Questa metodologia aiuta ad affrontare le domande chiave nel campo dell'allergia e dell'immunologia, in particolare quelle che riguardano i fenotipi che possono essere associati ai cambiamenti di temperatura corporea. I principali vantaggi di questa tecnica sono che è economica, non invasiva e non richiede anestesia. Le implicazioni di questa tecnica consentono ai ricercatori di ridurre lo stress e il dolore dei topi durante la misurazione della temperatura eliminando gli effetti dell'anestesia e / o di visualizzare i fenotipi comportamentali.
Per misurare la temperatura corporea del topo dopo l'anestesia, confermare la sedazione per frequenza respiratoria o immobilità e afferrare il mouse dalla nuca con un dito indice e un pollice e la coda con un dito mignolo. Tenendo il mouse parallelo alla superficie del banco da laboratorio, posizionare un sensore termometro a infrarossi sotto l'addome inferiore con la superficie piana esterna del termometro a due o cinque millimetri di distanza dalla superficie dell'addome tra i due capezzoli superiori. Quindi deprimere il grilletto del termometro per misurare la temperatura dell'animale, facendo attenzione a mantenere costante il mouse e il termometro.
Per misurare la temperatura corporea del mouse senza anestetico, raccogliere il mouse verso l'alto al centro della coda ed esporre l'addome. Lasciare che il mouse si tenga su una superficie di spigolo dritto con le sopracciglia e tenere premuto il grilletto per misurare la temperatura. In alternativa, consentire al mouse di aggrapparsi al bordo rettilineo superiore del termometro e far sedere il mouse sulla superficie piana esterna del termometro con il suo addome appena sopra il sensore a infrarossi durante la misurazione della temperatura.
Per una sensibilizzazione passiva dell'anafilassi sistemica utilizzare una siringa millilitro dotata di un ago calibro 26 per iniettare 200 microlitri di anti-dinitrofenolo appena preparato, o DNP, IgE in PBS, nel peritoneo di ogni animale ricevente appena laterale alla linea mediana tra i capezzoli più inferiori e i secondi più inferiori. 24 ore dopo l'iniezione, misurare la temperatura corporea di ciascun animale ricevente come dimostrato e caricare una siringa millilitro dotata di un ago calibro 30 con 100 microlitri di albumina di siero umano DNP appena preparata. Per indurre l'anafilassi sistemica passiva, inserire l'ago sul lato mediale dell'occhio con un angolo poco profondo mirando dietro l'occhio e iniettare l'intero volume di soluzione per via endovenosa nel seno venoso retro-orbitale.
Quindi posizionare il mouse da solo in una gabbia di recupero con monitoraggio fino alla piena reclinanza e misurare la temperatura e l'attività corporea ogni 10 minuti per 70 minuti. I topi sensibilizzati IgE dimostrano un calo massimo della temperatura di tre gradi Celsius a 20 minuti mentre i mouse di controllo PBS mostrano un calo massimo di 1,1 gradi Celsius nello stesso periodo di tempo dopo la sfida. Le osservazioni comportamentali possono anche essere eseguite in animali non anestetizzati per valutare la relazione tra le cadute di temperatura osservate e l'attività del topo.
In questa sfida rappresentativa di allergia alimentare al topo, il gruppo di controllo PBS ha dimostrato un calo significativo della temperatura 10 minuti dopo la sfida rispetto al gruppo trattato con inibitore 2CA. La valutazione dei punteggi di attività e delle cadute di temperatura da questa sfida di allergia alimentare ha rivelato una correlazione statisticamente significativa tra i due set di dati. Seguendo questa procedura, altri esperimenti che coinvolgono misurazioni della temperatura corporea del topo possono essere eseguiti per rispondere a domande aggiuntive riguardanti fenotipi comportamentali associati al cambiamento della temperatura corporea.
