Bu proje Pedro Brugarolas&#39;a NIH / NIBIB 1K99EB020075 hibeleri ve Chicago Yenilik Borsası&#39;ndan Brian Popko ve Pedro Brugarolas&#39;a bir Yenilik Fonu Ödülü ile desteklendi. Profesör Brian Popko, projeye danışmanlığı ve maddi desteği sayesinde minnettarlıkla teşekkür etti. Chin-Tu Chen ve Chicago Üniversitesi&#39;ndeki Entegre Küçük Hayvan Görüntüleme Araştırma Kaynakları, laboratuar alanını ve ekipmanını cömertçe paylaştığı için kabul edilmektedir. IBA, bu makalenin açık erişimine destek verdiği için onaylandı.

DİKKAT: Radyoaktif maddelerin kullanımıyla ilgili tüm prosedürler, yerel Radyasyon Güvenliği Dairesi tarafından onaylanmalıdır. Radyoaktif maddelerle çalışırken, bir laboratuar önlüğü ve kişisel radyasyon rozetleri giyin. Her zaman iki kat eldiven kullanın ve radyoaktiviteyi ele alan her adımdan sonra bir Geiger sayaç ile elleri kontrol edin. Eldivenlerin radyoaktif maddelerle kontamine olması ve dış eldivenlerin yerine koyması gerekir. Uygun ekranlamayı kullanın, radyasyon kaynağıyla temas halinde olan zamanı en aza indirin ve mesafeyi en üst düzeye çıkarın. 1. Bir Hafta Önce Deney: Malzemelerin Hazırlanması <ol><li> Download [18F] 3F4AP sırası: Synthera kullanıcıları Kullanıcı Veritabanına (http://www.iba-radiopharmasolutions.com/products/chemistry) giriş yapabilir ve 3F4AP için sıralama dosyasını indirebilir. Diğer sentezleyicilerin kullanıcıları, adımların sırasına göre kendi komut dosyalarını yazmak zorunda kalabilirler. S ile aşina olmak için ek açıklama dizisine göz atınSentezle ilgili tepsiler. </li><li> Sentez için yeterli gaz olduğundan emin olun. Sentezleyici sıkıştırılmış gaz, helyum veya azot gerektirir. Ayrıca&gt; 75 psi basınçlı hava gerekir. Basınçların üreticinin önerdiği şekilde olduğundan emin olun. </li><li> HPLC mobil fazını hazırlayın: 1 L 50 mM sodyum fosfat ve 10 mM trietil amin hazırlayın. Bir pH metreyi kullanarak, karıştırırken doymuş sodyum hidroksit damlatarak pH&#39;ını 8.0 ± 0.1&#39;e ayarlayın. Çözeltiyi 0.22 um&#39;lik bir şişe filtresi ile filtre edin ve% 5 etanol ekleyin. </li><li> Fırında bir gece boyunca cam eşyaları kurutun. </li></ol> 2. Deney Günü: Flor-18&#39;in Varışından Önce <ol><li> 1 mL şırınga kullanarak, reaktif şişeleri uygun reaktiflerle doldurun. Şişeler 2 ve 3 için fırında kurutulmuş şişeler ve susuz solventler argon altında tutulur. Viyalleri, bir kıvırıcı kullanarak kıvrım contaları ile sızdırmaz hale getirin. <ol><li> Tüp 1 doldurun (11 mm çap / 2 mL hacim viAl) 400 uL TBA-HCO3 + 800 uL asetonitril (MeCN) ile yıkanmıştır. </li><li> Vial 2&#39;yi (13 mm / 4 mL tüp), MeCN&#39;nin 1.0 mg / mL + 450 uL prekürsör solüsyonu 50 uL&#39;si ile doldurun. </li><li> Vial 3&#39;ü (11 mm / 2 mL tüp) 500 mcL MeCN ile doldurun. </li><li> Metanol (MeOH) içinde 4 mL% 0.2 oksalik asit ile Vial 4&#39;ü (13 mm / 4 mL flakon) doldurun. </li></ol></li><li> QMA (güçlü anyon değişimi) ve Alumina-N katı faz ekstraksiyon kartuşlarının durumunu kontrol edin. 10 mL şırınga kullanarak, 5 mL% 8.4 NaHCO3&#39;ü damlatarak QMA&#39;ya, ardından 5 mL ultra saf deiyonize Tip I suya (25 ºC&#39;de 18.2 ΜΩ • cm) geçirin. 5 mL ultra saf su damla damla Alumina-N kartuşu ile, ardından 5 mL MeOH +% 0.2 oksalik asit ile geçirin. </li><li> HPLC&#39;yi açın ve C-18 sütununu, mobil fazın her bir dakikada 4 mL&#39;si ile 30 dakika boyunca şartlandırın. </li><li> Hidrojenatör kartuşu tutacağı üzerine yeni bir katalizör kartuşu yükleyin ve 0.5 mL / dakika% 100 MeOH akışa başlayın. SHidrojen regülatörünü 50 psi&#39;ye getirin ve kartuşu 15 dakika boyunca değiştirin ( Şekil 2 ). </li><li> Entegre Sıvı İşlemcisini (IFP) konumlandırın 1 ila 4 viallerini takarak, Şekil 3&#39;te gösterildiği gibi kartuşları ve toplama şişesini takarak birleştirin. Bir toplama şişesini bir havalandırma iğnesi ile hidrojenatörün çıkış hattına takın. </li><li> Synthesizer&#39;ın yazılımını başlatın. Giriş ve şifreyi girin. Üreticinin talimatlarına göre sentezleyicide ön kontrol kontrolleri yapın. </li><li> 3F4AP sırasını yüklemek için &quot;Sıralar&quot; ve ardından &quot;Aç&quot; ı tıklayın. </li><li> Ekrandaki &quot;Yükle&quot; düğmesini tıklayarak IFP&#39;yi yükleyin. Çalıştırmak için bir dosya adı yazın ve &quot;Başlat&quot; ı tıklayarak diziyi başlatın. (Otomatik synthesizer, 18 F yükleme adımından önce otomatik olarak duraklatır.) </li><li> Sentezleyici, rutin kendi kendini kontrol adımlarına (dizinin bir parçası) geçtiği için izleyin. Kulağa bakN herhangi bir uyarı veya alarm olmadığından emin olmak için. Seslere dikkat edin, çünkü sentezleyiciler hatları temizler ve çalışma haznesine reaksiyon haznesini ön ısıttırır. Sıcaklık göstergesi yükselmeli ve 65 ºC&#39;de kalmalıdır. Synthesizer&#39;ın 18 F aktarımı için hazır olduğunu belirten sinyalin (işitsel uyarı sesi) bekleyin. </li></ol> 3. Deney Günü: 18 F Etiketleme <ol><li> Siklotron hedefinden 18F şişeye istenilen miktarda siklotronla üretilen 18 F&#39;yı uzaktan aktarın. Radyoaktivite miktarını doğrulayın ve teslimat zamanı ile kaydedin. NOT: 18 F - transfer için doğrudan bir hat kullanmıyorsanız, septum vasıtasıyla aktiviteyi aktarmak için iğne takılı önceden doldurulmuş bir şırıngayı kullanın. Başlangıç ​​radyoaktivite miktarı, Radyasyon Güvenliği Ofisi tarafından belirlenen sınırlara ve istenen son tracer miktarına bağlıdır. Tipik miktar 50 ila 500 mCi arasında değişir. </li><lI&gt; &quot;Devam Et&quot; e basarak sentezleyicide sekansı devam ettirin. Bu, 18 F&#39;nin QMA&#39;ya transferini başlatacaktır. </li><li> Sentezin progresyonunu, bilgisayar ekranındaki otomatik sıralama boyunca izleyin. <ol><li> Faredeki 18 F&#39;nin 90 saniye boyunca QMA&#39;ya transferini izleyin. 18 F - QMA&#39;ya tutuklandıktan sonra, TBA-HCO 3 çözeltisiyle (tüp 1) elute edilir. (Sekansın ikinci bölümü) </li><li> TBA 18 F azaltılmış basınç (5 kPa) ve ısıtma (100 ºC) altında kurutulurken sentezleyicideki basınç ve sıcaklık izlerini izleyin, ardından ek kurutma ve soğutma adımları izler. (Dizinin 3. bölümü) </li><li> Reaktöre susuz MeCN (tüp 3) ve öncü solüsyon (tüp 2) transferini ve 1 dakika süreyle oda sıcaklığında nasıl tepki verdiğini izleyin. Çözüm renksiz veya çok soluk sarı olmalıdır. (Dizinin 4. bölümü) </li><li> Okzalik asit transferini izleÇözeltisine (flakon 4) reaktöre ilave edildi. Çözelti, reaktörden alümina-N kartuşu yoluyla son ürün şişesine basınç aktarılırken izleyin. (Dizinin 5. Bölümü) </li></ol></li><li> Dizinin sonunda, raporu yazdırın, IFP&#39;yi çıkartın, gaz tanklarını kapatın ve yazılımı kapatın. </li><li> İşlemi ilk başlatırken, alümina-N kartuşu ve toplama şişesinin içindeki radyoaktiviteyi, doz kalibratöründeki kartuşu ve flakonu ayrı olarak sokarak ölçün. Aktiviteyi ve ölçüm zamanını kaydedin. Kullanılmış kartuşu kurşun atık kabına yerleştirin. Toplama flakonunu bir sonraki adıma taşımak için korumalı bir kapa yerleştirin. </li><li> Bir 2 &quot;iğne takılı bir 1 mL şırınga kullanarak, işlemde kalite kontrolü için standart bir HPLC şişesine yaklaşık olarak 100 μL ara ürün solüsyonu manuel olarak aktarın.Bu numunenin 10 μL&#39;sini HPLC&#39;ye enjekte ederek saflığı ve Arabirim kimliğiDiat bileşik. NOT: HPLC koşulları: XDB 5 um, 9.4 x 250 mm C18 kolonu. Akış 4 mL / dakika. Hareketli faz (50 mM Na2HP04, 10 mM TEA,% 5 EtOH). İzocrat 15 dakika. </li></ol> 4. Deney Günü: Hidrojenasyon DİKKAT: Ürünün hidrojenizatöre enjeksiyonu uygun koruyucu önlemler kullanarak yapılmalıdır. Hidrojen gazı doğru bir şekilde ele alınmalı ve havalandırılmalıdır. NOT: hidrojenasyon reaktörü, sentezleyicide HPLC sütununun yerine bağlanabilir ve sentezleyici yazılımı kullanılarak kontrol edilebilir. <ol><li> Sentezleyici HPLC sekansını başlatarak hidrojenatör akışını 0.5 mL / dak&#39;da ayarlayın. Elle hidrojen basıncını 50 psi&#39;ye ayarlayın. <ol><li> Etiketleme ve söndürme adımlarını tamamladıktan sonra, sentezleyici ara ürün solüsyonunu hidrojenatör / HPLC döngüsüne aktaracaktır. </li></ol></li><li> HPL&#39;de radyoaktif zirve göründüğündeC yazılımı, ürünü toplamak için toplama valfini değiştirin. Bir doz kalibratörü kullanarak ham ürünün radyoaktivitesini ölçün. NOT: Ham ürün, sıcak bir hücre içerisinde otomatik bir HPLC sistemine enjekte edilmelidir. Arıtma işleminden sonra nihai ürün daha sonra toplanır ve USP ve FDA yönetmeliklerine göre aseptik bir ISO sınıfı 5 laminar hava akımı sıcak hücresine dağıtılır. </li></ol> 5. Deney Günü: Dozun Saflaştırılması ve Hazırlanması <ol><li> Ham ürünün HPLC&#39;ye enjekte edilmesi ve son fraksiyona karşılık gelen fraksiyonların toplanması için otomatik fraksiyon toplayıcısını kullanın. Her tüp, 0.66 mL çözelti içerir. NOT: HPLC koşulları: XDB 5 um, 9.4 x 250 mm C18 kolonu. Akış 4 mL / dakika. Hareketli faz (50 mM Na2HP04, 10 mM TEA,% 5 EtOH). İzocrat 15 dakika. 4-15 dakika toplayın. </li><li> Bir doz kalibratörü kullanarak her fraksiyonun radyoaktivitesini ölçün ve kaydedin. Kesirleri en yüksek miktarda birleştirinS radyoaktivite (tipik olarak tüpler 14-18). </li><li> Ürün solüsyonunu 10 mL&#39;lik bir şırınga ile çizin ve numuneyi 0.22 μm&#39;lik bir filtreden steril bir şişeye geçirin. Şişe etiketi üzerindeki radyoaktivite miktarını, sentetik süre bitimini ve solüsyon hacmini kaydedin. Bu, enjeksiyon için son dozdur. Kalite kontrol testleri için 0.8 mL&#39;lik solüsyonu bir kenara koyun. </li></ol> 6. Deney Günü: Kalite Kontrol (QC) Testleri <ol><li> Doz bırakmadan önce: Dozu kurşunikumlu camla inceleyin. Çözüm, berrak, renksiz ve partikül madde içermemelidir. </li><li> Radyokimyasal kimlik: <ol><li> RadioTLC için: numunenin bir damlasını TLC plakasında referans standartla yan yana yerleştirin. TLC levhasını,% 95 MeOH:% 5 asetik asit kullanarak bir TLC odasında çalıştırın. Referans standardını UV aydınlatması altında görselleştirin ve konumunu kalem ile işaretleyin. </li><li> TLC plakasını radyo TLC tarama alanına bantlayınEr ve pikin kayıt zamanı. Referans standardının R f değerleri ve radyoaktif tepe değeri% 5&#39;in içinde olmalıdır. </li><li> RadioHPLC için: HPLC&#39;de referans standart ile birlikte ve referans olmadan dozdan 10 μL uygulayın. Referans standardının tutma süresi ve radyoaktif zirve eşleşmelidir. Çakıl numunesinde tek bir coelution zirvesi görülmelidir. </li></ol></li><li> Radyokimyasal saflık için: radyoHPLC ve radioTLC hedef tepeleri için eğri altındaki alanı ölçün. Hedef tepe alanı, bir araya getirilen tüm radyoaktif tepelerin alanının&gt;% 95&#39;inde olmalıdır. </li><li> Spesifik radyoaktiflik için: önceden belirlenmiş bir kalibrasyon eğrisi kullanarak UV HPLC izinin eğrisi altındaki alantan belirlenen kütle miktarı üzerinden zirve noktasındaki (5.2 aşamasında ölçülen) radyoaktivite miktarı olarak spesifik radyoaktiviteyi hesaplayın. Spesifik radyoaktiflik 50 mCi / μmol&#39;dan yüksek olmalıdır. </li><li> Kalıntı çözücü analizi için: artık çözücü miktarını ölçünTs (MeCN, MeOH) ile gaz kromatografısi kullanılmıştır. Solvent seviyeleri asetonitril için &lt;0.04% ve metanol için &lt;3000 ppm olmalıdır. EtOH miktarı w / v% 10&#39;dan az olmalıdır. </li><li> Steril filtre bütünlüğü testi için (kabarcık noktası): adım 5.3&#39;te kullanılan filtreyi, bir basınç regülatörü ile donatılmış bir azot kaynağına bağlayın ve iğneyi suya batırın. Basınç ölçeri izlerken yavaşça gaz valfini açın. Filtre, iğneden bir kabarcık akışı olmadığı için patlamadan 50 psi&#39;ye kadar olan basınçlara dayanmalıdır. İğneden bir miktar kabarcık çıkana kadar basıncı 50 psi&#39;nin üzerine çıkarın. Bu basıncı kaydedin, patlama basıncıdır ve&gt; 50 psi olmalıdır. </li><li> Radyonüklid yarılanma ömrü için: bir doz kalibratöründe ≥10 dakika aralıklarla iki zaman noktasında ürünün radyoaktivitesini ölçün. Aşağıdaki denklemi kullanarak yarılanma ömrünü hesaplayın. Yarılanma ömrü 18 F&#39;lik bir yarıçap ile 5 dakika içinde eşleşmelidir (109 ± 5 dakika): T ½ hesaplanan = 0.693 t ÷ ln (A 1 / A 2 ) Burada, t ölçümleri arasındaki zaman aralığı ve her zaman noktasında ölçülen aktivite A 1 , A 2&#39;dir . </li><li> Radyonüklid kimlik ve saflık için: bir gama sayacı kullanarak ürün örneğinin γ-ışını spektrumunu elde edin. Spektrum, 511 keV&#39;luk bir enerjide tek bir foto-zirveye sahip olmalıdır. Spektrumda başka foto-doruk olmamalıdır. </li><li> Endotoksin analizi için: bir LAL kromojenik endotoksin kantitatif testi kullanarak endotoksin düzeylerini ölçün. Nihai ürün hacmi 10 mL olan 1:10 seyreltilmiş ürün için endotoksin düzeyleri &lt;1.75 EU / mL olmalıdır. </li><li> Her QC testinden elde edilen sonuçları belgeleyin. Hayvan çalışmaları için dozun ancak tüm testler geçtiğinde bırakın. </li><li> Doz sonrası bırakma: Sterilite testi için: Her iki akışkan tioglikolata ve triptikaza dozdan bir numune ekleyinSoya sosu. Medyada 14 gün sonra hiçbir büyüme görülmemelidir. </li></ol> 7. Deney Günü: Hesaplamalar (Tablo 1) <ol><li> Çürüme öncesi düzeltilmiş radyokimyasal verim (ndc RCY) için: ndc RCY&#39;yi başlangıçtaki radyoaktivite üzerindeki nihai üründeki radyoaktivite miktarı olarak hesaplayın. </li><li> Radyoaktif etiketleme verimliliği için: etiketleme verimi, alümina-N kartuşu (toplulaştırılmamış [18F] F - ) ve toplama flakonu içindeki radyoaktivite üzerindeki toplanan flakondaki radyoaktivitenin oranı olarak hesaplanır. </li><li> Hidrojenasyon verimi için: Hidrojenasyon verimini, HPLC&#39;ye enjekte edilen radyoaktivite üzerinde istenilen pikteki radyoaktivite miktarı olarak hesaplayın. </li><li> Filtreleme kayıpları için: Filtreyi hesapla, filtrelemeden önce filtrede kalmış radyoaktivite ve şırınga radyoaktivite kaybediyor. </li></ol>

<ol>
	<li>Valk, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Positron emission tomography : basic science and clinical practice. , (2003).</li><li>Phelps, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> PET: molecular imaging and its biological applications. , (2004).</li><li>Ametamey, S. M., Honer, M., Schubiger, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+imaging+with+PET.">Molecular imaging with PET.</a> Chem Rev. 108 (5), 1501-1516 (2008).</li><li>Oriuchi, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Present+role+and+future+prospects+of+positron+emission+tomography+in+clinical+oncology.">Present role and future prospects of positron emission tomography in clinical oncology.</a> Cancer Sci. 97 (12), 1291-1297 (2006).</li><li>Heiss, W. D., Herholz, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brain+receptor+imaging.">Brain receptor imaging.</a> J Nucl Med. 47 (2), 302-312 (2006).</li><li>Brugarolas, P., Freifelder, R., Cheng, S. -. H., DeJesus, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthesis+of+meta-substituted+[18F]3-fluoro-4-aminopyridine+via+direct+radiofluorination+of+pyridine+N-oxides.">Synthesis of meta-substituted [18F]3-fluoro-4-aminopyridine via direct radiofluorination of pyridine N-oxides.</a> Chemical Communications. , (2016).</li><li>Jones, R. E., Heron, J. R., Foster, D. H., Snelgar, R. S., Mason, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+4-aminopyridine+in+patients+with+multiple+sclerosis.">Effects of 4-aminopyridine in patients with multiple sclerosis.</a> J Neurol Sci. 60 (3), 353-362 (1983).</li><li>Davis, F. A., Stefoski, D., Rush, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orally+administered+4-aminopyridine+improves+clinical+signs+in+multiple+sclerosis.">Orally administered 4-aminopyridine improves clinical signs in multiple sclerosis.</a> Ann Neurol. 27 (2), 186-192 (1990).</li><li>Goodman, A. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sustained-release+oral+fampridine+in+multiple+sclerosis:+a+randomised,+double-blind,+controlled+trial.">Sustained-release oral fampridine in multiple sclerosis: a randomised, double-blind, controlled trial.</a> Lancet. 373 (9665), 732-738 (2009).</li><li>Brugarolas, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Abstracts Of Papers Of The American Chemical Society. , (2016).</li><li>Brugarolas, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+PET+tracer+for+MS.">Development of a PET tracer for MS.</a> J Nucl Med Meeting Abstracts. 55 (1), 1124 (2014).</li><li>Brugarolas, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorinated+4-aminopyrdines+as+PET+tracers+for+MS.">Fluorinated 4-aminopyrdines as PET tracers for MS.</a> Journal of Nuclear Medicine. 56, 493 (2015).</li><li>Yoswathananont, N., Nitta, K., Nishiuchi, Y., Sato, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Continuous+hydrogenation+reactions+in+a+tube+reactor+packed+with+Pd/C.">Continuous hydrogenation reactions in a tube reactor packed with Pd/C.</a> Chem Comm. (1), 40-42 (2005).</li><li>St&#246;cklin, G., Pike, V. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Radiopharmaceuticals for Positron Emission Tomography-Methodological Aspects. 24, (1993).</li><li>Liu, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+evaluation+of+a+high-affinity+18F-trifluoroborate+octreotate+derivative+for+somatostatin+receptor+imaging.">Preclinical evaluation of a high-affinity 18F-trifluoroborate octreotate derivative for somatostatin receptor imaging.</a> J Nucl Med. 55 (9), 1499-1505 (2014).</li><li>Liu, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=18F-trifluoroborate+derivatives+of+[des-arg(10)]kallidin+for+imaging+bradykinin+b1+receptor+expression+with+positron+emission+tomography.">18F-trifluoroborate derivatives of [des-arg(10)]kallidin for imaging bradykinin b1 receptor expression with positron emission tomography.</a> Mol Pharm. 12 (3), 974-982 (2015).</li><li>Scott, P. J. H., Hockley, B. G., Kilbourn, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Radiochemical Syntheses, Volume 1: Radiopharmaceuticals for Positron Emission Tomography. , (2012).</li></ol>

Yazarlar açıklayacak bir şeye sahip değiller.

PET izleyicilerinin hazırlanması, radyasyona maruz kalmayı en aza indirmek için asgari kullanıcı müdahalesi ile etkili etiketleme gerektirir 14 . Burada, [18F] 3F4AP radyokimyasal sentezi için halihazırda görüntüleme demiyelinizasyonu için araştırılan bir PET izleyici için yarı otomatik prosedürü anlattık. Bu yarı otomatik yöntem radyoterapöre yüksek saflıkta ve hayvan çalışmaları için yeterli spesifik aktivite üretir. Bu bileşiğin sentezi için önceki yöntemler, üretilebilen radyoaktif izleyici miktarını önemli ölçüde sınırlayan elle sentez 6&#39;ya dayanıyordu. Sentez için otomatik bir metoda sahip olmak, daha tekrarlanabilir verimler sağlar ve prosedürü benzer cihazlarla diğer laboratuarlara aktarmak için daha kolay hale getirir. Prosedürün tamamen otomatikleştirilmesi için gelecekteki çabalar, büyük hayvanlarda veya insanlarda yapılan çalışmalar için yüksek miktarlarda izleyici üretilmesine vesile olacaktır. 18 F için 19F nükleofilik değişimini kullanır. Bu reaksiyonun avantajları hızlı olması ve aşırı miktarda öncül maddenin uzaklaştırılması için potansiyel olarak uzun bir saflaştırma basamağı gerçekleştirmek zorunda kalmadan hemen hemen sadece istenen ürünü üretmesidir. Burada kullanılan gibi florid değişimli etiketleme reaksiyonlarını kullanmanın bir kısıtlaması, soğuk bileşiğin ilk kütlesi nedeniyle mCi&#39;de radyoaktivite miktarı olarak μmol cinsinden bileşik miktarı üzerinden tanımlanan nihai spesifik aktivitenin sınırlandırılabilmesidir. Standart koşullar altında, 100-200 mCi 18 F - ve 50 μg prekürsör ile başlayarak, sentezin sonunda tipik spesifik aktivite, preklinik PET görüntüleme çalışmaları için yeterli görünen 100-200 mCi / μmol&#39;a kadar çıkmaktadır . Bununla birlikte, spesifik aktivite 18 F başlangıç ​​miktarını arttırarak gelişebilir - </suP&gt; miktarını düşük tutarken. Yüksek aktivite ve düşük prekürsör miktarları ile başlayarak yüksek spesifik aktivite (1-3 Ci / μmol) ile florid değişimi ile radyoligand üretmek için birkaç rapor bulunmaktadır 15 , 16 . PET izleyicilerin tüm radyokimyasal sentezlerinde olduğu gibi, radyoaktif bozunumu en aza indirgemek için çabucak çalışmak kritik önem taşır. Radyasyona maruz kalmayı en aza indirgemek için radyoaktif maddelerin tutulduğu zamanı en aza indirgemek, uygun ekranlama kullanmak ve radyoaktif madde ile kullanıcı arasındaki mesafeyi maksimize etmek de önemlidir. Bu yönler, kullanıcının elle HPLC&#39;ye enjekte etmek, fraksiyonları toplamak ve nihai ürünü filtrelemek zorunda olduğu protokolün ikinci yarısında (saflaştırma ve kalite kontrolü) özellikle önemlidir. PET izleyicilerin tüm radyokimyasal sentezlerinde olduğu gibi, mRadyoaktif bozunumu asimetre edin. Radyasyona maruz kalmayı en aza indirgemek için radyoaktif maddelerin tutulduğu zamanı en aza indirgemek, uygun ekranlama kullanmak ve radyoaktif madde ile kullanıcı arasındaki mesafeyi maksimize etmek de önemlidir. Bu yönler, kullanıcının elle hidrojene enjekte edilmesi, fraksiyonların toplanması, kurutma prosedürünün kurulması, ürünü tamponda yeniden çözülmesi ve filtrelemesi gereken protokolün ikinci yarısında (hidrojenasyon ve saflaştırma) özellikle önemlidir. Filtreleme aşaması esnasında, flakon duvarlarında büyük miktarda radyoaktif malzeme kaybetmek kolaydır. Bu nedenle, filtrelemeden önce tüm sıvıyı toplamaya çalışmanız önemlidir. Çözmek için daha büyük miktarda tampon kullanılması iyileşme verimini artırabilir, ancak HPLC üzerinde daha büyük bir hacim enjekte etmeyi gerektiren, zirve miktarını arttırıp nihai doz hacmini arttırması gerektiği için kullanımı önerilmez. Bir sorun gidermek içinNd işlemi optimize etmek, her adımın verimlerini takip etmek için önemlidir. Çoğu adımda bu, herhangi bir adım öncesi ve sonrası radyoaktivite miktarını ölçerek yapılır. Reaksiyon durumunda, verimler, HPLC tepelerinin tayin edilmesi yoluyla hesaplanabilir. Sonuçlar Bölümündeki Tablo 1 , her adım için tipik verimleri göstermektedir. Aşağıdaki Tablo 2 başarısızlığın potansiyel nedenleri ve bunların nasıl düzeltileceği ile sık rastlanan başarısızlıkların birçoğunu listelemektedir. Son olarak, burada gösterilen prosedür [18F] 3F4AP sentezi için spesifik olmasına rağmen, genel iş akışı ve bireysel adımların birçoğu diğer bileşiklerin sentezi için ortaktır17. Bu makalede, herhangi bir PET izleyici üzerinde yapılan tipik QC testlerini de gösterdik.

İnsan vücudunda küçük moleküllü bir ilacın invaziv olmayan şekilde izlenmesi hassas tıpta büyük bir potansiyele sahiptir. Moleküler görüntüleme tekniklerinde, pozitron emisyon tomografisi (PET), birçok olumlu özelliklere sahiptir: PET dedektörlerinin yüksek hassasiyeti, çok az miktardaki radyoaktif materyalin tespit edilmesine ve ölçülmesine olanak tanır ve tarayıcıların özellikleri, ilacın lokalizasyonu için doğru mekansal haritalama sağlar. 1 , 2 , 3 . Örneğin PET, bir radyoaktif glikoz analoğu, [18F] FDG 4 alım seviyesine dayalı olarak tümörlerin ve metastazların tespit edilmesine ve lokalizasyonuna izin verir. PET, nörolojik ve psikiyatrik bozuklukları teşhis etmek ve anlamak için değerli olabilen belirli beyin reseptörlerinin yerlerinin belirlenmesini ve miktarlarının belirlenmesini sağlayabilir 5 . Geliştirmek içinKüçük moleküllü bir PET izleyici olduğunda, ilgi konusu bileşik, genellikle 11 ° C veya 18 ° C olan bir pozitron yayan izotopla etiketlenmelidir. Bu iki radyoizotop arasında, 18F daha uzun yarılanma ömrüne sahiptir ( 11 C için 109 dakika vs 20.3) , Çoklu doz ve saha dışı üretim yapılmasına izin verir. Bununla birlikte, bir moleküle 18 F eklenmesi zorlu olabilir. 18 F etiketi, kimyagerin aktivitenin direkt olarak taşınması ve yüksek emilen radyasyon dozlarının alınması için otomasyona uygun hızlı reaksiyonlar gerektirir. Son zamanlarda, piridinlerin florlanması için öncüler olarak piridin N-oksitlerin kullanımını ve bu kimyasalın multipl skleroz için FDA onaylı ilacın radyoflorinlenmiş bir analoğu olan [18F] 3F4AP 6&#39;nın radyokimyasal sentezinde kullanılması şeklindeki 4- Aminopiridin (4AP) 7,8,9. thYeni radyoterapötik demiyelinizasyon için bir PET izleyici olarak halen araştırılmaktadır 10,11,12. Bu video makalesinde, IBA Synthera Sentez Birimini (bundan böyle &quot;sentezleyici&quot; olarak anılacaktır) ve kendi bünyesinde yapılan akış hidrojenasyon cihazını kullanarak bu bileşiğin yarı otomatik sentezini gösteriyoruz. Sentez, Şekil 1&#39;de gösterilen reaksiyona dayanmaktadır. Prosedüre hazırlık yaklaşık 1 saat, radyoaktif etiketleme ve saflandırma 1.5 saat ve kalite kontrol işlemleri 0.5 saat sürer.

<table><tbody><tr><td>Cyclotron produced [&lt;sup&gt;18&lt;/sup&gt;F]fluoride</td><td>House supplied/Zevacor</td><td>IBA Cyclone 18</td><td>100-200 mCi</td></tr><tr><td>Integrated fluid processor for production FLT/FDG</td><td>ABX</td><td>K-2715SYN</td><td>Cassette used for nucleophilic substitution</td></tr><tr><td>Anhydrous acetonitrile</td><td>Janssen</td><td>36431-0010</td><td>Transfer under nitrogen</td></tr><tr><td>Methanol</td><td>Janssen</td><td>67-56-1</td><td></td></tr><tr><td>ultrapure water</td><td>house supplied</td><td></td><td>Millipore MilliQ system</td></tr><tr><td>TBA-HCO3</td><td>ABX</td><td>808.0000.6</td><td>abx.de</td></tr><tr><td>QMA</td><td>Waters</td><td>WAT023525</td><td>Quaternary methyl ammonium: Anion exchange solid phase extraction cartridge for trap and release of &lt;sup&gt;18&lt;/sup&gt;F&lt;sup&gt;-&lt;/sup&gt; from the target water</td></tr><tr><td>Sodium bicarbonate</td><td>ABX</td><td>K-28XX.03</td><td>Prefilled 5 mL syringes</td></tr><tr><td>Alumina-N</td><td>Waters</td><td>WAT020510</td><td>Alumina-N solid phase extraction cartridge (for trapping unreacted &lt;sup&gt;18&lt;/sup&gt;F&lt;sup&gt;-&lt;/sup&gt;)</td></tr><tr><td>3-fluoro-4-nitropyridine N-oxide</td><td>Synthonix</td><td>76954-0</td><td>Store in desicator. Precursor</td></tr><tr><td>3-fluoro-4-aminopyridine</td><td>Sigma Aldrich</td><td>704490-1G</td><td>Reference standard</td></tr><tr><td>Oxalic acid</td><td>Sigma Aldrich</td><td>75688-50G</td><td></td></tr><tr><td>Sodium phosphate monobasic</td><td>Fisher Scientific&amp;nbsp;</td><td>S80191-1</td><td></td></tr><tr><td>Triethyl amine</td><td>Fisher Scientific&amp;nbsp;</td><td>04885-1</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol</td><td>Decon Labs</td><td>DSP-MD.43</td><td>USP</td></tr><tr><td>Final product vial</td><td>ABX</td><td>K28XX.04</td><td></td></tr><tr><td>Millex Filter Syringe</td><td>Millex</td><td>SLGVR04NL</td><td></td></tr><tr><td>10% Pd/C cartridge</td><td>Sigma Aldrich</td><td>THS-01111-12EA</td><td></td></tr><tr><td>11 mm vials + crimp seals</td><td>Fisher Scientific&amp;nbsp;</td><td>03-250-618, 06-451-117, or equivalent</td><td></td></tr><tr><td>13 mm vials + crimp seals</td><td>Fisher Scientific</td><td>06-718-992, 06-718-643, or equivalent</td><td></td></tr><tr><td>HPLC vials</td><td>Fisher Scientific</td><td>03-391-16, 03-391-17, or equivalent</td><td></td></tr><tr><td>SEMIPREP C18 column</td><td>Agilent</td><td>990967-202</td><td></td></tr><tr><td>V-vials</td><td>Alltech</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Syringes: 1, 3, 10 mL</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-829-10D, 14-829-13Q, 14-829-18G, or equivalent</td><td></td></tr><tr><td>Compressed gases: N&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;, He, H&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;</td><td>Airgas</td><td>UHP N300, UHP HE300, UHP H300, or equivalent</td><td></td></tr><tr><td>TLC plates</td><td>Sigma Aldrich</td><td>Z193275, or equivalent</td><td></td></tr><tr><td>&lt;strong&gt;Name&lt;/strong&gt;</td><td>&lt;strong&gt;Company&lt;/strong&gt;</td><td>&lt;strong&gt;Catalog Number&lt;/strong&gt;</td><td>&lt;strong&gt;Comments&lt;/strong&gt;</td></tr><tr><td>&lt;strong&gt;Equipment&lt;/strong&gt;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Synthera automated synthesizer</td><td>IBA SA, Belgium, iba-worldwide.com</td><td>Synthera, 250.001</td><td>Automatic synthesis unit</td></tr><tr><td>In-house hydrogenator</td><td>See picture</td><td></td><td>See text description</td></tr><tr><td>Hot cells</td><td>Comecer</td><td></td><td>For manipulating radioactive materials</td></tr><tr><td>RadioTLC scanner</td><td>Eckert and Ziegler</td><td></td><td>For handling sterile materials</td></tr><tr><td>HPLC</td><td>Dionex</td><td>Ultimate 3000</td><td></td></tr><tr><td>Dose calibrator</td><td>Capintec</td><td>CRC15</td><td>Or equivalent</td></tr><tr><td>Gamma counter</td><td>Capintec, 7 Vreeland Road, Florham Park, NJ 07932</td><td>CRC 15, PET-CRC25, or equivalent</td><td>For measuring radioactivity</td></tr><tr><td>Personal dosimeters</td><td>Packard</td><td>Cobra II</td><td>For measuring gamma spectrum</td></tr><tr><td>Personal radiation badges and rings</td><td>Atlantic Nuclear</td><td>Rados Rad-60 Electronic Dosimeter, or equivalent</td><td></td></tr><tr><td>Rotavap + vacuum pump</td><td>Landauer</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Lead pigs + syringe shields</td><td>Heidolph</td><td></td><td>Or equivalent</td></tr><tr><td>Geiger counter</td><td>Pinestar</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Geiger counter</td><td>Ludlum</td><td>Model 3 + Pancake GM detector, 4801605, 47-1539, or equivalent</td><td></td></tr></tbody></table>

automated radiochemical synthesis of [18f]3f4ap: a novel pet tracer for imaging demyelinating diseases

3- [18F] floro-4-aminopiridin, [18F] 3F4AP, multipl skleroz 4-aminopiridin (4AP) için FDA onaylı ilacın radyoflorize edilmiş bir analoğudur. Bu bileşik, demiyelinizasyon için bir PET izleyici olarak halen araştırılmaktadır. Yakın zamanda, bir piridin N-oksidin doğrudan fluorlanması ve bu reaksiyonun [18F] 3F4AP radyokimyasal sentezi için kullanılması olan metafluorinlenmiş piridinler üretmek için yeni bir kimyasal reaksiyon tarif ettik. Bu yazıda, bu tracer&#39;ın nasıl üretileceğini otomatik sentezleyiciyi ve kendi bünyesinde yapılan akış hidrojenasyon reaktörünü gösteriyoruz. Ayrıca, klinik öncesi hayvan görüntüleme çalışmaları için radyo traktörünü serbest bırakmadan önce yapılan standart kalite kontrol prosedürlerini gösteririz. Bu yarı otomatik prosedür, gelecekteki klinik çalışmalar için [18F] 3F4AP üretiminin temelini oluşturabilir.

[18F] 3F4AP&#39;ın radyokimyasal sentezi iki aşamadan oluşur ( Şekil 1 ). İlk adım sentez ünitesini kullanarak tamamen otomatik bir şekilde gerçekleştirilir ( Şekil 3 ). Bu kaset tabanlı sistem, dört reaktif şişesi ve bir reaktör şişesi kullanır ve reaktiflerin aktarılması ve karıştırılmasına, yanı sıra reaktörün ısıtılması, basınçlandırılması ve boşaltılmasına izin veren bilgisayar kontrollü valflere sahiptir. Buna ek olarak reaktiflerin ayrılması için standart katı faz ekstraksiyon kartuşlarını destekler. Bilgisayar arabirimi, kullanıcıların kendi sentezlerini çalıştırmak için komut dosyalarını yazmasına ve değiştirmesine olanak tanır. [18F] 3F4AP durumunda, sentez prosedürü beş temel parçadan oluşur. İlk bölümde, sentezleyici kendinden kontrol aşamalarını gerçekleştirir, reaktörü ön ısıttırır ve 18 F&#39;nin hazır olduğunu operatörün sinyalini bekler. İkinci bölüm sırasında, [18F] florid,18 F viali anyon değiştirme kartuşuna sokarak kartuştan bir çözelti tetrabutil amonyum bikarbonat kullanarak reaktöre akıtıldı. Üçüncü bölüm, sentezleyiciyi [18F] florürü azeotropik olarak vakum altında kurutarak nükleofilik yer değiştirmeye karşı reaktif hale getirir. Dördüncü bölümde, öncül otomatik olarak 18 F ile tepkimeye giren reaktöre eklenir - etiketli bileşiği üretir. Son olarak, reaksiyon, ürünün baz yükseltme bozunumunu önleyen, metanol içinde% 0.2 oksalik asit ilavesiyle söndürülür ve nihai çözelti, bir alumina-N kartuşundan geçirildikten sonra toplama şişesine basınç transfer edilir. Reaksiyona girmemiş florür. Etiketleme adımı tamamlandıktan sonra kalite kontrolü için küçük bir numune alınabilir. HPLC&#39;de bir numune çalıştırmak, etiketleme adımının çalıştığını teyit eder ve bir tahminRadyokimyasal saflığın açık olduğu ( Şekil 4 ). Ayrıca, HPLC üzerindeki UV izinden, önceden belirlenmiş bir kalibrasyon eğrisi kullanılarak kütle miktarı ürün hesaplanabilir. İşlem sırasında kalite kontrol HPLC çalışırken, ikinci reaksiyon adımı, N-oksit ve nitro gruplarının indirgenmesi gerçekleştirilir. Bunu yapmak için, etiketli ürün Yoswathananont ve diğerleri tarafından yayımlanan metoda dayalı olarak bir şirket içi hidrojenleme cihazına otomatik olarak enjekte edilir . 13 ( Şekil 2 ). Bu cihaz, geri akışını önlemek için çek valfler ile donatılmış hatlar vasıtasıyla akış hidrojenasyon cihazına bağlanmış bir HPLC pompa ve sıkıştırılmış bir hidrojen tankından oluşur. Ürün, HPLC pompası ile itilir ve bir T şekilli karıştırıcıda hidrojen ile karıştırılır. Bu karışım daha sonra katı bir destek üzerinde% 10 Pd / C katalizörü içeren küçük bir kartuştan geçirilir. Kata geçtikten sonraDaha sonra indirgenmiş ürün küçük fraksiyonlarda toplanır. Hidrojenasyon işleminden sonra, ham ürün nakledilir ve nihai ürünün saflaştırılması için HPLC&#39;ye manuel olarak enjekte edilir ( Şekil 5 ). HPLC&#39;nin mobil fazı hayvan enjeksiyonuyla uyumlu olacak şekilde seçilmiştir. Ürüne tekabül eden doruklar toplanır ve nihai dozu elde etmek için süzülür-sterilize edilir. PET görüntüleme çalışmaları için doz bırakmadan önce, kalite kontrol testleri yapılır. Bu testler, izleyicinin, olması gerektiği kimyasal varlık ve enjeksiyon için güvenli olmasını sağlamak için gerçekleştirilir. Bu testlerden bazıları hayvanlara enjekte etmek için gerekli olmayabilir, ancak genel olarak insan kullanım kılavuzlarını izlemeniz önerilir. Bunu yapmak, ürünün kalitesini garanti eder, bu da sonuçların güvenini arttırır ve fakirliği artırırİnsan enjeksiyonu ürününün imalatına gelecekteki geçişi ilitür. Tablo 1 , başlangıç ​​miktarı radyoaktivitesi, başlangıç ​​ön öncüsü miktarı, her adım için verim, spesifik aktivite, filtreleme kaybı gibi tipik sentez parametrelerini içerir . Bu parametreler, aralıklı başarısızlıkların ve prosedürün gelecekte optimizasyonunun yararlıdır. <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/55537/55537fig1.jpg" /> Şekil 1. Reaksiyon şeması. Radyokimyasal sentez, 19 F / 18 F değişimi ile takip edilen paladyum katalizli hidrojenleme ile etiketlenmeyi içerir. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55537/55537fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen tıklayınız.</a> <img alt="şekil 2"<html> Src = &quot;/ dosyalar / ftp_upload / 55537 / 55537fig2.jpg&quot; /&gt; Şekil 2. Hidrojenasyon sistemi. Cihaz şeması. Bu cihaz, Yoswathananont ve ark.&#39;nın yayınına dayanmaktadır . (Ref 13). <img alt="Şekil 3" src="/files/ftp_upload/55537/55537fig3.jpg" /> Şekil 3. Sentezleyici entegre akışkan işlemci (IFP) ve reaktiflerin düzeni. IFP dört reaktif şişesi, bir QMA kartuşu ve bir reaktör flakonu içerir. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55537/55537fig3large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen tıklayınız.</a> <img alt="Şekil 4" src="/files/ftp_upload/55537/55537fig4.jpg" /> Şekil 4. Ara ürün için UV ve radyoHPLC izleyicileri. 3-floro-4-nitropiridin N-oksit, 313 nm&#39;de karakteristik bir absorpsiyona sahiptir.E.jove.com/files/ftp_upload/55537/55537fig4large.jpg &quot;target =&quot; _ blank &quot;&gt; Bu figürde daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen tıklayınız. <img alt="Şekil 5" src="/files/ftp_upload/55537/55537fig5.jpg" /> Şekil 5. Nihai ürün için UV ve radyoHPLC izleyicileri. 3-floro-4-aminoopiridin 254 nm&#39;de emilir. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55537/55537fig5large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen tıklayınız.</a> <table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td> kavram </td><td> Ortalama (n = 4) </td><td> SD </td><td> Yorumlar </td></tr><tr><td> Başlangıçtaki 18 F etkinliği (mCi) </td><td> 148.0 </td><td> 44,9 </td><td> Sentez başlangıcı </td></tr><tr><td> Prekürsör miktarı (μg) </td><td> 50 </td&gt; <td></td><td> 1.0 mg / mL stoktan 50 μL kullanın </td></tr><tr><td> QMA&#39;da kalan etkinlik (mCi) </td><td> 3.0 </td><td> 1.7 </td><td> Etiketleme basamağının sonunda ölçüldü </td></tr><tr><td> Radyoaktif işaretleme </td><td> % 29.7 </td><td> % 6.3 </td><td> Act_collection_vial ÷ (Act_collection_vial + Act_AluN) </td></tr><tr><td> Radyokimyasal saflık (HPLC-1) </td><td> &gt;% 98 </td><td></td><td> HPLC-1 QC&#39;den </td></tr><tr><td> Spec. davranmak. Ara madde (mCi / umol) </td><td> 122,9 </td><td> 29,7 </td><td> Kalibrasyon eğrisi kullanarak HPLC-1&#39;den </td></tr><tr><td> Hidrojenasyonun iyileştirilmesi (dc) </td><td> % 74 </td><td> % 9.0 </td><td> Çürüme için düzeltildi </td></tr><tr><td> HPLC radyokimyasal saflık (HPLC-2) </td><td> % 90.7 </td><td> % 2.9 </td><td> HPLC-2&#39;den hesaplandı </td></tr><tr><td> Kurutma verimi </td><td> &gt;% 98 </td><td></td><td> Çürüme için düzeltildi </td></tr><tr><td> İyileştirmeyi filtrelemek </td><td> % 93.5 </td><td> % 1.7 </td><td> Çürüme için düzeltildi </td></tr><tr><td> Doz hacmi (mL) </td><td> 3.3 </td><td></td><td> En yüksek radyoaktifliğe sahip fraksiyonları toplayın </td></tr><tr><td> Spec. davranmak. Nihai ürün (mCi / umol) </td><td> 75.5 </td><td> 30.0 </td><td> HPLC-3&#39;ten kalibrasyon eğrisi kullanılarak </td></tr><tr><td> Sentez etkinliği </td><td> % 8.5 </td><td> % 3.6 </td><td> Çürüme önleme sorunu düzeltildi </td></tr><tr><td> Sentez süresi (dk) </td><td> 104 </td><td> 11.2 </td><td></td></tr></tbody></table> Tablo 1. Radyokimyasal sentez parametreleri. <table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td> Sık karşılaşılan problemler </td><td> Potansiyel nedenler ve çözümler </td></tr><tr><td rowspan="3"> [18F] florür QMA&#39;dan verimli bir şekilde elimine edilmemiştir </td><td> · TBA-HCO 3 doğru hazırlanmamıştır. Konsantrasyonun yeterli olduğundan emin olun. </td></tr><tr><td> · TBA-HCO 3 flakonunda sızıntı var. Sıkma contasının sıkı olduğundan ve septuma IFP&#39;ye yerleştirmeden önce delinmediğinden emin olun. </td></tr><tr><td> · TBA-HCO 3 iyi durumda değil. Yeni bir parti sipariş edin. </td></tr><tr><td rowspan="2"> Etiketleme verimi düşük </td><td> · Prekürsör solüsyonunda nem var. Kuru ön madde ve çözücüler. </td></tr><tr><td> · Sıcaklık çok düşük. </td></tr><tr><td rowspan="3"> Tepkime çözeltisi sarıdır </td><td> · Ürün taban nedeniyle bozuluyor. Daha az TBA-HCO 3 kullanın. </td></tr><tr><td> · OradaÇok önceden haberci. Daha az öncü kullanın. </td></tr><tr><td> · 18 F miktarı için çok az solvent var. Daha fazla çözücü kullanın. </td></tr><tr><td> RadioHPLC&#39;de ek tepeler </td><td> · Nitro grubu yerini alıyor: reaksiyon sıcaklığını düşürmek veya reaksiyon süresini kısaltmak. </td></tr><tr><td rowspan="3"> Hidrojenasyon reaksiyonu çalışmıyor </td><td> · Katalizör iyi değildir. Yeni bir kartuş kullanın. </td></tr><tr><td> · Akış çok hızlıdır ve katalizör ile alt tabaka arasında yeterli temasa izin vermez. Akışı azalt. </td></tr><tr><td> · Hidrojen basinci çok düsüktür. H2 basıncını arttırın. </td></tr><tr><td> Prosedür esnasında hidrojen basıncı dramatik bir şekilde artar </td><td> Kartuş bütünlüğü tehlikeye girer ve sağlam destek hatları tıkar. Akışı durdurun ve gazını kesin. Radyoaktivite bozunsun. Katalizör kartuşunu çıkarın ve sistemi boşaltın. KoyEw kartuşu. </td></tr><tr><td> Hidrojenasyon verimi düşük </td><td> · Katalizör için rekabet eden çok fazla yabancı madde (MeCN, oksalik asit). Safsızlık miktarını azaltın veya öncünün kütlesini arttırın (Uyarı: artan öncül miktarı spesifik aktiviteyi azaltacaktır). </td></tr><tr><td rowspan="2"> Hidrojenleme adımından radyoaktivitenin geri kazanımı düşüktür </td><td> · Sistemde bir sızıntı var. Hidrojen hattına sızıntıları ve geri yıkamayı kontrol edin. </td></tr><tr><td> · Reaktörde bileşik deflorinasyon yapıyor. Farklı reaksiyon koşullarını (basınç, sıcaklık, akış, vb. ) Değerlendirin. </td></tr><tr><td rowspan="2"> Filtrasyon sırasında çok fazla radyoaktivite kaybedildi </td><td> · Kullanmadan önce filtreyi ıslatın. </td></tr><tr><td> Düşük ölü hacimli filtre kullanın. </td></tr><tr><td rowspan="4"> HPLC üzerindeki son ürün zirvesi geniş görünüyor </td><td> · Çok fazla hacim enjekte edildi. Alt yükleount. Daha geniş çaplı sütun kullanın. </td></tr><tr><td> · Kolon iyi şartlandırılmamıştır. Sütun en az 30 sütun hacmi için ayarlayın. </td></tr><tr><td> · Mobil fazın pH değeri düşüktür. PH değerinin ≥ 8 olduğundan emin olun. </td></tr><tr><td> · Kolon iyi durumda değil. Kolonu değiştirin. Temel pH ile uyumlu sütun kullanın. </td></tr></tbody></table> Çizelge 2. Sorun giderme kılavuzu.

Watch this Scientific Journal Video about Automated Radiochemical Synthesis of [18F]3F4AP: A Novel PET Tracer for Imaging Demyelinating Diseases at JoVE.com

Automated Radiochemical Synthesis of [18F]3F4AP: A Novel PET Tracer for Imaging Demyelinating Diseases

[18F] 3F4AP&#39;in yarı otomatikleştirilmiş radyokimyasal sentezini ve kalite kontrol prosedürlerini gösteririz.

Otomatik Radyokimyasal Sentez [<sup&gt; 18</sup&gt; F] 3F4AP: Demyelinizan Hastalıkların Görüntülenmesine Yönelik Yeni Bir PET İzleyici

3-[18F]fluoro-4-aminopyridine, [18F]3F4AP, is a radiofluorinated analog of the FDA-approved drug for multiple sclerosis 4-aminopyridine (4AP). This ...

automated-radiochemical-synthesis-18f3f4ap-novel-pet-tracer-for

Research

JoVE Journal

Medicine

Automated Radiochemical Synthesis of [18F]3F4AP: A Novel PET Tracer for Imaging Demyelinating Diseases

9.9K Görüntüleme.  The University of Chicago.  [18F] 3F4AP'in yarı otomatikleştirilmiş radyokimyasal sentezini ve kalite kontrol prosedürlerini gösteririz. 

Video: Automated Radiochemical Synthesis of [18F]3F4AP: A Novel PET Tracer for Imaging Demyelinating Diseases

Radionuclide-fluorescence Reporter Gene Imaging to Track Tumor Progression in Rodent Tumor Models

Metastasis is responsible for most cancer deaths. Despite extensive research, the mechanistic understanding of the complex processes governing metastasis remains incomplete. In vivo models are paramount for metastasis research, but require refinement. Tracking spontaneous metastasis by non-invasive in vivo imaging is now possible, but remains challenging as it requires long-time observation and high sensitivity. We describe a longitudinal combined radionuclide and fluorescence whole-body in vivo imaging approach for tracking tumor progression and spontaneous metastasis. This reporter gene methodology employs the sodium iodide symporter (NIS) fused to a fluorescent protein (FP). Cancer cells are engineered to stably express NIS-FP followed by selection based on fluorescence-activated cell sorting. Corresponding tumor models are established in mice. NIS-FP expressing cancer cells are tracked non-invasively in vivo at the whole-body level by positron emission tomography (PET) using the NIS radiotracer [18F]BF4-. PET is currently the most sensitive in vivo imaging technology available at this scale and enables reliable and absolute quantification. Current methods either rely on large cohorts of animals that are euthanized for metastasis assessment at varying time points, or rely on barely quantifiable 2D imaging. The advantages of the described method are: (i) highly sensitive non-invasive in vivo 3D PET imaging and quantification, (ii) automated PET tracer production, (iii) a significant reduction in required animal numbers due to repeat imaging options, (iv) the acquisition of paired data from subsequent imaging sessions providing better statistical data, and (v) the intrinsic option for ex vivo confirmation of cancer cells in tissues by fluorescence microscopy or cytometry. In this protocol, we describe all steps required for routine NIS-FP-afforded non-invasive in vivo cancer cell tracking using PET/CT and ex vivo confirmation of in vivo results. This protocol has applications beyond cancer research whenever in vivo localization, expansion and long-time monitoring of a cell population is of interest.

We describe a protocol for preclinical in vivo tracking of cancer metastasis. It is based on a radionuclide-fluorescence reporter combining the sodium iodide symporter, detected by non-invasive [18F]tetrafluoroborate-PET, and a fluorescent protein for streamlined ex vivo confirmation. The method is applicable for preclinical in vivo cell tracking beyond tumor biology.

Kemirgen tümör modelleri ilerlemesinde tümör izlemek için Imaging radyonüklid Floresans muhabir gen

Metastasis is responsible for most cancer deaths. Despite extensive research, the mechanistic understanding of the complex processes governing metastasis ...

Kanser Araştırmaları

Automation of a Positron-emission Tomography (PET) Radiotracer Synthesis Protocol for Clinical Production

The development of new positron-emission tomography (PET) tracers is enabling researchers and clinicians to image an increasingly wide array of biological targets and processes. However, the increasing number of different tracers creates challenges for their production at radiopharmacies. While historically it has been practical to dedicate a custom-configured radiosynthesizer and hot cell for the repeated production of each individual tracer, it is becoming necessary to change this workflow. Recent commercial radiosynthesizers based on disposable cassettes/kits for each tracer simplify the production of multiple tracers with one set of equipment by eliminating the need for custom tracer-specific modifications. Furthermore, some of these radiosynthesizers enable the operator to develop and optimize their own synthesis protocols in addition to purchasing commercially-available kits. In this protocol, we describe the general procedure for how the manual synthesis of a new PET tracer can be automated on one of these radiosynthesizers and validated for the production of clinical-grade tracers. As an example, we use the ELIXYS radiosynthesizer, a flexible cassette-based radiochemistry tool that can support both PET tracer development efforts, as well as routine clinical probe manufacturing on the same system, to produce [18F]Clofarabine ([18F]CFA), a PET tracer to measure in vivo deoxycytidine kinase (dCK) enzyme activity. Translating a manual synthesis involves breaking down the synthetic protocol into basic radiochemistry processes that are then translated into intuitive chemistry &#34;unit operations&#34; supported by the synthesizer software. These operations can then rapidly be converted into an automated synthesis program by assembling them using the drag-and-drop interface. After basic testing, the synthesis and purification procedure may require optimization to achieve the desired yield and purity. Once the desired performance is achieved, a validation of the synthesis is carried out to determine its suitability for the production of the radiotracer for clinical use.

Automation of a Positron-emission Tomography PET Radiotracer Synthesis Protocol for Clinical Production

Positron-emission tomography (PET) imaging sites that are involved in multiple early clinical research trials need robust and versatile radiotracer manufacturing capabilities. Using the radiotracer [18F]Clofarabine as an example, we illustrate how to automate the synthesis of a radiotracer using a flexible, cassette-based radiosynthesizer and validate the synthesis for clinical use.

Klinik üretim için bir pozitron emisyon tomografi (PET) Radiotracer sentez protokolü'nün Otomasyon

The development of new positron-emission tomography (PET) tracers is enabling researchers and clinicians to image an increasingly wide array of biological ...

Kimya

Radiotracer Administration for High Temporal Resolution Positron Emission Tomography of the Human Brain: Application to FDG-fPET

Functional positron emission tomography (fPET) provides a method to track molecular targets in the human brain. With a radioactively-labelled glucose analogue, 18F-fluordeoxyglucose (FDG-fPET), it is now possible to measure the dynamics of glucose metabolism with temporal resolutions approaching those of functional magnetic resonance imaging (fMRI). This direct measure of glucose uptake has enormous potential for understanding normal and abnormal brain function and probing the effects of metabolic and neurodegenerative diseases. Further, new advances in hybrid MR-PET hardware make it possible to capture fluctuations in glucose and blood oxygenation simultaneously using fMRI and FDG-fPET.
The temporal resolution and signal-to-noise of the FDG-fPET images is critically dependent upon the administration of the radiotracer. This work presents two alternative continuous infusion protocols and compares them to a traditional bolus approach. It presents a method for acquiring blood samples, time-locking PET, MRI, experimental stimulus, and administering the non-traditional tracer delivery. Using a visual stimulus, the protocol results show cortical maps of the glucose-response to external stimuli on an individual level with a temporal resolution of 16 s.

This manuscript describes two radiotracer administration protocols for FDG-PET (constant infusion and bolus plus infusion) and compares them to bolus administration. Temporal resolutions of 16 s are achievable using these protocols.

İnsan Beyninin Yüksek Zamansal Çözünürlük pozitron Emisyon Tomografisi için Radiotracer İdaresi: FDG-fPET Uygulaması

Functional positron emission tomography (fPET) provides a method to track molecular targets in the human brain. With a radioactively-labelled glucose ...

Davranış

Technical Aspect of the Automated Synthesis and Real-Time Kinetic Evaluation of [11C]SNAP-7941

Positron emission tomography (PET) is an essential molecular imaging technique providing insights into pathways and using specific targeted radioligands for in vivo investigations. Within this protocol, a robust and reliable remote-controlled radiosynthesis of [11C]SNAP-7941, an antagonist to the melanin-concentrating hormone receptor 1, is described. The radiosynthesis starts with cyclotron produced [11C]CO2 that is subsequently further reacted via a gas-phase transition to [11C]CH3OTf. Then, this reactive intermediate is introduced to the precursor solution and forms the respective radiotracer. Chemical as well as the radiochemical purity are determined by means of RP-HPLC, routinely implemented in the radiopharmaceutical quality control process. Additionally, the molar activity is calculated as it is a necessity for the following real-time kinetic investigations. Furthermore, [11C]SNAP-7941 is applied to MDCKII-WT and MDCKII-hMDR1 cells for evaluating the impact of P-glycoprotein (P-gp) expression on cell accumulation. For this reason, the P-gp expressing cell line (MDCKII-hMDR1) is either used without or with blocking prior to experiments by means of the P-gp substrate (&#177;)-verapamil and the results are compared to the ones observed for the wildtype cells. The overall experimental approach demonstrates the importance of a precise time-management that is essential for every preclinical and clinical study using PET tracers radiolabelled with short-lived nuclides, such as carbon-11 (half-life: 20 min).

Technical Aspect of the Automated Synthesis and Real-Time Kinetic Evaluation of [11C]SNAP-7941

Here, we represent a protocol for the fully automated radiolabelling of [11C]SNAP-7941 and the analysis of the real-time kinetics of this PET-tracer on P-gp expressing and non-expressing cells.

Otomatik sentez ve gerçek zamanlı kinetik değerlendirmesinin teknik yönü [11C] SNAP-7941

Positron emission tomography (PET) is an essential molecular imaging technique providing insights into pathways and using specific targeted radioligands ...

Solid Phase 11C-Methylation, Purification and Formulation for the Production of PET Tracers

Routine production of radiotracers used in positron emission tomography (PET) mostly relies on wet chemistry where the radioactive synthon reacts with a non-radioactive precursor in solution. This approach necessitates purification of the tracer by high performance liquid chromatography (HPLC) followed by reformulation in a biocompatible solvent for human administration. We recently developed a novel 11C-methylation approach for the highly efficient synthesis of carbon-11 labeled PET radiopharmaceuticals, taking advantage of solid phase cartridges as disposable &#34;3-in-1&#34; units for the synthesis, purification and reformulation of the tracers. This approach obviates the use of preparative HPLC and reduces the losses of the tracer in transfer lines and due to radioactive decay. Furthermore, the cartridge-based technique improves synthesis reliability, simplifies the automation process and facilitates compliance with the Good Manufacturing Practice (GMP) requirements. Here, we demonstrate this technique on the example of production of a PET tracer Pittsburgh compound B ([11C]PiB), a gold standard in vivo imaging agent for amyloid plaques in the human brains.

Solid Phase 11C-Methylation, Purification and Formulation for the Production of PET Tracers

We report an efficient carbon-11 radiolabeling technique to produce clinically relevant tracers for Positron Emission Tomography (PET) using solid phase extraction cartridges. 11C-methylating agent is passed through a cartridge preloaded with precursor and successive elution with aqueous ethanol provides chemically and radiochemically pure PET tracers in high radiochemical yields.

Pet İzleyicilerin Üretimi için Katı Faz 11C-Metilasyon, Arıtma ve Formülasyon

Routine production of radiotracers used in positron emission tomography (PET) mostly relies on wet chemistry where the radioactive synthon reacts with a ...

18F-Labeling of Radiotracers Functionalized with a Silicon Fluoride Acceptor (SiFA) for Positron Emission Tomography

The para-substituted di-tert-butylfluorosilylbenzene structural motif known as the silicon-fluoride acceptor (SiFA) is a useful tag in the radiochemist&#39;s toolkit for incorporating radioactive [18F]fluoride into tracers for use in positron emission tomography. In comparison to conventional radiolabeling strategies, isotopic exchange of fluorine-19 from SiFA with [18F]fluoride is carried out at room temperature and requires minimal reaction participants. The formation of by-products is thus negligible, and purification is greatly simplified. However, while the precursor molecule used for labeling and the final radiolabeled product are isotopically discrete, they are chemically identical and are thus inseparable during purification procedures. The SiFA tag is also susceptible to degradation under the basic conditions arising from the processing and drying of [18F]fluoride. The &#39;4 drop method&#39;, wherein only the first 4 drops of eluted [18F]fluoride are used from the solid-phase extraction, reduces the amount of base in the reaction, facilitates lower molar amounts of precursor, and reduces degradation.

18F-Labeling of Radiotracers Functionalized with a Silicon Fluoride Acceptor SiFA for Positron Emission Tomography

The synthesis of fluorine-18 (18F) labeled radiopharmaceuticals for positron emission tomography typically requires months of experience. When incorporated into a radiotracer, the silicon-fluoride acceptor (SiFA) motif enables a simple 18F-labeling protocol that is independent of costly equipment and preparatory training, while reducing precursor quantity needed and utilizing milder reaction conditions.

18.000 Pozitron Emisyon Tomografisi Için Silikon Florür Alıcı (SiFA) ile İşlevselleştirilmiş Radyotracerlerin F-Etiketlemesi

The para-substituted di-tert-butylfluorosilylbenzene structural motif known as the silicon-fluoride acceptor (SiFA) is a useful tag in the ...

Radiosynthesis of 1-(2-[18F]Fluoroethyl)-L-Tryptophan using a One-pot, Two-step Protocol

The kynurenine pathway (KP) is a primary route for tryptophan metabolism. Evidence strongly suggests that metabolites of the KP play a vital role in tumor proliferation, epilepsy, neurodegenerative diseases, and psychiatric illnesses due to their immune-modulatory, neuro-modulatory, and neurotoxic effects. The most extensively used positron emission tomography (PET) agent for mapping tryptophan metabolism, &#945;-[11C]methyl-L-tryptophan ([11C]AMT), has a short half-life of 20 min with laborious radiosynthesis procedures. An onsite cyclotron is required to radiosynthesize [11C]AMT. Only a limited number of centers produce [11C]AMT for preclinical studies and clinical investigations. Hence, the development of an alternative imaging agent that has a longer half-life, favorable in vivo kinetics, and is easy to automate is urgently needed. The utility and value of 1-(2-[18F]fluoroethyl)-L-tryptophan, a fluorine-18-labeled tryptophan analog, has been reported in preclinical applications in cell line-derived xenografts, patient-derived xenografts, and transgenic tumor models.
This paper presents a protocol for the radiosynthesis of 1-(2-[18F]fluoroethyl)-L-tryptophan using a one-pot, two-step strategy. Using this protocol, the radiotracer can be produced in a 20 &#177; 5% (decay corrected at the end of synthesis, n &#62; 20) radiochemical yield, with both radiochemical purity and enantiomeric excess of over 95%. The protocol features a small precursor amount with no more than 0.5 mL of reaction solvent in each step, low loading of potentially toxic 4,7,13,16,21,24-hexaoxa-1,10-diazabicyclo[8.8.8]hexacosane (K222), and an environmentally benign and injectable mobile phase for purification. The protocol can be easily configured to produce 1-(2-[18F]fluoroethyl)-L-tryptophan for clinical investigation in a commercially available module.

Radiosynthesis of 1-2-[18F]Fluoroethyl-L-Tryptophan using a One-pot, Two-step Protocol

Here, we describe the radiosynthesis of 1-(2-[18F]Fluoroethyl)-L-tryptophan, a positron emission tomography imaging agent for studying tryptophan metabolism, using a one-pot, two-step strategy in a radiochemistry synthesis system with good radiochemical yields, high enantiomeric excess, and high reliability.

1-(2-[18F]Floroetil)-L-Triptofanın Tek Kaplı, İki Adımlı Protokol Kullanılarak Radyosentezi

The kynurenine pathway (KP) is a primary route for tryptophan metabolism. Evidence strongly suggests that metabolites of the KP play a vital role in tumor ...

Automated Production of [68Ga]Ga-FAPI-46 on the iPHASE MultiSyn Synthesizer

An Automated Radiosynthesis of [68Ga]Ga-FAPI-46 for Routine Clinical Use

[68Ga]Ga-FAPI-46 is a promising new tracer for the imaging of fibroblast activation protein (FAP) by positron emission tomography (PET). Labeled FAP inhibitors (FAPIs) have demonstrated uptake in various types of cancers, including breast, lung, prostate, pancreatic and colorectal cancer. FAPI-PET also possesses a practical advantage over FDG-PET as fasting and resting are not required. [68Ga]Ga-FAPI-46 exhibits enhanced pharmacokinetic properties, improved tumor retention, and higher contrast images than the earlier presented [68Ga]Ga-FAPI-02 and [68Ga]Ga-FAPI-04. Although a manual synthesis protocol for [68Ga]Ga-FAPI-46 was initially described, in recent years, automated methods using different commercial synthesizers have been reported.
In this work, we describe the development of the automated synthesis of [68Ga]Ga-FAPI-46 using the iPHASE MultiSyn synthesizer for clinical applications. Initially, optimization of the reaction time and comparison of the performance of four different solid phase extraction (SPE) cartridges for final product purification were investigated. Then, the development and validation of the production of 0.6-1.7 GBq of [68Ga]Ga-FAPI-46 were conducted using these optimized parameters. The product was synthesized in 89.8 &#177; 4.8% decay corrected yield (n = 6) over 25 min. The final product met all recommended quality control specifications and was stable up to 3 h post synthesis.

This work describes the automated production of up to 1.7 GBq of [68Ga]Ga-FAPI-46 on the iPHASE MultiSyn synthesizer for PET imaging of fibroblast activation protein.

[68Ga]Ga-FAPI-46 is a promising new tracer for the imaging of fibroblast activation protein (FAP) by positron emission tomography (PET). Labeled FAP ...

Microwave-assisted One-pot Synthesis of N-succinimidyl-4-[18F]fluorobenzoate ([18F]SFB)

Biomolecules, including peptides,1-9 proteins,10,11 and antibodies and their engineered fragments,12-14 are gaining importance as both potential therapeutics and molecular imaging agents. Notably, when labeled with positron-emitting radioisotopes (e.g., Cu-64, Ga-68, or F-18), they can be used as probes for targeted imaging of many physiological and pathological processes.15-18 Therefore, significant effort has devoted to the synthesis and exploration of 18F-labeled biomolecules. Although there are elegant examples of the direct 18F-labeling of peptides,19-22 the harsh reaction conditions (i.e., organic solvent, extreme pH, high temperature) associated with direct radiofluorination are usually incompatible with fragile protein samples. To date, therefore, the incorporation of radiolabeled prosthetic groups into biomolecules remains the method of choice.23,24
N-Succinimidyl-4-[18F]fluorobenzoate ([18F]SFB),25-37 a Bolton-Hunter type reagent that reacts with the primary amino groups of biomolecules, is a very versatile prosthetic group for the 18F-labeling of a wide spectrum of biological entities, in terms of its evident in vivo stability and high radiolabeling yield. After labeling with [18F]SFB, the resulting [18F]fluorobenzoylated biomolecules could be explored as potential PET tracers for in vivo imaging studies.1 Most [18F]SFB radiosyntheses described in the current literatures require two or even three reactors and multiple purifications by using either solid phase extraction (SPE) or high-performance liquid chromatography (HPLC). Such lengthy processes hamper its routine production and widespread applications in the radiolabeling of biomolecules. Although several module-assisted [18F]SFB syntheses have been reported,29-32, 41-42 they are mainly based on complicated and lengthy procedures using costly commercially-available radiochemistry boxes (Table 1). Therefore, further simplification of the radiosynthesis of [18F]SFB using a low-cost setup would be very beneficial for its adaption to an automated process.
Herein, we report a concise preparation of [18F]SFB, based on a simplified one-pot microwave-assisted synthesis (Figure 1). Our approach does not require purification between steps or any aqueous reagents. In addition, microwave irradiation, which has been used in the syntheses of several PET tracers,38-41 can gives higher RCYs and better selectivity than the corresponding thermal reactions or they provide similar yields in shorter reaction times.38 Most importantly, when labeling biomolecules, the time saved could be diverted to subsequent bioconjugation or PET imaging step.28,43 The novelty of our improved [18F]SFB synthesis is two-fold: (1) the anhydrous deprotection strategy requires no purification of intermediate(s) between each step and (2) the microwave-assisted radiochemical transformations enable the rapid, reliable production of [18F]SFB.

Microwave-assisted One-pot Synthesis of N-succinimidyl-4-[18F]fluorobenzoate [18F]SFB

A facile, one-pot synthesis of N-succinimidyl-4-[18F]fluorobenzoate ([18F]SFB) was developed based on a non-aqueous, three-step radiochemical process. Using microwave heating, the entire procedure can be completed in less than 30 min, or 60 min with further purification by preparative HPLC. The decay-corrected radiochemical yields (RCYs) were 35-5% (n > 30).

Mikrodalga-destekli-pot Bir Sentez N Succinimidyl-4-[ 18 F] fluorobenzoate ([ 18 F] SFB)

Biomolecules, including peptides,1-9 proteins,10,11 and antibodies and their engineered fragments,12-14 are gaining importance as both potential ...

Biyoloji

Semi-quantitative Assessment Using [18F]FDG Tracer in Patients with Severe Brain Injury

Patients with severe traumatic brain injury (sTBI) have difficulty knowing whether they are accurately expressing their thoughts and emotions because of disorders of consciousness, disrupted higher brain function, and verbal disturbances. As a consequence of an insufficient ability to communicate, objective evaluations are needed from family members, medical staff, and caregivers. One such evaluation is the assessment of functioning brain areas. Recently, multimodal brain imaging has been used to explore the function of damaged brain areas. [18F]-fluorodeoxyglucose positron emission tomography-computed tomography ([18F]FDG-PET/CT) is a successful tool for examining brain function. However, the assessment of brain glucose metabolism based on [18F]FDG-PET/CT is not standardized and depends on several varying parameters, as well as the patient&#39;s condition. Here, we describe a series of semiquantitative assessment protocols for a region-of-interest (ROI) image analysis using self-produced [18F]FDG tracers in patients with sTBI. The protocol focuses on screening the participants, preparing the [18F]FDG tracer in the hot lab, scheduling the acquisition of [18F]FDG-PET/CT brain images, and measuring glucose metabolism using the ROI analysis from a targeted brain area.

Semi-quantitative Assessment Using [18F]FDG Tracer in Patients with Severe Brain Injury

[18F]-fluorodeoxyglucose (FDG) positron emission tomography-computed tomography is useful for studying glucose metabolism related to brain function. Here, we present a protocol for an [18F]FDG tracer set-up and semiquantitative assessment of the region-of-interest analysis for targeted brain areas associated with clinical manifestations in patients with severe traumatic brain injury.

Yarı kantitatif değerlendirmesi ağır beyin hasarı olan hastalarda [18F] FDG izleyici kullanarak

Patients with severe traumatic brain injury (sTBI) have difficulty knowing whether they are accurately expressing their thoughts and emotions because of ...

Otomatik Radyokimyasal Sentez [

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler

Kemirgen tümör modelleri ilerlemesinde tümör izlemek için Imaging radyonüklid Floresans muhabir gen

Klinik üretim için bir pozitron emisyon tomografi (PET) Radiotracer sentez protokolü'nün Otomasyon

İnsan Beyninin Yüksek Zamansal Çözünürlük pozitron Emisyon Tomografisi için Radiotracer İdaresi: FDG-fPET Uygulaması

Otomatik sentez ve gerçek zamanlı kinetik değerlendirmesinin teknik yönü [¹¹C] SNAP-7941

Pet İzleyicilerin Üretimi için Katı Faz ¹¹C-Metilasyon, Arıtma ve Formülasyon

^18.000 Pozitron Emisyon Tomografisi Için Silikon Florür Alıcı (SiFA) ile İşlevselleştirilmiş Radyotracerlerin F-Etiketlemesi

1-(2-[^18F]Floroetil)-L-Triptofanın Tek Kaplı, İki Adımlı Protokol Kullanılarak Radyosentezi

An Automated Radiosynthesis of [⁶⁸Ga]Ga-FAPI-46 for Routine Clinical Use

Mikrodalga-destekli-pot Bir Sentez N Succinimidyl-4-[¹⁸ F] fluorobenzoate ([¹⁸ F] SFB)

Yarı kantitatif değerlendirmesi ağır beyin hasarı olan hastalarda [¹⁸F] FDG izleyici kullanarak