Name: trabecular meshwork response to pressure elevation in the living human eye
Uploaded: 2015-06-20T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 3 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Trabecular Meshwork Response to Pressure Elevation in the Living Human Eye at JoVE.com

Supported in part by National Institute of Health contracts R01-EY13178, and P30-EY08098 (Bethesda, MD), the Eye and Ear Foundation (Pittsburgh, PA), and unrestricted grants from Research to Prevent Blindness (New York, NY).

Etik Beyanı: özne işe başlamadan önce onay Tıp Pittsburgh Üniversitesi Kurumsal Değerlendirme Kurulu elde edilmiştir. Sağlanan tüm denekler çalışmaya katılmadan önce bilgilendirilmiş onam yazılı. 1. Veri Toplama <ol><li> Basınç Yükselmesi <ol><li> Göze% 0.5 proparakain bir damla instilling bazal ölçümleri (GİB ve Ekim ölçümleri) atın. Etkinlik için 3 dakika bekleyin. </li><li> Yavaşça ophthalmodynamometer, kohort 1 30 g, ve 5 ile zamansal sklera baskı uygulamak ve aşağıdaki gibi kohort 2. 10 gr Sonra istenen (GİB ve OCT) ölçümleri almak <ol><li> GİB Ölçümleri <ol><li> Bazal GİB ölçün. Bölüm 1.1&#39;de anlatıldığı gibi basıncını yükseltebilir. </li><li> Kohort 1 &#39;de,% 0.5 proparakain bir damla aşılamak etki için 3 dakika bekleyin ve skleraya basınç 30 g uygulanır. Basınç uygulandığında edilirken, GİB tonometer aşağıdaki manufa kullanarak ölçülmesicturer talimatları. </li><li> Kohort 2&#39;de,% 0.5 proparakain bir damla aşılamak etki için 3 dakika bekleyin ve bir ophthalmodynamometer kullanılarak skleral basınç 5 g uygulanır. Tonometre aşağıdaki üreticinin talimatlarına kullanarak basıncı yüksekliği sırasında GİB ölçün. <ol><li> 5 gr ölçümden sonra 5 dakika bekleyin. </li><li> Ophthalmodynamometer tarafından skleral basıncın 10 gr uygulayın ve üreticinin talimatlarına tonometresi kullanılarak basınç yükselmesi sırasında GİB ölçümü. Çalışma kayıtlarında GİB ve durum (yani, taban çizgisi veya 10 gr) kaydedin. </li></ol></li></ol></li><li> Ekim Tarama <ol><li> Ekim tarayıcı de konuyu Seat. Yeni konular için hasta demografik verileri girin veya önceden taranmış konularda Ekim veritabanından demografik verileri çağırmak. </li><li> Ön segment 512 x 128 tarama protokolü seçin. Video görüntüsü penceresinde göz ortalayın. Tarayıcının arasındaki mesafeyi azaltınve göz kornea kesit görüntü tarama penceresinde görünene kadar </li><li> Sözlü komutları kullanarak burun yönde hasta bakışını yönlendirerek tarama penceresinin merkezine zamansal limbus pozisyon </li><li> Bazal tarama Edinme ve kalite için tarama gözden geçirin. Kabul edilebilir IF, kaydetmek ve kabul edilebilir değilse, bu adımı tekrarlayın. <ol><li> Hiçbir yanıp söner, ve açı görüntünün kenarına sürüklenen ya da üstünde saygısız olmadan hacmi boyunca görüntülenmiştir ise taramaları kabul edin. </li></ol></li><li> % 0.5 proparakain bir damla aşılamak etkinlik 3 dakika bekleyin ve 1.3.5 arasındaki adımları 1.3.2 tekrarlayın. </li><li> Kohort 1 için ophthalmodynamometer ile skleral basınç 30 g uygulamak ve basınç uygulanır edilirken tarama kazanır. Basıncını çıkarın ve kalite için tarama gözden geçirin. Kabul edilebilir IF, kaydetmek ve kabul edilebilir değilse, bu adımı tekrarlayın. </li><li> Kohort 2 için ophthalmodynamom tarafından skleral basıncın 5 g uygulamakbasınç uygulandığında edilirken eter ve tarama kazanırlar. Basıncını çıkarın ve kalite için tarama gözden geçirin. Kabul edilebilir IF, kaydetmek ve kabul edilebilir değilse, bu adımı tekrarlayın. </li><li> Göz 5 g basıncı pertürbasyon kurtarmak için izin 5 dakika bekleyin. </li><li> Kohort 2 için ophthalmodynamometer ile skleral basınç 10 g uygulamak ve basınç uygulanır edilirken tarama kazanır. Basıncını çıkarın ve kalite için tarama gözden geçirin. Kabul edilebilir IF, kaydetmek ve kabul edilebilir değilse, bu adımı tekrarlayın. </li><li> Çalışma kayıtlarında tarama süresini, durumu (yani, taban çizgisi ya da 10 g) ve konumunu kaydeder. </li></ol></li></ol></li></ol></li></ol> 2. Veri İşleme <ol><li> OCT içine yüksek kapasiteli USB depolama aygıtını takın. OCT üzerinde Kayıtlar menüsünden &quot;Export&quot; seçeneğini seçin. USB sürücü ihraç dosyaları için bir dosya konumu belirleyin. &quot;.zip&quot; Seçeneğini De-belirleyin. Sc hasta adını girinans ihraç ve taramaları ihraç edilecek seçeneğini seçin. Ihracat başlatın. </li><li> Ihracat tamamlandığında, USB sürücü çıkarılırken ve OCT kaldırmak. Görüntü işleme istasyonu ihraç görüntüleri içeren yüksek kapasiteli USB sürücüsü takın. </li><li> Bu durumda ImageJ görüntü işleme programı başlatın. </li><li> Ham görüntü veri alma; &quot;Dosya -&gt; İthalat -&gt; Ham&quot; Dosya menüsünden. &quot;_cube_raw.img&quot; Ile biten USB sürücüden işlenecek olan dosyayı seçin. </li><li> Orijinal görüntü verileri değiştirilmemiş kaydedilir, böylece yeni bir ad kullanarak ithal dosyayı kaydedin (http://www.ori.dhhs.gov/education/products/RIandImages). </li><li> 8 bit, Genişlik: 512, Yükseklik: 1.024, Ofset: Görüntü türü aşağıdaki gibi ithalat parametrelerini girin 0; Resimlerin sayısı: 128. </li><li> Eklentileri menüsünden &quot;&gt; StackReg - -&gt; R egistration Plugins&quot; seçeneğini seçin. Ve sonra &quot;Sert Vücut seçin&quot;Seçeneği. Hizalanmış yığını kurtarmak için daha sonra &quot;&gt; TIFF - - Dosya&gt; Farklı Kaydet&#39;i&quot; seçeneğini seçin. </li><li> Seçin &quot;Süreci -&gt; Filtreler -&gt; 3D Ortalama&quot; süreç menüsünden. Filtre seçenekleri gibi parametreler X = 1, Y = 1 ve Z = 1 girin. İki kez bu adımı yineleyin. </li><li> Ortalama yığını kaydetmek için &quot;&gt; TIFF - - Dosya&gt; Farklı Kaydet&#39;i&quot; seçiniz. Aktif yığının çerçevesine 1 taşımak için fare tekerleğini döndürün. </li><li> &quot;Süreci -&gt; Yerel Kontrast (CLAHE) geliştirin&quot; seçeneğini seçin İşleme menüsünden. 31, histogram kutuları: 256, Maksimum Eğim: 5, Maske: Parametreler blok boyutunu kullanın hiçbiri, ve &quot;hızlı&quot; seçeneğini işaretleyin. Sonraki kareye geçmek için sağ ok tuşunu kullanın. </li><li> Yerel Kontrast (CLAHE) Enhance&gt; aktif yığının çerçevesine 2 taşıyın ve süreç tekrarlayın. Tüm kareler kontrastlı oldu kadar tekrarlayın. </li><li> Seçin &quot;Dosya -&gt; Farklı Kaydet -&gt; TIFF&quot;; kontrastlı yığını kaydedin. Sonra &quot;Image -&gt; Adjust -&gt; Size&quot; Görüntü menüsünden. &quot;Boy Oranı sınırlama&quot; seçeneğinin işaretini kaldırın, sonra da Genişlik girin: 2048 ve yüksekliği: 1.024 değerleri. </li><li> Seçin &quot;Görüntü -&gt; Transform -&gt; Dikey çevir&quot; Görüntü menüsünden. Analiz menüden - Sonra &quot;&gt; Set Ölçeği Analiz&quot; seçeneğini seçin. 1 ve Tamam&#39;a tıklayın: 2048, bilinen mesafeyi: 4,000, ve Piksel Boyut Oranını piksel uzaklık girin. 1-boy oranı yığını: kalibre 1 kaydetmek için &quot;&gt; TIFF - - Dosya&gt; Farklı Kaydet&#39;i&quot; seçiniz. </li><li> Görsel taramaları içinde bir referans noktası olarak hizmet etmek farklı bir damar geçişi tanımlamak için taramaları incelemek yavaş yavaş fare tekerleği döndürün. Analiz elektronik tabloda görüntü numarası ve referans çerçevesi numarasını kaydedin. </li><li> İlk ölçüm kareye gitmek için sol ok tuşuna 15 kez basın. &quot;Serbest SelectionsR seçin21; araç çubuğundan bir araç. </li><li> SC merkezinde fare yerleştirin ve yukarı ok tuşuna basın. SC ekranı doldurur kadar bu adımı yineleyin. </li><li> Fare ile sınır çizerek elle segmenti SC. Geçerli görüntü çerçevesi için kontrol (Ctrl) tuşunu basın D tutun. Ctrl tuşunu basılı tutun ve basın M analizi elektronik tabloya SC kesit alanı ve ölçüm kare sayısı ölçümü Transcribe. Özetlenen alan De-seçin. 3 kez anahtar sağ oka basın. SC 10 kare cinsinden kadar bu adımı yineleyin. </li><li> İlk ölçüm kareye geri dönmek için sol ok tuşuna 30 kez basın. </li><li> Araç çubuğunda düz bölüm aracını seçin. </li><li> SC ön-en posterior-çoğu yerden düz bir çizgi çizin. Sadece mevcut çerçeve için kontrol anahtarı ve basın D tutun. Analiz-tabloya kumanda anahtarı ve basın M. Deşifre SC uzunluğu ve çerçeve numarasını tutun. Özetlenen alan De-seçin. Sağ ok tuşuna basın3 kez. SC uzunluğu SC enine kesit alanı ile aynı 10 kare cinsinden kadar yineleyin. </li><li> Uzunluk ölçümleri ile alan ölçümleri bölerek dış duvar mesafesi (SC-IOWD) ortalama SC iç duvarı hesaplamak için analiz elektronik tabloya denklemi SC-IOWD = SC-CSA / eksenel uzunluğa yerleştirin. </li><li> İlk ölçüm kareye geri dönmek için sol ok tuşuna 30 kez basın. </li><li> Araç çubuğunda düz bölüm aracını seçin. </li><li> Düz bir çizgi çizin ön-en trabeküler ağda ve ön kamaraya sınırına SC. Hat sınırına dik olduğundan emin olun. Ctrl ve ardından düğmesine basın D, M. tutun </li><li> SC posterior-en konumu ve TM sınırında ve ön kamarada bir çizgi çizin. Sınırına dik bu hat olun. Kontrol ve ardından düğmesine basın D, M. tutun </li><li> SC merkezi ve TM sınırında ve ön kamarada bir çizgi çizin. Lin emin olunsınır dik ör. Sadece mevcut çerçeve için kontrol anahtarı ve basın D tutun. </li><li> Analiz-tabloya üç TM kalınlık ölçümleri ve çerçeve numarasını uyarlamak. Bu basın 3 kez anahtar sağ ok yapmak. TM kalınlığı SC kesit alanı aynı 10 kare cinsinden kadar bu adımı yineleyin. </li></ol>

<ol>
	<li>Quigley, H. A., Broman, A. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+number+of+people+with+glaucoma+worldwide+2010+and+2020.">The number of people with glaucoma worldwide 2010 and 2020.</a> The British journal of ophthalmolog. 90, 262-267 (2006).</li><li>Sommer, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationship+between+intraocular+pressure+and+primary+open+angle+glaucoma+among+white+and+black+Americans.+The+Baltimore+Eye+Survey.">Relationship between intraocular pressure and primary open angle glaucoma among white and black Americans. The Baltimore Eye Survey.</a> Archives of ophthalmolog. 109, 1090-1095 (1991).</li><li>Sommer, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Racial+differences+in+the+cause-specific+prevalence+of+blindness+in+east+Baltimore.">Racial differences in the cause-specific prevalence of blindness in east Baltimore.</a> The New England journal of medicin. 325, 1412-1417 (1991).</li><li>Leske, M. C., Connell, A. M., Wu, S. Y., Hyman, L., Schachat, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distribution+of+intraocular+pressure.">Distribution of intraocular pressure.</a> The Barbados Eye Study. Archives of ophthalmolog. 115, 1051-1057 (1997).</li><li>Leske, M. C., Wu, S. Y., Hennis, A., Honkanen, R., Nemesure, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Risk+factors+for+incident+open-angle+glaucoma:+the+Barbados+Eye+Studies.">Risk factors for incident open-angle glaucoma: the Barbados Eye Studies.</a> Ophthalmolog. 115, 85-93 (2008).</li><li>Mitchell, P., Lee, A. J., Rochtchina, E., Wang, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Open-angle+glaucoma+and+systemic+hypertension:+the+blue+mountains+eye+study.">Open-angle glaucoma and systemic hypertension: the blue mountains eye study.</a> Journal of glaucom. 13, 319-326 (2004).</li><li>Mitchell, P., Smith, W., Attebo, K., Healey, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevalence+of+open-angle+glaucoma+in+Australia.+The+Blue+Mountains+Eye+Study.">Prevalence of open-angle glaucoma in Australia. The Blue Mountains Eye Study.</a> Ophthalmolog. 103, 1661-1669 (1996).</li><li>Gabelt, B., Kaufman, P., Kaufman, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Adler's Physiology of the Ey. , 237-289 (2003).</li><li>Grant, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+aqueous+perfusion+in+enucleated+human+eyes).">Experimental aqueous perfusion in enucleated human eyes).</a> Archives of ophthalmolog. 69, 783-801 (1963).</li><li>Jocson, V. L., Sears, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+aqueous+perfusion+in+enucleated+human+eyes.+Results+after+obstruction+of+Schlemm's+canal.">Experimental aqueous perfusion in enucleated human eyes. Results after obstruction of Schlemm's canal.</a> Archives of ophthalmolog. 86, 65-71 (1971).</li><li>Maepea, O., Bill, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pressures+in+the+juxtacanalicular+tissue+and+Schlemm's+canal+in+monkeys.">Pressures in the juxtacanalicular tissue and Schlemm's canal in monkeys.</a> Experimental eye researc. 54, 879-883 (1992).</li><li>Johnstone, M. A., Grant, W. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pressure-dependent+changes+in+structures+of+the+aqueous+outflow+system+of+human+and+monkey+eyes.">Pressure-dependent changes in structures of the aqueous outflow system of human and monkey eyes.</a> American journal of ophthalmolog. 75, 365-383 (1973).</li><li>Overby, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Altered+mechanobiology+of+Schlemm's+canal+endothelial+cells+in+glaucoma.">Altered mechanobiology of Schlemm's canal endothelial cells in glaucoma.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of Americ. , (2014).</li><li>Allingham, R. R., de Kater, A. W., Ethier, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Schlemm's+canal+and+primary+open+angle+glaucoma:+correlation+between+Schlemm's+canal+dimensions+and+outflow+facility.">Schlemm's canal and primary open angle glaucoma: correlation between Schlemm's canal dimensions and outflow facility.</a> Experimental eye researc. 62, 101-109 (1996).</li><li>Camras, L. J., Stamer, W. D., Epstein, D., Gonzalez, P., Yuan, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+effects+of+trabecular+meshwork+stiffness+on+outflow+facility+in+normal+human+and+porcine+eyes.">Differential effects of trabecular meshwork stiffness on outflow facility in normal human and porcine eyes.</a> Investigative ophthalmolog., &amp; visual scienc. 53, 5242-5250 (2012).</li><li>Last, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elastic+modulus+determination+of+normal+and+glaucomatous+human+trabecular+meshwork.">Elastic modulus determination of normal and glaucomatous human trabecular meshwork.</a> Investigative ophthalmolog., &amp; visual. 52, 2147-2152 (2011).</li><li>Lutjen-Drecoll, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+morphology+of+the+trabecular+meshwork+in+primate+eyes.">Functional morphology of the trabecular meshwork in primate eyes.</a> Progress in retinal and eye researc. 18, 91-119 (1999).</li><li>Li, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pilocarpine-induced+dilation+of+Schlemm's+canal+and+prevention+of+lumen+collapse+at+elevated+intraocular+pressures+in+living+mice+visualized+by+OCT.">Pilocarpine-induced dilation of Schlemm's canal and prevention of lumen collapse at elevated intraocular pressures in living mice visualized by OCT.</a> Investigative ophthalmolog., &amp; visual scienc. 55, 3737-3746 (2014).</li><li>Francis, A. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphometric+analysis+of+aqueous+humor+outflow+structures+with+spectral-domain+optical+coherence+tomography.">Morphometric analysis of aqueous humor outflow structures with spectral-domain optical coherence tomography.</a> Investigative ophthalmolog., &amp; visual. 53, 5198-5207 (2012).</li><li>Kagemann, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=3D+visualization+of+aqueous+humor+outflow+structures+in-situ+in+humans.">3D visualization of aqueous humor outflow structures in-situ in humans.</a> Experimental eye researc. 93, 308-315 (2011).</li><li>Kagemann, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+and+assessment+of+Schlemm's+canal+by+spectral-domain+optical+coherence+tomography.">Identification and assessment of Schlemm's canal by spectral-domain optical coherence tomography.</a> Investigative ophthalmolog., &amp; visual. 51, 4054-4059 (2010).</li><li>Kagemann, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IOP+Elevation+Reduces+Schlemm's+Canal+Cross-sectional+Area.">IOP Elevation Reduces Schlemm's Canal Cross-sectional Area.</a> Investigative ophthalmolog &amp; visual scienc. , (2014).</li></ol>

Dr Schuman Zeiss, Inc. Massachusetts Teknoloji Enstitüsü ve Massachusetts Göz ve Kulak Revir tarafından lisanslı fikri mülkiyet için telif aldı

Mevcut teknik, SC çöküşü ölçmek için yumuşak doku mekanik cevabın non-invaziv gözlem yararlanır. Insan kadavra gözlerini kullanarak gelecekteki iş diseksiyonu sonrası doku sapmaları gerçek doku sertliği kalibre etmek gereklidir. Ancak, bu tür çalışmalar daha önceki çıkış modelleri aynı sınırlamaları yaşayacaktır; Özellikle, doku gerilim yaşayan kas katkıları mevcut olmayacaktır. Yaşayan bir memeli göz modelinde daha ileri kalibrasyon görüntüleme ve TM&#39;nin sertliği doğruda...

Glokom geri dönüşümsüz körlük 1 dünyanın ikinci önde gelen nedenidir. Yükselmiş göz içi basıncı (GİB) glokom 2-7 varlığı ve ilerlemesi için önemli bir nedensel risk faktörüdür. &#160; IOP sulu salgı 8 oluşumu ve çıkışı arasındaki denge tarafından kontrol edilir. En büyük çıkış direnci yerleri juxtacanicular doku ve Schlemm kanal (SC) iç duvar, SC ve trabeküler ağ (TM) 9-11 arasında bir arayüz vardır. TM sertliği GİB karşısında SC çöküşün önlenmesi katkı da, Overby ve ark., 12 son zamanlarda IOP yükselmesiyle, gözeneklerin oluşmasını engelleyen, artan SC endotel sertleşmesiyle sonuçlanan, glokom gen ekspresyonunun değişeceği olduğunu göstermiştir glokom gözler 13. TM morfolojisi ve sertlik t vurgulayan çıkış tesis 14,15 ile ilişkilidirO onun biyomekanik özelliklerini ölçmek gerekir. TM&#39;nin atomik kuvvet mikroskopisi ölçümleri glokom (4.0 kPa) 16 olmadan donörlerden alınan gözlerle karşılaştırıldığında glokom hastalarında (81 kPa) tarafından bağışlanan gözünde yüksek sertlik gösterir, ancak bu ölçümler disseke ex vivo dokularda yapılmıştır. Posterior TM dış lamellated ve cribiform TM 17 takın uzunlamasına kas hücrelerinin ön tendonlar aracılığıyla siliyer kasın içine sabitlenir. Silier kas (CM) aktivitesi artmış TM sertliği 17 taklit, TM tautness artabilir. düz kas düzensizlikler tarafından uyarılan SC çökmesi direnç değişiklikleri gözlemlemek için yeteneği, bir hayvan modelinde 18&#39;de gösterilmiştir. Biz non-invaziv görüntüye yeteneği distalinde insan gözleri yaşayan ve spektral domain optik koherens tomografi (OCT) ile SC dahil birincil sulu mizah çıkış sistemi göstermiştir &lt;sup&gt; 19-21. Bu tekniği kullanarak, akut GİB yükselmesi 22 TM ve SC morfometrik tepkisini ölçmek için yeteneğini göstermiştir. Burada tarif edilen yöntemin genel amacı yerinde canlı dokularda akut GİB yükselmesi için yaşayan çıkış yolu morfometrik tepkisini ölçmek için oldu. Bu teknik, parçalara dokularda yapılan geçme ölçümlere göre, TM sertliğe TM ve CM içinde hem de kasılma lif aktivitesi katkılarını içeren fizyolojik koşullar altında TM incelenmesi avantajı vardır. Mekanik TM yanıtının gözlem bu tekniği uygulayarak arkasındaki mantık biz şimdi çıkış direnci ve GİB yönetmelik 13 doğrudan bağlantılı biliyor TM, mekanik davranış içine aksi takdirde kullanılamaz anlayışlar bize sağlamasıdır. Genel sertlik, küçük Asma kontraktil dokuların katkısını ayırtkonuların rt etmeden ve tropikamid idaresi tarafından düz kas aktivitesinin baskılanması ile incelenmiştir.

<table><tbody><tr><td>Spectral Domain OCT</td><td>Zeiss</td><td>Cirrus</td><td></td></tr><tr><td>Imaging Workstation</td><td>Apple</td><td>iMac</td><td></td></tr><tr><td>Ophthalmodynamometer</td><td>Baillairt Matalene Ophthalmodynamometer, Surgical instruments CO., Inc. New York, NY</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Image Processing Program</td><td>rsb.info.nih.gov/ij</td><td>ImageJ, FIJI</td><td></td></tr></tbody></table>

trabecular meshwork response to pressure elevation in the living human eye

trabeküler ağ (TM) mekanik özellikleri çıkış direnci ve göz içi basıncı (GİB) yönetmelik ile bağlantılıdır. Bu tekniğin arkasındaki mantık akut GİB yükselmesi için TM mekanik yanıtın doğrudan gözlemdir. Tarama öncesinde, GİB başlangıç ​​ve GİB yükselmesi sırasında ölçülür. limbus başlangıçta ve GİB yükselmesi sırasında spektral domain OCT tarafından taranan (ophthalmodynamometer (ODM) 30 g kuvveti uygulanan). Taramalar ImageJ kullanılarak sulu mizah çıkış yolunun görselleştirme geliştirmek için işlenir. Vasküler görülecek başlangıç ​​ve GİB yükselmesi tarama hacimlerindeki gelen yerleri tanımlamak için kullanılır. Schlemm kanal (SC) kesit alanı (SC-CSA) ve uzun ekseni boyunca posterior anterior SC uzunluğu SC 1 mm segmenti içindeki 10 noktada elle ölçülür. Dış duvar mesafesi (kısa eksen uzunluğu) iç bölünmesiyle SC alanı olarak hesaplanmaktadır Mean onunuzun eksen uzunluğu. Etkisi GİB yüksekliklerde bitişik dokuların katkısını incelemek için ölçümler olmadan ve tropikamid damlatılması ile düz kas gevşemesi ile tekrarlanmıştır. SC, TM geçiş TM sertliği tarafından direnç, ancak siliyer gövde içinde komşu iki düz kas olan bağlantı destek tarafından geliştirilmiştir. Bu teknik insan gözünün içindeki fizyolojik koşullar altında in situ basınç yükselmesine yaşayan insan TM tepkisini ölçmek için ilk.

Bu veri toplama ve görüntü analiz teknikleri kullanılarak, örneğin SC kesit alanı olarak çıkış yolu morfolojik parametrelere IOP küçük ve büyük değişim etkileri (Şekil 1) elde edilir. Biz kesit alanında büyük bir azalma ile temsil edilen GİB artışı yüksek düzeyde, SC gözlemlenebilir çöküşünü üretmek olduğunu görebilirsiniz. Göz SC-CSA değişim olmaması (Şekil 1) ile kanıtlandığı gibi, GİB küçük artışlar karşılamak mümkün görünmek...

Watch this Scientific Journal Video about Trabecular Meshwork Response to Pressure Elevation in the Living Human Eye at JoVE.com

Trabecular Meshwork Response to Pressure Elevation in the Living Human Eye

Schlemm kanal uzaya trabeküler (TM) göç ophthalmodynamometer akut basınç yükselmesi tarafından uyarılan ve spektral domain optik koherens tomografi ile görülebilir. Bu yöntemin amacı, yerinde canlı dokularda akut basınç yükselmesine yaşayan çıkış yolu morfometrik tepkisini ölçmek için olduğunu.

Yaşayan İnsan Eye Basınç Artışı trabeküler Tepki

The mechanical characteristics of the trabecular meshwork (TM) are linked to outflow resistance and intraocular pressure (IOP) regulation. The rationale ...

trabecular-meshwork-response-to-pressure-elevation-living-human

Research

JoVE Journal

Medicine

9.9K Görüntüleme.  University of Pittsburgh School of Medicine.  Schlemm kanal uzaya trabeküler (TM) göç ophthalmodynamometer akut basınç yükselmesi tarafından uyarılan ve spektral domain optik koherens tomografi ile görülebilir. Bu yöntemin amacı, yerinde canlı dokularda akut basınç yükselmesine yaşayan çıkış yolu morfometrik tepkisini ölçmek için olduğunu. 

Video: Trabecular Meshwork Response to Pressure Elevation in the Living Human Eye

Experimental Glaucoma Induced by Ocular Injection of Magnetic Microspheres

Progress in understanding the pathophysiology, and providing novel treatments for glaucoma is dependent on good animal models of the disease. We present here a protocol for elevating intraocular pressure (IOP) in the rat, by injecting magnetic microspheres into the anterior chamber of the eye. The use of magnetic particles allows the user to manipulate the beads into the iridocorneal angle, thus providing a very effective blockade of fluid outflow from the trabecular meshwork. This leads to long-lasting IOP rises, and eventually neuronal death in the ganglion cell layer (GCL) as well as optic nerve pathology, as seen in patients with the disease. This method is simple to perform, as it does not require machinery, specialist surgical skills, or many hours of practice to perfect. Furthermore, the pressure elevations are very robust, and reinjection of the magnetic microspheres is not usually required unlike in some other models using plastic beads. Additionally, we believe this method is suitable for adaptation for the mouse eye.

We present a method for inducing elevated intraocular pressure (IOP), by injecting magnetic microspheres into the rat eye, to model glaucoma. This leads to strong pressure rises, and extensive neuronal death. This protocol is easy to perform, does not require repeat injections, and produces stable long-lasting IOP rises.

Deneysel Glokom Manyetik Mikrokürelerin Göz Enjeksiyon Bağlı

Progress in understanding the pathophysiology, and providing novel treatments for glaucoma is dependent on good animal models of the disease. We present ...

Tıp

A Magnetic Microbead Occlusion Model to Induce Ocular Hypertension-Dependent Glaucoma in Mice

The use of rodent models of glaucoma has been essential to understand the molecular mechanisms that underlie the pathophysiology of this multifactorial neurodegenerative disease. With the advent of numerous transgenic mouse lines, there is increasing interest in inducible murine models of ocular hypertension. Here, we present an occlusion model of glaucoma based on the injection of magnetic microbeads into the anterior chamber of the eye using a modified microneedle with a facetted bevel. The magnetic microbeads are attracted to the iridocorneal angle using a handheld magnet to block the drainage of aqueous humour from the anterior chamber. This disruption in aqueous dynamics results in a steady elevation of intraocular pressure, which subsequently leads to the loss of retinal ganglion cells, as observed in human glaucoma patients. The microbead occlusion model presented in this manuscript is simple compared to other inducible models of glaucoma and also highly effective and reproducible. Importantly, the modifications presented here minimize common issues that often arise in occlusion models. First, the use of a bevelled glass microneedle prevents backflow of microbeads and ensures that minimal damage occurs to the cornea during the injection, thus reducing injury-related effects. Second, the use of magnetic microbeads ensures the ability to attract most beads to the iridocorneal angle, effectively reducing the number of beads floating in the anterior chamber avoiding contact with other structures (e.g., iris, lens). Lastly, the use of a handheld magnet allows flexibility when handling the small mouse eye to efficiently direct the magnetic microbeads and ensure that there is little reflux of the microbeads from the eye when the microneedle is withdrawn. In summary, the microbead occlusion mouse model presented here is a powerful investigative tool to study neurodegenerative changes that occur during the onset and progression of glaucoma.

Here, we present a protocol to induce ocular hypertension in the murine eye that results in the loss of retinal ganglion cells as observed in glaucoma. Magnetic microbeads are injected into the anterior chamber and attracted to the iridocorneal angle using a magnet to block the outflow of aqueous humour.

Bir Manyetik microbead Oklüzyon Modeli Farelerde Glokom Oküler Hipertansiyon Bağımlı tetikleyebilecek

The use of rodent models of glaucoma has been essential to understand the molecular mechanisms that underlie the pathophysiology of this multifactorial ...

Glaucoma-inducing Procedure in an In Vivo Rat Model and Whole-mount Retina Preparation

Glaucoma is a disease of the central nervous system affecting retinal ganglion cells (RGCs). RGC axons making up the optic nerve carry visual input to the brain for visual perception. Damage to RGCs and their axons leads to vision loss and/or blindness. Although the specific cause of glaucoma is unknown, the primary risk factor for the disease is an elevated intraocular pressure. Glaucoma-inducing procedures in animal models are a valuable tool to researchers studying the mechanism of RGC death. Such information can lead to the development of effective neuroprotective treatments that could aid in the prevention of vision loss. The protocol in this paper describes a method of inducing glaucoma - like conditions in an in vivo rat model where 50 &#181;l of 2 M hypertonic saline is injected into the episcleral venous plexus. Blanching of the vessels indicates successful injection. This procedure causes loss of RGCs to simulate glaucoma. One month following injection, animals are sacrificed and eyes are removed. Next, the cornea, lens, and vitreous are removed to make an eyecup. The retina is then peeled from the back of the eye and pinned onto sylgard dishes using cactus needles. At this point, neurons in the retina can be stained for analysis. Results from this lab show that approximately 25% of RGCs are lost within one month of the procedure when compared to internal controls. This procedure allows for quantitative analysis of retinal ganglion cell death in an in vivo rat glaucoma model.

Glaucoma-inducing Procedure in an In Vivo Rat Model and Whole-mount Retina Preparation

Glaucoma is characterized by damage to retinal ganglion cells. Inducing glaucoma in animal models can provide insight into the study of this disease. Here, we outline a procedure that induces loss of RGCs in an in vivo rat model and demonstrates the preparation of whole-mount retinas for analysis.

Glokom uyaran bir de Prosedürü<em&gt; İn Vivo</em&gt; Rat Modeli ve Tüm montaj Retina Hazırlık

Glaucoma is a disease of the central nervous system affecting retinal ganglion cells (RGCs). RGC axons making up the optic nerve carry visual input to the ...

A Model of Glaucoma Induced by Circumlimbal Suture in Rats and Mice

The circumlimbal suture is a technique for inducing experimental glaucoma in rodents by chronically elevating intraocular pressure (IOP), a well-known risk factor for glaucoma. This protocol demonstrates a step-by-step guide on this technique in Long Evans rats and C57BL/6 mice. Under general anesthesia, a "purse-string" suture is applied on the conjunctiva, around the equator and behind the limbus of the eye. The fellow eye serves as an untreated control. Over the duration of our study, which was a period of 8 weeks for rats and 12 weeks for mice, IOP remained elevated, as measured regularly by rebound tonometry in conscious animals without topical anesthesia. In both species, the sutured eyes showed electroretinogram features consistent with preferential inner retinal dysfunction. Optical coherence tomography showed selective thinning of the retinal nerve fiber layer. Histology of the rat retina in cross-section found reduced cell density in the ganglion cell layer, but no change in other cellular layers. Staining of flat-mounted mouse retinae with a ganglion cell specific marker (RBPMS) confirmed ganglion cell loss. The circumlimbal suture is a simple, minimally invasive and cost-effective way to induce ocular hypertension that leads to ganglion cell injury in both rats and mice.

Chronic ocular hypertension is induced by applying a circumlimbal suture in rats and mice, leading to functional and structural deterioration of the retinal ganglion cells consistent with glaucoma.

Manken Circumlimbal dikiş sıçanlar ve fareler tarafından indüklenen glokom

The circumlimbal suture is a technique for inducing experimental glaucoma in rodents by chronically elevating intraocular pressure (IOP), a well-known ...

Translaminar Autonomous System Model for the Modulation of Intraocular and Intracranial Pressure in Human Donor Posterior Segments

There is a current unmet need for a new preclinical human model that can target disease etiology ex vivo using intracranial pressure (ICP) and intraocular pressure (IOP) which&#160;can identify various pathogenic paradigms related to the glaucoma pathogenesis. Ex vivo human anterior segment perfusion organ culture models have previously been successfully utilized and applied as effective technologies for the discovery of glaucoma pathogenesis and testing of therapeutics. Preclinical drug screening and research performed on ex vivo human organ systems can be more translatable to clinical research. This article describes in detail the generation and operation of a novel ex vivo human translaminar pressure model called the translaminar autonomous system (TAS). The TAS model can independently regulate ICP and IOP using human donor posterior segments. The model allows for studying pathogenesis in a preclinical manner. It can reduce the use of living animals in ophthalmic research. In contrast to in vitro experimental models, optic nerve head (ONH) tissue structure, complexity, and integrity can also be maintained within the ex vivo TAS model.

We describe and detail the use of the translaminar autonomous system. This system utilizes the human posterior segment to independently regulate the pressure inside the segment (intraocular) and surrounding the optic nerve (intracranial) to generate a translaminar pressure gradient that mimics features of glaucomatous optic neuropathy.

İnsan Donör Arka Segmentlerinde Göz İçi ve İntrakraniyal Basıncın Modülasyonu için Translaminer Otonom Sistem Modeli

There is a current unmet need for a new preclinical human model that can target disease etiology ex vivo using intracranial pressure (ICP) and intraocular ...

Nörobilim

Otomatik Sıkıştırma ile Domuz Oküler Lensinin Biyomekanik Karakterizasyonu

Automated Compression Testing of the Ocular Lens

The biomechanical properties of the ocular lens are essential to its function as a variable power optical element. These properties change dramatically with age in the human lens, resulting in a loss of near vision called presbyopia. However, the mechanisms of these changes remain unknown. Lens compression offers a relatively simple method for assessing the lens' biomechanical stiffness in a qualitative sense and, when coupled with appropriate analytical techniques, can help quantify biomechanical properties. A variety of lens compression tests have been performed to date, including both manual and automated, but these methods inconsistently apply key aspects of biomechanical testing such as preconditioning, loading rates, and time between measurements. This paper describes a fully automated lens compression test wherein a motorized stage is synchronized with a camera to capture the force, displacement, and shape of the lens throughout a preprogrammed loading protocol. A characteristic elastic modulus may then be calculated from these data. While demonstrated here using porcine lenses, the approach is appropriate for the compression of lenses of any species.

Yazar Spotlight: Yaşa Bağlı Lens Sertliği Değişikliklerinin Anlaşılmasını Geliştirmek 

We present an automated method for characterizing the effective elastic modulus of an ocular lens using a compression test.

Oküler lensin otomatik kompresyon testi

The biomechanical properties of the ocular lens are essential to its function as a variable power optical element. These properties change dramatically ...

Biyomühendislik

Full-Circle Cauterization of Limbal Vascular Plexus for Surgically Induced Glaucoma in Rodents

Glaucoma, the second leading cause of blindness worldwide, is a heterogeneous group of ocular disorders characterized by structural damage to the optic nerve and retinal ganglion cell (RGC) degeneration, resulting in visual dysfunction by interrupting the transmission of visual information from the eye to the brain. Elevated intraocular pressure is the most important risk factor; thus, several models of ocular hypertension have been developed in rodents by either genetic or experimental approaches to investigate the causes and effects of the disease. Among those, some limitations have been reported such as surgical invasiveness, inadequate functional assessment, requirement of extensive training, and highly variable extension of retinal damage. The present work characterizes a simple, low-cost, and efficient method to induce ocular hypertension in rodents, based on low-temperature, full-circle cauterization of the limbal vascular plexus, a major component of aqueous humor drainage. The new model provides a technically easy, noninvasive, and reproducible subacute ocular hypertension, associated with progressive RGC and optic nerve degeneration, and a unique post-operative clinical recovery rate that allows in vivo functional studies by both electrophysiological and behavioral methods.

The goal of this protocol is to characterize a novel model of glaucomatous neurodegeneration based on 360&#176; thermic cauterization of limbal vascular plexus, inducing subacute ocular hypertension.

Kemirgenlerde Cerrahi Olarak İndüklenen Glokom için Limbal Vasküler Pleksusun Tam Daire Koterizasyonu

Glaucoma, the second leading cause of blindness worldwide, is a heterogeneous group of ocular disorders characterized by structural damage to the optic ...

Laser Capture Microdissection of Highly Pure Trabecular Meshwork from Mouse Eyes for Gene Expression Analysis

Laser capture microdissection (LCM) has allowed gene expression analysis of single cells and enriched cell populations in tissue sections. LCM is a great tool for the study of the molecular mechanisms underlying cell differentiation and the development and progression of various diseases, including glaucoma. Glaucoma, which comprises a family of progressive optic neuropathies, is the most common cause of irreversible blindness worldwide. Structural changes and damage within the trabecular meshwork (TM) can result in increased intraocular pressure (IOP), which is a major risk factor for developing glaucoma. However, the precise molecular mechanisms involved are still poorly understood. The ability to perform gene expression analysis will be crucial in obtaining further insights into the function of these cells and its role in the regulation of IOP and glaucoma development. To achieve this, a reproducible method for isolating highly enriched TM from frozen sections of mouse eyes and a method for downstream gene expression analysis, such as RT-qPCR and RNA-Seq is needed. The method described herein is developed to isolate highly pure TM from mouse eyes for downstream digital PCR and microarray analysis. In addition, this technique can be easily adapted for the isolation of other highly enriched ocular cells and cell compartments that have been difficult to isolate from mouse eyes. The combination of LCM and RNA analysis can contribute to a more comprehensive understanding of the cellular events underlying glaucoma.

Here, we describe a protocol for a reproducible laser capture microdissection (LCM) for isolating trabecular meshwork (TM) for downstream RNA analysis. The ability to analyze changes in gene expression in the TM will help in understanding the underlying molecular mechanisms of TM-related ocular diseases.

Lazer yakalama mikrodiseksiyon son derece saf trabeküler Meshwork gen ifade analizi için fare gözlerinden

Laser capture microdissection (LCM) has allowed gene expression analysis of single cells and enriched cell populations in tissue sections. LCM is a great ...

Yaşayan İnsan Eye Basınç Artışı trabeküler Tepki

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler

Deneysel Glokom Manyetik Mikrokürelerin Göz Enjeksiyon Bağlı

Bir Manyetik microbead Oklüzyon Modeli Farelerde Glokom Oküler Hipertansiyon Bağımlı tetikleyebilecek

Glokom uyaran bir de Prosedürü

Manken Circumlimbal dikiş sıçanlar ve fareler tarafından indüklenen glokom

İnsan Donör Arka Segmentlerinde Göz İçi ve İntrakraniyal Basıncın Modülasyonu için Translaminer Otonom Sistem Modeli

Oküler lensin otomatik kompresyon testi

Oküler lensin otomatik kompresyon testi

Oküler lensin otomatik kompresyon testi

Kemirgenlerde Cerrahi Olarak İndüklenen Glokom için Limbal Vasküler Pleksusun Tam Daire Koterizasyonu

Lazer yakalama mikrodiseksiyon son derece saf trabeküler Meshwork gen ifade analizi için fare gözlerinden