Biz seyreltme ve pestisit formülasyonu yardım için Molly stedfast teşekkür ederiz. Biz de deneysel tasarım ile ilgili yardım için probit analizi rehberliği için Troy Anderson ve Zachary Adelman teşekkür ederiz. Bu araştırma kısmen Entomoloji Vakfı ödülü ile ve Virginia Zararlı Yönetimi burs fonları tarafından desteklenmiştir.

NOT: Bu protokol ayrıca yatak böcek yumurta ve ilk instars tedavisi için iki insektisit testlerini içerir. Her iki protokol aynı böcek kullanılarak yapılmıştır, ancak protokoller insektisit pozlama sağlamak ve kolayca örnekleri işlemek için adapte edilmesi gerekiyordu. 1. Yumurta Daldırma Böcek Deneyi <ol><li> Bir koloniden evlendirilen, iyi beslenmiş yetişkin dişi yatak hataların çekin ve filtre kağıdı ile bir Petri kabı içine dişileri (5-10) yerleştirin. insektisit tayini için yeterli yumurta var olmasını sağlamak için en az on çoğaltır var. kadın her gün yumurta koydu olmadığını kontrol edin. <ol><li> Onlar yumurtalarını sonra, Petri kabı (6 cm x 5 cm) dışında kadın almak ve günlük yeni bir filtre kağıdı ile yeni Petri kapları içine koydu ve eski ve yeni Petri kapları tarih kaydedin. </li><li> Deneye başlamadan önce 5 gün 4 yaşına yumurta izin verin. embriyonik gelişim sırasında insektisitler değişikliklere duyarlılığı, so yumurta yaş için kontrol etmek önemlidir. D fotoperiyot,% 60 RH ve 27 ° C: 12:12 L tüm yaşam evrelerini tutun. </li></ol></li><li> Yumurta uygun yaş sonra, yumuşak uçlu forseps kullanılarak filtre kağıtları yavaşça yatak böcek yumurta kaldırmak. Yavaşça forseps kullanarak filtre kağıdı bağlı yumurta dibine vurma ve sonra yavaşça atma yatak böcek yumurtalarını sınırlamak için yumurta üzerine fazla baskı uygulamadan yakala. </li><li> içinde plastik Petri yemekleri kendi grupları içinde kaldırılır yatak hata yumurta yerleştirin. Bir kumaş yumuşatıcı levha ile dışarıdan her Petri kabı alt sürterek bed bug yumurta flinging statik elektriği sınırlayın. tek seferde yatak böcek yumurtalarının muamele grupları (grup başına 5-10 yumurta). bir grup bir kopyalayan düşünün ve bu deney için çoğaltır en az beş (veya daha fazla) kullanın. </li><li> 5 farklı konsantrasyonda (bir dizi elde etmek için insektisitlerin seri dilüsyonları Hazırlama 0,21-21 ul / ml imidakloprid (% 0.1) / β-siflutrin (% 0.5) ve kontrol içinÇözücü (musluk suyu) ile çözüm sadece. Daldırma deneyi için yeterli hacim, her bir konsantrasyonun 20 mL sağlayın. </li><li> 35 mL çizgisinde Kesme santrifüj tüpleri (50 ml) medial bir kesme diski aksesuarı ile bir döner alet ve bir santrifüj tüpüne (çap = 2.54 cm) bir alüminyum ile aynı döner alet kap içine bir delik oksit taş aksesuarını taşlama. Kapağı sıkıca boru (Şekil 1) içine vida, böylece keserken kapağın kenarında 5 cm bırakın. </li><li> Kap içine sığacak kadar büyük kareler halinde ince örgü Cut (~ 5 cm 2). santrifüj tüp kapağı kullanılarak santrifüj tüplerine, herhangi bir darbe ortadan kaldırarak, sıkıca örgü vidalayın. </li><li> santrifüj tüpünün içine örgü üzerine boya fırçası kullanarak yatak böcek yumurta bir grup (bir çoğaltma) yerleştirin. 5 saniye boyunca bir insektisit konsantrasyonu içine kesilmiş santrifüj tüpünün içinde yatak hataların grup batırın. </li><li> th dışında santrifüj tüpü çıkarıne insektisit çözüm. içinde bir laboratuvar doku üzerine doğrudan santrifüj tüpü yerleştirerek yumurta ile örgü kurulayın. </li><li> Küçük, ince kıl boya fırçası kullanarak santrifüj tüpünün dışında yumurta grubu kaldırmak ve temiz bir filtre kağıdı ile temiz bir Petri Dish içine koyun. </li><li> Tutanak yumurta ölüm bütün yumurtaları sağlamak için 14 gün boyunca (yumurtadan başarısızlık) yumurtadan için yeterli zaman vardı. </li><li> Abbott formülü (-% kontrol mortalite / 100 - Kontrol ölüm x% 100 test mortalite) kullanarak kontrol tedavisinde mortalite için doğru. </li><li> LC 50 değerleri hesaplamak için analiz yazılımı 15 içine gelen konsantrasyonları ile kaydedilen mortalite yerleştirin. </li></ol> 2. İlk Evre Böcek Deneyi <ol><li> tercihen 1 gün önce beslenen, iyi beslenmiş yatak böcek (5 yetişkin erkek ve 5 yetişkin kadın) bir grup ayırın ve matin için sağlanan filtre kağıdı ile bir Petri kabındaki (6 cm x 5 cm) içine koyung ve yumurtlama. yetişkin yatak böcek dostum ve yaklaşık 7-9 gün süreyle yumurtalarını bırakmak için izin verin. Beslenmesi için kan 16 çevreleyen cam tüplerde sıcak su dolaşır bir yapay besleme sistemi kullanın. Bu çalışma için, defibronated tavşan kanı kullanın. </li><li> Petri gelen yetişkin (5 cm x 6 cm) çıkartın ve yumurta Petri içinde ilk instars içine yumurtadan izin verin. yatak hata yumurta, oda sıcaklığında yumurtadan için yaklaşık 7-9 gün sürer. </li><li> Bir boya fırçası kullanılarak aynı yaştaki beslenmemiş ilk instars toplayın. Yaş onlar yumurtadan gün günlük ilk instars kaldırarak ve kayıt ile tespit edilebilir. insektisit tahlil kadar yeni, temiz Petri kapları içine koyun. insektisit tahlil kısa sürede tamamlanması gerektiğini, böylece ilk evre perileri, dayanıklı çok kurutucu değildir. </li><li> Tahlil için, 5 farklı konsantrasyonda ve bir kontrol Solu bir dizi elde etmek için imidakloprid / p-siflutrin seri dilüsyonları hazırlanmasıSolvent yalnızca yon. Amerika Birleşik Devletleri yatak böcek kontrolü için etiketli formüle edilmiş ürünler, bu nedenle bir çözücü (etikete göre olan su) bu çalışmalar için kullanılmıştır. </li><li> Pipet ayrı ayrı filtre kağıtları üzerine, kontrol grubunda her bir insektisit konsantrasyonu ile su ve 150 uL tam bölünen miktarları (# 1, 4.2 cm çapında). filtre kağıdı tüm kenarı ve merkezi etrafında damlacıkları uygulayarak pipetter kullanarak tüm filtre kağıdının üzerine insektisit dağıtın. </li><li> Bireysel sunta paneller (7 cm 2) üstünde ayrı ayrı işlenmiş filtre kağıtları yerleştirin. </li><li> durumdayken insektisit ile ıslak ve bir Petri tabağına ters bir alt birinci instars kapağı ayrı ayrı filtre kağıtları üzerine ilk instars salınımı grupları (grup başına 5 ila 10). </li><li> işlenmiş yüzeyi kaçan ilk evre yatak hataların önlenmesi için Petri kabı üstünde bir ağırlık koyun. </li><li> Tüm 24 saat maruz bırakıldıktan sonra ilk evre yatak hataların rekor ölüminsektisit konsantrasyonları. </li><li> Abbott formülü (-% kontrol mortalite / 100 - Kontrol ölüm x% 100 test mortalite) kullanarak kontrol tedavisinde mortalite için doğru. </li><li> LC 50 değerleri hesaplamak için analiz yazılımı 15 içine kaydedilen mortalite ve konsantrasyonları yerleştirin. </li></ol>

<ol><li>Sabou, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bed+bugs+reproductive+life+cycle+in+the+clothes+of+a+patient+suffering+from+Alzheimer%27s+disease+results+in+iron+deficiency+anemia%5BTitle%5D)+AND+%22Parasite%22%5BJournal%5D)">Bed bugs reproductive life cycle in the clothes of a patient suffering from Alzheimer's disease results in iron deficiency anemia.</a> Parasite. 20, (2013).</li>
<li>Reinhardt, K., Kempke, D., Naylor, R. A., Siva-Jothy, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensitivity+to+bites+by+the+bedbug%2C+Cimex+lectularius%5BTitle%5D)+AND+%22Med.+Vet.+Entomol%22%5BJournal%5D)">Sensitivity to bites by the bedbug, Cimex lectularius.</a> Med. Vet. Entomol. 23, 163-166 (2009).</li>
<li>Leverkus, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bullous+allergic+hypersensitivity+to+bed+bug+bites+mediated+by+IgE+against+salivary+nitrophorin%5BTitle%5D)+AND+%22J.+invest.+entomol%22%5BJournal%5D)">Bullous allergic hypersensitivity to bed bug bites mediated by IgE against salivary nitrophorin.</a> J. invest. entomol. 126, 91-96 (2006).</li>
<li>Fletcher, C. L., Ardern-Jones, M. R., Hay, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Widespread+bullous+eruption+due+to+multiple+bed+bug+bites%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Exp.+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Widespread bullous eruption due to multiple bed bug bites.</a> Clin. Exp. Dermatol. 27, 74-75 (2002).</li>
<li>Pritchard, M. J., Hwang, S. W. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2734207/">Severe anemia from bedbugs.</a> Can. Med. Assoc. J. 181, 287-288 (2009).</li>
<li>Goddard, J., de Shazo, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Psychological+effects+of+bed+bug+attacks+%28Cimex+lectularius+L%29%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Med%22%5BJournal%5D)">Psychological effects of bed bug attacks (Cimex lectularius L).</a> Am. J. Med. 125, 101-103 (2012).</li>
<li>Harlan, H. J. <a target="_blank" href="https://www.researchgate.net/publication/263133743_Bed_Bugs_101_the_Basics_of_Cimex_lectularius">Bed bugs 101: the basics of Cimex lectularius.</a> Am. Entomol. 52, 99-101 (2006).</li>
<li>Pinto, L. J., Cooper, R., Kraft, S. K. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPinto%2C+LJ+%22Bed+Bug+Handbook%3A+The+Complete+Guide+to+Bed+Bugs+and+Their+Control%22">Bed Bug Handbook: The Complete Guide to Bed Bugs and Their Control</a>. , Pinto & Associates, Inc.. Mechanicsville, MD, USA. (2007).</li>
<li>Toloza, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+patterns+of+insecticide+resistance+in+eggs+and+first+instars+of+Triatoma+infestans+%28Hemiptera%3A+Reduviidae%29+from+Argentina+and+Bolivia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Med.+Entomol%22%5BJournal%5D)">Differential patterns of insecticide resistance in eggs and first instars of Triatoma infestans (Hemiptera: Reduviidae) from Argentina and Bolivia.</a> J. Med. Entomol. 45, 421-426 (2008).</li>
<li>Cueto, G. M., Zerba, E. N., Picollo, M. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+of+pyrethroid+resistance+in+eggs+of+Pediculus+humanus+capitis+%28Phthiraptera%3A+Pediculidae%29+from+Argentina%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Med.+Entomol%22%5BJournal%5D)">Evidence of pyrethroid resistance in eggs of Pediculus humanus capitis (Phthiraptera: Pediculidae) from Argentina.</a> J. Med. Entomol. 45, 693-697 (2008).</li>
<li>Ho, S. H., Goh, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deltamethrin+as+a+potential+ovicidal+pyrethroid+against+Plutella+xylostella+L%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol.+let%22%5BJournal%5D)">Deltamethrin as a potential ovicidal pyrethroid against Plutella xylostella L.</a> Toxicol. let. 22, 161-164 (1984).</li>
<li>Bell, C. H., Hole, B. D., Evans, P. H. The occurrence of resistance to phosphine in adult and egg stages of strains of Rhyzopertha dominica (F.)(Coleoptera: Bostrichidae). J. Stored Prod. Res. 13, 91-94 (1977).</li>
<li>Campbell, B. E., Miller, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insecticide+Resistance+in+Eggs+and+First+Instars+of+the+Bed+Bug%2C+Cimex+lectularius+%28Hemiptera%3A+Cimicidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Insects%22%5BJournal%5D)">Insecticide Resistance in Eggs and First Instars of the Bed Bug, Cimex lectularius (Hemiptera: Cimicidae).</a> Insects. 6, 122-132 (2015).</li>
<li>Price, L. A., Mills, K. A. <a target="_blank" href="http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/0022474X88900082">The toxicity of phosphine to the immature stages of resistant and susceptible strains of some common stored product beetles, and implications for their control.</a> J. Stored Prod. Res. 24, 51-59 (1988).</li>
<li>Robertson, J. L., Preisler, H. K., Russel, R. M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aRobertson%2C+JL+%22PoloPlus%3A+Probit+and+Logit+Analysis+User%27s+Guide%22">PoloPlus: Probit and Logit Analysis User's Guide</a>. , LeOra Software. Petaluna, CA, USA. (2003).</li>
<li>Montes, C., Cuadrillero, C., Vilella, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maintenance+of+a+laboratory+colony+of+Cimex+lectularius+%28Hemiptera%3A+Cimicidae%29+using+an+artificial+feeding+technique%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Med.+Entomol%22%5BJournal%5D)">Maintenance of a laboratory colony of Cimex lectularius (Hemiptera: Cimicidae) using an artificial feeding technique.</a> J. Med. Entomol. 39, 675-679 (2002).</li>
<li>Brogdon, W. G., McAllister, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simplification+of+adult+mosquito+bioassays+through+use+of+time-mortality+determinations+in+glass+bottles%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Mosq.+Control.+Assoc%22%5BJournal%5D)">Simplification of adult mosquito bioassays through use of time-mortality determinations in glass bottles.</a> J. Am. Mosq. Control. Assoc. 14, 159-164 (1998).</li>
<li>Katarzyna, K., Saddler, A., Koella, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+age+and+larval+nutrition+on+phenotypic+expression+of+insecticide-resistance+in+Anopheles+mosquitoes%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Effects of age and larval nutrition on phenotypic expression of insecticide-resistance in Anopheles mosquitoes.</a> PLoS One. 8 (3), (2013).</li>
<li>Outram, I. <a target="_blank" href="https://www.researchgate.net/publication/248283593_Factors_affecting_the_resistance_of_insect_eggs_to_sulphuryl_fluoride-I_The_uptake_of_sulphuryl-35S_fluoride_by_insect_eggs">Factors affecting the resistance of insect eggs to sulphuryl fluoride-II: the distribution of sulphuryl-35 S fluoride in insect eggs after fumigation.</a> J. Stored. Prod. Res. 3, 353-358 (1967).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.

A critical step in this assay is to ensure that no eggs that are removed from a surface are damaged prior to the assay. Many insects cement their eggs to a substrate, therefore, a preliminary test may be needed to ensure that removal does not cause mortality. This test can be conducted with several replications of a treated group (bed bugs removed from filter paper) compared to a control group (bed bugs not removed). Similar low rates of mortality (or no mortality) between the treated and control group will ensure that ...

Yatak hataların insan konaklar 1, 2, 3, 4, 5, 6 kan kaybı, cilt tahrişleri, uykusuzluk, depresyon, ve anksiyete neden olabilir önemli bir kentsel haşere vardır. Yatak hataların ortadan kaldırılması ve kontrol maliyetleri yüksek ve çoğu kez bir haşere kontrol firması 7 tarafından bir eve birden fazla ziyaret gerektirir. Birden fazla ziyaret nedeniyle genellikle yatak hataların şifreli davranış ve onları öldürerek ile ilişkili zorluklar gereklidir. Özellikle, yatak böcek Yumurtalar, küçük boyutları ve yumurta kabuğu embriyo koruma kontrol etmek zordur. Şu anda, Amerika Birleşik Devletleri boyunca birçok haşere kontrol şirketleri için ortak bir uygulama, bir kimyasal böcek ilacı kullanan yatak böcek için bir ev tedavi etmektir. BilindikYumurta kontrol etmek zor olduğunu, bu nedenle birçok şirket yeniden tedaviler 8 için iki haftalık bir zaman diliminde hayata geçirdik. İlk evre ortaya ve ileri sürülen böcek ile öldürmek daha kolay olacak, böylece bu yatak böcek yumurta yumurtadan için yeterli zaman sağlar. Ancak, yatakta böcek yumurta ve ilk instars karşı sıvı insektisitlerin etkinliğini değerlendiren çalışmalarda bir eksiklik olduğunu. Böcek yumurtaları birçok tarım zararlılarının yanı sıra, yatak hataların dışında kentsel böcek zararlılarına kontrol edilmesi en zor yaşam evresi olmak belgelenmiştir. birkaç çalışma insektisit direnci rapor ederken, bu zorlukların çoğu, yumurta kabuğu atfedilmiştir. Yumurta aşamasında direnç, Plutella 11 xylostetla 10 capitis Triatoma infestans 9 Pediculus humanus içinde Rhyzopertha Dominica 12 belgelenmiştir <em&gt; Cımex lectularius 13, ve birden fazla depolanmış ürün böcekleri (yani Oryzaephilus surinamensis, Tribolium castaneum, Cryptolestes ferrugineus ve Rhyzopertha dominica). 14 kabuğu ile insektisit penetrasyonu ile ilişkili yumurta aşamasında ve olgunlaşmamış aşamaları yanı sıra komplikasyonlar direnç gelişimi, bu yaşam evrelerinde karşı insektisit etkinliği biyoanalizlere ihtiyacını zorunlu kılmaktadır. Bu protokol ortak yatak hataların yumurta ve birinci instar aşamasında insektisit etkinliğini belirlemek için bir adım-adım yordam sağlar, Cımex lectularius. Bu protokollerin iki LC50 değerlerinin miktarını belirlemek için konsantrasyon-yanıt deneyleri bulunmaktadır. Konsantrasyon-tepki deneyleri genellikle, ancak bu protokolü kolay yatak böcek yumurta ve birinci instars grupları tedavi etmek için adapte edilmiştir, toksikolojik çalışmalar için kullanılmıştır. Bu deneyler, uyarlanabilirÇeşitli böcek türlerin yumurta ve olgunlaşmamış yaşam evrelerinde.

<table><tbody><tr><td>Petri dishes</td><td>Fisher Scientific Inc.</td><td>08-757-105</td><td>Plastic</td></tr><tr><td>Filter paper</td><td>Whatman</td><td>1001-042</td><td></td></tr><tr><td>Featherweight forceps</td><td>Fisher Scientific Inc.</td><td>4750</td><td></td></tr><tr><td>Temprid SC (imidacloprid/bifenthrin)</td><td>Bayer CropScience</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Transport GHP (acetamiprid/bifenthrin)</td><td>FMC Corp.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Centrifuge tube</td><td></td><td>06-443-18</td><td>50 mL; flat-top threaded</td></tr><tr><td>Fine mesh</td><td></td><td>7250C</td><td></td></tr><tr><td>KimWipe</td><td></td><td>06-666A</td><td>11 cm x 21 cm</td></tr><tr><td>Small paint brush</td><td></td><td></td><td>Any small paint brush</td></tr><tr><td>Hardboard panels</td><td></td><td></td><td>Composite wood or tile would be sufficient from a home improvement store</td></tr><tr><td>Metal weights</td><td></td><td></td><td>Any type of metal screw that will hold the weight of the Petri dish down onto a surface</td></tr></tbody></table>

a method for evaluating insecticide efficacy against bed bug, cimex lectularius, eggs and first instars

Böcek zararlılarına karşı böcek standart toksisite değerlendirmeleri öncelikle yetişkin böcekler üzerinde yapılmaktadır. Değerlendirme bir doz veya bir insektisit konsantrasyonu mortalite de artar bir doz-yanıt veya konsantrasyon-tepki eğrisi, dayanmaktadır. Standart öldürücü konsantrasyon (LC 50) ve öldürücü doz (LD 50) bir test nüfusun% 50 mortalite neden testler, yumurta ve erken instar veya nimf evrelerinde olarak yetişkin olmayan böcek yaşam evrelerinde karşı böcek, toksisitesini değerlendirmek için zor olabilir . Ancak bu bilgiler kontrol ve tedavi çalışmalarını etkileyen tüm yatak böcek yaşam evrelerinde insektisit etkinliği, anlamak için çok önemlidir. Bu protokol yatak hata yumurta için modifiye standart daldırma biyoassay ve nimf ilk instars tedavisi için bir temas böcek öldürücü tahlil kullanır. Bu deneyler, daha insektisit değerlendirmeler için LC50 değerlerinin belirlenmesi için, bir konsantrasyon-yanıt eğrisi oluşturur.

Yumurta imidakloprid / p-siflutrin 5 farklı konsantrasyonda (mL / mL) içine daldırılmıştır. İlk instars imidakloprid / p-siflutrin, beş farklı konsantrasyonda (Şekil 2) ile muamele edilen yüzeyler üzerinde yerleştirilmiştir. Harlan, Richmond, ve Epic Merkezi (Tablo 1): Biz C. lectularius üç farklı popülasyonlar kullanılır. Harlan suşu piretroid insek...

Watch this Scientific Journal Video about A Method for Evaluating Insecticide Efficacy against Bed Bug,  Cimex lectularius, Eggs and First Instars at JoVE.com

A Method for Evaluating Insecticide Efficacy against Bed Bug,  Cimex lectularius, Eggs and First Instars

İnsektisit değerlendirmeler genellikle yetişkin böcekler yerine olgunlaşmamış aşamalarında karşı hedeflenir. Burada, ilk nimf yatak böcek aşamasına bir karşılaştırma ile yatak hata yumurta karşı böcek değerlendirmek için bir protokol mevcut. Bu protokoller, yetişkin olmayan yaşam evrelerinde insektisit etkinliğini değerlendirmek için başka böcekler için ayarlanabilir.

Yatak Bug karşı Böcek etkinliğini değerlendirmek için bir yöntem,<em&gt; Cımex lectularius</em&gt; Yumurta ve İlk instars

Standard toxicity evaluations of insecticides against insect pests are primarily conducted on adult insects. Evaluations are based on a dose-response or ...

a-method-for-evaluating-insecticide-efficacy-against-bed-bug-cimex

Research

JoVE Journal

Environment

A Method for Evaluating Insecticide Efficacy against Bed Bug, Cimex lectularius, Eggs and First Instars

11.3K Görüntüleme.  University of Florida.  İnsektisit değerlendirmeler genellikle yetişkin böcekler yerine olgunlaşmamış aşamalarında karşı hedeflenir. Burada, ilk nimf yatak böcek aşamasına bir karşılaştırma ile yatak hata yumurta karşı böcek değerlendirmek için bir protokol mevcut. Bu protokoller, yetişkin olmayan yaşam evrelerinde insektisit etkinliğini değerlendirmek için başka böcekler için ayarlanabilir. 

Video: A Method for Evaluating Insecticide Efficacy against Bed Bug,  Cimex lectularius, Eggs and First Instars

A Technique to Screen American Beech for Resistance to the Beech Scale Insect (Cryptococcus fagisuga Lind.)

Beech bark disease (BBD) results in high levels of initial mortality, leaving behind survivor trees that are greatly weakened and deformed.&#160;The disease is initiated by feeding activities of the invasive beech scale insect, Cryptococcus fagisuga, which creates entry points for infection by one of the Neonectria species of fungus.&#160;Without scale infestation, there is little opportunity for fungal infection. Using scale eggs to artificially infest healthy trees in heavily BBD impacted stands demonstrated that these trees were resistant to the scale insect portion of the disease complex1.&#160;Here we present a protocol that we have developed, based on the artificial infestation technique by Houston2, which can be used to screen for scale-resistant trees in the field and in smaller potted seedlings and grafts.&#160;The identification of scale-resistant trees is an important component of management of BBD through tree improvement programs and silvicultural manipulation.

A Technique to Screen American Beech for Resistance to the Beech Scale Insect Cryptococcus fagisuga Lind.

Beech bark disease is initiated by feeding activities of the beech scale insect that create fungal entry points in the bark.&#160;Trees that are resistant to the scale insect are also disease resistant.&#160;Here we present the protocol we have developed to screen individual beech trees for beech scale resistance.

Kayın Ölçek Böcek Direnç Amerikan kayını (Screen A Tekniği<em&gt; Cryptococcus fagisuga</em&gt; Lind.)

Beech bark disease (BBD) results in high levels of initial mortality, leaving behind survivor trees that are greatly weakened and deformed.&#160;The ...

Çevre

Functional Characterization of Carboxylesterases in Insecticide Resistant House Flies, Musca Domestica

Carboxylesterase-mediated metabolism is thought to play a major role in insecticide resistance in various insects. Several carboxylesterase genes were found up-regulated in the resistant house fly strain, whereas their roles in conferring insecticide resistance remained to be explored. Here, we designed a protocol for the functional characterization of carboxylesterases. Three example experiments are presented: (1) expression and isolation of carboxylesterase proteins through a baculovirus-mediated insect Spodoptera frugiperda (Sf9) cell expression system; (2) a cell-based MTT (3-[4, 5-dimethykthiazol-2-yl]-2, 5-diphenyltetrazolium bromide) cytotoxicity assay to measure the tolerance of insect cells to different permethrin treatments; and (3) in vitro metabolic studies to explore the metabolic capabilities of carboxylesterases toward permethrin. The carboxylesterase gene Md&#945;E7 was cloned from a resistant house fly strain ALHF and used to construct a recombinant baculovirus for Sf9 cells infection. The cell viabilities against different permethrin treatments were measured with the MTT assay. The enhanced cell tolerance of the experimental group (Md&#945;E7-recombinant baculovirus infected cells) compared with those of the control groups (CAT-recombinant baculovirus infected cells and GFP-recombinant baculovirus infected cells) to permethrin treatments suggested the capabilities of Md&#945;E7 in metabolizing insecticides, thereby protecting cells from chemical damages. Besides that, carboxylesterase proteins were expressed in insect Sf9 cells and isolated to conduct an in vitro metabolic study. Our results indicated a significant in vitro metabolic efficiency of Md&#945;E7 toward permethrin, directly indicating the involvement of carboxylesterases in metabolizing insecticides and thus conferring insecticide resistance in house flies.

Functional Characterization of Carboxylesterases in Insecticide Resistant House Flies, Musca Domestica

Here, we present a protocol to produce house fly carboxylesterase proteins in vitro with a baculovirus mediated insect cell expression system and later functionally characterize their roles in metabolizing permethrin, thereby, conferring pyrethroid resistance by conducting cell-based MTT assay and in vitro metabolic studies.

Carboxylesterases böcek ilacı dayanıklı ev sinekleri, sinek Domestica içinde işlevsel karakterizasyonu

Carboxylesterase-mediated metabolism is thought to play a major role in insecticide resistance in various insects. Several carboxylesterase genes were ...

Biyokimya

Methodology to Test Control Agents and Insecticides Against the Coffee Berry Borer Hypothenemus hampei

Prior to recommending insecticides to treat the coffee berry borer (CBB) Hypothenemus hampei, it is valuable to know the mortality and repellency of these insecticides against adult insects or their impact on reproductive output. However, currently available methods assess adult mortality only, limiting the selection of novel insecticides with a different mode of action. In this work, different experimental methods were examined to identify the diverse effects on the CBB under laboratory conditions. For this, green coffee fruits (GFs) were collected and disinfected by immersion in sodium hypochlorite solution followed by UV light irradiation. In parallel, CBB adults from a colony were disinfected by immersion in sodium hypochlorite solution. To assess fruit protection (preinfestation), the fruits were placed in plastic boxes, and the insecticides were applied. Then, the CBB adults were released at a rate of two CBBs per GF. The GFs were left under controlled conditions to evaluate CBB infestation and survival after 1, 7, 15, and 21 days. To evaluate insecticide efficacy after CBB infestation (postinfestation), CBB adults were released to the GFs in a 2:1 ratio for 3 h at 21 &#176;C. Infested fruits showing CBB adults with their abdomens partially exposed were selected and placed in 96-well racks, and the CBBs boring into the fruits were treated directly. After 20 days, the fruits were dissected, and the CBB biological stages inside each fruit were recorded. The GFs served as substrates that mimic natural conditions to evaluate toxic, chemical, and biological insecticides against the CBB.

Methodology to Test Control Agents and Insecticides Against the Coffee Berry Borer Hypothenemus hampei

A method using green coffee fruits (GFs) was developed to test the toxicity of insecticides against the coffee berry borer (CBB). Insecticides or toxic substances were applied to disinfected GFs before or after CBB infestation. Insect mortality, repellency, and reproductive capacity, in addition to other parameters, were evaluated.

Kontrol Ajanlarını ve İnsektisitleri Kahve Berry Borer Hypothenemus hampei'ye Karşı Test Etme Metodolojisi

Prior to recommending insecticides to treat the coffee berry borer (CBB) Hypothenemus hampei, it is valuable to know the mortality and repellency of these ...

Evaluating the Effect of Pesticides on the Larvae of the Solitary Bees

Current ecological risk assessments of pesticides on pollinators have primarily considered only laboratory conditions. For the larvae of solitary bees, ingestion of provisions contaminated with pesticides may increase the mortality rate of the larvae, decrease the collection rate and the population of adult solitary bees in the next year from a demographic perspective. But there are limited studies on the effects of pesticides on the larvae of solitary bees. Therefore, understanding how pesticides influence the larvae of solitary bees should be considered an integral part of pesticide ecological risk assessment. This study presents a method to expose the larvae of solitary bee, Osmia excavata, to lethal or sublethal doses of pesticide, tracking larval weight gain, developmental duration, eclosion ability, and food consumption efficiency conversion of ingested food. To demonstrate the effectiveness of this method, the larvae of O. excavata were fed with provisions containing acute lethal and sublethal doses of chlorpyrifos. Then, the above indexes of the treated larvae were investigated. This technique helps to predict and mitigate the risk of pesticides to pollinators.

The present protocol explains a method to feed pesticide-contaminated provisions to the larvae of the solitary bees, Osmia excavata. The procedure examines the ecotoxicity of the pesticide to the larvae of the solitary bees.

Pestisitlerin yalnız arıların larvaları üzerindeki etkisinin değerlendirilmesi

Current ecological risk assessments of pesticides on pollinators have primarily considered only laboratory conditions. For the larvae of solitary bees, ...

Bioassays for Monitoring Insecticide Resistance

Pest resistance to pesticides is an increasing problem because pesticides are an integral part of high-yielding production agriculture. When few products are labeled for an individual pest within a particular crop system, chemical control options are limited. Therefore, the same product(s) are used repeatedly and continual selection pressure is placed on the target pest. There are both financial and environmental costs associated with the development of resistant populations. The cost of pesticide resistance has been estimated at approximately $ 1.5 billion annually in the United States. This paper will describe protocols, currently used to monitor arthropod (specifically insects) populations for the development of resistance. The adult vial test is used to measure the toxicity to contact insecticides and a modification of this test is used for plant-systemic insecticides. In these bioassays, insects are exposed to technical grade insecticide and responses (mortality) recorded at a specific post-exposure interval. The mortality data are subjected to Log Dose probit analysis to generate estimates of a lethal concentration that provides mortality to 50% (LC50) of the target populations and a series of confidence limits (CL's) as estimates of data variability. When these data are collected for a range of insecticide-susceptible populations, the LC50 can be used as baseline data for future monitoring purposes. After populations have been exposed to products, the results can be compared to a previously determined LC50 using the same methodology.

This manuscript demonstrates and discusses techniques used to survey pesticide susceptibility and detect resistance to contact and systemic pesticides in arthropod pests.

İnsektisit Direnci İzleme için biyoanalizlere

Pest resistance to pesticides is an increasing problem because pesticides are an integral part of high-yielding production agriculture. When few products ...

Biyoloji

Using Single Sensillum Recording to Detect Olfactory Neuron Responses of Bed Bugs to Semiochemicals

The insect olfactory system plays an important role in detecting semiochemicals in the environment. In particular, the antennal sensilla which house single or multiple neurons inside, are considered to make the major contribution in responding to the chemical stimuli. By directly recording action potential in the olfactory sensillum after exposure to stimuli, single sensillum recording (SSR) technique provides a powerful approach for investigating the neural responses of insects to chemical stimuli. For the bed bug, which is a notorious human parasite, multiple types of olfactory sensillum have been characterized. In this study, we demonstrated neural responses of bed bug olfactory sensilla to two chemical stimuli and the dose-dependent responses to one of them using the SSR method. This approach enables researchers to conduct early screening for individual chemical stimuli on the bed bug olfactory sensilla, which would provide valuable information for the development of new bed bug attractants or repellents and benefits the bed bug control efforts.

Bed bugs rely on olfactory receptor neurons housed in their antennal olfactory sensilla to detect semiochemicals in the environment. Utilizing single sensillum recording, we demonstrate a method to evaluate bed bug response to semiochemicals and explore the coding process involved.

Semiokimyasallar için yatak hataların Koku Nöron Cevapları Algılama Tek Sensillum Kaydı Kullanma

The insect olfactory system plays an important role in detecting semiochemicals in the environment. In particular, the antennal sensilla which house ...

Nörobilim

Protocols for Testing the Toxicity of Novel Insecticidal Chemistries to Mosquitoes

New classes of insecticides with novel modes of action are needed to control insecticide resistant populations of mosquitoes that transmit diseases such as Zika, dengue and malaria. Assays for rapid, high-throughput analyses of unformulated novel chemistries against mosquito larvae and adults are presented. We describe protocols for single point-dose and dose response assays to evaluate the toxicity of small molecule chemistries to the Aedes aegypti vector of Zika, dengue and yellow fever,&#160;the malaria vector, Anopheles gambiae and the northern house mosquito, Culex quinquefasciatus, on contact and via ingestion. As an example, we evaluated the toxicity of amitriptyline, a small molecule antagonist of G protein-coupled receptors, via larval, adult topical and adult blood-feeding assay. The protocols provide a starting point to investigate insecticide potential. Results are discussed in the context of additional experiments to explore product applications and mechanisms for delivery.

Protocols are described for assessing the toxicity of chemistries to immature and adult mosquitoes for development as new classes of larvicides, adulticides and endectocides. The protocols enable high-throughput testing of multiple chemistries at single-point dose and subsequent evaluation via dose response assay to determine toxicity on contact or via ingestion.

Sivrisinekler için roman böcek kimyaları toksisite testleri için iletişim kuralları

New classes of insecticides with novel modes of action are needed to control insecticide resistant populations of mosquitoes that transmit diseases such ...

Topical Application Bioassay to Quantify Insecticide Toxicity for Mosquitoes and Fruit Flies

The continued use of insecticides for public health and agriculture has led to widespread insecticide resistance and hampering of control methods. Insecticide resistance surveillance of mosquito populations is typically done through Centers for Disease Control and Prevention (CDC) bottle bioassays or World Health Organization (WHO) tube tests. However, these methods can result in a high degree of variability in mortality data due to variable insecticide contact with&#160;the insect, the relatively small numbers of organisms tested, extensive variation in mass between populations, and constantly changing environmental conditions, leading to variable outcomes. This paper presents the topical application bioassay, adapted as a high-throughput phenotypic bioassay for both mosquitoes and fruit flies, to test large numbers of insects along&#160;a range of insecticide concentrations.
This assay 1) ensures consistent treatment and insecticide contact with every organism, 2) produces highly specific dose-response curves that account for differences in average mass between strains and sexes (which is particularly important for field-collected organisms), and 3) allows for the calculation of statistically rigorous median lethal doses (LD50), which are necessary for resistance ratio comparisons-an alternative surveillance approach from diagnostic dose mortality, which is also used for larvicide resistance surveillance. This assay will be a complementary tool for accurately phenotyping mosquito populations and, as illustrated using fruit flies, is easily adaptable for use with other insects. We argue that this assay will help fill the gap between genotypic and phenotypic insecticide resistance in multiple insect species.

We describe the methodology and importance of the topical application bioassay to measure insecticide susceptibility in mosquitoes and fruit flies. The presented assay is high-throughput, utilizes insect mass-thus allowing for calculating a mass-relativized lethal dose instead of concentration-and likely has lower variability than other similar methods.

Sivrisinekler ve Meyve Sinekleri için İnsektisit Toksisitesini Ölçmek için Topikal Uygulama Biyotahlili

The continued use of insecticides for public health and agriculture has led to widespread insecticide resistance and hampering of control methods. ...

Helicoverpa armigera Üzerindeki Fitokimyasal Etkilerin Besleme Testi ile Değerlendirilmesi

Developing a Feeding Assay System for Evaluating the Insecticidal Effect of Phytochemicals on Helicoverpa armigera

Helicoverpa armigera, a lepidopteran insect, is a polyphagous pest with a worldwide distribution. This herbivorous insect is a threat to plants and agricultural productivity. In response, plants produce several phytochemicals that negatively impact the insect's growth and survival. This protocol demonstrates an obligate feeding assay method to evaluate the effect of a phytochemical (quercetin) on insect growth, development, and survival. Under controlled conditions, the neonates were maintained until the second instar on a pre-defined artificial diet. These second-instar larvae were allowed to feed on a control and quercetin-containing artificial diet for 10 days. The insects' body weight, developmental stage, frass weight, and mortality were recorded on alternate days. The change in body weight, the difference in feeding pattern, and developmental phenotypes were evaluated throughout the assay time. The described obligatory feeding assay simulates a natural mode of ingestion and can be scaled up to a large number of insects. It permits one to analyze phytochemicals' effect on the growth dynamics, developmental transition, and overall fitness of H. armigera. Furthermore, this setup can also be utilized to evaluate alterations in nutritional parameters and digestive physiology processes. This article provides a detailed methodology for feeding assay systems, which may have applications in toxicological studies, insecticidal molecule screening, and understanding chemical effects in plant-insect interactions.

Yazar Spotlight: Böcek Haşere Yönetimi için Besleme Deneylerinin Geliştirilmesi ve Zorlukları 

This protocol describes the obligate feeding assay to evaluate the potentially toxic effect of a phytochemical on the lepidopteran insect larvae. This is a highly scalable insect bioassay, easy to optimize the sublethal and lethal dose, deterrent activity, and physiological effect. This could be used for screening eco-friendly insecticides.

Fitokimyasalların Helicoverpa armigera Üzerindeki İnsektisidal Etkisinin Değerlendirilmesi için Beslenme Deney Sistemi Geliştirilmesi

Helicoverpa armigera, a lepidopteran insect, is a polyphagous pest with a worldwide distribution. This herbivorous insect is a threat to plants and ...

Yatak Bug karşı Böcek etkinliğini değerlendirmek için bir yöntem,

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Kayın Ölçek Böcek Direnç Amerikan kayını (Screen A Tekniği

Carboxylesterases böcek ilacı dayanıklı ev sinekleri, sinek Domestica içinde işlevsel karakterizasyonu

Kontrol Ajanlarını ve İnsektisitleri Kahve Berry Borer Hypothenemus hampei'ye Karşı Test Etme Metodolojisi

Pestisitlerin yalnız arıların larvaları üzerindeki etkisinin değerlendirilmesi

İnsektisit Direnci İzleme için biyoanalizlere

Semiokimyasallar için yatak hataların Koku Nöron Cevapları Algılama Tek Sensillum Kaydı Kullanma

Sivrisinekler için roman böcek kimyaları toksisite testleri için iletişim kuralları

Sivrisinekler ve Meyve Sinekleri için İnsektisit Toksisitesini Ölçmek için Topikal Uygulama Biyotahlili

Fitokimyasalların Helicoverpa armigera Üzerindeki İnsektisidal Etkisinin Değerlendirilmesi için Beslenme Deney Sistemi Geliştirilmesi

Fitokimyasalların Helicoverpa armigera Üzerindeki İnsektisidal Etkisinin Değerlendirilmesi için Beslenme Deney Sistemi Geliştirilmesi