Name: contextual and cued fear conditioning test using a video analyzing system in mice
Uploaded: 2014-03-01T15:45:00.000+00:00
Duration: 19 min 32 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Contextual and Cued Fear Conditioning Test Using a Video Analyzing System in Mice at JoVE.com

Burada gösterilen bazı verilerin Ruh Sağlığı ABD Ulusal Enstitüsü&#39;nden Dr Jacqueline N. Crawley laboratuvarda elde edildi ve bize kağıt verileri göstermek için izin verdiği için ona teşekkür etmek istiyorum. Biz de davranış analizi için ImageFZ programı geliştirirken yaptığı yardım için Kazuo Nakanishi teşekkür ederim. Bu araştırma ile desteklenen Hibe-in-Aid Bilimsel Araştırma (B) (21.300.121), Grant-in-Aid Bilimsel Araştırma Yenilikçi Alanları Eğitim Bakanlığı (Kapsamlı Beyin Bilim Ağı), Bilim, Spor ve Kültür Japonya üzerinde , Nöroinformatik Japonya Merkezi (NIJC) ve Japonya Bilim ve Teknoloji Kurumu (JST) Crest hibe dan hibe.

<ol>
	<li>Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> What's wrong with my mouse: behavioral phenotyping of transgenic and knockout mice. , (2007).</li><li>Fanselow, M. S., Poulos, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+neuroscience+of+mammalian+associative+learning.">The neuroscience of mammalian associative learning.</a> Annu. Rev. Psychol. 56, 207-234 (2005).</li><li>LeDoux, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Emotion+circuits+in+the+brain.">Emotion circuits in the brain.</a> Annu. Rev. Neurosci. 23, 155-184 (2000).</li><li>Nakajima, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comprehensive+behavioral+phenotyping+of+calpastatin-knockout+mice.">Comprehensive behavioral phenotyping of calpastatin-knockout mice.</a> Mol. Brain. 1, 7 (2008).</li><li>Ikeda, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+YWHAE,+a+gene+encoding+14-3-3epsilon,+as+a+possible+susceptibility+gene+for+schizophrenia.">Identification of YWHAE, a gene encoding 14-3-3epsilon, as a possible susceptibility gene for schizophrenia.</a> Hum. Mol. Genet. 17, 3212-3222 (2008).</li><li>Sakae, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mice+lacking+the+schizophrenia-associated+protein+FEZ1+manifest+hyperactivity+and+enhanced+responsiveness+to+psychostimulants.">Mice lacking the schizophrenia-associated protein FEZ1 manifest hyperactivity and enhanced responsiveness to psychostimulants.</a> Hum. Mol. Genet. 17, 3191-3203 (2008).</li><li>Fukuda, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Down-regulation+of+protocadherin-alpha+A+isoforms+in+mice+changes+contextual+fear+conditioning+and+spatial+working+memory.">Down-regulation of protocadherin-alpha A isoforms in mice changes contextual fear conditioning and spatial working memory.</a> Eur. J. Neurosci. 28, 1362-1376 (2008).</li><li>Imayoshi, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Roles+of+continuous+neurogenesis+in+the+structural+and+functional+integrity+of+the+adult+forebrain.">Roles of continuous neurogenesis in the structural and functional integrity of the adult forebrain.</a> Nat. Neurosci. 11, 1153-1161 (2008).</li><li>Nakatani, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Abnormal+behavior+in+a+chromosome-engineered+mouse+model+for+human+15q11-13+duplication+seen+in+autism.">Abnormal behavior in a chromosome-engineered mouse model for human 15q11-13 duplication seen in autism.</a> Cell. 137, 1235-1246 (2009).</li><li>Takao, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comprehensive+behavioral+analysis+of+calcium/calmodulin-dependent+protein+kinase+IV+Knockout+mice.">Comprehensive behavioral analysis of calcium/calmodulin-dependent protein kinase IV Knockout mice.</a> PLoS ONE. 5, (2010).</li><li>Tamada, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Decreased+exploratory+activity+in+a+mouse+model+of+15q+duplication+syndrome;+implications+for+disturbance+of+serotonin+signaling.">Decreased exploratory activity in a mouse model of 15q duplication syndrome; implications for disturbance of serotonin signaling.</a> PLoS ONE. 5, (2010).</li><li>Watanabe, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relaxin-3-deficient+mice+showed+slight+alteration+in+anxiety-related+behavior.">Relaxin-3-deficient mice showed slight alteration in anxiety-related behavior.</a> Front. Behav. Neurosci. 5, 50 (2011).</li><li>Takeuchi, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=P301S+mutant+human+tau+transgenic+mice+manifest+early+symptoms+of+human+tauopathies+with+dementia+and+altered+sensorimotor+gating.">P301S mutant human tau transgenic mice manifest early symptoms of human tauopathies with dementia and altered sensorimotor gating.</a> PLoS ONE. 6, (2011).</li><li>Koshimizu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adenomatous+polyposis+coli+heterozygous+knockout+mice+display+hypoactivity+and+age-dependent+working+memory+deficits.">Adenomatous polyposis coli heterozygous knockout mice display hypoactivity and age-dependent working memory deficits.</a> Front. Behav. Neurosci. 5, 85 (2011).</li><li>Yao, I., Takao, K., Miyakawa, T., Ito, S., Setou, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synaptic+E3+ligase+SCRAPPER+in+contextual+fear+conditioning:+extensive+behavioral+phenotyping+of+Scrapper+heterozygote+and+overexpressing+mutant+mice.">Synaptic E3 ligase SCRAPPER in contextual fear conditioning: extensive behavioral phenotyping of Scrapper heterozygote and overexpressing mutant mice.</a> PLoS ONE. 6, (2011).</li><li>Shoji, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comprehensive+behavioral+analysis+of+ENU-induced+Disc1-Q31L+and+-L100P+mutant+mice.">Comprehensive behavioral analysis of ENU-induced Disc1-Q31L and -L100P mutant mice.</a> BMC Res. Notes. 5, 108 (2012).</li><li>Anagnostaras, S. G., Josselyn, S. A., Frankland, P. W., Silva, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Computer-assisted+behavioral+assessment+of+Pavlovian+fear+conditioning+in+mice.">Computer-assisted behavioral assessment of Pavlovian fear conditioning in mice.</a> Learn. Mem. 7, 58-72 (2000).</li><li>Miyakawa, T., Yamada, M., Duttaroy, A., Wess, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperactivity+and+intact+hippocampus-dependent+learning+in+mice+lacking+the+M1+muscarinic+acetylcholine+receptor.">Hyperactivity and intact hippocampus-dependent learning in mice lacking the M1 muscarinic acetylcholine receptor.</a> J. Neurosci. 21, 5239-5250 (2001).</li><li>Marchand, A. R., Luck, D., DiScala, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+an+improved+automated+analysis+of+freezing+behaviour+in+rats+and+its+use+in+trace+fear+conditioning.">Evaluation of an improved automated analysis of freezing behaviour in rats and its use in trace fear conditioning.</a> J. Neurosci. Methods. 126, 145-153 (2003).</li><li>Kopec, C. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+robust+automated+method+to+analyze+rodent+motion+during+fear+conditioning.">A robust automated method to analyze rodent motion during fear conditioning.</a> Neuropharmacology. 52, 228-233 (2007).</li><li>Wehner, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+trait+locus+analysis+of+contextual+fear+conditioning+in+mice.">Quantitative trait locus analysis of contextual fear conditioning in mice.</a> Nat. Genet. 17, 331-334 (1997).</li><li>Quirk, G. J., Armony, J. L., LeDoux, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fear+conditioning+enhances+different+temporal+components+of+tone-evoked+spike+trains+in+auditory+cortex+and+lateral+amygdala.">Fear conditioning enhances different temporal components of tone-evoked spike trains in auditory cortex and lateral amygdala.</a> Neuron. 19, 613-624 (1997).</li><li>Chaudhury, D., Christopher, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circadian+modulation+of+learning+and+memory+in+fear-conditioned+mice.">Circadian modulation of learning and memory in fear-conditioned mice.</a> Behav. Brain Res. 133, 95-108 (2002).</li><li>Valentinuzzi, V. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+circadian+phase+on+context+and+cued+fear+conditioning+in+C57BL/6J+mice.">Effect of circadian phase on context and cued fear conditioning in C57BL/6J mice.</a> Learn. Behav. 29, 133-142 (2001).</li><li>Frankland, P. W., Bontempi, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+organization+of+recent+and+remote+memories.">The organization of recent and remote memories.</a> Nat. Rev. Neurosci. 6, 119-130 (2005).</li><li>Contarino, A., Baca, L., Kennelly, A., Gold, L. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+assessment+of+conditioning+parameters+for+context+and+cued+fear+in+mice.">Automated assessment of conditioning parameters for context and cued fear in mice.</a> Learn. Mem. 9, 89-96 (2002).</li><li>Kinney, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deficits+in+trace+cued+fear+conditioning+in+galanin-treated+rats+and+galanin-overexpressing+transgenic+mice.">Deficits in trace cued fear conditioning in galanin-treated rats and galanin-overexpressing transgenic mice.</a> Learn. Mem. 9, 178-190 (2002).</li><li>Hefner, K., Holmes, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ontogeny+of+fear-,+anxiety-+and+depression-related+behavior+across+adolescence+in+C57BL/6J+mice.">Ontogeny of fear-, anxiety- and depression-related behavior across adolescence in C57BL/6J mice.</a> Behav. Brain Res. 176, 210-215 (2007).</li><li>Wellman, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impaired+stress-coping+and+fear+extinction+and+abnormal+corticolimbic+morphology+in+serotonin+transporter+knock-out+mice.">Impaired stress-coping and fear extinction and abnormal corticolimbic morphology in serotonin transporter knock-out mice.</a> J. Neurosci. 27, 684-691 (2007).</li><li>Valentinuzzi, V. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+measurement+of+mouse+freezing+behavior+and+its+use+for+quantitative+trait+locus+analysis+of+contextual+fear+conditioning+in+(BALB/cJ+&#215;+C57BL/6J)F2+mice.">Automated measurement of mouse freezing behavior and its use for quantitative trait locus analysis of contextual fear conditioning in (BALB/cJ &#215; C57BL/6J)F2 mice.</a> Learn. Mem. 5, 391-403 (1998).</li><li>Valentinuzzi, V. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+circadian+phase+on+context+and+cued+fear+conditioning+in+C57BL/6J+mice.">Effect of circadian phase on context and cued fear conditioning in C57BL/6J mice.</a> Learn. Behav. 29, 133-142 (2001).</li><li>Bothe, G. W. M., Bolivar, V. J., Vedder, M. J., Geistfeld, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+and+behavioral+differences+among+five+inbred+mouse+strains+commonly+used+in+the+production+of+transgenic+and+knockout+mice.">Genetic and behavioral differences among five inbred mouse strains commonly used in the production of transgenic and knockout mice.</a> Genes Brain Behav. 3, 149-157 (2004).</li><li>Chen, C., Kim, J. J., Thompson, R. F., Tonegawa, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hippocampal+lesions+impair+contextual+fear+conditioning+in+two+strains+of+mice.">Hippocampal lesions impair contextual fear conditioning in two strains of mice.</a> Behav. Neurosci. 110, 1177-1180 (1996).</li><li>Anagnostaras, S. G., Gale, G. D., Fanselow, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hippocampus+and+contextual+fear+conditioning:+Recent+controversies+and+advances.">Hippocampus and contextual fear conditioning: Recent controversies and advances.</a> Hippocampus. 11, 8-17 (2001).</li><li>Akirav, I., Maroun, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+the+medial+prefrontal+cortex-amygdala+circuit+in+stress+effects+on+the+extinction+of+fear.">The role of the medial prefrontal cortex-amygdala circuit in stress effects on the extinction of fear.</a> Neural Plast. , 1-11 (2007).</li><li>Johansen, J. P., Cain, C. K., Ostroff, L. E., LeDoux, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+mechanisms+of+fear+learning+and+memory.">Molecular mechanisms of fear learning and memory.</a> Cell. 147, 509-524 (2011).</li><li>Anagnostaras, S. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+assessment+of+pavlovian+conditioned+freezing+and+shock+reactivity+in+mice+using+the+video+freeze+system.">Automated assessment of pavlovian conditioned freezing and shock reactivity in mice using the video freeze system.</a> Front. Behav. Neurosci. 4, (2010).</li><li>Pham, J., Cabrera, S. M., Sanchis-Segura, C., Wood, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+scoring+of+fear-related+behavior+using+EthoVision+software.">Automated scoring of fear-related behavior using EthoVision software.</a> J. Neurosci. Methods. 178, 323-326 (2009).</li><li>Blanchard, D. C., Blanchard, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Crouching+as+an+index+of+fear.">Crouching as an index of fear.</a> J. Comp. Physiol. Psychol. 67, 370-375 (1969).</li><li>Frankland, P. W., Bontempi, B., Talton, L. E., Kaczmarek, L., Silva, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+involvement+of+the+anterior+cingulate+cortex+in+remote+contextual+fear+memory.">The involvement of the anterior cingulate cortex in remote contextual fear memory.</a> Science. 304, 881-883 (2004).</li><li>Takao, K., Miyakawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Investigating+gene-to-behavior+pathways+in+psychiatric+disorders:+the+use+of+a+comprehensive+behavioral+test+battery+on+genetically+engineered+mice.">Investigating gene-to-behavior pathways in psychiatric disorders: the use of a comprehensive behavioral test battery on genetically engineered mice.</a> Ann. N. Y. Acad. Sci. 1086, 144-159 (2006).</li><li>Takao, K., Yamasaki, N., Miyakawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+brain-behavior+phenotypying+of+genetically-engineered+mice+on+research+of+neuropsychiatric+disorders.">Impact of brain-behavior phenotypying of genetically-engineered mice on research of neuropsychiatric disorders.</a> Neurosci. Res. 58, 124-132 (2007).</li></ol>

Biz bu yayın ile ilişkili çıkar bilinen çatışmalar vardır ve onun sonucu etkilemiş olabilir bu iş için önemli bir mali destek olmuştur onaylamak.

Bağlamsal ve cued korku klima testi öğrenme ve hafıza değerlendirmek için en yaygın kullanılan paradigmaların biridir. Bu test, bir dernek, bir bağlam ve / veya şartlı uyaran (işitsel işaret) ve caydırıcı bir uyarıcı (elektrik footshock) arasında yapılmış olduğu Pavlovyan klima şeklidir. Bağlam veya işaret ya ile karşı karşıya bağlam / işitsel işaret ve Ayak şokunun bile tek bir eşleşmeden sonra, fareler uzun ömürlü donmasını sergilerler. Bu testte, donma davranışı korku bellek bir göstergesi olarak kullanılır. Farmakolojik ve lezyon çalışmaları hafıza oluşumu, konsolidasyon ve geri alma gibi amigdala, hipokampus ve prefrontal korteks 3,33-35 gibi çeşitli beyin bölgeleri tarafından düzenlenmektedir ortaya koymuştur. Buna ek olarak, moleküler genetik çalışmalar, spesifik genlerin ve genetik olarak fareler 36 kullanılarak bu beyin bölgelerinde öğrenme ve hafıza ile ilgili moleküllerin bir rol oynadığım göstermiştir. Bu nedenle, bu test simple ve nörobiyolojik temeli yatan korku, öğrenme ve hafıza keşfetmek için yararlıdır. Bu film yazıda, anlamak ve kolayca testi gerçekleştirmek için ayrıntılı bilgi denemeyen sağlamak için bizim protokol tanıttı. Donma davranışı insan deneyciler tarafından doğrudan gözlem yoluyla ölçüldü. İyi eğitilmiş deneyci gözlemler karşısında güvenilir, istikrarlı sonuçlar üretmesi bekleniyor. Ancak, bu yöntem gibi gözlemsel yöntemi farklılığa, gözlemci önyargıları ve basit ölçümü hatalar gibi potansiyel sorunları, zor doğrudan bağımsız deneyci ve farklı laboratuvarların sonuçları karşılaştırmak yapılmasını gerektirir. Otomatik bir photobeam-tabanlı bilgisayar ölçüm sistemi de 26,30-32 kullanılmıştır. Ancak bu sistem, aynı zamanda donma davranışı ölçme potansiyel sorunlar çıkarmaktadır. Çünkü sensör düzenlemenin, bu sistem Typica olurdu küçük baş hareketleri algılamak mümkün olabilirLly insan gözlem yoluyla &#39;aktif&#39; olarak atılır. Buna ek olarak, donma sırasında titreyen bir hayvan donuyor, photobeam aralıklı kesintiler titreyen bir sonucu olarak görülmektedir, çünkü, donmanın olarak düşünülebilir. Alternatif bir yöntem olarak, otomatik bir görüntü ve video analiz sistemleri, 17-20,37,38 geliştirilmiştir. Anagnostaras vd. 37 iyi geçerliliğe sahip ve iyi 17,20,37-38 dondurma puan görüntü analiz yazılımı programları ile birkaç sistem nitelendirdi. Ancak, bu sistemler ve analiz programları çoğu ticari tedarikçilerden elde edilecek ve tipik olarak maliyetlidir. Biz dondurma davranış analizi için ImageFZ yazılım programı geliştirdi ve bu program ücretsiz bir yazılım programı olarak dağıtılmaktadır. ImageFZ piksel bir gövde (parçacık) olarak fare algılar ve miktarı bağlı olarak dondurma &#39;veya&#39; non-dondurma &#39;olarak ince fare hareketi ayrımcılıkardışık görüntülerin her biri bir parçacık arasındaki örtüşmeyen bölgelerin alan. Temsili sonuçlarda görüldüğü gibi, ImageFZ programı kullanılarak ölçümler ile tutarlı veya başka yöntemler kullanılarak elde edilen çok daha doğrudur. Böylece, ImageFZ program otomatik olarak insan gözlemciler tanımlı kriterleri kullanarak dondurma gibi hakim olduğu davranışı ölçer. Buna ek olarak, ImageFZ programı mesafe sırasında, daha önce (cm) gitti ve ayak şoku maruz kaldıktan sonra, donma davranışının şok duyarlılık ve analiz bir değerlendirme kolaylaştırmak hesaplar. Metodolojik farklılıklar laboratuarlar arasında var. Bu farklılıklar, laboratuarlar arasında verilerin karşılaştırılması zorluk ve farklı laboratuarlarda sonuçlar replike neden olabilir. Daha istikrarlı ve karşılaştırılabilir veriler elde etmek için, bu test protokolünü mümkün olduğu kadar standart gereklidir. ImageFZ ile analiz sistemi katkıda bulunabilir test prosedürleri otomasyon yol açarprotokollerinin standardizasyonu laboratuvarlar boyunca kullanılır. Donma davranışı analiz ederken çeşitli davranışsal tepkileri düşünülmelidir. Hayvanlar korkunç bir durumla karşı karşıya İlk, ne zaman, bunun yerine 39 donma kaçabilsin. Kaçan korku cevaplardan biridir ve onun oluşum korku hafızasını küçümseyen yol açacaktır. İkinci olarak, dondurma genel bir aktivite seviyesine bağlı olabilir ve kontrol ve deney farelerinde aktivite düzeyi muayene edilmesi gerekmektedir. M1 muskarinik asetilkolin reseptörü eksik farenin yabani tip farelere kıyasla dondurma azaltılmış düzeyde gösterdi, ancak, örneğin, çeşitli davranışsal testleri sonuçları yerine kendi hafıza bozukluğu 18 kendi hiperaktivite fenotipi atfedilebilir olabileceğini göstermiştir. ImageFZ konular ile seyahat mesafe (cm) hesaplar. Veri farklılıklar konular arasında genel aktivite düzeyleri mevcut olup olmadığını incelemek için kullanılabilir. Bir grup fark varsamesafe sorunun olası bir yaklaşım mesafesi temel etkinlik olarak eğitimin ilk 2 dakika boyunca gitti düşünün ve sırasında bazal + aktivite sırasında / (aktivite (bastırma oranı = (aktivite test sırasında) bir bastırma oranı kullanmak için, gitti korku 17,40 ikincil bir indeksi olarak test)). Son olarak, bir elektirik ayak şoku için reaktivite açısından değişiklikler indükleyen ağrı hassasiyetinde bir fark, eğer varsa, donma davranışı değişikliklere neden olabilir. ImageFZ da mesafe ayak şoku duyarlılık bir indeksi olarak kullanılabilir (6 saniye) ile maruz kaldıktan sonra 2 saniye için 2 saniye Ayak şokunun bir maruz kalma, daha önce 2 saniye ayrıntılı olarak (cm), seyahat hesaplar. Video analiz sistemleri, siyah agouti albino, donma davranışı ölçmek ve kahverengi fareler sulandırmak için geliştirilmiştir. ImageFZ (Şekil 1B bakınız) beyaz fareler incelemek için siyah zemin tepsi ve siyah ağlarını kullanır. Siyah ızgaralar speci yapılır<html> ally kaplı siyah boya ile metal işleme ve tipik olarak siyah fareler için kullanılan kaplanmamış metal ızgaralar, benzer bir elektrik iletkenliğine sahiptir. ImageFZ da program parametrelerinin ayarlamaları ile sıçan ve diğer kemirgenlerde donma davranışı analiz eder. ImageFZ güncel versiyonda, konunun donma davranışı analiz etmek için, üst duvardan bir video kamera ile kaydedilir. ImageFZ görüntüleri bölmenin tarafından yakalanır, bir set-up da kullanılabilir. Buna ek olarak, ImageFZ 4 aparatların fazla kontrol eder. Bu özellik, zaman tasarrufu ve her konunun yürütme zamanı ve davranışları üzerinde test sırayla farklılıklardan potansiyel etkilerini azaltarak, araştırmacı aynı anda 4 fareleri incelemek için olanak sağlar. Böylece, ImageFZ test prosedürü ve donma davranış analizini kolaylaştırır, ve bu program daha az emek ve davranışsal deneyler için herhangi bir eğitim olmadan test kolaylaştırır. Miyakawa Laboratuarda e_content &quot;&gt;, öğrenme ve hafıza ile ilgili belirli bir genin etkisini araştırmak için görüntü analiz sistemi kullanılarak ve bağlamsal korku şartlandırma tetiklenen testte genetik olarak fare ve vahşi tipli kontrol farelerinin fazla 110 suşları değerlendirilmiştir 41-42 Biz 5.000 &#39;den fazla fareler için ham verilerin büyük bir set elde etmiş yayınlanan araştırma makaleleri 4-16 için kullanılan ham verileri bir ortak veritabanı (URL olarak&#39; Fare Fenotip Veritabanı &#39;dahildir:.. http: / / www.mouse-phenotype.org/). Mevcut film makale, deneysel işlemin detayları ile ilgili ayrıntılı bilgi sağlar ve test durumun anlaşılmasını teşvik etmektedir.

Bağlamsal ve cued korku klima testi kemirgenlerde 1-3 ilişkisel öğrenme korku ve belleği değerlendirmek için kullanılan davranışsal paradigma. Bu test yaygın olarak transgenik ve nakavt farelerde 1,4-16 korku öğrenme ve bellek nörobiyolojik mekanizmaları anlamak için kullanılır olmuştur. Nefes hariç tam hareketsizlik gibi tanımlanmıştır Donma davranışı, korku durumları için ortak bir tepkidir. Hayvanlar bir elektirik ayak şoku olan bir işitsel bir işaret eşleştirme maruz sonra bu davranış paradigmada, bu birleştirici korku öğrenme ve bellek indeksi olarak ölçülür donma davranışı göstererek korku üreten uyarana yanıt verir. Bu test daha ayrıntılı ekipman, araştırmacı tarafından daha az fiziksel efor ve diğer öğrenme ve hafıza görevleri daha fareler için çok daha az eğitim zaman gerektirir; genellikle 2 gün boyunca yaklaşık 5-10 dk / gün fare başına gerektirir. Test prosedürü si olmasına rağmenmple ve gerçekleştirmek için çok az zaman gerektirir, araştırmacı dikkatle gözlemlemek ve fare davranışı ölçmek gerekir, bu nedenle, birçok otomatik ölçüm sistemleri davranışsal analizi 17-20 yapmak için geliştirilmiştir. Biz ImageFZ yazılım programı ile geliştirilen Bizim video-analiz sistemi, bize kolayca donma davranışlarını analiz ve son derece güvenilir sonuçlar üretmek için izin verir. Bu makale, test prosedürü hakkında ayrıntılı bilgi sağlar ve ImageFZ yazılım programı için nasıl kullanılacağı açıklanır.

<table><tbody><tr><td>ImageFZ program</td><td>Developed by Tsuyoshi Miyakawa</td><td></td><td>This program is available through O&#039;Hara &amp;amp; Co., Tokyo, Japan and for free download at http://www.mouse-phenotype.org/. This software runs on 32-bit Windows XP/Vista/7.&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Conditioning chamber</td><td>O&amp;rsquo;Hara &amp;amp; Co., Japan</td><td>CL-3002L</td><td>For mouse.</td></tr><tr><td>Cued test chamber</td><td>O&amp;rsquo;Hara &amp;amp; Co., Japan</td><td>CLT-3002L</td><td>For mouse.</td></tr><tr><td>Interface</td><td>O&amp;rsquo;Hara &amp;amp; Co., Japan</td><td>CL-1040</td><td>The interface includes a white noise/tone generator, which can be controlled by ImageFZ program.</td></tr><tr><td>Scrambled shock generator</td><td>O&amp;rsquo;Hara &amp;amp; Co., Japan</td><td>SGA-2040</td><td>The shock generator can be controlled by ImageFZ program.</td></tr><tr><td>Shock grid tester (ammeter)</td><td>O&amp;rsquo;Hara &amp;amp; Co., Japan</td><td>SG-T</td><td></td></tr><tr><td>USB video capture device</td><td>XLR8</td><td>USB2IVOSX</td><td></td></tr><tr><td>Quad image splitter</td><td>Wireless Tsukamoto Co., Ltd., Japan</td><td>400AS</td><td></td></tr><tr><td>Soundproof room</td><td>O&amp;rsquo;Hara &amp;amp; Co., Japan</td><td>CL-4210</td><td></td></tr><tr><td>Freeze Monitor</td><td>San Diego Instruments, Inc., CA, USA</td><td></td><td>16 x 16 photbeam array&amp;nbsp; ( 2.5 cm spacing)</td></tr></tbody></table>

contextual and cued fear conditioning test using a video analyzing system in mice

Bağlamsal ve cued korku klima testi öğrenmek ve çevresel ipuçları ve caydırıcı deneyimleri arasında bir ilişki hatırlamak için farelerin yeteneğini değerlendirir davranışsal testlerden biridir. Bu testte, fareler, bir klima odasına yerleştirilir ve klimalı bir uyarıcı (işitsel bir işaret) ve kırpıntı ve caydırıcı bir koşulsuz uyarıcı (bir elektrik ayak şoku) verilmiştir. Bir gecikme süresinden sonra, fareler aynı klima odası ile işaret işitsel sunumu ile farklı şekil verilmiş bir bölmesine maruz kalmaktadır. Donma davranışı test sırasında korku bellek bir indeksi olarak ölçülür. Otomatik olarak davranışlarını analiz etmek, biz http://www.mouse-phenotype.org/ adresinden ücretsiz olarak kullanılabilir ImageFZ uygulama yazılım programı kullanarak video analiz sistemi geliştirdik. İşte, bizim protokol ayrıntılarını göstermek için, biz bağlamsal için prosedür göstermek ve ImageFZ Sist kullanarak C57BL/6J farelerde korku klima testi cuedem. Ayrıca, bizim protokol ve bir insan gözlemci tarafından atılırsa o ile ImageFZ sistemi veya bir photobeam-tabanlı bir bilgisayar ölçüm sistemi tarafından ölçülen dondurma karşılaştırarak zaman video analiz sistem performansını valide. Bizim için temsili sonuçlarda görüldüğü gibi, ImageFZ ile elde edilen veriler, ImageFZ sistemi kullanılarak davranış analizi son derece güvenilir olduğunu gösteren, bir insan gözlemci ile analiz edilenlere benzerdi. Mevcut film makale test prosedürleri hakkında ayrıntılı bilgi sağlar ve deneysel durumun anlaşılmasını teşvik edecektir.

Korku klima testte, insan denemecileri emek-yoğun doğrudan gözlem yoluyla 26-29 donma davranışını ölçmek için kullanılan, ancak son zamanlarda photobeam-tabanlı bilgisayar ölçümü (örn. &#39;Freeze Monitor&#39; sistemi) ve görüntü analiz sistemleri otomatik olarak kullanılmıştır Donma davranışı 26,30-32 ölçer. ImageFZ aşağıda tarif edildiği gibi, insan gözlem yoluyla elde edilenlere benzer sonuçlar elde otomatik bir görüntü analiz sistemi. Burada, değişen parametreleri altında ImageFZ analizi olanlar ile insan gözlem sonuçlarını karşılaştırdık: &#39;Oranı (kare / sn)&#39; ve &#39;(piksel) kriterini Donma.&#39; Bu deneyde, beş erkek C57BL/6J fareler (SD (g ± ortalama vücut ağırlıkları), 31.4 ± 3.55, SD (piksel), 351,6 ± 62,2 ± vücut büyüklüğü ortalama) yaşı 15-27 hafta kullanıldı. İnsan gözlem bir olay-kayıt programı (Macintosh OS9 yazılım programı) kullanılarak yapılmış; devam anahtar basarak olayBir fare hiçbir hareketin bir butik görüntülenen 2 saniye veya daha fazla süreyle d &#39;dondurma&#39; olarak kabul edildi. Dondurma yüzdesi her deney, her 60 saniye hesaplanır ve korelasyon analizi için kullanılmıştır. 2 gözlemciler tarafından attı Donma yüzde (klima, r = 0,879 için gözlemciler arası güvenilirlik; bağlam testi, r = 0,957 için; cued testi için, r = 0.866, = 0.888 tüm durumlarda, r) ​​bir insan oluşturmak için ortalama edildi skor. Donma her kare hızında (yani 1, 2 ve 4 fps) ile ImageFZ ile ölçülür yüzdeleri ve insan gözlemler yoluyla elde edilenler arasındaki korelasyonlar incelenmiştir. Şekil 4&#39;te gösterildiği gibi, ImageFZ (1, 2 ve 4 frame) üzerinden hesaplanan yüzdeler yüksek donma 2 gözlemci ölçümlerinden elde edilen ortalama değeri ile korele edilmiştir. Özellikle, daha yüksek bir kare hızında görüntü yakalamak her zaman iyi bir ilişki üretmez. E insan gözlemcilerin elde edilenlerle benzer 1 fps oluşturulan sonuçlara görüntü analiziach testi. Insan gözlemleri ile ölçülür ve &#39;Dondurma kriter (piksel)&#39;, her koşul altında ImageFZ kullanarak dondurma yüzdeleri (yani 20, 30, ve 40 piksel) arasındaki korelasyonlar incelenmiştir. 20 &#39;Donma kriteri (piksel)&#39;, 30 ve 40 piksel ImageFZ kullanılarak hesaplanan donma yüzdeler, her durumda, son derece (Şekil 5), insan gözlemler yoluyla elde edilenler ile karşılaştırılmıştır. Donma kriter insan gözlemciler tarafından &#39;dondurma&#39; olarak kabul düşük bir değer, bir fare ince hareketi ayarlanır Şekil 5D, görüldüğü gibi, &#39;non-donma&#39; ImageFZ kullanılarak düşünülebilir. Kriteri yüksek bir değere ayarlanırsa, tersine, bir fare hareketi, insan gözlemciler tarafından &#39;non-dondurma&#39; olarak attı, kabul edilecek &#39;dondurma&#39; ImageFZ (Şekil 5C, 5F ve 5I&#39;ya) kullanarak. Bu nedenle, en güvenilir sonuçlar elde etmek için, ImageFZ program, her bir parametre bize kalibre edilmelidirHer test ortamında insan gözlemler yoluyla attı veri ing. Buna ek olarak, ImageFZ kullanılarak elde edilenlere bir photobeam tabanlı bir bilgisayar ölçüm sistemi (Freeze Monitör sistemi), (Şekil 6) kullanarak, insan gözlemci tarafından üretilen sonuçları karşılaştırılmıştır. Insan gözlemci tedavi grubu ve ImageFZ puanlama sonuçlarına kör edildi. Freeze Monitor sisteminin parametre ayarları için, biz daha önceden belirlenmiş bir sistemde 30 donma yüzdesi 3. önlemler kullanılır. Kısaca, 10 sn aralıklarla sayısının hangi hayvanların her 5 sn aralığının başlangıcı arasında (sırasıyla 1sec 10sn ve 2saniye 10 sn) aralığı ve gecikme ilk yeni ışınını geçmeye fazla 1 veya 2 sn gerekli ve Bu aralığı (Latency3) içinde üçüncü yeni ışın kesinti ölçüldü. Fare dondurma sırasında aralıklarla yüzdeleri veya zaman r toplam miktarının yüzdesiÜçüncü photobeam hesaplandı kırmak equired. Her bir sistem ölçülen dondurma yüzdeleri, Şekil 6&#39;da gösterilmiştir. Grupları, t-testleri, ardından iki yönlü tekrarlı ölçüm ANOVA (Tablo 1 e bakınız) kullanılarak karşılaştırıldı. ImageFZ (Şekil 6B) kullanılarak ölçülmüştür dondurma yüzdeler photobeam tabanlı bir sistem (Şekiller 6C-E) kullanılarak elde edilen verilere göre insan gözlem (Şekil 6) boyunca işaretlenebilir edilenlere benzemektedir. , Donma oranları arasındaki korelasyonlar ölçülür ise, her bir testte ImageFZ programı kullanılarak ölçülen dondurucu yüzdeler son derece (,, bağlam test, r = 0.970 tetiklenen test, r = 0.934 conditioning, r = 0.947), insan gözlem boyunca işaretlenebilir ile bağıntılandırılmıştır photobeam-tabanlı bilgisayar ölçüm sistemi (1sn 10sn, 2sn 10sn veya Latency3) kullanılarak ve insan gözlemci klima, r = 0.503, 0.593, ve 0.761 (düşüktü; bağlam test, ImageFZ ve insan gözlem (Şekil 7A ve 7B) kullanılarak ölçülen dondurucu yüzdeleri arasındaki korelasyonlar göre r = 0.772, 0.819 ve 0.912). Buna ek olarak, Şekil 7, insan gözlem yoluyla elde edilmiş ve her bir fare ImageFZ kullanılarak donma oranları arasındaki fark en küçük farklılıklar ortaya koymaktadır. Bu sonuçlar, dondurma miktarı ölçülürken ImageFZ kullanılarak ölçülen dondurucu yüzdeler son derece hassas olan ve bu gözlem, insan ImageFZ yoluyla elde edilenlere benzer olduğunu göstermektedir. <img alt="Şekil 1" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50871/50871fig1highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50871/50871fig1.jpg" /> Şekil 1. Bağlamsal için aygıtlar ve korku klima testi cued. Klima ve bağlam testi için (A) Akrilik kare odası, ( <strong&gt; B) beyaz fareler (alt) için siyah plastik bir zemin üzerinde, siyah aguti veya sulandırılmış kahverengi farelerin (üst) ve electrifiable black metal ızgaralar için beyaz plastik bir zemin üzerinde metal ızgaralar, ızgaraları büyütülmüş görüntüleri sağ gösterilir Panel, (C) bir beyaz gürültü / ton jeneratör ve bir şok jeneratör, (D) ses geçirmez bir oda, ve (E) cued testi için düz bir zemin ile bir akrilik üçgen odası. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50871/50871fig1highres.jpg" target="_blank">resmi büyütmek için buraya tıklayın.</a> <img alt="Şekil 2," fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50871/50871fig2highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50871/50871fig2.jpg" /> Şekil 2. Protokolünün şematik. (A) bağlamsal genel bakış ve korku klima testi cued, (B) Klima, (C) context testi, ve (D) testi cued. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50871/50871fig2highres.jpg" target="_blank">resmi büyütmek için buraya tıklayın.</a> <img alt="Şekil 3," fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50871/50871fig3highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50871/50871fig3.jpg" /> Şekil 3,. ImageFZ yazılım programı tarafından görüntü analizi. Ardışık görüntülerin her çifti için, fare, üzerinden hareket alanı (piksel) miktarı ImageFZ hesaplanır. Bu alanda belli bir eşiğin (örneğin 30 piksel) altında olduğunda, davranış dondurma &#39;olması değerlendirilir. Alan miktarı eşit veya eşiği aştığında, davranış &#39;non-dondurma&#39; olarak kabul edilir. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50871/50871fig3highres.jpg" target="_blank">resmi büyütmek için buraya tıklayın.</a> <img alt="Şekil 4," fo:content-width="6in" src="/files/ftp_upload/50871/50871fig4highres.jpg" width="500" /> Şekil 4. Insan gözlem yoluyla elde edilen değerler ile ImageFZ kullanarak farklı kare hızlarında görüntülerinden hesaplanan donma yüzdelerinin karşılaştırılması. Korku klima testler erkek C57BI/6J fareler (n = 5) kullanılarak yapılmıştır. Testler sırasında, iki gözlemci donma davranışı attı. Aynı anda, canlı görüntüler ImageFZ programını kullanarak 4 fps ele geçirildi. 4 fps&#39;de yakalanan dosyalar 1 fps veya 2 fps çekilen görüntülerin karşılık kareleri çıkardıktan sonra Küçülürlerse. &#39;Hızı (kare / sn)&#39; parametre değerleri 1, 2, veya 4 fps için kuruldu ve her 60 sn bin donma yüzdeler ImageFZ çevrimdışı analiz kullanarak görüntü dosyalarının hesaplandı. Her nokta, her 60 sn bin dondurucu bir yüzdesini temsil eder. Insan gözlem ve ImageFZ analizinden elde edilen veriler arasındaki Pearson korelasyon katsayıları hesaplandı.<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50871/50871fig4highres.jpg" target="_blank">Daha büyük resmi görmek için buraya tıklayın.</a> <img alt="Şekil 5," fo:content-width="6in" src="/files/ftp_upload/50871/50871fig5highres.jpg" width="500" /> Şekil 5,. ImageFZ ve insan gözlemleri ile ölçülenlerden kullanarak farklı donma kriter değerleri resimlerden hesaplanan donma yüzdeler korku klima testler erkek C57BL/6J fareleri (n = 5) kullanılarak yapılmıştır. Karşılaştırılmıştır. Testler sırasında, iki gözlemci donma davranışı kaydedilen ve canlı görüntüler ImageFZ programı kullanılarak ele geçirildi. Her 60 sn bin donma yüzdeler, 20, 30, ya da 40 piksel, &#39;Donma kriter (piksel)&#39; parametre değerlerini ayarlayarak, ImageFZ çevrimdışı analiz yoluyla görüntüleri (1 kare / sn) hesaplandı. Her nokta, her 60 sn bin dondurucu bir yüzdesini temsil eder. Pearson korelasyon katsayısıinsan gözlem ve ImageFZ analizinden elde edilen veriler arasındaki efficients her testte hesaplandı. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50871/50871fig5highres.jpg" target="_blank">resmi büyütmek için buraya tıklayın.</a> <img alt="Şekil 6," fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50871/50871fig6highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50871/50871fig6.jpg" /> Şekil 6,. Dondurma yüzdeleri erkek C57BL/6J fareler koşulsuz ve şartlandırılmış grup (n = 5, her bir grup) otomatik sistemleri ve insan gözlem kullanılarak ölçülmüştür. (A) İnsan gözlem, (B) ImageFZ, (C) Monitör sistemi 1 (1sn 10 sn), (D) Monitör sistemi 2 (2sn 10sn) dondurun ve (E) Monitör sistemi 3 (Latency3) dondurun dondurun. Grup karşılaştırmalar t-testleri (takiben iki yönlü tekrarlayan ölçümler ANOVA unconditioned grubu genel durumunu grup, * p &lt;0.05; †, p &lt;0.01). ImageFZ insan gözlem yoluyla attı benzer idi kullanılarak elde edilen veriler. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50871/50871fig6highres.jpg" target="_blank">resmi büyütmek için buraya tıklayın.</a> <img alt="Şekil 7" fo:content-width="4.3in" src="/files/ftp_upload/50871/50871fig7highres.jpg" width="420" /> Şekil 7. Korelasyon ve donma yüzdeleri otomasyon sistemleri ve insan gözlem yoluyla attı arasındaki otomasyon sistemleri ve insan gözlem kullanılarak ölçülen donma oranları,. (AB) Dağılım araziler ve Pearson korelasyon katsayıları arasındaki farkların frekans dağılımı gösterilmektedir. ImageFZ kullanılarak hesaplanan donma yüzdeler, son derece insan gözlem yoluyla elde edilenler ile karşılaştırılmıştır. 10% dif daha az (CF) Geçtiğiveri ImageFZ insan gözlem yoluyla analiz ile karşılaştırıldı kullanılarak analiz edildiğinde Ference otomasyon sistemleri vs insan gözlem elde donma yüzdeleri arasındaki en yüksek idi. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50871/50871fig7highres.jpg" target="_blank">resmi büyütmek için buraya tıklayın.</a> <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0"><tbody><tr><td></td><td> ANOVA&#39;lar </td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td> Durum </td><td> Zaman </td><td> Durum x Zaman </td></tr><tr><td> Day 1 (klima) </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Insan </td><td> F (1,8) = 28.53, p = 0.0007 </td><td> F (7,56) = 20.79, p &lt;0.0001 </td><td> F (7,56) = 16.58, p &lt;0.0001 </td></tr><tr><td> ImageFZ </td><td> F (1,8) = 13.97, p = 0,0057 </td><td> F (7,56) = 21.40, p &lt;0.0001 </td><td> F (7,56) = 11.69, p &lt;0.0001 </td></tr><tr><td> Freeze Monitör (1sec10sec) </td><td> F (1,8) = 5.16, p = 0.0528 </td><td> F (7,56) = 2.39, p = 0.0329 </td><td> F (7,56) = 0.72, p = 0,6572 </td></tr><tr><td> Freeze Monitör (2sec10sec) </td><td> F (1,8) = 4.07, p = 0,0782 </td><td> F (7,56) = 3.44, p = 0.0039 </td><td> F (7,56) = 1.52, p = 0,1803 </td></tr><tr><td> Freeze Monitör (Latency3) </td><td> F (1,8) = 4.44, p = 0,0682 </td><td> F (7,56) = 9.94, p &lt;0.0001 </td><td> F (7,56) = 4.33, p = 0.0007 </td></tr><tr><td> Day 2 (bağlam) </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Insan </td><td> F (1,8) = 42.94, p = 0.0002 </td><td> F (4,32) = 1.91, p = 0,1336 </td><td> F (4,32) = 1.48, p = 0,2302 </td></tr><tr><td> ImageFZ </td><td> F (1,8) = 49.61, p = 0.0001 </td><td> F (4,32) = 2.06, p = 0.1087 </td><td> F (4,32) = 0.83, p = 0,5174 </td></tr><tr><td> Freeze Monitör (1sec10sec) </td><td> F (1,8) = 20.28, p = 0.002 </td><td> F (4,32) = 1.63, p = 0,1918 </td><td> F (4,32) = 0.55, p = 0,6997 </td></tr><tr><td> Freeze Monitör (2sec10sec) </td><td>F (1,8) = 40.20, p = 0.0002 </td><td> F (4,32) = 2.66, p = 0,0504 </td><td> F (4,32) = 1.20, p = 0,3306 </td></tr><tr><td> Freeze Monitör (Latency3) </td><td> F (1,8) = 35.30, p = 0.0003 </td><td> F (4,32) = 2.49, p = 0.0626 </td><td> F (4,32) = 1.09, p = 0,3793 </td></tr></tbody></table> Tablo 1. Istatistiklerinin karşılaştırılması.

Watch this Scientific Journal Video about Contextual and Cued Fear Conditioning Test Using a Video Analyzing System in Mice at JoVE.com

Contextual and Cued Fear Conditioning Test Using a Video Analyzing System in Mice

Bu makalede, farelerde öğrenme korku ve belleği değerlendirmek için bir video analiz sistemi kullanılarak bir bağlamsal ve cued korku klima testi için bir protokol sunuyor.

Farelerde Video Analiz Sistemi kullanma ve bağlamsal cued Korku Klima Testi

The contextual and cued fear conditioning test is one of the behavioral tests that assesses the ability of mice to learn and remember an association ...

contextual-cued-fear-conditioning-test-using-video-analyzing-system

Research

JoVE Journal

Behavior

51.3K Görüntüleme.  Fujita Health University.  Bu makalede, farelerde öğrenme korku ve belleği değerlendirmek için bir video analiz sistemi kullanılarak bir bağlamsal ve cued korku klima testi için bir protokol sunuyor. 

Video: Contextual and Cued Fear Conditioning Test Using a Video Analyzing System in Mice

Construction of Microdrive Arrays for Chronic Neural Recordings in Awake Behaving Mice

State-of-the-art electrophysiological recordings from the brains of freely behaving animals allow researchers to simultaneously examine local field potentials (LFPs) from populations of neurons and action potentials from individual cells, as the animal engages in experimentally relevant tasks. Chronically implanted microdrives allow for brain recordings to last over periods of several weeks. Miniaturized drives and lightweight components allow for these long-term recordings to occur in small mammals, such as mice. By using tetrodes, which consist of tightly braided bundles of four electrodes in which each wire has a diameter of 12.5 &mu;m, it is possible to isolate physiologically active neurons in superficial brain regions such as the cerebral cortex, dorsal hippocampus, and subiculum, as well as deeper regions such as the striatum and the amygdala. Moreover, this technique insures stable, high-fidelity neural recordings as the animal is challenged with a variety of behavioral tasks. This manuscript describes several techniques that have been optimized to record from the mouse brain. First, we show how to fabricate tetrodes, load them into driveable tubes, and gold-plate their tips in order to reduce their impedance from M&Omega; to K&Omega; range. Second, we show how to construct a custom microdrive assembly for carrying and moving the tetrodes vertically, with the use of inexpensive materials. Third, we show the steps for assembling a commercially available microdrive (Neuralynx VersaDrive) that is designed to carry independently movable tetrodes. Finally, we present representative results of local field potentials and single-unit signals obtained in the dorsal subiculum of mice. These techniques can be easily modified to accommodate different types of electrode arrays and recording schemes in the mouse brain.

The design and assembly of microdrives for in vivo electrophysiological recordings of brain signals from the mouse is described. By attaching microelectrode bundles to sturdy driveable carriers, these techniques allow for long-term and stable neural recordings. The lightweight design allows for unrestricted behavioral performance by the animal following drive implantation.

Uyanık davranmak Fare Kronik Sinir Kayıtlar için Microdrive Diziler İnşaatı

State-of-the-art electrophysiological recordings from the brains of freely behaving animals allow researchers to simultaneously examine local field ...

Davranış

Trace Fear Conditioning in Mice

In this experiment we present a technique to measure learning and memory. In the trace fear conditioning protocol presented here there are five pairings between a neutral stimulus and an unconditioned stimulus. There is a 20 sec trace period that separates each conditioning trial. On the following day freezing is measured during presentation of the conditioned stimulus (CS) and trace period. On the third day there is an 8 min test to measure contextual memory. The representative results are from mice that were presented with the aversive unconditioned stimulus (shock) compared to mice that received the tone presentations without the unconditioned stimulus. Trace fear conditioning has been successfully used to detect subtle learning and memory deficits and enhancements in mice that are not found with other fear conditioning methods. This type of fear conditioning is believed to be dependent upon connections between the medial prefrontal cortex and the hippocampus. One current controversy is whether this method is believed to be amygdala-independent. Therefore, other fear conditioning testing is needed to examine amygdala-dependent learning and memory effects, such as through the delay fear conditioning.

In the following experiment we describe a protocol for trace fear conditioning in mice. This type of associative memory includes a trace period that separates the neutral stimulus and the unconditioned stimulus.

Farelerde Korku Yastıkları Trace

In this experiment we present a technique to measure learning and memory. In the trace fear conditioning protocol presented here there are five pairings ...

Using the Threat Probability Task to Assess Anxiety and Fear During Uncertain and Certain Threat

Fear of certain threat and anxiety about uncertain threat are distinct emotions with unique behavioral, cognitive-attentional, and neuroanatomical components. Both anxiety and fear can be studied in the laboratory by measuring the potentiation of the startle reflex. The startle reflex is a defensive reflex that is potentiated when an organism is threatened and the need for defense is high. The startle reflex is assessed via electromyography (EMG) in the orbicularis oculi muscle elicited by brief, intense, bursts of acoustic white noise (i.e., &#8220;startle probes&#8221;). Startle potentiation is calculated as the increase in startle response magnitude during presentation of sets of visual threat cues that signal delivery of mild electric shock relative to sets of matched cues that signal the absence of shock (no-threat cues). In the Threat Probability Task, fear is measured via startle potentiation to high probability (100% cue-contingent shock; certain) threat cues whereas anxiety is measured via startle potentiation to low probability (20% cue-contingent shock; uncertain) threat cues. Measurement of startle potentiation during the Threat Probability Task provides an objective and easily implemented alternative to assessment of negative affect via self-report or other methods (e.g., neuroimaging) that may be inappropriate or impractical for some researchers. Startle potentiation has been studied rigorously in both animals (e.g., rodents, non-human primates) and humans which facilitates animal-to-human translational research. Startle potentiation during certain and uncertain threat provides an objective measure of negative affective and distinct emotional states (fear, anxiety) to use in research on psychopathology, substance use/abuse and broadly in affective science. As such, it has been used extensively by clinical scientists interested in psychopathology etiology and by affective scientists interested in individual differences in emotion.

Potentiation of the startle reflex is measured via electromyography of the orbicularis oculi muscle during low (uncertain) and high (certain) probability electric shock threat in the Threat Probability Task. This provides an objective measure of distinct negative emotional states (fear/anxiety) for research on psychopathology, substance use/abuse, and broad affective science.

Tehdit Olasılık Görevi kullanma Belirsiz ve belirli Tehdit sırasında Anksiyete ve Korku değerlendirin

Fear of certain threat and anxiety about uncertain threat are distinct emotions with unique behavioral, cognitive-attentional, and neuroanatomical ...

Quantifying Social Motivation in Mice Using Operant Conditioning

In this protocol, social motivation is measured in mice through a pair of operant conditioning paradigms. To conduct the experiments, two-chambered shuttle boxes were equipped with two operant levers (left and right) and a food receptacle in one chamber, which was then divided from the second chamber by an automated guillotine door covered by a wire grid. Different stimulus mice, rotated across testing days, served as a social stimulus behind the wire grid, and were only visible following the opening of the guillotine door. Test mice were trained to lever press in order to open the door and gain access to the stimulus partner for 15 sec. The number of lever presses required to obtain the social reward progressively increased on a fixed schedule of 3. Testing sessions ended after test mice stopped lever pressing for 5 consecutive minutes. The last reinforced ratio or breakpoint can be used as a quantitative measure of social motivation. For the second paradigm, test mice were trained to discriminate between left and right lever presses in order to obtain either a food reward or the social reward. Mice were rewarded for every 3 presses of each respective lever. The number of food and social rewards can be compared as a measurement of the value placed upon each reward. The ratio of each reward type can also be compared between mouse strains and the change in this ratio can be monitored within testing sessions to measure satiation with a given reward type. Both of these operant conditioning paradigms are highly useful for the quantification of social motivation in mouse models of autism and other disorders of social behavior.

This article describes a new protocol for the quantitative measurement of social motivation in mice using operant conditioning for a social reward. The protocol is useful for the measurement of social motivation in mouse models of autism and other disorders of social behavior.

Edimsel Conditioning kullanma Farelerde Sosyal Motivasyon miktarının

In this protocol, social motivation is measured in mice through a pair of operant conditioning paradigms. To conduct the experiments, two-chambered ...

Determining Ultrasonic Vocalization Preferences in Mice using a Two-choice Playback Test

Mice emit ultrasonic vocalizations (USVs) during a variety of conditions, such as pup isolation and adult social interactions. These USVs differ with age, sex, condition, and genetic background of the emitting animal. Although many studies have characterized these differences, whether receiver mice can discriminate among objectively different USVs and show preferences for particular sound traits remains to be elucidated. To determine whether mice can discriminate between different characteristics of USVs, a playback experiment was developed recently, in which preference responses of mice to two different USVs could be evaluated in the form of a place preference.
First, USVs from mice were recorded. Then, the recorded USVs were edited, trimmed accordingly, and exported as stereophonic sound files. Next, the USV amplitudes generated by the two ultrasound emitters used in the experiment were adjusted to the same sound pressure level. Nanocrystalline silicon thermo-acoustic emitters were used to play the USVs back. Finally, to investigate the preference of subject mice to selected USVs, pairs of two differing USV signals were played back simultaneously in a two-choice test box. By repeatedly entering a defined zone near an ultrasound emitter and searching the wire mesh in front of the emitter, the mouse reveals its preference for one sound over another. This model allows comparing the attractiveness of the various features of mouse USVs, in various contexts.

Ultrasonic vocalizations (USVs) in mice differ depending on age, sex, condition, and genetic background. Using two ultrasound emitters broadcasting simultaneously in different locations, this two-choice test can evaluate murine recognition and preference responses to different characteristics of USVs.

Bir iki seçim Oynatma Testi kullanarak Fare Ultrasonik Seslendirme Tercihleri ​​belirlenmesi

Mice emit ultrasonic vocalizations (USVs) during a variety of conditions, such as pup isolation and adult social interactions. These USVs differ with age, ...

Fear Incubation Using an Extended Fear-Conditioning Protocol for Rats

Emotional memory has been primarily studied with fear-conditioning paradigms. Fear conditioning is a form of learning through which individuals learn the relationships between aversive events and otherwise neutral stimuli. The most-widely utilized procedures for studying emotional memories entail fear conditioning in rats. In these tasks, the unconditioned stimulus (US) is a footshock presented once or several times across single or several sessions, and the conditioned response (CR) is freezing. In a version of these procedures, called cued fear conditioning, a tone (conditioned stimulus, CS) is paired with footshocks (US) during the training phase. During the first test, animals are exposed to the same context in which training took place, and freezing responses are tested in the absence of footshocks and tones (i.e., a context test). During the second test, freezing is measured when the context is changed (e.g., by manipulating the smell and walls of the experimental chamber) and the tone is presented in the absence of footshocks (i.e., a cue test). Most cued fear conditioning procedures entail few tone-shock pairings (e.g., 1-3 trials in a single session). There is a growing interest in less common versions involving an extensive number of pairings (i.e., overtraining) related to the long-lasting effect called fear incubation (i.e., fear responses increase over time without further exposure to aversive events or conditioned stimuli). Extended fear-conditioning tasks have been key to the understanding of fear incubation&#8217;s behavioral and neurobiological aspects, including its relationship with other psychological phenomena (e.g., post-traumatic stress disorder). Here, we describe an extended fear-conditioning protocol that produces overtraining and fear incubation in rats. This protocol entails a single training session with 25 tone-shock pairings (i.e., overtraining) and a comparison of conditioned freezing responses during context and cue tests 48 h (short-term) and 6 weeks (long-term) after training.

We describe an extended fear-conditioning protocol that produces overtraining and fear incubation in rats. This protocol entails a single training session with 25 tone-shock pairings (i.e., overtraining) and a comparison of conditioned freezing responses during context and cue tests 48 h (short-term) and 6 weeks (long-term) after training.

Korku Kuluçka Fareler için Genişletilmiş Fear-Klima Protokolü kullanma

Emotional memory has been primarily studied with fear-conditioning paradigms. Fear conditioning is a form of learning through which individuals learn the ...

A Novel Pavlovian Fear Conditioning Paradigm to Study Freezing and Flight Behavior

Fear- and anxiety-related behaviors significantly contribute to an organism&#8217;s survival. However, exaggerated defensive responses to perceived threat are characteristic of various anxiety disorders, which are the most prevalent form of mental illness in the United States. Discovering the neurobiological mechanisms responsible for defensive behaviors will aid in the development of novel therapeutic interventions. Pavlovian fear conditioning is a widely used laboratory paradigm to study fear-related learning and memory. A major limitation of traditional Pavlovian fear conditioning paradigms is that freezing is the only defensive behavior monitored. We recently developed a modified Pavlovian fear conditioning paradigm that allows us to study both conditioned freezing and flight (also known as escape) behavior within individual subjects. This model employs higher intensity footshocks and a greater number of pairings between the conditioned stimulus and unconditioned stimulus. Additionally, this conditioned flight paradigm utilizes serial presentation of pure tone and white noise auditory stimuli as the conditioned stimulus. Following conditioning in this paradigm, mice exhibit freezing behavior in response to the tone stimulus, and flight responses during the white noise. This conditioning model can be applied to the study of rapid and flexible transitions between behavioral responses necessary for survival.

Defensive behavioral responses are contingent upon threat intensity, proximity, and context of exposure. Based on these factors, we developed a classical conditioning paradigm that elicits clear transitions between conditioned freezing and flight behavior within individual subjects. This model is crucial for the understanding the pathologies involved in anxiety, panic, and post-traumatic stress disorders.

Donma ve Uçuş Davranışını İncelemek İçin Yeni Bir Pavlovian Korku Şartlandırma Paradigması

Fear- and anxiety-related behaviors significantly contribute to an organism&#8217;s survival. However, exaggerated defensive responses to perceived threat ...

Değiştirilmiş Korku Koşullandırması ile Farelerde Aktif Savunma Davranışlarının İncelenmesi

Modified Fear Conditioning for Inducing Flight Behaviors in Mice

The appropriate manifestation of defensive behavior in a threatening situation is critical for survival. The prevailing theory suggests that an active defensive behavior, such as jumping or rapid darting, is expressed under high threat imminence or actual threat, whereas passive defensive behavior, such as freezing, is expressed when the threat is predicted, but the threat imminence is relatively low. In classical fear conditioning, subjects typically exhibit freezing as a conditioned defensive response, with little expression of active defensive behavior in most cases. Here, we introduce a modified fear conditioning procedure for mice to observe the transition from freezing to flight and vice versa, involving five repetitive pairings of conditioned stimuli (CS; continuous tone, 8 kHz, 95 dB SPL (sound pressure levels)) and unconditioned stimuli (US; foot shock, 0.9 mA, 1.0 s) over two days. This modified fear conditioning procedure requires a relatively large number of conditioning sessions and conditioning days but does not necessitate a high-intensity foot shock for modest expression of flight behavior. Using the same context for conditioning and salient CS presentations is essential to elicit flight behaviors. This modified fear conditioning procedure is a reliable method for observing active defensive behaviors in mice, providing an opportunity to elucidate the fine mechanisms and characteristics of such behaviors in a fearful context.

Yazar Spotlight: Korku Öğrenme ve Yok Olmada Savunma Davranışlarının Sinirsel İlişkilerini Keşfetmek

To study flight behaviors in a fearful context, we introduce a modified fear conditioning protocol. This protocol ensures that mice consistently exhibit flight behaviors during cue presentation in the fear conditioning.

Farelerde Uçuş Davranışlarını İndüklemek için Değiştirilmiş Korku Koşullandırması

The appropriate manifestation of defensive behavior in a threatening situation is critical for survival. The prevailing theory suggests that an active ...

Farelerde Video Analiz Sistemi kullanma ve bağlamsal cued Korku Klima Testi

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler

Uyanık davranmak Fare Kronik Sinir Kayıtlar için Microdrive Diziler İnşaatı

Farelerde Korku Yastıkları Trace

Tehdit Olasılık Görevi kullanma Belirsiz ve belirli Tehdit sırasında Anksiyete ve Korku değerlendirin

Edimsel Conditioning kullanma Farelerde Sosyal Motivasyon miktarının

Bir iki seçim Oynatma Testi kullanarak Fare Ultrasonik Seslendirme Tercihleri belirlenmesi

Korku Kuluçka Fareler için Genişletilmiş Fear-Klima Protokolü kullanma

Donma ve Uçuş Davranışını İncelemek İçin Yeni Bir Pavlovian Korku Şartlandırma Paradigması

Farelerde Uçuş Davranışlarını İndüklemek için Değiştirilmiş Korku Koşullandırması

Farelerde Uçuş Davranışlarını İndüklemek için Değiştirilmiş Korku Koşullandırması

Farelerde Uçuş Davranışlarını İndüklemek için Değiştirilmiş Korku Koşullandırması

Farelerde Video Analiz Sistemi kullanma ve bağlamsal cued Korku Klima Testi

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler

Uyanık davranmak Fare Kronik Sinir Kayıtlar için Microdrive Diziler İnşaatı

Farelerde Korku Yastıkları Trace

Tehdit Olasılık Görevi kullanma Belirsiz ve belirli Tehdit sırasında Anksiyete ve Korku değerlendirin

Edimsel Conditioning kullanma Farelerde Sosyal Motivasyon miktarının

Bir iki seçim Oynatma Testi kullanarak Fare Ultrasonik Seslendirme Tercihleri ​​belirlenmesi

Korku Kuluçka Fareler için Genişletilmiş Fear-Klima Protokolü kullanma

Donma ve Uçuş Davranışını İncelemek İçin Yeni Bir Pavlovian Korku Şartlandırma Paradigması

Farelerde Uçuş Davranışlarını İndüklemek için Değiştirilmiş Korku Koşullandırması

Farelerde Uçuş Davranışlarını İndüklemek için Değiştirilmiş Korku Koşullandırması

Farelerde Uçuş Davranışlarını İndüklemek için Değiştirilmiş Korku Koşullandırması

Bir iki seçim Oynatma Testi kullanarak Fare Ultrasonik Seslendirme Tercihleri belirlenmesi