Biz eleştiri ona destek için Wendy Chao teşekkür ederim. Bu çalışma Körlük Vakfı (DGV), Lions Göz Araştırma Fonu (DGV) ve Yeatts aile (jwm cömert bir bağış önlemek için Bausch &amp; Lomb Vitreoretinal Kardeşliği (HM), Ulusal Göz Enstitüsü hibe EY014104 (jwm), Research tarafından desteklenmiştir ve DGV).

Tüm hayvanlar üzerinde deneyler Vizyon Araştırma Derneği ve Oftalmik ve Vizyon Araştırma Hayvanların Kullanım Oftalmoloji Bildirimi uyarınca gerçekleştirilen ve kurallar ve yönetmelikler Massachusetts Göz ve Kulak Hastanesi Hayvan Bakım Komitesi tarafından belirlenen edildi. 1.. Tedavi öncesi <ol><li> 60 mg bir intraperitoneal enjeksiyonu ile bir 8 haftalık bir fare anestezisi / ketamin ve 6 mg / kg ksilazin kg arasındadır. </li><li> Bıyıkları kesti. Onlar görselleştirme ve alet yerleştirme ile müdahale çünkü bu yapılır. </li><li> % 5 fenilefrin ve% 0.5 tropikamid ile öğrenci dilate. </li><li> Kirpikler kesti. Onlar görselleştirme ve alet yerleştirme ile müdahale çünkü bu da yapılır. </li><li> Topikal anestezi (% 0.5 proparacaine hidroklorür oftalmik solüsyon) uygulayın. </li></ol> 2. Mikroskop altında Cerrahi <ol><li> Lateral pos içinde fare ayarlayıncerrahın doğru burun ile ition. Bir ayak tutam cerrahi anestezi teyit etmek için yapılır ve steril eldiven önce ameliyat başlamadan donned. </li><li> Posterior limbusta zamansal konjonktiva kesilirken ve skleradan konjonktiva ayrı. Sklera nüfuz kaçının. Bu adımdan sonra, göz kontrolü için forseps ile limbusta konjonktiva kavramak. </li><li> Yapmak konik bir 30 G iğne ucu kullanarak kendi kendine kapanan skleral kesi işaret etti. Sklera yoluyla skleral tünel yapmak ve koroid içine sklera (Şekil 1) nüfuz. Retinayı nüfuz kaçının. Koroid kanama oluşur ve skleral yara yoluyla dışarı çıkarsa, kanama durana kadar bir cerrahi mızrakla bir astriction gerçekleştirin. Bu skleral yara kendinden contalı göz içi basıncı olacak. </li><li> Göz içi basıncını azaltmak için, bir 30 G iğne ile kornea delin. E sırasında iris ve lens yaralanmasına önlemek için iris için iğne paralel kullanınön odasına ntry. Göz içi basınç kendiliğinden sızdırmaz hale gelmesine, yaranın neden olur. </li><li> Konik (iç gözün doğru) aşağı işaret ile subretinal boşluğa Hamilton 10 ul şırınga bağlı bir 33 G iğne takın ve altta yatan RPE nörosensöriyel retina ayırmak için hafifçe 3.5 ul sodyum hialüronat enjekte. Retina nüfuz ise sodyum hiyaluronat vitreus alanı değil subretinal uzaya gidecek çünkü 33 G iğne ile retina nüfuz kaçının. Ayrıca, bir sözlü gözyaşı yaratacak çünkü hızlı enjeksiyon önlemek ve sodyum hiyaluronat ön odasına sızdırıyor. </li><li> Sulu mizah göziçi basıncını ayarlamak için forseps ile kornea delinmesi etrafında kornea iterek kornea delinmesi dışarı akmasına izin verin. </li><li> Bir cerrahi mızrak kullanarak skleral yara sızıntı olmadığını onaylayın. </li><li> Sodyum hiyaluronat sızıntı riskini azaltmak için, siyanakrilat cerrahi yapıştırıcı yerleştirebilirsinizskleral yara. </li><li> Siyanoakrilat cerrahi yapıştırıcı kullanılarak orijinal konumuna konjonktiva takın. Bu da sodyum hiyalüronat sızıntısı riskini azaltır. </li><li> Bir kapak camını kullanarak fundusunu kontrol ve subretinal kanama olmadan bir büllöz RD oluşturulmasını onaylayın. </li></ol> 3. Sonra Tedavi <ol><li> Enfeksiyon riskini azaltmak için göze basitrasin antibiyotik merhem uygulanır. </li><li> Düşük kan basıncı, düşük vücut ısısı sonraki neden olan anestezi (ketamin ve ksilazin karışımı) önlemek için bir ısıtma pedi üzerine fareler tutun. </li><li> Bunlar anestezi uyandırmak sonra geri hayvan kafesine fareler koyun. Komplikasyonlar için günlük fareler izleyin. Herhangi bir komplikasyon ortaya çıkması durumunda aşağıda tarif edildiği gibi fareler euthanize. </li></ol> 4. Kurban <ol><li> 100 mg intraperitoneal enjeksiyondan sonra servikal dislokasyon ile fareler Euthanize / sodyum pentobarbital ve enuclea kgHer deney için uygun zaman noktalarında gözleri te (gösterilmemiştir). Sodyum hiyaluronat dışarı sızabilir çünkü enükleasyon sırasında gözün üzerinde baskı uygulamaktan kaçının. Büllöz RDs en az 14 gün boyunca kalıcı olması gerekir. </li></ol>

<ol>
	<li>Anderson, D. H., Guerin, C. J., Erickson, P. A., Stern, W. H., Fisher, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphological+recovery+in+the+reattached+retina.">Morphological recovery in the reattached retina.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 27, 168-183 (1986).</li><li>Cook, B., Lewis, G. P., Fisher, S. K., Adler, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Apoptotic+photoreceptor+degeneration+in+experimental+retinal+detachment.">Apoptotic photoreceptor degeneration in experimental retinal detachment.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 36, 990-996 (1995).</li><li>Zacks, D. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Caspase+Activation+in+an+Experimental+Model+of+Retinal+Detachment.">Caspase Activation in an Experimental Model of Retinal Detachment.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 44, 1262-1267 (2003).</li><li>Zacks, D. N., Han, Y., Zeng, Y., Swaroop, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+Signaling+Pathways+and+Stress-Response+Genes+in+an+Experimental+Model+of+Retinal+Detachment.">Activation of Signaling Pathways and Stress-Response Genes in an Experimental Model of Retinal Detachment.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 47, 1691-1695 (2006).</li><li>Nakazawa, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+cytokine+responses+to+retinal+detachment+in+rats.">Characterization of cytokine responses to retinal detachment in rats.</a> Mol. Vis. 12, 867-878 (2006).</li><li>Nakazawa, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumor+Necrosis+Factor-Mediates+Photoreceptor+Death+in+a+Rodent+Model+of+Retinal+Detachment.">Tumor Necrosis Factor-Mediates Photoreceptor Death in a Rodent Model of Retinal Detachment.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 52, 1384-1391 (2011).</li><li>Hisatomi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relocalization+of+apoptosis-inducing+factor+in+photoreceptor+apoptosis+induced+by+retinal+detachment+in+vivo.">Relocalization of apoptosis-inducing factor in photoreceptor apoptosis induced by retinal detachment in vivo.</a> Am. J. Pathol. 158, 1271-1278 (2001).</li><li>Hisatomi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Critical+role+of+photoreceptor+apoptosis+in+functional+damage+after+retinal+detachment.">Critical role of photoreceptor apoptosis in functional damage after retinal detachment.</a> Curr. Eye Res. 24, 161-172 (2002).</li><li>Nakazawa, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monocyte+chemoattractant+protein+1+mediates+retinal+detachment-induced+photoreceptor+apoptosis.">Monocyte chemoattractant protein 1 mediates retinal detachment-induced photoreceptor apoptosis.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. 104, 2425-2430 (2007).</li><li>Trichonas, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Receptor+interacting+protein+kinases+mediate+retinal+detachment-induced+photoreceptor+necrosis+and+compensate+for+inhibition+of+apoptosis.">Receptor interacting protein kinases mediate retinal detachment-induced photoreceptor necrosis and compensate for inhibition of apoptosis.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. 107, 21695-21700 (2010).</li><li>Roh, M. I., Murakami, Y., Thanos, A., Vavvas, D. G., Miller, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Edaravone,+an+ROS+Scavenger,+Ameliorates+Photoreceptor+Cell+Death+after+Experimental+Retinal+Detachment.">Edaravone, an ROS Scavenger, Ameliorates Photoreceptor Cell Death after Experimental Retinal Detachment.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 52, 3825-3831 (2011).</li><li>Mantopoulos, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tauroursodeoxycholic+acid+(TUDCA)+protects+photoreceptors+from+cell+death+after+experimental+retinal+detachment.">Tauroursodeoxycholic acid (TUDCA) protects photoreceptors from cell death after experimental retinal detachment.</a> PLoS One. 6, e24245 (2011).</li><li>Yang, L., Bula, D., Arroyo, J. G., Chen, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preventing+retinal+detachment-associated+photoreceptor+cell+loss+in+Bax-deficient+mice.">Preventing retinal detachment-associated photoreceptor cell loss in Bax-deficient mice.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 45, 648-654 (2004).</li><li>Cebulla, C. M., Ruggeri, M., Murray, T. G., Feuer, W. J., Hernandez, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spectral+domain+optical+coherence+tomography+in+a+murine+retinal+detachment+model.">Spectral domain optical coherence tomography in a murine retinal detachment model.</a> Exp. Eye Res. 90, 521-527 (2010).</li><li>Secondi, R., Kong, J., Blonska, A. M., Staurenghi, G., Sparrow, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fundus+Autofluorescence+Findings+in+a+Mouse+Model+of+Retinal+Detachment.">Fundus Autofluorescence Findings in a Mouse Model of Retinal Detachment.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 53, 5190-5197 (2012).</li><li>Machemer, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+retinal+detachment+in+the+owl+monkey.+IV.+The+reattached+retina.">Experimental retinal detachment in the owl monkey. IV. The reattached retina.</a> Am. J. Ophthalmol. 66, 1075-1091 (1968).</li><li>Ross, W., Lavina, A., Russell, M., Maberley, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+correlation+between+height+of+macular+detachment+and+visual+outcome+in+macula-off+retinal+detachments+of+&lt;+or+=+7+days'+duration.">The correlation between height of macular detachment and visual outcome in macula-off retinal detachments of &lt; or = 7 days' duration.</a> Ophthalmology. 112, 1213-1217 (2005).</li><li>Glatt, H., Machemer, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+subretinal+hemorrhage+in+rabbits.">Experimental subretinal hemorrhage in rabbits.</a> Am. J. Ophthalmol. 94, 762-773 (1982).</li><li>Toth, C. A., Morse, L. S., Hjelmeland, L. M., Landers, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibrin+directs+early+retinal+damage+after+experimental+subretinal+hemorrhage.">Fibrin directs early retinal damage after experimental subretinal hemorrhage.</a> Arch. Ophthalmol. 109, 723-729 (1991).</li><li>Benner, J. D., Hay, A., Landers, M. B., Hjelmeland, L. M., Morse, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibrinolytic-assisted+removal+of+experimental+subretinal+hemorrhage+within+7+days+reduces+outer+retinal+degeneration.">Fibrinolytic-assisted removal of experimental subretinal hemorrhage within 7 days reduces outer retinal degeneration.</a> Ophthalmology. , 101-672 (1994).</li><li>Bhisitkul, R. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroprotective+effect+of+intravitreal+triamcinolone+acetonide+against+photoreceptor+apoptosis+in+a+rabbit+model+of+subretinal+hemorrhage.">Neuroprotective effect of intravitreal triamcinolone acetonide against photoreceptor apoptosis in a rabbit model of subretinal hemorrhage.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 49, 4071-4077 (2008).</li><li>Zeng, R., Zhang, Y., Shi, F., Kong, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Novel+Experimental+Mouse+Model+of+Retinal+Detachment:+Complete+Functional+and+Histologic+Recovery+of+the+Retina.">A Novel Experimental Mouse Model of Retinal Detachment: Complete Functional and Histologic Recovery of the Retina.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 53, 1685-1695 (2012).</li><li>Leon, S., Yin, Y., Nguyen, J., Irwin, N., Benowitz, L. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lens+injury+stimulates+axon+regeneration+in+the+mature+rat+optic+nerve.">Lens injury stimulates axon regeneration in the mature rat optic nerve.</a> J. Neurosci. 20, 4615-4626 (2000).</li><li>Murakami, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+choroidal+neovascularization+via+brief+subretinal+exposure+to+a+newly+developed+lentiviral+vector+pseudotyped+with+Sendai+viral+envelope+proteins.">Inhibition of choroidal neovascularization via brief subretinal exposure to a newly developed lentiviral vector pseudotyped with Sendai viral envelope proteins.</a> Hum. Gene Ther. 21, 199-209 (2010).</li><li>Kong, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Self-complementary+AAV5+vector+facilitates+quicker+transgene+expression+in+photoreceptor+and+retinal+pigment+epithelial+cells+of+normal+mouse.">Self-complementary AAV5 vector facilitates quicker transgene expression in photoreceptor and retinal pigment epithelial cells of normal mouse.</a> Exp. Eye Res. 90, 546-554 (2010).</li></ol>

Massachusetts Göz ve Kulak Hastanesi Verteporfin kullanımına yönelik üç ABD patentleri bir mülkiyet ilgi var. Buna ek olarak, Massachusetts göz ve kulak Hastanesi maküler dejenerasyon ve başka bozuklukların tedavisi için subretinal koroidal yeni damarların seçici yok edilmesine yönelik bazı patent başvurularında mülkiyet ilgi vardır. Massachusetts Göz ve Kulak Revir bu patent ve patent uygulamalarının bir sonucu olarak telif alır ve Dr Miller Massachusetts Göz ve telif paylaşım hükümler içeren Kulak revir kurumsal Patent Politikası ve Prosedürleri uyarınca aynı bir pay alır. Yazar, Dr Joan W. Miller, bir geçmiş yönetim kurulu üyesi ve Alcon, Inc eski hissedarı ve şu anda Alcon için bir danışman olarak hizmet vermektedir Imagen Biotech, Inc, ISIS Eczacılık; Kalvista Eczacılık; Regeneron Pharmaceuticals, Inc ve onl Therapeutics, LLC. Dr Demetrios G. Vavvas vermektedirRoche, Genentech, Kala İlaç için danışman olarak.

Kemirgen gözünde RD modeli oluşturmak için çeşitli yöntemler 3-15, 22, rapor edilmiştir. Genel olarak, insanlarda ameliyat sırasında kullanılan göz içi yapışkan bir madde olduğunu ve bilinen herhangi bir toksisite 1-15 ile ilişkili değildir, çünkü çoğu sodyum hiyalüronat subretinal enjeksiyon kullanmaktadır. Sodyum hiyaluronatın yerine normal tuzlu su ya da fosfat tamponlu tuzlu su (PBS), RD süresini arttırır. Bir transvitreal yaklaşım 3-6 veya transskleral yaklaşım 7-15: Natriumhyaluronat subretinal enjeksiyon yöntemleri iki yaklaşımdan birini kullanın. Her iki yöntem de fundus gözlem ile gerçekleştirilir. Transvitreal yaklaşımda, retina altı enjektör, bir retinotomi periferik retina oluşturulur, vitröz kavitesine sokulur ve sodyum hiyaluronat subretinal boşluğa enjekte edilir. Bu yöntemde, iki retina yırtıkları retina riskini artırır yapılır,l kanama olduğu subretinal uzaya gidebilir. Buna ek olarak, retinotomi oluşturulur lens yaralanma riski vardır. Skleral yaklaşım için çeşitli tadil edilmiş yöntem vardır. Bir ön kamara ponksiyonundan doğrudan, konjunktiva, sklera, koroid ve RPE ile retina altına yerleştirildiğinde, sodyum hiyaluronat ile doldurulmuş bir şırınga bağlı bir 30 G iğne ile, göz içi basıncını azaltmak sonra, bu yöntemlerin çoğunda 7-12. Sodyum hiyalüronat sonra retina altına enjekte edilir. Bu yöntemi kullanarak skleral retinal yırtılma ve lens yaralanma riskini transvitreal yaklaşım kullanılarak daha azdır. Bununla birlikte, bir 30 G iğne ile sklera yapılan delik, özellikle fare gözleri için, büyük, ve retina altına enjekte sodyum hiyaluronat kolayca skleral yara yoluyla göz dışarı sızar. Bu, daha düşük, daha az kalıcı RD ve daha değişken fotoreseptör hücre ölümüne yol açar. Dahası, koroid kanama oluşursa,göziçi basıncı önce subretinal hiyalüronat düşürüldü çünkü skleral perforasyon adım, kanama subretinal alana yayılacak. Çeşitli faktörler subretinal kanama ve yükseklik ve RD 16-21 sebat dahil olmak üzere, müstakil retina RD etkisini etkileyebilir. Artan RD 16, 17 yüksekliği ve fotoreseptör hücre hasarı ile fotoreseptör hücre ölümü artar, çünkü oksijen ve sığ RD kıyasla daha yüksek RD koryokapillaris gelen temel besin düşük difüzyon daha geniş olabilir. Ayrıca, alt retinal hemorhaj, fotoreseptör hücrelerinin 18-21 için toksik olan, müstakil retinada Bu toksisite olası mekanizmalar hipoksi ve retina altı kanama metabolik bozulmaya bir difüzyon bariyeri olarak ve (demir gibi) kan bileşenleri ile uyarılan doğrudan nörotoksisiteyi içerir. Reti üzerinde koruyucu etkisi olduğu rapor edilmiştir lens hasarı,nal ganglion hücrelerinin 23, ayrıca RD indüksiyonundan sonra fotoreseptör hücre ölümünü etkileyebilir. Giriş yarası sitesi kapalı değilse ek olarak, sodyum hiyaluronat enükleasyon sırasında göz manipülasyon ile dışarı sızabilir. Bu da, sonuçların yorumunu etkileyebilecek, sığ bir RD hatalı sınıflandırmasına yol açabilir. Biz RDS tekrar elde edilebilirliğini arttırmak ve subretinal kanama oranını azaltmak için Natriumhyaluronat subretinal enjeksiyon için transskleral yöntem değiştirilmiş. Bu protokolün kritik adım enjeksiyon sonrasında sodyum hiyalüronat sızmasını engelleyen bir 30 G iğne kullanılarak bir kendinden sızdırmaz skleral kesik yaratıyor. Daha fazla önem skleral yara ödenir böylece önceki yöntemlerden farklı olarak, bu protokol fundus gözlem olmaksızın gerçekleştirilir. Tutkal uygulaması, aynı zamanda, gözün dışarı sızmasını sodyum hyaluronat engeller. Bizim tecrübelerimize göre, bu protokol w ile subretinal kanama oranıönemli ölçüde diğer protokolleri ile daha az. Koroid kanama skleral kesi adımı sırasında ortaya çıkarsa bu adımı göz içi basıncını azaltarak önce gerçekleştirilir, çünkü skleral yara yoluyla göz çıkacaktır. Koroid kanama göz içi basıncı ve nörosensöriyel retina dekolmanı azalma sonra meydana gelirse, kan subretinal boşluğa teşrih edecek. Bu, diğer teknikler ile yaklaşık% 10-20 aksine vakaların yaklaşık% 5 bunun bulunmuştur. Bu hayvanlar analiz dışında tutulmalıdır. Bu teknik aynı zamanda, fotoreseptör ve RPE hücreleri 25, 24, hedef vektör-aracılı gen transferi retina altı enjeksiyon için kullanılabilir. Bu enjeksiyonlar için tipik bir araç (PBS, tuzlu su), sodyum hiyalüronat önemli ölçüde daha az yapışkan olduğu için, standart teknikler daha sızıntı boğulmuş bulunmaktadır. Burada anlatılan teknik, bu riskini azaltarak, vektör aktarma deneyleri daha tekrarlanabilir hale getirir vegüvenilir.

A correction was made to <a href="http://www.jove.com/video/50660/">Retinal Detachment Model in Rodents by Subretinal Injection of Sodium Hyaluronate</a>. The footnotes were removed from the abstract due to redundancy in the introduction.

Erratum: Retinal Detachment Model in Rodents by Subretinal Injection of Sodium Hyaluronate

Fotoreseptör temel retinal pigment epitel ayrıldığı zaman fotoreseptör hücre ölümü ve daha sonra görsel bir düşüş meydana gelir. Fotoreseptör fiziksel olarak ayrılması, yaşa bağlı maküler dejenerasyon (AMD), santral seröz korioretinopati, diyabetik retinopati, prematüre retinopati ve yanı sıra yırtıklıı (örneğin retina, bir çizikten) retina dekolmanı (dahil olmak üzere çeşitli retinal hastalıklar, görülür RD). Sodyum hiyalüronat subretinal enjeksiyon fotoreseptör dejenerasyonu 1-15 patofizyolojisine ilişkin bilgi veren, fotoreseptör hücre ölümüne yol açan bir RD oluşturmak için yaygın olarak kabul edilmiş bir modeldir. Ilk olarak 2001 yılında piyasaya 7 subretinal sodyum hiyalüronat enjeksiyonu ile indüklenen fotoreseptör dejenerasyonu, (hafta günü) makul bir zaman süresi avantajına sahiptir. Ancak, Anima hayvana fotoreseptör hücre kaybının önemli değişkenlik olabilir1) boy ve RD süresi ve subretinal kanama 2) oluşumu: nedeniyle RD sonra fotoreseptör hücre ölümünü etkileyen iki önemli faktör l. Her iki faktör katkıda yönteme dik bir teknik öğrenme eğrisi vardır. Fotoreseptör hücre dejenerasyonu RD yüksekliği ile artar, retinal pigment epitel arasındaki mesafe olarak (RPE) katmanı ve fotoreseptör 16-17 artırır. Bu raporlar ile tutarlı, önceki deneyler sığ RDS daha büllöz RDS fazla fotoreseptör ölüm gösterdi. Ayrıca, alt retinal hemorhaj, fotoreseptör hücreleri için toksik olan ve fotoreseptör hücre ölümü 18-21 etkilediği bildirilmiştir. Aynı şekilde, biz subretinal kanama olmadan RDS daha subretinal kanama ile RDS daha fotoreseptör ölüm gözlemledik. Bu nedenle, değişkenliği en aza indirmek için teknikler subretinal hemoraji kaçınarak RD tutarlı zirvelere ulaşmak odaklanmak zorunda. Bizim içinde değişik bir şekliducing RD subretinal kanama görülen, gözün aynı pozisyonda tekrarlanabilir büllü ve kalıcı RD yapabilirsiniz. Biz bunu diğer siteleri ile karşılaştırıldığında daha geniş bir operasyon sahasını ulaşmak daha kolaydır çünkü zamansal yaklaşım kullanılarak ameliyat gerçekleştirildi. Konjunktival kesildikten sonra, kendi kendine yapışan bir skleral kesik bir 30 G iğne kullanılarak yapılır. Bir skleral tünel, oluşturulan koroid içine sklera penetrasyon tarafından takip edilir. Koroid kanama bu adımda ortaya çıkarsa, kanama skleral yara yoluyla gözü çıkar ve kanama cerrahi mızrakla astriction durdurulabilir. Bir ön kamara lastik sonra göz içi basıncını azaltmak için, kornea gerçekleştirilir. Yalnız subretinal enjeksiyon çıkan retinal arter tıkanıklığı ve iç retina iskemi ile artmış göz içi basıncı yol açacaktır, çünkü bu önemli bir adımdır. Bir Hamilton 10 ul şırınga bağlanmış olan bir 33 G iğne daha sonra subretinal boşluğa sokulur ve 3,5 μ olan, L, sodyum hiyalüronat yavaşça temel RPE arasındaki duyu siniri retinasına ayırmak için enjekte edilir. Fundus gözlem altında gerçekleştirilir uyaran RD diğer yöntemlerin aksine, bu yöntem doğrudan gözlem altında gerçekleştirilir. Skleral yara kendinden sızdırmaz olduğundan, sodyum hiyalüronat sonra dışarı sızıntı olmayacak. Son olarak, tutkal skleral yara üzerine konur ve konjonktiva orijinal konumuna tutturulur. Bu adımlar da sodyum hiyaluronat sızıntı riskini azaltmak sürer. 3.5 ul sodyum hiyalüronat enjeksiyon 8 haftalık farelerin gözlerinde tekrarlanabilir RDS (retinanın% 50) oluşturur. Böylece tekrarlanabilir büllü ve kalıcı RDS sağlayan, gözün dışarı sızmasını enjekte sodyum hialüronat engeller nedeniyle kendi kendine kapanan bir yara oluşturmak bizim modifiye prosedüründe en önemli adımdır.

<table border="1">
<tbody>
 <tr>
 <td>Name of Reagent/Material</td>
 <td>Company</td>
 <td>Catalog Number</td>
 <td>Comments</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Ketaject</td>
 <td>Phoenix</td>
 <td>2010025</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>AnaSed</td>
 <td>LLOYD</td>
 <td>4004821</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>5% Phenylephrine / 0.5% Tropicamide</td>
 <td>Massachusetts Eye and Ear Pharmacy</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>0.5% Proparacaine Hydrochloride Ophthalmic Solution</td>
 <td>AKORN</td>
 <td>17478-263-12</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Provics</td>
 <td>Alcon</td>
 <td>8065183085</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Webglue</td>
 <td>Patterson Veterinary</td>
 <td>07-8566128</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Microscope</td>
 <td>Leica</td>
 <td>MG90</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>30G1/2 PrecisionGlide Needle</td>
 <td>BD</td>
 <td>305106</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Weck-Cel Eye Spears</td>
 <td>Beaver-Visitec</td>
 <td>0008685</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>10 Microliter Syringe</td>
 <td>Hamilton</td>
 <td>7635-01</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>33 gauge, 0.5 inch needle</td>
 <td>Hamilton</td>
 <td>7803-05</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>18x18mm Cover Glass</td>
 <td>Fisher Scientific</td>
 <td>18-548A</td>
 <td></td>
 </tr>
 </tbody>
</table>

retinal detachment model in rodents by subretinal injection of sodium hyaluronate

Natriumhyaluronat subretinal enjeksiyon retina dekolmanı (RD) uyaran bir yaygın kabul gören bir yöntemdir. Ancak, RD veya subretinal kanama oluşma yüksekliği ve süresi müstakil retinada fotoreseptör hücre ölümünü etkileyebilir. Bu nedenle, fotoreseptör hücre ölümü değerlendirmek için retina altı kanama olmadan üretilebilir RDS oluşturmak için avantajlıdır. Biz subretinal kanama nadir rastlanılan bir tekrarlanabilir konumda büllü ve kalıcı RDS oluşturmak için önceden bildirilen yöntem değiştirdi. Modifiye edilmiş bu yöntemin önemli bir aşaması, subretinal boşluk içine enjeksiyondan sonra sodyum hiyalüronat sızmasını önlemek için kendi kendine yapışan bir skleral kesik, yaratılmasıdır. 30 G iğne ile koroid içine sklera penetrasyon ardından kendinden sızdırmazlık skleral kesi, bir skleral tünel oluşturulur yapmak. Koroid kanama Bu aşama sırasında meydana de, cerrahi bir mızrak ile astriction koroid etek hızını azaltanorrhage. Bu yöntem, bu tür regmatojen RD, prematüre, diyabetik retinopati, seröz santral korioretinopati, ve yaşla ilişkili maküler dejenerasyon (AMD) ve retinopati gibi RD kapsayan hastalıklarda fotoreseptör ölüm, daha güvenilir ve tekrarlanabilir bir model sağlar.

Bu protokol ile yapılan RD kalıcılığını değerlendirmek için, cryosections gün 3, 7 yapılmış ve RD indüksiyonundan sonra 14 edildi. Altı gözü Her bir zaman noktası kullanılmıştır. Hematoksilin ve eosin (HE) boyama bölümleri görselleştirmek için kullanılmıştır. Tüm bölümler lens (Şekil 2) yaklaşan bir büllöz RD gösterdi. Bir göz 7. gününde subretinal kanama gösterdi. Hiçbir gözleri enfeksiyon veya lens hasarının belirtisi gösterdi. <img src="/files/ftp_upload/50660/50660fig1.jpg" alt="Şekil 1" fo:content-width="4.5in" fo:src="/files/ftp_upload/50660/50660fig1highres.jpg" /> Şekil 1. Kendi kendine yapışan bir skleral kesik oluşturma. Bu şematik normal fare göz bir kesit görüntüsünü göstermektedir. Kırmızı çizgi kendinden sızdırmaz skleral kesi gösterir. Bir 30 G iğne ile koroid sklera içine nüfuz ardından bir skleral tünel kendi kendine yapışan bir skleral kesik oluşturur. Bu skleral yarakendinden contalı subretinal boşluğa enjeksiyon sonrası Natriumhyaluronat sızmasını önlemek ve kalıcı büllöz retina dekolmanı elde edebilirsiniz göz içi basıncı, olacak. <img src="/files/ftp_upload/50660/50660fig2.jpg" alt="Şekil 2," fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50660/50660fig2highres.jpg" /> Şekil 2. Retina dekolmanı zaman tabii ki. Bu fundus fotoğraf ameliyattan hemen sonra subretinal kanama olmadan bir büllöz retina dekolmanı gösterir. En az 14 gün boyunca subretinal kanama olmadan hematoksilen ve eozin (HE) boyama gösterisi kalıcı büllöz retina dekolmanı ile kriyokesitler.

Watch this Scientific Journal Video about Retinal Detachment Model in Rodents by Subretinal Injection of Sodium Hyaluronate at JoVE.com

Retinal Detachment Model in Rodents by Subretinal Injection of Sodium Hyaluronate

, Dekolmanı bir tekrarlanabilir ve sürekli yüksekliği ile deneysel retina dekolmanı oluşturma ve subretinal kanama olmadan retina hastalığında fotoreseptör hücre kaybı patofizyolojisi okuyan ve potansiyel terapötik müdahalelerin değerlendirilmesi için önemlidir. Burada ayrıntılı olarak, böyle bir yöntem sunulmaktadır.

Sodyum Hyaluronat subretinal Enjeksiyon Kemirgenler Retina Dekolmanı Modeli

Subretinal injection of sodium hyaluronate is a widely accepted method of inducing retinal detachment (RD). However, the height and duration of RD or the ...

retinal-detachment-model-rodents-subretinal-injection-sodium

Research

JoVE Journal

Medicine

20.6K Görüntüleme.  Massachusetts Eye and Ear Infirmary, Harvard Medical School.  , Dekolmanı bir tekrarlanabilir ve sürekli yüksekliği ile deneysel retina dekolmanı oluşturma ve subretinal kanama olmadan retina hastalığında fotoreseptör hücre kaybı patofizyolojisi okuyan ve potansiyel terapötik müdahalelerin değerlendirilmesi için önemlidir. Burada ayrıntılı olarak, böyle bir yöntem sunulmaktadır. 

Video: Retinal Detachment Model in Rodents by Subretinal Injection of Sodium Hyaluronate

Subretinal Injection of Gene Therapy Vectors and Stem Cells in the Perinatal Mouse Eye

The loss of sight affects approximately 3.4 million people in the United States and is expected to increase in the upcoming years.1 Recently, gene therapy and stem cell transplantations have become key therapeutic tools for treating blindness resulting from retinal degenerative diseases. Several forms of autologous transplantation for age-related macular degeneration (AMD), such as iris pigment epithelial cell transplantation, have generated encouraging results, and human clinical trials have begun for other forms of gene and stem cell therapies.2 These include RPE65 gene replacement therapy in patients with Leber's congenital amaurosis and an RPE cell transplantation using human embryonic stem (ES) cells in Stargardt's disease.3-4 Now that there are gene therapy vectors and stem cells available for treating patients with retinal diseases, it is important to verify these potential therapies in animal models before applying them in human studies. The mouse has become an important scientific model for testing the therapeutic efficacy of gene therapy vectors and stem cell transplantation in the eye.5-8 In this video article, we present a technique to inject gene therapy vectors or stem cells into the subretinal space of the mouse eye while minimizing damage to the surrounding tissue.

This surgical technique illustrates the injection of gene therapy vectors and stem cells into the subretinal space of the mouse eye.

Fare Göz içine Gen Terapisi Vektörler ve Kök Hücre Subretinal Enjeksiyon

The loss of sight affects approximately 3.4 million people in the United States and is expected to increase in the upcoming years.1 Recently, gene therapy ...

Tıp

Performing Subretinal Injections in Rodents to Deliver Retinal Pigment Epithelium Cells in Suspension

The conversion of light into electrical impulses occurs in the outer retina and is accomplished largely by rod and cone photoreceptors and retinal pigment epithelium (RPE) cells. RPE provide critical support for photoreceptors and death or dysfunction of RPE cells is characteristic of age-related macular degeneration (AMD), the leading cause of permanent vision loss in people age 55 and older. While no cure for AMD has been identified, implantation of healthy RPE in diseased eyes may prove to be an effective treatment, and large numbers of RPE cells can be readily generated from pluripotent stem cells. Several interesting questions regarding the safety and efficacy of RPE cell delivery can still be examined in animal models, and well-accepted protocols used to inject RPE have been developed. The technique described here has been used by multiple groups in various studies and involves first creating a hole in the eye with a sharp needle. Then a syringe with a blunt needle loaded with cells is inserted through the hole and passed through the vitreous until it gently touches the RPE. Using this injection method, which is relatively simple and requires minimal equipment, we achieve consistent and efficient integration of stem cell-derived RPE cells in between the host RPE that prevents significant amount of photoreceptor degeneration in animal models. While not part of the actual protocol, we also describe how to determine the extent of the trauma induced by the injection, and how to verify that the cells were injected into the subretinal space using in vivo imaging modalities. Finally, the use of this protocol is not limited to RPE cells; it may be used to inject any compound or cell into the subretinal space.

Here we present a community accepted protocol in multimedia format for subretinally injecting a bolus of RPE cells in rats and mice. This approach can be used for determining rescue potentials, safety profiles, and survival capacities of grafted RPE cells upon implantation in animal models of retinal degeneration.

Süspansiyon Retina pigment epiteli Hücreleri sunun Kemirgenler Subretinal Enjeksiyonları Sahne

The conversion of light into electrical impulses occurs in the outer retina and is accomplished largely by rod and cone photoreceptors and retinal pigment ...

A Step by Step Protocol for Subretinal Surgery in Rabbits

Age related macular degeneration (AMD), retinitis pigmentosa, and other RPE related diseases are the most common causes for irreversible loss of vision in adults in industrially developed countries. RPE transplantation appears to be a promising therapy, as it may replace dysfunctional RPE, restore its function, and thereby vision.
Here we describe a method for transplanting a cultured RPE monolayer on a scaffold into the subretinal space (SRS) of rabbits. After vitrectomy xenotransplants were delivered into the SRS using a custom made shooter consisting of a 20-gauge metallic nozzle with a polytetrafluoroethylene (PTFE) coated plunger. The current technique evolved in over 150 rabbit surgeries over 6 years. Post-operative follow-up can be obtained using non-invasive and repetitive in vivo imaging such as spectral domain optical coherence tomography (SD-OCT) followed by perfusion-fixed histology.
The method has well-defined steps for easy learning and high success rate. Rabbits are considered a large eye animal model useful in preclinical studies for clinical translation. In this context rabbits are a cost-efficient and perhaps convenient alternative to other large eye animal models.

Retinal pigment epithelium (RPE) replacement strategies and gene-based therapy are considered for several retinal degenerative conditions. For clinical translation, large eye animal models are required to study surgical techniques applicable in patients. Here we present a rabbit model for subretinal surgery geared towards RPE transplantation, which is versatile and cost-efficient.

Tavşanlarda Subretinal Cerrahi Adım Protokolle Bir Adım

Age related macular degeneration (AMD), retinitis pigmentosa, and other RPE related diseases are the most common causes for irreversible loss of vision in ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and drugs. It is widely used in many studies on the physiological functions of vascular smooth muscle, the pathogenesis of vascular diseases such as hypertension, and the development of smooth muscle relaxant drugs. The mouse is a widely used model animal with a large pool of disease models and genetically modified strains. We introduced this method to measure the isometric contraction of mouse mesenteric artery in detail. A 1.4-mm segment of mouse mesenteric resistance artery was isolated and mounted on a myograph chamber by passing two steel wires through its lumen. After equilibration and normalization steps, the vessel segment was potentiated by a high-K+ solution twice prior to the contraction assay. As an example of the application of this method in drug development, we measured the relaxant effect of a novel natural substance, neoliensinine, isolated from a Chinese herb, embryos of the lotus seed (Nelumbo nucifera Gaertn.) on mouse mesenteric arteries. The vessel segments mounted on the myograph chamber were stimulated with a high-K+ solution. When the force tension reached a stable sustained phase, cumulative doses of neoliensinine were added to the chamber. We found that neoliensinine had a dose-dependent relaxant effect on smooth muscle contraction, thus suggesting that it bears potential activity against hypertension. In addition, as the vessel segment can survive at least 4 hours after mounting and maintain contractility induced by the high-K+ solution for many times, we suggest that the wire myograph system may be used for the time-consuming process of drug screening.

The wire myograph technique is used to investigate vascular smooth muscle functions and screen new drugs. We report a detailed protocol for measuring the isometric contractility of the mouse mesenteric artery and for screening new relaxants of vascular smooth muscle.

İzometrik Contractility ölçüm tel Myography kullanarak fare mezenterik arter

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Studying Left Ventricular Reverse Remodeling by Aortic Debanding in Rodents

To better understand the left ventricular (LV) reverse remodeling (RR), we describe a rodent model wherein, after aortic banding-induced LV remodeling, mice undergo RR upon removal of the aortic constriction. In this paper, we describe a step-by-step procedure to perform a minimally invasive surgical aortic debanding in mice. Echocardiography was subsequently used to assess the degree of cardiac hypertrophy and dysfunction during LV remodeling and RR and to determine the best timing for aortic debanding. At the end of the protocol, terminal hemodynamic evaluation of the cardiac function was conducted, and samples were collected for histological studies. We showed that debanding is associated with surgical survival rates of 70-80%. Moreover, two weeks after debanding, the significant reduction of ventricular afterload triggers the regression of ventricular hypertrophy (~20%) and fibrosis (~26%), recovery of diastolic dysfunction as assessed by the normalization of left ventricular filling and end-diastolic pressures (E/e&#39;&#160;and LVEDP). Aortic debanding is a useful experimental model to study LV RR in rodents. The extent of myocardial recovery is variable between subjects, therefore, mimicking the diversity of RR that occurs in the clinical context, such as aortic valve replacement. We conclude that the aortic banding/debanding model represents a valuable tool to unravel novel insights into the mechanisms of RR, namely the regression of cardiac hypertrophy and the recovery of diastolic dysfunction.

Here we describe a step-by-step protocol of surgical aorta debanding in the well-established mice model of aortic-constriction. This procedure not only allows studying the mechanisms underlying the left ventricular reverse remodeling and regression of hypertrophy but also to test novel therapeutic options that might accelerate myocardial recovery.

Kemirgenlerde Aort Debanding tarafından Sol Ventrikül Ters Tadilatı Eğitimi

To better understand the left ventricular (LV) reverse remodeling (RR), we describe a rodent model wherein, after aortic banding-induced LV remodeling, ...

Osteoarthritis Pain Model Induced by Intra-Articular Injection of Mono-Iodoacetate in Rats

The current animal models of osteoarthritis (OA) can be divided into spontaneous models and induced models, both of which aim to simulate the pathophysiological changes of human OA. However, as the main symptom in the late stage of OA, pain affects the patients&#39; daily life, and there are not many available models. The mono-iodoacetate (MIA)-induced model is the most widely used OA pain model, mainly used in rodents. MIA is an inhibitor of glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase, which causes chondrocyte death, cartilage degeneration, osteophyte, and measurable changes in animal behavior. Besides, expression changes of matrix metalloproteinase (MMP) and pro-inflammatory cytokines (IL1 &#946; and TNF &#945;) can be detected in the MIA-induced model. Those changes are consistent with OA pathophysiological conditions in humans, indicating that MIA can induce a measurable and successful OA pain model. This study aims to describe the methodology of intra-articular injection of MIA in rats and discuss the resulting pain-related behaviors and histopathological changes.

This study describes the method of intra-articular injection of mono-iodoacetate in rats and discusses the resulting pain-related behaviors and histopathological changes, which provide references for future applications.

Sıçanlarda Mono-İyodoasetatın Eklem İçi Enjeksiyonu ile İndüklenen Osteoartrit Ağrı Modeli

The current animal models of osteoarthritis (OA) can be divided into spontaneous models and induced models, both of which aim to simulate the ...

Oxygen-Induced Retinopathy Model for Ischemic Retinal Diseases in Rodents

One of the commonly used models for ischemic retinopathies is the oxygen-induced retinopathy (OIR) model. Here we describe detailed protocols for the OIR model induction and its readouts in both mice and rats. Retinal neovascularization is induced in OIR by exposing rodent pups either to hyperoxia (mice) or alternating levels of hyperoxia and hypoxia (rats). The primary readouts of these models are the size of neovascular (NV) and avascular (AVA) areas in the retina. This preclinical in vivo model can be used to evaluate the efficacy of potential anti-angiogenic drugs or to address the role of specific genes in the retinal angiogenesis by using genetically manipulated animals. The model has some strain and vendor specific variation in the OIR induction which should be taken into consideration when designing the experiments.

Oxygen-induced retinopathy (OIR) can be used to model ischemic retinal diseases such as retinopathy of prematurity and proliferative diabetic retinopathy and to serve as a model for proof-of-concept studies in evaluating antiangiogenic drugs for neovascular diseases. OIR induces robust and reproducible neovascularization in the retina that can be quantified.

Kemirgenlerde İskemik Retina Hastalıkları için Oksijen Kaynaklı Retinopati Modeli

One of the commonly used models for ischemic retinopathies is the oxygen-induced retinopathy (OIR) model. Here we describe detailed protocols for the OIR ...

A Murine Model of Ischemic Retinal Injury Induced by Transient Bilateral Common Carotid Artery Occlusion

Diverse vascular diseases such as diabetic retinopathy, occlusion of retinal veins or arteries and ocular ischemic syndrome can lead to retinal ischemia. To investigate pathological mechanisms of retinal ischemia, relevant experimental models need to be developed. Anatomically, a main retinal blood supplying vessel is the ophthalmic artery (OpA) and OpA originates from the internal carotid artery of the common carotid artery (CCA). Thus, disruption of CCA could effectively cause retinal ischemia. Here, we established a mouse model of retinal ischemia by transient bilateral common carotid artery occlusion (tBCCAO) to tie the right CCA with 6-0 silk sutures and to occlude the left CCA transiently for 2 seconds via a clamp, and showed that tBCCAO could induce acute retinal ischemia leading to retinal dysfunction. The current method reduces reliance on surgical instruments by only using surgical needles and a clamp, shortens occlusion time to minimize unexpected animal death, which is often seen in mouse models of middle cerebral artery occlusion, and maintains reproducibility of common retinal ischemic findings. The model can be utilized to investigate the pathophysiology of ischemic retinopathies in mice and further can be used for in vivo drug screening.

Here, we describe a mouse model of retinal ischemia by transient bilateral common carotid artery occlusion using simple sutures and a clamp. This model can be useful for understanding the pathological mechanisms of retinal ischemia caused by cardiovascular abnormalities.

Geçici Bilateral Ortak Karotid Arter Tıkanması sonucu İndüklenen İskemik Retina Yaralanmasının Murine Modeli

Diverse vascular diseases such as diabetic retinopathy, occlusion of retinal veins or arteries and ocular ischemic syndrome can lead to retinal ischemia. ...

Retinal Pigment Epithelium Transplantation in a Non-human Primate Model for Degenerative Retinal Diseases

Retinal pigment epithelial (RPE) transplantation holds great promise for the treatment of inherited and acquired retinal degenerative diseases. These conditions include retinitis pigmentosa (RP) and advanced forms of age-related macular degeneration (AMD), such as geographic atrophy (GA). Together, these disorders represent a significant proportion of currently untreatable blindness globally. These unmet medical needs have generated heightened academic interest in developing methods of RPE replacement. Among the animal models commonly utilized for preclinical testing of therapeutics, the non-human primate (NHP) is the only animal model that has a macula. As it shares this anatomical similarity with the human eye, the NHP eye is an important and appropriate preclinical animal model for the development of advanced therapy medicinal products (ATMPs) such as RPE cell therapy.
This manuscript describes a method for the submacular transplantation of an RPE monolayer, cultured on a polyethylene terephthalate (PET) cell carrier, underneath the macula onto a surgically created RPE wound in immunosuppressed NHPs. The fovea-the central avascular portion of the macula-is the site of the greatest mechanical weakness during the transplantation. Foveal trauma will occur if the initial subretinal fluid injection generates an excessive force on the retina. Hence, slow injection under perfluorocarbon liquid (PFCL) vitreous tamponade is recommended with a dual-bore subretinal injection cannula at low intraocular pressure (IOP) settings to create a retinal bleb. 
Pretreatment with an intravitreal plasminogen injection to release parafoveal RPE-photoreceptor adhesions is also advised. These combined strategies can reduce the likelihood of foveal tears when compared to conventional techniques. The NHP is a key animal model in the preclinical phase of RPE cell therapy development. This protocol addresses the technical challenges associated with the delivery of RPE cellular therapy in the NHP eye.

The non-human primate (NHP) is an ideal model for studying human retinal cellular therapeutics due to the anatomical and genetic similarities. This manuscript describes a method for submacular transplantation of retinal pigment epithelial cells in the NHP eye and strategies to prevent intraoperative complications associated with macular manipulation.

Dejeneratif Retina Hastalıkları için İnsan Dışı Primat Modelinde Retina Pigment Epitel Transplantasyonu

Retinal pigment epithelial (RPE) transplantation holds great promise for the treatment of inherited and acquired retinal degenerative diseases. These ...

A Simplified Model for Heterotopic Heart Valve Transplantation in Rodents

There is an urgent clinical need for heart valve replacements that can grow in children. Heart valve transplantation is proposed as a new type of transplant with the potential to deliver durable heart valves capable of somatic growth with no requirement for anticoagulation. However, the immunobiology of heart valve transplants remains unexplored, highlighting the need for animal models to study this new type of transplant. Previous rat models for heterotopic aortic valve transplantation into the abdominal aorta have been described, though they are technically challenging and costly. For addressing this challenge, a renal subcapsular transplant model was developed in rodents as a practical and more straightforward method for studying heart valve transplant immunobiology. In this model, a single aortic valve leaflet is harvested and inserted into the renal subcapsular space. The kidney is easily accessible, and the transplanted tissue is securely contained in a subcapsular space that is well vascularized and can accommodate a variety of tissue sizes. Furthermore, because a single rat can provide three donor aortic leaflets and a single kidney can provide multiple sites for transplanted tissue, fewer rats are required for a given study. Here, the transplantation technique is described, providing a significant step forward in studying the transplant immunology of heart valve transplantation.

This protocol describes a simple and efficient method for the transplantation of aortic valve leaflets under the renal capsule to allow for the study of alloreactivity of heart valves.