이 프로젝트는 Pedro Brugarolas에게 NIH / NIBIB 1K99EB020075 교부금과 Chicago Innovation Exchange에서 Brian Popko 및 Pedro Brugarolas에게 혁신 기금 상을 지원 받았습니다. 브라이언 팝코 (Brian Popko) 교수는 프로젝트에 대한 멘토십 및 재정 지원에 감사 드리며 첸 (Chin-Tu Chen) 교수와 시카고 대학교 (University of Chicago)의 소규모 동물 이미징 연구 소 (Small Animal Imaging Research Resource) 교수는 실험실 공간과 장비를 아낌없이 공유하고 있음을 인정합니다. IBA는이 기사의 오픈 액세스 후원에 대해 인정 받았습니다.

주의 : 방사성 물질 사용과 관련된 모든 절차는 해당 지역의 방사선 안전국의 승인을 받아야합니다. 방사성 물질로 작업 할 때 실험실 외투와 개인 방사선 배지를 착용하십시오. 항상 두 단계의 장갑을 사용하고 방사능 처리와 관련된 각 단계 후에 가이거 계수기를 사용하여 손을 확인하십시오. 장갑이 방사능으로 오염되면 폐기하고 바깥 장갑을 교체하십시오. 적절한 차폐를 사용하고 방사선원과의 접촉 시간을 최소화하고 거리를 최대화하십시오. 1. 실험 1 주 전에 : 재료 준비 <ol><li> [ 18 F] 3F4AP sequence 다운로드 : Synthera 사용자는 사용자 데이터베이스 (http://www.iba-radiopharmasolutions.com/products/chemistry)에 로그인하여 3F4AP 용 시퀀스 파일을 다운로드 할 수 있습니다. 다른 신디사이저 사용자는 일련의 단계에 따라 자체 스크립트를 작성해야 할 수 있습니다. 주석 처리 된 시퀀스를 탐색하여 s에 익숙해집니다.합성에 관련된 teps. </li><li> 합성에 필요한 가스가 충분한 지 확인하십시오. 신시사이저에는 압축 가스, 헬륨 또는 질소가 필요합니다. 또한 75 psi 이상의 압축 공기가 필요합니다. 압력이 제조자가 권장하는 범위 내에 있는지 확인하십시오. </li><li> HPLC 이동상 준비 : 1 L의 50 mM 인산 나트륨과 10 mM의 트리 에틸 아민을 준비한다. pH 측정기를 사용하여 포화 수산화 나트륨을 저어 주면서 pH를 8.0 ± 0.1로 조정한다. 0.22 μm bottletop 필터를 통해 용액을 여과하고 5 % 부피의 에탄올을 첨가한다. </li><li> 오븐에서 하룻밤 동안 건조 유리 제품. </li></ol> 2. 실험의 날 : 불소 -18 도착 전 <ol><li> 1 mL 주사기를 사용하여 시약병에 적절한 시약을 채 웁니다. 바이알 2와 3은 오븐 건조 된 약병과 아르곤하에 보관 한 무수 용매를 사용하십시오. 크림 퍼 (crimper)를 사용하여 크림 씰로 바이알을 밀봉하십시오. <ol><li> 바이알 1 채우기 (11 mm 직경 / 2 mL 볼륨 vial)을 400μL의 TBA-HCO3 + 800μL의 아세토 니트릴 (MeCN)과 혼합 하였다. </li><li> 전구 물질 용액 1.0 μg / mL + MeCN 450 μL 50 μL로 바이알 2 (13 mm / 4 mL 바이 얼)를 채 웁니다. </li><li> 유리 병 3 (11mm / 2mL 유리 병)에 500μL의 MeCN을 채 웁니다. </li><li> 메탄올 (MeOH) 중 0.2 % 옥살산 4 mL로 바이알 4 (13 mm / 4 mL 바이 얼)를 채 웁니다. </li></ol></li><li> 조건 QMA (강한 음이온 교환) 및 알루미나 - N 고상 추출 카트리지. 10 mL 주사기를 사용하여 5 mL의 8.4 % NaHCO 3 를 QMA를 통해 떨어 뜨린 다음 5 mL의 초순수 탈 이온화 I 형 물 (25 ºC에서 18.2 ΜΩ • cm)을 통과시킵니다. 5mL의 초순수를 Alumina-N 카트리지를 통과시킨 후 5mL의 MeOH + 0.2 % 옥살산을 통과시킨다. </li><li> HPLC를 켜고 30 분 동안 이동상 분당 4 mL로 C-18 컬럼을 조절한다. </li><li> 수소 촉매 카트리지 홀더에 새로운 촉매 카트리지를로드하고 100 % MeOH 0.5 mL / min의 흐름을 시작하십시오. 에스수소 조절기를 50psi로 조절하고 카트리지를 15 분 동안 조절하십시오 ( 그림 2 ). </li><li> 그림 3 과 같이 카트리지 및 수집 바이알을 부착하여 바이알 1 ~ 4를 해당 위치에 설치하여 Integrated Fluid Processor (IFP)를 조립하십시오. 벤트 니들과 함께 수집 바이알을 수소 첨가 장치의 출력 라인에 연결하십시오. </li><li> 신디사이저의 소프트웨어를 시작하십시오. 로그인과 암호를 입력하십시오. 제조업체 지침에 따라 신디사이저에서 사전 실행 검사를 수행하십시오. </li><li> &quot;Sequences&quot;를 클릭 한 다음 &quot;Open&quot;을 클릭하여 3F4AP 시퀀스를로드하십시오. </li><li> 화면의 &quot;로드&quot;버튼을 클릭하여 IFP를로드하십시오. 실행을위한 파일 이름을 입력하고 &quot;시작&quot;을 클릭하여 시퀀스를 시작하십시오. (자동 합성기는 18F 로딩 단계 전에 자동으로 멈 춥니 다.) </li><li> 신디사이저가 일상적인 자체 검사 단계 (시퀀스의 첫 번째 단계)를 거치는 것을 지켜보십시오. 비명을보세요n 경고 나 경고가 없는지 확인하십시오. 신디사이저가 라인을 비우고 실행 준비를 위해 반응기를 예열 할 때 소리에주의하십시오. 온도 표시기가 상승하여 65ºC에 있어야합니다. 신디사이저가 18 F 전송 준비가되었음을 나타내는 신호 (청각 신호음)가 나올 때까지 기다리십시오. </li></ol> 3. 실험 일 : 18 F 표시 <ol><li> 싸이클로트론에서 생성 된 18 F의 원하는 양을 사이클로트론 타겟에서 18 F 바이알에 원격 전송합니다. 방사능의 양을 확인하고 배달 시간과 함께 기록하십시오. 참고 : 18 F - 전송에 직통 전화를 사용하지 않는 경우, 중정 관을 통해 바이알에 활동을 전달하기 위해 바늘이 부착 된 미리 채운 주사기를 사용하십시오. 시작 방사능의 양은 방사선 안전국 (Office of Radiation Safety)에 의해 설정된 한계와 최종 추적자의 원하는 양에 달려있다. 전형적인 양은 50 내지 500 mCi이다. </li><li&gt; &quot;Resume&quot;을 눌러 신디사이저의 시퀀스를 다시 시작하십시오. 그러면 18 F를 QMA로 전송합니다. </li><li> 컴퓨터 화면에서 자동 시퀀스를 통해 합성 진행을 모니터링합니다. <ol><li> 바이알에서 18 초 동안 QMA로 90 초 동안 옮기는 것을 지켜보십시오. QMA에 18F를 포획 한 후, TBA-HCO3 용액 (약병 1)으로 용리된다. (시퀀스의 파트 2) </li><li> TBA 18 F가 감압 (5 kPa) 및 가열 (100 ºC)에서 건조되는 동안 신디사이저의 압력 및 온도 추적을 모니터링 한 다음 추가 건조 및 냉각 단계를 수행합니다. (시퀀스의 파트 3) </li><li> 무수 MeCN (유리 병 3)과 전구체 용액 (유리 병 2)을 반응기로 옮기고 실온에서 1 분 동안 반응하는 모습을 관찰하십시오. 용액은 무색이거나 매우 희미한 노란색이어야합니다. (시퀀스의 파트 4) </li><li> 옥살산 이동 관찰용액 (약병 4)을 반응기에 첨가 하였다. 용액이 알루미나 -N 카트리지를 통해 반응기에서 최종 제품 바이알로 전달되는 것을 관찰하십시오. (시퀀스의 파트 5) </li></ol></li><li> 순서가 끝나면 보고서를 인쇄하고 IFP를 꺼내고 가스 탱크를 잠그고 소프트웨어를 닫습니다. </li><li> 첫 번째 절차를 수립하는 동안 카트리지와 바이알을 별도로 선량 교정기에 넣고 알루미나 N 카트리지와 수집 바이알의 방사능을 측정합니다. 활동 및 측정 시간을 기록하십시오. 사용한 카트리지를 납 함유 폐기물 용기에 넣으십시오. 다음 단계로 이송하기 위해 차폐 된 용기에 수집 바이알을 놓습니다. </li><li> 부착 된 2 &quot;바늘이 달린 1 mL 주사기를 사용하여 중간 생성물 용액의 시료 약 100 μL을 표준 HPLC 바이알에 공정 중 품질 관리를 위해 수동으로 옮기십시오.이 시료의 10 μL를 HPLC에 주입하여 순도 및 중간체의 정체성diate 화합물. 참고 : HPLC 조건 : XDB 5 μm, 9.4 x 250 mm C18 컬럼. 유량 4 mL / min. 이동상 (50 mM Na2HPO4, 10 mM TEA, 5 % EtOH). 독재 정치 15 분. </li></ol> 4. 실험의 날 : 수소화 주의 : 제품의 수소 첨가 장치 주입은 적절한 차폐 예방책을 사용하여 수행해야합니다. 수소 가스는 올바르게 처리하고 배출해야합니다. 참고 : 수소화 반응기는 신디사이저의 HPLC 컬럼 대신에 연결하여 신디사이저 소프트웨어를 사용하여 제어 할 수 있습니다. <ol><li> 신디사이저 HPLC 시퀀스를 시작하여 0.5 mL / min에서 수소화 기 흐름을 설정하십시오. 수동으로 수소 압력을 50 psi로 설정하십시오. <ol><li> 라벨링 및 퀀칭 단계가 끝나면 신디사이저는 중간 생성물 용액을 수소화 장치 / HPLC 루프로 옮깁니다. </li></ol></li><li> 방사능 피크가 HPL에 나타날 때C 소프트웨어가 수집 밸브를 토글하여 제품을 수집합니다. 용량 교정기를 사용하여 조 생성물의 방사능을 측정합니다. 참고 : 조 생성물은 핫셀 내부의 자동화 된 HPLC 시스템에 주입해야합니다. 정제 후, 최종 생성물을 수집하여 USP 및 FDA 규정에 따라 무균 ISO 클래스 5 층류 공기 셀로 분배한다. </li></ol> 5. 실험의 날 : 복용량의 정화 및 준비 <ol><li> 조 생성물을 HPLC에 주입하고 자동 분획 수집기를 사용하여 최종 생성물 피크에 해당하는 분획을 수집합니다. 각 튜브에는 0.66 mL의 용액이 들어 있습니다. 참고 : HPLC 조건 : XDB 5 μm, 9.4 x 250 mm C18 컬럼. 유량 4 mL / min. 이동상 (50 mM Na2HPO4, 10 mM TEA, 5 % EtOH). 독재 정치 15 분. 수집 4-15 분. </li><li> 용량 측정기를 사용하여 각 분획의 방사능을 측정하고 기록하십시오. 가장 많은 양의 분수를 합치십시오.s의 방사능 (전형적으로 튜브 14-18). </li><li> 10 ML 주사기와 제품 솔루션을 그려 멸균 유리 병에 0.22 μm의 필터를 통해 샘플을 전달하십시오. 바이알 라벨에 방사능의 양, 합성 시간의 끝 및 용액 양을 기록하십시오. 이것은 주사를위한 최종 복용량입니다. 품질 관리 시험을 위해 ~ 0.8 mL의 용액을 곁에 두십시오. </li></ol> 6. 실험의 날 : 품질 관리 (QC) 테스트 <ol><li> 복용량 방출 이전 : 납 차폐 유리를 통해 조사량을 검사하십시오. 용액은 깨끗하고 무색이며 미립자 물질이 없어야합니다. </li><li> 방사 화학적 동일성 : <ol><li> RadioTLC의 경우 : 참조 표준과 나란히 TLC 판에 한 방울의 샘플을 놓습니다. 95 % MeOH : 5 % 아세트산을 사용하여 TLC 챔버에서 TLC 플레이트를 작동시킨다. UV 조명 하에서 참조 표준을 시각화하고 연필로 위치를 표시하십시오. </li><li> TLC 플레이트를 radioTLC 스캔의 스테이지에 테이프로 고정하십시오.그리고 피크 시간을 기록하십시오. 기준 표준 및 방사성 피크의 R f 값은 5 % 이내로 일치해야합니다. </li><li> RadioHPLC의 경우 : HPLC에서 참조 표준을 포함하거나 포함하지 않은 선량 10 μL를 실행하십시오. 참조 표준 및 방사성 피크의 보유 시간은 일치해야합니다. 스파이크 된 샘플에는 단일 공명 피크가 있어야합니다. </li></ol></li><li> 방사성 화학 순도의 경우 : radioHPLC 및 radioTLC 표적 봉우리의 곡선 아래 면적을 측정합니다. 목표 피크의 면적은 결합 된 모든 방사성 피크의 면적의&gt; 95 % 여야합니다. </li><li> 특정 방사능의 경우 : 사전 설정된 검정 곡선을 사용하여 UV HPLC 트레이스 곡선 아래의 면적에서 결정된 질량에 대해 피크의 방사능 양 (단계 5.2에서 측정 됨)으로 특정 방사능을 계산합니다. 특정 방사능은 50mCi / μmol보다 높아야합니다. </li><li> 잔류 용매 분석을 위해 : 잔류 솔벤의 양을 측정하십시오ts (MeCN, MeOH)를 가스 크로마토 그래피를 사용하여 투여한다. 용제 수준은 아세토 니트릴의 경우 &lt;0.04 %, 메탄올의 경우 &lt;3,000ppm이어야합니다. EtOH의 양은 10 % w / v 미만이어야한다. </li><li> 멸균 필터 완전성 테스트 (버블 포인트) : 단계 5.3에서 사용 된 필터를 압력 조절기가 장착 된 질소 공급 장치에 연결하고 바늘을 물에 잠기 게하십시오. 압력 게이지를 보면서 점차 가스 밸브를여십시오. 필터는 바늘에서 기포가 없으므로 파열없이 50 psi까지 견딜 수 있어야합니다. 기포가 바늘에서 나올 때까지 50 psi 이상으로 압력을 높이십시오. 이 압력을 기록하십시오. 파열 압력이며 50 psi 이상이어야합니다. </li><li> 방사성 핵종 반감기의 경우 : 선량 교정기에서 10 분 이상 두 시점에서 제품의 방사능을 측정합니다. 아래 방정식을 사용하여 반감기를 계산합니다. 반감기는 18F의 반감기와 5 분 이내에 일치해야합니다 (109 ± 5 분) : t ½ 계산 값 = 0.693t ÷ ln (A1 / A2) 여기서 t 는 측정 사이의 간격이고, A1, A2는 각 시간 지점에서 측정 된 활동입니다. </li><li> 방사성 동질성 및 순도 : 감마 카운터를 사용하여 제품 샘플의 γ 선 스펙트럼을 얻습니다. 스펙트럼은 511 keV의 에너지에서 하나의 단일 광 피크를 나타냅니다. 스펙트럼에 다른 사진 피크가 없어야합니다. </li><li> 내 독소 분석 : LAL 발색성 내 독소 정량 시험을 사용하여 내 독소 수준을 측정합니다. 최종 제품 부피가 10 mL 인 1:10 희석 된 제품의 경우 내 독소 레벨은 &lt;1.75 EU / mL이어야합니다. </li><li> 각 QC 검사의 결과를 기록하십시오. 모든 검사가 통과 된 경우에만 동물 연구를위한 용량을 방출하십시오. </li><li> 투여 후 방출 : 무균 시험을 위해 : 유체 티오 글리콜 레이트와 트립 타카 제 모두에 용량 샘플을 첨가하십시오간장 국물. 14 일이 지나면 언론 매체에서 성장을 보지 못할 것입니다. </li></ol> 7. 실험 일 : 계산 (표 1) <ol><li> 비 감쇠 보정 된 방사 화학적 수율 (ndc RCY) : 시작 방사능에 대한 최종 생성물의 방사능 량으로서 ndc RCY를 계산한다. </li><li> 방사성 표지 효소의 경우 : 알루미나 N 카트리지 (비 함유 [ 18 F] F - ) 및 수집 바이알의 방사능 대비 수집 바이알의 방사능 비율로 표지 수율을 계산합니다. </li><li> 수소화 수율의 경우 : HPLC에 주입 된 방사능보다 원하는 피크의 방사능 양으로 수소화 수율을 계산하십시오. </li><li> 필터링 손실의 경우 : 필터링을 계산하기 전에 필터에 남아있는 방사능과 방사능에 비해 주사기가 손실됨을 계산합니다. </li></ol>

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	<li>Valk, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Positron emission tomography : basic science and clinical practice. , (2003).</li><li>Phelps, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> PET: molecular imaging and its biological applications. , (2004).</li><li>Ametamey, S. M., Honer, M., Schubiger, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+imaging+with+PET.">Molecular imaging with PET.</a> Chem Rev. 108 (5), 1501-1516 (2008).</li><li>Oriuchi, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Present+role+and+future+prospects+of+positron+emission+tomography+in+clinical+oncology.">Present role and future prospects of positron emission tomography in clinical oncology.</a> Cancer Sci. 97 (12), 1291-1297 (2006).</li><li>Heiss, W. D., Herholz, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brain+receptor+imaging.">Brain receptor imaging.</a> J Nucl Med. 47 (2), 302-312 (2006).</li><li>Brugarolas, P., Freifelder, R., Cheng, S. -. H., DeJesus, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthesis+of+meta-substituted+[18F]3-fluoro-4-aminopyridine+via+direct+radiofluorination+of+pyridine+N-oxides.">Synthesis of meta-substituted [18F]3-fluoro-4-aminopyridine via direct radiofluorination of pyridine N-oxides.</a> Chemical Communications. , (2016).</li><li>Jones, R. E., Heron, J. R., Foster, D. H., Snelgar, R. S., Mason, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+4-aminopyridine+in+patients+with+multiple+sclerosis.">Effects of 4-aminopyridine in patients with multiple sclerosis.</a> J Neurol Sci. 60 (3), 353-362 (1983).</li><li>Davis, F. A., Stefoski, D., Rush, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orally+administered+4-aminopyridine+improves+clinical+signs+in+multiple+sclerosis.">Orally administered 4-aminopyridine improves clinical signs in multiple sclerosis.</a> Ann Neurol. 27 (2), 186-192 (1990).</li><li>Goodman, A. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sustained-release+oral+fampridine+in+multiple+sclerosis:+a+randomised,+double-blind,+controlled+trial.">Sustained-release oral fampridine in multiple sclerosis: a randomised, double-blind, controlled trial.</a> Lancet. 373 (9665), 732-738 (2009).</li><li>Brugarolas, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Abstracts Of Papers Of The American Chemical Society. , (2016).</li><li>Brugarolas, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+PET+tracer+for+MS.">Development of a PET tracer for MS.</a> J Nucl Med Meeting Abstracts. 55 (1), 1124 (2014).</li><li>Brugarolas, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorinated+4-aminopyrdines+as+PET+tracers+for+MS.">Fluorinated 4-aminopyrdines as PET tracers for MS.</a> Journal of Nuclear Medicine. 56, 493 (2015).</li><li>Yoswathananont, N., Nitta, K., Nishiuchi, Y., Sato, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Continuous+hydrogenation+reactions+in+a+tube+reactor+packed+with+Pd/C.">Continuous hydrogenation reactions in a tube reactor packed with Pd/C.</a> Chem Comm. (1), 40-42 (2005).</li><li>St&#246;cklin, G., Pike, V. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Radiopharmaceuticals for Positron Emission Tomography-Methodological Aspects. 24, (1993).</li><li>Liu, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+evaluation+of+a+high-affinity+18F-trifluoroborate+octreotate+derivative+for+somatostatin+receptor+imaging.">Preclinical evaluation of a high-affinity 18F-trifluoroborate octreotate derivative for somatostatin receptor imaging.</a> J Nucl Med. 55 (9), 1499-1505 (2014).</li><li>Liu, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=18F-trifluoroborate+derivatives+of+[des-arg(10)]kallidin+for+imaging+bradykinin+b1+receptor+expression+with+positron+emission+tomography.">18F-trifluoroborate derivatives of [des-arg(10)]kallidin for imaging bradykinin b1 receptor expression with positron emission tomography.</a> Mol Pharm. 12 (3), 974-982 (2015).</li><li>Scott, P. J. H., Hockley, B. G., Kilbourn, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Radiochemical Syntheses, Volume 1: Radiopharmaceuticals for Positron Emission Tomography. , (2012).</li></ol>

저자는 공개 할 것이 없습니다.

PET 추적자를 준비하려면 방사선 노출을 최소화하기 위해 최소한의 사용자 개입으로 효율적인 라벨링이 필요합니다 14 . 여기, 이미 이미 탈수 초화 검사를 받고있는 PET 추적자 인 [ 18 F] 3F4AP의 방사 화학 합성을위한 첫 번째 반자동 절차에 대해 설명했습니다. 이 반자동 방식은 동물 실험을 위해 고순도 및 충분한 비 활동성 방사성 추적자를 생산합니다. 이 화합물의 합성을위한 이전의 방법은 생성 될 수있는 방사능 추적자의 양을 상당히 제한하는 수동 합성 6 에 의존했다. 합성을위한 자동화 된 방법은 재현성있는 생산량을 제공하며 유사한 장비를 사용하는 다른 실험실로 절차를 이전하는 것을 더 쉽게 만듭니다. 이 절차를 완전히 자동화하기위한 앞으로의 노력은 대형 동물이나 인간을 대상으로 한 연구를 위해 많은 양의 추적자를 생산하는 데 도움이 될 것입니다. <p c이 과정은 방사성 동위 원소를 18F에 대해 19F의 친 핵성 교환을 사용하여 관심 분자에 통합시킨다. 이 반응의 이점은 과량의 전구체를 제거하기 위해 잠재적으로 긴 정제 단계를 수행 할 필요없이 빠르고 독점적으로 원하는 생성물을 생산한다는 것입니다. 여기에 사용 된 것과 같은 불소 교환 라벨링 반응의 한 가지 한계는 차가운 화합물의 초기 질량으로 인해 μmol 단위의 화합물 양보다 mCi에서 방사능의 양으로 정의되는 최종 비 활동이 제한 될 수 있다는 것입니다. 우리의 표준 조건 하에서, 18 F의 100 ~ 200 mCi와 50 μg의 전구체로 시작하여, 합성의 최종 특유의 활성은 100-200 mCi / μmol이며, 이것은 전임상 PET 이미징 연구에 충분하다고 여겨집니다 . 그럼에도 불구하고 특정 활동은 18F - </sup&gt;를 낮추십시오. 높은 활성과 낮은 전구체 양으로 시작하여 높은 비 활동 (1-3 Ci / μmol)으로 불소 - 교환에 의한 방사성 리간드를 생산하는 여러보고가있었습니다 15 , 16 . PET 추적자의 모든 방사 화학 합성과 마찬가지로 방사성 붕괴를 최소화하기 위해 신속하게 작업하는 것이 중요합니다. 또한 방사성 물질 취급 시간을 최소화하고, 적절한 차폐를 사용하고 방사능 노출을 최소화하기 위해 방사성 물질과 사용자 간의 거리를 최대화하는 것이 중요합니다. 이러한 측면은 사용자가 수동으로 용액을 HPLC에 주입하고, 분획을 수집하고 최종 생성물을 여과해야하는 프로토콜 (정제 및 품질 관리)의 후반 동안 특히 중요합니다. PET 추적자의 모든 방사 화학 합성과 마찬가지로,방사성 붕괴를 회피한다. 또한 방사성 물질 취급 시간을 최소화하고, 적절한 차폐를 사용하고 방사능 노출을 최소화하기 위해 방사성 물질과 사용자 간의 거리를 최대화하는 것이 중요합니다. 이러한 측면은 사용자가 수동으로 수소화기에 용액을 주입하고, 분획을 모으고, 건조 절차를 설정하고, 완충액으로 제품을 재용 해하고 그것을 여과해야하는 프로토콜 (수소화 및 정제)의 후반 동안 특히 중요합니다. 걸러내는 동안 바이알의 벽에 많은 양의 방사성 물질을 잃어 버리기 쉽습니다. 따라서, 여과하기 전에 모든 액체를 수집하는 것이 중요합니다. 더 많은 양의 완충액을 사용하여 용해 시키면 회수율을 향상시킬 수 있지만, HPLC에 더 많은 용적을 주입해야하므로 피크가 확대되고 최종 용량의 양이 증가하므로 사용하지 않는 것이 좋습니다. 문제를 해결하기 위해절차 최적화는 각 단계의 수율을 추적하는 것이 중요합니다. 대부분의 단계에서 이것은 모든 단계 전후의 방사능 양을 측정함으로써 간단히 수행됩니다. 반응의 경우 수율은 HPLC 피크의 정량을 통해 계산할 수 있습니다. 결과 섹션의 표 1 은 각 단계의 일반적인 생산량을 보여줍니다. 아래의 표 2 는 일반적으로 발생하는 실패의 많은 원인과 실패 원인 및 해결 방법을 나열합니다. 마지막으로, 여기에 설명 된 절차가 [ 18 F] 3F4AP의 합성에 특이 적이지만, 일반적인 작업 과정과 많은 개별 단계가 다른 화합물 17 의 합성에 공통적입니다. 이 기사에서는 PET 추적자에 대해 수행 된 일반적인 QC 검사도 시연했습니다.

인체 내에서 비 ​​침습적으로 소분자 약물을 추적 할 수있는 능력은 정밀 의학을 향한 큰 잠재력을 가지고 있습니다. 분자 이미지 기술 중에서 PET (positron emission tomography)는 PET 검출기의 고감도가 매우 적은 양의 방사성 물질을 탐지하고 정량화 할 수 있으며 스캐너의 특성에 따라 약물의 위치를 ​​정확하게 파악할 수 있습니다. , 3 . 예를 들어, PET는 방사성 포도당 유사체의 섭취 수준에 근거한 종양 및 전이의 검출 및 국소화를 허용합니다 [ 18 F] FDG 4 . PET는 또한 특정 뇌 수용체의 위치 및 정량화를 제공하고 신경 및 정신 질환을 진단하고 이해하는데 유용 할 수 있습니다. 개발을 위해소분자 PET 추적자에 관심있는 화합물은 양전자 방출 동위 원소, 일반적으로 11C 또는 18F로 표시되어야합니다.이 두 방사성 동위 원소 사이에서 18F는보다 긴 반감기 (109 분 대 11.3C의 20.3) 이는 다중 선량 및 오프 사이트 생산을 허용합니다. 그럼에도 불구하고 분자에 18 F를 첨가하는 것은 어려울 수 있습니다. 18 F 표시는 화학자가 활동을 직접 처리하고 고 흡수 선량을받는 것을 자동화하는 자동화와 호환되는 빠른 반응이 필요합니다. 우리는 최근 피리딘의 불소화를위한 전구체로서 피리딘 N- 옥사이드의 사용과 FDA가 승인 한 다발성 경화증 약물의 방사성 플루오르 화 유사체 인 [ 18 F] 3F4AP 6 의 방사성 화학 합성에이 화학 물질의 사용을 기술했다. 아미노 피리딘 (4AP) 7 , 8 , 9 . Th새로운 radiotracer는 탈수 초 10 , 11 , 12 를위한 애완 동물 추적자로 지금 조사 중이다. 이 동영상 기사에서는 IBA Synthera Synthesis Unit (이하 &quot;신디사이저&quot;라고 함) 및 자체 제작 된 유동 수소화 장치를 사용하여이 화합물의 반자동 합성을 시연합니다. 합성은 그림 1 에 표시된 반응을 기반으로합니다. 절차 준비는 약 1 시간, 방사성 표지 및 정제 1.5 시간, 품질 관리 절차는 0.5 시간이 소요됩니다.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Cyclotron produced [18F]fluoride</td>
			<td>House supplied/Zevacor</td>
			<td>IBA Cyclone 18</td>
			<td>100-200 mCi</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Integrated fluid processor for production FLT/FDG</td>
			<td>ABX</td>
			<td>K-2715SYN</td>
			<td>Cassette used for nucleophilic substitution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anhydrous acetonitrile</td>
			<td>Janssen</td>
			<td>36431-0010</td>
			<td>Transfer under nitrogen</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methanol</td>
			<td>Janssen</td>
			<td>67-56-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ultrapure water</td>
			<td>house supplied</td>
			<td></td>
			<td>Millipore MilliQ system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TBA-HCO3</td>
			<td>ABX</td>
			<td>808.0000.6</td>
			<td>abx.de</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>QMA</td>
			<td>Waters</td>
			<td>WAT023525</td>
			<td>Quaternary methyl ammonium: Anion exchange solid phase extraction cartridge for trap and release of 18F- from the target water</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium bicarbonate</td>
			<td>ABX</td>
			<td>K-28XX.03</td>
			<td>Prefilled 5 mL syringes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alumina-N</td>
			<td>Waters</td>
			<td>WAT020510</td>
			<td>Alumina-N solid phase extraction cartridge (for trapping unreacted 18F-)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3-fluoro-4-nitropyridine N-oxide</td>
			<td>Synthonix</td>
			<td>76954-0</td>
			<td>Store in desicator. Precursor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3-fluoro-4-aminopyridine</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>704490-1G</td>
			<td>Reference standard</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oxalic acid</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>75688-50G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium phosphate monobasic</td>
			<td>Fisher Scientific&#160;</td>
			<td>S80191-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triethyl amine</td>
			<td>Fisher Scientific&#160;</td>
			<td>04885-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Decon Labs</td>
			<td>DSP-MD.43</td>
			<td>USP</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Final product vial</td>
			<td>ABX</td>
			<td>K28XX.04</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Millex Filter Syringe</td>
			<td>Millex</td>
			<td>SLGVR04NL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10% Pd/C cartridge</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>THS-01111-12EA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>11 mm vials + crimp seals</td>
			<td>Fisher Scientific&#160;</td>
			<td>03-250-618, 06-451-117, or equivalent</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>13 mm vials + crimp seals</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>06-718-992, 06-718-643, or equivalent</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HPLC vials</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>03-391-16, 03-391-17, or equivalent</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SEMIPREP C18 column</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>990967-202</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>V-vials</td>
			<td>Alltech</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringes: 1, 3, 10 mL</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14-829-10D, 14-829-13Q, 14-829-18G, or equivalent</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Compressed gases: N2, He, H2</td>
			<td>Airgas</td>
			<td>UHP N300, UHP HE300, UHP H300, or equivalent</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TLC plates</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>Z193275, or equivalent</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Synthera automated synthesizer</td>
			<td>IBA SA, Belgium, iba-worldwide.com</td>
			<td>Synthera, 250.001</td>
			<td>Automatic synthesis unit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>In-house hydrogenator</td>
			<td>See picture</td>
			<td></td>
			<td>See text description</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hot cells</td>
			<td>Comecer</td>
			<td></td>
			<td>For manipulating radioactive materials</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RadioTLC scanner</td>
			<td>Eckert and Ziegler</td>
			<td></td>
			<td>For handling sterile materials</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HPLC</td>
			<td>Dionex</td>
			<td>Ultimate 3000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dose calibrator</td>
			<td>Capintec</td>
			<td>CRC15</td>
			<td>Or equivalent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gamma counter</td>
			<td>Capintec, 7 Vreeland Road, Florham Park, NJ 07932</td>
			<td>CRC 15, PET-CRC25, or equivalent</td>
			<td>For measuring radioactivity</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Personal dosimeters</td>
			<td>Packard</td>
			<td>Cobra II</td>
			<td>For measuring gamma spectrum</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Personal radiation badges and rings</td>
			<td>Atlantic Nuclear</td>
			<td>Rados Rad-60 Electronic Dosimeter, or equivalent</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rotavap + vacuum pump</td>
			<td>Landauer</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lead pigs + syringe shields</td>
			<td>Heidolph</td>
			<td></td>
			<td>Or equivalent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Geiger counters</td>
			<td>Pinestar</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td>Ludlum&#160;</td>
			<td>Model 3 + Pancake GM detector, 4801605, 47-1539, or equivalent</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

automated radiochemical synthesis of [18f]3f4ap: a novel pet tracer for imaging demyelinating diseases

3 - [ 18 F] fluoro-4-aminopyridine, [ 18 F] 3F4AP는 다발성 경화증 4-aminopyridine (4AP)에 대한 FDA 승인 의약품의 방사성 불소화 유사체입니다. 이 화합물은 현재 탈수 초의 PET 추적자로서 연구 중이다. 우리는 최근 피리딘 N- 산화물의 직접 불소화와 [ 18 F] 3F4AP의 방사 화학적 합성을위한이 반응의 이용으로 이루어진 메타 플루오르 화 피리딘을 생산하는 새로운 화학 반응을 기술했다. 이 기사에서는 자동 신디사이저와 사내에서 제조 한 유동 수소화 반응기를 사용하여이 트레이서를 생산하는 방법을 시연합니다. 우리는 또한 전임상 동물 영상 연구를 위해 방사성 추적자를 발표하기 전에 수행 된 표준 품질 관리 절차를 보여줍니다. 이 반자동 절차는 임상 시험을위한 [ 18 F] 3F4AP의 미래 생산을위한 기초 자료가 될 수 있습니다.

[ 18 F] 3F4AP의 방사 화학 합성은 두 단계로 구성된다 ( 그림 1 ). 첫 번째 단계는 합성 유닛을 사용하여 완전히 자동화 된 방식으로 수행됩니다 ( 그림 3 ). 이 카세트 기반 시스템은 4 개의 시약병과 1 개의 반응기 병을 사용하며 반응기 가열, 가압 및 배기뿐 아니라 시약의 이동과 혼합을 허용하는 컴퓨터 제어식 밸브가 있습니다. 또한 시약 분리를위한 표준 고체 추출 카트리지를 지원합니다. 컴퓨터 인터페이스를 통해 사용자는 자신의 합성을 실행하기 위해 스크립트를 작성하고 수정할 수 있습니다. [ 18 F] 3F4AP의 경우, 합성 과정은 다섯 가지 기본 부분으로 구성됩니다. 첫 번째 부분에서 신디사이저는 자체 점검 단계를 수행하고 원자로를 미리 예열하고 18F가 준비되었다는 운전자의 신호를 기다립니다. 두 번째 부분 동안 [ 18 F] 불화물은18F 바이알을 음이온 교환 카트리지에 넣고 테트라 부틸 암모늄 바이 카보네이트 용액을 사용하여 카트리지에서 반응기로 용리. 세 번째 부분 인 신디사이저는 [ 18 F] 플루오 라이드를 공융으로 건조시켜 친 핵성 변위에 반응성으로 만든다. 네 번째 부분에서 전구체는 반응기에 자동으로 첨가되어 18F와 반응하여 표지 화합물을 생성합니다. 마지막으로 메탄올에 0.2 %의 옥살산을 첨가하여 반응을 중단시켜 제품의 염기가 촉진 된 분해를 방지하고 최종 용액을 어떤 것을 포획하는 알루미나 -N 카트리지를 통과 한 후 수집 바이알에 압력을 전달합니다 미 반응 불화물. 라벨링 단계가 완료된 후에는 품질 관리를 위해 작은 샘플을 채취 할 수 있습니다. HPLC에서 샘플을 실행하면 라벨 작업 단계가 작동하고 추정치가 확인됩니다( 그림 4 ). 또한, HPLC의 UV 트레이스로부터 사전 설정된 검정 곡선을 사용하여 대량의 생성물을 계산할 수 있습니다. 공정 중 품질 관리 HPLC가 실행되는 동안 두 번째 반응 단계 인 N- 옥사이드 및 니트로 그룹의 환원이 수행됩니다. 이를 수행하기 위해 Yoswathananont et al. 에 의해 발표 된 방법에 근거하여 사내 수소 첨가 장치에 표지 생성물을 자동 주입 한다. 13 ( 그림 2 ). 이 장치는 역류를 방지하기 위해 역류 방지 밸브가 설치된 라인을 통해 유동 수소화 장치에 연결된 HPLC 펌프와 압축 수소 탱크로 구성됩니다. 생성물을 HPLC 펌프로 밀고 T 형 혼합기에서 수소와 혼합 하였다. 이어서,이 혼합물을 고체 지지체 상에 10 % Pd / C 촉매를 함유하는 작은 카트리지를 통과시킨다. 카타를 통과 한 후이어서, 환원 된 생성물을 작은 분획으로 수집한다. 수소화 후, 최종 생성물을 정제하기 위해 조 생성물을 수송하여 수동으로 HPLC에 주입한다 ( 그림 5 ). HPLC의 이동상은 동물 주입과 호환되도록 선택되었습니다. 생성물에 해당하는 피크를 수집하고 여과 살균하여 최종 용량을 얻습니다. PET 이미징 연구를위한 용량을 공개하기 전에 품질 관리 테스트가 수행됩니다. 이 테스트는 추적자가 될 것으로 예상되는 화학 물질이며 주사에 안전하다는 것을 확인하기 위해 수행됩니다. 이 검사 중 일부는 동물에게 주입하기 위해 필요하지 않을 수도 있지만 일반적으로 인간 사용 지침을 따르는 것이 좋습니다. 이렇게하면 제품의 품질이 보장되므로 결과에 대한 확신이 커지고 fac인간 주입을위한 제품 제조에 대한 미래의 전환을 촉진합니다. 표 1 은 초기 방사능, 전구체의 초기 양, 각 단계의 수율, 비 활동, 여과 손실 등을 포함하는 전형적인 합성 파라미터를 포함한다 . 이러한 파라미터는 때때로 실패 및 향후의 공정 최적화 문제를 해결하는 데 유용하다. <img alt="그림 1" src="/files/ftp_upload/55537/55537fig1.jpg" /> 그림 1. 반응식. 방사 화학적 합성은 19 F / 18 F 교환에 의한 라벨링과이어서 팔라듐 - 촉매 수소화에 의해 이루어진다. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55537/55537fig1large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a> <img alt="그림 2"<html> src = &quot;/ files / ftp_upload / 55537 / 55537fig2.jpg&quot;/&gt; 그림 2. 수소화 시스템. 장치의 개략도. 이 장치는 Yoswathananont et al. (참고 문헌 13). <img alt="그림 3" src="/files/ftp_upload/55537/55537fig3.jpg" /> 그림 3. 신디사이저 통합 유체 프로세서 (IFP) 및 시약의 구성표 IFP에는 4 개의 시약병, QMA 카트리지 및 1 개의 원자로 용 바이알이 들어 있습니다. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55537/55537fig3large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a> <img alt="그림 4" src="/files/ftp_upload/55537/55537fig4.jpg" /> 그림 4. 중간 생성물에 대한 UV 및 라디오 HRP 추적자. 3- 플루오로 -4- 니트로 피리딘 N- 옥사이드는 313 nm에서 특성 흡수성을 갖는다.e.jove.com/files/ftp_upload/55537/55537fig4large.jpg &quot;target =&quot;_ blank &quot;&gt;이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오. <img alt="그림 5" src="/files/ftp_upload/55537/55537fig5.jpg" /> 그림 5. 최종 제품의 UV 및 라디오 HRP 추적자. 3- 플루오로 -4- 아미노 피리딘은 254 nm에서 흡수된다. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55537/55537fig5large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a> <table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td> 개념 </td><td> 평균 (n = 4) </td><td> SD </td><td> 댓글 </td></tr><tr><td> 초기 18F 활동 (mCi) </td><td> 148.0 </td><td> 44.9 </td><td> 합성 시작 </td></tr><tr><td> 전구체 양 (μg) </td><td> 50 </td&gt; <td></td><td> 1.0 mg / mL 재고량 50 μL 사용 </td></tr><tr><td> QMA (mCi)에 남아있는 활동 </td><td> 3.0 </td><td> 1.7 </td><td> 라벨링 단계 종료시 측정 </td></tr><tr><td> 방사성 표지 수율 </td><td> 29.7 % </td><td> 6.3 % </td><td> Act_collection_vial ÷ (Act_collection_vial + Act_AluN) </td></tr><tr><td> 방사 화학 순도 (HPLC-1) </td><td> &gt; 98 % </td><td></td><td> HPLC-1 QC </td></tr><tr><td> 투기. 행위. 중간체 (mCi / μmol) </td><td> 122.9 </td><td> 29.7 </td><td> 검량선을 이용한 HPLC-1로부터 </td></tr><tr><td> 수소화 반응 (dc) </td><td> 74 % </td><td> 9.0 % </td><td> 감쇠 보정 </td></tr><tr><td> HPLC 방사 화학 순도 (HPLC-2) </td><td> 90.7 % </td><td> 2.9 % </td><td> HPLC-2로부터 계산 됨. </td></tr><tr><td> 건조 효율 </td><td> &gt; 98 % </td><td></td><td> 감쇠 보정 </td></tr><tr><td> 필터링 복구 </td><td> 93.5 % </td><td> 1.7 % </td><td> 감쇠 보정 </td></tr><tr><td> 용량 (mL) </td><td> 3.3 </td><td></td><td> 방사능이 가장 높은 분수 수집 </td></tr><tr><td> 투기. 행위. 최종 생성물 (mCi / μmol) </td><td> 75.5 </td><td> 30.0 </td><td> 검량선을 이용한 HPLC-3부터 </td></tr><tr><td> 합성 효율 </td><td> 8.5 % </td><td> 3.6 % </td><td> 비 - 감쇠 보정 </td></tr><tr><td> 합성 시간 (분) </td><td> 104 </td><td> 11.2 </td><td></td></tr></tbody></table> 표 1. Radiochemical 합성 매개 변수. <table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td> 일반적인 문제 </td><td> 잠재적 인 이유와 해결책 </td></tr><tr><td rowspan="3"> [ 18 F] 불화물은 QMA로부터 효율적으로 용리되지 않는다. </td><td> · TBA-HCO 3 가 올바르게 준비되지 않았습니다. 농도가 적절한 지 확인하십시오. </td></tr><tr><td> · TBA-HCO3 바이알에 누출이 있습니다. 크림프 씰이 빡빡하고 IFP에 설치하기 전에 중격을 뚫지 않았는지 확인하십시오. </td></tr><tr><td> · TBA-HCO 3 는 양호한 상태가 아닙니다. 신선한 배치를 주문하십시오. </td></tr><tr><td rowspan="2"> 라벨링 수율이 낮음 </td><td> · 전구체 용액에 수분이있다. 건조한 전구체 및 용매. </td></tr><tr><td> · 온도가 너무 낮습니다. </td></tr><tr><td rowspan="3"> 반응 액은 노란색이다. </td><td> · 제품이 바탕 때문에 분해됩니다. 더 적은 TBA-HCO3를 사용하십시오. </td></tr><tr><td> · t가있다.많은 선구자. 전구체를 덜 사용하십시오. </td></tr><tr><td> · 18 F의 양은 용제가 너무 적습니다. 더 많은 용제를 사용하십시오. </td></tr><tr><td> radioHPLC의 추가 피크 </td><td> · 니트로 그룹이 대체되고있다 : 반응 온도를 낮추거나 반응 시간을 단축시킨다. </td></tr><tr><td rowspan="3"> 수소화 반응이 효과가 없다. </td><td> · 촉매가 좋지 않습니다. 새 카트리지를 사용하십시오. </td></tr><tr><td> · 흐름이 너무 빠르며 촉매와 기판 사이에 충분한 접촉을 허용하지 않습니다. 유량을 줄입니다. </td></tr><tr><td> · 수소 압력이 너무 낮습니다. H 2 압력을 증가 시키십시오. </td></tr><tr><td> 절차 중 수소 압력이 급격히 증가합니다. </td><td> · 카트리지 무결성이 손상되어 견고한 지원으로 라인이 막혔습니다. 흐름을 멈추고 가스를 차단하십시오. 방사능이 부패하게하십시오. 촉매 카트리지를 제거하고 시스템을 세척하십시오. ~을 넣어 라.ew 카트리지. </td></tr><tr><td> 수소화 수율이 낮다. </td><td> · 촉매 (MeCN, 옥살산)와 경쟁하는 불순물이 너무 많습니다. 불순물의 양을 줄이거 나 전구체의 질량을 증가시킵니다 (경고 : 전구체 양의 증가는 특정 활동을 감소시킵니다). </td></tr><tr><td rowspan="2"> 수소화 단계에서의 방사능 회수가 낮다. </td><td> · 시스템에 누수가 있습니다. 수소 라인에 누출과 역류가 있는지 점검하십시오. </td></tr><tr><td> · 화합물은 반응기에서 탈 불소화됩니다. 다양한 반응 조건 (압력, 온도, 유량 등 )을 평가하십시오. </td></tr><tr><td rowspan="2"> 여과하는 동안 너무 많은 방사능이 손실됩니다. </td><td> · 사용 전에 필터를 적시십시오. </td></tr><tr><td> · 더 낮은 부피의 필터를 사용하십시오. </td></tr><tr><td rowspan="4"> HPLC의 최종 제품 피크는 광범위하게 보입니다. </td><td> · 부피가 너무 많습니다. 더 낮은 오전에 주사하십시오.오트. 직경이 큰 컬럼을 사용하십시오. </td></tr><tr><td> · 컬럼의 조건이 좋지 않습니다. 적어도 30 개의 컬럼 볼륨에 대한 컬럼 조건. </td></tr><tr><td> · 이동상의 pH가 낮다. pH가 8 이상인지 확인하십시오. </td></tr><tr><td> · 기둥의 상태가 양호하지 않습니다. 열을 교체하십시오. 염기성 pH와 호환되는 컬럼을 사용하십시오. </td></tr></tbody></table> 표 2.. 제점 해결 안내서.

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Automated Radiochemical Synthesis of [18F]3F4AP: A Novel PET Tracer for Imaging Demyelinating Diseases

우리는 [ 18 F] 3F4AP의 반자동 방사 화학 합성과 품질 관리 절차를 입증합니다.

자동 방사 화학 합성 [<sup&gt; 18</sup&gt; F] 3F4AP : 결절성 탈수 초성 질환 이미지 진단용 PET 트레이서

3-[18F]fluoro-4-aminopyridine, [18F]3F4AP, is a radiofluorinated analog of the FDA-approved drug for multiple sclerosis 4-aminopyridine (4AP). This ...

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JoVE Journal

Medicine

Automated Radiochemical Synthesis of [18F]3F4AP: A Novel PET Tracer for Imaging Demyelinating Diseases

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비디오: Automated Radiochemical Synthesis of [18F]3F4AP: A Novel PET Tracer for Imaging Demyelinating Diseases

Non-invasive Imaging of Acute Allograft Rejection after Rat Renal Transplantation Using 18F-FDG PET

The number of patients with end-stage renal disease, and the number of kidney allograft recipients continuously increases. Episodes of acute cellular allograft rejection (AR) are a negative prognostic factor for long-term allograft survival, and its timely diagnosis is crucial for allograft function 1. At present, AR can only be definitely diagnosed by core-needle biopsy, which, as an invasive method, bares significant risk of graft injury or even loss. Moreover, biopsies are not feasible in patients taking anticoagulant drugs and the limited sampling site of this technique may result in false negative results if the AR is focal or patchy. As a consequence, this gave rise to an ongoing search for new AR detection methods, which often has to be done in animals including the use of various transplantation models.
Since the early 60s rat renal transplantation is a well-established experimental method for the examination and analysis of AR 2. We herein present in addition small animal positron emission tomography (PET) using 18F-fluorodeoxyglucose (FDG) to assess AR in an allogeneic uninephrectomized rat renal transplantation model and propose graft FDG-PET imaging as a new option for a non-invasive, specific and early diagnosis of AR also for the human situation 3. Further, this method can be applied for follow-up to improve monitoring of transplant rejection 4.

Non-invasive Imaging of Acute Allograft Rejection after Rat Renal Transplantation Using 18F-FDG PET

We herein present a rat renal transplantation model to non-invasively assess acute allograft rejection using positron emission tomography with 18F-fluorodeoxyglucose.

쥐 신장 이식 후 급성 동종 이식 거부의 비 침습 이미징 사용<sup&gt; 18</sup&gt; F-FDG PET

The number of patients with end-stage renal  disease, and the number of kidney allograft recipients continuously increases.  Episodes of acute cellular ...

연구

의학

Diffusion Tensor Magnetic Resonance Imaging in the Analysis of Neurodegenerative Diseases

Diffusion tensor imaging (DTI) techniques provide information on the microstructural processes of the cerebral white matter (WM) in vivo. The present applications are designed to investigate differences of WM involvement patterns in different brain diseases, especially neurodegenerative disorders, by use of different DTI analyses in comparison with matched controls. 	
DTI data analysis is performed in a variate fashion, i.e. voxelwise comparison of regional diffusion direction-based metrics such as fractional anisotropy (FA), together with fiber tracking (FT) accompanied by tractwise fractional anisotropy statistics (TFAS) at the group level in order to identify differences in FA along WM structures, aiming at the definition of regional patterns of WM alterations at the group level. Transformation into a stereotaxic standard space is a prerequisite for group studies and requires thorough data processing to preserve directional inter-dependencies. The present applications show optimized technical approaches for this preservation of quantitative and directional information during spatial normalization in data analyses at the group level. On this basis, FT techniques can be applied to group averaged data in order to quantify metrics information as defined by FT. Additionally, application of DTI methods, i.e. differences in FA-maps after stereotaxic alignment, in a longitudinal analysis at an individual subject basis reveal information about the progression of neurological disorders. Further quality improvement of DTI based results can be obtained during preprocessing by application of a controlled elimination of gradient directions with high noise levels.	
In summary, DTI is used to define a distinct WM pathoanatomy of different brain diseases by the combination of whole brain-based and tract-based DTI analysis.

Diffusion tensor imaging (DTI) basically serves as an MRI-based tool to identify in vivo the microstructure of the brain and pathological processes due to neurological disorders within the cerebral white matter. DTI-based analyses allow for application to brain diseases both at the group level and in single subject data.

neurodegenerative 질병의 분석에서 확산 텐서 자기 공명 영상

Diffusion tensor imaging (DTI) techniques provide information on the microstructural processes of the cerebral white matter (WM) in vivo. The present ...

A Novel Application of Musculoskeletal Ultrasound Imaging

Ultrasound is an attractive modality for imaging muscle and tendon motion during dynamic tasks and can provide a complementary methodological approach for biomechanical studies in a clinical or laboratory setting. Towards this goal, methods for quantification of muscle kinematics from ultrasound imagery are being developed based on image processing. The temporal resolution of these methods is typically not sufficient for highly dynamic tasks, such as drop-landing. We propose a new approach that utilizes a Doppler method for quantifying muscle kinematics. We have developed a novel vector tissue Doppler imaging (vTDI) technique that can be used to measure musculoskeletal contraction velocity, strain and strain rate with sub-millisecond temporal resolution during dynamic activities using ultrasound. The goal of this preliminary study was to investigate the repeatability and potential applicability of the vTDI technique in measuring musculoskeletal velocities during a drop-landing task, in healthy subjects. The vTDI measurements can be performed concurrently with other biomechanical techniques, such as 3D motion capture for joint kinematics and kinetics, electromyography for timing of muscle activation and force plates for ground reaction force. Integration of these complementary techniques could lead to a better understanding of dynamic muscle function and dysfunction underlying the pathogenesis and pathophysiology of musculoskeletal disorders.

We describe a new ultrasound-based vector tissue Doppler imaging technique to measure muscle contraction velocity, strain and strain rate with sub-millisecond temporal resolution during dynamic activities. This approach provides complementary measurements of dynamic muscle function and could lead to a better understanding of mechanisms underlying musculoskeletal disorders.

근골격계 초음파 이미징의 소설 응용 프로그램

Ultrasound is an attractive modality for imaging muscle and tendon  motion during dynamic tasks and can provide a complementary methodological  approach ...

MRI and PET in Mouse Models of Myocardial Infarction

Myocardial infarction is one of the leading causes of death in the Western world. The similarity of the mouse heart to the human heart has made it an ideal model for testing novel therapeutic strategies.
In vivo magnetic resonance imaging (MRI) gives excellent views of the heart noninvasively with clear anatomical detail, which can be used for accurate functional assessment. Contrast agents can provide basic measures of tissue viability but these are nonspecific. Positron emission tomography (PET) is a complementary technique that is highly specific for molecular imaging, but lacks the anatomical detail of MRI. Used together, these techniques offer a sensitive, specific and quantitative tool for the assessment of the heart in disease and recovery following treatment.
In this paper we explain how these methods are carried out in mouse models of acute myocardial infarction. The procedures described here were designed for the assessment of putative protective drug treatments. We used MRI to measure systolic function and infarct size with late gadolinium enhancement, and PET with fluorodeoxyglucose (FDG) to assess metabolic function in the infarcted region. The paper focuses on practical aspects such as slice planning, accurate gating, drug delivery, segmentation of images, and multimodal coregistration. The methods presented here achieve good repeatability and accuracy maintaining a high throughput.

We describe how to perform MRI and PET imaging of the mouse heart. The protocol is tailored to assess treatment efficacy in models of myocardial infarction and heart failure.

Myocardial infarction is one of the leading causes of death in the Western world. The similarity of the mouse heart to the human heart has made it an ...

Simultaneous PET/MRI Imaging During Mouse Cerebral Hypoxia-ischemia

Dynamic changes in tissue water diffusion and glucose metabolism occur during and after hypoxia in cerebral hypoxia-ischemia reflecting a bioenergetics disturbance in affected cells. Diffusion weighted magnetic resonance imaging (MRI) identifies regions that are damaged, potentially irreversibly, by hypoxia-ischemia. Alterations in glucose utilization in the affected tissue may be detectable by positron emission tomography (PET) imaging of 2-deoxy-2-(18F)fluoro-&#7429;-glucose ([18F]FDG) uptake. Due to the rapid and variable nature of injury in this animal model, acquisition of both modes of data must be performed simultaneously in order to meaningfully correlate PET and MRI data. In addition, inter-animal variability in the hypoxic-ischemic injury due to vascular differences limits the ability to analyze multi-modal data and observe changes to a group-wise approach if data is not acquired simultaneously in individual subjects. The method presented here allows one to acquire both diffusion-weighted MRI and [18F]FDG uptake data in the same animal before, during, and after the hypoxic challenge in order to interrogate immediate physiological changes.

The method presented here uses simultaneous positron emission tomography and magnetic resonance imaging. In the cerebral hypoxia-ischemia model, dynamic changes in diffusion and glucose metabolism occur during and after injury. The evolving and irreproducible damage in this model necessitates simultaneous acquisition if meaningful multi-modal imaging data are to be acquired.

마우스 대뇌 저산소증 - 허혈 동안 동시 PET / MRI 영상

Dynamic changes in tissue water diffusion and glucose metabolism occur during and after hypoxia in cerebral hypoxia-ischemia reflecting a bioenergetics ...

Longitudinal In Vivo Imaging of the Cerebrovasculature: Relevance to CNS Diseases

Remodeling of the brain vasculature is a common trait of brain pathologies. In vivo imaging techniques are fundamental to detect cerebrovascular plasticity or damage occurring overtime and in relation to neuronal activity or blood flow. In vivo two-photon microscopy allows the study of the structural and functional plasticity of large cellular units in the living brain. In particular, the thinned-skull window preparation allows the visualization of cortical regions of interest (ROI) without inducing significant brain inflammation. Repetitive imaging sessions of cortical ROI are feasible, providing the characterization of disease hallmarks over time during the progression of numerous CNS diseases. This technique accessing the pial structures within 250 &#956;m of the brain relies on the detection of fluorescent probes encoded by genetic cellular markers and/or vital dyes. The latter (e.g., fluorescent dextrans) are used to map the luminal compartment of cerebrovascular structures. Germane to the protocol described herein is the use of an in vivo marker of amyloid deposits, Methoxy-O4, to assess Alzheimer&#39;s disease (AD) progression. We also describe the post-acquisition image processing used to track vascular changes and amyloid depositions. While focusing presently on a model of AD, the described protocol is relevant to other CNS disorders where pathological cerebrovascular changes occur.

Longitudinal In Vivo Imaging of the Cerebrovasculature: Relevance to CNS Diseases

This manuscript describes a procedure to track the remodeling of the cerebrovasculature during amyloid plaque accumulation in vivo using longitudinal two-photon microscopy. A thinned-skull preparation enables the visualization of fluorescent dyes to assess the progression of cerebrovascular damage in a mouse model of Alzheimer&#39;s disease.

종<em&gt; 생체</em&gt;은 Cerebrovasculature의 이미징 : CNS 질환에 관련성

Remodeling of the brain vasculature is a common trait of brain pathologies. In vivo imaging techniques are fundamental to detect cerebrovascular ...

Determining Glucose Metabolism Kinetics Using 18F-FDG Micro-PET/CT

This paper describes the use of 18F-FDG and micro-PET/CT imaging to determine in vivo glucose metabolism kinetics in mice (and is transferable to rats). Impaired uptake and metabolism of glucose in multiple organ systems due to insulin resistance is a hallmark of type 2 diabetes. The ability of this technique to extract an image-derived input function from the vena cava using an iterative deconvolution method eliminates the requirement of the collection of arterial blood samples. Fitting of tissue and vena cava time activity curves to a two-tissue, three compartment model permits the estimation of kinetic micro-parameters related to the 18F-FDG uptake from the plasma to the intracellular space, the rate of transport from intracellular space to plasma and the rate of 18F-FDG phosphorylation. This methodology allows for multiple measures of glucose uptake and metabolism kinetics in the context of longitudinal studies and also provides insights into the efficacy of therapeutic interventions.

Determining Glucose Metabolism Kinetics Using 18F-FDG Micro-PET/CT

This study describes a protocol that uses 18F-FDG and positron emission tomography/computed tomography (PET/CT) imaging, together with kinetic modelling, to quantify the in vivo, real-time uptake of 18F-FDG into tissues.

사용 포도당 대사 속도론 결정<sup&gt; (18)</sup&gt; F-FDG 마이크로 PET / CT

This paper describes the use of 18F-FDG and micro-PET/CT imaging to determine in vivo glucose metabolism kinetics in mice (and is transferable to rats). ...

PET Imaging of Neuroinflammation Using [11C]DPA-713 in a Mouse Model of Ischemic Stroke

Neuroinflammation is central to the pathological cascade following ischemic stroke. Non-invasive molecular imaging methods have the potential to provide critical insights into the temporal dynamics and role of certain neuroimmune interactions in stroke. Specifically, Positron Emission Tomography (PET) imaging of translocator protein 18 kDa (TSPO), a marker of activated microglia and peripheral myeloid-lineage cells, provides a means to detect and track neuroinflammation in vivo. Here, we present a method to accurately quantify neuroinflammation using [11C]N,N-Diethyl-2-[2-(4-methoxyphenyl)-5,7-dimethylpyrazolo[1,5-a]pyrimidin-3-yl]acetamide ([11C]DPA-713), a promising second generation TSPO-PET radiotracer, in distal middle cerebral artery occlusion (dMCAO) compared to sham-operated mice. MRI was performed 2 days post-dMCAO surgery to confirm stroke and define the infarct location and volume. PET/Computed Tomography (CT) imaging was carried out 6 days post-dMCAO to capture the peak increase in TSPO levels following stroke. Quantitation of PET images was conducted to assess the uptake of [11C]DPA-713 in the brain and spleen of dMCAO and sham mice to assess central and peripheral levels of inflammation. In vivo [11C]DPA-713 brain uptake was confirmed using ex vivo autoradiography.

PET Imaging of Neuroinflammation Using [11C]DPA-713 in a Mouse Model of Ischemic Stroke

Positron Emission Tomography (PET) imaging of translocator protein 18 kDa (TSPO) provides a non-invasive means to visualize the dynamic role of neuroinflammation in the development and progression of brain diseases. This protocol describes TSPO-PET and ex vivo autoradiography to detect neuroinflammation in a mouse model of ischemic stroke.

애완 동물 Neuroinflammation [11C] DPA-713을 사용 하 여 허 혈 성 뇌졸중의 마우스 모델에서의 영상

Neuroinflammation is central to the pathological cascade following ischemic stroke. Non-invasive molecular imaging methods have the potential to provide ...

Whole Body and Regional Quantification of Active Human Brown Adipose Tissue Using 18F-FDG PET/CT

In endothermic animals, brown adipose tissue (BAT) is activated to produce heat for defending body temperature in response to cold. BAT&#39;s ability to expend energy has made it a potential target for novel therapies to ameliorate obesity and associated metabolic disorders in humans. Though this tissue has been well studied in small animals, BAT&#39;s thermogenic capacity in humans remains largely unknown due to the difficulties of measuring its volume, activity, and distribution. Identifying and quantifying active human BAT is commonly performed using 18F-Fluorodeoxyglucose (18F-FDG) positron emission tomography and computed tomography (PET/CT) scans following cold-exposure or pharmacological activation. Here we describe a detailed image-analysis approach to quantify total-body human BAT from 18F-FDG PET/CT scans using an open-source software. We demonstrate the drawing of user-specified regions of interest to identify metabolically active adipose tissue while avoiding common non-BAT tissues, to measure BAT volume and activity, and to further characterize its anatomical distribution. Although this rigorous approach is time-consuming, we believe it will ultimately provide a foundation to develop future automated BAT quantification algorithms.

Whole Body and Regional Quantification of Active Human Brown Adipose Tissue Using 18F-FDG PET/CT

Using free, open-source software, we have developed an analytical approach to quantify total and regional brown adipose tissue (BAT) volume and metabolic activity of BAT using 18F-FDG PET/CT.

In endothermic animals, brown adipose tissue (BAT) is activated to produce heat for defending body temperature in response to cold. BAT&#39;s ability to ...

Quantitative [18F]-Naf-PET-MRI Analysis for the Evaluation of Dynamic Bone Turnover in a Patient with Facetogenic Low Back Pain

Imaging techniques that reflect dynamic bone turnover may aid in characterizing a wide range of bone pathologies. Bone is a dynamic tissue undergoing continuous remodeling with the competing activity of osteoblasts, which produce the new bone matrix, and osteoclasts, whose function is to eliminate mineralized bone. [18F]-NaF is a positron emission tomography (PET) radiotracer that enables visualization of bone metabolism. [18F]-NaF is chemically absorbed into hydroxyapatite in the bone matrix by osteoblasts and can thus noninvasively detect osteoblastic activity, which is occult to conventional imaging techniques. Kinetic modeling of dynamic [18F]-NaF-PET data provides detailed quantitative measures of bone metabolism. Conventional semi-quantitative PET data, which utilizes standardized uptake values (SUVs) as a measure of radiotracer activity, is referred to as a static technique due to its snapshot of tracer uptake in time.&#160; Kinetic modeling, however, utilizes dynamic image data where tracer levels are continuously acquired providing tracer uptake temporal resolution. From the kinetic modeling of dynamic data, quantitative values like blood flow and metabolic rate (i.e., potentially informative metrics of tracer dynamics) can be extracted, all with respect to the measured activity in the image data. When combined with dual modality PET-MRI, region-specific kinetic data can be correlated with anatomically registered high-resolution structural and pathologic information afforded by MRI. The goal of this methodological manuscript is to outline detailed techniques for performing and analyzing dynamic [18F]-NaF-PET-MRI data. The lumbar facet joint is a common site of degenerative arthritis disease and a common cause for axial low back pain.&#160; Recent studies suggest [18F]-NaF-PET may serve as a useful biomarker of painful facetogenic disease.&#160; The human lumbar facet joint will, therefore, be used as a prototypical region of interest for dynamic [18F]-NaF-PET-MRI analysis in this manuscript.

Quantitative [18F]-Naf-PET-MRI Analysis for the Evaluation of Dynamic Bone Turnover in a Patient with Facetogenic Low Back Pain

Imaging techniques that reflect dynamic bone turnover may aid in characterizing a wide range of bone pathologies. We present detailed methodologies for performing and analyzing dynamic [18F]-NaF-PET-MRI data in a patient with facetogenic low back pain using the lumbar facet joints as a prototypical region of interest.

정량 [18F]-Naf-PET-MRI 분석 은 얼굴 투박성 요통 환자에서 동적 뼈 회전율의 평가를 위한

Imaging techniques that reflect dynamic bone turnover may aid in characterizing a wide range of bone pathologies. Bone is a dynamic tissue undergoing ...

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종

사용 포도당 대사 속도론 결정

애완 동물 Neuroinflammation [¹¹C] DPA-713을 사용 하 여 허 혈 성 뇌졸중의 마우스 모델에서의 영상

Whole Body and Regional Quantification of Active Human Brown Adipose Tissue Using ¹⁸F-FDG PET/CT

정량 [¹⁸F]-Naf-PET-MRI 분석 은 얼굴 투박성 요통 환자에서 동적 뼈 회전율의 평가를 위한