الدائم انسداد الأوعية الدماغية<em&gt; عبر</em&gt; ضمد مزدوجة وعانى من قطع

Summary

نحن تصف طريقة استنساخه للغاية لانسداد دائم من القوارض كبير الأوعية الدموية الدماغية. ويمكن تحقيق هذه التقنية مع الضرر القليل جدا الطرفية، والحد الأدنى من فقدان الدم، وارتفاع معدل البقاء على قيد الحياة على المدى الطويل، وحجم احتشاء متناسقة تتناسب مع السكان السريرية البشرية.

Abstract

السكتة الدماغية هي السبب الرئيسي للوفاة والعجز وفقدان الاجتماعية والاقتصادية في جميع أنحاء العالم. الغالبية من كل السكتات الدماغية تنجم عن انقطاع في تدفق الدم (نقص التروية) ^1. الشريان الدماغي الأوسط (MCA) يسلم الغالبية العظمى من الدم إلى السطح الجانبي للقشرة ^2، هو الموقع الأكثر شيوعا من السكتة الدماغية الإنسان ^3، ونقص التروية داخل أراضيها يمكن أن يؤدي إلى خلل وظيفي واسع أو الموت ^1،4،5. الناجين من السكتة الدماغية وغالبا ما تعاني فقدان أو تعطيل قدرات المحرك، والعجز الحسي، واحتشاء. في محاولة لالتقاط هذه الخصائص الرئيسية من السكتة الدماغية، وبالتالي وضع العلاج الفعال، وضعت قدرا كبيرا من التركيز على النماذج الحيوانية من نقص التروية في MCA.

ونحن هنا نقدم وسيلة من انسدادات في الأوعية الدموية السطحية القشرية بشكل دائم. وسوف نقدم هذه الطريقة باستخدام مثال على انسداد الأوعية ذات الصلة أن النماذج النوع الاكثر شيوعا، والموقع، وoutcom(ه) من السكتة الدماغية الإنسان، دائمة الأوسط انسداد الشريان الدماغي (pMCAO). في هذا النموذج، ونحن جراحيا فضح MCA في الفئران الكبار وتسد في وقت لاحق عن طريق ربطة مزدوجة وعانى من قطع من السفينة. هذا pMCAO يمنع فرع القشرية القريبة من MCA، مما تسبب في نقص التروية في كل من إقليم MCA القشرية، وجزء كبير من القشرة. ويمكن أيضا أن هذا الأسلوب من انسداد استخدامها لتسد أجزاء أكثر القاصي السفن القشرية من أجل تحقيق مزيد من نقص التروية التنسيق تستهدف منطقة أصغر من اللحاء. مساوئ الأولية من pMCAO هي أن الإجراء الجراحي هو الغازية إلى حد ما كما هو مطلوب حج القحف الصغيرة للوصول MCA، على الرغم من هذه النتائج في الحد الأدنى من تلف الأنسجة. المزايا الأساسية لهذا النموذج، ومع ذلك، هي: موقع الانسداد ويعرف جيدا، ودرجة الحد من تدفق الدم غير متسقة، والوظيفية والعصبية يحدث ضعف بسرعة، حجم احتشاء غير متسقة، وارتفاع معدل البقاء على قيد الحياة لفترة طويلة يسمح- تقييم المزمن الطويل.

Introduction

من أجل حمل ظروف الدماغية التي تحاكي بشكل فعال السكتة الدماغية الإنسان، ويعمل على نطاق واسع العديد من النماذج الحيوانية السكتة الدماغية، مع وحدات التخزين من احتشاء الناتجة متفاوتة. في نموذج photothrombotic، يتم تعريض الدماغ من خلال الجمجمة سليمة باستخدام إضاءة ليزر بعد الحقن في الوريد من مادة حساس (مثل روز البنغال)، مما أدى إلى تجلط الدم الضوئية، انسداد الأوعية المشع، ونقص التروية في الأنسجة المحيطة بها ^{6، 7.} Photothrombosis يمكن أن يؤدي إلى، مناطق صغيرة جدا منعزلة من احتشاء وعادة ما تستخدم كوسيلة من النمذجة "مصغرة السكتات الدماغية"، أو "مايكرو السكتات الدماغية".

هذه التقنية اعتمدت أكثر على نطاق واسع لإحداث السكتة الدماغية، لا سيما في الشريان الدماغي الأوسط (MCA)، هو نموذج حيدة داخل اللمعة ^8، الذي يتم إدخال خيوط جراحية في الشريان السباتي الخارجي وتقدمت حتى occludes غيض قاعدة MCA. A PRIالتحدي ماري من داخل اللمعة انسداد خيوط هو ارتفاع معدل الوفيات (70٪ عندما يتم المغطي MCA لمدة 3 ساعة، وهذه نقطة الزمنية ذات الصلة للبحوث السكتة الدماغية) ^9. وشملت القضايا الأخرى مع أسلوب ممكن نزف تحت العنكبوتية، انسداد غير مكتملة، وحجم احتشاء متغير ^10،11. نتائج هذا النموذج في درجة واسعة من احتشاء في كل من القشرة وsubcortically ^12، ونماذج السكتة الدماغية البشرية الهائلة.

على الرغم من أن النماذج السكتة الدماغية على حد سواء الصغيرة والضخمة هي مهمة، والسكتات الدماغية الإنسان وعادة ما تكون في مكان ما بين. في دراسات سريرية واسعة النطاق، ويتراوح احتشاء السكتة الدماغية في حجم 28-80 سم ^3، وهو ما يترجم إلى 4،5 حتي 14٪ من نصف الكرة التماثل ishemic ^9. في المقارنة، ونحن الفئران pMCAO احتشاء يتراوح حجمها من حوالي 9-35 مم ^3، والذي يشكل 3-12٪ من نصف الكرة التماثل ishemic. لدينا نموذج pMCAO، بالتالي، يشبه حجم احتشاء السكتة الدماغية البشرية من خلال نسبة الدماغوحدة التخزين.

بالإضافة إلى نمذجة أضرار هيكلية من السكتة الدماغية، نتائج pMCAO في عجز وظيفي والسلوكية مماثلة لحالة الإنسان. في الحد الأدنى، نموذج فعال من نتائج السكتة الدماغية في عجز حركة المقابل للضرر السكتة الدماغية ^13-15، وفقدان أو تعطل المحرك والوظيفة الحسية ^16،17، وفقدان أو اختلال أثار نشاط الخلايا العصبية ^16،18، والتخفيضات في تدفق الدم الدماغي ^{19، 20،} واحتشاء ^21،22. وفقا لذلك، ونماذج pMCAO لدينا انسداد خطير من MCA مما أدى إلى الإعاقة الجسدية، وفقدان وظيفة داخل القشرة الحسية (والقشور المجاورة)، تعطيل نشاط الخلايا العصبية، انخفاض حاد في تدفق الدم MCA، وسمات احتشاء-السمة المميزة للالسكتة الدماغية ^{23 -25،} وبالتالي العامل بوصفه نموذجا فعالا من السكتة الدماغية البشرية.

إجرائيا، pMCAO ينطوي على حج القحف الصغيرة التي نعمل إزالة بعناية الجمجمة والجافية منو× 2 ملم "نافذة الجراحية" 2 على الجزء الأولي (M1) من MCA، فقط قبل التشعب الأساسي للMCA في الفروع القشرية الأمامية والخلفية (أرقام 1A و 1B). نحن تمرير القطع عكس منحنى نصف إبرة خياطة وخيط (6-0 الحرير) من خلال طبقة حنوني السحايا، أدناه MCA وفوق السطح القشري (انظر الجدول من الكواشف محددة والمعدات اللازمة لإمدادات جراحية اللازمة للاضطلاع pMCAO ). نحن ثم ربط ربطة مزدوجة، وتشديد عقدة اثنين حول MCA، والقطع السفينة بين عقدة اثنين. ربطة مزدوجة وعانى من قطع طريق M1 يحدث القاصي فقط إلى المتفرعة العدسي المخططي، مثل أن فقط الفروع القشرية من MCA هي المتضررة وبالتالي احتشاء القشرية فقط (لا ضرر تحت القشرية) ويحدث ^26،27 (الشكل 2). على الرغم من السكتة الدماغية الإنسان غالبا ما ينطوي على احتشاء تحت القشرية، والنمذجة هذه القوارض يتطلب زيادة في الغازية (انسدادات الأوعية المخية قبل branchi القشريةيتطلب الوصول إلى نانوغرام الشرايين عن طريق الشريان السباتي في الرقبة ويستلزم انسداد إضافية) في تقنية وزيادة التباين في حجم احتشاء. النموذج الموصوف هنا لا يمكن إجراء مزيد من قريب عن الوصول إلى الفروع السابقة من MCA غير ممكن عن طريق حج القحف بسيطة. في حين أنه قد يكون من الممكن جراحيا للحث على احتشاء تحت القشرية عبر pMCAO، فإن انسداد يستتبع إجراء الغازية للغاية، وبالتالي فهي ليست مثالية.

ويمكن تأكيد فعالية انسداد طريق الليزر دوبلر، أو الليزر رقطة التصوير ^12،24،25 (الشكل 3)، أو تشريحيا بعد الوفاة (الشكل 2). وتجدر الإشارة إلى أن أبحاث سابقة أظهرت أن التحفيز الحسي يمكن أن تلعب دورا رئيسيا في تطور ونتائج احتشاء؛ منح حماية من التلف عندما تدار في غضون 2 ساعة من pMCAO وتسبب زيادة في الضرر السكتة الدماغية عندما تدار في 3 ساعة آخر pMCAO ^24،25،28. لقد أكدت أنه في 5 ساعة بعد pMCAO، والتحفيز لم يعد له تأثير على النتيجة (بيانات غير منشورة). ولذلك، ينبغي التقليل من التحفيز الحسي من المواضيع لمدة 5 ساعة بعد pMCAO للحصول على حجم احتشاء مع الحد الأدنى من التغير. وفقا لذلك، لدينا مجموعة تدير "ضوابط غير المعالجة" من هذا النوع عن طريق الحفاظ على الفئران تخدير لمدة 5 ساعة بعد pMCAO، في الظلام، مع الحد الأدنى من الحواس، وصراحة لا التحفيز ضئيلة للغاية.

وتجدر الإشارة كذلك إلى أن التباين في بعض الأحيان في هيكل MCA، بما في ذلك المتفرعة المفرطة، والقطاعات الأساسية متعددة، أو غياب التواصل الشرايين يمكن أن يحدث على تردد بين 10 و 30٪ في الذكور البالغين سبراغ داولي الفئران ^29،30. إذا لوحظ شذوذ في MCA، فإنه من المستحسن عدم استخدام هذا الموضوع بالذات وسوف مضيفا الحيوانات مع مثل هذه التشوهات الوعائية زيادة تقلب احتشاء.

بالإضافة إلى ذلك، هناك العديد من الجوانب العملية من سالإجراء اور التي تجعل هذه الطريقة انسداد المفيد للتحقيق السكتة الدماغية. أولا، قد يتم وضع الغرز حول الشريان ولكن ليس شددت من أجل جمع تقييم أساسي، يليه تقييم آخر الدماغية بعد ضمد وعانى من قطع. في هذه الطريقة، وإعداد الجراحية اللازمة لإطباق السيطرة الفعلية ل، ضمن المواضيع. لأنه قد يشكل موضوع ثابتة أو ضمن إطار التجسيمي في جميع أنحاء انسداد، فمن الممكن لإجراء تقييم تجريبي من كل موضوع قبل وأثناء وبعد انسداد دون تحريك موضوع أو إزعاج أي معدات التجريبية في استخدام ^25،28. وعلاوة على ذلك، ويؤدي هذا الإجراء في معدل وفيات منخفض جدا، حتى داخل المواضيع القوارض الذين تتراوح أعمارهم بين 21-24 شهرا من العمر (أي ما يعادل الإنسان المسنين) ^31، وبالتالي يمكن أن تستخدم لتقييم علاجات السكتة الدماغية في الفئران هذا النموذج بشكل وثيق الأكثر شيوعا الفئة العمرية من الذين يعانون من السكتة الدماغية ^25،28. سفينة transectioأيضا يخدم ن العديد من الأغراض العملية. غياب النزيف بعد عانى من قطع يؤكد أن السفينة كانت المغطي تماما في كلا الموقعين ضمد. بالإضافة إلى ذلك، عانى من قطع يضمن انقطاع دائم من تدفق الدم. وأخيرا، عانى من قطع يضمن أن أي تدفق الدم في الكشف عن الأجزاء البعيدة للسفينة المغطي يجب أن تأتي من مصدر بديل.

وأخيرا، على الرغم من أننا تصف على وجه التحديد هذه التقنية لانسداد MCA في هذه المخطوطة والفيديو، ويمكن تطبيق نفس مزدوج ضمد تقنية عانى من قطع لأية سفينة الدماغية التي يمكن الوصول إليها عن طريق حج القحف. المختبر لدينا، على سبيل المثال، تستخدم pMCAO بالتعاون مع العديد من انسداد دائم إضافي من فروع MCA البعيدة من أجل منع المرحلتين الابتدائية، والضمانات تدفق الدم ²⁴ بطريقة مشابهة لتقنيات مصممة للحث على نقص التروية انتقائي داخل القشرة الحسية الجسدية الأولية ^32.

في الختام، رطريقته لانسداد دائم كما ينطبق على مولودية الجزائر نموذجا عن كثب ثلاثة جوانب الأولية من السكتة الدماغية الإنسان: موقع الأكثر شيوعا (MCA)، نوع (نقص التروية)، ودرجة الضرر (احتشاء) المرتبطة الأدب اكلينيكية على البشر من السكتة الدماغية. وعلاوة على ذلك، يمكن تطبيق هذا الأسلوب من إطباق إلى مواقع انسداد واحد أو عدة في جميع أنحاء الدماغ، ويمكن أن تجري في المواضيع العمر مع ارتفاع معدل البقاء على قيد الحياة. ونظرا للطبيعة الديناميكية الدائمة، وموسع نسبيا من هذا الانسداد، وهذا الأسلوب يمثل أداة إضافية للباحثين قبل السريرية تقييم النهج رواية للحماية من وعلاج السكتة الدماغية.

Protocol

1. الشروع في العمل: الأدوات الجراحية المطلوبة

انظر الشكل 4

1. حفر الأسنان (كافو معدات طب الأسنان، الموديل: UMXL-TM)، وحفر 2 بت، والحفر 3 بت
2. إبر الحقن اثنين ~ 30 قياس
3. مسنن ملاقط، المنحنية غيض اختياري (يمكن أن تكون مفيدة ولكن ليس من الضروري)
4. اثنين من ملاقط غيض غرامة
5. قواطع للاسلاك
6. خيوط الجروح
7. مايكرو مقص

2. خلق نافذة الجراحية

1. التخدير: الإجراءات هي في الامتثال للمبادئ التوجيهية المعاهد الوطنية للصحة، وتمت الموافقة من قبل جامعة كاليفورنيا في ايرفين رعاية الحيوان واللجنة الاستخدام. الموضوعات التجريبية هي 295-400 ز ذكر سبراغ داولي الفئران (مختبرات نهر تشارلز، ويلمنجتون، MA، الولايات المتحدة الأمريكية)، وينبغي أن تستخدم الإجراء التخدير التالية:
   1. حقن الفئران الغشاء البريتونى مع البلعة بنتوباربيتال الصوديوم (55 ملغ / كغ من وزن الجسم)، يليه الحقن العضلي من الأتروبين (0.05 مغ / كغ، وزن الجسم) في حدائرة الهجرة والجنسية الساق، وتدار 3.0 سم مكعب من الدكستروز 5٪ في الماء تحت الجلد.
   2. تكملة الصوديوم بنتوباربيتال (27.5 ملغ / كغ، وزن الجسم) الحقن عند الضرورة. إدارة مرهم مضاد حيوي للعين للعيون لحماية القرنيات خلال الإجراءات التالية. إدارة 5٪ سكر العنب (3 مل) والأتروبين (0.05 مغ / كغ، وزن الجسم) كل ست ساعات نقصان الإفرازات التنفسية خلال التخدير. قياس درجة حرارة الجسم عن طريق مسبار المستقيم، والحفاظ على درجة حرارة الجسم عند 37 درجة مئوية بواسطة بطانية الحرارية ذاتية التنظيم.
2. تحديد موقع MCA إما عن طريق:
   1. رقيق (أ) 2 × 2 مم التصوير / تصور نافذة على القشرة الحسية الجسدية باستخدام حجم HP 3 درل حتى الجمجمة هو شفاف تقريبا ثم ترقق إلى الشفافية الكاملة باستخدام حجم HP 2 مثقاب. ويمكن بعد ذلك أن ينظر إلى موقع MCA من خلال هذه النافذة ومسار الداني في استخدامها لتقريب موقع للجزء الأولي. سوف MCA تشغيل عموما قطريا عبر هذانافذة في منقاري إلى الذيلية / بطني إلى اتجاه ظهري (على سبيل المثال، من اليسار إلى أسفل اليمين / إلى الأعلى عند عرض نصف الكرة المخية الأيسر من وجهة جراح وجهة نظر). ثم يمكن إنشاء الإطار الجراحية أعلاه حيث تقدر المراقب الجزء M1 (الأقرب إلى التفرع القشرية) ليكون موجودا على أساس الفروع البعيدة وضوحا من خلال النافذة الأولى. من أجل تقليل كمية من الجمجمة التي يتم إزالتها من أجل الوصول إلى MCA، وينبغي وضع التصوير / نافذة تصور وثيق، ولكن منفصلة من نافذة الجراحية.
      أو
   2. وينبغي وضع إطار جراحية صغيرة حوالي 3 ملم الأمامي و1 ملم الوحشي على الثقبة البيضية أو العصب الفكي، على مقربة من المنصة قوس ^30،33،34. من أجل الوصول بشكل فعال تنبع من MCA (المعروف أيضا باسم الجزء M1)، وينعكس في عضلة الصدغي مؤقتا بعيدا عن سطح الجمجمة. (ملاحظة: في حالة العمليات الجراحية البقاء على المدى الطويل، وقد تم تجربة مختبرنا في ثار من خلال السماح للعضلة الصدغي أن تظل تعلق في مرساة لها، فإن العضلات إعادة يصلب على سطح الجمجمة، مما يسمح للأكل السلوك الصحي وصيانة فعالة من وزن الجسم.
3. اتبع MCA إلى منقاري، الزاوية بطني من إطار التصوير (في حال استخدام هذا كمرجع) من أجل تقدير حيث يكمن فروعه القشرية الأولية.
4. إنشاء منطقة رقيقة الجمجمة جديدة (نشير إلى هذا الأمر باعتباره نافذة الجراحية) منقاري قليلا وبطني إلى إطار التصوير (في حال استخدام هذا كمرجع) حيث الجزء M1 (المتفرعة قبل القشرية) من MCA ينبغي أن يكون. ملاحظة هامة: اترك حوالي 2 مم الفجوة بين إطار التصوير (في حال استخدام هذا كمرجع) ونافذة الجراحية.
5. تحديد موقع تنبع من MCA (المعروف أيضا باسم الجزء M1) فقط قبل المتفرعة من الشريان القشرية كما هو مبين في أرقام 1A و 1B.
6. باستخدام حجم HP-3 درل، رقيقة الجمجمة فوق المقدرة موقع الجزء M1. عندمايصبح جمجمة شفافة إلى حد ما، والتحول إلى حجم أكثر حساسية قليلا HP-2 الحفر ورقيقة الجمجمة حتى أنها شفافة تماما. تأكيد بصريا كما يصبح الجراحية منطقة نافذة رقيقة بما يكفي لمشاهدة الأوعية الدموية، وتقييم الموقع من M1 في هذه المرحلة واستكمال نافذة مثل أن هناك 2-3 مم على جانبي طول الجزء M1 (وهذا يسمح لغرفة الإدراج والخروج من إبرة خياطة على جانبي MCA).

ملاحظة هامة: يجب الكف عن ترقق عندما تكون سماكة من الجمجمة هي مماثلة لتلك التي من غلاف بلاستيكي. السفينة سوف تمزق إذا التدريبات يكسر من خلال الجمجمة والجافية. إذا كانت الجمجمة ليست رقيقة بما يكفي من ناحية أخرى، سوف إزالته لانسداد تكون صعبة ويمكن أن يؤدي إلى الأضرار التي لحقت القشرة أو الشريان.

7. تأخذ 30 المقياس (30 G) إبرة تحت الجلد وثني رأس الإبرة، وذلك باستخدام ملاقط مسننة.
8. استخدام إبرة G 30 إلى ثقب الجمجمة الرعايةتماما في منطقة ليست مباشرة فوق الشريان. استخدام هذا الثقب ثقب للسماح ملاقط لفهم الجمجمة وإزالة بعناية منطقة ضعيفة من النافذة الجراحية.
9. خذ الجديد 30 G الحاجة، ثني طرفها كما في الخطوة 6، وإزالة بعناية الجافية.

ملاحظة: سوف قطع الجافية يؤدي إلى قشر الظهر وسوف MCA تصبح أكثر وضوحا، وذلك نتيجة لانخفاض الضغط.

3. تسد MCA

1. استخدام قواطع للاسلاك لتقليم عكس نصف منحنى القطع إبرة خياطة (الجولة 3/8، 16 ملم إبرة خياطة) وصولا الى حوالي 3-5 ملم.
2. الخيط إبرة خياطة قلص كما هو مبين في الصورة في 4E الشكل. ملاحظة هامة: من المهم أن الإبرة هي الخيوط بحيث طرفي خيوط الجروح هي من طول ما يعادلها. وهذا يتيح للسحب من كل الموضوع ينتهي تحت M1 في نفس الوقت، ويمكن بعد ذلك إبرة أن تقطع الحرة مغادرة اثنين من أطوال الموضوع إلى ربط عقدة اثنين حول MCA.
3. استخدام مسننة ملاقط زلة إبرة خياطة تحت M1. إدراج مع حوالي 0.5-1 ملم مسافة من MCA، والبقاء كما الضحلة ممكن وذلك للحد من الأضرار التي لحقت القشرة ولكن تجنب الكثير من الضغط على MCA كذلك.
4. عندما يحين إبرة خياطة من الجانب الآخر من النوع الذي هو تحت MCA، واستخدام الملقط غيض غرامة (كما هو موضح أدناه) لسحب غيض من إبرة خياطة من الجانب الآخر مع الاستمرار في إطعام أو دفع الطرف الآخر من الخيط إبرة مسننة الحافة مع ملاقط.
5. مرة واحدة يتم تمرير إبرة خياطة تماما تحت MCA، وقد انسحبت، والاستمرار في سحب على إبرة خياطة أو الموضوع حتى طول الخيط يساوي على جانبي MCA. يمكن الضغط على أسفل على الموضوع كما يتغذى من خلال لتقليل الضغط على MCA تكون مفيدة لمنع تمزق كما يمر الخيط تحت الشريان.
6. قطع الخيط على مقربة من إبرة خياطة.
7. استخدام كل من ملاقط نقطة غرامة لاستجلاء اثنين من خيوط الجروح الناتجةو حتى لا يكون هناك نوعان من المواضيع المستقلة موتر تحت MCA التي لم يتم لمس. من الناحية المثالية المواضيع سيكون حوالي 1 مم وبصرف النظر حيث أنها تمر تحت MCA.
8. استخدام كل من ملاقط نقطة غرامة لادراك التعادل وهما عقدة منفصلة (اثنين من الحروف المركبة) مع المواضيع حول MCA محاولة للحفاظ على هذا ~ 1 ملم من مسافة بين عقدة للسماح للغرفة عانى من قطع.

ملاحظة: إذا كان المطلوب عنصر تحكم الشام الداخلية، وإعداد إطباق ترك عقدة انسداد فضفاضة بحيث لا انقباض MCA على الإطلاق، وجمع البيانات قبل تشديد عقدة، وقطع السفينة. تقليم الموضوع إلى منعها على التقاط أي شيء قبل انسداد ولكن ترك الموضوع بما فيه الكفاية للسماح للتشديد عقدة في وقت لاحق. بهذه الطريقة، أي التصوير خط الأساس أو جمع البيانات لا يمكن أن يؤديها مع كل من نفس الغزو الجراحية مثل انسداد وشددت عقدة في نقطة الوقت المناسب مع تأخير كبير.

9. مرة واحدة في عقدة قد تكونسحبت EN ضيق، استخدم مقص الصغرى إلى القطع M1 في عقدة بين اثنين.
10. في حالة طويلة الأجل، دراسات البقاء على قيد الحياة:
    1. خياطة قطعي رفرف فروة الرأس إلى مكانه مرة أخرى مع الموضوع الجراحية المعقمة أو تأمين الأنسجة باستخدام مقاطع الجرح العقيمة.
    2. إدارة المضادات الحيوية محليا إلى منطقة الجرح (مثل مرهم باسيتراسين) وجهازيا عن طريق الحقن وقائية من الأمبيسلين (150 ملغ / كغ IM).
    3. في حين أن الموضوع لا يزال تخدير إدارة مرهم مضاد حيوي العيون للعيون.
    4. إدارة تكميلية الأتروبين (0.05 مغ / كغ IM) لتقليل الإفرازات التنفسية خلال التخدير.
    5. حقن فلونيكسين أنتيمونيات (1.1 ملغ / كلغ) تحت الجلد في ختام عملية جراحية، ومرة ​​أخرى في صباح اليوم التالي (~ بعد 12 ساعة) للسيطرة على الألم.
    6. وضع الحيوان على ودافئة، سطح مائل الجافة بحيث الأنف الحيوانات هو فوق ذيله على الصعود (وهذا يسهل التنفس حتى الحيوان مستيقظا).
    7. مراقبة الحيوانات حتى يصبح مستيقظا ويتحرك بأمان من تلقاء نفسها.
    8. مرة واحدة هذا الحيوان هو العودة في الحظيرة، والنشاط الحيوان، والمظهر، النطق، وتغذية وشرب الكحوليات وينبغي مراقبتها يوميا.

4. قتل رحيم

1. في ختام كل تجربة، ينبغي أن يتم التخلص الفئران مع الصوديوم بنتوباربيتال (2-3 مل، الغشاء البريتونى).

النتائج

ويمكن التأكد من انسداد الناجح لسفينة باستخدام الليزر رقطة التصوير (LSI) بين تقنيات التصوير تدفق الدم الأخرى. يجب أن تدفق الدم في الفروع القشرية الرئيسية للMCA تنخفض إلى ~ 25٪ من خط الأساس أو انسداد أقل التالية تبعا لمستوى الضوضاء في نظام تسجيل وحساسية هذه الت?...

Discussion

وقد تم تطوير هذا البروتوكول من أجل حمل نقص التروية داخل القشرة القوارض، والقيام بذلك مع الحد الأدنى من التأثير المحيطي للمواضيع التجريبية. انسداد مزدوج وطريقة عانى من قطع يسمح لتأكيد البصرية التي تكون السفينة قد تم المغطي بشكل دائم، ويمكن أداؤها دون غزو المفرط أو تل...

Materials

Name of the equipment	Company	Catalogue number	Comments (optional)
Extra Fine Graefe Forceps - 0.5 mm Tips Slight Curve (1)	Fine Science Tools	11151-10
Ceramic Coated Dumont #5 Forceps (2)	Fine Science Tools	11252-50
Extra Fine Bonn Scissors, straight (1)	Fine Science Tools	14084-08
Round 3/8 (16 mm) Suture Needles	Fine Science Tools	12050-02
6-0 Braided Silk Suture	Fine Science Tools	NC9071061 Harvard Apparatus No.:510461
30 gauge needle, ½" length	Fine Science Tools	NC9867376 No.:ZT-5-030-5-L/COL