir.</li>
	<li>Tepsiler için kullanılan tüm su, gelişimin herhangi bir aşamasında böceklerin kaçmasını önleyen bir ağ içeren bir bölmeye sahip bir drenajdan atılır.</li>
	<li>Yetişkinler serbest bırakılmadan önce olgunlaşırken serbest bırakma cihazlarını tutmak için raf içeren serbest bırakma için yetişkinlerin depolanmasının bir alanı gereklidir (Serbest Bırakma için Yetişkin Depolama, Şekil 2).</li>
</ol>Toplu Yetiştirme RIDL için Üretim Yöntemleri:
Yumurta Üretim Kolonisi, yetişkinleri üretmek için Salınım Üretimi 'nde (Şekil 1) kullanılan yumurtaları üretir. İki yetiştirme yönteminde birçok benzerlik vardır, aynı zamanda bazı belirgin farklılıklar vardır. Her iki prosedür için de aynı olan yetiştirme işlemleri sadece Yumurta Üretim Kolonisi bölümünde açıklanmıştır.
Yumurta Üretim Kolonisi
4. Larva Üretimi
Yumurta Üretim Kolonisi, Salınım Üretimi için homozigous OX513A RIDL yumurta8 üretir. Yüksek kalite kontrolü, sağlanan yumurtaların canlılığını, zindeliğini ve gerinim bütünlüğünü sağlar.
<ol><li>Kuluçka için uyaran, düşük çözünmüş oksijen seviyesine sahip suya batırılmasıdır. Sudaki oksijen seviyesini azaltmak için suyu kaynayana kadar ısıtın ve hemen 400 ml'yi 500 ml cam kavanozlara (74 mm açıklık çevresi) yerleştirin, kapağı güvenli bir şekilde sabitleyin ve soğuması için birkaç saat oda sıcaklığında bırakın.</li>
	<li>Bir kavanoz kaynamış suya 1 g yumurta koyun, yeniden alın ve bir saat bekleyin. İçeriği 2 L su ile bir tepsiye aktarın ve böcek koşulları altında gece boyunca bırakın.</li>
	<li>Yumurtadan çıkan larvaları bilinen bir su hacmine yerleştirin ve aliquots almak için yeterli zaman için manyetik bir karıştırıcı ve pire kullanarak karıştırın; kuvvetlice veya uzun süre karıştırmak larvalara zarar verir ve minimumda tutulmalıdır. Larvaları taramak için kullanılan standart hacim 1 L'dir, ancak 300'den fazla larva / ml'den fazla yoğunlukların sayılması zordur ve zarar verici olabilir. Bu nedenle yaklaşık 300.000 yumurta / L'den fazla su yumurtadan çıkmayın.</li>
	<li>Üç adet 1 ml aliquot alarak ve fazla suyu emmek için emici bir süngerin üzerine 1 cm karelik bir ızgara ile emici bir kağıda yerleştirerek tarama oranını belirleyin.  Yumurtadan çıkmış ve taranmamış yumurtanın sayısını üç kareden, yumurtadan çıkmış bir yumurtanın eksik kapağını arayarak sayın. %80-90 civarında bir tarama oranı beklenmektedir.</li>
	<li>Her biri 1 ml'lik dört aliquot alın ve dört siyah ağırlık teknesine yerleştirin (larvalar beyazdır ve bu nedenle siyah bir arka plana karşı daha kolay görülebilir) ve gözle bulunan canlı larva sayısını sayın; sayaç kullanılması önerilir. Ml başına ortalama larva sayısı daha sonra tepsi başına istenen sayıda larva elde etmek için her tepsiye eklenecek su hacmini hesaplamak için kullanılır.</li>
	<li>Larvaların suşlar ve türler arasında yetiştirilebileceği yoğunlukta büyük farklılıklar olabilir. RIDL yetişkin erkek boyutunu vahşi tip erkeklerle karşılaştırmak da arzu edilir; ideal olarak, vahşi erkeklerle başarılı bir şekilde rekabet edebilecek daha büyük boyutlu RIDL erkeklerine benzer olmak istersiniz. Bu nedenle, her RIDL suşu için larvaların ideal yoğunluğunun belirlenmesi gerekir ve yetiştirme ve üretim ölçeği için alan kısıtlamalarına karşı bir takastır. 0.1-2.5 larva / ml arasında değişen yoğunluklar, üretim çıktısı ve kalitesinin iyi bir kombinasyonu olduğunu gördük; ayrıca Medici tarafından tartışıldı23.</li>
	<li>Larvaları tepsilere ekleyin. Tesisimizde üretim için larva yoğunluğunu sağlamak için yaklaşık 53 cm x 37 cm x 8 cm (L x W x H) ve gerekli miktarda su içeren tepsiler kullanıyoruz.</li>
	<li>Gerekli 30 μg/ ml'lik son konsantrasyonu elde etmek için tepsilere 1:100 seyreltmede bir tetrasiklin (suda 3 mg / ml) stok çözeltisi ekleyin.</li>
	<li>Larvaları, ince bir toz haline getirilmiş pul balık yemi<a href="http://www.sera.de">(www.sera.de)</a>ile besleyin. Tablo 1, larva başına günlük gıda mg'ında tipik beslenme rejimini gösterir. Larvaları yukarıda açıklanan böcek koşulları altında uygun sıralama gününe kadar besleyin.</li>
</ol>5. Larvaları Pupa ve Erkek / Dişi Pupalardan Sıralama
<ol><li>Larvaları pupalardan ayırarak kuluçkadan 8 gün sonra pupalardan sıralayın. Sonra erkekler için pupaları seksle sıralayın. Plaka ayırıcısı 24,25 olarak bilinen bir cihaz larvaları erkek pupalardan ve dişi pupalardan sıralayabilir. Şekil 3, larvaları erkekten ve dişi pupalardan ayırmak için bu plaka ayırıcının kullanımını göstermektedir.</li>
	<li>Altta bir ağ olan bir ölçüm kaşığı kullanarak, 500 pupa veya daha fazla ile kalibre edin ve kafesler kurmak ve üretilen toplam erkek ve dişi pupa miktarını tahmin etmek için kullanın.</li>
	<li>Sıralamanın ilk gününde (8. gün) pupaların çoğu erkektir, bu nedenle sıralanmış larvaları bir tepsiye geri yerleştirin ve pupaların çoğunun dişi olduğu ertesi güne kadar arka tarafa yerleştirin (Şekil 4).</li>
	<li>Sıralama işlemini her gün 2.1-2.3 adımlarında açıklandığı gibi, tüm larvalar yavrulanana kadar veya bir çalışma haftasının sonuna kadar tekrarlayın.</li>
	<li>Bir kafese 1.000 erkek pupa (ölçü kaşığını kullanarak) yerleştirin ve 9. günde aynı kafese 3.000 dişi pupa ekleyin (örgü üst ve ağlı erişim deliği ile uyarlanmış 30 cm yüksekliğinde ve 30 cm çapında PVC borular kullanıyoruz, ancak BugDorm'dan 30 cm x 30 cm plastik kafesler de mevcuttur).</li>
	<li>Yetişkinlerin en az 2 gün çiftleşmelerine izin verin ve onlara sakkaroz çözeltisi sağlayın (%10) kan beslemeden önce ıslak pamuklu reklam libitumunda. Haftada iki kan yemi ile iki hafta (~ iki gonotrofik döngü) yumurta toplayın. Bu, 3.000 dişilik bir kafesten (ortalama 48 yumurta / dişi) ortalama 143.000 yumurta verir. Haftada 4 milyon yumurta üretimi için her hafta yaklaşık 28 kafes kurulması gerekir.</li>
</ol>6. Kan Besleme
<ol><li>Alüminyum plaka besleme sistemi kafeslere haftada iki kez kan sağlar. Parafilmli bir alüminyum plakanın (10 cm x 10 cm x 3 mm) yanında bir kan cebi oluşturulur (Şekil 5). Beslenmeyi teşvik etmek için, plaka besleyicinin üzerine ısıtılmış bir fasulye torbası yerleştirilerek kan ısıtılır. Fasulye torbası, bir mikrodalga fırında yaklaşık 10 saniye ısıtılan bir bez torbada yaklaşık 250 g buğday tanelerinden oluşuyordu. Beslenme için kullandığımız kan yerel bir sitoirden; Bu hayvanlar (özellikle keçiler ve koyunlar) insan tüketimi için olduğu için patojenlerin varlığını önlemek için test edilirler.</li>
	<li>Kan beslemeden üç gün sonra, dişilerin yumurtalarını bırakmaları için bir yumurtlama alanı sağlanır. Yumurtlama bölgesi, içini kaplayan su ve filtre kağıdı ile yaklaşık 1/4'e doldurulmuş yuvarlak bir plastik kaptır. İki gün sonra yumurtlama yeri kaldırılır. Maksimum yumurta üretimi için, filtre kağıdının kabın içindeki mevcut yüzeyin tamamını kapladığından ve ıslak kaldığından emin olun.</li>
	<li>Yumurta kağıdını çıkarın ve böcek koşullarında kurumak için emici kağıda yerleştirin; yumurtalar yüksek nemde (%70'in üzerinde) bir şartlanma süresi gerektirir en az 48 saat sonra döşenir. Yumurtalar, nem yüksek tutulduğu sürece, kuluçka oranında minimum düşüşle3aya kadar böcek ilacı içinde bırakılabilir.</li>
	<li>Yumurta üretim kolonisinin, serbest bırakma programı için haftalık olarak gerekli olan yumurta sayısını sağlamak için yeterli boyutta olması gerekir. Yukarıda açıklanan tesis, haftada 28 kafes ile yaklaşık 4 milyon yumurta üretebilir. Salınım Üretimi ve Yumurta Üretim Kolonisi için en az 4 haftalık yumurtayı garanti edecek kadar yumurtanın saklanması önerilir.</li>
</ol>Sürüm Oluşturma
7. Larva Üretimi
Salınım üretimi için tarama, yetiştirme ve sıralama işlemleri, Yumurta Üretim kolonisi için daha önce açıklanan yöntemle aynıdır. Bununla birlikte, üretim ölçeği çok daha büyüktür ve bu daha fazla tepsi ve daha fazla çaba gerektirir.
8. Larvaları, Erkek Pupaları ve Dişi Pupaları Sıralama
<ol><li>Larvaların, erkek pupaların ve dişi pupaların sıraya dizilişleri Yumurta Üretimi için açıklanan yöntemle aynıdır.</li>
	<li>Erkek pupaları sıraladıktan sonra, serbest bırakılmadan önce kadın kontaminasyon olup olmadığını kontrol etmek önemlidir; % 1'den fazla kadın olmamalıdır. 500 pupadan üç aliquot alın (üç rastgele pupa ölçüm kaşığı) ve mevcut dişi pupa sayısını sayın. Dişiler genellikle erkeklerden daha büyük oldukları ve genital lob şeklindeki farklılıklardan tanımlanabilirler (Şekil 6)27. % 1'den fazla kadın varsa, tekrar başvurulmalı ve kontrol edilmelidir.</li>
	<li>Serbest bırakmak için sadece 8 ve 9. kalan larvaları ve pupaları otoklav. Brezilya'da, bu atık tıbbi atıklarla aynı şekilde ele alınmalıdır, ancak düzenlemeler diğer ülkelerde farklılık gösterebilir. Kalite kontrol, yetiştirme ve kontaminasyon risklerindeki farklılıklar, daha büyük sayılardan ve daha düşük kalite kontrolü nedeniyle Yumurta Üretim Kolonisi için Salınım Neslinden dişi pupa ve larvalar kullanmayın.</li>
</ol>Serbest Bırakma için Yetişkin Depolama: Erkekleri serbest bırakılmadan önce ortaya çıkmak ve olgunlaşmak için serbest bırakma cihazlarına yerleştirin. Serbest bırakma cihazlarının ayrıntıları bu yöntemde ele alınmaz. Ancak kullandığımız serbest bırakma cihazlarının kapasitesi 1.000 erkek civarındadır. Sürüm yöntemi ayrıntıları (sürüm cihazı ve sürüm sistemi) bu yöntemde ele alınmaz.

<ol>
	<li>Dyck, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sterilizing+Insects+with+Ionizing+Radiation.">Sterilizing Insects with Ionizing Radiation.</a> Sterile Insect Technique. , 233-268 (2005).</li><li>Dyck, V., Hendrichs, J., Robinson, A. S., Klassen, W., Curtis, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=History+of+the+Sterile+Insect+Technique..">History of the Sterile Insect Technique..</a> Sterile Insect Technique. , 3-36 (2005).</li><li>Alphey, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sterile-insect+methods+for+control+of+mosquito-borne+diseases+&#8211;+an+analysis.">Sterile-insect methods for control of mosquito-borne diseases &#8211; an analysis.</a> Vector Borne Zoonotic Dis. 10, 295-311 (2010).</li><li>Thomas, D. D., Donnelly, C. A., Wood, R. J., Alphey, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insect+population+control+using+a+dominant,+repressible,+lethal+genetic+system.">Insect population control using a dominant, repressible, lethal genetic system.</a> Science. 287, 2474-2476 (2000).</li><li>Fu, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Female-specific+insect+lethality+engineered+using+alternative+splicing.">Female-specific insect lethality engineered using alternative splicing.</a> Nat. Biotechnol. 25, 353-357 (2007).</li><li>Fu, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Female-specific+flightless+phenotype+for+mosquito+control.">Female-specific flightless phenotype for mosquito control.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 107, 4550-4554 (2010).</li><li>Gong, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+dominant+lethal+genetic+system+for+autocidal+control+of+the+Mediterranean+fruitfly.">A dominant lethal genetic system for autocidal control of the Mediterranean fruitfly.</a> Nat. Biotechnol. 23, 453-456 (2005).</li><li>Phuc, H. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Late-acting+dominant+lethal+genetic+systems+and+mosquito+control.">Late-acting dominant lethal genetic systems and mosquito control.</a> BMC Biol. 5 (11), (2007).</li><li>Harris, A. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Successful+suppression+of+a+field+mosquito+population+by+sustained+release+of+engineered+male+mosquitoes.">Successful suppression of a field mosquito population by sustained release of engineered male mosquitoes.</a> Nat. Biotechnol. 30, 828-830 (2012).</li><li>Harris, A. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Field+performance+of+engineered+male+mosquitoes.">Field performance of engineered male mosquitoes.</a> Nat. Biotechnol. 29, 1034-1037 (2011).</li><li>Bailey, D. L., Lowe, R. E., Dame, D. A., Seawright, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mass+rearing+the+genetically+altered+MACHO+strain+of+Anopheles+albimanus+Wiedemann.">Mass rearing the genetically altered MACHO strain of Anopheles albimanus Wiedemann.</a> Am. J. Trop. Med. Hyg. 29, 141-149 (1980).</li><li>Benedict, M. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Colonisation+and+mass+rearing:+learning+from+others.">Colonisation and mass rearing: learning from others.</a> Malar. J.. 8 Suppl 2 (S4), (2009).</li><li>Alphey, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Re-engineering+the+sterile+insect+technique.">Re-engineering the sterile insect technique.</a> Insect Biochem. Mol. Biol. 32, 1243-1247 (2002).</li><li>Wise de Valdez, ., R, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+elimination+of+dengue+vector+mosquitoes.">Genetic elimination of dengue vector mosquitoes.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 108, 4772-4775 (2011).</li><li>Macoris Mde, ., L, , et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Resistance+of+Aedes+aegypti+from+the+state+of+Sao+Paulo,+Brazil,+to+organophosphates+insecticides..">Resistance of Aedes aegypti from the state of Sao Paulo, Brazil, to organophosphates insecticides..</a> Mem. Inst. Oswaldo Cruz. 98, 703-708 (2003).</li><li>Campos, J., Andrade, C. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Larval+susceptibility+of+Aedes+aegypti+and+Culex+quinquefasciatus+populations+to+chemical+insecticides.">Larval susceptibility of Aedes aegypti and Culex quinquefasciatus populations to chemical insecticides.</a> Rev. Saude Publica. 37, 523-527 (2003).</li><li>Gubler, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Resurgent+vector-borne+diseases+as+a+global+health+problem.">Resurgent vector-borne diseases as a global health problem.</a> Emerg. Infect. Dis. 4, 442-450 (1998).</li><li>Harris, A. F., Rajatileka, S., Ranson, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pyrethroid+resistance+in+Aedes+aegypti+from+Grand+Cayman.">Pyrethroid resistance in Aedes aegypti from Grand Cayman.</a> Am. J. Trop. Med. Hyg. 83, 277-284 (2010).</li><li>Lima, J. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Resistance+of+Aedes+aegypti+to+organophosphates+in+several+municipalities+in+the+State+of+Rio+de+Janeiro+and+Espirito+Santo.">Resistance of Aedes aegypti to organophosphates in several municipalities in the State of Rio de Janeiro and Espirito Santo.</a> Am. J. Trop. Med. Hyg. 68, 329-333 (2003).</li><li>Paris, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Persistence+of+Bacillus+thuringiensis+israelensis+(Bti)+in+the+environment+induces+resistance+to+multiple+Bti+toxins+in+mosquitoes.">Persistence of Bacillus thuringiensis israelensis (Bti) in the environment induces resistance to multiple Bti toxins in mosquitoes.</a> Pest Manag. Sci. 67, 122-128 (2010).</li><li>Rendon, P., McInnis, D., Lance, D., Stewart, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Medfly+(Diptera:+Tephritidae)+genetic+sexing:+large-scale+field+comparison+of+males-only+and+bisexual+sterile+fly+releases+in+Guatemala.">Medfly (Diptera: Tephritidae) genetic sexing: large-scale field comparison of males-only and bisexual sterile fly releases in Guatemala.</a> J. Econ. Entomol. 97, 1547-1553 (2004).</li><li>Papathanos, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex+separation+strategies:+past+experience+and+new+approaches.">Sex separation strategies: past experience and new approaches.</a> Malar. J.. 8 Suppl 2 (S5), (2009).</li><li>Medici, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studies+on+Aedes+albopictus+larval+mass-rearing+optimization.">Studies on Aedes albopictus larval mass-rearing optimization.</a> J. Econ. Entomol. 104, 266-273 (2011).</li><li>Focks, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+improved+separator+for+the+developmental+stages,+sexes+and+species+of+mosquito+(Diptera+Culicidae)..">An improved separator for the developmental stages, sexes and species of mosquito (Diptera Culicidae)..</a> J. Med. Entomol. 17, 567-568 (1980).</li><li>Fay, R. W., McCray, E. M., Kilpatrick, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mass+production+of+sterilized+male+Aedes+aegypti.">Mass production of sterilized male Aedes aegypti.</a> Mosquito News. 23, 210-214 (1963).</li><li>Christophers, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Aedes aegypti the yellow fever mosquito: Its life history, Bionomics and Structure. , (2009).</li><li>Jones, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+method+for+sexing+living+Anopheles+Larvae+(diptera,+culicidae).">A simple method for sexing living Anopheles Larvae (diptera, culicidae).</a> Ann. Entomol. Soc. Am. 50, 104-106 (1957).</li><li>Koenraadt, C. J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pupal+Dimensions+as+Predictors+of+Adult+Size+in+Fitness+Studies+of+Aedes+aegypti+(Diptera+Culicidae)..">Pupal Dimensions as Predictors of Adult Size in Fitness Studies of Aedes aegypti (Diptera Culicidae)..</a> J. Med. Entomol. 45, 331-336 (2008).</li><li>Alphey, L., Nimmo, D., O'Connell, S., Alphey, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insect+population+suppression+using+engineered+insects.">Insect population suppression using engineered insects.</a> Adv. Exp. Med. Biol. 627, 93-103 (2008).</li><li>Alphey, N., Bonsall, M. B., Alphey, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+resistance+to+genetic+control+of+insects.">Modeling resistance to genetic control of insects.</a> J. Theor. Biol. 270, 42-55 (2011).</li><li>Atkinson, M. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analyzing+the+control+of+mosquito-borne+diseases+by+a+dominant+lethal+genetic+system.">Analyzing the control of mosquito-borne diseases by a dominant lethal genetic system.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 104, 9540-9545 (2007).</li><li>Bargielowski, I., Nimmo, D., Alphey, L., Koella, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+life+history+characteristics+of+the+genetically+modified+OX513A+line+and+a+wild+type+strain+of+Aedes+aegypti.">Comparison of life history characteristics of the genetically modified OX513A line and a wild type strain of Aedes aegypti.</a> PLoS One. 6 (e20699), (2011).</li><li>Bargielowski, I., Alphey, L., Koella, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cost+of+mating+and+insemination+capacity+of+a+genetically+modified+mosquito+Aedes+aegypti+OX513A+compared+to+its+wild+type+counterpart.">Cost of mating and insemination capacity of a genetically modified mosquito Aedes aegypti OX513A compared to its wild type counterpart.</a> PLoS One. 6 (26086), (2011).</li></ol>

Oxitec'e bağlı yazarlar Oxitec Ltd. Oxitec Ltd.'de istihdam ve/veya özkaynak ilgisine sahiptir ve Oxford Üniversitesi bu makalenin konusuyla ilgili fikri mülkiyete sahiptir.

RIDL, sivrisinekleri kontrol etmek için etkili ve çevre açısından güvenli bir yöntemdir3,29-31. Teknik entegre bir haşere yönetim programı için geçerlidir ve larvicides, üreme alanı azaltma ve zina dahil olmak üzere en güncel kontrol yöntemleri bu teknoloji ile uyumludur. Bu yöntem, Ae'nin kontrolünde kullanılmak üzere haftada 570.000 RIDL erkek pupanın nasıl üretılacağını açıklar. Aegypti ve bilgimize göre bu, bu ölçekte transgenik sivrisinek üretiminin ilk açıklamasıdır. Bazı karşılaştırılabilir üretim sistemleri 1960'larda ve 70'lerde vahşi tip Ae. aegypti için geliştirilmiştir,ancak o zamandan beri bu ölçekte karşılaştırılabilir bir üretim olmamıştır. Brezilya'da Şubat 2011'den Şubat 2012'ye kadar yaklaşık 11 milyon erkek serbest bırakıldı. Belirli bir alanın kontrol edilmesi için gerekli olan erkek sayısı, vahşi popülasyonun büyüklüğü, serbest bırakılan erkeklerin dağılımı, serbest bırakıldıktan sonra erkeklerin hayatta kalma ve çiftleşme rekabet gücü ve çevre koşulları dahil olmak üzere bir dizi faktöre bağlıdır.  Önceki çalışmalar, RIDL'nin bir sivrisinek popülasyonu en az% 80 9 azaltabileceğinigöstermiştir.
Üretim ölçeği ve maliyet ile erkeklerin kalitesi için kütle yetiştirmeyi optimize etmek arasında bir dengeye ihtiyaç vardır. Örneğin, larva yoğunluğunu artırmak, gerekli alanı, işçiliği ve yavrulama süresini azaltarak üretim kapasitesini artırabilir32. Bununla birlikte, çok yüksek larva yoğunlukları, çiftleşme kapasitesi32,33azaltılmış daha küçük ve daha kısa ömürlü erkeklere neden olabilir. Bir SIT programı ile ilgili olarak erkeklerin kalitesi, sonuçta serbest bırakılan erkeklerin tarladaki kadınlarla çiftleşme yeteneği ile değerlendirilecektir. Vahşi muadillerine göre çiftleşme rekabet gücünü değerlendirmek için kapsamlı saha değerlendirmesi gereklidir9,10. Bu genellikle tam olarak hangi faktörlerin 'yüksek kaliteli' bir erkek sivrisinek yaptığını değerlendirmeyi pratik hale getirir. Bununla birlikte, büyük ölçekli kitlesel yetiştirmede tutarlı üretim ve kaliteyi (rutin olarak değerlendirilebilecek ölçüde) korumak çok önemlidir. Bu, potansiyel olarak önemli bir etkiye sahip olan küçük dalgalanmalarla tüm sürecin yüksek düzeyde uyanıklık ve standardizasyonunu gerektirir. L1 larvalarının aliquoting kritik bir adımdır ve bu noktayı göstermektedir. Doğru sayıda larvayı tepsilere aliquoting kaliteli üretim için gereklidir. Besleme rejimi, belirli sayıda larva için hassas bir şekilde uyarlanmıştır. Çok az / çok fazla larva, larvaların hayatta kalmasını, pupaların boyutunu ve yavrulama zamanını etkileyen aşırı / az beslenmeye neden olacaktır. Kitlesel yetiştirme sanatının bir sırrı varsa, üretim döngüsündeki birçok küçük adımın bu makalede açıklandığı gibi tutarlı, hassas ve yüksek düzeyde kalite kontrol ile yürütülmesini sağlamaktır.

Sivrisinekler insanlarda bir dizi hastalığa neden olabilecek birçok patojeni iletir ve bu sivrisinekleri kontrol etmek yüzyıllardır devam eden bir savaş olmuştur. Kimyasal ve biyolojik yöntemlere dayalı böcekleri kontrol etme stratejileri bazı önemli başarılar elde etmiştir, ancak çoğu durumda kontrol uzun vadede sürdürülebilir olmamıştır. Örneğin, Brezilya 50'lerde Ae. aegypti'nin yok edilmesini sağladı, ancak sivrisinek son 40-50 yılda yeniden istila edildi. Bu, insektisit direnci, çevresel hasar, zayıf kontrol programı uygulaması15-20ve yeterli izleme veya yanıt olmadan hızlı yeniden istila dahil olmak üzere birçok nedene bağlanabilir.
Sivrisineklere karşı bu savaşı kazanmaya çalışmak için yeni teknikler ve yöntemler aranıyor.  Moleküler tekniklerdeki son gelişmeler, Steril Böcek Tekniği (SIT)1-3etrafında yeni ve yenilikçi sivrisinek kontrol yöntemlerinin geliştirilmesine yol açmıştır. RIDL (Dominant Lethal taşıyan Böceklerin Salınımı)4 olarak bilinen bir kontrol yöntemi SIT'a dayanır, ancak radyasyon sterilizasyon ihtiyacını gidermek için genetik yöntemler kullanır. RIDL suşları, Ae. aegypti 5-8, Ae. aegypti'nin ridl suşu Dahil olmak üzere çeşitlihaşere türleri için inşa edilmiştir. daha fazla saha kullanımı dünyanın diğer ülkelerinde planlanmış veya devam etmektedir.  RIDL kullanarak sivrisinek popülasyonlarını bastırmak, çok sayıda yüksek kaliteli erkek yetişkinin yetiştirilmesini gerektirecektir3,14.
Bir SIT programı için sadece erkeklerin serbest bırakılması arzu edilir; dişi sivrisinekler ısırır ve hastalığı iletir. Ek olarak, serbest bırakılan steril erkekler, program etkinliğini azaltan serbest bırakılan kadınlar tarafından 'dikkatleri dağılabilir'. Sadece erkeklere özel salınım, ışınlanmış Akdeniz meyve sinekleri ile yapılan büyük saha deneylerinde karışık cinsiyet salınımından3-5kat daha etkili olduğu gösterilmiştir 21 .
Bir RIDL kitle yetiştirme programında, erkekleri serbest bırakmak için üretmenin birkaç aşaması vardır.  Birincisi, salınım üretimi için gerekli yumurtaları üretmektir (Şekil 1). Bir sonraki aşama, larvaları pupalardan ve erkek pupaları dişi pupalardan ayırarak yumurtaları pupalara veya yetişkinlere geri getirmektir. Erkeklerin kadınlardan büyük ölçekli ayrılması, kütle sıralamaya uygun belirli bir yaşam aşamasında cinsiyetler arasında bir fark gerektirir22. Ae. aegypti'de (ve diğer sivrisinek türlerinde), cinsiyet ayırma teknikleri için yararlanılabilen erkek ve dişi pupalar arasında önemli bir boyut farkı vardır. Sıralanmış RIDL erkekleri daha sonra bir kontrol programında pupa veya yetişkinler olarak serbest bırakılır11,12.
Aşağıda, Ae'nin RIDL suşu olan OX513A'nın kitlesel olarak yetiştirilmesi için yöntemler açıklanmaktadır. Aegypti, serbest bırakıl. Açıklanan yöntemler, bir kontrol programı için yumurta ve RIDL erkeklerinin üretimi için gerekli teknikleri kapsamaktadır.

<table align="left" border="1" cellpadding="0" cellspacing="0" width="100%">
	<tbody>
		<tr>
			<td style="width:15.92%;height:38px;">
			Vipan Premium
			</td>
			<td style="width:15.06%;height:38px;">
			Sera GmbH
			</td>
			<td style="width:12.64%;height:38px;">
			190
			</td>
			<td style="width:40.2%;height:38px;">
			<a href="http://www.sera.de/uk/pages/products/product/sera-vipan-3.html">http://www.sera.de/uk/pages/products/product/sera-vipan-3.html</a>
			</td>
			<td style="width:16.16%;height:38px;">
			Required for rearing RIDL larvae
			</td>
		</tr>
		<tr>
			<td style="width:15.92%;height:58px;">
			Tetracycline
			</td>
			<td style="width:15.06%;height:58px;">
			Sigma Aldrich
			</td>
			<td style="width:12.64%;height:58px;">
			T7660
			</td>
			<td style="width:40.2%;height:58px;">
			<a href="http://www.sigmaaldrich.com/catalog/ProductDetail.do?D7=0&amp;N5=SEARCH_CONCAT_PNO|BRAND_KEY&amp;N4=T7660|SIGMA&amp;N25=0&amp;QS=ON&amp;F=SPEC">http://www.sigmaaldrich.com/catalog/ProductDetail.do?D7=0&#38;N5=SEARCH_CONCAT_PNO|BRAND_KEY&#38;N4=T7660|SIGMA&#38;N25=0&#38;QS=ON&#38;F=SPEC</a>
			</td>
			<td style="width:16.16%;height:58px;">
			Required for rearing RIDL larvae
			</td>
		</tr>
		<tr>
			<td style="width:15.92%;height:38px;">
			Plate separator
			</td>
			<td style="width:15.06%;height:38px;">
			J.W. Hock
			</td>
			<td style="width:12.64%;height:38px;">
			5412
			</td>
			<td style="width:40.2%;height:38px;">
			<a href="http://www.johnwhock.com/download/manuals/instr_5412_separator.pdf">http://www.johnwhock.com/download/manuals/instr_5412_separator.pdf</a>
			</td>
			<td style="width:16.16%;height:38px;">
			Separating larvae and pupae
			</td>
		</tr>
		<tr>
			<td style="width:15.92%;height:38px;">
			Parafilm M
			</td>
			<td style="width:15.06%;height:38px;">
			Pechiney Plastic packing
			</td>
			<td style="width:12.64%;height:38px;">
			PM-996
			</td>
			<td style="width:40.2%;height:38px;">
			<a href="http://www.parafilm.com">www.parafilm.com</a>
			</td>
			<td style="width:16.16%;height:38px;">
			Cover plate for blood feeding system
			</td>
		</tr>
		<tr>
			<td style="width:15.92%;height:38px;">
			Rearing pans for Release generation (53 cm x 38 cm x 8 cm)
			</td>
			<td style="width:15.06%;height:38px;">
			Pleion
			</td>
			<td style="width:12.64%;height:38px;">
			0757
			</td>
			<td nowrap="nowrap" style="width:40.2%;height:38px;">
			<a href="http://pleion.actcenter.com.br/produtos.asp?opcao=1">http://pleion.actcenter.com.br/produtos.asp?opcao=1</a>
			</td>
			<td style="width:16.16%;height:38px;">
			Larval rearing Release generation
			</td>
		</tr>
		<tr>
			<td style="width:15.92%;height:19px;">
			Fluorescent scope
			</td>
			<td style="width:15.06%;height:19px;">
			Leica&#160;Microsystems
			</td>
			<td style="width:12.64%;height:19px;">
			MZ FLIII
			
			</td>
			<td style="width:40.2%;height:19px;">
			<a href="http://www.leica-microsystems.com/fileadmin/downloads/Leica%20MZ%20FLIII/Brochures/M1-160-0de.pdf">http://www.leica-microsystems.com/fileadmin/downloads/Leica%20MZ%20FLIII/Brochures/M1-160-0de.pdf</a>
			</td>
			<td style="width:16.16%;height:19px;">
			Viewing fluorescent RIDL larvae
			</td>
		</tr>
		<tr>
			<td style="width:15.92%;height:38px;">
			Adult cages
			</td>
			<td style="width:15.06%;height:38px;">
			BugDorm
			</td>
			<td style="width:12.64%;height:38px;">
			DP1000
			</td>
			<td style="width:40.2%;height:38px;">
			<a href="http://bugdorm.megaview.com.tw/bugdorm-1-insect-rearing-cage-30x30x30-cm-pack-of-one-p-29.html">http://bugdorm.megaview.com.tw/bugdorm-1-insect-rearing-cage-30x30x30-cm-pack-of-one-p-29.html</a>
			</td>
			<td style="width:16.16%;height:38px;">
			Cages for Egg production&#160; colony
			</td>
		</tr>
		<tr>
			<td style="width:15.92%;height:38px;">
			Filter paper
			</td>
			<td style="width:15.06%;height:38px;">
			CELAB
			</td>
			<td style="width:12.64%;height:38px;">
			
			</td>
			<td style="width:40.2%;height:38px;">
			<a href="http://www.casadolaboratorio.com.br/subpage118.html">http://www.casadolaboratorio.com.br/subpage118.html</a>
			</td>
			<td style="width:16.16%;height:38px;">
			Filter paper for egg laying
			</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

mass production of genetically modified aedes aegypti for field releases in brazil

Sivrisineklere karşı savaşı kazanmaya çalışmak için yeni teknikler ve yöntemler aranıyor. Moleküler tekniklerdeki son gelişmeler, Steril Böcek Tekniği (SIT)1-3etrafında yeni ve yenilikçi sivrisinek kontrol yöntemlerinin geliştirilmesine yol açmıştır. RIDL (Baskın Ölümcül Taşıyan Böceklerin Salınımı)4olarak bilinen bir kontrol yöntemi SIT'a dayanır, ancak radyasyon sterilizasyonu ihtiyacını gidermek için genetik yöntemler kullanır5-8. Ae. aegypti'nin bir RIDL suşu Grand Cayman9,10'dasahada başarıyla test edildi; daha fazla saha kullanımı dünyanın diğer ülkelerinde planlanmış veya devam etmektedir.
Böceklerin kitlesel olarak yetiştirilmeleri birkaç böcek türünde ve haftada milyarlarca seviyeye kurulmuştur. Bununla birlikte, sivrisineklerde, yetiştirme genellikle çok daha küçük ölçekte gerçekleştirilir ve en büyük ölçekli yetiştirme 1970'lerde ve 80'lerde gerçekleştirilir. Bir RIDL programı için, ısırdıkları ve hastalığı bulaştırdığı kadar az dişinin serbest bırakılması arzu edilir. Bir toplu yetiştirme programında, serbest bırakılacak erkekleri üretmek için birkaç aşama vardır: yumurta üretimi, yavruya kadar yumurta yetiştirmek ve daha sonra erkekleri serbest bırakmadan önce kadınlardan sıralamak. Bu erkekler daha sonra pupa veya yetişkinler olarak yayınlanan bir RIDL kontrol programı için kullanılır11,12.
RIDL kullanarak bir sivrisinek popülasyonu bastırmak için çok sayıda yüksek kaliteli erkek yetişkinin yetiştirilmesi gerekir13,14. Aşağıda, Ae. aegypti 8'inbir RIDL suşu olan OX513A'nın toplu yetiştirme yöntemleri açıklanmaktadır ve bir kontrol programı için yumurta üretimi ve toplu yetiştirme RIDL erkeklerinin üretimi için gerekli teknikleri kapsar.

Üretim için beklenen yavru sonuçları Şekil 4'te gösterilmiştir. Erkekler ilk önce yavrular, 8. günde zirve yapar ve dişiler kuluçkadan çıktıktan sonra 9. Erkekleri kadınlardan ayırmak için en iyi zamanı bilmek için bu yavru eğrisini ölçmek önemlidir.
6 aydan fazla erkek ve dişi pupaların tasnifinden elde edilen sonuçlar, kadın kontaminasyonunun ortalama% 0,02 olduğunu göstermektedir (Şekil 5; SEM = %0,004). Bu bulaşma oranı, bir aylık salınımlar (yaklaşık iki milyon erkek) üzerinde salınan sadece 400 kadını temsil eder. Haftalık mevcut yumurta üretimi 4 milyondur. Bunların 3,5 milyon'ı yumurta kolonisi ve üretimi için yumurtadan çıkar ve geri kalanı yedek için saklanır. Yumurtaların yaklaşık% 11'i yumurta üretim kolonisi için kullanılır ve geri kalanı serbest bırakılmak için kullanılır. Yumurta kuluçka oranı ortalama %87,3 (SEM = %0,5) ve L1 larvalarından erkek pupa verimi ortalama% 29,5 'tir (SEM = 1.2). Yaklaşık 571.000 erkek pupa üreten SalınımLı Nesil kolonisi için her hafta iki milyon larva yetiştirilmektedir (SEM = 14.000). Ortaya çıkma ve salınım sırasında pupa ve yetişkin mortalitesi ortalama% 5'tir ve haftada yaklaşık 543.000 (SEM = 13.000) yetişkin erkek sivrisinek salınmıştır. 4 milyon yumurta /haftalık mevcut üretimin, atık ve depolamadan kaynaklanan kaybı azaltmak için daha fazla optimizasyonla ~ 3 milyon / haftaya düşürülebileceği tahmin edilmektedir. Açıklanan üretim için toplamda 6 personele ihtiyaç vardır; dördü salınım üretimi üzerinde çalışıyor ve kalan ikisi yumurta kolonisinde.

Kalite Kontrol

Kalite kontrolü, yetişkinlerin kalitesini, yetiştirme verimliliğini, işçiliği ve maliyetleri korumak için gereklidir. 

Transgene fenotip kontrolü
RIDL gen ekspresyonunun doğrulanması için iki kontrol gerçekleştirilir, birincisi floresan işaretleyicinin ifadesini kontrol etmek ve ikincisi tetrasiklin yokluğunda RIDL öldürücülük özelliğinin ifadesini kontrol etmek. Tüm larvalar floresan işaretleyiciyi ifade etmelidir. Floresan işaretleyicinin beklendiği gibi ifade olup olmadığını kontrol etmek için, 2.000 ilk başlangıç larvası, DsRed2 filtreli (Texas Red) leica MZFLIII stereomikroskop altında kontrol edilir. Tetrasiklin olmadan RIDL geni ifade edilir ve yetişkinlere% 3-4 sağkalım bekliyoruz8. Bunu kontrol etmek için, tetrasiklin içermeyen her serbest bırakma toplu işlemi için fazladan bir tepsi ayarlanır. Normal yetiştirme için tek fark, yiyeceklerin 6 günden itibaren 2/3 oranında azaltılmasıdır, çünkü ölü larvalara bağlı fazla yiyeceklerin birikmesi aşırı bakteri üremesine neden olabilir.

Yetiştirme kontrolü
Sürüm oluşturmadan dört tepsi, ayrı ayrı sıralanacak ve sayılmak üzere rastgele seçilir. Erkek ve dişi pupa sayısı her gün her tepsiden kaydedilir (Şekil 4). Beklenen erkek ve kadın sayısından herhangi bir sapma, üretimi ve / veya zindeliği etkileyebilecek ve sorunların kaynağını belirlemeye yardımcı olmak için yumurta kolonisi ile karşılaştırılabilecek potansiyel bir sorunu gösterir.

Pupa Ölçümleri
Pupa boyutunun yetişkin boyutu28ile ilişkili olduğu gösterilmiştir. Yetişkin boyutu için bir kalite kontrolü olarak sefalotoraks genişliği, Serbest Bırakma Neslinden itibaren her sıralama günü için en az 30 erkek pupa ile ölçülür; Yumurta Üretimi için Koloni dişi pupalar da ölçülür. Ortalama sefalotoraks genişliği serbest bırakılan erkekler için 1,05 mm (SEM 0,005), erkekler ve dişiler için sırasıyla Yumurta Üretimi, Kolonisi; Ae. albopictus kütle yetiştirme24için benzer sonuçlar elde edilmiştir.
<img alt="Figure 1" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/3579/3579fig1highres.jpg" src="/files/ftp_upload/3579/3579fig1.jpg"> Şekil 1. Bir RIDL / SIT programında kullanılmak üzere kitlesel yetiştirme sivrisineklerinin aşamaları. Yumurta Üretim Kolonisi, salınım üretimine sağlanan yumurtaların kalitesini sağlamak için yüksek düzeyde kalite kontrolüne sahiptir.  Yumurtalar, erkeklerin dişilerden sıralandığı serbest bırakma kolonisinde pupalara yetiştirilir.  Erkek yetişkinler daha sonra RIDL kontrol programı için kullanılır.
<img alt="Figure 2" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/3579/3579fig2highres.jpg" src="/files/ftp_upload/3579/3579fig2.jpg"> Şekil 2. Bir serbest bırakma programı için RIDL erkeklerinin üretimi için yetiştirme tesisinin şeması. Yüksek kaliteli yumurtalar yumurta üretim kolonisi odasında sürekli olarak üretilir ve daha sonra Serbest Bırakma Üretim odasında pupalara yetiştirilir. Larvalar ve pupalar daha sonra ayrılır ve pupalar erkekler için cinsiyet olarak sıralanır. Erkekler daha sonra serbest bırakma cihazlarına yerleştirilir ve yetişkin depolama ve serbest bırakma odasında serbest bırakılmak üzere yetişkinlere olgunlaşmalarına izin verilir. 
<img alt="Figure 3" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/3579/3579fig3highres.jpg" src="/files/ftp_upload/3579/3579fig3.jpg"> Şekil 3. Larvaları, erkek pupaları ve dişi pupaları bir plaka ayırıcı kullanarak ayırmak26.  Plaka ayırıcı, bu üç farklı yaşam aşamasını sıralamak için larvalar, erkek pupalar ve dişi pupalar arasındaki boyut farkını kullanır; larvalar, dişi pupalardan daha küçük olan erkek pupalardan daha küçük olma eğilimindedir.  Cihaz iki cam plakadan oluşur; biri eğimli metal çerçeveye sabitlenir ve diğeri ilk plakanın üzerine oturur ve dört ayar vidası(A)kullanılarak ilkine göre hareket ettirilebilir.  Dört ayar vidası, dış plakanın arka plakaya bir açıyla ayarlanabilmesini sağlar, böylece plakalar arasında aşağı doğru sivrilen kama şeklinde bir boşluk oluşur.  Larvalar ve pupalar cam plakalar (B) arasına dökülür ve bir su hortumu (C)kullanılarak hafifçe yıkanır.  Plakanın açısını ayarlayarak larvalar, erkek pupalar ve dişi pupalar ayrılabilir (D).  Sürekli yıkama ve plaka açısının artırılması ile larvalar önce (bir elek içine), ardından erkek pupa ve son olarak dişi pupalara yıkanabilir. 
<img alt="Figure 4" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/3579/3579fig4highres.jpg" src="/files/ftp_upload/3579/3579fig4.jpg"> Şekil 4. Kitle tarafından yetiştirilen RIDL Ae. aegyptiiçin yavru eğrileri .  Bu grafik, haftada ~135.000 pupa ile 23 haftalık gözlem sırasında kitlesel yetiştirilen RIDL erkek ve dişi pupalar için ortalama yüzde yavruyu göstermektedir.  Hata çubukları = standart ortalama hatası, n = 23. İlk koleksiyonda (8 gün) ortalama% 59 erkek ve% 30 dişi pupayı 5 gün boyunca tepsilerden kurtarılan toplam pupalardan kurtardık. 
<img alt="Figure 5" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/3579/3579fig5highres.jpg" src="/files/ftp_upload/3579/3579fig5.jpg"> Şekil 5. Sıralanmış erkek pupaların ortalama kadın kontaminasyonu. Bu grafik, altı aylık bir süre boyunca yumurtadan çıktıktan sonra 8. 
<img alt="Figure 6" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/3579/3579fig6highres.jpg" src="/files/ftp_upload/3579/3579fig6.jpg"> Şekil 6. Alüminyum plaka kan besleyici sistemi. Plaka (B) Parafilm (A) ile kaplanır ve bir cebe pipetlenmiş ve daha sonra mühürlenmiştir (D). Plaka bir kafese yerleştirilir ve üzerine ısıtılmış bir fasulye torbası (C) yerleştirilerek ısıtılır (E). 
<img alt="Figure 7" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/3579/3579fig7highres.jpg" src="/files/ftp_upload/3579/3579fig7.jpg"> Şekil 7. Erkek ve dişi Ae. aegypti pupa ayırt edici. Ae. aegypti pupa, genital lob şeklindeki farklılıklarla güvenilir bir şekilde seks yapılabilir (küreklerin hemen altındaki pupal karın segmentlerinin sonunda). Ek olarak, erkekler de kadınlardan daha küçük olma eğilimindedir.   
<img alt="Table 1" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/3579/3579table1highres.jpg" src="/files/ftp_upload/3579/3579table1.jpg"> Tablo 1.  Ae. aegypti RIDL larvaları için genel beslenme rejimi (günde larva başına yiyecek mg). Gerekli gerçek yiyecek miktarını hesaplamak için tepsi başına toplam larva sayısı ile çarpın.

Watch this Scientific Journal Video about Mass Production of Genetically Modified Aedes aegypti for Field Releases in Brazil at JoVE.com

Mass Production of Genetically Modified Aedes aegypti for Field Releases in Brazil

RIDL® (Baskın Ölümcül Taşıyan Böceklerin Salınımı) sistemini kullanarak Aedes aegypti'nin popülasyon baskısını elde etmek için çok sayıda erkek sivrisinek salınmalıdır. Bu, maksimum sayıda yüksek kaliteli erkek sivrisinek elde etmek için güvenilir sistemler sağlamak için kitlesel yetiştirme tekniklerinin ve teknolojisinin kullanılmasını gerektirir.

Brezilya'da Saha Sürümleri için Genetiği Değiştirilmiş Aedes aegypti'nin Seri Üretimi

New techniques and methods are being sought to try to win the battle against mosquitoes. Recent advances in molecular techniques have led to the ...

mass-production-genetically-modified-aedes-aegypti-for-field-releases

Research

JoVE Journal

Environment

Mass Production of Genetically Modified Aedes aegypti for Field Releases in Brazil

22.8K Görüntüleme.  Oxitec Ltd. RIDL® (Baskın Ölümcül Taşıyan Böceklerin Salınımı) sistemini kullanarak Aedes aegypti'nin popülasyon baskısını elde etmek için çok sayıda erkek sivrisinek salınmalıdır. Bu, maksimum sayıda yüksek kaliteli erkek sivrisinek elde etmek için güvenilir sistemler sağlamak için kitlesel yetiştirme tekniklerinin ve teknolojisinin kullanılmasını gerektirir.

Video: Mass Production of Genetically Modified Aedes aegypti for Field Releases in Brazil

Evaluation of Integrated Anaerobic Digestion and Hydrothermal Carbonization for Bioenergy Production

Lignocellulosic biomass is one of the most abundant yet underutilized renewable energy resources. Both anaerobic digestion (AD) and hydrothermal carbonization (HTC) are promising technologies for bioenergy production from biomass in terms of biogas and HTC biochar, respectively. In this study, the combination of AD and HTC is proposed to increase overall bioenergy production. Wheat straw was anaerobically digested in a novel upflow anaerobic solid state reactor (UASS) in both mesophilic (37 &#176;C) and thermophilic (55 &#176;C) conditions. Wet digested from thermophilic AD was hydrothermally carbonized at 230 &#176;C for 6 hr for HTC biochar production. At thermophilic temperature, the UASS system yields an average of 165 LCH4/kgVS&#160;(VS: volatile solids) and 121 L CH4/kgVS&#160;at mesophilic AD over the continuous operation of 200 days. Meanwhile, 43.4 g of HTC biochar with 29.6 MJ/kgdry_biochar was obtained from HTC of 1 kg digestate (dry basis) from mesophilic AD. The combination of AD and HTC, in this particular set of experiment yield 13.2 MJ of energy per 1 kg of dry wheat straw, which is at least 20% higher than HTC alone and 60.2% higher than AD only.

A novel Upflow Anaerobic Solid State (UASS) reactor was used for biogas production from fibrous feedstock. Digestate from UASS reactor was hydrothermally carbonized into HTC biochar in a pressurized batch reactor. The integration of the two bioenergy concepts was applied in this study to increase overall bioenergy production.

Biyoenerji Üretimi Entegre Anaerobik Sindirim ve Hidrotermal karbonizasyon Değerlendirilmesi

Lignocellulosic biomass is one of the most abundant yet underutilized renewable energy resources. Both anaerobic digestion (AD) and hydrothermal ...

Çevre

Integrated Field Lysimetry and Porewater Sampling for Evaluation of Chemical Mobility in Soils and Established Vegetation

Potentially toxic chemicals are routinely applied to land to meet growing demands on waste management and food production, but the fate of these chemicals is often not well understood. Here we demonstrate an integrated field lysimetry and porewater sampling method for evaluating the mobility of chemicals applied to soils and established vegetation. Lysimeters, open columns made of metal or plastic, are driven into bareground or vegetated soils. Porewater samplers, which are commercially available and use vacuum to collect percolating soil water, are installed at predetermined depths within the lysimeters. At prearranged times following chemical application to experimental plots, porewater is collected, and lysimeters, containing soil and vegetation, are exhumed. By analyzing chemical concentrations in the lysimeter soil, vegetation, and porewater, downward leaching rates, soil retention capacities, and plant uptake for the chemical of interest may be quantified. Because field lysimetry and porewater sampling are conducted under natural environmental conditions and with minimal soil disturbance, derived results project real-case scenarios and provide valuable information for chemical management. As chemicals are increasingly applied to land worldwide, the described techniques may be utilized to determine whether applied chemicals pose adverse effects to human health or the environment.

Field lysimetry and porewater sampling allow researchers to evaluate the fate of chemicals applied to soils and established vegetation. The goal of this protocol is to demonstrate how to install required instrumentation and collect samples for chemical analysis during integrated field lysimetry and porewater sampling experiments.

Entegre Saha Lysimetry ve gözenek suyu Örnekleme Topraklarda Kimyasal Hareketlilik Değerlendirilmesi ve kurulan Bitki Örtüsü

Potentially toxic chemicals are routinely applied to land to meet growing demands on waste management and food production, but the fate of these chemicals ...

Extraction and Analysis of Microbial Phospholipid Fatty Acids in Soils

Phospholipid fatty acids (PLFAs) are key components of microbial cell membranes. The analysis of PLFAs extracted from soils can provide information about the overall structure of terrestrial microbial communities. PLFA profiling has been extensively used in a range of ecosystems as a biological index of overall soil quality, and as a quantitative indicator of soil response to land management and other environmental stressors.
The standard method presented here outlines four key steps: 1. lipid extraction from soil samples with a single-phase chloroform mixture, 2. fractionation using solid phase extraction columns to isolate phospholipids from other extracted lipids, 3. methanolysis of phospholipids to produce fatty acid methyl esters (FAMEs), and 4. FAME analysis by capillary gas chromatography using a flame ionization detector (GC-FID). Two standards are used, including 1,2-dinonadecanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (PC(19:0/19:0)) to assess the overall recovery of the extraction method, and methyl decanoate (MeC10:0) as an internal standard (ISTD) for the GC analysis.

Phospholipid fatty acids provide information about the structure of soil microbial communities. We present methods for extraction from soil samples with a single-phase chloroform mixture, fractionation of extracted lipids using solid phase extraction columns, and methanolysis to produce fatty acid methyl esters, which are analyzed by capillary gas chromatography.

Ekstraksiyon ve Topraklarda Mikrobiyal Fosfolipid Yağ Asitleri Analizi

Phospholipid fatty acids (PLFAs) are key components of microbial cell membranes. The analysis of PLFAs extracted from soils can provide information about ...

A Gusseted Thermogradient Table to Control Soil Temperatures for Evaluating Plant Growth and Monitoring Soil Processes

Thermogradient tables were first developed in the 1950s primarily to test seed germination over a range of temperatures simultaneously without using a series of incubators. A temperature gradient is passively established across the surface of the table between the heated and cooled ends and is lost quickly at distances above the surface. Since temperature is only controlled on the table surface, experiments are restricted to shallow containers, such as Petri dishes, placed on the table. Welding continuous aluminum vertical strips or gussets perpendicular to the surface of a table enables temperature control in depth via convective heat flow. Soil in the channels between gussets was maintained across a gradient of temperatures allowing a greater diversity of experimentation. The gusseted design was evaluated by germinating oat, lettuce, tomato, and melon seeds. Soil temperatures were monitored using individual, battery-powered dataloggers positioned across the table. LED lights installed in the lids or along the sides of the gradient table create a controlled temperature chamber where seedlings can be grown over a range of temperatures. The gusseted design enabled accurate determination of optimum temperatures for fastest germination rate and the highest percentage germination for each species. Germination information from gradient table experiments can help predict seed germination and seedling growth under the adverse soil conditions often encountered during field crop production. Temperature effects on seed germination, seedling growth, and soil ecology can be tested under controlled conditions in a laboratory using a gusseted thermogradient table.

Traditional thermogradient tables create a range of temperatures across the surface. Welding gussets perpendicular to the surface of a thermogradient table will control temperature in depth increasing possible research applications.

Bir Körüklü Thermogradient Tablo Toprak Süreçleri Bitki Büyüme değerlendirilmesi ve İzleme Toprak Sıcaklıklar Denetim

Thermogradient tables were first developed in the 1950s primarily to test seed germination over a range of temperatures simultaneously without using a ...

Modification and Application of a Leaf Blower-vac for Field Sampling of Arthropods

Rice fields host a large diversity of arthropods, but investigating their population dynamics and interactions is challenging. Here we describe the modification and application of a leaf blower-vac for suction sampling of arthropod populations in rice. When used in combination with an enclosure, application of this sampling device provides absolute estimates of the populations of arthropods as numbers per standardized sampling area. The sampling efficiency depends critically on the sampling duration. In a mature rice crop, a two-minute sampling in an enclosure of 0.13 m2 yields more than 90% of the arthropod population. The device also allows sampling of arthropods dwelling on the water surface or the soil in rice paddies, but it is not suitable for sampling fast flying insects, such as predatory Odonata or larger hymenopterous parasitoids. The modified blower-vac is simple to construct, and cheaper and easier to handle than traditional suction sampling devices, such as D-vac. The low cost makes the modified blower-vac also accessible to researchers in developing countries.

Assessment of arthropod abundance in crops is critical for investigating population dynamics and species interactions. Here we describe the modification and application of a leaf blower-vac for suction sampling of arthropods in rice.

Modifikasyon ve Arthropodların Saha Örnekleme için bir Yaprak Blower-vac Uygulama

Rice fields host a large diversity of arthropods, but investigating their population dynamics and interactions is challenging. Here we describe the ...

The Plant Infection Test: Spray and Wound-Mediated Inoculation with the Plant Pathogen Magnaporthe Grisea

Plants possess a powerful system to defend themselves against potential threats by pathogenic fungi. For agriculturally important plants, however, current measures to combat such pathogens have proved too conservative and, thus, not sufficiently effective, and they can potentially pose environmental risks. Therefore, it is extremely necessary to identify host-resistance factors to assist in controlling plant diseases naturally through the identification of resistant germplasm, the isolation and characterization of resistance genes, and the molecular breeding of resistant cultivars. In this regard, there is need to establish an accurate, rapid, and large-scale inoculation method to breed and develop plant resistance genes. The rice blast fungal pathogen Magnaporthe grisea causes severe disease symptoms and yield losses. Recently, M. grisea has emerged as a model organism for studying the mechanisms of plant-fungal pathogen interactions. Hence, we report the development of a plant virulence test method that is specific for M. grisea. This method provides for both spray inoculation with a conidial suspension and wounding inoculation with mycelium cubes or droplets of conidial suspension. The key step of the wounding inoculation method for detached rice leaves is to make wounds on plant leaves, which avoids any interference caused by host penetration resistance. This spray/wounding protocol contributes to the rapid, accurate, and large-scale screening of the pathotypes of M. grisea isolates. This integrated and systematic plant infection method will serve as an excellent starting point for gaining a broad perspective of issues in plant pathology.

The Plant Infection Test: Spray and Wound-Mediated Inoculation with the Plant Pathogen Magnaporthe Grisea

Here, we present a protocol to test plant virulence with the plant pathogen Magnaporthe grisea. This report will contribute to the large-scale screening of the pathotypes of fungi isolates and serve as an excellent starting point for understanding the resistant mechanisms of plants during molecular breeding.

Bitki enfeksiyon Test: Sprey ve bitki patojeni Magnaporthe Grisea ile aşı yara-aracılı

Plants possess a powerful system to defend themselves against potential threats by pathogenic fungi. For agriculturally important plants, however, current ...

Laboratory and Field Protocol for Estimating Sheet Erosion Rates from Dendrogeomorphology

Sheet erosion is among the crucial drivers of soil degradation. Erosion is controlled by environmental factors and human activities, which often lead to severe environmental impacts. The understanding of sheet erosion is, consequently, a worldwide issue with implications for both environment and economies. However, the knowledge on how erosion evolves in space and time is still limited, as well as its effects on the environment. Below, we explain a new dendrogeomorphological protocol for deriving eroded soil thickness (Ex) by acquiring accurate microtopographic data using both terrestrial laser scanning (TLS) and microtopographic profile gauges. Additionally, standard dendrogeomorphic procedures, dependent on anatomical variations in root rings, are utilized to establish the timing of exposure. Both TLS and microtopographic profile gauges are used to obtain ground surface pro&#64257;les, from which Ex is estimated after the threshold distance (TD) is determined, i.e., the distance between the root and the sediment knickpoint, which allows de&#64257;ning the lowering of the ground surface caused by sheet erosion. For each profile, we measured the height between the topside of the root and a virtual plane tangential to the ground surface. In this way, we intended to avoid small-scale impacts of soil deformation, which may be due to pressures exerted by the root system, or by the arrangement of exposed roots. This may provoke small amounts of soil sedimentation or erosion depending on how they physically affect the surface runoff. We demonstrate that an adequate microtopographic characterization of exposed roots and their associated ground surface is very valuable to obtain accurate erosion rates. This finding could be utilized to develop the best management practices designed to eventually halt or perhaps, at least, lessen soil erosion, so that more sustainable management policies can be put into practice.

Characterizing erosion from dendrogeomorphology has usually focused on accurately finding the starting time of root exposure, by examining macroscopic or cell level changes caused by exposure. Here, we offer a detailed description of different novel techniques to obtain more precise erosion rates from highly accurate microtopographic data.

Laboratuvar ve levha erozyon oranları üzerinden Dendrogeomorphology tahmin etmek için alan Protokolü

Sheet erosion is among the crucial drivers of soil degradation. Erosion is controlled by environmental factors and human activities, which often lead to ...

Construction of a Compact Low-Cost Radiation Shield for Air-Temperature Sensors in Ecological Field Studies

Low cost temperature sensors are increasingly used by ecologists to assess climatic variation and change on ecologically relevant scales. Although cost-effective, if not deployed with proper solar radiation shielding, the observations recorded from these sensors will be biased and inaccurate. Manufactured radiation shields are effective at minimizing this bias, but are expensive compared to the cost of these sensors. Here, we provide a detailed methodology for constructing a compact version of a previously described custom fabricated radiation shield, which is more accurate than other published shielding methods that attempt to minimize shield size or construction costs. The method requires very little material: corrugated plastic sheets, aluminum foil duct tape, and cable ties. One 15 cm and two 10 cm squares of corrugated plastic are used for each shield. After cutting, scoring, taping and stapling of the sheets, the 10 cm squares form the bottom two layers of the solar radiation shield, while the 15 cm square forms the top layer. The three sheets are held together with cable ties. This compact solar radiation shield can be suspended, or placed against any flat surface. Care must be taken to ensure that the shield is completely parallel to the ground to prevent direct solar radiation from reaching the sensor, possibly causing increased warm biases in sun-exposed sites in the morning and afternoon relative to the original, larger design. Even so, differences in recorded temperatures between the smaller, compact shield design and the original design were small (mean daytime bias = 0.06 &#176;C). Construction costs are less than half of the original shield design, and the new design results in a less conspicuous instrument that may be advantageous in many field ecology settings.

With the advent of small, low-cost environmental sensors, it is now possible to deploy high-density networks of sensors to measure hyper localized temperature variation. Here, we provide a detailed methodology for constructing a compact version of a previously described custom-fabricated radiation shield for use with inexpensive thermochrons.

Kompakt düşük maliyetli radyasyon kalkanı yapımı Hava sıcaklık sensörleri ekolojik alan çalışmaları için

Low cost temperature sensors are increasingly used by ecologists to assess climatic variation and change on ecologically relevant scales. Although ...

Visualizing Efficacy of Pesticides Against Disease Vector Mosquitoes in the Field

Efficacy of public health pesticides targeting nuisance and disease-vector insects such as mosquitoes, sand flies, and filth-breeding flies is not uniform across ecological zones. To best protect public and veterinary health from these insects, the environmental limitations of pesticides need to be investigated to inform effective use of the most appropriate pesticide formulations and techniques. We have developed a research program to evaluate combinations of pesticides, pesticide application equipment, and application techniques in hot-arid desert, hot-humid tropical, warm and cool temperate, and urban locations to derive pesticide use guidelines specific to target insect and environment. To these ends we designed a system of protocols to support efficient, cost-effective, portable, and standardized evaluation of a diverse range of pesticides and equipment across multiple environments. At the core of these protocols is the use of an array of small cages with colony-reared sentinel mosquitoes (adults and immatures) and sand flies (adults), strategically arranged in natural habitats and exposed to pesticide spray. Spatial and temporal patterns of pesticide efficacy are derived from percent mortality in sentinel cages, then mapped and visualized in a geographic information system. Maps of sentinel mortality data may be statistically compared to evaluate relative efficacy of a pesticide across multiple environments, or to study multiple pesticides in a single environment. Protocols may be modified to accommodate a variety of scenarios, including, for example, the vertical orientation of sentinels in canopy habitats or simultaneous testing of ground and aerial application methods.

The efficacy of public health pesticides targeting nuisance and disease-vector insects is not uniform across different ecological zones. Here we present a system of techniques using captive vector insects as sentinels for pesticide efficacy to derive electronic maps supporting the standard evaluation of pesticides across multiple environments.

Pestisitler hastalık vektör sivrisinekler alanında karşı etkinliği görselleştirme

Efficacy of public health pesticides targeting nuisance and disease-vector insects such as mosquitoes, sand flies, and filth-breeding flies is not uniform ...

Construction of a Low-cost Mobile Incubator for Field and Laboratory Use

Incubators are essential for a range of culture-based microbial methods, such as membrane filtration followed by cultivation for assessing drinking water quality. However, commercially available incubators are often costly, difficult to transport, not flexible in terms of volume, and/or poorly adapted to local field conditions where access to electricity is unreliable. The purpose of this study was to develop an adaptable, low-cost and transportable incubator that can be constructed using readily available components. The electronic core of the incubator was first developed. These components were then tested under a range of ambient temperature conditions (3.5 &#176;C - 39 &#176;C) using three types of incubator shells (polystyrene foam box, hard cooler box, and cardboard box covered with a survival blanket). The electronic core showed comparable performance to a standard laboratory incubator in terms of the time required to reach the set temperature, inner temperature stability and spatial dispersion, power consumption, and microbial growth. The incubator set-ups were also effective at moderate and low ambient temperatures (between 3.5 &#176;C and 27 &#176;C), and at high temperatures (39 &#176;C) when the incubator set temperature was higher. This incubator prototype is low-cost (&lt; 300 USD) and adaptable to a variety of materials and volumes. Its demountable structure makes it easy to transport. It can be used in both established laboratories with grid power or in remote settings powered by solar energy or a car battery. It is particularly useful as an equipment option for field laboratories in areas with limited access to resources for water quality monitoring.

This paper describes a method for building an adaptable, low-cost and transportable incubator for microbial testing of drinking water. Our design is based on widely available materials and can operate under a range of field conditions, while still offering the advantages of higher-end laboratory-based models.

Ucuz mobil kuluçka makinesi inşaat alanı ve labaratuar kullanımı için

Incubators are essential for a range of culture-based microbial methods, such as membrane filtration followed by cultivation for assessing drinking water ...