Fonte: Laboratório de Jeff Salacup - Universidade de Massachusetts Amherst
O produto de uma extração de solvente orgânico, um extrato lipídeca total (TLE), é muitas vezes uma mistura complexa de centenas, se não milhares, de diferentes compostos. O pesquisador muitas vezes só está interessado em um punhado de compostos ou, se estiver interessado em muitos, pode precisar remover constituintes indesejados que estão "no caminho" ou co-eluindo. Por exemplo, as concentrações de compostos individuais em uma amostra são frequentemente determinadas em um cromatógrafo gasoso acoplado a um detector de 500 chama (GC-FID), porque a relação entre a resposta fid (em pA) e a quantidade de composto em uma amostra (por exemplo,ng/μL) é linear e sensível. A porção GC do instrumento separa diferentes compostos em uma amostra baseada em seu ponto de ebulição, estrutura química e afinidade com uma fase sólida que pode mudar de acordo com a aplicação. O resultado é um cromatógrafo (Figure 1), mostrando a separação de diferentes componentes químicos no tempo, bem como sua concentração relativa (calculada como a área sob a curva). No entanto, às vezes mais de um composto elutes fora do GC de cada vez (Figure 1). Neste caso, a purificação da amostra é necessária antes que os compostos possam ser quantificados com confiança.
Figura 1. Um cromatógrafo mostrando a separação de diferentes componentes químicos ao longo do tempo e sua concentração relativa (área sob a curva). Picos de eluição e separação são mostrados.
1. Instalação e Preparação de Materiais
Esta purificação produz um TLE livre de ésteres que podem estar co-eluting com os alkenones. No entanto, a purificação produziu ácidos carboxílicos, que não podem ser injetados em instrumentos comumente usados para analisar amostras para concentrações de alkenona devido à sua baixa volatilidade. Por exemplo, o ponto de ebulição do hexano, um hidrocarboneto de 6 carbonos, é de 68 °C, mas o ponto de ebulição de seu ácido (ácido hexanoico) é de 205 °C. A maioria dos biomarcadores gc tem de 20 a 35 átomos de carbono (o pont...
Como mencionado anteriormente, a saponificação é comumente usada em laboratórios de geoquímica orgânica para remover ésteres de metila ácidos graxos (FAMEs) de alkenones, chamados alkenoatos, que co-elute com alkenonas em cromatógrafos a gás(Figure 1). A saponificação também é usada para "libertar" ácidos graxos "ligados" a sedimentos ou macromoléculas. A degradação e preservação da matéria orgânica e dos biomarcadores em sedimentos envolve a remoção de grupos funcio...
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