Image Analysis for Detecting Absolute FRET Efficiencies Using Donor Quenching and Sensitized Emission
7:01
Results: Quantification of FRET Images
8:28
Conclusion
Transcript
Dieses Protokoll beschreibt einen Schritt-für-Schritt-experimentellen Prozess und einen mathematischen Algorithmus zur Quantifizierung von FRET unter Verwendung von Donor Quenching und akzeptorsensibilisierter Emission. Die Quantifizierung der FRE
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Der Förster-Resonanz-Energietransfer (FRET) zwischen zwei Fluorophor-Molekülen kann zur Untersuchung von Proteininteraktionen in der lebenden Zelle verwendet werden. Hier wird ein Protokoll zur Verfügung gestellt, wie FRET in lebenden Zellen gemessen werden kann, indem die sensibilisierte Emission des Akzeptors und das Abschrecken des Donormoleküls mittels konfokaler Laser-Scanning-Mikroskopie detektiert werden.