Kemik enfeksiyonu araştırmaları için bir hayvan modeli çok önemlidir. Ancak, şu anda hangi enfeksiyonlar durumu ve bakteri sayısı tutarlı olduğu için hiçbir tavşan modeli yoktur. Kemik enfeksiyonu tavşan modeli tutarlı bir bakteri kullanır ve vankomisin yüklü kalsiyum sülfat ve otojen parçaları ile tedavi edilir.
Bu teknik kemik enfeksiyonu ve kemik nonunion tedavisinin tanısı ve kemik enfeksiyonunun patogenezinin anlaşılması için genişletilebilir. Bu yöntem sıçanlar, fareler ve domuzlar diğer kemik enfeksiyonu modelleri içine fikir sağlayabilir. Aynı miktarda bakteriyel süspansiyonu kemik iliği içine yüklemek zordur.
Görsel gösteri, araştırmacıların kritik adımları kolay ve doğru bir şekilde gerçekleştirmelerine yardımcı olabilir. Bakteriyel süspansiyon hazırlamak için, ilk LB kültür orta 0,3 mililitre S.aureus dondurulmuş kurutulmuş toz 0.5 miligram çözünür. Süspansiyonu iyice karıştırın ve bakterileri 37 santigrat derecede 16 saat boyunca kuluçkaları için triptotik soya agar plakalarına yerleştirin.
Ertesi sabah, 37 santigrat derecede 24 saat boyunca triptik soya suyu tüplerinde kültür için tek bir bakteri kolonisi oluşturma ünitesi seçin. Bakteriler orta logaritmik büyüme aşamasında olduklarında, 1 mililitre bakteriyi 1,5 mililitrelik bir tüpe aktarın ve bakterileri santrifüj le toplayın. Daha sonra, son yıkamadan sonra 3 mililitre taze PBS bakteri resuspending, yıkama başına PBS 100 mikrolitre bakteri hücre pelet üç kez yıkayın.
Kemik enfeksiyonu kalıbını kurmak için, üç aylık üç kilogram erkek Yeni Zelanda beyaz tavşan pençe çimdik yanıt eksikliği onaylamak ve saç büyüme yönünde karşı proksimal tibial bölgeden saç kaldırmak için bir elektrikli tıraş makinesi kullanın. Pozlanmış cildi poviyo iyot solüsyonu ile dezenfekte edin ve s.Aureus enjeksiyonu için kaval kemiğin üst ucunu ve sondaj deliği pozisyonunu işaretlemek için bir kalem ve cetvel kullanın, sondaj deliği pozisyonunun tibial platonun yatay ortasında olduğuna dikkat edin. Daha sonra, deride bir kesi yapmak için bir sayı 11 neşter kullanın, periton bir santimetre kesi takip.
Bir elektrikli kemik matkap ünitesi kullanarak, tibia iki milimetre çapında delik yumruk ve kemik balmumu iki milimetre çapında iki milimetre uzunluğunda silindir ile delik basın. Tibial platoyatay düzlem boyunca herhangi bir yedek kemik balmumu çıkarın ve delik kemik balmumu dolu olduğunu onaylayın. Daha sonra, periosteum ve deri dikey bir yatak sütür dikmek için emilebilir cerrahi dikiş ler kullanın dikiş çiğneme hayvan önlemek için.
Ve bir mililitrelik asepsi enjektörü kullanarak s.Aureus çözeltisinin mililitrebaşına sekiz koloni oluşturan üniteye yavaşça bir kez 10 tane demlik deliğe enjekte edin. Yedinci, 14, 21 ve 28. Anesteziden sonra, santimetre tibial deri ve periton kesiler yapmak ve kemik balmumu temizlemek için bir sayı 11 neşter kullanın.
Daha sonra, nekrotik kemik debride için iki bitişik 4.8 milimetre çapında delik yumruk için bir elektrikli kemik matkap ünitesi kullanın ve nekrotik kemik iliği ve granülasyon doku debride için bir kemik kaşığı kullanın. Daha sonra, iki delik arasındaki kemik dokusunu kazıyın ve temizleyin ve 37 santigrat derecede bir gecede kuluçka için koyun kanı agar plakaları üzerine debrided kemik iliği bir mililitre yayıldı. Ertesi sabah, 30 ila 300 kolonili plakaları seçin ve enfekte hayvan başına koloni oluşturan birimlerin sayısını hesaplayın.
Enfeksiyondan sonraki 28. Esnek bir silika jel kalıp içine karışık ürün ekleyin ve ürünün oda sıcaklığında 15 dakika kurumasını bekleyin. Sonra, vankomisin yüklü kalsiyum sülfat veya VCS boncuk kaldırmak için kalıp esnetin.
Antibiyotik tedavisi ve otojen kemiğin implantasyonu için, ilk olarak, kuyruk bölgesitıraş önce yaralı tibia yeniden ortaya çıkarmak, ve povison iyot çözeltisi ile maruz kuyruk deri dezenfekte. Kuyruğu kesmek için cerrahi makas kullanın ve hayvanın dikişleri çiğnemesini önlemek için dikey bir şilte sütürde deriyi kapatmak için emilebilir cerrahi dikişler kullanın. Kuyruk kemiği ortaya çıkarmak için kuyruk deri kesmek için bir numara 11 neşter kullanın.
Herhangi bir kas çıkarın, yumuşak doku, ve periost, ve her eklemde kuyruk kemiği ayırmak. Kemik parçalarını steril salin içeren 100 milimetrelik plastik bir tabağa aktarın. Daha sonra, tibial ilik boşluğuna VCS boncuk dört adet implant kavisli makas kullanın ve otojen kuyruk kemiği parçaları sekiz adet ile kemik defekti doldurmak için kavisli forceps kullanın.
Daha sonra, bir yatak sütür şekilde emilebilir cerrahi dikişler ile periosteum ve deri kesilerini kapatın. Kemik enfeksiyonu model grubunda C-reaktif protein ve beyaz kan hücresi düzeyleri kontrol hayvanlarına göre daha yüksektir. VCS veya VCS otojen kemik tedavisinden iki, dört, altı ve sekiz hafta sonra, C-reaktif protein ve beyaz kan hücresi düzeyleri önemli ölçüde azalır.
İki boyutlu rekonstrüksiyon görüntüleri VCS veya VCS ve otojen kemik ile tedaviden sonraki 12 haftalık dönemde kemik hacminde ilerleyici bir artış gösterirken, tedavi edilmeyen kemik enfeksiyonu model grubunda kemik kaybı önemli. Kemik rejenerasyon kantitatif indekslerini analiz etmek için, bitmap verileri kullanılarak 3B model görüntüler yeniden oluşturulabilir ve her kemikte 9,6 milimetre uzunluğunda oval bir alan seçilebilir. İşlenmemiş kemik enfeksiyonu model grubunda kemik hacminin doku hacmine oranı VCS ve VCS otojen kemik gruplarında ölçülenlerden önemli ölçüde daha düşüktür.
VCS otojen kemik grubundaki trabeküler sayı ve kalınlık skorları, işlenmemiş kemik enfeksiyonu modeli ve VCS hayvanlarındakilerden anlamlı olarak daha yüksektir. Ayrıca, VCS otojen kemik grubundaki trabeküler ayırma skorları, işlenmemiş kemik enfeksiyonu modeli ve VCS gruplarında ölçülenlerden belirgin derecede daha düşüktür. Uygun vücut ağırlığı ile tavşan seçmek için özen.
Kemik balmumu ile Staphylococcus aureus çözeltisi blok. Nekrotik kemiği tamamen debride ve iki bitişik 4.8 milimetre çapında delik yumruk. İşlemsonrasında kemik enfeksiyonu nun patolojik süreçlerini izlemek ve onarmak için ultrason, radyoloji ve bilgisayar tomografisi gibi diğer tanısal ölçüm yöntemi de yapılabilir.
Bu gelişmiş kemik enfeksiyonu modeli ve kombine VCS ve otojen kemik tedavisi kemik enfeksiyonu ve kemik rejenerasyon unun altını çizen mekanizmanın incelenmesinde yararlı olabilir. Staphylococcus aureus dondurulmuş kurutulmuş toz tehlikeli olduğundan, bakteriyel süspansiyon her zaman izole bir bakteri laboratuvarında hazırlanmalıdır.
