Finansman Kaynakları: Sağlık hibe HL067177, HL096845 Ulusal Enstitüsü tarafından desteklenen olarak bu çalışma ve DSW için P01AI084853

1. Donör Prosedürü <ol><li> Tüm cerrahi prosedürleri steril tekniği kullanılarak yapıldı. Hiçbir antibiyotik donör ve alıcı fareler hem de verilmiştir. </li><li> Donör farenin anestezi indüksiyonu% 5 İsofluranın başlatılır. </li><li> Fare tarafından orotrakeal 20 gauge intravenöz kateter ile entübe ve ardından 125 solunum / dakika ve yaklaşık 0.5 ml tidal volüm (Vücut ağırlığının% 2) oranında% 100 oksijen kullanarak, bir kemirgen ventilatör yerleştirilir. </li><li> Anestezi inhale% 1-2 izofluran ile korunur. </li><li> Donör fare yatar pozisyonda yerleştirilir,% 70 alkol ile prepped. </li><li> Laparosternotomy kombine bir orta hat ve enine kesi olarak gerçekleştirilir. </li><li> 100 u / kg Heparin sadece karaciğer alttan, inferior vena kava (IVC) enjekte edilir. </li><li> Diyafram omurganıza doğru ventral kostal eki boyunca kesilir ve göğüs boşluğu göğüs her iki kesim tarafından gösterilenboyun duvar. </li><li> Diyafram düzeyinde IVK insizyon sonra, sağ atriyal apendiks soğutmalı 2 ml kesilerek akciğerler temizlendi (4 ° C) pulmoner arter kökünde (bir transvers insizyon ile Ringer enjeksiyonu ve heparin 0,1 ml PA) gövde. </li><li> Endtidal enflasyonun üçte ikisi de havalandırma tutuklanmasının, kalp-akciğer bloğu çıkarıldı ve buz (4 ° C) saklanır. </li><li> Donör sol akciğer kolluklar eki tarafından alıcı için hazırlanmıştır. Pulmoner ligament Pulmoner Ven (PV) kadar insize edilir. Hilusu yemek borusu ve aort kaldırarak getirilir. </li><li> Hilumun en-boy kafa bulunan PA, yanı sıra, ekteki ana bronş (Br) tanımlar. Bronş gelen PA dikkatlice incelemek. </li><li> PA kaf 24-gauge intravenöz (IV) kateter yapılan ve 0.7 mm bir uzantısı olan uzunluğu 0.5 mm kesilir. </li><li> Manşetin tüm yüzeyine daha sonra anastomoz kolaylaştırmak için Aşınmışilave sütürlerle. </li><li> Bronş için kaf 20-gauge IV kateter türetilen ve 0.7 mm bir uzantısı olan 1.0 mm uzunluğunda kesilir. </li><li> Aynı materyaller kullanılarak, PV manşon donör fare ağırlığı ile değişir. Özellikle, fareler için manşon büyüklüğü 24-27 gram 22 ayar, bir 0.7 mm uzantılı uzunluğu 0.7 mm. 27-32 gram ağırlığındaki fareler için, çalışmaları, 0.7 mm uzunluğunda uzantısı ile 0,7 mm olan bir 20-gauge kateter kullanılmıştır. </li><li> Kolluklar PA, PV ve Br distal uçlarında içine yerleştirilir ve 9-0 sütür ile sabitlenir. </li><li> Donör akciğer boşaltıldı ve depolama önce steril heparin ile steril salin ile yıkanır. Donör akciğer sonra akciğer çok temiz ve steril tutar buz üzerinde steril serum fizyolojik ile ıslatılmış steril gazlı bez (4 ° C) ile sarılır. </li><li> A mikrodamar kelepçe hava yolu içine Ringer giriş önlemek için bronş üzerine yerleştirilir. </li></ol> 2. Alıcı Prosedürü <ol><li> Anestezi indüksiyonuYukarıda donör için tarif edildiği gibi thesia ve mekanik havalandırma aynıdır. </li><li> Sol göğüs duvarı traş ve% 70 alkol ve cerrahi alan bol dökümlü bir ile prepped edilir. </li><li> Bir torakotomi insizyonu omurga dorsale yakın kesi ve kalp bitişik sol akciğer damarları ve bronşları üzerine yerleştirilen bir mikrovasküler klemp uzanan, sol üçüncü interkostal yapılır. Sen PV aralarında hilusun ve Br kaudal sonunda, kranial yönü de PA görebilirsiniz. </li><li> Merkezi hiler yapılara kenetlenmiş bırakırken PA, Br ve PV hafif gerginlik neden hemostat nazik traksiyon kullanarak, sol akciğer göğüs boşluğundan dışarı çekilir. </li><li> PA, PV ve Br PA, PV ve Br etrafında gevşek yerleştirilmiş 9-0 sütür koyarak takip künt diseksiyon ile izole edilir. </li><li> Onun adventisyal kılıf, geminin çevresi yaklaşık dörtte biri küçük bir insizyonla tamamen PA diseksiyon sonra isearterin dorsal kısmının devamı zedelemeden, ön duvarı haline getirilmiştir. </li><li> Soğuk, Ringer-batırılmış pamuk gazlı bez sarılmış ve yukarıda açıklandığı gibi hazırlanan donör akciğer, sonra göğüs boşluğuna yerleştirilmiş ve manşetler alıcı PA, PV ve Br içine yerleştirilir ve 9-0 dikiş ile sabitlenir. </li><li> Hiler kros klemp reperfüzyon ve havalandırma için izin kaldırılır. </li><li> Alıcının toraks içine geri nakledilen akciğer yerleştirdikten sonra torakotomi insizyonu 5-0 dikiş kullanılarak kapatıldı. </li><li> Fare anestezi kurtarmak için izin verilir. Buprenorfin (0,05-0,15 mg / kg) cerrahi hemen sonra tatbik edilebilir ve 2-3 gün ameliyat sonrası için her 8 saat boyunca edilir. </li></ol> 3. Temsilcisi Sonuçlar Deneyimlerimiz bunu tekrar uygulama birkaç ay fare akciğer nakli modeli yeterliliğine gerektirdiğini öğretti. Yeterliliği elde edildikten sonra, birölümlerin operasyon yedi gün sonrası içinde meydana gelen bir% 96 (96/100 ardışık ameliyatları) perioperatif sağkalım oranı chieved. İki ölüm intraoperatif başladı kanama nedeniyle idi ve pneumothraces diğer iki farelerde ölüm nedeni idi. Tüm işlemler için, sıcak iskemi süresi ± 3.14 dakika 14.32 idi ve soğuk iskemi zamanı 58,51 ± 18.06 dakika idi. Üç ortotopik akciğer transplantasyonu grupları incelendi: isograft: 6 / C57BL → C57BL / 6, allogreft: C57BL/10 → C57BL / 6 ve C57BL / 6 → C57BL/10. Sadece erkek fareler kullanılmaktadır ancak cinsler arasında anlamlı bir fark vardır anatomik çünkü bizim teknik aynı zamanda, dişi fareler için uygulanabilir. Ret patoloji Sınıflandırma klinik akciğer nakli 7 (Tablo 1) için standart kriterler kullanarak bir kör olarak yapıldı. Bu isograft (C57BL / 6 → C57BL / 6) hafif veya hiç rejeksiyonu gözlenen ise, hem allogreft bileşimleri geliştirilmiştir compaBunun yanısıra daimi akut ya da kronik rejeksiyon (Şekil 1). Buna karşılık, OB C57BL/10 anlamlı olarak daha sık idi day28 (Tablo 1) C57BL / 6 → C57BL/10 grubuna göre → C57BL / 6. <table border="1"><tbody><tr><td></td><td> C57BL / 6 → C57BL / 6 </td><td> C57BL/10 → C57BL / 6 </td><td> C57BL / 6 → C57BL/10 </td><td> P-değeri </td></tr><tr><td> Reddetme Patoloji 28. günde de &quot;A&quot; Skorlar </td><td> 0.67 ± 0.89 </td><td> * 3.33 ± 0.82 </td><td> * 3.29 ± 0.76 </td><td> * P&gt; 0.05 </td></tr><tr><td> OB / gün 21 ve 28. Toplam fareler </td><td> 0/24 (0%) </td><td> ** 14/34 (% 42.1) </td><td> ** 2/16 (% 12.5) </td><td> ** P &lt;0.05 </td></tr></tbody></table> Tablo 1. Rejeksiyon ve obliteratif bronşiolit sonrası nakli sıklığı histolojik skorları. Standart cri tarafından rejeksiyon skoru (&quot;A&quot; Skorlar)Teria olarak temsili sonuçları açıklanmıştır. Veri gün 28 transplantasyon sonrası &quot;A&quot; skorları ortalama ± SD temsil eder. Veri gün 21 ve 28 sonrası nakli azından OB geliştirilmiş her grupta farelerin miktar ve oranını temsil etmektedir. <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/3947/3947fig1.jpg" /> Şekil 1. 28 gün sonrası akciğer nakli de makroskopik bulgular ve histopatoloji. Panel 1A makroskobik bulgular ve H &amp; E boyalı Isograft akciğer ve sağ akciğer naif temsil eder. Panel 1B ve 1C H &amp; E ve sırasıyla, OB ve olmayan OB geliştirilen BL / 6 fare alıcı, nakledilen Masson Trikrom lekeli BL/10 akciğer allogreft temsil eder. 1B beyaz ok OB lezyonları tanımlar. Panel 1D BL/10 fare alıcıya nakledilmektedir BL / 6 akciğer allogreft gösterir. İşlem sırasında ana sorun çekim şöyleydi. <ol><li> Kan akımı bozukluğu: Bol donör akciğer kadarrenk beyaz olur. Aşırı basınç kullanımı pulmoner ödem neden olabilir. Ama nakil sonrası ödem önlemek için çok fazla zorlamayın. </li><li> Donör içine manşet ekleme Zorluk: damarsal yeterli uzunlukta ve bağlı yağ ve bağ dokusu ücretsiz olduğunu emin olunmalıdır. </li><li> Anastomoz yerinde kanama: yaklaşık 5 dakika boyunca etkilenen yerinde baskı uygulamak için Q ipuçlarını kullanın. </li><li> Alıcı PA kan akımının tıkanması: Temelde manşet yerleştirme sırasında torsiyonu kaynaklanır. Hava PA içinde görülürse anastomoz gerekli olduğunu daha sonra yeniden yapmak. </li><li> Zor PV anastomoz: PV Membran çok ince ve kolayca gözyaşlarıdır. Uygun manşet boyutunu seçin ve çok yavaşça alıcının PV doğrudan takın. </li><li> Alıcı PV kan akımının tıkanması: manşetin yerini ve yönünü emin olun. Bronşiyal kaf gelen sıkıştırma bırakın. </li><li> Pnömotoraks: Bu manipulatio nedeniyle ya bronş perforasyonu neden olabilirhava yolu veya nakil işlemi ile ilişkili travma nedeniyle akciğer yüzeyinin delinmesi n. Eski hava yolu duvarındaki deliğin cerrahi olarak kapatılması ile tedavi edilir; ve ikincisi 10-0 naylon dikiş kullanılarak akciğer yüzeyinde kaçak sutüre ile tedavi edilir. </li></ol>

<ol>
	<li>Asimacopoulos, P. J., Molokhia, F. A., Pegg, C. A., Norman, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lung+transplantation+in+the+rat.">Lung transplantation in the rat.</a> Transplant Proc. 3, 583-585 (1971).</li><li>Yoshida, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+technique+of+experimental+lung+transplantation+in+rabbits.">Surgical technique of experimental lung transplantation in rabbits.</a> Ann. Thorac. Cardiovasc. Surg. 11, 7-11 (2005).</li><li>McDyer, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+and+murine+obliterative+bronchiolitis+in+transplant.">Human and murine obliterative bronchiolitis in transplant.</a> Proc. Am. Thorac. Soc. 4, 37-43 (2007).</li><li>Sato, M., Keshavjee, S., Liu, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Translational+research:+animal+models+of+obliterative+bronchiolitis+after+lung+transplantation.">Translational research: animal models of obliterative bronchiolitis after lung transplantation.</a> Am. J. Transplant. 9, 1981-1987 (2009).</li><li>Okazaki, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mouse+model+of+orthotopic+vascularized+aerated+lung+transplantation.">A mouse model of orthotopic vascularized aerated lung transplantation.</a> Am. J. Transplant. 7, 1672-1679 (2007).</li><li>Fan, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutralizing+IL-17+Prevents+Obliterative+Bronchiolitis+in+Murine+Orthotopic+Lung+Transplantation.">Neutralizing IL-17 Prevents Obliterative Bronchiolitis in Murine Orthotopic Lung Transplantation.</a> Am. J. Transplant. 11, 911-922 (2011).</li><li>Stewart, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Revision+of+the+1996+working+formulation+for+the+standardization+of+nomenclature+in+the+diagnosis+of+lung+rejection.">Revision of the 1996 working formulation for the standardization of nomenclature in the diagnosis of lung rejection.</a> J. Heart Lung Transplant. 26, 1229-1242 (2007).</li><li>Mizuta, T., Kawaguchi, A., Nakahara, K., Kawashima, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simplified+rat+lung+transplantation+using+a+cuff+technique.">Simplified rat lung transplantation using a cuff technique.</a> J. Thorac. Cardiovasc. Surg. 97, 578-581 (1989).</li><li>Jungraithmayr, W. M., Korom, S., Hillinger, S., Weder, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mouse+model+of+orthotopic,+single-lung+transplantation.">A mouse model of orthotopic, single-lung transplantation.</a> J. Thorac. Cardiovasc. Surg. 137, 486-491 (2009).</li><li>Li, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+vascularized+right+lung+transplantation+in+the+mouse.">Orthotopic vascularized right lung transplantation in the mouse.</a> J. Thorac. Cardiovasc. Surg. , (2010).</li></ol>

Çıkar çatışması ilan etti.

Farelerde ortotopik akciğer nakli mikrocerrahi talep ve dokuların aşırı kırılganlık nedeniyle zordur. Manşet tekniğinin tanıtılması sıçanlarda 8 ortotopik akciğer naklinin yaygın kullanımı için izin verdi. Bu laboratuarımızda farelerde ortotopik akciğer nakli modelinin geliştirilmesi için temel oldu. Farelerde ve sıçanlarda, insanlarda farklı olarak, sol akciğer tek lob içeren ve solunum toplam kütlesinin sadece% 25 kadar kılar. Bu, sol-tek akciğer nakli, bir dolaşım destek sistemi için gerek kalmadan mürin modelinde mümkün kılar. Bizim ön ameliyatları nakledilen akciğer ventilasyon ve perfüzyon PV anastomoz boyutu son derece bağlı olduğunu ortaya çıkardı. Özgül PV anastomoz manşon büyüklüğü donör maç için kullanılan ve alıcıları olarak 9 bildirildi. Sakıncalı manşet boyutlandırma PV anast Nakledilen akciğer veya ayrışma ya atelektazi sonuçlandıomosis. Okazaki ark kombine damar ligasyonu kullanımı rapor ve bronş 5 kırpma. Bu çalışmada biz sıcak iskemi süresi kısalabilir öneririz tüm hiler yapılar için anevrizma klibi, kullanın. Fare modelinde ortotopik sol akciğer nakli bir kısıtlaması alıcı hayvanlar allogreftler 5 Alloimmun aracılı nekroz sonra hayatta olmasıdır. Bu nedenle, yaşam çalışmaları mümkün değildir ve greft değerlendirmesi nakledilen akciğer 10 histolojik bağlıdır. Bu tekniği kullanarak, farelerde bir preklinik obliteratif bronşiolit modeli geliştirdik. Spesifik olarak, fare donör C57BL/10 ve alıcı C57BL / 6 &#39;dir. Bu küçük rolü değil, obliteratif bronşiolit patogenezinde 6 büyük, doku uygunluk antijenleri göstermektedir. Ayrıca, IL-17 fare modelinde obliteratif bronşiolit önler nötralize bildirdin. Bu modl akciğer transplantasyonu klinik muayene ve akciğer nakli ilerlemesi için yeni bir araştırma aracı temsil eder.

<table border="1"><tbody><tr><td> Ekipman Adı </td><td> Şirket </td><td> Katalog numara </td></tr><tr><td> Zeiss OPMI 6SFC-1880 </td><td> Prescott&#39;un A.Ş. </td><td> PMZ014 </td></tr><tr><td> Harvard Kemirgen Vantilatör </td><td> Harvard Apparatus </td><td> 55-7058 </td></tr><tr><td> 20 gauge IV kateter </td><td> Terumo Medical Corporation </td><td> 100510D </td></tr><tr><td> 22-gauge IV kateter </td><td> Terumo Medical Corporation </td><td> 081015S </td></tr><tr><td> 24-gauge IV kateter </td><td> Terumo Medical Corporation </td><td> 100522A </td></tr><tr><td> 9/0 Meth Mavi Virgin İpek </td><td> Ashaway Hattı &amp; İplikler Mfg CO </td><td> MBVS-90 </td></tr><tr><td> 10-0 Alcon Cerrahi Sütür </td><td> Alcon Laboratories, Inc </td><td> 8065-192101 </td></tr><tr><td> Black Örgülü İpek 5-0/18inches </td><td> Henry Schein </td><td> M652630 </td></tr><tr><td> Heparin Sodyum 1000 ünite / ml </td><td> APP İlaç </td><td> 407156 </td></tr><tr><td> Betadine Çözüm </td><td> Purdue Ürün </td><td> 67618-150 </td></tr><tr><td> Ringer enjeksiyonu </td><td> Hospira </td><td> NDC 0409-7953-03 </td></tr></tbody></table><table border="1"><tbody><tr><td> Farelerin suşu </td><td> Satıcı </td><td> Yaş, Ağırlık </td><td> Cinsiyet, Yorumlar </td></tr><tr><td> C57BL/10 </td><td> Harlan Sprague-Dawley </td><td> 8-12 hafta, 25-30g </td><td> Erkek, Donör </td></tr><tr><td> C57BL / 6 </td><td> Harlan Sprague-Dawley </td><td> 8-12 hafta, 25-30g </td><td> Erkek, Verici ya da alıcı </td></tr></tbody></table> Tablo 2. Farelerin Tablo, Beliric reaktifleri ve ekipmanları.

development of obliterative bronchiolitis in a murine model of orthotopic lung transplantation

Sıçanlarda ortotopik akciğer nakli ilki 1971 1 Asimacopoulos ve arkadaşları tarafından rapor edilmiştir. Şu anda, bu yöntem iyi kabul ve allo-reddedilme çalışma için değil, aynı zamanda akciğer transplantasyonu sonrası iskemi-reperfüzyon hasarının mekanizmaları incelemek için singeneik suşlar arasında sadece standartlaştırılmıştır. Sıçan ve diğer büyük bir hayvan modeli 2 uygulanması bu çalışmaların aydınlatılması önemli ölçüde katkıda rağmen, bu araştırmaların kapsamı eleme ve transjenik farelerin azlığı ile sınırlıdır. Obliteratif bronşiolit, akciğer nakli hastalarında önde gelen ölüm nedeni için etkili tedaviler nedeniyle, obliteratif bronşiolit çoğaltmak klinik öncesi modeller için yoğun araştırmalar olmuştur. Trakeal allogreft modeli en yaygın olarak kullanılan ve obliteratif bronşiolit 3 histopatolojik bazı özellikleri çoğaltabilir olduğunu. Bununla birlikte, bozulmamış bir vasculat eksikliğiAlıcının kenliği ve obliteratif bronşiolit eksik patolojik özelliklerine hiçbir bağlantısı ile ure bu model 4 programını sınırlamak. Diğer katı organ nakli aksine, vaskülarize fare akciğer nakli sadece son 2007 5 yılında ilk kez Okazaki ve arkadaşları tarafından bildirilmiştir. Sıçan akciğer nakli temel ilkelerini uygulamak, laboratuar obliteratif bronşiolit immünopatogenezi 6 ileri çalışma izin küçük histoincompatible antijen murin ortotopik tek-sol akciğer nakli kullanarak obliteratif bronşiolit modeli başlattı.

Watch this Scientific Journal Video about Development of Obliterative Bronchiolitis in a Murine Model of Orthotopic Lung Transplantation at JoVE.com

Development of Obliterative Bronchiolitis in a Murine Model of Orthotopic Lung Transplantation

Obliteratif bronşiolit akciğer transplantasyonu uzun süreli yaşam için anahtar engel ve sağlam bir preklinik model eksikliği obliteratif bronşiolit immünopatogenezi inceleyerek engellemektedir. Diğer solid organ nakli aksine, vaskülarize fare akciğer transplantasyonu vardır ancak son zamanlarda geliştirilmiştir. Burada fare ortotopik tek-akciğer transplantasyonu sonrası bağımsız geliştirilen obliteratif bronşiolit modeli gösterilmektedir.

Ortotopik Akciğer Transplantasyonu bir Mürin Modelinde Obliteratif Bronşiolit Gelişimi

Orthotopic lung transplantation in rats was first reported by Asimacopoulos and colleagues in 1971 1. Currently, this method is well accepted and ...

development-obliterative-bronchiolitis-murine-model-orthotopic-lung

Research

JoVE Journal

Medicine

20.1K Görüntüleme.  Indiana University School of Medicine. Obliteratif bronşiolit akciğer transplantasyonu uzun süreli yaşam için anahtar engel ve sağlam bir preklinik model eksikliği obliteratif bronşiolit immünopatogenezi inceleyerek engellemektedir. Diğer solid organ nakli aksine, vaskülarize fare akciğer transplantasyonu vardır ancak son zamanlarda geliştirilmiştir. Burada fare ortotopik tek-akciğer transplantasyonu sonrası bağımsız geliştirilen obliteratif bronşiolit modeli gösterilmektedir.

Video: Development of Obliterative Bronchiolitis in a Murine Model of Orthotopic Lung Transplantation

Orthotopic Aortic Transplantation: A Rat Model to Study the Development of Chronic Vasculopathy

Research models of chronic rejection are essential to investigate pathobiological and pathophysiological processes during the development of transplant vasculopathy (TVP).
The commonly used animal model for cardiovascular chronic rejection studies is the heterotopic heart transplant model performed in laboratory rodents. This model is used widely in experiments since Ono and Lindsey (3) published their technique. To analyze the findings in the blood vessels, the heart has to be sectioned and all vessels have to be measured.
Another method to investigate chronic rejection in cardiovascular questionings is the aortic transplant model (1, 2). In the orthotopic aortic transplant model, the aorta can easily be histologically evaluated (2). The PVG-to-ACI model is especially useful for CAV studies, since acute vascular rejection is not a major confounding factor and Cyclosporin A (CsA) treatment does not prevent the development of CAV, similar to what we find in the clinical setting (4). A7-day period of CsA is required in this model to prevent acute rejection and to achieve long-term survival with the development of TVP.
This model can also be used to investigate acute cellular rejection and media necrosis in xenogeneic models (5).

This video demonstrates the orthotopic aortic transplant model as a simple model to study the development of transplant vasculopathy (TVP) in rats.

Ortotopik Aort Nakli: Rat Modeli Kronik Vaskülopati Geliştirme Çalışması

Research models of chronic rejection are essential to investigate pathobiological and pathophysiological processes during the development of transplant ...

Tıp

An Orthotopic Model of Murine Bladder Cancer

In this straightforward procedure, bladder tumors are established in female C57 mice through the use of catheterization, local cauterization, and subsequent cell adhesion. After their bladders are transurethrally catheterized and drained, animals are again catheterized to permit insertion of a platinum wire into bladders without damaging the urethra or bladder. The catheters are made of Teflon to serve as an insulator for the wire, which will conduct electrical current into the bladder to create a burn injury. An electrocautery unit is used to deliver 2.5W to the exposed end of the wire, burning away extracellular layers and providing attachment sites for carcinoma cells that are delivered in suspension to the bladder through a subsequent catheterization. Cells remain in the bladder for 90 minutes, after which the catheters are removed and the bladders allowed to drain naturally. The development of tumor is monitored via ultrasound. Specific attention is paid to the catheterization technique in the accompanying video.

Bladder tumors are established in female mice in a minimally invasive fashion through catheterization, local cauterization, and subsequent adhesion of carcinoma cells to the burn sites.

Murin Mesane Kanseri bir Ortotopik Model

In this straightforward procedure, bladder tumors are established in female C57 mice through the use of catheterization, local cauterization, and ...

Orthotopic Liver Transplantation in Rats

Clinical progress in the field of liver transplantation has been largely supported by animal models1,2. Since the publication of the first orthotopic rat liver transplantation in 1979 by Kamada et al.3, this model has remained the gold standard despite various proposed alternative techniques4. Nevertheless, its broader use is limited by its steep learning curve5.
In this video paper, we show a simple and easy-to-establish revision of Kamada's two-cuff technique. The suprahepatic vena cava anastomosis is performed manually with a running suture, and the vena porta and infrahepatic vena cava anastomoses are performed utilizing a quick-linker cuff system6. Manufacturing the quick-linker kit is shown in a separate video paper.

We present an easy-to-establish revision of the classical two-cuff technique for orthotopic liver transplantation in rat.

Sıçanlarda Ortotopik Karaciğer Nakli

Clinical progress in the field of liver transplantation has been largely supported by animal models1,2. Since the publication of the first orthotopic rat ...

Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as studies on graft preservation and ischemia-reperfusion injury 1,2, immunological responses 3,4, hemodynamics 5,6, and small-for-size syndrome 7. The rat OLT is among the most difficult animal models in experimental surgery and demands advanced microsurgical skills that take a long time to learn. Consequently, the use of this model has been limited. Since the reliability and reproducibility of results are key components of the experiments in which such complex animal models are used, it is essential for surgeons who are involved in rat OLT to be trained in well-standardized and sophisticated procedures for this model.
While various techniques and modifications of OLT in rats have been reported 8 since the first model was described by Lee et al. 9 in 1973, the elimination of the hepatic arterial reconstruction 10 and the introduction of the cuff anastomosis technique by Kamada et al. 11 were a major advancement in this model, because they simplified the reconstruction procedures to a great degree. In the model by Kamada et al., the hepatic rearterialization was also eliminated. Since rats could survive without hepatic arterial flow after liver transplantation, there was considerable controversy over the value of hepatic arterialization. However, the physiological superiority of the arterialized model has been increasingly acknowledged, especially in terms of preserving the bile duct system 8,12 and the liver integrity 8,13,14.
In this article, we present detailed surgical procedures for a rat model of OLT with hepatic arterial reconstruction using a 50% partial graft after ex vivo liver resection. The reconstruction procedures for each vessel and the bile duct are performed by the following methods: a 7-0 polypropylene continuous suture for the supra- and infrahepatic vena cava; a cuff technique for the portal vein; and a stent technique for the hepatic artery and the bile duct.

Orthotopic liver transplantation in rats is an indispensable experimental model for biomedical research. Here we present our surgical procedures for orthotopic rat liver transplantation with hepatic arterial reconstruction using a 50% partial graft.

Hepatik Arter İmar Kısmi Ortotopik Karaciğer Nakli Bir Rat Modeli Cerrahi İşlemleri

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as ...

Murine Corneal Transplantation: A Model to Study the Most Common Form of Solid Organ Transplantation

Corneal transplantation is the most common form of organ transplantation in the United States with between 45,000 and 55,000 procedures performed each year. While several animal models exist for this procedure and mice are the species that is most commonly used. The reasons for using mice are the relative cost of using this species, the existence of many genetically defined strains that allow for the study of immune responses, and the existence of an extensive array of reagents that can be used to further define responses in this species. This model has been used to define factors in the cornea that are responsible for the relative immune privilege status of this tissue that enables corneal allografts to survive acute rejection in the absence of immunosuppressive therapy. It has also been used to define those factors that are most important in rejection of such allografts. Consequently, much of what we know concerning mechanisms of both corneal allograft acceptance and rejection are due to studies using a murine model of corneal transplantation. In addition to describing a model for acute corneal allograft rejection, we also present for the first time a model of late-term corneal allograft rejection.

Mice have been used as a model for studying many forms of transplantation, including corneal transplantation. We describe in this report a murine model for both acute and late-term corneal transplantation.

Sıçangiller Kornea Nakli: Katı Organ Nakli En Yaygın Formu Eğitim için Bir Model

Corneal transplantation is the most common form of organ transplantation in the United States with between 45,000 and 55,000 procedures performed each ...

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

The number of acceptable donor lungs available for lung transplantation is severely limited due to poor quality. Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed lung transplantation in humans to become more readily available by enabling the ability to assess organs and expand the donor pool. As this technology expands and improves, the ability to potentially evaluate and improve the quality of substandard lungs prior to transplant is a critical need. In order to more rigorously evaluate these approaches, a reproducible animal model needs to be established that would allow for testing of improved techniques and management of the donated lungs as well as to the lung-transplant recipient. In addition, an EVLP animal model of associated pathologies, e.g., ventilation induced lung injury (VILI), would provide a novel method to evaluate treatments for these pathologies. Here, we describe the development of a rat EVLP lung program and refinements to this method that allow for a reproducible model for future expansion. We also describe the application of this EVLP system to model VILI in rat lungs. The goal is to provide the research community with key information and &#8220;pearls of wisdom&#8221;/techniques that arose from trial and error and are critical to establishing an EVLP system that is robust and reproducible.

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed lung transplantation in humans to become more readily available by enabling the ability to assess organs and expand the donor pool. Here, we describe the development of a rat EVLP program and refinements that allow for a reproducible model for future expansion.

İzole Yöntemi<em&gt; Ex vivo</emBir Rat Modelinde&gt; Akciğer Perfüzyon: Sıçan EVLP Programı Geliştirme Öğrenilmiş Dersler

The number of acceptable donor lungs available for lung transplantation is severely limited due to poor quality. Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed ...

Pre-clinical Orthotopic Murine Model of Human Prostate Cancer

To study the multifaceted biology of prostate cancer, pre-clinical in vivo models offer a range of options to uncover critical biological information about this disease. The human orthotopic prostate cancer xenograft mouse model provides a useful alternative approach for understanding the specific interactions between genetically and molecularly altered tumor cells, their organ microenvironment, and for evaluation of efficacy of therapeutic regimens. This is a well characterized model designed to study the molecular events of primary tumor development and it recapitulates the early events in the metastatic cascade prior to embolism and entry of tumor cells into the circulation. Thus it allows elucidation of molecular mechanisms underlying the initial phase of metastatic disease. In addition, this model can annotate drug targets of clinical relevance and is a valuable tool to study prostate cancer progression. In this manuscript we describe a detailed procedure to establish a human orthotopic prostate cancer xenograft mouse model.

Prostate cancer is the second most common cause of cancer-related deaths in the United States. An orthotopic cancer model provides a useful approach to understand the biology of prostate cancer and to evaluate the efficacy of therapeutic regimens. This protocol describes detailed steps necessary to establish an orthotopic prostate cancer mouse model.

İnsan Prostat Kanseri klinik öncesi Ortotopik murin modeli

To study the multifaceted biology of prostate cancer, pre-clinical in vivo models offer a range of options to uncover critical biological information ...

Open Tracheostomy Gastric Acid Aspiration Murine Model of Acute Lung Injury Results in Maximal Acute Nonlethal Lung Injury

Acid pneumonitis is a major cause of sterile acute lung injury (ALI) in humans. Acid pneumonitis spans the clinical spectrum from asymptomatic to acute respiratory distress syndrome (ARDS), characterized by neutrophilic alveolitis, and injury to both alveolar epithelium and vascular endothelium. Clinically, ARDS is defined by acute onset of hypoxemia, bilateral patchy pulmonary infiltrates and non-cardiogenic pulmonary edema. Human studies have provided us with valuable information about the physiological and inflammatory changes in the lung caused by ARDS, which has led to various hypotheses about the underling mechanisms. Unfortunately, difficulties determining the etiology of ARDS, as well as a wide range of pathophysiology have resulted in a lack of critical information that could be useful in developing therapeutic strategies.
Translational animal models are valuable when their pathogenesis and pathophysiology accurately reproduce a concept proven in both in vitro and clinical settings. Although large animal models (e.g., sheep) share characteristics of the anatomy of human trachea-bronchial tree, murine models provide a host of other advantages including: low cost; short reproductive cycle lending itself to greater data acquisition; a well understood immunologic system; and a well characterized genome leading to the availability of a variety of gene deletion and transgenic strains. A robust model of low pH induced ARDS requires a murine ALI that targets mainly the alveolar epithelium, secondarily the vascular endothelium, as well as the small airways leading to the alveoli. Furthermore, a reproducible injury with wide differences between different injurious and non-injurious insults is important.
The murine gastric acid aspiration model presented here using hydrochloric acid employs an open tracheostomy and recreates a pathogenic scenario that reproduces the low pH pneumonitis injury in humans. Additionally, this model can be used to examine interaction of a low pH insult with other pulmonary injurious entities (e.g., food particles, pathogenic bacteria).

This protocol induces acute lung injury in a mouse that has close fidelity to the pathogenesis of acid pneumonitis observed in humans. We generate a maximal acute nonlethal low pH lung injury and account for differences in rodent-human anatomic respiratory structure using an open tracheostomy coupled with circumferential pressure release.

Akut Akciğer Hasarı Açık Trakeostomi Gastrik Asit Aspirasyon Fare Modeli Maksimal Akut Ölümcül olmayan Akciğer Hasarı Sonuçlar

Acid pneumonitis is a major cause of sterile acute lung injury (ALI) in humans. Acid pneumonitis spans the clinical spectrum from asymptomatic to acute ...

A Pre-Clinical Porcine Model of Orthotopic Heart Transplantation

Fifty-years following the first successful report, cardiac transplantation remains the gold-standard treatment for eligible patients with advanced heart failure. Multiple small-animal models of heart transplantation have been used to study the acute and long-term effects of novel therapies. However, few are tested and demonstrated success in clinical trials. It is of critical importance to evaluate new therapies in a clinically relevant large-animal model for efficient and reliable translation of basic studies&#39;&#160;findings. Here, we describe a pre-clinical large-animal (porcine) model of orthotopic heart transplantation that has been firmly established and previously used to investigate novel cardioprotective strategies. This procedure focuses on acute ischemia-reperfusion injury and is a reliable method to investigate novel interventions which have been tested and validated in smaller experimental models, such as the murine model. We demonstrate its usefulness in assessing cardiac performance during the early post-transplantation period and other potential possibilities enabled by the model.

Here, we describe a pre-clinical large-animal (porcine) model of orthotopic heart transplantation that has been firmly established and utilized to investigate novel cardioprotective strategies.

Ortootopik kalp transplantasyonunun klinik öncesi porcine modeli

Fifty-years following the first successful report, cardiac transplantation remains the gold-standard treatment for eligible patients with advanced heart ...

Reduced Complications after Arterial Reconnection in a Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation of human liver transplantation due to the absence of arterial reconnection. Described here is a modified transplantation procedure that includes the incorporation of hepatic artery (HA) reconnection, leading to a marked improvement in transplant outcomes. With a mean anhepatic time of 12 min and 14 s, HA reconnection results in improved perfusion of the transplanted liver and an increase in long-term recipient survival from 37.5% to 88.2%. This protocol includes the use of 3D-printed cuffs and holders to connect the portal vein and infrahepatic inferior vena cava. It can be implemented for studying multiple aspects of liver transplantation, from immune response and infection to technical aspects of the procedure. By incorporating a simple and practical method for arterial reconnection using a microvascular technique, this modified rat OLT protocol closely mimics aspects of human liver transplantation and will serve as a valuable and clinically relevant research model.

The goal of this study is to modify the rat orthotopic liver transplant model to better represent human liver transplantation and improve recipient survival. The presented method reestablishes hepatic arterial inflow by connecting the donor liver&#39;s common hepatic artery to the recipient liver&#39;s proper hepatic artery.

Ortotopik Karaciğer Transplantasyonunun Sıçan Modelinde Arteriyel Reconnection Sonrası Azaltılmış Komplikasyonlar

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation ...