Bu yöntem biyomühendislik alanında anahtar sorulara cevap yardımcı olabilir, özellikle hemodinamik ve intervasküler cihazlar ile etkileşimleri ile ilgili. Bu tekniğin en büyük avantajı, biyomühendislik laboratuvarlarının çoğunda bulunan ekipmanların kullanılmasıdır ve bu da uzman olmayanlar için giriş engelini azaltmaya yardımcı olabilir. PDMS prepolimer tabanını 10'a bir oranında kürleme maddesine ağırlık olarak karıştırın.
66 gramlık karışım, 50 santimetreküpe kadar hacimli hayaletlerin üretimi için yeterli malzeme sağlar. De-gaz ve kabarcık tuzak en aza indirmek için 60 dakika boyunca bir vakum desiccator karışımı yerleştirin. Kabarcık yırtılması kolaylaştırmak için döngüsel basınç depresifizasyon kullanın.
Döküm yapmak için bir cam slayt üzerine baskılı ABS kalıp montaj arayüzü mühür için döküm macun kullanarak. Kabarcık tuzaken en aza indirmek için çalışırken dikkatle kalıp içine PDMS karışımı dökün. Kalan kabarcıklar elle bir iğne kullanılarak yırtılmış olabilir.
En az 24 saat oda sıcaklığında döküm hayalet cure. Tozkür sırasında hayalet üzerinde yerleşmek değil sağlamak için bir konteyner kullanılabilir. Demolding gerçekleştirmek için, aseton içinde hayalet batırarak ABS çözünür.
70 watt'a kadar güç kullanarak en az 15 dakika sonicate. Solvent kalıntılarını gidermek için hayaleti isopropil alkol ve deiyonize suyla iyice durulayın. Görüntü yakalama yazılımında eklenmiş bir kamera içeren optik mikroskop kullanarak, görüntü alanı içindeki özelliği en üst düzeye çıkaran bir büyütme altında hayaletin içindeki kritik bir özelliğin görüntüsünü yakalayın.
Aynı büyütmede uygun bir kalibrasyon reticle bir görüntü yakalayın. Her iki görüntüyü de araç çubuğuna sürükleyerek ImageJ'e yükleyin. Aktif hale getirmek için kalibrasyon reticle görüntüsünü tıklatın ve sonra satır aracını seçin.
Fareyi kullanarak, bilinen bir mesafe özelliği boyunca bir çizgi çizin ve analiz seçin. ImageJ menüsünden ölçek ayarlayın. Bilinen mesafe etiketli alana özelliğin uzunluğunu ve uzunluk etiketli alana birimini girin.
Bu kalibrasyon faktörünü bütün açık görüntülere uygulamak için genel etiketli kutuyu yürüt Hayali kritik özelliğin görüntüsünü etkin hale getirin ve ilgi çekici bir özellik boyunca bir çizgi çizmek için çizgi aracını kullanın. ImageJ menüsünden analiz seçin, satırın uzunluğunu ölçmek için ölçün.
Fantom sadakatini onaylamak için beklenen değeri, sonuç penceresinde işaretli sütundaki değerle karşılaştırın. Sahte kan çözeltisi yapmak için hacim olarak 60-40 oranında deiyonize su ve gliserol karışımı. Sahte kan çözeltisine %2,5 floresan polistiren boncuk çözeltisi bir mililitre ekleyin, sonra 10 dakika boyunca 400 rpm manyetik bir karıştırma plakası üzerinde karışımı homojenize.
Metin protokolünde açıklandığı gibi in vitro dolaşım sistemi kurulumgerçekleştirin. Daha önce olduğu gibi video görüntüleme için kalibrasyon oranını belirleyin. Mikroskobu kasıtsız dökülmelere karşı korumak için PDMS hayaletini yerleştirmeden önce mikroskop aşamasının üzerine akrilik bir levha yerleştirilebilir.
Cihazı kurmak için PDMS hayaletini floresan mikroskobun sahnesine yerleştirin. Hayaleti dişli pompasına bağlayın ve sahte kan çözeltisini tanıtın. Pompa kalibrasyon eğrisine göre istenilen akış hızıiçin pompa motor kumandasını ayarlayın.
Sabit durum koşullarını sağlamak için pompayı denemeden önce bir ila beş dakika çalıştırın. Bir deneyden sonra boncuk yapışması gözlenirse, 70 watt'a kadar güç kullanarak hayaleti sulu bir deterjan çözeltisinde sonicate edin. Modelin temizliği de hayalet yüzeyine yapışmış boncuksıfır deplasman ile sorgulama pencereleri neden olacak gibi vektör alan sadakat için önemlidir.
Görüntü işleme gerçekleştirmek için, kaydet AVI dosyasını almak için ImageJ penceresine sürükleyin. Gri skalaya dönüştür olarak işaretli kutuyu seçin. ImageJ menüsünden analiz seçin, görüntü piksel yoğunlukları bir histogram oluşturmak için histogram oluşturun.
İşlenmemiş görüntü için ortalama ve standart sapmaya dikkat edin. ImageJ menüsünden görüntüyü seçin, parlaklık kontrast filtresi uygulamak için parlaklığı ve kontrastı ayarlayın. Parlaklık ve kontrast menüsünde, görüntü sınırlarını tanımlamak için ayarla düğmesini tıklatın.
Ortalama değer artı bir standart sapma ve görüntünün maksimum yoğunluğu olacak maksimum değer olarak minimum değeri ayarlayın. ImageJ menüsünden doymuş piksel sayısını azaltmak için işlem, gürültü, despeckle seçin. Ardından, yarıçapı 1,5 olan proses, filtreler, gaussian bulanıklığı seçin.
Bu, 3x3'lü bir mahallede ışıklı piksellerin zaman zaman kaldırılmasından kaynaklanan yapıları önceki despeckling işlemiyle azaltır. Çokgen aracını tıklatın ve sonra ilgi alanı anahat için resme tıklayın. ImageJ menüsünden seçip edin, sinyal inden inmeden sinyal beklenmeyen yerlerdesensör gürültüsünü gidermek için dışarıyı temizleyin ve bu da genel sinyali gürültü oranına düşürebilir.
Metin protokolünde açıkolduğu gibi veri analizine devam edin. Burada gösterilen tamamlanmış hayalet boyutları yanı sıra parçacık görüntü velocimetry veya Ilgi PIV bölge ile vurgulanır. Bu şekil, video çekimi sırasında perforatör arterdeki floresan boncuklardan kaynaklanan görüntü yoğunluğu kontur çizimlerini ve yüzey çizimlerini göstermektedir.
Bu, yoğunluk kapama yapıldıktan sonra sinyalin gürültü oranına doğru iyileşmesini gösterir. Burada gösterilen ham video elde edilen sonuç vektör alanları, yoğunluk kapama sonra ve daha sonra tekrar yoğunluk kapaklı vektör alanı normalleştirilmiş medyan testi kullanılarak doğrulanır sonra. Post processing ve vektör doğrulama teknikleri kullanıldıkça vektör alanı daha düzgün hale gelir ve dairesel bir kanaldaki akış için beklenen profile daha yakın olur.
Bu yordamı denerken, elde edilen sinyalin kendisindeki gürültüyü en aza indirmeye odaklanmak önemlidir. Bu protokol, bu sapmaları azaltmak için yazılım tabanlı teknikleri özetlerken, bunların oluşumunu azaltmak için her adımda dikkatli olunmalıdır. Aseton ile çalışmanın son derece tehlikeli olabileceğini ve bu işlemi gerçekleştirirken her zaman kişisel koruyucu ekipman giymeniz in yanı sıra herhangi bir ateşleme kaynağından uzakta bir duman başlığı altında çalışmanız gerektiğini unutmayın.
