Biz onların teknik yardım Alvin Welch ve Larry Pang teşekkür etmek istiyorum. CIRM Yeni Fakülte Ödülü RN2-00902-1; Bu çalışma Ulusal Sağlık Enstitüleri (NIH) ödülü P50 CA086306, Rejeneratif Tıp California Institute (CIRM) hibeler RC1-00149-1 ve RS1-00203-1 tarafından kısmen finanse edildi , Translasyonel Tıp Caltech-UCLA Ortak Merkezi, AIDS Araştırma için UCLA Merkezi&#39;nde (CFAR) NIH / NIAID AI028697, UCLA AIDS Enstitüsü, CIRM Araçlar ve Teknoloji Ödülü RT1-01126, ve UC Multicampus Araştırma Programı ve California Girişimleri Antiviral İlaç Keşif Merkezi (sayı MRPI-143226).

<ol>
	<li>McCune, J. M., Namikawa, R., Kaneshima, H., Shultz, L. D., Lieberman, M., Weissman, I. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+SCID-hu+mouse:+murine+model+for+the+analysis+of+human+hematolymphoid+differentiation+and+function.">The SCID-hu mouse: murine model for the analysis of human hematolymphoid differentiation and function.</a> Science. 241 (4873), 1632-1639 (1988).</li><li>Bristol, G. C., Gao, L. Y., Zack, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+and+maintenance+of+SCID-hu+mice+for+HIV+research.">Preparation and maintenance of SCID-hu mice for HIV research.</a> Methods. 12 (4), 343-347 (1997).</li><li>Mosier, D. E., Gulizia, R. J., Baird, S. M., Wilson, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transfer+of+a+functional+human+immune+system+to+mice+with+severe+combined+immunodeficiency.">Transfer of a functional human immune system to mice with severe combined immunodeficiency.</a> Nature. 335 (6187), 256-259 (1988).</li><li>Melkus, M. W., Estes, J. D., Padgett-Thomas, A., Gatlin, J., Denton, P. W., Othieno, F. A., Wege, A. K., Haase, A. T., Garcia, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Humanized+mice+mount+specific+adaptive+and+innate+immune+responses+to+EBV+and+TSST-1.">Humanized mice mount specific adaptive and innate immune responses to EBV and TSST-1.</a> Nat. Med. 12 (11), 1316-1322 (2006).</li><li>Denton, P. W., Estes, J. D., Sun, Z., Othieno, F. A., Wei, B. L., Wege, A. K., Powell, D. A., Payne, D., Haase, A. T., Garcia, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antiretroviral+pre-exposure+prophylaxis+prevents+vaginal+transmission+of+HIV-1+in+humanized+BLT+mice.">Antiretroviral pre-exposure prophylaxis prevents vaginal transmission of HIV-1 in humanized BLT mice.</a> PLoS Med. 5 (1), e16 (2008).</li><li>Sun, Z., Denton, P. W., Estes, J. D., Othieno, F. A., Wei, B. L., Wege, A. K., Melkus, M. W., Padgett-Thomas, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intrarectal+transmission,+systemic+infection,+and+CD4++T+cell+depletion+in+humanized+mice+infected+with+HIV-1.">Intrarectal transmission, systemic infection, and CD4+ T cell depletion in humanized mice infected with HIV-1.</a> J. Exp. Med. 204 (4), 705-714 (2007).</li><li>Shimizu, S., Hong, P., Arumugam, B., Pokomo, L., Boyer, J., Koizumi, N., Kittipongdaja, P., Chen, A., Bristol, G., Galic, Z., Zack, J. A., Yang, O., Chen, I. S., Lee, B., An, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+highly+efficient+short+hairpin+RNA+potently+down-regulates+CCR5+expression+in+systemic+lymphoid+organs+in+the+hu-BLT+mouse+model.">A highly efficient short hairpin RNA potently down-regulates CCR5 expression in systemic lymphoid organs in the hu-BLT mouse model.</a> Blood. 115 (8), 1534-1544 (2010).</li><li>V, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+HIV+Latency+in+Humanized+BLT+Mice.">Generation of HIV Latency in Humanized BLT Mice.</a> J. Virol. 86 (1), 630-634 (2012).</li><li>Vatakis, D. N., Koya, R. C., Nixon, C. C., Wei, L., Kim, S. G., Avancena, P., Bristol, G., Baltimore, D., Kohn, D. B., Ribas, A., Radu, C. G., Galic, Z., Zack, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antitumor+activity+from+antigen-specific+CD8+T+cells+generated+in+vivo+from+genetically+engineered+human+hematopoietic+stem+cells.">Antitumor activity from antigen-specific CD8 T cells generated in vivo from genetically engineered human hematopoietic stem cells.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 108 (51), 1408-1416 (2011).</li></ol>

Çıkar çatışması ilan etti.

In vivo PET görüntüleme ile birleştiğinde modifiye BLT humanize fare modelinde kronik insan hastalıkları incelemek için güçlü araçlardır. Bu sistem blt fare modeli ve HIV araştırma için sınırlı kapsamı dışındadır gelişmeler alır. Buna ek olarak, bunların klinik ortamda ulaşmadan önce çeşitli gen tedavi protokolleri gibi teşhis yöntemleri incelemek hangi bir büyük bir sistemdir. Fareler karşı primatlar kullanarak düşük maliyet ile birleştiğinde ikincisi bu bir ?...

<table border="1"><tbody><tr><td> Reaktif Adı </td><td> Şirket </td><td> Katalog numarası </td><td> Yorumlar (isteğe bağlı) </td></tr><tr><td> PBS </td><td> Invitrogen </td><td> 10010049 </td><td></td></tr><tr><td> RPMI 1640 </td><td></td><td> A1049101 </td><td></td></tr><tr><td> Iscove sitesi </td><td></td><td> 12440061 </td><td></td></tr><tr><td> Fötal Buzağı Serumu </td><td></td><td> 16000085 </td><td></td></tr><tr><td> Kollajenaz tip IV </td><td> Sigma Aldrich </td><td> C5138 </td><td></td></tr><tr><td> Hyaluronidaz </td><td></td><td> H3506 </td><td></td></tr><tr><td> DNAse I </td><td> Roche Diagnostics </td><td> 10104159001 &lt;/ Td&gt; <td></td></tr><tr><td> Piptazo (Zosyn) </td><td> Pfizer </td><td></td><td> <a href="http://labeling.pfizer.com/showlabeling.aspx?id=416" target="_blank">Piperasilin / tazobaktam kombinasyonu</a> </td></tr><tr><td> Ficoll (Ficoll-Paque Plus) </td><td> GE Healthcare Yaşam Bilimleri </td><td> 17-1440-02 </td><td></td></tr><tr><td> MACS Tampon </td><td> Miltenyi Biotech </td><td> Bak yorum </td><td> MACS tamponu: PBS,% 0.5 fetal bovin serumu ve 2 mM sitrat dekstroz formül-A ile desteklenmiş </td></tr><tr><td> CD34 microbead Kiti </td><td></td><td> 130-046-702 </td><td></td></tr><tr><td> LS Sütunlar </td><td></td><td> 130-042-401 </td><td></td></tr><tr><td> Retronectin </td><td> Takara </td><td> T100A </td><td></td></tr><tr><td&gt; Matrigel </td><td> BD Biosciences </td><td> 354263 </td><td></td></tr><tr><td> Isofluorane </td><td> Baxter </td><td></td><td> <a href="http://www.baxter.com/healthcare_professionals/products/forane.html" target="_blank">http://www.baxter.com/healthcare_professionals/products/forane.html</a> </td></tr><tr><td> Carprofen (Rimadyl) </td><td> Pfizer Hayvan Sağlığı </td><td></td><td> <a href="https://www.rimadyl.com/default.aspx" target="_blank">https://www.rimadyl.com/default.aspx</a> </td></tr></tbody></table>

using the blt humanized mouse as a stem cell based gene therapy tumor model

Fare gibi küçük hayvan modellerinde yaygın insan hastalığı araştırmak için ve yeni tedavi yaklaşımları geliştirmek için kullanılmıştır. Bilgi zenginliği bu çalışmalarda elde rağmen, fare bağışıklık yanı sıra insan immün yetmezlik virüsü (HIV) enfeksiyonu gibi viral hastalıkların türlerin özgüllüğü benzersiz özellikleri insanlaşmış fare modellerinin gelişmesine yol açmıştır. Önceki modellere C. B 17 SCID / SCID farelerde ve adlandırdığı insan fetal timus ve fetal karaciğer transplantasyonu kullanımı dahil senin / liv (SCID-hu) 1, 2 ya da insan periferik kan lökositleri evlatlık transferi (SCID-huPBL ) 3. Her iki model de ağırlıklı olarak HIV enfeksiyonu çalışma için kullanılmıştır. Bu modellerin her ikisi de temel sınırlamalar biri onları HIV hastalığı araştırmak için daha önemli fizyolojik modeli yapmak için çevre, insan bağışıklık hücrelerinin kararlı sulandırma eksikliği oldu. Bu amaçla, BLT uğultuanized fare modeli geliştirilmiştir. BLT kemik iliği / karaciğer / timus anlamına gelir. Bu modelde, 6 ila 8 hafta eski NOD.Cg-Prkdcscid Il2rgtm1Wjl / SzJ (NSG), bağışıklığı baskılanmış farelerde ikinci bir insan hematopoetik kök hücre nakli 4 tarafından takip edilmesi sadece SCID-hu fare modelinde olduğu gibi senin / liv İmplantı alacak. Bu sistemin avantajı, çevre, insan bağışıklık sisteminin tam sulandırılması olduğunu. Bu model, HIV enfeksiyonu ve gecikme 5-8 incelemek için kullanılır olmuştur. Biz genetik hHSC 7, 9 otolog transduced enjeksiyonu takiben thy / liv implant oluşturmak için insan hematopoietik kök hücreleri (hHSC) modifiye kullanımı olan bu modelin değiştirilmiş bir versiyonunu yarattı. Bu yaklaşım, genetiği değiştirilmiş soy nesil sonuçlanır. Daha da önemlisi, bir melanom spesifik T hücre reseptörü eksprese eden fonksiyonel sitotoksik T hücreleri (CTL) oluşmasına neden incelemek için bu sistem uyarlanmış. Bu modelini kullanarak tümör regresyonu (9) belirlemek için canlı pozitron emisyon tomografi (PET) görüntüleme kullanarak bizim transgenik KVK işlevselliğini değerlendirmek başardık. Bu protokolün amacı bu transgenik farelerin üreten ve canlı PET kullanılarak in vivo etkinliği değerlendiren sürecini açıklamaktır. Biz insan doku ve lentiviral vektörler kullanın bu yana bir not olarak, tesislerimizde özel önlemler (BSL-2 +) ile Biyogüvenlik Seviyesi 2 (BSL-2) için CDC NIH yönergelere uygun. Buna ek olarak, NSG farelerde ciddi nedenle bağışıklığı baskılanmış, onların barınma ve bakım en yüksek sağlık standartlarına (uymalıdır <a href="http://jaxmice.jax.org/research/immunology/005557-housing.html" target="_blank">http://jaxmice.jax.org/research/immunology/005557-housing.html</a> ).

Transplantasyon işlemin bir akış şeması Şekil 1A &#39;de gösterilmiştir. Senin / liv implantın bir resmi Şekil 1B &#39;de gösterilmiştir. Timik doku normal olarak geliştirir ve insan CD4 ve CD8 T hücrelerinin bir fizyolojik bir dağılıma sahiptir. Sulandırıldıktan sonra, hayvanlar CD4, CD8, T hücreleri ve diğer immün hücre soyları, normal dağılım ile bir insan bağışıklık sistemi taşırlar. Tümör büyüklüğü ve canlı dok...

Watch this Scientific Journal Video about Using the BLT Humanized Mouse as a Stem Cell based Gene Therapy Tumor Model at JoVE.com

Using the BLT Humanized Mouse as a Stem Cell based Gene Therapy Tumor Model

Hümanize fareler kullanılarak tümör spesifik T hücrelerin oluşturulması ve karakterizasyonu burada tanımlanmıştır. İnsan timik doku ve genetiği değiştirilmiş insan hematopoietik kök hücrelerin bağışıklığı baskılanmış farelere nakledilmektedir. Anti-tümör bağışıklık yanıtı in vivo incelenmesi için izin veren bir mühendislik insan bağışıklık sisteminin sulandırma ile sonuçlanır.

Bir Kök Hücre tabanlı Gen Terapisi Tümör Modeli olarak BLT Insanlaşmış Fare Kullanma

Small animal models such as mice have been extensively used to study human  disease and to develop new therapeutic interventions. Despite the wealth of  ...

using-blt-humanized-mouse-as-stem-cell-based-gene-therapy-tumor

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

18.6K Görüntüleme.  David Geffen School of Medicine at UCLA. Hümanize fareler kullanılarak tümör spesifik T hücrelerin oluşturulması ve karakterizasyonu burada tanımlanmıştır. İnsan timik doku ve genetiği değiştirilmiş insan hematopoietik kök hücrelerin bağışıklığı baskılanmış farelere nakledilmektedir. Anti-tümör bağışıklık yanıtı in vivo incelenmesi için izin veren bir mühendislik insan bağışıklık sisteminin sulandırma ile sonuçlanır.