Herhangi bir fon ilan etmek.

Açıklandığı gibi iskelet kası prosedür Appalachian State Üniversitesi Kurumsal Değerlendirme Kurulu kuralları takip. NOT: ekibi operatör (Ph.D. veya biyopsi tekniği eğitimli MD), ve en az bir oluşur, ancak ideal, üç veya daha fazla teknisyenleri. Operatör iletken ve iskelet kas biyopsi tüm yönleriyle denetlemekten sorumludur. Bir teknisyen (teknisyeni # 1) kas ekstraksiyon tüm yönleri ile operatöre yardımcı için hemen sorumludur. Bu &quot;steril olmayan eller&quot; olarak steril bir şırınga ile emme uygulanmasını içerir. İkinci bir teknisyene (teknisyeni # 2) deneğin korkusunu en aza indirmek için prosedür sırasında konu ve masajlar öznenin karşısında bacak ile görüşmesinde yürütmektedir. Üçüncü teknisyeni (3 teknisyeni #) kullanımı ve iskelet kası örnek işlemekten sorumludur. Mansap analitik önlemler kaç addit dikteuğratarak teknisyenleri iskelet kası örneği hazırlanması / gelişmesi için gereklidir. 1. Konu Hazırlık <ol><li> , Toplayın hazırlamak ve kas biyopsi (Tablo 1) için belirtilen malzemeleri düzenlemek. Dekontamine ve Bergström iğnesini (dış ve iç kanül trokar) ve standart uygulamalara göre 16 pistonu sterilize edin. </li><li> Konu ile onam formunu inceleyin. Appalachian State Üniversitesi&#39;nde kullanılan formu Katılacak Rıza iskelet kası biyopsisi kısmı çevrimiçi ek 1&#39;de verilmiştir. <ol><li> Prosedürün olası riskler, cilt hazırlığı, anestezi uygulaması, tipik duyumlara odaklanarak kas biyopsi prosedürünün genel yönleri hakkında konuya konuşun. Dikkatli formu katılın ve çalışma tasarımı ve prosedürleri anlaşıldığını onaylamak için onu imzalamak için Rıza okumak için konuyu söyleyin. </li></ol></li><li> S doğrulayınubject alerjik olmayan için &quot;___ Caine&quot; tipi ilaçlar (örneğin lidokain). </li><li> Maruz uyluk ile bir yastıklı masaya sırtüstü yatmak konuyu söyleyin. Kişinin bacak altında plastik altlık ile iki atılabilir emici levhaları tarafından yerleştirin. Böylece kısaltılmış pozisyonda Vastus lateralis yerleştirerek, topuk altında küçük bir havlu rulo gibi diz tamamen genişletilmiş olduğundan (yüksek ~ 1 cm) ile rahat bir şekilde bacak yerleştirin. </li><li> Operatör biyopsi Alanı görselleştirilebilir ve böylece kısa süreli maruz uyluk kas büzülmesi için konusu talimat yazıldı. Not: Vastus sadece fasya lata (illiotibial bant), patella üst ve büyük trokanter 7 arasındaki mesafenin yaklaşık üçte birine anterior olan biyopsi siteyi lateralis. </li><li> Sadece aşağıdaki operatör işareti (~ 0.5 cm) ince bir nokta kalıcı bir kalem ile kesi site var. </li><li> Operatör Pinc tarafından yaklaşık Deri kıvrım kalınlığı belirlemek mıskinfold hing. </li><li> Operatör var ve teknisyenler sabun ve ılık su ile ellerini yıkamak ve tek kullanımlık eldivenler yok. </li><li> Operatör (Clippers yoluyla) biyopsi site çevresinde ~ bir bölgeden 15 cm x 15 cm saç kaldırmak var. Biyopsi sitesinden saç kırpma işlemi sırasında kesi girmesini ve kapanış sırasında saçları önler ve epilasyon bant kapanışları ve cilt (3.4 bakınız) arasında daha iyi temas sağlar: Not. </li><li> Operatör çubukla alan sterilize sahip topikal bir antiseptik ile önceden ıslatılır, (örneğin iyot / kabuklu deniz ürünleri alerjisi konular için povidon-iyot veya klorheksidin glukonat gibi). Merkezinde başlar ve kesik alanının dış kenarına doğru eş merkezli daireler halinde çalışır. En azından, yeni bir ön-batırılmış bez ile iki kez daha her zaman tekrarlayın. </li></ol> 2. Biyopsi Prosedürü <ol><li> Operatör, atılabilir eldivenler kaldırmak sabun ve ılık su ile ellerinizi yıkayın ve steril cerrahi gl don varaseptik teknikle Oves. </li><li> Teknisyen # 1 sunacağım operatöre steril fenestre örtüye sahip. Aseptik teknik kullanılarak, operatör var steril bir alan sağlamak için biyopsi sitesi üzerinden örtüyü yerleştirin. </li><li> Teknisyen 1. mevcut olması, operatör, aseptik teknikle, korurken, bir 21 G iğne ile donatılmış 5 mL&#39;lik bir şırınga. Alkollü bir bezle lidokain şişenin üst temizleyin. <ol><li> Operatör hemen lidokain 5 ml çekilme var. Şırınga, 21 G iğne çıkarın ve bir kavuz kabın içine iğne atın. </li><li> Aseptik teknik korurken teknisyen # 1 sunacağım 1-½ inç 25 G iğne ile operatör var. Operatör yerde şırınga üzerine 1-½ inç iğne ve şırınga hava kabarcıkları tahliye. </li></ol></li><li> Kesi sitede teknisyen 1. sprey etil klorür (~ cilt üzerinde silinmez mürekkep işaretinin üzerinde 0.5 cm) sahip cilt görünene kadar &quot;blanch.&quot; <ol><li> HaOperatör çapında bir &quot;kabarcık&quot; 2-4 mm üretmek için lidokain 100 ~ ile ul sızmak sonra, dermis içine deriye yaklaşık yatay iğneyi iğne aspire, ve A.Ş.. <ol><li> Iğne bir kan damarı yerleştirilmiş olmadığını onaylamak için (biraz şırınga pistonu geri çekme) operatörü aspirat iğne var. Kan şırınga görünüyorsa, iğneyi çekilme kavuz konteyner içinde atmak ve 2.3 tekrar başlar. </li><li> , Operatör unun, deri altı doku içine iğne sahip iğne havalandırın, ve daha sonra bir kabarcık oluşturmak üzere lidokain ~ 1 ml doku infiltrasyonu. Kabarcık yatışmış sonra, fasya yüzeyel durdurma, dikey kesi yeri içine lidokain yüklü şırınga 1-½ inç iğne takın. Not: konu (bir arı sokması benzer) lidokain ilk enjeksiyondan sonra hafif bir anlık batma hissi hissedebilirsiniz. </li></ol></li><li> Operat emin olunBu 17-19 myotoxic olduğu veya lidocoine ile kas etkilemez. </li><li> Operatör aspirat iğne var ve kalçasından iğne geri çekilirken daha sonra yavaş yavaş lidokain kalan 4 ml enjekte edilir. Enjeksiyon sitesi üzerinden steril gazlı bez yerleştirin ve lokal anestezik etkisi sürerken konu dinlenmek için izin verir. </li></ol></li><li> Aseptik teknik korurken 2-3 dakika sonra, operatör neşteri teknisyen 1. hediyem var. <ol><li> Hafifçe alanı anestezi doğrulamak için neşter ucu ile biyopsi siteyi soruşturma operatör var. Gerekirse, kesi yeri içine lidokain başka bir 3-4 ml enjekte 2.4.1.2 bkz. </li></ol></li><li> Operatör femur deri ve derialtı dokularda (~ mürekkep işaretinin üzerinde 2-3 mm) paralel aracılığıyla düz 1 cm kesi yapmak zorunda. <ol><li> Operatör kas içine fasya yoluyla bir kesi yapmak için neşter derin yerleştirin var. Her yönde bir kere yapmanız<html> . Not: konu kas içine neşter bıçak keser eğer derin kesimli bir sancı ya da baskı hissedebilirsiniz. </li><li> Teknisyen 2. sahip konuşma konuyu meşgul ve ters bacak masaj. </li></ol></li><li> Operatör yerde kesi ve biyopsi sitesi üzerinden steril gazlı bez liberal bir miktar var ve kanamayı azaltmak için kesi doğrudan basınç uygulayın. <ol><li> Teknisyen 1. atılabilir 60 ml şırınga ve 30 cm uzatma boru (Şekil 1) 3-yollu metal stopkok bağlamak var. </li><li> Teknisyen 1. uzatma tüpünün serbest ucuna şevli hortum konnektörünün bir ucunu sıkıca arasında ~ 15-18 mm olan bir 200 ul pipet büyük ucuna şevli hortum konnektörünün diğer ucunu yazıldı ucu kesilmiş. </li></ol></li></ol>jpg &quot;width =&quot; 500 &quot;/&gt; Şekil 1. Bergström iğne. (A) Bergström iğne (5 mm), (a) bir dış kanül ve (b) iç trokar oluşan, ilgili bileşenleri (c) piston, (d) 15-18 mm kesim ~ 200 ul bir pipet içermektedir , (e) konik plastik konektör, (f) 3-yollu metal musluk, (g) 30 cm uzatma tüpü, ve (h) tek 60 ml şırınga. (B) Bergström iğne (5 mm) ve ilgili bileşenleri monte. ( C) geri Bergström iğne (5 mm) iç trokar yaklaşık 1 cm dış kanülün penceresi açılır. <ol start="9"><li> Kanama yatışmış sonra, teknisyen 1. sterilize otoklav keseyi açmak ve aseptik teknik korurken operatöre 5 mm biyopsi iğnesi ve iç trokarı (Şekil 1) sunmak var. <ol><li> Operatör iğneyi (dış kanül ve iç trokarı) monte var, uyum ve kayma hareketini kontrol edin. </li> &lt;/ Ol&gt; </li><li> Operatör var sıkıca dönmesini iç trokarı önlemek için iki elinizle iğne düzeneğini (dış kanül ve iç trokar) tutun. Teknisyen 1. sıkıca hafif aşağıya doğru bir döndürme hareketiyle biyopsi iğnesi iç trokar kısmının üstünde içine kesilmiş pipet yerleştirin var. Operatörünüze veya biyopsi iğne, sadece pipet değmeyecek teknisyen 1. olun. </li><li> Operatör kesiden dokuya biyopsi iğne tanıtmak var. Biyopsi iğne ucu ile fasya olarak kesi (kazanılmış bir &quot;hissediyorum&quot;) bulun. İğne, kas içine ilerleyen bir zemine doğru iğne aşağı hemen ardından pano ve açı geçen iğneyi. Not: Konular fasya yoluyla kesi biyopsi iğne ucu ile bulunur ve iğne kas içine ilerletilir gibi bazı hafif rahatsızlık (örneğin, &quot;derin basınç,&quot; ya da hafif kramp hissi) karşılaşabilirsiniz. <ol> &lt;li&gt; &quot;rahat&quot; Kalmak için teknisyen 2. talimat konuyu var ve operatör kas içine iğne ilerleyen iken kendi uyluk kaslarını değil. </li></ol></li><li> Biyopsi iğnesi konuma getirildikten sonra, tek 60 ml şırınga açmak için kullanıcı teknisyen sinyal 1. sahiptir. <ol><li> Teknisyen 1. hızla biyopsi iğnesi içinde emme oluşturmak için 40-50 cc işaretine açık tek 60 ml şırınga çekin var. </li><li> Operatör kas içinde dış trokar konumunu korurken, dış kanül penceresini açmak için dışarı yaklaşık 1 cm iç trokarı çekin var. Operatör hızla (klip) kesilmiş ve kas örnek toplamak için iç trokarı kapatın var. Emme serbest bırakmak için operatör sinyal teknisyen # 1 var. </li><li> Teknisyen 1. emme serbest bırakmak için odasına stopcock açmak mı. </li><li> Operatör var biyopsi iğnesi 90 ° döndürmek ve işlemi tekrarlayın. Gerekirse, operatör repea sahip(4 klip toplam) 3x rotasyon prosedürü t. </li></ol></li><li> Fasya veya cilt yakalamak için dikkatli olmak, uyluk biyopsi iğne çıkarırken operatör steril gazlı bez ile kesi yeri doğrudan karşı baskı uygulamak var. Önemli bir direnç hissedilirse iç trokarın bir kıvırma hareketi uygularken, yeniden kesti. </li><li> Uyluktan biyopsi iğnesinin çıkarılması üzerine görsel doku yeterli miktarda toplanmış, tahmin etmek için dış kanülün lümen incelemek için, operatör arka 1 cm iç trokarı çekmelidir. <ol><li> Operatör elden # 1 tekniklere biyopsi iğne var. Aseptik teknik O teknisyen 1. sağlamak korumak için sadece iğne değil, operatör dokunur. Teknisyen # 1 elden 3. tekniklere biyopsi iğne var. </li></ol></li><li> Teknisyen # 3 sökün biyopsi iğne doku var. <ol><li> Teknisyen 3. kullanacağım pistonu (Şekil 1) ve ince uçlu forseps bir çift vartüm kas dokusu, iç ve dış kanül trokar kaldırılır emin olmak için. </li><li> Teknisyen 3. hızlı kas dokusunun yeterli miktarda toplanmış onaylamak ve bir buz-soğuk diseksiyon blokta örnekleri yer için örnek tartılır yazıldı. </li></ol></li><li> Teknisyen 3. dikkatle kas örneklerinde görünür bağ dokusu ve yağ teşrih var. Teknisyen 3. alt analizlere göre depolama için kas numuneleri hazırlamak var. Örneğin, hemen kriyotüpe içinde örnekleri yer ve sıvı azot içinde dondurma ek, montaj ve RNaz inhibitörü, vb kriyotüpe histoloji, ya da bir yer için dondurmak </li><li> Gerekirse aseptik teknik korurken, ikinci sterilize biyopsi iğnesi ile işlemi tekrarlayın. </li></ol> 3. Kapanış <ol><li> Operatör steril gazlı bez ve 10-15 dakika süreyle bir buz paketi ile biyopsi siteye doğrudan basınç uygulayın var. </li><li> Hemostaz sağlandıktan sonra, operatör kullanımı alkol pr varep pedler kesi etrafındaki alandan kurutulmuş kan kaldırmak için. </li><li> Teknisyen # 1 sunacağım operatöre topikal cerrahi yapıştırıcı ve uygulayıcının bir tüp var. Operatör aplikatör ucu veya borunun üst değmeden cerrahi yapışkan ve aplikatör tüpü monte yazıldı. </li><li> Öte yandan ile kuru kesiğin üst üzerinde cerrahi yapışkan tek bir tabaka uygulanırken, operatörün bir eliyle kesik kapatıldı çekmelidir. Yapıştırıcı tedavileri (~ 90 sn) sonra, kesi bant closuresperpendicular geçerlidir. Alternatif olarak, iki steril 4-0 sütür ile kesiğin kapatılması. </li><li> Operatör kesi yeri 3-4 2 &quot;x 2&quot; non-steril gazlı bez koyarak doğrudan basınç uygulamak ve öz-yapışan yapışkanlı şal ile güvenli var. </li><li> Operatör sözlü konuyu ve uygun yara bakımı, normal ve anormal tepkiler üzerine yazılı talimatlar ve takip eden 1 ila 4 gün boyunca etkinlik ilkelerine uygun (çevrimiçi Herhangi yüzeylerin bakın sağlamasıpplement 2). </li></ol>

<ol>
	<li>Duchene, G. B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recherches+sur+la+paralysie+musculaire+pseudohypertrophique+ou+paralysie+myo-sclerosique.">Recherches sur la paralysie musculaire pseudohypertrophique ou paralysie myo-sclerosique.</a> Arch Gen Med. 11 (30), (1868).</li><li>Bergstrom, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Muscle+electrolytes+in+man.+Determined+by+neutron+activation+analysis+on+needle+biopsy+specimens.">Muscle electrolytes in man. Determined by neutron activation analysis on needle biopsy specimens.</a> Scand J Clin Lab Invest (England). 14, (1962).</li><li>Bergstrom, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Percutaneous+needle+biopsy+of+skeletal+muscle+in+physiological+and+clinical+research).">Percutaneous needle biopsy of skeletal muscle in physiological and clinical research).</a> Scand J Clin Lab Invest. 35, 609-616 (1975).</li><li>Bergstrom, J., Hultman, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+study+of+the+glycogen+metabolism+during+exercise+in+man.">A study of the glycogen metabolism during exercise in man.</a> Scand J Clin Lab Invest. 19, 218-228 (1967).</li><li>Evans, W. J., Phinney, S. D., Young, V. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Suction+applied+to+a+muscle+biopsy+maximizes+sample+size.">Suction applied to a muscle biopsy maximizes sample size.</a> Med Sci Sports Exerc. 14, 101-102 (1982).</li><li>Hennessey, J. V., Chromiak, J. A., Della Ventura, S., Guertin, J., MacLean, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increase+in+percutaneous+muscle+biopsy+yield+with+a+suction-enhancement+technique.">Increase in percutaneous muscle biopsy yield with a suction-enhancement technique.</a> J Appl Phys. 82, 1739-1742 (1997).</li><li>Tarnopolsky, M. A., Pearce, E., Smith, K., Lach, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Suction-modified+Bergstrom+muscle+biopsy+technique:+experience+with+13,500+procedures.">Suction-modified Bergstrom muscle biopsy technique: experience with 13,500 procedures.</a> Muscl., &amp; Nerve. 43, 717-725 (2011).</li><li>Nieman, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Carbohydrate+ingestion+influences+skeletal+muscle+cytokine+mRNA+and+plasma+cytokine+levels+after+a+3-h+run.">Carbohydrate ingestion influences skeletal muscle cytokine mRNA and plasma cytokine levels after a 3-h run.</a> J Appl Physiol. 94, 1917-1925 (2003).</li><li>Nieman, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+carbohydrate+ingestion+on+immune+changes+after+2+h+of+intensive+resistance+training.">Influence of carbohydrate ingestion on immune changes after 2 h of intensive resistance training.</a> J Appl Physiol. 96, 1292-1298 (2004).</li><li>Utter, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Carbohydrate+supplementation+and+perceived+exertion+during+prolonged+running.">Carbohydrate supplementation and perceived exertion during prolonged running.</a> Med Sci Sports Exerc. 36, 1036-1041 (2004).</li><li>Nieman, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Muscle+cytokine+mRNA+changes+after+2.5+h+of+cycling:+influence+of+carbohydrate.">Muscle cytokine mRNA changes after 2.5 h of cycling: influence of carbohydrate.</a> Med Sci Sports Exerc. 37, 1283-1290 (2005).</li><li>Nieman, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+quercetin+and+EGCG+on+mitochondrial+biogenesis+and+immunity.">Effects of quercetin and EGCG on mitochondrial biogenesis and immunity.</a> Med Sci Sports Exerc. 41, 1467-1475 (2009).</li><li>Nieman, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quercetin's+Influence+on+Exercise+Performance+and+Muscle+Mitochondrial+Biogenesis.">Quercetin's Influence on Exercise Performance and Muscle Mitochondrial Biogenesis.</a> Med Sci Sports Exerc. 42, 338-345 (2010).</li><li>Dumke, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quercetin's+effect+on+cycling+efficiency+and+substrate+utilization.">Quercetin's effect on cycling efficiency and substrate utilization.</a> Appl Physiol Nut Metab. 34, 993-1000 (2009).</li><li>Nieman, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quercetin's+influence+on+exercise-induced+changes+in+plasma+cytokines+and+muscle+and+leukocyte+cytokine+mRNA.">Quercetin's influence on exercise-induced changes in plasma cytokines and muscle and leukocyte cytokine mRNA.</a> J Appl Physiol. 103, 1728-1735 (2007).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guideline+for+Disinfection+and+Sterilization+in+Healthcare+Facilities.">Guideline for Disinfection and Sterilization in Healthcare Facilities.</a> http://www.cdc.gov/hicpac/Disinfection_Sterilization/toc.html. , (2008).</li><li>Faria, F. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+onset+and+duration+of+mobilization+affect+the+regeneration+in+the+rat+muscle.">The onset and duration of mobilization affect the regeneration in the rat muscle.</a> Histol Histopath. 23, 565-571 (2008).</li><li>Carlson, B. M., Shepard, B., Komorowski, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+histological+study+of+local+anesthetic-induced+muscle+degeneration+and+regeneration+in+the+monkey.">A histological study of local anesthetic-induced muscle degeneration and regeneration in the monkey.</a> J Ortho Res. 8, 485-494 (1990).</li><li>Yagiela, J. A., Benoit, P. W., Buoncristiani, R. D., Peters, M. P., Fort, N. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+myotoxic+effects+of+lidocaine+with+epinephrine+in+rats+and+humans.">Comparison of myotoxic effects of lidocaine with epinephrine in rats and humans.</a> Anesth Analg. 60, 471-480 (1981).</li><li>Coyle, E. F., Coggan, A. R., Hemmert, M. K., Ivy, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Muscle+glycogen+utilization+during+prolonged+strenuous+exercise+when+fed+carbohydrate.">Muscle glycogen utilization during prolonged strenuous exercise when fed carbohydrate.</a> J Appl Physiol. 61, 165-172 (1986).</li><li>Gibala, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brief+intense+interval+exercise+activates+AMPK+and+p38+MAPK+signaling+and+increases+the+expression+of+PGC-1alpha+in+human+skeletal+muscle.">Brief intense interval exercise activates AMPK and p38 MAPK signaling and increases the expression of PGC-1alpha in human skeletal muscle.</a> J Appl Physiol. 106, 929-934 (1985).</li><li>Phillips, S. M., Tipton, K. D., Ferrando, A. A., Wolfe, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Resistance+training+reduces+the+acute+exercise-induced+increase+in+muscle+protein+turnover.">Resistance training reduces the acute exercise-induced increase in muscle protein turnover.</a> Am J Physiol. 276, 118-124 (1999).</li><li>Davis, J. M., Murphy, E. A., Carmichael, M. D., Davis, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quercetin+increases+brain+and+muscle+mitochondrial+biogenesis+and+exercise+tolerance.">Quercetin increases brain and muscle mitochondrial biogenesis and exercise tolerance.</a> Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 296, 1071-1077 (2009).</li><li>Vissing, K., Andersen, J. L., Schjerling, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Are+exercise-induced+genes+induced+by+exercise.">Are exercise-induced genes induced by exercise.</a> FASEB J. 19, 94-96 (2005).</li><li>Lundby, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+expression+in+human+skeletal+muscle:+alternative+normalization+method+and+effect+of+repeated+biopsies.">Gene expression in human skeletal muscle: alternative normalization method and effect of repeated biopsies.</a> Eur J Appl Physiol. 95, 351-360 (2005).</li><li>Coyle, E. F., Coggan, A. R., Hemmert, M. K., Ivy, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Muscle+glycogen+utilization+during+prolonged+strenuous+exercise+when+fed+carbohydrate.">Muscle glycogen utilization during prolonged strenuous exercise when fed carbohydrate.</a> J Appl Physiol. 61, 165-172 (1985).</li></ol>

The authors have no conflicts of interest.

Bu video ASU İnsan Performansı Laboratuarı kullanılan iskelet kas biyopsi bir adım-adım özetini sağlar. Küçük değişikliklerle bu prosedür, son 13 yılda yaklaşık 1.600 kas biyopsileri toplamak için kullanılır olmuştur. Kas biyopsi örnekleri önemli araştırma bulgularından yola çıkılarak, spor beslenme temelli araştırmalarda önemli veriler sağlamıştır. Modifiye Bergström iskelet kas biyopsi tekniği yaparken farkında olmak çok önemli teknikler vardır. Bi...

Perkütan ya da &#39;yarı-açık&#39; biyopsi tekniği insan hasta ve araştırma konuları iskelet kası doku örneklerinin elde etmek için kullanılır. Duchenne (1806-1875) perkütan biyopsi 1 ile doğanlarda iskelet kası elde etmek için bir trokar ile bir iğne oluşturmak için ilk olarak yatırılmaktadır. 1960 yılında, Bergström Duchenne 2-4 tarif edilene benzer bir perkütan biyopsi iğne tanıttı. Yirmi yıl sonra, Evans ve diğ. Bergström 5 iğnenin kesme trokardan emme uygulanarak değiştirilmiş tekniği. Bu modifikasyon, 5-kat, 6,7 doku 3 verimini arttırmak ve klinik ve araştırma ortamlarında biyomedikal kullanılır. Bu teknik vardır ve miyopatilerin tanı ve iskelet kas yapısı ve fonksiyonu anlayışımızı geliştirmek için devam edecektir. Perkütan kas biyopsi tekniği straightfo olduğunurward. Doğru yapıldığı zaman, aseptik teknikle ödün vermeden, ilişkili riskler minimumdur. Kas biyopsisi araştırma projeleri için bir araştırma aracı olarak kabul edilir. Bazı akademik kurumlar kas biyopsisi almak için, doğrudan hekim gözetimi ile, bir doktora ile fakülte araştırmacılar eğitimli izin ve diğerleri tekniği gerçekleştirmek için bir kurul sertifikalı hekim gerektirir. ASU biyopsi takımı başarıyla son 13 yılda 8-15 sırasında 1.600 kas biyopsileri yürüttü. Bu videonun amacı, insan deneklerin vastus lateralis iskelet kası doku örnekleri elde etmek için modifiye Bergström iğne perkütan kas biyopsi tekniği 5 tanımlamaktır.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="969">
	<tbody>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:439px;">Name of Material / Equipment</td>
			<td style="width:185px;">Company</td>
			<td style="width:141px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:204px;">Comments /&#160; Description</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Bergstr&#246;m biopsy needle, 5 x 100mm</td>
			<td style="width:185px;">Stille Surgical Inc.</td>
			<td>119-29187-50</td>
			<td>1 ea</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Durasorb blue pad</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>22-031-340</td>
			<td>case of 300</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Prep Razor Disposable</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>89760</td>
			<td>1 ea</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Shave Cream</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>92869</td>
			<td>1 can</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Alcohol Swab</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>98721</td>
			<td>box/200</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Povidone-iodine Swabsticks (3 pack)</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>90691</td>
			<td>pack of 50</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Face masks</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>19-039-690</td>
			<td>case of 50</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Sterile Gloves; sz 6.5</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>68128</td>
			<td>box of 50 pairs</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Sterile Gloves; sz 7.0</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>68129</td>
			<td>box of 50 pairs</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Sterile Gloves; sz 8.5</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>68132</td>
			<td>box of 50 pairs</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Fenestrated Towel Drape</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>92712</td>
			<td>case of 50</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Lidocaine (1% HCl, w/o Epi</td>
			<td>Dealmed</td>
			<td>427902</td>
			<td>30cc vial</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Ethyl Chloride spray</td>
			<td>Dealmed</td>
			<td>386020</td>
			<td>3.5 fl. Oz. bottle</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">5 mL syringe w/ 21G needle</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>14-827-48</td>
			<td>case of 100</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">25G 5/8&#34; needle</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>14-826AA</td>
			<td>case of 100</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">25G 1 1/2&#34; needle</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>14-826-49</td>
			<td>case of 100</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Single-Use Scalpels&#160; w/ #11 blade</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>0-8927-5B</td>
			<td>box of 20</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">60 mL Syringe</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>13-689-8</td>
			<td>case of 40</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">~30 inch extension tubing</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>14-169-7A</td>
			<td>roll of 50ft</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Metal stopcock</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>01-290-38</td>
			<td>each</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Polypropylene tubing connector w/ tapered ends, 3.2 to 5.5 mm</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>15-315-28A</td>
			<td>case of 100</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Yellow pipette tips (1-200 &#181;L)</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>02-681-2</td>
			<td>cut off&#160; ~15-18 mm of the tip</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Topical surgical adhesive</td>
			<td>Medline</td>
			<td>MSC091076</td>
			<td>case of 36 tubes</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Topical surgical adhesive</td>
			<td>Medline</td>
			<td>MSC091076Z</td>
			<td>box of 6 tubes</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Butterfly stitches (adhesive strips) 1/2&#34; x 4&#34; (6 per pack)</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>93050</td>
			<td>box/300</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Bandadge, Strip, 3/4 x 3 in.</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>19-027-202</td>
			<td>pack of 100</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Adhesive bandage (5m rolls)</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>19-027-768</td>
			<td>case of 36</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">1&#34; paper surgical tape</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>19-027-761</td>
			<td>case of 12</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Sutures (4-0 reverse cutting, FS2)</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>82926</td>
			<td>box of 36</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">4 x 4 sterile gauze pads</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>66949</td>
			<td>pkg/50</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">2 x 2 non-sterile gauze pads</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>37336</td>
			<td>pkg/200</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">3 x 4 Non-Adherent Pads</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>74389</td>
			<td>bx/100</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Autoclave bags 3.5 x 9</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>40390</td>
			<td>box of 200</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Autoclave bags 5.25 x 10</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>40391</td>
			<td>box of 200</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Autoclave indicator tape</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>31608</td>
			<td>box of 250</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Lab Coats&#8212;small</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>23-900-520A&#160;</td>
			<td>10/pk</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Lab Coats&#8212;medium</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>23-900-520B&#160;</td>
			<td>10/pk</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Lab Coats&#8212;large</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>23-900-520C&#160;</td>
			<td>10/pk</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Germicidal Disposable Cloth Wipes</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>62879</td>
			<td>Can/160</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

human skeletal muscle biopsy procedures using the modified bergstr&#246;m technique

Perkütan biyopsi tekniği araştırmacılar ve klinisyenler iskelet kas dokusu örnekleri toplamak sağlar. Tekniği, güvenli ve son derece etkilidir. Bu video insan deneklerin vastus lateralis iskelet kası doku örnekleri elde etmek için modifiye edilmiş bir Bergström iğne kullanılarak perkütan biyopsi tekniği açıklar. Bergström iğne uzak ucunda bir kesme bıçağı ile ucun kenarındaki küçük bir açıklık (&quot;pencere &#39;) ve bir iç trokar olan bir dış kanül oluşur. Lokal anestezi ve aseptik koşullar altında, iğne cilt, deri altı dokusu, ve ön panodaki bir kesi ile iskelet kas içine ilerletilir. Daha sonra, emme iç trokar için uygulanır, böylece kesme ya da iskelet kası dokusu örneği tamamlamak dış trokar iskelet kası dokusu emme ile dış kanülün penceresine çekilir, geri çekilir ve iç trokar hızla kapanır . İğne 90 ° döndürülür60 ve bir kesim yapılır. Bu işlem, üç kez daha tekrarlanabilir. Bu, birden çok kesim tekniği, genellikle sağlıklı kişilerde 100-200 mg veya daha fazla bir örneğini üreten sırasında ve hemen öncesinde yapılabilir ve egzersiz veya diğer müdahale nöbetinden sonra. Kesi sitenin biyopsi sonrası soyunma ardından, denekler genellikle hemen günlük yaşam aktivitelerini devam ve tam 48-72 saat içinde şiddetli fiziksel aktiviteye katılabilirsiniz. Konular fasiyalarında kesiden kas herniasyonu riskini azaltmak için 48 saat boyunca ağır direnç egzersiz kaçınmalısınız.

Yukarıda tarif edildiği gibi kas biyopsisi hızlı ve düzenli olarak iskelet kası dokusu örnekleri toplamak için araştırmacı sağlar. Sağlıklı, atletik kişilerde tipik verim 3-4 klipler ile tek geçişte 200 mg veya daha fazladır. Prosedürü kesi için hazırlık harcanan çoğu 15-20 dakika alır. Egzersize dayalı çalışmalarda, kas örnekleri genelde kurtarma sırasında toplanan bir ya da iki numune ile, öncesi ve sonrası egzersiz alınır. Bu tasarım sayesinde, post-egzersiz saç (karşı) uyluk...

Watch this Scientific Journal Video about Human Skeletal Muscle Biopsy Procedures Using the Modified BergstrÃ¶m Technique at JoVE.com

Human Skeletal Muscle Biopsy Procedures Using the Modified Bergstr&amp;#246;m Technique

The purpose of this video is to present the modified Bergstr&#246;m skeletal muscle biopsy technique on human subjects.

Modifiye Bergström Tekniği İnsan İskelet Kası Biyopsi Prosedürleri

The percutaneous biopsy technique enables researchers and clinicians to collect skeletal muscle tissue samples. The technique is safe and highly ...

human-skeletal-muscle-biopsy-procedures-using-modified-bergstrm

Research

JoVE Journal

Medicine

Human Skeletal Muscle Biopsy Procedures Using the Modified Bergstr&#246;m Technique

39.5K Görüntüleme.  Appalacian State University. The purpose of this video is to present the modified Bergström skeletal muscle biopsy technique on human subjects. 

Video: Human Skeletal Muscle Biopsy Procedures Using the Modified Bergstr&#246;m Technique

Myo-mechanical Analysis of Isolated Skeletal Muscle

To assess the in vivo effects of therapeutic interventions for the treatment of muscle disease 1,2,3, quantitative methods are needed that measure force generation and fatigability in treated muscle. We describe a detailed approach to evaluating myo-mechanical properties in freshly explanted hindlimb muscle from the mouse. We describe the atraumatic harvest of mouse extensor digitorum longus muscle, mounting the muscle in a muscle strip myograph (Model 820MS; Danish Myo Technology), and the measurement of maximal twitch and tetanic tension, contraction time, and half-relaxation time, using a square pulse stimulator (Model S48; Grass Technologies). Using these measurements, we demonstrate the calculation of specific twitch and tetanic tension normalized to muscle cross-sectional area, the twitch-to-tetanic tension ratio, the force-frequency relationship curve and the low frequency fatigue curve 4. This analysis provides a method for quantitative comparison between therapeutic interventions in mouse models of muscle disease 1,2,3,5, as well as comparison of the effects of genetic modification on muscle function 6,7,8,9.

To assess the in vivo effects of therapeutic interventions for muscle disease, methods are needed to quantitate force generation and fatigability in treated muscle. We detail an approach to evaluating myo-mechanical properties in explanted mouse hindlimb muscle. This analysis provides a robust approach to quantitating the effects of genetic modification on muscle function, as well as comparison of therapies in mouse models of muscle disease.

İzole İskelet Kası Myo-mekanik Analizi

To assess the in vivo effects of therapeutic interventions for the treatment of muscle disease 1,2,3, quantitative methods are needed that measure force ...

Tıp

Skeletal Muscle Gender Dimorphism from Proteomics

Gross contraction in skeletal muscle is primarily determined by a relatively small number of contractile proteins, however this tissue is also remarkably adaptable to environmental factors1 such as hypertrophy by resistance exercise and atrophy by disuse. It thereby exhibits remodeling and adaptations to stressors (heat, ischemia, heavy metals, etc.)2,3. Damage can occur to muscle by a muscle exerting force while lengthening, the so-called eccentric contraction4. The contractile proteins can be damaged in such exertions and need to be repaired, degraded and/or resynthesized; these functions are not part of the contractile proteins, but of other much less abundant proteins in the cell. To determine what subset of proteins is involved in the amelioration of this type of damage, a global proteome must be established prior to exercise5 and then followed subsequent to the exercise to determine the differential protein expression and thereby highlight candidate proteins in the adaptations to damage and its repair. Furthermore, most studies of skeletal muscle have been conducted on the male of the species and hence may not be representative of female muscle. 
In this article we present a method for extracting proteins reproducibly from male and female muscles, and separating them by two-dimensional gel electrophoresis followed by high resolution digital imaging6. This provides a protocol for spots (and subsequently identified proteins) that show a statistically significant (p &lt; 0.05) two-fold increase or decrease, appear or disappear from the control state. These are then excised, digested with trypsin and separated by high-pressure liquid chromatography coupled to a mass spectrometer (LC/MS) for protein identification (LC/MS/MS)5. This methodology (Figure 1) can be used on many tissues with little to no modification (liver, brain, heart etc.).

A straight-forward set of methods to isolate and determine the identity of the most abundant proteins expressed in skeletal muscle. About 800 spots are discerned on a two-dimensional gel from 10 mg muscle; this allows for the determination of gender-specific protein expression. These methods will give equivalent results in most tissues.

İskelet Kası Cinsiyet Proteomik Dimorfizm

Gross contraction in skeletal muscle is primarily determined by a relatively small number of contractile proteins, however this tissue is also remarkably ...

Skin Punch Biopsy Explant Culture for Derivation of Primary Human Fibroblasts

Tissues and cell lines derived from an individual with disease are ideal sources to study disease-related cellular phenotypes. Patient-derived fibroblasts in this protocol have been successfully used in the derivation of induced pluripotent stem cells to model disease1. Early passages of these fibroblasts can also be used for cell-based functional assays to study specific disease pathways, mechanisms2 and subsequent drug screening approaches. The advantage of the presented protocol over enzymatic procedures are 1) the reproducibility of the technique from small amounts of tissue derived from older patients, e.g. patients affected with Parkinson's disease, 2) the technically simple approach over more challenging methodologies using enzymatic treatments, and 3) the time consideration: this protocol takes 15-20 min and can be performed immediately after biopsy arrival. Enzymatic treatments can take up to 4 hr and have the problems of overdigestion, reduction of cell viability and subsequent attachment of cells when not handled properly. This protocol describes the dissection and preparation of a 4-mm human skin biopsy for derivation of a fibroblast culture and has a very high success rate which is important when dealing with patient-derived tissue samples. In this culture, keratinocytes migrate out of the biopsy tissue within the first week after preparation. Fibroblasts appear 7-10 days after the first outgrowth of keratinocytes. DMEM high glucose media supplemented with 20% FBS favors the growth of fibroblasts over keratinocytes and fibroblasts will overgrow the keratinocytes. After 2 passages keratinocytes have been diluted out resulting in relatively homogenous fibroblast cultures which expresses the fibroblast marker SERPINH1 (HSP-47). Using this approach, 15-20 million fibroblasts can be derived in 4-8 weeks for cell banking. The skin dissection takes about 15-20 min, cells are then monitored once a day under the microscope, and media is changed every 2-3 days after attachment and outgrowth of cells.

The fibroblast explant culture protocol from human skin punch biopsies is a technically robust and simple way to derive skin cells within 4-8 weeks for banking of about 15-20 million cells at a low passage number.

İlköğretim İnsan Fibroblastlar türetilmesi için Cilt Punch Biyopsi Eksplantın Kültür

Tissues and cell lines derived from an individual with disease are ideal sources to study disease-related cellular phenotypes. Patient-derived fibroblasts ...

Tibial Nerve Transection - A Standardized Model for Denervation-induced Skeletal Muscle Atrophy in Mice

The tibial nerve transection model is a well-tolerated, validated, and reproducible model of denervation-induced skeletal muscle atrophy in rodents. Although originally developed and used extensively in the rat due to its larger size, the tibial nerve in mice is big enough that it can be easily manipulated with either crush or transection, leaving the peroneal and sural nerve branches of the sciatic nerve intact and thereby preserving their target muscles. Thus, this model offers the advantages of inducing less morbidity and impediment of ambulation than the sciatic nerve transection model and also allows investigators to study the physiologic, cellular and molecular biologic mechanisms regulating the process of muscle atrophy in genetically engineered mice. The tibial nerve supplies the gastrocnemius, soleus and plantaris muscles, so its transection permits the study of denervated skeletal muscle composed of fast twitch type II fibers and/or slow twitch type I fibers. Here we demonstrate the tibial nerve transection model in the C57Black6 mouse. We assess the atrophy of the gastrocnemius muscle, as a representative muscle, at 1, 2, and 4 weeks post-denervation by measuring muscle weights and fiber type specific cross-sectional area on paraffin-embedded histologic sections immunostained for fast twitch myosin.

The tibial nerve transection model is a well-tolerated, validated, and reproducible model of skeletal muscle atrophy. The model surgical protocol is described and demonstrated in C57Black6 mice. &#160;

Tibial Sinir transeksiyonu - Farelerde denervasyon bağlı İskelet Kas Atrofi için bir Standart Model

The tibial nerve transection model is a well-tolerated, validated, and reproducible model of denervation-induced skeletal muscle atrophy in rodents. ...

Murine Cervical Heart Transplantation Model Using a Modified Cuff Technique

Mouse models are of special interest in research since a wide variety of monoclonal antibodies and commercially defined inbred and knockout strains are available to perform mechanistic in vivo studies. While heart transplantation models using a suture technique were first successfully developed in rats, the translation into an equally widespread used murine equivalent was never achieved due the technical complexity of the microsurgical procedure. In contrast, non-suture cuff techniques, also developed initially in rats, were successfully adapted for use in mice1-3. This technique for revascularization involves two major steps I) everting the recipient vessel over a polyethylene cuff; II) pulling the donor vessel over the formerly everted recipient vessel and holding it in place with a circumferential tie. This ensures a continuity of the endothelial layer, short operating time and very high patency rates4.
Using this technique for vascular anastomosis we performed more than 1,000 cervical heart transplants with an overall success rate of 95%. For arterial inflow the common carotid artery and the proximal aortic arch were anastomosed resulting in a retrograde perfusion of the transplanted heart. For venous drainage the pulmonary artery of the graft was anastomosed with the external jugular vein of the recipient5.
Herein, we provide additional details of this technique to supplement the video.

The murine cervical heart transplantation model is well suited for immunological as well as ischemia reperfusion injury studies. We modified the procedure using a non-suture cuff technique and performed more than 1,000 successful transplants with this approach.
Herein, we provide additional details of this technique to supplement the video.

Modifiye Manşet Tekniği Sıçangiller Servikal Kalp Nakli Modeli

Mouse models are of special interest in research since a wide variety of monoclonal antibodies and commercially defined inbred and knockout strains are ...

High-throughput Flow Cytometry Cell-based Assay to Detect Antibodies to N-Methyl-D-aspartate Receptor or Dopamine-2 Receptor in Human Serum

Over the recent years, antibodies against surface and conformational proteins involved in neurotransmission have been detected in autoimmune CNS diseases in children and adults. These antibodies have been used to guide diagnosis and treatment. Cell-based assays have improved the detection of antibodies in patient serum. They are based on the surface expression of brain antigens on eukaryotic cells, which are then incubated with diluted patient sera followed by fluorochrome-conjugated secondary antibodies. After washing, secondary antibody binding is then analyzed by flow cytometry. Our group has developed a high-throughput flow cytometry live cell-based assay to reliably detect antibodies against specific neurotransmitter receptors. This flow cytometry method is straight forward, quantitative, efficient, and the use of a high-throughput sampler system allows for large patient cohorts to be easily assayed in a short space of time. Additionally, this cell-based assay can be easily adapted to detect antibodies to many different antigenic targets, both from the central nervous system and periphery. Discovering additional novel antibody biomarkers will enable prompt and accurate diagnosis and improve treatment of immune-mediated disorders.

Over the recent years, live cell-based assays have been used successfully to detect antibodies against surface and conformational antigens. Here, we describe a method using high-throughput flow cytometry enabling the analysis of large cohorts of patients. Detection of novel antibodies will improve diagnosis and treatment of immune-mediated disorders.

İnsan Serum içinde N-metil-D-aspartat reseptör ya da dopamin-2 reseptör antikorları algılamak üzere yüksek verimli Flow Cytometry hücre bazlı bir deneyde

Over the recent years, antibodies against surface and conformational proteins involved in neurotransmission have been detected in autoimmune CNS diseases ...

Preparation and Respirometric Assessment of Mitochondria Isolated from Skeletal Muscle Tissue Obtained by Percutaneous Needle Biopsy

Respirometric profiling of isolated mitochondria is commonly used to investigate electron transport chain function. We describe a method for obtaining samples of human Vastus lateralis, isolating mitochondria from minimal amounts of skeletal muscle tissue, and plate based respirometric profiling using an extracellular flux (XF) analyzer. Comparison of respirometric profiles obtained using 1.0, 2.5 and 5.0 &#956;g of mitochondria indicate that 1.0 &#956;g is sufficient to measure respiration and that 5.0 &#956;g provides most consistent results based on comparison of standard errors. Western blot analysis of isolated mitochondria for mitochondrial marker COX IV and non-mitochondrial tissue marker GAPDH indicate that there is limited non-mitochondrial contamination using this protocol. The ability to study mitochondrial respirometry in as little as 20 mg of muscle tissue allows users to utilize individual biopsies for multiple study endpoints in clinical research projects.

Methods for biopsy of Vastus lateralis, preparation of purified mitochondria, and respirometric profiling are described. The use of small muscle volume makes this technique suitable for clinical research applications.

Perkütan İğne Biyopsisi ile Elde Edilen İskelet Kası Doku İzole Mitokondri hazırlanması ve Respirometrik Değerlendirmesi

Respirometric profiling of isolated mitochondria is commonly used to investigate electron transport chain function. We describe a method for obtaining ...

Human Vastus Lateralis Skeletal Muscle Biopsy Using the Weil-Blakesley Conchotome

Percutaneous muscle biopsy using the Weil-Blakesley conchotome is well established in both clinical and research practice. It is a safe, effective and well tolerated technique. The Weil-Blakesley conchotome has a sharp biting tip with a 4 - 6 mm wide hollow. It is inserted through a 5 - 10 mm skin incision and can be maneuvered for controlled tissue penetration. The tip is opened and closed within the tissue and then rotated through 90 -180&#176; to cut the muscle. The amount of muscle obtained following repeated sampling can vary from 20 mg to 290 mg which can be processed for both histology and molecular studies. The wound needs to be kept dry and vigorous physical activity kept to a minimum for approximately 72 hr although normal levels of activity can restart immediately following the procedure. This procedure is safe and effective when close attention is paid to the selection of subjects, full asepsis and post procedure care. &#160;Both right and left vastus lateralis are suitable for biopsy dependent on participant preference.

Human Vastus Lateralis Skeletal Muscle Biopsy Using the Weil-Blakesley Conchotome

This video demonstrates the technique of percutaneous muscle biopsy of the human vastus lateralis using the Weil-Blakesley conchotome.

İnsan<em&gt; Vastus lateralis</em&gt; Weil-Blakesley Conchotome kullanılması İskelet Kası Biyopsi

Percutaneous muscle biopsy using the Weil-Blakesley conchotome is well established in both clinical and research practice. It is a safe, effective and ...

Phosphorus-31 Magnetic Resonance Spectroscopy: A Tool for Measuring In Vivo Mitochondrial Oxidative Phosphorylation Capacity in Human Skeletal Muscle

Skeletal muscle mitochondrial oxidative phosphorylation (OXPHOS) capacity, which is critically important in health and disease, can be measured in vivo and noninvasively in humans via phosphorus-31 magnetic resonance spectroscopy (31PMRS). However, the approach has not been widely adopted in translational and clinical research, with variations in methodology and limited guidance from the literature. Increased optimization, standardization, and dissemination of methods for in vivo 31PMRS would facilitate the development of targeted therapies to improve OXPHOS capacity and could ultimately favorably impact cardiovascular health. 31PMRS produces a noninvasive, in vivo measure of OXPHOS capacity in human skeletal muscle, as opposed to alternative measures obtained from explanted and potentially altered mitochondria via muscle biopsy. It relies upon only modest additional instrumentation beyond what is already in place on magnetic resonance scanners available for clinical and translational research at most institutions. In this work, we outline a method to measure in vivo skeletal muscle OXPHOS. The technique is demonstrated using a 1.5 Tesla whole-body MR scanner equipped with the suitable hardware and software for 31PMRS, and we explain a simple and robust protocol for in-magnet resistive exercise to rapidly fatigue the quadriceps muscle. Reproducibility and feasibility are demonstrated in volunteers as well as subjects over a wide range of functional capacities.

Phosphorus-31 Magnetic Resonance Spectroscopy: A Tool for Measuring In Vivo Mitochondrial Oxidative Phosphorylation Capacity in Human Skeletal Muscle

This work demonstrates the feasibility of an in vivo phosphorus-31 magnetic resonance spectroscopy (31PMRS) technique to quantify mitochondrial oxidative phosphorylation (OXPHOS) capacity in human skeletal muscle.

Fosfor-31 Manyetik Rezonans Spektroskopisi: Ölçme için Aracı<em&gt; İn Vivo</emİnsan İskelet Kası içinde&gt; Mitokondriyal Oksidatif Fosforilasyon Kapasitesi

Skeletal muscle mitochondrial oxidative phosphorylation (OXPHOS) capacity, which is critically important in health and disease, can be measured in vivo ...

Mouse Model for Pancreas Transplantation Using a Modified Cuff Technique

Mouse models have several advantages in transplantation research, including easy handling, a variety of genetically well-defined strains, and the availability of the widest range of molecular probes and reagents to perform in vivo as well as in vitro studies. Based on our experience with various murine transplantation models, we developed a heterotopic pancreas transplantation model in mice with the intent to analyze mechanisms underlying severe ischemia reperfusion injury-associated early graft damage. In contrast to previously described techniques using suture techniques, herein we describe a new procedure using a non-suture cuff technique. 
In recent years, we have performed more than 300 pancreas transplantations in mice with an overall success rate of &gt;90%, a success rate never described before in mouse pancreas transplantation. The backbone of this non-suture cuff technique for graft revascularization consists of two major steps: (I) pulling the recipient vessel over a polyethylene/polyamide cuff and fixing it with a circumferential ligature, and (II) placing the donor vessel over the everted recipient vessel and fixing it with a second circumferential ligature. The resultant continuity of the endothelial layer results in less thrombogenic lesions with high patency rates and, finally, high success rates.
In this model, arterial anastomosis is achieved by pulling the abdominal aorta of the donor graft over the everted common carotid artery of the recipient animal. Venous drainage of the graft is achieved by pulling the portal vein of the graft over the everted external jugular vein of the recipient. This manuscript provides details and crucial steps of the organ recovery and organ implantation procedures, which will allow researchers with microsurgical skills to perform the transplantation successfully in their laboratories.

Among abdominal solid organ transplantation, pancreatic grafts are prone to develop severe ischemia reperfusion injury-associated graft damage, leading eventually to early graft loss. This protocol describes a model of murine pancreas transplantation using a non-suture cuff technique, ideally suited for analyzing these early, deleterious damages.