Bu paradigmanın genel amacı, alkol kullanım bozukluğunun kemirgen modellerini kullanarak potansiyel bir anti-alkol ilacının etkinliğini değerlendirmektir. Alkol kullanımı bozukluğu büyük bir halk sağlığı krizini temsil eder. Mevcut tedaviler etkisizdir ve devam eden klinik öncesi araştırmalara ihtiyaç vardır.
Protokolümüz, potansiyel bir tedavinin güvenliğini ve yararını değerlendirmemize ve hastalığın altında yatan nörobiyolojiye bakmamızı sağlar. Bunsen brülör bir yardımcı bıçak ısıtarak prosedüre başlayın. Bu bıçağı kullanarak, plastik 18 mililitre serolojik pipet üst ve alt uçlarından kabaca bir inç kesti.
Sonra bir ısı tabancası altında pipet Sıcak. Bilyalı rulman tüpünü pipetin alt ucuna yerleştirin. Sonra ticari olarak kullanılabilir bir shrink şal tabancası kullanarak, shrink şal ile yerine sipper tüp mühür.
Diğer açıklığı silikon durdurucuyla kapatın. Hayvan alışkanlığı için, varışta, yatak, gıda ve su ve metal ızgara kafes üst ile standart polikarbonat polisülfone kafes her fare. Bir hafta tek konut iklimlendirme dördüncü günden itibaren, ölçmek ve farenin günlük vücut ve gıda ağırlıkları kaydedin.
Menisküsenin en yüksek noktasını kaydetmek için ters şişenin yanında gravürleri kullanarak su alımını ölçün. Su alımı son üç günün ortalamasından artı veya eksi %10 değişkenliğe sabitlendikten sonra, TBC veya DID ile etanol erişimine başlayın. TBS yapmak için, 105.3 mililitre 190 geçirmez tane etanol ekleyerek 105.3 mililitre su 894.7 mililitre% 10 etanol çözeltisi hazırlamak, sonra iyice sallayın.
Etanolhızlı buharlaşır göz önüne alındığında, haftada iki kez çözelti değiştirin. TBC'nin ilk gününde, her kafeste, iki su şişesinden birini boşaltın ve taze hazırlanmış etanol çözeltisi ile ağzına kadar doldurun. Etanol ve suyun görsel olarak ayırt edilmesinin zor olduğu göz önüne alındığında, şişeleri ilgili içerikleriyle açıkça etiketleyin.
Su şişesine gerektiği gibi daha fazla çözelti ekleyin. Daha sonra şişeyi kafese geri yerleştirin, kapağın güvenli bir şekilde kapalı olduğundan ve herhangi bir hava kabarcığı veya sızdırıştan yoksun olduğundan emin olun. Hava şişe kaçabilirsiniz, böylece sadece şişe dokunarak herhangi bir hava kabarcıkları çıkarın.
Şişenin pozisyonunu her gün, içme faaliyetinde şartlı yer tercihi ile ilgili etkilerin düzeltilmesi için alternatif olarak yerleştirin. Kayıt etanol alım seviyesi ve% 10 etanol alımı ve tercih oranını analiz. En kısa sürede etanol alımı istikrarlı hale gelmiştir, enjeksiyon için fare alışmak için, günlük ölçüm rutin sırasında her fareye tek bir kontrol intraperitoneal enjeksiyon uygulayın.
Düşük değişkenliğe sahip bir etanol bazalçizgisi yeniden kurulduktan sonra, fareleri kontrol ve deney gruplarına bölün ve tüm gruplar kabaca benzer ortalama etanol alım değerlerine sahip olacak şekilde etanol alım değerlerini kullanarak kontrol ve deneysel gruplara bölün. Akut veya çok günlük süre için günlük ilaç dozlandırmaya başlayın. DID yapmak için, planlanan etanol erişim her gün, su hacmi, gıda alımı ve vücut ağırlığı için ölçümleri kaydetmek ve ilaç dozlama gerçekleştirmek.
Bileşik içme döneminde maksimum beyin konsantrasyonu yaklaşıyor, böylece ilacın farmakokinetiği uyarınca seçilen ışık döngüsü sırasında önceden seçilmiş bir süre içinde gerçekleştirin. Daha sonra, 789,5 mililitre suya 190 geçirmez tane etanol 210,5 mililitre ekleyerek 1, 000 mililitre%20 etanol çözeltisi hazırlayın. Sonra iyice sallayın.
En kısa sürede DID başlar gibi, su şişesi sadece alkol şişesi ile değiştirilebilir böylece içme oturumu başlamadan önce etanol şişesi doldurun. Tüm DID oturumu sırasında, hayvanı rahatsız etmemek için kırmızı ışıkfarı kullanın. Işık döngüsünden önce karanlık döngüye üç saat başlaması planlanan DID içme seansının başlangıcında, her fare için su hacmini kaydedin.
Sonra% 20 etanol çözeltisi bir şişe ile her su şişesi değiştirin ve başlangıç etanol hacmi kaydedin. Son etanol hacmini iki saat sonra içme seansının sonunda birinci ile üç ve dört saat sonra dördüncü gün arasında okuyun ve kaydedin. Sonra% 20 etanol alımını analiz edin.
Daha sonra, su şişesi ve kayıt su hacmi ile etanol şişe değiştirin. Bu rakam, akut moksitktin dozunun kilogram başına beş miligram olan etanol alımı ve tercihi üzerine yaptığı etkilerin değerlendirilmesini göstermektedir. Moksitktin tek bir doz önemli ölçüde aşan alkol alımını azalttı 45%pre-moxidectin enjeksiyonları ve tercih aşan 30%10 etanol alımı ve tercih her ikisi de önemli ölçüde tuzlu hemen ertesi gün MOX tedavisi nin ardından daha düşük kalır.
Burada, alem içme DID prosedürü kullanılarak modellenmiştir. Farelere ilk günden 4'e kadar olan günlerde salin verildi ve dördüncü günde taban çizgisi %20 etanol oluşturuldu. İkinci haftalık döngünün birinci ile üç arasında olduğu günlerde, tüm farelere bir günlük tuzlu enjeksiyon daha yapıldı.
Üçüncü günden itibaren etanol alım değerleri daha sonra daha sonra kilogram başına beş miligram veya dördüncü gün tuzlu ya moxidectin bir enjeksiyon alınan iki gruba fareler bölmek için kullanılmıştır. Ertesi hafta, tüm fareler gün bir ile dört arasında günlük tuzlu enjeksiyonları alınan ve etanol alımı yine dördüncü gün ölçüldü. MOX'un akut uygulaması analiz edildi ve uyuşturucu öncesi enjeksiyonlara kıyasla alkol alımını %54'ü aşan ölçüde azalttığı saptandı.
Bu protokolü kullanarak gelecekteki deneylerin potansiyel bir ilacın mekanizmasını, dozlama ve toksisitesini değerlendirmek ve mevcut tedavi seçenekleriyle ilgili etkinliğini değerlendirmek için yapılması gerektiğini unutmayın.
