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Il transwell migration assay

Overview

La migrazione delle cellule in risposta a segnali chimici è cruciale per lo sviluppo, l'immunità e gli stati patologici come il cancro. Per quantificare la migrazione cellulare, un semplice test è stato sviluppato nel 1961 dal Dr. Stephen Boyden, che ora è noto come il saggio di migrazione transwell o boyden chamber assay. Questo set-up consiste in un inserto che separa i pozzetti di una piastra multiwell in scomparti superiori e inferiori. Le cellule la cui migrazione deve essere studiata vengono seminate nel compartimento superiore e la soluzione chemioattrattante viene posizionata nel compartimento inferiore. Dopo l'incubazione, il conteggio delle cellule nel compartimento inferiore consente la quantificazione della migrazione indotta dai chemioattrattivi.

Questo video esaminerà il set-up sperimentale comunemente usato per gli studi sulla migrazione cellulare. Quindi evidenzieremo alcune considerazioni chiave e delineeremo un protocollo generalizzato per l'esecuzione di un esperimento che coinvolge cellule aderenti. Infine, esamineremo vari adattamenti di questa configurazione attualmente utilizzata per studiare diversi fattori che influenzano la migrazione.

Procedure

Il test di migrazione transwell è una tecnica classica che consente agli scienziati di quantificare il movimento cellulare. La migrazione si riferisce alla capacità di una cella di spostarsi singolarmente o in cluster. I movimenti cellulari sono resi possibili attraverso una precisa ristrutturazione del loro citoscheletro e la migrazione di solito avviene in risposta a stimoli che fungono da segnali.

Oggi discuteremo il test di migrazione transwell, che utilizza una semplice configurazione della camera per valu..

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Overview

0:42

Background on the Transwell Chamber

2:21

Experimental Considerations

3:43

Protocol for Measuring Migration of Adherent Cells

5:13

Applications

7:52

Summary

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