Sirkadiyen zamanlama, tercih ve davranış bireysel farklılıkları ölçerken tutarsız terminoloji ve metodoloji var. Bu protokol, sirkadiyen fenotipleri kategorilere ayırmak ve diurnal performans testi yapmak için altın standart tekniklerini birleştirir. Bu protokolün en büyük avantajı sirkadiyen fenotipleri hem sirkadiyen evreye hem de uyku davranışına bakarak doğru bir şekilde değerlendirebilmektir ve bu da bireylerle ev ortamında yapılabilir.
Katılımcı süreci gösteren Surrey Üniversitesi'nden Cheryl Isherwood olacaktır. Katılım kriterlerini karşılayan katılımcıları ilk toplantıya katılmaya davet edin. Ve deneye katılmak isteyen tüm katılımcılardan yazılı bilgilendirilmiş onay alın.
Katılımcılardan uyku, uyandırma değişkenleri ve iş ve boş günlerdeki ışık maruziyetindeki bireysel farklılıkları değerlendiren Münih ChronoType Anketi'ni doldurmalarını isteyin. Fizyolojik numune toplama için, katılımcı kimlik numarası, sabah veya akşam ve daha sonra bireysel örnekleme numarası ile yedi mililitrelik polipropilen toplama tüpleri ön etiket. Farklı renkli etiketler de örnekler arasında ayırt yardımcı olmak için sabah ve akşam örnekleme tüpleri için kullanılabilir.
Katılımcıların alındıktan sonra numuneleri zaman damgası ile damgalamalarına olanak sağlamak için hem sabah hem de akşam protokolleri için katılımcı kimlik numarası, mevsimsel bilgiler için tarih ve fotoğraf döneminin hesaplanma yeri dahil olmak üzere örnek bir koleksiyon kayıt sayfası hazırlayın. A.m ve p.m ile ilgili bir sorun olmaması nı sağlamak için evrensel zamanın kullanılması önemlidir.
zaman kodları. Tükürük örneklerinin nasıl toplandığını gösterin, katılımcılara yataktan kalkmadan hemen önce sabah numunelerinin alınmasının gerekli olduğunu ve akşam örneklerinin loş ışıkta, tercihen kırmızı ışıkta alınması gerektiğini bildirin. Araştırmacılar mümkünse bunu ölçmelidir.
Katılımcıya, alarma gerek kalmadan, tercih edilen zamanlarda yatabilecekleri ve uyanabilecekleri ücretsiz bir günde numuneleri toplamasını emredin. Her katılımcıya dinlenme ve aktivite kalıplarını ve çalışma süresi boyunca ışık verilerini toplamak için en az iki hafta boyunca takılması için bir bilek aktivitesi monitörü veya aktigraf verin. Her aktigrafı, istirahat ve aktivite analizleri için aktigrafi verilerini toplayacak şekilde ayarlayın ve parametreleri gerekene göre ayarlayın.
Katılımcılara aktigrafları nasıl kullanacaklarını öğretin, baskın olmayan bileklerine takmalarını sağlamak ve ışık verilerinin toplanması için kolların cihazı kaplamasını engelleyin. Aktigrafi ile birlikte, ve uyku kolaylaştırmak için, aktigrafik verilerden elde edilen uyandırma analizi, her katılımcıgünlük olarak tamamlanması için bir uyku günlüğü vermek. Kortizol uyanış yanıtı sabah örnek toplama için, katılımcıların yatakta hala uygun etiketli örnek tüpler içine, ilk saat için her 15 dakikada bir ve değerlendirme sonraki bir ila iki saat için her 30 dakikada bir uyanma üzerine örnekleri toplamak var.
Tüm numuneler toplandığında, katılımcılar numunelerini araştırma ekibi tarafından toplanana kadar eksi 20 derecede dondurucuda saklamalıdırlar. Loş ışık melatonin başlangıcı için, katılımcı loş ışık altında kapalı oturup tükürük örnekleri toplamak gerekir üç ila dört saat önce alışılmış yatmadan önce her 30 dakikada bir kadar alışılmış yatmadan sonra bir ila iki saat sonrasına kadar. Katılımcı ayrıca her numunenin alındığı zamanı da kaydetmelidir.
Mümkün olduğunda, araştırmacılar yoğunluk ve spektral bileşimi izlemek için ışık koşullarını ölçmek gerekir. Akşam örneklemesi için katılımcıların loş ışık koşullarında kapalı mekanlarda oturmanın önemini anlamaları esastır. Katılımcılar tuvaleti kullanabilir veya numuneler arasında kafeinsiz bir içecek tüketebilirler, bir sonraki numune nin toplanmasından önce 15 dakika boyunca tekrar oturttukları sürece.
Katılımcının örnekleme süresi boyunca loş ışıkta, tercihen kırmızı ışıkta kalması için diğer tüm odaların aynı ışık koşullarına sahip olduğundan emin olun. Numuneler arasında gıda tüketiliyorsa, katılımcılar bir sonraki numunenin toplanmasından 15 dakika önce ağızlarını suyla yıkamalıdır. Tüm numuneler toplandıktan sonra, katılımcılar numunelerini araştırma ekibi tarafından toplanana kadar eksi 20 derecede bir dondurucuda saklamalıdırlar.
Diurnal performans testi evde veya laboratuvarda yapılabilir ve belirli saat saatlerinde incelenen zaman noktalarının sayısına göre çalışma hipotezine göre düzenlenmelidir. Tükürük örnekleri ve uyku günlüğü aldıktan sonra, günlük uyku zamanı ayıklayın ve uyku günlükleri uyanma süreleri ayıklayın ve çalışma ile ilgili aktigrafik değişkenler elde etmek için üretici yazılım içine bu verileri girin. Katılımcıların tükürük örneklerinde her zaman noktasında melatonin ve kortizol konsantrasyonu belirlemek için, standart protokollere göre her katılımcının örnekleri ile bir radyo immünoassay gerçekleştirin.
Melatonin konsantrasyonlarının üç temel ilk tükürük koleksiyonunun iki standart sapmasını aştığı zaman noktaları olarak bireysel DMMO'ları hesaplayın. Kortizol tepesini sabah kortizol uyanış tepkisi sırasında kaydedilen en yüksek kortizol konsantrasyonu zamanı olarak hesaplayın. Bir değişken, erken sirkadiyen fenotip kategorisindeyse sıfır, ara sirkadiyen fenotip kategorisinde yse bir, geç sirkadiyen fenotip kategorisinde ise iki değişken olarak sıfır olarak tahsis edilmelidir.
Toplanan beş değişkenden toplam sirkadiyen fenotip skoru hesaplayın. Bu puana göre, alt kategoriler de tabloda belirtildiği gibi belirlenebilir. Erken sirkadiyen fenotipler olarak sınıflandırılan tüm katılımcıların puanı sıfırile bir arasındadır.
Ve tüm geç sirkadiyen fenotip katılımcıların ın puanları 8 ile 10 arasında. Bu temsili deneyin sonuçlarını doğrulamak için, grup ortalamaları her sirkadiyen fenotip değişkeni için karşılaştırıldı. Uyku süresi, verimlilik ve gecikme süresi de dahil olmak üzere diğer uyku değişkenleri, gruplar arasında önemli ölçüde farklılık yoktu.
Serbest günlerde düzeltilmiş orta uyku önemli ölçüde loş ışık melatonin başlangıcı ile ilişkili olduğunu, kortizol uyanış yanıtı pik zaman, uyku başlangıcı, ve uyanma zamanı. Bu veriler, farklı sirkadiyen fenotip gruplarının uyku başlangıçlarında, ofset sürelerinde ve fizyolojik değişkenlerinde açık farklılıklar gösterdiğini göstermiştir. Karolinska Uykululuk Ölçeği ve Psikomotor Uyanıklık Görevi için tüm grup düzeyinde anlamlı diurnal varyasyonlar gözlendi.
Her grup ayrı ayrı analiz edildiğinde, öznel uykuhali önemli diurnal varyasyonlar gösterdi, ECP'ler akşamları yüksek uykululuk rapor, ve SABAH LCPs's yüksek uykululuk. Psychomotor Vigilance performansı için, önemli diurnal varyasyonlar LPP'lerde bulundu, ancak ECP'lerde değil. Protokolün her adımını net bir şekilde açıklamak ve katılımcının çalışma uyumluluğunu en üst düzeye çıkarmak için kurulum görüşmesi sırasında anladığını sağlamak önemlidir.
Katılımcılar sirkadiyen fenotipler olarak kategorize edildikten sonra, performans testi öğesi değiştirilebilir, zamanlamaları değiştirilebilir, zaman puanlarını artırarak büyütülebilir veya çalışmanın amaçlarına bağlı olarak farklı görevler kullanılarak değiştirilebilir. Bu protokol, sirkadiyen fenotipin dahil etme ve dışlama kriterleri için bir tarama aracı olarak doğru ve ayrıntılı bir şekilde değerlendirilmesini gerektiren herhangi bir çalışmada ve aynı zamanda zamana duyarlı araştırmalarda sirkadiyen fenotipin kontrolünde kullanılabilir. Bu yaklaşım, bireysel sirkadiyen fenotipleri belirlemek için altın standart biyolojik faz belirteçleri nesnel ve öznel uyku desenleri ile birleştirmek için ayrıntılı bir yöntem sağlar.
