Yazarlar aşağıdaki finansman kaynakları kabul: başka Kröner-Fresenius-Stiftung (Tienush Rassaf); Hans und Gertie Fischer Stiftung (Tienush Rassaf), hibe Tıp Fakültesi, üniversite Duisburg-Essen, Almanya (Tienush Rassaf, Lars Michel); Ernst-und Berta Grimmke-Stiftung (Christos Rammos).

Tüm deneyler uygun olarak ve tüm ilgili düzenlemeler ile uyum içinde tamamlanmıştır (' koruma, omurgalı deneysel ve diğer bilimsel amaçlar (yönergesi 2010/63/AB) ve hayvan bakımı için kullanılan hayvanlar için Avrupa Sözleşmesi yapıldı Kurumsal yönergelere uygun olarak. Tüm deneyler 6 ay yaşında erkek C57BL/6JRj fareler ile gerçekleştirilmiş.
1. hazırlık
<ol><li>Cerrahi mikroskop ve ısıtma yastığını yanı sıra vücut sıcaklık izlemek için bir rektal sonda hazırlayın. Temiz ve tüm cerrahi aletler sterilize.</li>
	<li>10 cm 2 adet 5-0 ipek iplik damar ligasyonu, 5 cm 6-0 polipropilen iplik ve 2 mm silikon tüp ligasyonu LCA için hazırlanın.</li>
	<li>PV kateter kalibrasyon küvet için 37 ° C ön ısıtma tarafından ve Hamilton şırınga H2O tuzlu kalibrasyon için % 15 sodyum klorür (NaCl) ile doldurulmuş bir 100 µL hazırlayın.</li>
	<li>37 ° C'de yer PV kateter (3 cm, 1.4 F) önceden ısıtılmış % 0,9 NaCl (serum) H2O içinde en az 30 dk önce ölçüm. Kateter veri edinme cihaza bağlayın ve bir analog/sayısal dönüştürücü aygıtı bağlayın. Her iki cihaz bir bilgisayara bağlayın.</li>
	<li>Yazılımı kurar. Yazılım destekli basınç kalibrasyonu ve gürültülerinden kalibrasyon yazılım güdümlü iş akışı8tarafından talep gibi gerçekleştirin.</li>
</ol>2. anestezi ve analjezi
<ol><li>Ketamin 100 mg/kg vücut ağırlığı ve xylazine hidroklorür 10 mg/kg vücut ağırlığı mayi enjeksiyonu ile kullanarak fare anestezi. Ben başında / R cerrahi, 0,05 mg/kg vücut ağırlığı buprenorfin intraperitoneally analjezi sağlamak için yönetmek.</li>
	<li>10 dk sonra bir 20 G intravenöz (IV) kateter kullanarak bir endotrakeal entübasyon gerçekleştirebilir ve fare ile % 40 oksijen (O2) ve (v) % 2 isoflurane havalandırın. Uygun havalandırma parametreleri (Örneğin, 220 µL kontur hacim, 150/dk 25-30 g C57BL/6JRj fare için) ayarlayın.</li>
	<li>Sürekli vücut sıcaklığı ile rektal sonda izlemek. Fare ısıtmalı plaka üzerinde araştırmacı doğru işaret kafa ile bağlayın. Fare normal vücut sıcaklığı 36,5-38 ° c. Vücut ısısını 1 derece içinde ateşli tabağı sıcaklık ayarı tarafından korumak.</li>
</ol>3. sol ventrikül kateterizasyon
<ol><li>Göğsündeki ve boynundaki üç alternatif scrubs betadin ve % 70 alkol ile dezenfekte edin.  Cilt dezenfektan kurumasını bekleyin. Göğüs kılları küçük hayvan tıraş sistemi kullanarak kaldırın.</li>
	<li>Bir 10 mm boyuna medyan kesi doğru küçük cerrahi makas kullanarak göğüs kemiğinin alt dudak altında 5 mm gerçekleştirin.</li>
	<li>Bir forseps kullanarak çene bezi yoluyla künt hazırlık sol ve sağ parçası incelemek. Ayrı kas ve yağ dokusu doğru komün şah damarı ortaya çıkarmak için sağ paratracheal bölgede. Seferber ve bükülmüş bir forseps ile bağ dokusu geminin yanında dikkatli künt hazırlık ile 5-10 mm toplam uzunluğu için gemi ayırmak. Not: Bu şiddetli hipotansiyon ve bradikardi neden olabilir vagus siniri veya karotis vücut Mekanik manipülasyonu her zaman önlemek.</li>
	<li>İki hazır ipek konu altında gemi geçmektedir. Sıkı bir düğüm ile distal gemi ligate ve gevşek bir düğüm hala kateter geçişini sağlar proksimal maruz kalan bölge koyun.</li>
	<li>Kafatası (sıkı) düğüm Bu kateterin giriş kolaylaştıracaktır gibi hafif bir gerginlik gemide uygulamak için farelerin şakağındaki konu saptamak. Bir hemostat damar kıskacı proksimal gemide proksimal geri dönülebilir olarak kan akışını engellemek için gevşek düğüm yerleştirin.</li>
	<li>Bir kama şeklinde kesi 1 mm mikro makasla gemi açmak için kafatası düğüm proksimal gerçekleştirin. Not: Küçük bir damla kan doğru bu adım yürütülmesini belirtir.</li>
	<li>Kateter dikkatli için 10 mm. başlangıç veri yazmak için kateter takın. Not: bir forseps ile belgili tanımlık kesme uzanan bu işlem daha kolay yapabilirsiniz.</li>
	<li>Damar kıskacı ayıklayın. 1-2 damla serum kateter hareketi kolaylaştırmak için kesi ekleyin. Yaklaşık bir 10 mm için kateter tanıtımı devam edin. Sensör ipucu ile proksimal düğüm geçtikten sonra düğüm dikkatle sadece tutturmak önlemek için yeterli kateter hareketi bozulması olmadan reflü kateterin daha ince parçalar yanında kan. Not: Kateter ucu algılayıcısına boyutunu reflü kan damar kıskacı ayıklanan önler.</li>
	<li>Yavaşça katater aort (Şekil 3A) yerleştirilir profil arteryel kan basıncı gösteren basınç analizi gösteriyor kadar kateter ekleyerek devam edin. Not: aort kapak ulaşan kateter hafif direnç ve nabız senkronize hareket kateterin tarafından belirtilir.</li>
	<li>Aort kapak ilerlemeye çalışıyor direnci yaşandığı zaman, çekme kateter tekrar 5 mm ve önceden diastolik basınç 0 - ulaştığı LV kateterizasyon PV analiz bir değişikliğe belirtilir kadar 20 mmHg (Şekil 3B). Daha fazla sensör ucu (Şekil 3 c) sol ventrikül yerleşimini onaylamak için izleme birimindeki değişiklikleri unutmayın. Proksimal düğüm kateter hareket önlemek için daha sıkı bağla.</li>
</ol>4. iskemi/reperfüzyon cerrahi
<ol><li>Kaburga görüntülenir kadar cilt kesi sol koltuk altı toplam uzunluğu, 15 mm. devam et iki kas tabakaları künt hazırlanması için doğru kaudal göğüs kemiği gerçekleştirmek.</li>
	<li>Kesik göğüs üzerinden üçüncü ve dördüncü sol kaburga arasında açın. Kalp zarını erişmek için cerrahi kanca kullanın. Kalp zarını kalp yukarıda çıkarabileceğim. LCA ligasyonu, geçerli analiz için hayvan kayıt PV verilere dokunmadan bekle 30 s ile devam etmeden önce.</li>
	<li>Sol auricle altında ortaya çıkan ve kalp tepe doğru sol tarafındaki azalan LCA yerelleştirilmesine. 6-0 polipropilen sütür arter bir döngü sol auricle altında 2 mm ile sarmak için kullanın. Bir küçük silikon tüp döngü altında yerleştirin ve sıkı bir düğüm yukarıdaki yerleştirin. Not: Distal Miyokardiyum dönüm gri LCA tıkanıklığı6için pozitif kontrol olarak hizmet vermektedir. Ben / R cerrahi bağımsız olarak çalışma araştırmacı üzerinden 5 dk içinde gerçekleştirilmesi.</li>
	<li>Dikişi 1 mm uzunlukta kesin. Cerrahi kanca yayın ve kas tabakaları yukarıda belgili tanımlık kesme el ile kapatın. 45 dk sürekli PV veri kaydederken bekleyin.</li>
	<li>45 dakika sonra kesi yeniden açın ve reperfüzyon ikna etmek için silikon tüp kaldırın. Kayıt verilerini başka bir 20 dakika. Not: Başarılı reperfüzyon olarak görülen iskemi önce kırmızı bir renk bir değişiklik gösterir.</li>
</ol>5. Kalibrasyon
Not: PV kateter sistemi kalibrasyon ikisi sonra ölçüm yapılması gerek 4 zorunlu adımlardan oluşur. Kalibrasyon geçerli sonuçlar sağlamak için her deneyden sonra tekrarlanmalıdır.
<ol><li>Basınç Kalibrasyonu ve gürültülerinden kalibrasyon adım 1,5 açıklandığı gibi deneme önce gerçekleştirin.</li>
	<li>Serum fizyolojik kalibrasyon deney tamamlandıktan sonra kateter sol ventrikül hala yerleştirildiğinde gerçekleştirin. Hazırlanan bölgede karotid arter sağ juguler ven lateral yerelleştirilmesine. 10 enjekte µL % 25 NaCl içinde H2O yolu ile bir Hamilton şırınga kayıt veri.</li>
	<li>Kalibrasyon birim eğrisi (Şekil 5C) artan aşamasında vurgulayarak edinme yazılımını kullanarak hesaplayın. Bu adımları toplam 3 kez tekrarlayın. Kan kaybı şırınga çıkarma sonra hızla ponksiyon sıkıştırmak için bir damar kıskacı kullanılarak kaçının.</li>
	<li>Hacim kalibrasyon göre Standart birimlerin analiz birimi veri toplama ayarlamak için gerçekleştirin. Yaklaşık 500 µL fare kan kalp ponksiyon (Örneğin, 200 IE heparin başına 5 µL) biraz heparinized 1 mL şırınga ile elde edilir. Geri çek PV kateter kateter zarar görmesini önlemek için 10-15 mm.</li>
	<li>Elde edilen kan 37 ° C önceden ısıtılmış kalibrasyon küvet (Şekil 5A) doldurun. Olarak sonuçları ile engelleyebilir kabarcıklar kaçının. Kateter ucu her iyi ve kayıt veri ekleyin. Standart eğriye göre analiz yazılım destekli (Şekil 5B) edinin. Toplam 3 kez tekrarlayın.</li>
	<li>Yeterli isoflurane anestezi her zaman korunur iken kan kaybı veya servikal çıkması tarafından fareler ötenazi.</li>
</ol>6. veri analizi
<ol><li>Kalibrasyon adımları tamamladıktan sonra yazılım destekli veri çözümlemesi gerçekleştirin. Bu nedenle, PV iş akışı analiz bölüm içinde uygun bölüme (en az on döngüleri) vurgulayın ve temel çözümlemesi gerçekleştirin. Havalandırma veya işleme nedeniyle sapmalar ile devir gerekirse hariç (şekil 3D).</li>
	<li>PV temel analiz (arteriyel basınç sadece), aort kapak geçirilmesi önce hemen önce ve sonra LCA tıkanıklığı gerçekleştirin. PV temel analiz yapma ve 5 dk. süre iskemi ve reperfüzyon sonrası aralıklarla devam edin. Deney sonunda, geri sol ventrikül (arteriyel basınç) üzerinden kateterin çekilmesi sonra basınç veri çözümlemesi gerçekleştirin.</li>
	<li>Örnekleme hatayı önlemek için en az 10 ardışık çevrimleri analiz. Ne zaman güçlü girişim yaşandığı elde edilen değerler havalandırma, havalandırma için en fazla 5 geçici kesinti ile s kabul edilebilir.</li>
	<li>Temel analiz (LV fonksiyonu karakterize etmek içinşekil 3D) hesaplanır aşağıdaki parametreleri kullanın:<ol>
<li>Kontur birim (µL)</li>
		<li>Ejeksiyon fraksiyonu: inme birim / end-diastolik hacim (%)</li>
		<li>Kardiyak çıkış: inme cilt * kalp hızı (µL/dk)</li>
		<li>Kardiyak Dizin: kardiyak çıkış / vücut yüzey alanı (µL/(min*cm²)</li>
		<li>İnme iş: iç alan PV eğrisinin (mmHg * µL)</li>
		<li>Maksimum basınç (değerleri); Ortalama basınç (Pmean)</li>
		<li>Max dP/dt (mmHg/s) LV sistolik fonksiyonunun parametre olarak</li>
		<li>Min dP/dt (mmHg/s) LV uyum için bir parametre olarak</li>
		<li>Saat sabit isovolumetric gevşeme: Tau (ms)</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol>
	<li>Sanchis-Gomar, F., Perez-Quilis, C., Leischik, R., Lucia, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+of+coronary+heart+disease+and+acute+coronary+syndrome.">Epidemiology of coronary heart disease and acute coronary syndrome.</a> Annals of Translational Medicine. 4 (13), 256 (2016).</li><li>Anderson, J. L., Morrow, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+Myocardial+Infarction.">Acute Myocardial Infarction.</a> New England Journal of Medicine. 376 (21), 2053-2064 (2017).</li><li>McNamara, R. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Predicting+in-hospital+mortality+in+patients+with+acute+myocardial+infarction.">Predicting in-hospital mortality in patients with acute myocardial infarction.</a> Journal of the American College of Cardiology. 68 (6), 626-635 (2016).</li><li>Kurian, G. A., Rajagopal, R., Vedantham, S., Rajesh, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Role+of+Oxidative+Stress+in+Myocardial+Ischemia+and+Reperfusion+Injury+and+Remodeling:+Revisited.">The Role of Oxidative Stress in Myocardial Ischemia and Reperfusion Injury and Remodeling: Revisited.</a> Oxidative Medicine and Cellular Longevity. , (2016).</li><li>Turer, A. T., Hill, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathogenesis+of+myocardial+ischemia-reperfusion+injury+and+rationale+for+therapy.">Pathogenesis of myocardial ischemia-reperfusion injury and rationale for therapy.</a> American Journal of Cardiology. 106 (3), 360-368 (2010).</li><li>Totzeck, M., Hendgen-Cotta, U. B., French, B. A., Rassaf, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+practical+approach+to+remote+ischemic+preconditioning+and+ischemic+preconditioning+against+myocardial+ischemia/reperfusion+injury.">A practical approach to remote ischemic preconditioning and ischemic preconditioning against myocardial ischemia/reperfusion injury.</a> Journal of Biological Methods. 3 (4), (2016).</li><li>Respress, J. L., Wehrens, X. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transthoracic+echocardiography+in+mice.">Transthoracic echocardiography in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (39), (2010).</li><li>Pacher, P., Nagayama, T., Mukhopadhyay, P., Batkai, S., Kass, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+cardiac+function+using+pressure-volume+conductance+catheter+technique+in+mice+and+rats.">Measurement of cardiac function using pressure-volume conductance catheter technique in mice and rats.</a> Nature Protocols. 3 (9), 1422-1434 (2008).</li><li>Zhang, B., Davis, J. P., Ziolo, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+catheterization+in+mice+to+measure+the+pressure+volume+relationship:+Investigating+the+Bowditch+effect.">Cardiac catheterization in mice to measure the pressure volume relationship: Investigating the Bowditch effect.</a> Journal of Visualized Experiments. (100), e52618 (2015).</li><li>Rossello, X., Hall, A. R., Bell, R. M., Yellon, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+the+Langendorff+perfused+isolated+mouse+heart+model+of+global+ischemia-reperfusion+injury:+Impact+of+ischemia+and+reperfusion+length+on+infarct+size+and+LDH+release.">Characterization of the Langendorff perfused isolated mouse heart model of global ischemia-reperfusion injury: Impact of ischemia and reperfusion length on infarct size and LDH release.</a> Journal of Cardiovascular Pharmacology and Therapeutics. 21 (3), 286-295 (2016).</li><li>Task Force on the management of ST-segment elevation acute myocardial infarction of the European Society of Cardiology (ESC). <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ESC+Guidelines+for+the+management+of+acute+myocardial+infarction+in+patients+presenting+with+ST-segment+elevation.">ESC Guidelines for the management of acute myocardial infarction in patients presenting with ST-segment elevation.</a> European Heart Journal. 33 (20), 2569-2619 (2012).</li><li>Shigemitsu, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+myocardial+infarction+due+to+left+main+coronary+artery+occlusion.+Therapeutic+strategy.">Acute myocardial infarction due to left main coronary artery occlusion. Therapeutic strategy.</a> Japanese Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 50 (4), 146-151 (2002).</li></ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Kardiyojenik şok ve ben Engelli LV fonksiyonu gerçek zamanlı vivo değerlendirilmesi için yeni bir yöntem olarak hizmet veren akut miyokard infarktüsünde LV hemodinami PV izlenmesi / R yaralanma. PV kateterizasyon parametreleri LV sistolik ve diyastolik fonksiyon ile ilgili geniş bir yelpazede sağlayabilir. LV hacimsel parametrelerin yanında genellikle ekokardiyografi veya MRI (odası birimler, EF, kontur birim ve kardiyak çıkış) tarafından elde edilen, PV analiz LV fonksiyonu daha tam bir yandan ...

Kalp-damar hastalıkları ölüm Batı uygarlığının1en sık nedenidir. Akut miyokard infarktüsünde yüksek akut ve kronik ölüm2ile ilişkili önemli bir olaydır. Revaskülarizasyon elde üzerinden acil perkütan koroner girişim (PCI) olsa bile, ölüm oranı yüksek, özellikle hastalarda akut miyokard infarktüsünde3ile semptomlar başlangıcından sonra ilk 48 saat içinde kalır. Kardiyojenik şok akut sol ventrikül (LV) fonksiyonları azalma nedeniyle bu hastaların3' te hastane ölüm için önemli bir nedeni var. LV fonksiyonu erken bu azalma tarafından Miyokardiyal hasarın neden iskemi ve reperfüzyon takip. Bu sözde iskemi/reperfüzyon (ı / R) yaralanma gibi abartılı reaktif oksijen türleri4,5nesil hücresel metabolome değişikliklerden aracılı.
Preklinik bir ortamda Miyokardiyal hasarın azalmasına yol açan olası koruyucu mekanizmaları keşfetmek için güvenilir fare modelleri yazı-Ben/R LV fonksiyonu6değerlendirilmesi için yöntemleri de dahil olmak üzere gerekli olan. Bu ayar, transtorasik ekokardiyografi7 ve manyetik rezonans görüntüleme (MRG)6 fonksiyonel fenotipleme8,9için yaygın olarak kullanılır. Ancak, bu yöntemlerin şiddetli LV disfonksiyon ve devam eden akut miyokard infarktüsünde kardiyojenik şokta değerlendirilmesi için uygun değildir ve doğrudan veri LV basınç gösteremez. Temel pathomechanisms erken faz izole kalp bir ex vivo tahlil kullanarak Langendorff aparatı Kılavuzu ben / R yaralanma10. Bu yöntem vivo içinde özerk sinir sistemi veya hormonal düzenleme ve asit-baz homeostasis gibi uyarlamalı mekanizmaları çoğaltmak onun yetersizlik nedeniyle sınırlıdır. Kullanılabilir şu anda herhangi bir yöntem için bir tam işlevsel fenotipleme-kardiyojenik şok ve sol ventrikül fonksiyon bozukluğu sırasında devam eden bir miyokardiyal ben / R yaralanma.
Basınç-hacim (PV) kateterizasyon ve geçici cerrahi sol ana koroner arter (LCA) tıkanıklığı kombinasyonu ile eşitlenmiş bir yaklaşım faydalı ama teknik olarak zor olabilir. Ben sırasında istikrarlı extracardiac hemodinami / R yaralanma için geçerli sonuçlar temel kararsız anestezi veya kan kaybı ağır sonuçları etkileyebilir beri. Bir roman yaklaşım için ı hemodinamik fenotipleme / R yaralanma üzerinden LV PV kateterizasyon ve geçici LCA tıkanıklığı kardiyojenik şok ve akut miyokard infarktüsünde LV disfonksiyonu yeni anlayışlar getirmek ve ilerideki analizleri için bir yöntemi olarak hizmet cardioprotection.

<table><tbody><tr><td>Betaisodona Loesung</td><td>Mundipharma</td><td>4162-1606/89x30mm</td><td>Povidon-Iod</td></tr><tr><td>Calibration cuvette</td><td>Millar instruments</td><td>910-1049</td><td>Calibration cuvette</td></tr><tr><td>Contura professional hair trimmer</td><td>Wella</td><td>HS-60</td><td>Small animal shaving system</td></tr><tr><td>Eclipse Needle 27G</td><td>BD</td><td>REF 305770</td><td>27G needle</td></tr><tr><td>Forceps</td><td>FST</td><td>11203-25, 11069-08, 11616-15, 11506-12, 11051-10</td><td>Surgical forceps</td></tr><tr><td>Forceps</td><td>Aesculap Braun</td><td>BN731R, BD 311R</td><td>Surgical forceps</td></tr><tr><td>Foris FS2434</td><td>Eizo</td><td>0FTD2033</td><td>Monitor</td></tr><tr><td>Hamilton Syringe 100 &amp;micro;l needle</td><td>Hamilton</td><td>80621</td><td>100&amp;micro;l syringe with needle</td></tr><tr><td>Heated Small animal OP table</td><td>Harvard Apparatus</td><td>15001</td><td>Heated OP table</td></tr><tr><td>Heparin-Natrium 25000</td><td>Ratiopharm</td><td>N68542.04</td><td>Heparin</td></tr><tr><td>Ketamin 10% 100 mg/ml</td><td>bela-pharm</td><td>FS1670041</td><td>Ketamin</td></tr><tr><td>Labchart Pro 8 + Pro modules</td><td>AD Instruments</td><td>MLS260/8</td><td>PV data analysis software</td></tr><tr><td>LAS EZ</td><td>Leica</td><td>LAS EZ</td><td>Microscope camera software</td></tr><tr><td>Leica IC80 HD</td><td>Leica</td><td>IC80 HD</td><td>Microscope camera</td></tr><tr><td>Leica M80</td><td>Leica</td><td>M80</td><td>Microscope</td></tr><tr><td>Micro-tip catheter transducer</td><td>Millar instruments</td><td>SPR-839</td><td>PV catheter</td></tr><tr><td>MiniVent</td><td>Harvard Apparatus</td><td>845</td><td>ventilation</td></tr><tr><td>MPVS Ultra</td><td>Millar instruments</td><td>PL3508B48/M</td><td>PV catheter data acquisition device</td></tr><tr><td>Octenisept</td><td>Sch&amp;uuml;lke</td><td>20000832-A</td><td>disinfectant</td></tr><tr><td>Plastipak 1ml</td><td>PD</td><td>REF 303172</td><td>1ml syringe</td></tr><tr><td>PowerLab 8/35</td><td>AD Instruments</td><td>PL3508</td><td>analog/digital converter</td></tr><tr><td>Prolene 6-0</td><td>Ethicon</td><td>XNEH7814.P31</td><td>Polypropylene suture</td></tr><tr><td>Retraction Kit</td><td>FST</td><td>18200-20</td><td>retraction of surgical situs</td></tr><tr><td>Seraflex 5-0</td><td>Naila</td><td>IC108000</td><td>silk suture</td></tr><tr><td>Small and micro-scissors</td><td>FST Essen</td><td>14059-11, 15007-08, 14064-11</td><td>Surgical scissors</td></tr><tr><td>Small silicon tube</td><td>Reichelt Chemietechnik</td><td></td><td>tube for LCA occlusion</td></tr><tr><td>Sodium Chloride</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S7653</td><td>Sodium Chloride</td></tr><tr><td>testo 108</td><td>testo</td><td>5631080</td><td>rectal thermometer</td></tr><tr><td>Thinkcentre desktop computer</td><td>Lenovo</td><td>PC0EJS2V</td><td>Computer</td></tr><tr><td>Vasofix Safety 20G</td><td>Braun</td><td>4269110S-01</td><td>intubation catheter</td></tr><tr><td>Windows 10</td><td>Microsoft</td><td>KW9-00240</td><td>Operating system</td></tr><tr><td>Xylazin 2%</td><td>Ceva</td><td>6324464.00.00</td><td>Xylazine hydrochloride</td></tr></tbody></table>

real-time pressure-volume analysis of acute myocardial infarction in mice

Akut miyokard infarktüsünde akut kalp yetmezliği ve kardiyojenik şok yol açabilir. Hemodinami değerlendirilmesi olası herhangi bir tedavi yaklaşımı akut sol ventrikül (LV) disfonksiyon karşı yönetmen değerlendirilmesi için önemlidir. Geçerli görüntüleme yöntemleri (Örn., ekokardiyografi ve manyetik rezonans görüntüleme) LV basınç verileri doğrudan ölçülen olamaz beri çeşitli kısıtlamalar bulunmaktadır. LV kateterizasyon koroner arter tıkanıklığı geçiren farelerde LV fonksiyonu gerçek zamanlı bir şekilde değerlendirilmesi için bir roman yöntemi olarak hizmet verebilir.
Yordamın başlangıcında, fareler tarafından endotrakeal entübasyon takip anestezi. LV kateterizasyon için şu karotid arter maruz yolu ile orta-boyun kesi yapıldı. Kateter tanıttı ve LV boşluğuna yerleştirilir. Sol torakotomi yapılmıştır ve sol ana koroner arter (LCA) tane. Reperfüzyon ikna etmek için dikiş 45 dk. basınç-hacim veri her zaman kaydedildi sonra piyasaya sürüldü.
LCA ligasyonu strok hacmi, LV ejeksiyon fraksiyonu (EF) ve kardiyak çıkış LV sistolik fonksiyonu olarak bir % 30 indirim kanıtladığı azalmasına neden oldu. LV contractility için bir parametre olarak en fazla dP/dt de önemli ölçüde azaltılmış ve diyastolik fonksiyonları ağır engelli (en az dP/dt-%40). Reperfüzyon 20 dk boyunca LV fonksiyonu tamamen iyileşmek için yol açmadı.
Gerçek zamanlı basınç-hacim analiz sırasında farelerde akut miyokard enfarktüsü kardiyak fonksiyon izlemek için geçerli bir yordam olarak görev yaptı. İstikrarlı anestezi ve standartlaştırılmış bir cerrahi yaklaşım geçerli sonuçlar sağlamak için çok önemli. Akut miyokard infarktüsünde erken aşaması morbidite ve mortalite için kritik olarak belirlendi yöntemi cardioprotection için yeni stratejiler preklinik değerlendirilmesi için yararlı olabilir.

LV kateterizasyon sonra tersinir LCA ligasyonu 45 dakika reperfüzyon 10 min tarafından takip yapıldı. PV veri hiç (Şekil 1) kaydedildi.
PV kateter doğru yerleşimini karakteristik LV PV grafik (Şekil 2A) elde ederek teyit edildi. LV kateter yerleştirme gösterdi tipik ventrikül basınç aralığı en az 0 - 20 mmHg ise yanlış yerleştirme PV-katater aort iç...

Watch this Scientific Journal Video about Real-time Pressure-volume Analysis of Acute Myocardial Infarction in Mice at JoVE.com

Real-time Pressure-volume Analysis of Acute Myocardial Infarction in Mice

Akut miyokard infarktüsünde farelerde sol ventrikül (LV) fonksiyonları akut ama eksik olarak karakterize değişimler neden olmaktadır. LV kateterizasyon koroner arter tıkanıklığı geçiren farelerde LV fonksiyonu gerçek zamanlı bir şekilde değerlendirilmesi için yeni bir yöntem olarak hizmet vermektedir.

Akut miyokard infarktüsünde farelerde gerçek zamanlı basınç-hacim Analizi

Acute myocardial infarction can lead to acute heart failure and cardiogenic shock. The evaluation of hemodynamics is critical for the evaluation of any ...

real-time-pressure-volume-analysis-acute-myocardial-infarction

Research

JoVE Journal

Medicine

9.0K Görüntüleme.  University Hospital Essen. Akut miyokard infarktüsünde farelerde sol ventrikül (LV) fonksiyonları akut ama eksik olarak karakterize değişimler neden olmaktadır. LV kateterizasyon koroner arter tıkanıklığı geçiren farelerde LV fonksiyonu gerçek zamanlı bir şekilde değerlendirilmesi için yeni bir yöntem olarak hizmet vermektedir.

Video: Real-time Pressure-volume Analysis of Acute Myocardial Infarction in Mice

MRI and PET in Mouse Models of Myocardial Infarction

Myocardial infarction is one of the leading causes of death in the Western world. The similarity of the mouse heart to the human heart has made it an ideal model for testing novel therapeutic strategies.
In vivo magnetic resonance imaging (MRI) gives excellent views of the heart noninvasively with clear anatomical detail, which can be used for accurate functional assessment. Contrast agents can provide basic measures of tissue viability but these are nonspecific. Positron emission tomography (PET) is a complementary technique that is highly specific for molecular imaging, but lacks the anatomical detail of MRI. Used together, these techniques offer a sensitive, specific and quantitative tool for the assessment of the heart in disease and recovery following treatment.
In this paper we explain how these methods are carried out in mouse models of acute myocardial infarction. The procedures described here were designed for the assessment of putative protective drug treatments. We used MRI to measure systolic function and infarct size with late gadolinium enhancement, and PET with fluorodeoxyglucose (FDG) to assess metabolic function in the infarcted region. The paper focuses on practical aspects such as slice planning, accurate gating, drug delivery, segmentation of images, and multimodal coregistration. The methods presented here achieve good repeatability and accuracy maintaining a high throughput.

We describe how to perform MRI and PET imaging of the mouse heart. The protocol is tailored to assess treatment efficacy in models of myocardial infarction and heart failure.

Myocardial infarction is one of the leading causes of death in the Western world. The similarity of the mouse heart to the human heart has made it an ...

Tıp

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms at work during MI and developing effective therapeutic approaches requires methodology to reproducibly simulate the clinical incidence and reflect the pathophysiological changes associated with MI. Here, we describe a surgical method to induce MI in mouse models that can be used for short-term ischemia-reperfusion (I/R) injury as well as permanent ligation. The major advantage of this method is to facilitate location of the left anterior descending artery (LAD) to allow for accurate ligation of this artery to induce ischemia in the left ventricle of the mouse heart. Accurate positioning of the ligature on the LAD increases reproducibility of infarct size and thus produces more reliable results. Greater precision in placement of the ligature will improve the standard surgical approaches to simulate MI in mice, thus reducing the number of experimental animals necessary for statistically relevant studies and improving our understanding of the mechanisms producing cardiac dysfunction following MI. This mouse model of MI is also useful for the preclinical testing of treatments targeting myocardial damage following MI.

We introduce a surgical method to induce experimental ischemia/reperfusion (I/R) injury to simulate myocardial infarction (MI) in mouse models that allows for more clarity in positioning of the ligation on the left anterior descending artery (LAD) to increase the reproducibility of MI experiments in mice.

Sol ön inen arter ligasyonu ile Miyokard İskemi-reperfüzyon Hasarı bir fare modeli

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

In Vivo Quantitative Assessment of Myocardial Structure, Function, Perfusion and Viability Using Cardiac Micro-computed Tomography

The use of Micro-Computed Tomography (MicroCT) for in vivo studies of small animals as models of human disease has risen tremendously due to the fact that MicroCT provides quantitative high-resolution three-dimensional (3D) anatomical data non-destructively and longitudinally. Most importantly, with the development of a novel preclinical iodinated contrast agent called eXIA160, functional and metabolic assessment of the heart became possible. However, prior to the advent of commercial MicroCT scanners equipped with X-ray flat-panel detector technology and easy-to-use cardio-respiratory gating, preclinical studies of cardiovascular disease (CVD) in small animals required a MicroCT technologist with advanced skills, and thus were impractical for widespread implementation. The goal of this work is to provide a practical guide to the use of the high-speed Quantum FX MicroCT system for comprehensive determination of myocardial global and regional function along with assessment of myocardial perfusion, metabolism and viability in healthy mice and in a cardiac ischemia mouse model induced by permanent occlusion of the left anterior descending coronary artery (LAD).

In Vivo Quantitative Assessment of Myocardial Structure, Function, Perfusion and Viability Using Cardiac Micro-computed Tomography

This method outlines the use of Quantum Micro-Computed Tomography (MicroCT) to assess cardiac morphology, function, perfusion, metabolism and viability with iodinated contrast agent in mice with experimentally-induced myocardial ischemia. The technique can be applied for non-destructive high-throughput longitudinal in vivo imaging of various animal models of human heart disease.

Miyokard Yapı, Fonksiyon Vivo Kantitatif Değerlendirilmesi yılında Perfüzyon ve Canlılık Kardiyak Mikro-bilgisayarlı Tomografi ile

The use of Micro-Computed Tomography (MicroCT) for in vivo studies of small animals as models of human disease has risen tremendously due to the fact that ...

Biyomühendislik

Minimal Invasive Surgical Procedure of Inducing Myocardial Infarction in Mice

Myocardial infarction still remains the main cause of death in western countries, despite considerable progress in the stent development area in the last decades. For clarification of the underlying mechanisms and the development of new therapeutic strategies, the availability of valid animal models are mandatory. Since we need new insights into pathomechanisms of cardiovascular diseases under in vivo conditions to combat myocardial infarction, the validity of the animal model is a crucial aspect. However, protection of animals are highly relevant in this context. Therefore, we establish a minimally invasive and simple model of myocardial infarction in mice, which assures a high reproducibility and survival rate of animals. Thus, this models fulfils the requirements of the 3R principle (Replacement, Refinement and Reduction) for animal experiments and assure the scientific information needed for further developing of therapeutical strategies for cardiovascular diseases.

A highly reproducible model for myocardial infarction in mice with minimal invasive manipulations is described. The model can be easily performed, resulting in a high reproducibility and survival rate. Thus, the described model will reduce the number of required animals as requested by the 3R principle (Replacement, Refinement and Reduction).

Farelerde Miyokard İnfarktüsü Oluşturan Minimal İnvaziv Cerrahi Prosedür

Myocardial infarction still remains the main cause of death in western countries, despite considerable progress in the stent development area in the last ...

Permanent Ligation of the Left Anterior Descending Coronary Artery in Mice: A Model of Post-myocardial Infarction Remodelling and Heart Failure

Heart failure is a syndrome in which the heart fails to pump blood at a rate commensurate with cellular oxygen requirements at rest or during stress. It is characterized by fluid retention, shortness of breath, and fatigue, in particular on exertion. Heart failure is a growing public health problem, the leading cause of hospitalization, and a major cause of mortality. Ischemic heart disease is the main cause of heart failure.
Ventricular remodelling refers to changes in structure, size, and shape of the left ventricle. This architectural remodelling of the left ventricle is induced by injury (e.g., myocardial infarction), by pressure overload (e.g., systemic arterial hypertension or aortic stenosis), or by volume overload. Since ventricular remodelling affects wall stress, it has a profound impact on cardiac function and on the development of heart failure. A model of permanent ligation of the left anterior descending coronary artery in mice is used to investigate ventricular remodelling and cardiac function post-myocardial infarction. This model is fundamentally different in terms of objectives and pathophysiological relevance compared to the model of transient ligation of the left anterior descending coronary artery. In this latter model of ischemia/reperfusion injury, the initial extent of the infarct may be modulated by factors that affect myocardial salvage following reperfusion. In contrast, the infarct area at 24 hr after permanent ligation of the left anterior descending coronary artery is fixed. Cardiac function in this model will be affected by 1) the process of infarct expansion, infarct healing, and scar formation; and 2) the concomitant development of left ventricular dilatation, cardiac hypertrophy, and ventricular remodelling.
Besides the model of permanent ligation of the left anterior descending coronary artery, the technique of invasive hemodynamic measurements in mice is presented in detail.

Heart failure is the leading cause of hospitalization and a major cause of mortality. A model of permanent ligation of the left anterior descending coronary artery in mice is applied to investigate ventricular remodelling and cardiac dysfunction post-myocardial infarction. The technique of invasive hemodynamic measurements in mice is presented.

Farelerde Sol Ön İnen Koroner Arter Daimi ligasyonu: Post-miyokard Enfarktüs Remodelling ve Kalp Yetmezliği Bir Model

Heart failure is a syndrome in which the heart fails to pump blood at a rate commensurate with cellular oxygen requirements at rest or during stress. It ...

Primary Outcome Assessment in a Pig Model of Acute Myocardial Infarction

Mortality after acute myocardial infarction remains substantial and is associated with significant morbidity, like heart failure. Novel therapeutics are therefore required to confine cardiac damage, promote survival and reduce the disease burden of heart failure. Large animal experiments are an essential part in the translational process from experimental to clinical therapies. To optimize clinical translation, robust and representative outcome measures are mandatory. The present manuscript aims to address this need by describing the assessment of three clinically relevant outcome modalities in a pig acute myocardial infarction (AMI) model: infarct size in relation to area at risk (IS/AAR) staining, 3-dimensional transesophageal echocardiography (TEE) and admittance-based pressure-volume (PV) loops. Infarct size is the main determinant driving the transition from AMI to heart failure and can be quantified by IS/AAR staining. Echocardiography is a reliable and robust tool in the assessment of global and regional cardiac function in clinical cardiology. Here, a method for three-dimensional transesophageal echocardiography (3D-TEE) in pigs is provided. Extensive insight into cardiac performance can be obtained by admittance-based pressure-volume (PV) loops, including intrinsic parameters of myocardial function that are pre- and afterload independent. Combined with a clinically feasible experimental study protocol, these outcome measures provide researchers with essential information to determine whether novel therapeutic strategies could yield promising targets for future testing in clinical studies.

Reliable and accurate outcome assessment is the key for translation of preclinical therapies into clinical treatment. The current paper describes how to assess three clinically relevant primary outcome parameters of cardiac performance and damage in a pig acute myocardial infarction model.

Akut Miyokard İnfarktüsü bir Domuz Modeli İlköğretim Sonuç Değerlendirmesi

Mortality after acute myocardial infarction remains substantial and is associated with significant morbidity, like heart failure. Novel therapeutics are ...

Murine Myocardial Infarction Model using Permanent Ligation of Left Anterior Descending Coronary Artery

Myocardial infarction (MI) and acute coronary diseases are among the most prominent causes of death in population with western lifestyle. The murine models of MI with permanent ligation of left-anterior descending (LAD) coronary artery closely mimics MI in humans. Murine models benefit from the extensive genetic engineering available nowadays. Here we propose a reproducible murine surgical model of myocardial infarction by permanent LAD coronary ligation. Our technique comprises anesthesia with ketamine/xylazine that can be rapidly reversed by administration of an antagonist, intubation without tracheotomy for mechanical-assisted ventilation, ventilation with application of extrinsic positive end-expiratory pressure (PEEP) to avoid alveolar collapse, a thoracotomy method limiting to the minimum surgical lesions made to skeletal muscles, and lung inflation without thoracentesis. This method is sparsely invasive, reproducible and reduces post-surgery mortality and complications.

Herein we describe a surgical procedure showing how to achieve permanent ligation of the left-anterior descending coronary artery in mice. This model is of high relevance to investigate the pathophysiology of myocardial infarction and the concomitant biological processes.

Sol Anterior İnen Koroner Arterin Kalıcı Ligasyonu ile Murine Miyokard Enfarktüsü Modeli

Myocardial infarction (MI) and acute coronary diseases are among the most prominent causes of death in population with western lifestyle. The murine ...

A Cryoinjury Model to Study Myocardial Infarction in the Mouse

The use of animal models is essential for developing new therapeutic strategies for acute coronary syndrome and its complications. In this article, we demonstrate a murine cryoinjury infarct model that generates precise infarct sizes with high reproducibility and replicability. In brief, after intubation and sternotomy of the animal, the heart is lifted from the thorax. The probe of a handheld liquid nitrogen delivery system is applied onto the myocardial wall to induce cryoinjury. Impaired ventricular function and electrical conduction can be monitored with echocardiography or optical mapping. Transmural myocardial remodeling of the infarcted area is characterized by collagen deposition and loss of cardiomyocytes. Compared to other models (e.g., LAD-ligation), this model utilizes a handheld liquid nitrogen delivery system to generate more uniform infarct sizes.

This article demonstrates a model to study cardiac remodeling after myocardial cryoinjury in mice.

Farede Miyokard Enfarktüsü Çalışması İçin Kriyoyaralanma Modeli

The use of animal models is essential for developing new therapeutic strategies for acute coronary syndrome and its complications. In this article, we ...

A Modified Simple Method for Induction of Myocardial Infarction in Mice

Myocardial infarction (MI) represents one of the leading causes of death. MI models are widely used for investigating the pathomechanisms of post-MI remodeling and evaluation of novel therapeutics. Different methods (e.g., isoproterenol treatment, cryoinjury, coronary artery ligation, etc.) have been used to induce MI. Compared with isoproterenol treatment and cryoinjury, coronary artery ligation may better reflect the ischemic response and chronic remodeling after MI. However, traditional methods for coronary ligation in mice are technically challenging. The current study describes a simple and efficient process for induction of MI in mice with readily available materials. The mouse chest skin was cut open under stable anesthesia. The heart was immediately externalized through the intercostal space after blunt separation of the pectoralis major and pectoralis minor. The left anterior descending branch (LAD) was ligated with a 6-0 suture 3 mm from its origin. Following LAD ligation, staining with 2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride (TTC) indicated successful induction of MI and temporal changes of post-MI scar size. Meanwhile, survival analysis results showed overt mortality within 7 days after MI, mainly due to cardiac rupture. Moreover, post-MI echocardiographic assessment demonstrated successful induction of contractile dysfunction and ventricular remodeling. Once mastered, an MI model can be established in mice within 2-3 min with readily available materials.

Under adequate anesthesia, the mouse heart was externalized through the intercostal space, and myocardial infarction was successfully induced by ligating the left anterior descending artery (LAD) using materials readily available in most laboratories.

Farelerde Miyokard Enfarktüsünün İndüksiyonu için Değiştirilmiş Basit Bir Yöntem

Myocardial infarction (MI) represents one of the leading causes of death. MI models are widely used for investigating the pathomechanisms of post-MI ...

An Experimental Model of Myocardial Infarction for Studying Cardiac Repair and Remodeling in Knockout Mice

Cardiovascular disease is the most prevalent cause of death in Western countries, with acute myocardial infarction (MI) being the most prevalent form. This paper describes a protocol for studying the role of galectin 3 (Gal-3) in the temporal evolution of cardiac healing and remodeling in an experimental animal model of MI. 
The procedures described include an experimental model of MI with a permanent coronary ligature in male C57BL/6J (control) and Gal-3 knockout (KO) mice, an echocardiography procedure to study cardiac remodeling and systolic function in vivo, a histological evaluation of interstitial myocardial fibrosis with picrosirius red-stained and rhodamine-conjugated lectin-stained sections for studying myocyte hypertrophy by the cross-sectional area (MCSA), and the quantification of infarct size and cardiac remodeling (scar thinning, septum thickness, and expansion index) by planimetry in slices stained with Masson's trichrome and triphenyl tetrazolium chloride. Gal-3 KO mice with MI showed disrupted cardiac remodeling and an increase in the scar thinning ratio and the expansion index. At the onset of MI, myocardial function and cardiac remodeling were also severely affected. At 4 weeks post MI, the natural evolution of fibrosis in infarcted Gal-3 KO mice was also affected. 
In summary, the experimental model of MI is a suitable model for studying the temporal evolution of cardiac repair and remodeling in mice with the genetic deletion of Gal-3 and other animal models. The lack of Gal-3 affects the dynamics of cardiac repair and disrupts the evolution of cardiac remodeling and function after MI.

Here, we describe an experimental model of myocardial infarction, an echocardiography procedure to study cardiac remodeling and function, and procedures for quantifying fibrosis and hypertrophy in picrosirius red-stained and rhodamine-stained sections, as well as the infarct size and expansion index in slices stained with Masson's trichrome.

Cardiovascular disease is the most prevalent cause of death in Western countries, with acute myocardial infarction (MI) being the most prevalent form. ...