Kızılötesi termometre pasif sistemik anafilaksi ve gıda Anti değerlendirme sırasında kullanarak fare vücut sıcaklık ölçümü

Bu metodoloji alerji ve immünoloji alanında önemli sorulara cevap yardımcı olur, özellikle vücut ısısı değişiklikleri ile ilişkili olabilir fenotipler ile ilgili olanlar. Bu tekniğin başlıca avantajları ucuz, non-invaziv olması ve anestezi gerektirmemesidir. Bu tekniğin etkileri, araştırmacıların sıcaklık ölçümü sırasında farelerin stresini ve ağrılarını azaltmasına ve anestezinin etkilerini ortadan kaldırmasına ve/veya davranışsal fenotipleri görselleştirmesine olanak sağlar.

Anestezi sonrası farenin vücut ısısını ölçmek için, solunum hızı veya hareketsizlik ile sedasyon onaylamak ve bir işaret parmağı ve başparmak ve serçe parmağı ile kuyruk ile boyun ense tarafından fare kavramak. Fareyi laboratuvar tezgahı yüzeyine paralel tutarken, iki üst meme ucu arasında karın yüzeyinden iki ila beş milimetre uzaklıkta termometrenin dış düz yüzeyi ile alt karın altına kızılötesi termometre sensörü yerleştirin. Daha sonra fare ve termometre sabit tutmak için dikkat, hayvanın sıcaklığını ölçmek için termometre tetikleme depress.

Anestezi olmadan fare vücut sıcaklığını ölçmek için, kuyruk ortasından fareyi almak ve karın ortaya çıkarmak. Farenin ön pençeleriyle düz kenar yüzeyine tutunmasını ve sıcaklığı ölçmek için tetiği tutmasına izin verin. Alternatif olarak, farenin termometrenin üst düz kenarına tutunmasını ve farenin sıcaklık ölçümü sırasında kızılötesi sensörün hemen üzerinde karınla birlikte termometrenin dış düz yüzeyinde oturmasını sağlar.

Pasif bir sistemik anafilaksi sensitizasyonu için taze hazırlanmış Anti-Dinitrophenol 200 mikrolitre enjekte etmek için 26 gauge iğne ile donatılmış bir mililitre şırınga kullanın, veya DNP, PBS IgE, her alıcı hayvanPeriton içine sadece en alt ve ikinci en alt meme arasında orta hatta lateral. Enjeksiyondan 24 saat sonra, her alıcı hayvanın vücut ısısını gösterildiği gibi ölçün ve 100 mikrolitre taze hazırlanmış DNP insan serum albumini içeren 30 kalibrelik bir iğneyle donatılmış bir mililitrelik şırınga yükleyin. Pasif sistemik anafilaksiyi indüklemek için, gözün medial tarafına gözün arkasına nişan alan sığ bir açıyla iğneyi yerleştirin ve çözeltinin tüm hacmini intravenöz olarak retro-orbital venöz sinüse enjekte edin.

Daha sonra fareyi tam bir tedavi ye kadar izleyerek bir kurtarma kafesinde tek başına yerleştirin ve vücut ısısını ve aktivitesini her 10 dakikada bir 70 dakika ölçün. IgE duyarlı fareler, pbs kontrol fareleri meydan okuma dan sonra aynı süre içinde 1,1 santigrat derece maksimum düşüş sergilerken, 20 dakika üç santigrat derece maksimum sıcaklık düşüşü gösterir. Gözlenen sıcaklık düşüşleri ile fare aktivitesi arasındaki ilişkiyi değerlendirmek için anestezi olmayan hayvanlarda davranışsal gözlemler de yapılabilir.

Bu temsili fare gıda alerjisi mücadelesinde, PBS kontrol grubu 2CA inhibitörü tedavi grubuna göre meydan okumadan 10 dakika sonra önemli bir sıcaklık düşüşü gösterdi. Bu gıda alerjisi sorunundaki aktivite puanlarının ve sıcaklık düşüşlerinin değerlendirilmesi, iki veri kümesi arasında istatistiksel olarak anlamlı bir korelasyon ortaya koymuştur. Bu yordamı takiben, fare vücut ısısı ölçümleri içeren diğer deneyler vücut ısısı değişimi ile ilişkili davranışsal fenotipler ile ilgili ek soruları cevaplamak için yapılabilir.