SM, YP ve VN, Hindistan Hükümeti, Yeni Delhi Üniversite Hibeleri Komisyonu tarafından verilen bursu kabul eder. RJ, MLP036626, MLP101526 ve YSA000826 proje kodları kapsamında mali destek için Hindistan'daki Bilimsel ve Endüstriyel Araştırma Konseyi'ne (CSIR) ve Pune, Hindistan'daki CSIR-Ulusal Kimya Laboratuvarı'na teşekkür eder.

H. armigera larvaları , ICAR-Ulusal Tarımsal Böcek Kaynakları Bürosu (NBAIR), Bangalore, Hindistan'dan elde edilmiştir. Bu çalışmada toplam 21 adet ikinci instar larvası kullanıldı.
1. Nohut bazlı yapay diyetin hazırlanması
NOT: Yapay bir diyet hazırlamak için gerekli bileşenlerin bir listesi Tablo 1'de belirtilmiştir.
<ol><li>Tüm fraksiyonları Tablo 1'de listelendiği gibi bir beherde ayrı ayrı tartın ve bir spatula/manyetik karıştırıcı kullanarak homojen bir karışım hazırlayın.</li>
	<li>C Fraksiyonunu yaklaşık 100 °C'de bir mikrodalga kullanarak 5 dakika kaynatın, Fraksiyon A'ya ekleyin ve iyice karıştırın.</li>
	<li>İyice karıştırdıktan sonra, Fraksiyon B'yi eklemeden önce karışık fraksiyonun biraz soğumasını bekleyin (Fraksiyon B, ısıya dayanıksız bileşenler içerir).</li>
	<li>Şeffaf, polistiren, 150 mm x 150 mm Petri kabına dökün.</li>
</ol>2. Quercetin içeren yapay diyetin hazırlanması
<ol><li>Uygun miktarda (1.000 ppm) quercetin hidratı tartın ( Malzeme Tablosuna bakınız) ve etanol (2 mg / mL), dimetil sülfoksit (DMSO; 30 mg / mL) veya dimetil formamid (DMF) gibi minimum organik çözücü hacminde uygun şekilde çözün. Burada DMSO, quercetin'i çözmek için kullanılır.</li>
	<li>Çözünmüş quercetin'i Fraksiyon B'ye ekleyin, ardından Fraksiyon A ve C'nin karışımına ekleyin (Fraksiyon B'den indirgenen su hacmi, eklenen DMSO hacmine eşittir).</li>
	<li>Quercetin'i çözmek için kullanılan eşit hacimde organik çözücüyü kontrol diyetine ekleyin. NOT: Şekil 1 , yapay ve quercetin içeren diyetlerin hazırlanmasının şematik gösterimini göstermektedir.</li>
</ol>3. H. armigera kültürünün yetiştirilmesi ve bakımı
NOT: Böcek yetiştirme ve bakımı için uygun şekilde temizlenmiş ve sterilize edilmiş malzemeler kullanın. Sterilite ve güvenlikle ilgili tüm standart çalışma uygulamalarını 16,17,18 izleyerek böcekleri dikkatli bir şekilde kullanın.
<ol><li>H. armigera yumurtalarını, adım 3.3'te açıklandığı gibi, üreme odasında (müslin bezle kaplı plastik kavanoz) korunmuş koşullarda saklayın. Ardından, yeni ortaya çıkan yenidoğanları taze hazırlanmış nohut bazlı yapay bir diyetle ince bir boya fırçası kullanarak nazikçe aktarın.</li>
	<li>Larvaları yetiştirmek için yapay bir diyet ve yetişkin güveler için %1 (a/h) multi-vitamin içeren %20 (a/h) sükroz çözeltisi (Malzeme Tablosuna bakınız) kullanın19,20. NOT: H. armigera'nın üçüncü ve daha yaşlı larvaları yamyamlık eğilimi gösterdiğinden, her larvayı ayrı bir şişede yetiştirmek gerekir.</li>
	<li>Böcek kültürü odasında sıcaklığı 25 ± 1 °C'de ve bağıl nemi %70'te tutun, 16 saat ışık: 8 saat karanlık fotoperiyot21.</li>
	<li>Homojenlik için laboratuvarda bir nesil böcek yetiştirin ve daha sonra besleme tahlili için kullanın.</li>
	<li>İsteğe bağlı olarak, larva ve pupaların büyümesini hızlandırmak için böcek kültürü odasının sıcaklığını 28 °C'ye yükseltin22.</li>
</ol>4. Besleme tahlili için kurulum
<ol><li>Her set için 21 saniye instar larvası toplayın (kontrol ve tedavi) ve yaklaşık 1-3 saat diyetten uzak tutun.</li>
	<li>Kontrol ve quercetin içeren diyeti küçük parçalara ayırın, verilen diyetin ve böceğin vücudunun ağırlığını kaydedin ve böcekleri dikkatlice kültür şişelerine aktarın. Böceklerin ilgili diyetle beslenmesine izin verin. NOT: Bu, beslenme testinin 0. günü olarak düşünülmelidir.</li>
	<li>Tahlilin 10. gününe kadar alternatif günlerde (2, 4, 6, 8 ve 10. günler) verilen diyet, yenmemiş diyet ve frass verilen böcek vücudunun ağırlığını kaydedin.</li>
	<li>10. Günden sonra, daha fazla gelişimsel ve morfolojik değişiklikleri gözlemlemek için kendi diyetleriyle beslenmelerini sağlayın. NOT: Gelişimsel değişiklikler şu yollarla yapılır: (1) larva kütikül yamaları, bir kafa kapsülü ve torasik bacaklar ile pupaların arka yarım gövdesi gibi larva-pupa ara ürünleri; (2) tamamen kararmış bir gövdeye sahip prepupae; (3) vücut büzülmesi olan cılız pupalar; (4) pupa güvesi eski pupa derisi ile ara güveler. Morfolojik değişiklikler, anormal gövdeleri, bükülmüş kanatları ve eklemli bacakları olan hatalı biçimlendirilmiş güve yetişkinlerini içerir. Bu değişiklikler daha sonra kontrol diyetinde beslenen böceklerle karşılaştırılır.</li>
	<li>Gelişimsel ve morfolojik kusurların incelenmesi gerekmiyorsa, böcekleri 10. günde dondurun. NOT: Larvaları dondurmadan önce, artık diyeti sindirim sisteminden çıkarmak için en az 3 saat diyetten mahrum bırakılmaları gerekir.</li>
</ol>5. Veri kaydı ve analizi
<ol><li>GraphPad Prism yazılımında (Malzeme Tablosuna bakın), "Hoş Geldiniz veya Yeni Tablo" iletişim kutusundan bir XY veri tablosu seçin ve buna, alt sütunlarda değerleri yan yana çoğaltan böcek sayısını girin. Daha sonra başlık adını X eksenine gün sayısı olarak verin ve A ve B gruplarında başlık adını sırasıyla kontrol ve quercetin tedavisi olarak verin. Vücut ağırlığı grafiğini oluşturmak için her böceğin vücut ağırlığını kontrol altına alın ve tedavi edin. NOT: GraphPad'de yapılan analizler numune büyüklüğüne ve tedavi sayısına göre değişiklik gösterebilir.</li>
	<li>Bir öğrenci t-testi kullanarak kontrol ve tedavi grupları arasındaki böcek vücut ağırlığını karşılaştırın (α = 0.05).</li>
	<li>Grafik yazılımını kullanarak hayatta kalma yüzdesi için bir Kaplan-Meier eğrisi çizmek için 10. günde canlı ve ölü larvaları ve pupaları sayın.</li>
	<li>Pupa sayısını sayın ve verilen formülü kullanarak pupa yüzdesini hesaplayın:</li>
	<li>Pupa yüzdesi (%) = (oluşan pupa sayısı/toplam larva sayısı) x 100</li>
	<li>Aşağıdaki formülleri kullanarak larva gelişimini beslenme indeksleri23 açısından karşılaştırın, ECI (%) = (larvaların ağırlık artışı/yenen yemin ağırlığı) x 100 ECD (%) = (larvaların ağırlık artışı/[yenen yemin ağırlığı - frassın ağırlığı]) x 100 AD (%) = ([yenen yemin ağırlığı - yenen yemin ağırlığı]/yenen yemin ağırlığı) x 100</li>
</ol>

Helicoverpa armigera Üzerindeki Fitokimyasal Etkilerin Besleme Testi ile Değerlendirilmesi

<ol>
	<li>Popp, J., Pet&#337;, K., Nagy, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pesticide+productivity+and+food+security.+A+review.">Pesticide productivity and food security. A review.</a> Agronomy for Sustainable Development. 33 (1), 243-255 (2013).</li><li>da Silva, F. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+toxicity+of+Helicoverpa+armigera+and+Helicoverpa+zea+(Lepidoptera:+Noctuidae)+to+selected+insecticides.">Comparative toxicity of Helicoverpa armigera and Helicoverpa zea (Lepidoptera: Noctuidae) to selected insecticides.</a> Insects. 11 (7), 431 (2020).</li><li>Usman, A., Ali, M. I., Shah, M., e Amin, F., Sarwar, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+efficacy+of+indigenous+plant+extracts+and+a+synthetic+insecticide+for+the+management+of+tomato+fruit+worm+(Helicoverpa+armigera+Hub.)+and+their+effect+on+natural+enemies+in+tomato+crop.">Comparative efficacy of indigenous plant extracts and a synthetic insecticide for the management of tomato fruit worm (Helicoverpa armigera Hub.) and their effect on natural enemies in tomato crop.</a> Pure and Applied Biology. 7 (3), 1014-1020 (2018).</li><li>Honnakerappa, S. B., Udikeri, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Abundance+of+Helicoverpa+armigera+(Hubner)+on+different+host+crops.">Abundance of Helicoverpa armigera (Hubner) on different host crops.</a> Journal of Farm Science. 31, 436-439 (2018).</li><li>Edosa, T. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Review+on+bio-intensive+management+of+African+bollworm,+Helicoverpa+armigera+(Hub.):+Botanicals+and+semiochemicals+perspectives.">Review on bio-intensive management of African bollworm, Helicoverpa armigera (Hub.): Botanicals and semiochemicals perspectives.</a> African Journal of Agricultural Research. 14 (1), 1-9 (2019).</li><li>Zhou, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Migratory+Helicoverpa+armigera+(Lepidoptera:+Noctuidae)+exhibits+marked+seasonal+variation+in+morphology+and+fitness.">Migratory Helicoverpa armigera (Lepidoptera: Noctuidae) exhibits marked seasonal variation in morphology and fitness.</a> Environmental Entomology. 48 (3), 755-763 (2019).</li><li>Souto, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plant-derived+pesticides+as+an+alternative+to+pest+management+and+sustainable+agricultural+production:+Prospects,+applications+and+challenges.">Plant-derived pesticides as an alternative to pest management and sustainable agricultural production: Prospects, applications and challenges.</a> Molecules. 26 (16), 4835 (2021).</li><li>&#214;zkara, A., Aky&#305;l, D., Konuk, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pesticides,+environmental+pollution,+and+health.">Pesticides, environmental pollution, and health.</a> Environmental Health Risk-Hazardous Factors to Living Species. , (2016).</li><li>Alengebawy, A., Abdelkhalek, S. T., Qureshi, S. R., Wang, M. -. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heavy+metals+and+pesticides+toxicity+in+agricultural+soil+and+plants:+Ecological+risks+and+human+health+implications.">Heavy metals and pesticides toxicity in agricultural soil and plants: Ecological risks and human health implications.</a> Toxics. 9 (3), 42 (2021).</li><li>Tlak Gajger, I., Dar, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plant+allelochemicals+as+sources+of+insecticides.">Plant allelochemicals as sources of insecticides.</a> Insects. 12 (3), 189 (2021).</li><li>Riddick, E. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Potential+of+quercetin+to+reduce+herbivory+without+disrupting+natural+enemies+and+pollinators.">Potential of quercetin to reduce herbivory without disrupting natural enemies and pollinators.</a> Agriculture. 11 (6), 476 (2021).</li><li>Gao, Y. -. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+quercetin+on+the+growth,+development,+nutrition+utilization,+and+detoxification+enzymes+in+Hyphantria+cunea+Drury+(Lepidoptera:+Arctiidae).">The effect of quercetin on the growth, development, nutrition utilization, and detoxification enzymes in Hyphantria cunea Drury (Lepidoptera: Arctiidae).</a> Forests. 13 (11), 1945 (2022).</li><li>Durmu&#351;o&#287;lu, E., Hatipo&#287;lu, A., G&#252;rkan, M. O., Moores, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+different+bioassay+methods+for+determining+insecticide+resistance+in+European+Grapevine+Moth,+Lobesia+botrana+(Denis+&amp;+Schifferm&#252;ller)+(Lepidoptera:+Tortricidae).">Comparison of different bioassay methods for determining insecticide resistance in European Grapevine Moth, Lobesia botrana (Denis &amp; Schifferm&#252;ller) (Lepidoptera: Tortricidae).</a> Turkish Journal of Entomology. 39 (3), 271-276 (2015).</li><li>Paramasivam, M., Selvi, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+bioassay+methods+to+assess+the+insecticide+toxicity+against+insect+pests-A+review.">Laboratory bioassay methods to assess the insecticide toxicity against insect pests-A review.</a> Journal of Entomology and Zoology Studies. 5 (3), 1441-1445 (2017).</li><li>Clark, E. L., Isitt, R., Plettner, E., Fields, P. G., Huber, D. P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+inexpensive+feeding+bioassay+technique+for+stored-product+insects.">An inexpensive feeding bioassay technique for stored-product insects.</a> Journal of Economic Entomology. 107 (1), 455-461 (2014).</li><li>Waldbauer, G. P., Cohen, R. W., Friedman, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+improved+procedure+for+laboratory+rearing+of+the+corn+earworm,+Heliothis+zea+(Lepidoptera:+Noctuidae).">An improved procedure for laboratory rearing of the corn earworm, Heliothis zea (Lepidoptera: Noctuidae).</a> The Great Lakes Entomologist. 17 (2), 10 (2017).</li><li>Friesen, K., Berkebile, D. R., Zhu, J. J., Taylor, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+rearing+of+stable+flies+and+other+muscoid+Diptera.">Laboratory rearing of stable flies and other muscoid Diptera.</a> JoVE. (138), e57341 (2018).</li><li>Zheng, M. -. L., Zhang, D. -. J., Damiens, D. D., Lees, R. S., Gilles, J. R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standard+operating+procedures+for+standardized+mass+rearing+of+the+dengue+and+chikungunya+vectors+Aedes+aegypti+and+Aedes+albopictus+(Diptera:+Culicidae)-II-Egg+storage+and+hatching.">Standard operating procedures for standardized mass rearing of the dengue and chikungunya vectors Aedes aegypti and Aedes albopictus (Diptera: Culicidae)-II-Egg storage and hatching.</a> Parasites &amp; Vectors. 8, 1-7 (2015).</li><li>Nagarkatti, S., Prakash, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rearing+Heliothis+armigera+(Hubn.)+on+an+artificial+diet.">Rearing Heliothis armigera (Hubn.) on an artificial diet.</a> Technical Bulletin Commonwealth Institute of Biological Control. , (1974).</li><li>Adhav, A. S., Kokane, S. R., Joshi, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+characterization+of+Helicoverpa+armigera+trehalase+and+investigation+of+physiological+effects+caused+due+to+its+inhibition+by+Validamycin+A+formulation.">Functional characterization of Helicoverpa armigera trehalase and investigation of physiological effects caused due to its inhibition by Validamycin A formulation.</a> International Journal of Biological Macromolecules. 112, 638-647 (2018).</li><li>Abbasi, B. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rearing+the+cotton+bollworm,+Helicoverpa+armigera,+on+a+tapioca-based+artificial+diet.">Rearing the cotton bollworm, Helicoverpa armigera, on a tapioca-based artificial diet.</a> Journal of Insect Science. 7 (1), 35 (2007).</li><li>Armes, N. J., Jadhav, D. R., Bond, G. S., King, A. B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insecticide+resistance+in+Helicoverpa+armigera+in+South+India.">Insecticide resistance in Helicoverpa armigera in South India.</a> Pesticide Science. 34 (4), 355-364 (1992).</li><li>Waldbauer, G. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+consumption+and+utilization+of+food+by+insects.">The consumption and utilization of food by insects.</a> Advances in Insect Physiology. 5, 229-288 (1968).</li><li>Carpinella, M. C., Defago, M. T., Valladares, G., Palacios, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antifeedant+and+insecticide+properties+of+a+limonoid+from+Melia+azedarach+(Meliaceae)+with+potential+use+for+pest+management.">Antifeedant and insecticide properties of a limonoid from Melia azedarach (Meliaceae) with potential use for pest management.</a> Journal of Agricultural and Food Chemistry. 51 (2), 369-374 (2003).</li><li>Diaz Napal, G. N., Palacios, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioinsecticidal+effect+of+the+flavonoids+pinocembrin+and+quercetin+against+Spodoptera+frugiperda.">Bioinsecticidal effect of the flavonoids pinocembrin and quercetin against Spodoptera frugiperda.</a> Journal of Pest Science. 88, 629-635 (2015).</li><li>ffrench-Constant, R. H., Roush, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Resistance+detection+and+documentation:+the+relative+roles+of+pesticidal+and+biochemical+assays.">Resistance detection and documentation: the relative roles of pesticidal and biochemical assays.</a> Pesticide Resistance in Arthropods. , 4-38 (1990).</li><li>Gikonyo, N. K., Mwangi, R. W., Midiwo, J. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toxicity+and+growth-inhibitory+activity+of+Polygonum+senegalense+(Meissn.)+surface+exudate+against+Aedes+aegypti+larvae.">Toxicity and growth-inhibitory activity of Polygonum senegalense (Meissn.) surface exudate against Aedes aegypti larvae.</a> International Journal of Tropical Insect Science. 18 (3), 229-234 (1998).</li><li>Sharma, R., Sohal, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioefficacy+of+quercetin+against+melon+fruit+fly.">Bioefficacy of quercetin against melon fruit fly.</a> Bulletin of Insectology. 66 (1), 79-83 (2013).</li><li>Despr&#233;s, L., David, J. -. P., Gallet, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+evolutionary+ecology+of+insect+resistance+to+plant+chemicals.">The evolutionary ecology of insect resistance to plant chemicals.</a> Trends in Ecology &amp; Evolution. 22 (6), 298-307 (2007).</li><li>Shi, G., Kang, Z., Ren, F., Zhou, Y., Guo, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+quercetin+on+the+growth+and+expression+of+immune-pathway-related+genes+in+silkworm+(Lepidoptera:+Bombycidae).">Effects of quercetin on the growth and expression of immune-pathway-related genes in silkworm (Lepidoptera: Bombycidae).</a> Journal of Insect Science. 20 (6), 23 (2020).</li><li>Selin-Rani, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toxicity+and+physiological+effect+of+quercetin+on+generalist+herbivore,+Spodoptera+litura+Fab.+and+a+non-target+earthworm+Eisenia+fetida+Savigny.">Toxicity and physiological effect of quercetin on generalist herbivore, Spodoptera litura Fab. and a non-target earthworm Eisenia fetida Savigny.</a> Chemosphere. 165, 257-267 (2016).</li><li>Ateyyat, M., Abu-Romman, S., Abu-Darwish, M., Ghabeish, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+flavonoids+against+woolly+apple+aphid,+Eriosoma+lanigerum+(Hausmann)+and+its+sole+parasitoid,+Aphelinus+mali+(Hald).">Impact of flavonoids against woolly apple aphid, Eriosoma lanigerum (Hausmann) and its sole parasitoid, Aphelinus mali (Hald).</a> Journal of Agricultural Science. 4 (2), 227 (2012).</li><li>Brito-Sierra, C. A., Kaur, J., Hill, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protocols+for+testing+the+toxicity+of+novel+insecticidal+chemistries+to+mosquitoes.">Protocols for testing the toxicity of novel insecticidal chemistries to mosquitoes.</a> JoVE. (144), e57768 (2019).</li><li>Mitchell, C., Brennan, R. M., Graham, J., Karley, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plant+defense+against+herbivorous+pests:+exploiting+resistance+and+tolerance+traits+for+sustainable+crop+protection.">Plant defense against herbivorous pests: exploiting resistance and tolerance traits for sustainable crop protection.</a> Frontiers in Plant Science. 7, 1132 (2016).</li></ol>

Yazarlar herhangi bir çıkar çatışması beyan etmemişlerdir.

Laboratuvar biyoanalizleri, sonuçları tahmin etmek ve kısa bir süre içinde makul bir maliyetle çeşitli bileşikler üzerinde karşılaştırmalı toksisite verileri üretmek için yararlıdır. Besleme biyo-tahlili, böcek-böcek ilacı ve böcek-bitki-böcek öldürücüler arasındaki etkileşimleri yorumlamaya yardımcı olur. Öldürücü doz 50 (LD50), öldürücü konsantrasyon 50 (LC50) veya başka herhangi bir öldürücü konsantrasyon veya doz24,25...

Mahsul verimliliğini etkileyen biyotik faktörler esas olarak patojenik ajanlar ve zararlılardır. Çeşitli böcek zararlıları, tarımsal ürün kaybının %15 ila %35'ine neden olur ve ekonomik sürdürülebilirlik uygulamalarını etkiler1. Coleoptera, Hemiptera ve Lepidoptera takımlarına ait böcekler, yıkıcı zararlıların ana takımlarıdır. Çevrenin son derece uyarlanabilir doğası, çeşitli hayatta kalma mekanizmalarının geliştirilmesinde lepidopteranlara fayda sağlamıştır. Lepidopteran böcekler arasında, Helicoverpa armigera (Pamuk kurdu) yaklaşık 180 farklı mahsulle beslenebilir ve üreme dokularına önemli zararlar verebilir2. Dünya çapında, H. armigera istilası yaklaşık 5 milyar dolarlık bir kayba neden olmuştur3. Pamuk, nohut, güvercin bezelyesi, domates, ayçiçeği ve diğer mahsuller H. armigera'ya ev sahipliği yapar. Yaşam döngüsünü konukçu tesislerin farklı bölümlerinde tamamlar. Dişi güvelerin bıraktığı yumurtalar yapraklarda çatlar, ardından larva dönemlerinde vejetatif dokularla beslenirler. Larva aşaması, obur ve son derece uyarlanabilir doğası nedeniyle en yıkıcıdır 4,5. H. armigera, polifaji, mükemmel göç yetenekleri, daha yüksek doğurganlık, güçlü diyapoz ve mevcut böcek kontrol stratejilerine karşı direncin ortaya çıkması gibi dikkate değer özellikleri nedeniyle küresel bir dağılım ve yeni bölgelere tecavüz göstermektedir6.
Terpenler, flavonoidler, alkaloidler, polifenoller, siyanojenik glukozitler ve diğerlerinden çeşitli kimyasal moleküller, H. armigera istilasının kontrolü için yaygın olarak kullanılmaktadır7. Bununla birlikte, kimyasal moleküllerin sık sık uygulanması, kalıntılarının edinilmesi nedeniyle çevre ve insan sağlığı üzerinde olumsuz etkiler yaratmaktadır. Ayrıca, çeşitli haşere avcıları üzerinde zararlı bir etki göstererek ekolojik bir dengesizliğe neden olurlar 8,9. Bu nedenle, haşere kontrolünün kimyasal molekülleri için güvenli ve çevre dostu seçeneklerin araştırılması gerekliliği vardır.
Bitkiler tarafından üretilen doğal böcek öldürücü moleküller (fitokimyasallar), kimyasal pestisitlere umut verici bir alternatif olarak kullanılabilir. Bu fitokimyasallar, alkaloidler, terpenoidler ve fenolikler 7,10 sınıflarına ait çeşitli ikincil metabolitleri içerir. Quercetin, çeşitli tahıllarda, sebzelerde, meyvelerde ve yapraklarda bulunan en bol flavonoidlerden (fenolik bileşik) biridir. Böceklere karşı beslenme caydırıcı ve böcek öldürücü aktivite gösterir; Ayrıca, zararlıların doğal düşmanlarına zararlı değildir11,12. Bu nedenle, bu protokol, H. armigera üzerindeki toksik etkisini değerlendirmek için quercetin kullanan besleme testini göstermektedir.
Doğal ve sentetik moleküllerin bir böceğin beslenmesi, büyümesi, gelişmesi ve davranış kalıpları üzerindeki etkisini değerlendirmek için çeşitli biyo-tahlil yöntemleri geliştirilmiştir13. Yaygın olarak kullanılan yöntemler arasında yaprak disk testi, seçim besleme testi, damlacık besleme testi, temas testi, diyet kaplama testi ve zorunlu besleme testibulunur 13,14. Bu yöntemler, pestisitlerin böceklere nasıl uygulandığına göre sınıflandırılır. Zorunlu beslenme testi, olası insektisitleri ve bunların öldürücü dozlarını test etmek için en yaygın kullanılan, hassas, basit ve uyarlanabilir yöntemlerden biridir14. Zorunlu bir beslenme tahlilinde, ilgilenilen molekül yapay bir diyetle karıştırılır. Bu, diyet bileşimi üzerinde tutarlılık ve kontrol sağlayarak sağlam ve tekrarlanabilir sonuçlar üretir. Besleme tahlillerini etkileyen önemli değişkenler böceğin gelişim evresi, insektisit seçimi, çevresel faktörler ve örneklem büyüklüğüdür. Testin süresi, iki veri kaydı arasındaki aralık, diyetle beslenmenin sıklığı ve miktarı, böceklerin sağlığı ve operatörlerin kullanım becerisi de besleme testlerinin sonucunu etkileyebilir14,15.
Bu çalışma, quercetin'in H. armigera sağkalımı ve zindeliği üzerindeki etkisini değerlendirmek için zorunlu beslenme testini göstermeyi amaçlamaktadır. Böcek vücut ağırlığı, ölüm oranı ve gelişimsel kusurlar gibi çeşitli parametrelerin değerlendirilmesi, quercetin'in böcek öldürücü etkileri hakkında fikir verecektir. Bu arada, yutulan gıdanın dönüşüm etkinliği (ECI), sindirilmiş gıdanın dönüşüm etkinliği (ECD) ve yaklaşık sindirilebilirlik (AD) dahil olmak üzere beslenme parametrelerinin ölçülmesi, quercetin'in antifeedant özelliklerini vurgulayacaktır.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Agar Agar</td>
			<td>Himedia</td>
			<td>RM666</td>
			<td>Solidifying agent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ascorbic acid</td>
			<td>Himedia</td>
			<td>CMS1014</td>
			<td>Vitamin C source</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bengal Gram</td>
			<td>NA</td>
			<td>NA</td>
			<td>Protein and carbohydrate source</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Casein</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C-5890</td>
			<td>Protein source</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cholesterol</td>
			<td>Sisco Research Laboratories</td>
			<td>34811</td>
			<td>Fatty acid source</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Choline Chloride</td>
			<td>Himedia</td>
			<td>GRM6824</td>
			<td>Ammonium salt</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMSO</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>67-68-5</td>
			<td>Solvent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GraphPad Prism v8.0</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>https://www.graphpad.com/guides/prism/latest/user-guide/using_choosing_an_analysis.htm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methyl Paraben</td>
			<td>Himedia</td>
			<td>GRM1291</td>
			<td>Antifungal agent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multivitamin capsule</td>
			<td>GalaxoSmithKline</td>
			<td>NA</td>
			<td>Vitamin source</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quercetin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>Q4951-10G</td>
			<td>Phytochemical</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sorbic Acid</td>
			<td>Himedia</td>
			<td>M1880</td>
			<td>Antimicrobail agent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Streptomycin</td>
			<td>Himedia</td>
			<td>CMS220</td>
			<td>Antibiotic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vitamin E capsule</td>
			<td>Nukind Healthcare</td>
			<td>NA</td>
			<td>Vitamin E source</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Yeast Extract</td>
			<td>Himedia</td>
			<td>RM027</td>
			<td>Amino acid source</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

developing a feeding assay system for evaluating the insecticidal effect of phytochemicals on helicoverpa armigera

Bir lepidopteran böceği olan Helicoverpa armigera, dünya çapında bir dağılıma sahip polifag bir zararlıdır. Bu otçul böcek, bitkiler ve tarımsal üretkenlik için bir tehdittir. Buna karşılık, bitkiler böceğin büyümesini ve hayatta kalmasını olumsuz yönde etkileyen çeşitli fitokimyasallar üretir. Bu protokol, bir fitokimyasalın (quercetin) böcek büyümesi, gelişmesi ve hayatta kalması üzerindeki etkisini değerlendirmek için zorunlu bir beslenme tahlili yöntemini gösterir. Kontrollü koşullar altında, yenidoğanlar önceden tanımlanmış bir yapay diyetle ikinci girişe kadar tutuldu. Bu ikinci instar larvaların 10 gün boyunca kontrol ve kuersetin içeren yapay bir diyetle beslenmelerine izin verildi. Böceklerin vücut ağırlığı, gelişim evresi, frass ağırlığı ve ölüm oranı alternatif günlerde kaydedildi. Test süresi boyunca vücut ağırlığındaki değişim, beslenme düzenindeki farklılık ve gelişimsel fenotipler değerlendirildi. Açıklanan zorunlu beslenme testi, doğal bir yutma modunu simüle eder ve çok sayıda böceğe kadar ölçeklendirilebilir. Fitokimyasalların büyüme dinamikleri, gelişimsel geçiş ve H. armigera'nın genel uygunluğu üzerindeki etkisini analiz etmeye izin verir. Ayrıca, bu kurulum beslenme parametrelerindeki ve sindirim fizyolojisi süreçlerindeki değişiklikleri değerlendirmek için de kullanılabilir. Bu makale, toksikolojik çalışmalarda, böcek öldürücü molekül taramasında ve bitki-böcek etkileşimlerinde kimyasal etkilerin anlaşılmasında uygulamaları olabilecek besleme tahlil sistemleri için ayrıntılı bir metodoloji sunmaktadır.

The biotic factors that affect crop productivity are mainly pathogenic agents and pests. Several insect pests cause 15% to 35% of agricultural crop loss and affect economic sustainability practices1. Insects belonging to the orders Coleoptera, Hemiptera, and Lepidoptera are the major orders of devastating pests. The highly adaptive nature of the environment has benefited lepidopterans in evolving several survival mechanisms. Amongst lepidopteran insects, Helicoverpa armigera (Cotton bollworm) can feed on around 180 different crops and cause significant damage to their reproductive tissues2. Worldwide, H. armigera infestation has resulted in a loss of around $5 billion3. Cotton, chickpeas, pigeon peas, tomatoes, sunflowers, and other crops are hosts for H. armigera. It completes its lifecycle on different parts of host plants. Eggs laid by female moths get hatched on the leaves, followed by their feeding on vegetative tissues during larval stages. The larval stage is the most destructive due to its voracious and highly adaptable nature4,5. H. armigera shows a global distribution and encroachment to new territories due to its remarkable attributes, such as polyphagy, excellent migratory abilities, higher fecundity, strong diapause, and the emergence of resistance to existing insect control strategies6.
Diverse chemical molecules from terpenes, flavonoids, alkaloids, polyphenols, cyanogenic glucosides, and many others are widely used for the control of H. armigera infestation7. However, frequent application of chemical molecules imparts adverse effects on the environment and human health due to the acquisition of their residues. Also, they show a detrimental effect on various pest predators, resulting in an ecological imbalance8,9. Therefore, there is a necessity to investigate safe and eco-friendly options for chemical molecules of pest control.
Natural insecticidal molecules produced by plants (phytochemicals) can be used as a promising alternative to chemical pesticides. These phytochemicals include various secondary metabolites belonging to the classes alkaloids, terpenoids, and phenolics7,10. Quercetin is one of the most abundant flavonoids (phenolic compound) present in various grains, vegetables, fruits, and leaves. It shows feeding deterrent and insecticidal activity against insects; also, it is not harmful to natural enemies of pests11,12. Thus, this protocol demonstrates the feeding assay using quercetin to assess its toxic effect on H. armigera.
Various bioassay methods have been developed to evaluate the effect of natural and synthetic molecules on an insect&#39;s feeding, growth, development, and behavioral patterns13. Commonly used methods include the leaf disk assay, choice feeding assay, droplet feeding assay, contact assay, diet covering assay, and obligate feeding assay13,14. These methods are classified based on how pesticides are applied to insects. The obligate feeding assay is one of the most commonly used, sensitive, simple, and adaptable methods to test probable insecticides and their lethal dose14. In an obligate feeding assay, the molecule of interest is mixed with an artificial diet. This provides consistency and control over the diet composition, generating robust and reproducible results. Important variables affecting feeding assays are the developmental stage of the insect, choice of insecticide, environmental factors, and sample size. The duration of the assay, interval between two data recordings, frequency and amount of diet fed, health of insects, and handling skill of operators can also influence the outcome of feeding assays14,15.
This study aims to demonstrate the obligate feeding assay to evaluate the effect of quercetin on H. armigera survival and fitness. Assessment of various parameters, such as insect body weight, mortality rate, and developmental defects, will provide insights into the insecticidal effects of quercetin. Meanwhile, measuring nutritional parameters, including the efficiency of conversion of ingested food (ECI), efficiency of conversion of digested food (ECD), and approximate digestibility (AD), will highlight the antifeedant attributes of quercetin.

Yazar Spotlight: Böcek Haşere Yönetimi için Besleme Deneylerinin Geliştirilmesi ve Zorlukları 

Fitokimyasalların Helicoverpa armigera Üzerindeki İnsektisidal Etkisinin Değerlendirilmesi için Beslenme Deney Sistemi Geliştirilmesi

This study is conducted to develop a simple and cost-effective feeding assay method for evaluating the effect of various natural molecules, including phytochemicals for their antifeedant and insecticidal properties against thieving insects, and identified potential molecules from these assay can be evaluated in field condition for pest management. Multiple assays have been developed to evaluate the effect of synthetic and natural molecules on insect feeding, growth, development, and behavior, further assays have been designed, such as dip case tool, diet covering assay, contact assay, droplet feeding assay, choice feeding assay, and lip dish test for insecticide evaluation, Maintaining uniform experimental conditions, addressing issues, like infection and cannibalism, ensuring even phytochemical distribution in larval diet, tracking, feeding behavior accurately, and determining optimal phytochemical concentrations post challenges, batch variation, and experimental design complexities must be managed. Additionally, transitioning from the lab assist to the field application, considering formulation and scalability is demanding.In the obligatory feeding assay, a large number of molecules can be tested simultaneously with a large number of insect sample sizes. The advantage of this feeding assay is that the test compound is mixed with an artificial diet, thus we have control over diet composition, which provides robust and reproducible results.

1.000 ppm quercetin içeren bir diyetle beslenen böcek larvaları, kontrol grubuna kıyasla vücut ağırlığında ~% 57'lik önemli bir azalma göstermiştir (Şekil 2A). Vücut ağırlığındaki azalma, kuersetin ile tedavi edilen larvaların vücut boyutunun azalmasına neden oldu (Şekil 2B). Kuersetin ile beslenen larvaların beslenme hızında kontrole kıyasla kayda değer bir azalma gözlenmiştir (Şekil 2C).
<p clas...

Watch this Scientific Journal Video about Development and Challenges of Feeding Assays for Insect Pest Management at JoVE.com

Bu protokol, bir fitokimyasalın lepidopteran böcek larvaları üzerindeki potansiyel toksik etkisini değerlendirmek için zorunlu besleme testini açıklar. Bu, öldürücü ve öldürücü dozu, caydırıcı aktiviteyi ve fizyolojik etkiyi optimize etmek kolay, oldukça ölçeklenebilir bir böcek biyo-tahlilidir. Bu, çevre dostu böcek ilaçlarını taramak için kullanılabilir.

Helicoverpa armigera, a lepidopteran insect, is a polyphagous pest with a worldwide distribution. This herbivorous insect is a threat to plants and ...

Bu çalışma, fitokimyasalların antibesi ve böcek öldürücü özellikleri de dahil olmak üzere çeşitli doğal moleküllerin hırsız böceklere karşı etkisini değerlendirmek için basit ve uygun maliyetli bir besleme tahlili yöntemi geliştirmek için yapılmıştır ve bu tahlillerden tespit edilen potansiyel moleküller haşere yönetimi için tarla koşullarında değerlendirilebilir. Sentetik ve doğal moleküllerin böcek besleme, büyüme, gelişme ve davranış üzerindeki etkisini değerlendirmek için çoklu tahliller geliştirilmiştir, daldırma vaka aracı, diyet kaplama tahlili, temas tahlili, damlacık besleme tahlili, seçim besleme tahlili ve insektisit değerlendirmesi için dudak yemeği testi gibi başka tahliller de tasarlanmıştır, Tek tip deney koşullarının sürdürülmesi, enfeksiyon ve yamyamlık gibi konuların ele alınması, Larva rasyonunda eşit fitokimyasal dağılımın sağlanması, izleme davranışı, beslenme davranışının doğru bir şekilde izlenmesi ve zorluklar, parti varyasyonu ve deneysel tasarım karmaşıklıkları sonrası optimal fitokimyasal konsantrasyonların belirlenmesi yönetilmelidir. Ek olarak, formülasyon ve ölçeklenebilirlik göz önünde bulundurularak laboratuvar yardımından saha uygulamasına geçiş yapmak zordur.Zorunlu besleme tahlilinde, çok sayıda molekül, çok sayıda böcek numune büyüklüğü ile aynı anda test edilebilir. Bu besleme testinin avantajı, test bileşiğinin yapay bir diyetle karıştırılmasıdır, bu nedenle sağlam ve tekrarlanabilir sonuçlar sağlayan diyet bileşimi üzerinde kontrole sahibiz.

developing-feeding-assay-system-for-evaluating-insecticidal-effect

Research

JoVE Journal

Biology

Developing a Feeding Assay System for Evaluating the Insecticidal Effect of Phytochemicals on Helicoverpa armigera

821 Görüntüleme.  CSIR-National Chemical Laboratory. Bu çalışma, fitokimyasalların antibesi ve böcek öldürücü özellikleri de dahil olmak üzere çeşitli doğal moleküllerin hırsız böceklere karşı etkisini değerlendirmek için basit ve uygun maliyetli bir besleme tahlili yöntemi geliştirmek için yapılmıştır ve bu tahlillerden tespit edilen potansiyel moleküller haşere yönetimi için tarla koşullarında değerlendirilebilir. Sentetik ve doğal moleküllerin böcek besleme, büyüme, gelişme ve davranış üzerindeki ...

Video: Yazar Spotlight: Böcek Haşere Yönetimi için Besleme Deneylerinin Geliştirilmesi ve Zorlukları 

Helicoverpa armigera, a lepidopteran insect, is a polyphagous pest with a worldwide distribution. This herbivorous insect is a threat to plants and agricultural productivity. In response, plants produce several phytochemicals that negatively impact the insect's growth and survival. This protocol demonstrates an obligate feeding assay method to evaluate the effect of a phytochemical (quercetin) on insect growth, development, and survival. Under controlled conditions, the neonates were maintained until the second instar on a pre-defined artificial diet. These second-instar larvae were allowed to feed on a control and quercetin-containing artificial diet for 10 days. The insects' body weight, developmental stage, frass weight, and mortality were recorded on alternate days. The change in body weight, the difference in feeding pattern, and developmental phenotypes were evaluated throughout the assay time. The described obligatory feeding assay simulates a natural mode of ingestion and can be scaled up to a large number of insects. It permits one to analyze phytochemicals' effect on the growth dynamics, developmental transition, and overall fitness of H. armigera. Furthermore, this setup can also be utilized to evaluate alterations in nutritional parameters and digestive physiology processes. This article provides a detailed methodology for feeding assay systems, which may have applications in toxicological studies, insecticidal molecule screening, and understanding chemical effects in plant-insect interactions.

This protocol describes the obligate feeding assay to evaluate the potentially toxic effect of a phytochemical on the lepidopteran insect larvae. This is a highly scalable insect bioassay, easy to optimize the sublethal and lethal dose, deterrent activity, and physiological effect. This could be used for screening eco-friendly insecticides.

Biyoloji

Preparing a Quercetin-Containing Chickpea-Based Artificial Diet for Evaluating its Effect on Helicoverpa armigera Growth

Preparing a Quercetin-Containing Chickpea-Based Artificial Diet for Evaluating its Effect on Helicoverpa armigera Growth  

To begin, weigh the desired components of fractions A, B, and C separately in a beaker, and prepare a homogenous mixture using a spatula or magnetic stir. Boil fraction C at around 100 degrees Celsius in a microwave for five minutes. Then add it to fraction A and mix thoroughly.Once the mixture cools down, add fraction B and pour the prepared control diet mixture into a transparent polystyrene Petri dish. To prepare quercetin containing an artificial diet, dissolve quercetin hydrate and dimethyl sulfoxide, then add the dissolved quercetin into fraction B, followed by a mixture of fractions A and C.Add an equivalent dimethyl sulfoxide to the prepared controlled diet.

Helicoverpa armigera Büyümesi Üzerine Etkisini Değerlendirmek İçin Quercetin İçeren Nohut Bazlı Yapay Diyet Hazırlama

Feeding Assay to Evaluate the Effects of Quercetin on Helicoverpa armigera Growth and Development

Feeding Assay to Evaluate the Effects of Quercetin on Helicoverpa armigera Growth and Development  

To begin, keep Helicoverpa armigera neonates in the plastic breeding chamber covered with a muslin cloth in the insect culture room. Then gently transfer newly emerged neonates using a fine paintbrush on a freshly prepared, chickpea based artificial diet for growth. For the feeding assay, collect 21 second instar larvae for the control and treatment set.Cut previously prepared control and quercetin containing diet into small pieces, and record the weight of the diet and the insect's body. Carefully transfer the insect into the culture vial, add the respective diet into the vial, and let the insect feed. From the second day till the 10th day, record the weight of the insect body followed by a given diet, uneaten diet, and frass.Count the live and dead larvae and pupae on day 10. To record and analyze the data, compare the insect body weight between the control and treatment groups using a student t test Plot a Kaplan-Meier curve for survival percentage using the graphing software using live dead larvae and pupae count. Then calculate the percent pupation and compare larval development and nutritional indices.In the present study, the insect larvae fed with quercetin containing diet showed a significant decrease compared to the control group, thereby resulting in reduced body size. Also, a notable reduction was observed in the feeding rate of quercetin fed larvae compared to the control. Furthermore, there was a significant decrease in percent pupation in quercetin fed larvae suggesting developmental retardation upon treatment.For insects fed on the quercetin containing diet, the efficiency of conversion of ingested food to body matter was reduced by approximately 9%compared to the control. The efficiency of conversion of digested food was reduced by approximately 49%compared to the control. The approximate digestibility in quercetin fed insects was increased by 5%compared to the control.