نموذج Monoiodoacetate الألم في التهاب المفاصل في الماوس

Summary

هشاشة العظام (OA)، أو مرض المفاصل التنكسية، هو شرط المنهكة المرتبطة الألم الذي لا تزال تسيطر عليها جزئيا فقط المسكنات المتاحة. ويجري تطوير نماذج حيوانية لتحسين فهمنا لآليات الألم ذات الصلة الزراعة العضوية. نحن هنا وصف منهجية لنموذج monoiodoacetate من الألم الزراعة العضوية في الماوس.

Abstract

أعراض كبير من المرضى الذين يعانون من هشاشة العظام (OA) هو الألم الذي الناجمة عن التغيرات الطرفية وكذلك المركزية ضمن مسارات الألم. العلاجات الحالية للألم الزراعة العضوية مثل المضادات أو المواد الأفيونية ليست فعالة بما فيه الكفاية ولا تخلو من آثار جانبية ضارة. ويجري تطوير نماذج حيوانية من الزراعة العضوية لتحسين فهمنا لآليات الألم ذات الصلة الزراعة العضوية وتحديد الأهداف الدوائية رواية للعلاج. وتشمل النماذج المتاحة من الزراعة العضوية في القوارض حاليا التدخلات الجراحية والكيميائية في مفصل الركبة واحد. أصبح (MIA) نموذج monoiodoacetate معيارا لنمذجة تعطل المشترك في الزراعة العضوية في كل من الجرذان والفئران. هذا النموذج، الذي هو أسهل لأداء في الفئران، ينطوي على حقن MIA في مفصل الركبة أن يدفع الاستجابات مثل الألم السريعة في أطرافهم المماثل، ومستوى الذي يمكن السيطرة عليها عن طريق الحقن بجرعات مختلفة. حقن داخل المفصل من MIA يعطل خلية غضروفية تحلل عن طريق تثبيط glycerنازعة ألدهيد-3-الفوسفاتيز والنتائج في الموت خلية غضروفية، اتساع الأوعية الدموية، تحت الغضروف نخر العظام وانهيار، وكذلك الالتهابات. التغيرات المورفولوجية للمفصلي الغضروف والعظام تعطيل هي تعكس بعض جوانب علم الأمراض المريض. جنبا إلى جنب مع تلف المفاصل، المشار MIA الحث حقن الحساسية الميكانيكية في مخلب هند والوزن العجز المماثل تحمل قابلة للقياس وقابلة للقياس الكمي. هذه التغيرات السلوكية تشبه من بعض الأعراض التي أبلغ عنها السكان المريض، وبالتالي التحقق من صحة حقن MIA في الركبة نموذجا مفيدا ومناسبا ما قبل السريرية من الألم الزراعة العضوية.

والهدف من هذه المادة هو وصف منهجية الحقن داخل المفصل من وزارة الداخلية والتسجيلات السلوكية للتنمية المرتبطة فرط الحساسية مع العقل لتسليط الضوء على الخطوات اللازمة لإعطاء التسجيلات متسقة وموثوق بها.

Introduction

سريريا، هشاشة العظام (OA)، أو مرض المفاصل التنكسية، هو حالة مؤلمة والموهنة التي تتميز الفقدان التدريجي للغضروف مفصلي، التهاب خفيف من الأنسجة في وحول المفاصل، وأحيانا تشكيل العظمية والخراجات العظام. المرضى الذين يعانون من الزراعة العضوية تقرير استمرار الألم ⁽¹⁾ وعرض زيادة حساسية للضغوط ومؤثرات الضارة في التهاب المفاصل المشتركة ^2-4. في الوقت الحاضر، لا يوجد علاج لOA مع توصف النهج والمسكنات العلاجية المتاحة للتخفيف من الألم الذي يصاحب هذه الحالة، مع قدر من النجاح ^5. ومع ذلك، لا تزال OA الألم ويجري حاليا وضع قضية والحيوان السريرية نماذج من الزراعة العضوية لتحسين فهمنا لآليات الألم ذات الصلة الزراعة العضوية والكشف عن أهداف جديدة للعلاج.

وهناك العديد من النماذج الحيوانية الزراعة العضوية المتاحة مع خصائص مختلفة ^6. الأساليب الجراحية، مثل الأماميالصليبي transection الرباط، يمكن استخدامها. ومع ذلك، فإنها تنطوي على التدخل الجراحي ماهرا ويتم تنفيذها في المقام الأول في الفئران، في حين يستخدم زعزعة الاستقرار في الغضروف المفصلي وسطي (DMM) في الماوس. التطور التلقائي الزراعة العضوية يحدث في تم الإبلاغ عن خنزير غينيا وانحطاط مشترك عفوية في C57 الفئران السوداء 3-16 شهرا من العمر ^7،8. نماذج الزراعة العضوية عفوية لا ينطوي على أي تدخل للحث على الشرط، ولكن لديهم تقلب المتأصل، وعلى هذا النحو، تكبد أعداد أكبر، وتكلف ^9،10. النماذج التي يسببها كيميائيا، من ناحية أخرى، تتطلب إجراءات أقل تغلغلا بكثير من النماذج الجراحية، وعلى هذا النحو، هي أسهل للتنفيذ وتسمح هذه الدراسة من آفات الزراعة العضوية في مراحل مختلفة. وتشمل هذه النماذج حقن واحدة في الركبة وكلاء التهابات، والمناعية، كولاجيناز، غراء، أو monoiodoacetate، والتي يمكن أن تكون سامة إذا كانت هربا من الفضاء المشترك. جميع النماذج الكيميائية من الزراعة العضوية، MIA هو الأكثر استخداما، والسلطة الفلسطينيةrticularly لاختبار فعالية من عاملات دوائية لعلاج الألم، وهذا النموذج يولد مثل الألم النمط الظاهري للتكرار وقوية، والسريع الذي يمكن أن تكون متدرجة عن طريق تغيير MIA الجرعة ^11-15.

حقن داخل المفصل من وزارة الداخلية في القوارض يستنسخ آفات الزراعة العضوية مثل واضطراب وظيفي والتي يمكن تحليلها وكميا. MIA هو المانع من غليسيرألدهيد-3-الفوسفاتيز، وتعطيل تحلل الخلايا وأدى في نهاية المطاف إلى موت الخلايا ^16،17. حقن داخل المفصل من MIA يسبب خلية غضروفية موت الخلايا، مما يؤدي إلى تآكل الغضاريف واللاحقة التعديلات العظم تحت الغضروف مثل ظهور العظام العظمية ^18،19.

كما وصفت فائدة MIA في الفئران قبل ^{20 عاما،} في هذه الورقة ونحن نركز على منهجية الزراعة العضوية التي يسببها MIA في الفئران كما يتم استخدام هذا النموذج على نحو متزايد مع توافر الفئران خروج المغلوب. وصفنا الداخلي للinjecنشوئها كميات صغيرة جدا في الركبة وأساليب لقياس حساسية للمؤثرات الضارة وغير الضارة في الأطراف الخلفية.

سوف انهيار منهجية تساعد على الحد من التقلبات، وعلى هذا النحو، صقل النموذج ويقلل من عدد الحيوانات اللازمة للدراسة.

Protocol

وقد تمت الموافقة على الإجراءات التي تجرى على الحيوانات من قبل اللجنة الأخلاقية في كينجز كوليدج في لندن وهي وفقا للوائح المملكة المتحدة وزارة الداخلية (قانون الحيوانات الإجراءات العلمية 1986).

1. حقن داخل المفصل من Monoiodoacetate في الركبة

1. منزل 8 - فئران عمرها أسابيع 10 في مجموعات من 5 تحت 12 ساعة دورة الضوء / الظلام (أضواء على في 07:00) مع الطعام والمياه الإعلانية libitum دع الفئران التأقلم ل1 قبل أسبوع من بدء التجربة.
2. بطريقة عشوائية والفئران القفص في مجموعات من 5. أعداد الحيوانات كما استخدم رموز بالتعتيم على المجرب للعلاجات. استخدام وزن الجسم كمعلمات لالعشوائية.
3. في يوم من الحقن، وحديثا إعداد حل monoiodoacetate في ملحي معقم (0.9٪ كلوريد الصوديوم) في تركيزات المطلوب. استخدام محلول ملحي معقم للحقن في مجموعة منفصلة من السيطرة على الفئران. جرعة أعلى نوصي من MIA هي 1 ملغ في 10 ميكرولتر.
   تحذير: Monoiodoacetate هو الاصدارذ سامة. ولذلك، فمن المستحسن أن قفازات وقناع يتم ارتداؤها عند التعامل مع مسحوق وإعداد الحل. الحل يجب أن تتم تصفيته العقيمة مع فلتر 0.22 ميكرون.
4. تخدير الفئران باستخدام عربة التخدير عن طريق وضعها أولا في غرفة تسليم 2٪ الأيزوفلورين في O ₂ خليط (معدل التدفق 1.5 لتر / دقيقة) ثم نقل الفئران إلى قسم مخروط الأنف، والتي توفر أيضا 2٪ الأيزوفلورين-O ₂ مزيج ، وعلى هذا النحو، ويحافظ على التخدير أثناء الحقن. وضع الطبيب البيطري مرهم على العينين لتجنب تجفيف للخروج في حين تحت التخدير. ارتداء ثوب الجراحية، والقفازات، وقناع أثناء أداء إجراء الحقن.
5. تأكيد التخدير عن طريق فحص نقص الحيوان استجابة لحافز قليل على الكفوف الخلفيتين.
6. وبمجرد أن الحيوان هو تحت التخدير، وضعه على ظهرها. تقليم ومسح المنطقة المحيطة مفصل الركبة مع الكحول. البوفيدون اليود أو الكلورهيكسيدين يمكن استخدامها كذلك وأو التطهير. فإن الوتر الرضفي (الخط الأبيض رفع الصوت عاليا الرضفة) تصبح مرئية.
7. من أجل تحقيق الاستقرار في موقع الحقن، والحفاظ على الركبة لا يزال، في موقف عازمة، من خلال وضع السبابة تحت مفصل الركبة والإبهام فوق السطح الأمامي لمفصل الكاحل. ليس مطلوبا تفضيل مشترك.
8. العثور على الموقع الدقيق للحقن، تشغيل إبرة 26 G تعلق على حقنة أفقيا على طول الركبة (حتى لا يخترق الجلد مع طرف) حتى يجدها فجوة تحت الرضفة. تطبيق ضغط لطيف للاحتفال المنطقة ثم رفع الإبر والمحاقن عموديا للحقن. ادخال الإبرة في منطقة ملحوظة، من خلال وتر الرضفة، عمودي على الساق. يجب أن يشعر أي مقاومة.
   1. استخدام الإبهام كدليل وحقن سطحي إلى الموقع الدخول. بعد الحقن، تدليك الركبة لضمان التوزيع حتى من الحل. تجاهل الإبرة فورا في حادالصورة بن.
   2. وضع الفئران مرة أخرى إلى قفص المنزل نظيفة على حصيرة ساخنة والسماح لهم بالخروج. حافظ على يقظة دائمة على الحيوانات حتى يستعيد وعيه مناسبة، والتي تقاس بها استعادة الاستلقاء القصية. مرة واحدة يتم استرداد الحيوانات، والعودة إلى القفص.
      ملاحظة: ويقترح لأغراض أفضل الممارسات والتدريب أن يتم استخدام صبغة والفوري تشريح ما بعد الوفاة أجريت لتأكيد التعريب الصحيح للحقن.

2. قياس فرط الحساسية الميكانيكية (آلام جلدية)

ملاحظة: يتم تقييم ثابت عتبات انسحاب الميكانيكية من خلال تطبيق الشعر فون فراي إلى السطح الأخمصي للمخلب هند.

1. جلب الفئران إلى غرفة السلوكية وترك الحيوانات غير المقيد التأقلم في مقصورات الاكريليك (8 سم × 5 سم × 10 سم) فوق شبكة سلكية.
   1. الفئران القطار التعامل والتعود 2 ساعة إلى مقصورات لمدة يومين قبل تطبيق شعر فون فراي من أجلللحد من التوتر والتمشي خلال تطبيق الشعر فون فراي. في أيام الاختبار، روض الحيوانات إلى مقصورات لمدة تصل إلى 60 دقيقة قبل الاختبار. ارتداء العباءات، والقفازات، والأقنعة خلال كل التجارب السلوكية.
2. تطبيق معايرة الشعر فون فراي (ألياف النايلون مرنة لزيادة قطر التي تمارس مستويات القوة يعرف بأنه معايرة من قبل الشركة الصانعة ويعبر عنه غرام (ز)) إلى السطح الأخمصي لمخلب هند حتى ينحني الألياف. استخدام 0.008، 0.02، 0.04، 0.07، 0.16، 0.4، 0.6، و 1.0 غرام ألياف أثناء الاختبار.
   1. عقد كل الشعر في مكان لمدة 3 ثانية أو حتى يتم سحب مخلب، وهذا الأخير تحديد استجابة إيجابية. بدءا من قوة التحفيز من 0.07 غرام، وتطبيق الشعر وفقا لطريقة "من أعلى إلى أسفل" ^21: علامة X كما رد الانسحاب ويا غياب الاستجابة. تطبيق في ترتيب تصاعدي من قوة، حتى 1 غ (قطع القوة)، حتى يتم الكشف عن الاستجابة.
   2. إعادة اختبار مخلب بتكرارخطوة 2.2.1، بدءا من خيوط أن يمارس قوة أقل من تلك التي تنتجها الانسحاب.
   3. ثم، تطبيق خيوط المتبقية بالتتابع، التي تنازلي قوة، حتى لا يحدث أي انسحاب. إعادة تطبيق خيوط تصاعديا حتى لوحظ استجابة. تستمر حتى يتم الحصول على سلسلة من ستة ردود (على سبيل المثال، OXOXOX)، من أجل الحصول على قيمة 'ك "بالرجوع إلى جداول القيم ^21.
   4. التعبير عن القيم انسحاب مخلب إلى 50٪ عتبات انسحاب مخلب في غرام. استخدام صيغة (10 ^{[XR + K δ])} / 10000 حيث XR = قيمة الماضي خيوط فون فراي المستخدمة في تسلسل (في وحدات السجل)، ك = القيمة الجدولية، وδ = يعني الفرق في القوى بين الألياف. حيث تم الكشف عن أي رد، استخدم الاستجابة القصوى من 1 غرام ^21،22.
3. باتباع الإجراء هو موضح أعلاه (2.2.1-2.2.4)، وتقييم عتبات الميكانيكية على حد سواء الكفوف الخلفيتين قبل وزارة الداخلية مباشرة صبن كقيم أساسية. بعد الحقن، وتقييم عتبات الكفوف المماثل والمقابل على فترات منتظمة يوميا لعدة أسابيع بعد MIA للتأكد من تطوير آلام جلدية الميكانيكية.
   ملاحظة: على سبيل المثال، ونحن التقرير عتبات قياس 0، 3، 5، 7، 10، 14، 21، و 28 أيام بعد الحقن وزارة الداخلية. تعتبر الحيوانات allodynic عندما عرض ردا على 0.1 غرام أو أقل. ردود طبيعية تقع ضمن 0.6 - مجموعة 1 غرام.

3. قياس الوزن تحمل العجز

ملاحظة: يتم قياس التغيرات في الوزن مع استخدام اختبار الوزن incapacitance.

1. تدريب كل فأر على السير في غرفة شبكي على الجهاز والجلوس في المربع القابضة. ضع الماوس أمام خانة عقد، ورفع مدخل تصل 45 درجة مئوية، والسماح الماوس ليدخلون وإغلاق مربع. السماح للحيوانات على التحرك بحرية حتى تبنوا موقفا الجلوس. هذا التدريب يأخذ يومين على الاقل ويضمن أن هذا الحيوان لا يزال وليس لeaning على جانبي الغرفة. معايرة أداة قبل استخدامه مع 100 غرام من الوزن الاختيار (أو وفقا لتعليمات المعدات).
   1. تأكد من أن كل مخلب هند يوضع على لوحة تسجيل المناسبة ^11. مدة كل قياس يأخذ 1 ثانية، وفقا لتعليمات الشركة الصانعة.
2. جمع ثلاثة قياسات للوزن يغيب عن كل مخلب هند من لوحة تسجيل لكل دورة تسجيل واستخدام القيمة المتوسطة لحساب الفرق في الوزن الذي تتحمله الكفوف المماثل والمقابل. القيم كما أعرب عن الفرق بين الكفوف المقابل والمماثل في غرام.
3. تقييم الوزن مع التغييرات قبل حقن MIA كقيم أساسية. ثم، وتقييم تكرار على فترات منتظمة على مدى عدة أسابيع للتأكد من تطوير التغييرات البوابة. على سبيل المثال، ونحن التقرير عتبات يقاس على 0، 3، 5، 7، 10، 14، 21، و 28 أيام بعد الحقن وزارة الداخلية.
   ملاحظة: الوزن الطبيعي بقيمة القرط من 50٪ تمثل توزيع الوزن على قدم المساواة في جميع أنحاء hindlimb المماثل والمقابل. واعتبرت الحيوانات عرض الحساسية تحمل الوزن تغيير ما يقرب من 45٪. قياسات عتبات الميكانيكية والوزن تحمل العجز لا يمكن أن يؤديها في نفس الفئران، كما تؤثر لا نقطة نهاية أخرى. لتقييم الدوائية، يجب اختبار كل مجموعة من الحيوانات في أوقات محددة بعد الجرعات بما يتماشى مع التعريف الدوائية من مجمع المستخدمة.

النتائج

لقد ذكرت مؤخرا أن حقن 0،5-1 ملغ MIA في الحث مشتركة الماوس الركبة المشار فرط الحساسية الميكانيكية (آلام جلدية) في مخلب هند المماثل والوزن تحمل العجز لمدة تصل إلى 4 أسابيع، على الرغم من onsets هي ²³ التي تعتمد على الجرعة.

البيانات الواردة في الشكل 1 تشكل مثالا على مدار الساعة من فرط الحساسية الميكانيكي الناجم عن وزارة الداخلية في الكفوف الخلفيتين المماثل التالية مجموعة من جرعات حقن في الركبة. على وجه التحديد، وأقل جرعة من MIA (0.5 ملغ / الماوس) التي يسببها انخفاض 50٪ من عتبات مقارنة حقن محلول ملحي في يوم 10، وانخفض عتبات إلى 70٪ من تلك الضوابط المالحة يوم 28 بعد الحقن. أدت الجرعة المتوسطة من 0.75 ملغ من MIA في انخفاض تدريجي في العتبات التي كانت أقل من 80٪ من عتبات السيطرة المالحة في يوم 10 وظلت منخفضة حتى يوم 28. كان مرتبطا أعلى جرعة من 1 ملغ MIA مع علامةانخفاض ificant في عتبة في يوم 5، وانخفاض إضافي في يوم 10، الذي وقعت حتى يوم 28.

توفر البيانات الواردة في الشكل 2 أمثلة على التغيرات تحمل الوزن التي ترتبط مع حقن MIA في مفاصل الركبة. في هذه المجموعة من التجارب، في حين أن وزارة الداخلية جرعة 0.5 ملغ لم تحدث تغييرات كبيرة في تحمل الوزن طوال فترة 28 يوم للدراسة، أسفرت MIA جرعة 0.75 ملغ في انخفاض كبير في الوزن الذي تتحمله مخلب المماثل من يوم 10 فصاعدا. والجدير بالذكر أن تحمل الوزن التماثل ترتبط مع 0.75 ملغ من MIA قد تعطي نتائج متباينة ومتضاربة بين الدراسات ^23. بدلا من ذلك، جرعة من 1 ملغ MIA يدفع عموما الوزن استنساخه تحمل التماثل والبيانات في الشكل 2 إثبات انخفاض كبير في الوزن يغيب عن مخلب هند المماثل من يوم 3 حتى نهاية فترة المراقبة. كما هو متوقع، ساليوأظهرت معاملة الحيوانات شمال شرق لا تحمل الوزن التغييرات.

الشكل 1. وقد تم تقييم التنمية الميكانيكية آلام جلدية المشاركة MIA حقن. عتبات انسحاب باو من الكفوف الخلفيتين المماثل والمقابل قبل وبعد حقن MIA (0.5، 0.75، و1mg / الماوس)، والمالحة (0.9٪ كلوريد الصوديوم)، ن = 8 - 10 الفئران / مجموعة. * P <0.05، ** P <0.01، *** P <0.001 مقابل المجموعة التي عولجت المالحة. في اتجاهين القياسات المتكررة أنوفا تليها الطلاب نيومان Keuls اللاحق الاختبار. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل 2. تطوير الوزن تحمل العجزحسبت الصورة المشاركة MIA حقن التغيرات في توزيع وزن الجسم بين أطرافه الخلفية كما [(وزن يغيب عن المماثل مخلب / مجموع الوزن يغيب عن الكفوف المماثل والمقابل) * 100] تم تقييمها قبل وبعد حقن MIA ( 0.5، 0.75، و 1 ملغ / الماوس)، والمالحة (0.9٪ كلوريد الصوديوم)، ن = 8-10 الفئران / مجموعة. * P <0.05، ** P <0.01، *** P <0.001 مقابل المجموعة التي عولجت المالحة. في اتجاهين القياسات المتكررة أنوفا تليها الطلاب نيومان Keuls اللاحق الاختبار. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

Discussion

مع هذه المنهجية، نحن تصف الأسلوب المفضل لحفز الزراعة العضوية مثل ألم في الماوس عن طريق الحقن داخل المفصل من وزارة الداخلية في مفصل الركبة وتقييم حساسية للمؤثرات غير المؤذية والضارة في الأطراف الخلفية. ويرتبط حقن MIA مع السلوك ألم مستمر، وهي تغير الوزن هند أطرافهم تحمل والتنمية من فرط الحساسية الميكانيكية المشار (آلام جلدية). هذه القياسات ثابتة يمكن استكمالها تحليل المشي على جهاز المشي أو عن طريق تحليل المنصة في الحيوانات التحرك بحرية. نماذج MIA تستجيب للعلاجات تخفيف الألم التقليدية ^24، مما يشير إلى أنها قد تكون مفيدة لتمييز الطرق العلاجية. في حين حقن MIA ليس من الصعب من الناحية الفنية، وكبسولة مشتركة يمكن التطرق خلال الحقن، مما أدى إلى تسرب MIA خارج الكبسولة، وفشل لاحقا للحث على سمية غضروفية. في الواقع، حقن النظامية من MIA يمكن أن تكون قاتلة في القوارض لالثانية الآثار المحتملة للMIA على أنسجة وخلايا أخرى من غضروفية قد يربك النتائج، إضافة إلى كونه غير مرغوب فيه. على هذا النحو، لا بد من التأكيد على أن عناية كبيرة يجب أن تعطى للحقن MIA، كما هو عنصر حاسم في هذا النموذج، ويحتاج الثقة لأن تعطى الحقنة يحدث في الفضاء المفصلية. هذا البروتوكول يساعد على تحقيق ذلك.

وتهدف هذه البروتوكولات المذكورة هنا لضمان الحيوانات توفر استجابات متسقة مثل الألم طوال فترة الاختبار. أيضا، أنها تسمح تعديل شدة المرض عن طريق تغيير جرعة من MIA تستخدم لحمل علم الأمراض ^15،23. والاستقراء السريع لكلا الدولة المرض وسلوك مثل الألم تسمح تقييم في الوقت المناسب من المركبات تعديل الألم. هذا هو مفيد على القائمة الجراحية وعفوية تطوير نماذج من الزراعة العضوية، التي يمكن أن تأخذ فترة أطول من الوقت لتطوير فرط الحساسية. أيضا، لا سيما بالنسبة للنماذج عفوية، وهذا المرض pathology لا تظهر في جميع الحيوانات (حوالي 20-80٪ ^7)، في حين يرتبط نموذج MIA مع حدوث كبيرا من المستجيبين. وعلاوة على ذلك، ونماذج العفوية ليست مناسبة لقياس التغيرات في تحمل الوزن، وتطور الزراعة العضوية في ركبتيه. وعند النظر في القياسات السلوكية، تحتاج إلى أن تبقى هادئا ومسترخيا خلال التقييمات الحيوانات. ويتحقق ذلك، كما هو مفصل في البروتوكول، من خلال التدريب في وقت مبكر قبل تسجيل القياسات والتعامل المتكرر، والذي يسمح الحيوانات لتصبح مألوفة مع المجرب. وهناك نقطة رئيسية للحد من التوتر هو استخدام نفس مجرب لاختبار السلوك طوال، وتغيير مستمر ستؤدي إلى القضايا المذكورة سابقا. مثل أي نموذج، نموذج MIA الزراعة العضوية يتحمل القيود، مثل سرعة اضطراب المشترك، الذي لا يشبه التطور البطيء للأمراض الزراعة العضوية في المرضى. طريقة واحدة للتغلب على هذه المشكلة يكون لتكمل هذا النموذج مع سونموذج rgical الزراعة العضوية. استخدام نموذج الكيميائية MIA في تطوير مجمع يسمح لاستخدام البروتوكولات الوقائية والعلاجية على تطوير وصيانة الألم مثل الزراعة العضوية. وأخيرا، فإن نموذج MIA تكمل دراسات الصفات phenotypical من الفئران خروج المغلوب، مما يساعد على مزيد من فهم هذا المرض الزراعة العضوية.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Monoiodoacetate	Sigma-Aldrich	I-2512-25G	≥ 98% purity
0.9% Saline	Mini-Plasco basic	365 4840
Isoflurane	Merial	DNI 4090/1
26 G Needle	Fisher Scientific	12947606
50 μl Hamilton Syringe	Sigma-Aldrich	20701
Von Frey Hairs	Linton Instruments	NC 122775-99
Incapacitance tester	Linton Instruments		Delivery on Request
Testing Cage Rack	Ugo Basile	37450
Compact Anesthetic system	Vet-Tech	AN001B
Medical O2	BOC	101-F
Aldasorbers		Vet -Tech	AN006A