Lipoaspirates gelen stromal vasküler fraksiyonları, veya SVFs elde etmek kollajenaz ile sindirim gerektirir, hangi biyolojik kontaminasyon riskini artırır. Kollajenaz olmadan SVF elde etmek için daha iyi bir yol geliştirilmelidir. Bu teknikler basit bir mekanik işlem le svf'yi doğal hücre dışı matrisinde elde etmemizi sağlar.
Prosedürü gösteren Xihang Chen, laboratuarımızdan yüksek lisans öğrencisi olacak. Yağ örneklerini aldıktan sonra, lipoaspirates bir 50 mililitrelik tüp içine aktarın ve hasat yağ 10 dakika boyunca dengelemek için izin. Daha sonra, yeni bir 50 mililitrelik tüp içine tüpün üst tabakasından yağ çekmek ve santrifüj ile yağ aşağı spin için geniş bir ucu pipet kullanın.
Tüpün üst tabakası Coleman yağ fraksiyonudur. Coleman yağının üst 2/3'ünü 15 mililitrelik yeni bir tüpe aktarın. Bu kısmı düşük yoğunluklu yağ olarak kabul edilir.
Coleman yağının alt üçte birini ikinci bir 15 mililitrelik tüpe aktarın. Bu kısmı yüksek yoğunluklu yağ olarak kabul edilir. Düşük yoğunluklu yağ bir ekstrasellüler matris stromal vasküler fraksiyon jel üretmek için, iki 20 mililitre şırınga düşük yoğunluklu yağ intershift 10 mililitre kadın luer kilit konektörü bir kadın tarafından bağlı kullanın.
Bu adipositleri yok etmek için önemli bir adımdır. İnterşinga kaymasının hızı ve saati nihai ürünün kalitesine katkıda bulunur. Son intershift seanstan sonra, santrifüj ile yağ toplamak ve 15 mililitrelik tüp üst yağ tabakası aktarın.
Sonra yeni bir 15 mililitre konik tüp içine yapışkan orta ekstrasellüler matriks stromal vasküler fraksiyonu jel tabakası aktarın. Yüksek yoğunluklu yağ bir ekstrasellüler matris stromal vasküler fraksiyon jel üretmek için, yüksek yoğunluklu yağ örnek beş mililitre düşük yoğunluklu yağ fraksiyonu iki mililitre ekleyin. Bir flokküle emülsiyon içinde gözlenenkadar gösterildiği gibi karışık yağ intershift.
Santrifüj ile flocculate toplamak ve üst yağ tabakası atın. Sonra yapışkan orta tabaka toplamak ve düşük yoğunluklu ekstrasellüler matriks stromal vasküler fraksiyon u jel örnek ile bu kesir karıştırın. Ekstrasellüler matriks stromal vasküler fraksiyon jel Coleman yağ işledikten sonra, atılan yağ hacmi son hacminin% 80 kadar alır, ve yağ tabakası altında korunan yağ dokusunun sadece% 20 ekstrasellüler matris stromal vasküler fraksiyonu jel olarak kabul edilir.
Ekstrasellüler matriks stromal vasküler fraksiyon jel bir 27 gauge ince iğne geçmesine olanak sağlayan pürüzsüz bir sıvı gibi dokuya sahiptir. Ancak, Coleman yağ sadece bir 18 gauge kanül geçebilir büyük lifleri ile integral bir yağ yapısı oluşur. Transplantasyondan sonraki üçüncü gün, birden fazla hücre içi lipid damlacıkları, geniş iyi vaskülarize bağ dokusu ve infiltrasyonlu inflamatuar hücreler ile küçük boyutlu pre-adipositler çok sayıda görünür.
15. günden itibaren inflamatuar hücrelerin sayısı yavaş yavaş azalmaya başlar ve adipositler olgunlaşmaya başlar. 90. güne gelindiğinde, greftlerde vaskülarize bağ dokusunun çoğu olgun adipositler ile değiştirilmiştir. Ekstrasellüler matriks stromal vasküler fraksiyon jel greftleri de transplantasyondan üç gün sonra birkaç perilipin pozitif adiposit içerir, küçük boyutlu pre-adipositler ile, birden fazla hücre içi lipid damlacıkları gün görünmeye başlar 15.
Günün her alanında 90 ekstrasellüler matriks stromal vasküler fraksiyon jel greft bölümleri çok sayıda perilipin pozitif adipositler ve yeni oluşan kan damarları sergiler. Akış sitometriürün hücresel popülasyonunu belirlemek için yapılabilir. Ve tarama elektron mikroskobu ürünün mikroyapısını görselleştirmek için yapılabilir.
Bu teknik, cerrahlar ve araştırmacılar için yağ dokusundan yerli ekstrasellüler matriks lifleri ile SVF hücrelerinin yüksek konsantrasyonlu bir ürün elde etmek için basit bir yöntem sağlar.
