الحفاظ على بعوض الزاعجة المصرية "البعوض مصابة" ولبخيه

Summary

هي أن يطلق سراحه البعوض بعوض الزاعجة المصرية المصابين ولبخيه إلى السكان الطبيعية لمنع انتقال سيتناقش. يصف لنا أساليب لخلفي عبد اللطيف-مصرية مع التهابات ولبخيه في المختبر للتجارب والإفراج عن الميدان، مع أخذ الاحتياطات اللازمة للتقليل من التكيف مع المختبر واختيار.

Abstract

ويجري استخدام البعوض بعوض الزاعجة المصرية المصابة تجريبيا مع ولبخيه في برامج السيطرة على انتشار سيتناقش مثل حمى الضنك وداء شيكونغونيا وزكى. ولبخيه-يمكن إطلاق البعوض في الحقل أما تقليل أحجام السكان عن طريق ماتينجس غير متوافقة أو تحويل السكان مع البعوض التي صهر لانتقال الفيروس. لهذه الاستراتيجيات أن تنجح، يجب أن يكون البعوض التي تطلق في الميدان من المختبر تنافسية مع البعوض الأصلي. ومع ذلك، يمكن أن يؤدي الحفاظ على البعوض في المختبر في الاستيلاد والانجراف الجينية ومختبر التكيف التي يمكن أن تقلل من لياقتهم البدنية في الميدان، وقد يتيه نتائج التجارب. لاختبار مدى ملاءمة مختلف الإصابات ولبخيه للنشر في الميدان، من الضروري الحفاظ على البعوض في بيئة مختبرية تحت التحكم عبر أجيال متعددة. يمكننا وصف بروتوكول بسيط للحفاظ على البعوض Ae-مصرية في المختبر، ومناسبة لكلا ولبخيه-البعوض المصاب والبرية من نوع. الأساليب تقليل التكيف المختبر وتنفيذ التهجين إلى زيادة أهمية التجارب في ميدان البعوض. بالإضافة إلى ذلك، يتم الاحتفاظ بالمستعمرات تحت الظروف المثلى لتعظيم لياقتهم للإطلاقات فتح الحقل.

Introduction

البعوض بعوض الزاعجة المصرية المسؤولة عن تحيل بعض سيتناقش الأكثر أهمية في العالم، بما في ذلك حمى الضنك، Zika وشيكونغونيا¹. وأصبحت هذه الفيروسات تهديدا متزايداً للصحة العالمية بتوزيع واسع النطاق عبد اللطيف. الزاعجة المصرية في المناطق المدارية وتواصل توسيع^2،،من³⁴. أنثى الزاعجة المصرية عبد اللطيف. تفضيلي تتغذى على الدم البشري⁵ وهكذا تميل إلى العيش بالقرب من البشر، وبخاصة في المناطق الحضرية حيث السكان أكثر كثافة. من خلال هذا الارتباط الوثيق مع البشر أنها تكيفت أيضا تولد في الموائل الاصطناعية، بما في ذلك إطارات السيارات والأواني ومزاريب وخزانات المياه^6،7. عبد اللطيف-مصرية أيضا سهولة التكيف مع بيئات المختبرات حيث أنها يمكن الحفاظ عليه دون أي متطلبات خاصة بعد يجري جمعها مباشرة من الميدان، وعلى عكس بعض الأنواع الأخرى في جنس بعوض ^{8، 9،10}. سهولة الصيانة شهد لهم درس على نطاق واسع في المختبر في طائفة واسعة من المجالات، وتهدف في نهاية المطاف إلى السيطرة على البعوض الأمراض قد يحيل.

تقليديا، أربوفيرال التحكم تعتمد اعتماداً كبيرا على استخدام المبيدات الحشرية للحد من السكان البعوض. مع ذلك، هناك اهتمام متزايد في النهج حيث البعوض المعدل يتم تربيتها في المختبر وثم أطلق سراحه في السكان الطبيعية. البعوض المفرج عنهم قد معدلة وراثيا^11،12،13، بيولوجيا^14،15، عن طريق تشعيع¹⁶،^17،العلاج الكيميائي¹⁸، أو بالجمع بين تقنيات¹⁹ قمع سكان البعوض أو استبدالها بالبعوض التي المقاوم للحرارة إلى انتقال أربوفيرال²⁰.

ولبخيه هي البكتيريا التي تستخدم حاليا كعامل مكافحة البيولوجية سيتناقش. وأدخلت مؤخرا عدة سلالات ولبخيه في Ae. مصرية تجريبيا باستخدام microinjection الجنينية^21،22،،من²³²⁴. هذه السلالات تقلل من قدرة سيتناقش نشر وتكرار في البعوضة، تتضاءل انتقال المحتملة^23،25،،من^2627،28 . ولبخيه العدوى تنتقل من الأم إلى ذرية، إلا أن بعض سلالات حمل العقم عند الذكور المصابين تتزاوج مع الإناث غير مصاب²². ولبخيه-ولذلك يمكن إطلاق الذكور المصابة بكميات كبيرة لقمع السكان البعوض الطبيعية، أظهرت مؤخرا في^15،الأنواع الأخرى من بعوضة ²⁹. بيد منذ ولبخيه تمنع أيضا انتقال أربوفيرال في Ae. مصرية، يمكن أيضا إصدار البعوض لاستبدال السكان الأصليين بناقلات الأكثر فقراً. عبد اللطيف-مصرية مصابة تجريبيا ولبخيه تصدر الآن في الميدان في العديد من البلدان باستخدام هذا النهج الأخير^14،،من³⁰³¹.

ولبخيه-استناداً إلى النهج للتحكم أربوفيرال تعتمد على فهم سليم للتفاعلات بين ولبخيهوالبعوض والبيئة. ولبخيه تحدث طبيعيا في طائفة واسعة من الحشرات، والسلالات أدخلت البعوض المتنوعة في تلك الآثار³². كما يتم عرض أنواع العدوى ولبخيه جديدة في Ae. مصرية²⁴، من الضروري أن تميز كل سلالة لآثارها على اللياقة البدنية البعوض والاستنساخ والتدخل أربوفيرال ضمن مجموعة من الشروط. ولذلك مطلوب التجريب الدقيق في المختبر لتقييم إمكانات سلالات ولبخيه لتحقيق النجاح في هذا المجال.

يمكن أن تتطلب فتح الحقل إطلاقات عبد اللطيف-مصرية مع التهابات ولبخيه غالباً ما تربى الآلاف إلى عشرات آلاف البعوض كل منطقة الإفراج عن أن يكون كل أسبوع^14،،من³⁰³¹. ويمكن تحسين نجاح الإصدارات الأولية عن طريق الإفراج عن البعوض حجم كبير إلى أقصى حد ممكن على خصوبتها³³ و^34،نجاح التزاوج³⁵. كما ينبغي أن يكون البعوض تتكيف مع الظروف أنهم سوف الخبرة في هذا المجال، تربية المختبر الطويلة الأجل ولكن قد يسبب تغييرات في السلوك، وعلم وظائف الأعضاء التي يمكن أن تؤثر في مجال أداء^{36،37، 38}.

يمكننا وصف بروتوكول بسيط لتربية عبد اللطيف-مصرية في المختبر باستخدام المعدات الأساسية. هذا البروتوكول مناسبة لكل نوع البرية و ولبخيه-إصابة البعوض، هذه الأخيرة التي يمكن أن تتطلب اهتماما خاصا ببعض سلالات ولبخيه آثاراً كبيرة على البعوض تاريخ حياة الصفات^{39، 40}-شروط تربية تجنب الاكتظاظ والتنافس على الغذاء لإنتاج البعوض بحجم متسقة، وهي حاسمة بالنسبة لناقلات اختصاص وتجارب اللياقة البدنية، ويضمن أن البعوض يتمتعون بصحة جيدة للإفراج عن الحقل⁴¹ . ونحن أيضا اتخاذ الاحتياطات اللازمة للتقليل من التكيف مختبر والاستيلاد بتقليل الضغوط انتقائية والتأكد من أن الجيل القادم هو أخذ عينات من تجمع كبير وعشوائي. ومع ذلك، مختبر البيئات تختلف اختلافاً واضحا من الأوضاع الميدانية، والصيانة على المدى الطويل في ظروف مريحة يمكن أن تقلل من اللياقة البدنية للبعوض عند الإفراج عنهم إلى الحقل^37،42،43 . ولذلك نعبر الإناث من خطوط المختبر إلى ميدان جمع الذكور بصورة دورية، الناتج في المستعمرات التي تشبه وراثيا للمقارنات التجريبية والتي يتم تطويعها وفقا ل السكان الحقل الهدف³⁹. الأساليب لا تتطلب أي معدات متخصصة ويمكن زيادتها إلى الخلفي عشرات الآلاف من الأفراد أسبوعيا للإطلاقات الحقل. البروتوكول أيضا أولويات اللياقة بدنية البعوض داخل وعبر الأجيال، واعتبار هام للحشرات المتجهة إلى إنشاء في السكان طبيعية. البروتوكول مناسبة لمعظم المختبرات التي تتطلب الحفاظ على عبد اللطيف-مصرية، خاصة بالنسبة للمقارنات التجريبية الهامة فيها نوعية متسقة للبعوض و relatability إلى الميدان.

Protocol

تغذية الدم للبعوض على البشر وأقر جامعة "ملبورن لجنة الأخلاقيات البشرية" (الموافقة على رقم: 0723847). وأبلغ جميع المتطوعين تقديم موافقة خطية.

1. تربية اليرقات

ملاحظة: تجري البعوض في 26 ± 0.5 درجة مئوية و 50-70% رطوبة نسبية، مع 12:12 ح (الضوء: الظلام) كبيرة لهذا البروتوكول صيانة مستعمرة. هذه الشروط مماثلة لمتوسط الظروف المناخية في كيرنز، أستراليا وضمن النطاق الحراري الأمثل لبقاء عبد اللطيف. مصرية والتنمية^44،،من⁴⁵⁴⁶. ارتفاع درجات الحرارة يمكن أن يؤدي إلى فقدان ولبخيه العدوى من البعوض المستعمرات وينبغي تجنبها⁴⁷. ونحن الحفاظ على الأفراد 500 على الأقل كل السكان للتقليل من الاستيلاد؛ الحفاظ على مستعمرات حجم أصغر يمكن أن عواقب اللياقة البدنية [روس وآخرون غير منشورة]. تحت هذه الظروف والتغذية الكافية بافتراض، هو الوقت جيل متوسط 28 يوما (انظر الجدول 1).

1. غمر البيض على الركازة في الصواني (الشكل 1A) التي تحتوي على 3 لتر ماء (مياه التناضح العكسي أو مياه الحنفية سنة، ولدت بترك ماء الصنبور في علب ل 24 ساعة قبل الاستخدام)، ~ 300 ملغ من الأسماك الغذاء (واحدة سحقت الكمبيوتر اللوحي، انظر الجدول للمواد)، عدد قليل من الحبوب من الخميرة الجافة النشطة للحث على الفقس⁴⁸.
2. يوم واحد بعد الفقس، استخدام ماصة زجاجية لنقل ما يقرب من 500 اليرقات إلى علب تحتوي على 4 لتر الماء (الشكل 1B)، عد استخدام عداد الفرس. إضافة الأغذية السمكية سحقت قرصين لكل علبة. إذا لزم الأمر، استخدام حاويات ذات أحجام مختلفة لتربية اليرقات (الشكل 1A)، ولكن الحفاظ على كثافة اليرقات أسفل 0.5 مليلتر اليرقات لتجنب الازدحام.
3. تحقق في علب يوميا لضمان حصول اليرقات على الغذاء الكافي؛ إضافة حوالي قرصين الغذاء إلى الصواني كل يومين. توفير الغذاء إعلانية libitum ولكن ضمان أن يتسق 0.5 يتوفر مغ/يرقة يوميا خلال هذه الفترة لضمان التنمية المتزامنة، وهيئة المساحة، وخلاف ذلك قد خلطت بين نتائج التجارب (انظر نتائج الممثل).
4. الحرص على تجنب الإتخام اليرقات، لا سيما في حاويات تربية أصغر مع الماء أقل مساحة وحجم. إذا كان الماء تبدو غائمة أو إذا لم يكن هناك وفيات اليرقات كبيرة، استبدله بالمياه العذبة؛ ينبغي أن يكون معدل الوفيات لا يعتد بها إذا كان يتم تغذية اليرقات على النحو الأمثل.

2-الكبار ظهور

ملاحظة: سوف تبدأ اليرقات في بوبات من خمسة أيام بعد الفقس إذا تغذية جيدة وينبغي بوبات الأغلبية بسبعة أيام بعد الفقس. الكبار ستبدأ الخارجة حوالي يومين بعد بوبيشن إذا حافظت على النحو الأمثل في 26 درجة مئوية (انظر نتائج الممثل). التنمية اليرقات تتأثر عادة بالتهابات ولبخيه عندما يتوفر الغذاء الكافي^23،،من³⁹⁴⁹.

1. سبعة أيام بعد الفقس صب محتويات العلبة بالكامل من خلال شبكة غرامة (حجم المسام 0.4 مم). الحفاظ على المياه اليرقات التي تمت تصفيتها لاستخدامها لاحقاً في أوفيكوبس (انظر قسم "الدم تغذية وأوفيبوسيشن"). عكس الشبكة وتراجع ذلك في وعاء من بلاستيك مع 200 مل الماء لنقل الخوادر. تقديم أغذية إضافية إذا بقيت أي اليرقات.
2. إعداد الأقفاص ظهور الكبار (الشكل 1) عن طريق توفير كوبين من محلول السكروز 10% (الشكل 1F) وكوبين من القطن والصوف رطبة لمنع جفاف (الشكل 1E).
3. إذا لا تحتاج الخوادر فرزها حسب الجنس، مكان الحاويات غطاء الخوادر في القفص غسيلك واترك الغطاء قليلاً للسماح للكبار في الظهور في القفص. بدلاً من ذلك، ضع قمع مقلوب فوق الحاوية للتقليل من الغرق. ضمان جميع البالغين قد ظهرت قبل إزالة الحاوية من القفص لمنع تحديد ضد مطوري بطيئة.

3-الخوادر Sexing التهجين

1. إذا الخوادر حاجة إلى فرز حسب الجنس (مثلاً، التهجين)، "الماصة؛" الخوادر من الصواني اليرقات وفصل الجنسين (الشكل 2) في حاويات بلاستيكية (الشكل 1A) مع 200 مل الماء كل 24 ساعة حتى العدد المطلوب من كل جنس تم التوصل إلى ذلك. وضع أغطية على الحاويات وتركها مغلقة.
2. ستظهر الكبار في الحاويات؛ تأكيد الجنس قبل الإفراج في أقفاص (الشكل 2). قم بإزالة أي الكبار مسحه بشكل غير صحيح مع المضخة خلال 24 ساعة ظهور قبل أن تصل إلى مرحلة النضج الجنسي. مرة واحدة وقد تأكدت الجنسين، الإفراج عن الكبار في أقفاص كل 24 ساعة.
3. للحصول على ولبخيه-التهجين المستعمرات المصابة من خلفية وراثية مماثلة لسكان طبيعية، عن طريق إضافة ولبخيه-إصابة الإناث من المستعمرات مختبر لاقفاص الذكور المعافين المستمدة من البيض جمعتها أوفيترابس في حقل³⁹، الحفاظ على الكثافة المقررة للأفراد 500 كل السكان.
   1. كرر التهجين لعلى الأقل ثلاثة أجيال متعاقبة لإنتاج المستعمرات التي هي على الأقل 87.5% مماثل جينياً ل السكان الميدانية³⁹. الحرجة: التأكد من صحة الجنسين في هذه المرحلة (راجع الخطوة 3.1).
4. أنثى الزاعجة المصرية عبد اللطيف. يتم عادة الصهر للتلقيح أخرى في غضون ساعة من التزاوج⁵⁰. عند التهجين المستعمرات، السماح للإناث والذكور الناضجة في أقفاص منفصلة لمدة يومين وثم نضح الإناث في قفص الذكور لتوفير فرصة متساوية لجميع الذكور.

4-الدم تغذية وأوفيبوسيشن

1. الانتظار لمدة ثلاثة أيام على الأقل بعد ذكر الماضي برز قبل الدم تغذية للسماح بوقت كاف لتنضج. الدم آر الإناث خلال أسبوعين ظهور لمنع الوفيات المفرطة، خاصة بالنسبة للبعوض مع التهابات ولبخيه التي تؤثر سلبا على طول العمر^22،،من²⁴⁴⁹. إزالة أكواب السكر في اليوم السابق للتغذية لتحسين معدلات التغذية.
   1. أطلب متطوعا لإدراج تلك الساعد في القفص للسماح للبعوض الإناث لتغذية. معظم الإناث ينبغي تغذية للإحلال في 5 دقائق، ولكن لتقليل التحديد ضد مغذيات بطيئة، اترك الساعد في قفص لمدة 15 دقيقة، أو حتى شكل واضح محتقن جميع الإناث؛ قفاز مطاط لحماية اليد من لدغ اختياري ولكن يوصي.
   2. يومين بعد تغذية الدم، ضع كوبين البلاستيكية التي تحتوي على الماء تربية اليرقات واصطف مع شريط من ورق زجاج (الشكل 1) (أو ورق الترشيح (الشكل 1 ح)) في قفص للإناث وضع البيض. جزئيا تغرق في قطاع الصنفرة في الماء للحفاظ على رطوبة. إزالة مصادر أخرى للمياه للحيلولة دون حصول الإناث تضع بيضها خارج كأس أوفيبوسيتيون.
      ملاحظة: يمكن استخدام مياه الحنفية في الكؤوس، ولكن المياه تربية اليرقات تشجع أوفيبوسيشن^51،52 والإناث سوف تضع بيضها أكثر شكل متزامن.

5-البيض جمع والتكييف

1. سوف تضع الإناث البيض على الصنفرة فقط فوق خط المياه؛ جمع واستبدالها الشرائط من ورق زجاج يوميا حتى تزرع لا المزيد من البيض. لاحظ أن أوفيبوسيشن قد يستمر لمدة تصل إلى أسبوع واحد.
2. شرائط الصنفرة الجافة جزئيا من النشاف لهم بلطف في منشفة ورقية لمدة 30 ثانية، مع الحرص على عدم إزاحة البيض. ثم لف الشرائط في ورقة منشفة ورقية جافة ووضعها في كيس من بلاستيك يمكن إغلاقها بشرط (1I الشكل).
3. تحقق من حالة البيض تحت مجهر تشريح (الشكل 3). إذا كانت شرائط الصنفرة هي رطبة جداً، قد يفقس البيض قبل يجري المغمورة بالمياه (الشكل 3B)، ولكن إذا جفت جداً قسوة، البيض قد ينهار (الشكل 3).
4. يمكن أن تكون دبرت البيض في أي وقت بعد جمع ما بعد ثلاثة أيام؛ يفقس كل البيض من كل مستعمرة، جمعت عبر جميع الأيام، في نفس الحاوية للمياه التأكد من أن الجيل القادم هو أخذ عينات من مجموعة كبيرة وعشوائية من الأفراد.
5. للتخزين على المدى الطويل، يبقى البيض في حاوية محكمة الإغلاق في رطوبة عالية (> 80 ٪) في حوالي 20 درجة مئوية. في ظل هذه الظروف، يمكن تخزين البيض دون ولبخيه لعدة أشهر مع الحفاظ على معدلات عالية هاتش^53،54.
6. كما أن بعض الإصابات ولبخيه يقلل كثيرا من صلاحية البيض مع^49،سن⁵⁵، يفقس البيض من ولبخيه-المصابين خطوط في غضون أسبوع واحد من جمع لمنع الوفيات المفرطة لذات الصلة سلالات. الدم آر الإناث مرة أخرى بعد أسبوع واحد إذا كان هناك حاجة إلى المزيد من البيض.

اليوم	الخطوة
0	يفقس البيض
1	عدد اليرقات في علب
7	نقل اليرقات والخوادر إلى أقفاص مستعمرة
17	الدم آر الإناث البالغات
21	البدء في جمع البيض
25	الانتهاء من جمع البيض
28	يفقس البيض

الجدول 1: نظرة عامة على جدول الصيانة مستعمرة Ae-مصرية في 26 درجة مئوية. توقيت الدم-تغذية الإناث وتفقيس بيض يتسم بالمرونة، ولكن ينبغي تجنب فترات طويلة في هذه المراحل، خاصة بالنسبة للبعوض مصابة ولبخيه، بغية الحد من معدل الوفيات. بعد هذا الجدول الزمني تصغير التحديد ضد البعوض التي سريعة أو بطيئة تطوير أو النضج في جميع مراحل الحياة، شريطة أن يتم تغذية اليرقات على النحو الأمثل.

الشكل 1: المعدات المستخدمة لتربية عبد اللطيف-مصرية في المختبر. (أ) الحاويات البلاستيكية المستخدمة لتفقيس بيض أو تربية اليرقات بكميات من 500، 750 و 5000 مل (من اليسار إلى اليمين). (ب) الصواني المستخدمة لتربية اليرقات في كثافة التي تسيطر عليها، عادة 500 اليرقات في 4 لتر مياه. (ج) 19.7 L والأقفاص (د) ل 3 المستخدمة للسكن الكبار. بكثافة للبالغين 25 أو أقل للتر الواحد ينبغي الإبقاء على توفير مساحة كافية. (ﻫ) 35 مل كأس مع القطن والصوف رطبة المقدمة كمصدر للمياه للبالغين. (و) كأس 35 مل مع محلول السكروز المقدمة عن طريق الحبل أو الفتيل الأسنان كمصدر للسكر. (حمنغ–) أكواب مملوءة بالماء تربية اليرقات واصطف مع الركيزة أوفيبوسيشن ورق زجاج أو ورق الترشيح (G H، على التوالي). (أنا) الرمز البريدي قفل الحقيبة المستخدمة لتخزين شرائط ورق زجاج أو ورق الترشيح. البقع السوداء على الصنفرة بيض البعوض. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

الشكل 2: الجانبي (A) والظهريه (ب) آراء الخوادر والكبار عبد اللطيف-مصرية (ج) مما يدل على مظهري الجنسي. يتم وضع الذكور على اليسار والإناث على اليمين في كل فريق. عندما تتغذى على النحو الأمثل، الخوادر للذكور والإناث وتتميز بالحجم؛ الإناث أكبر من الذكور (A) وأرجلها منتفخة نسبيا مقارنة بالذكور التي قد تملق الجانبين (ب). الذكور البالغين يتم تمييزها بسهولة من الإناث في ظل جميع الظروف تربية، أساسا بهوائيات بلوموسي وبالبس طويلة. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

الشكل 3. يوم الأربع القديمة Ae. مصرية البيض تحت ظروف مختلفة. البيض سليمة (A) على شرائط الصنفرة الحفاظ رطوبة عالية (> 80 ٪) لكن دون أي رطوبة مرئية. ينبغي أن تكون معدلات هاتش أعلاه 90% للبرية من نوع الزاعجة المصرية عبد اللطيف. وإذا استمر بشكل صحيح. (ب) البيض الذي يفقس قبل يجري المغمورة بالمياه (الفقس المبكر) تتميز بسقف فصل البيض ويرقان مرئية. وهذا يشير إلى أن قطاع الصنفرة أبقى رطبة جداً. البيض (ج) التي يتم تجفيفها أيضا قسوة قد تنهار، وهي واضحة للعيان بمظهرهم مقعرة. إذا أصبح الصنفرة قاسية هذا يشير أيضا إلى أن البيض قد تكون جافة جداً. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

النتائج

يوضح الشكل 4 آثار التغذية الأمثل على تنمية يرقات Ae. مصرية . عندما يتم توفير حاويات مع 0.25 مغ أغذية كل يرقة يوميا أو أقل، يزيد الوقت التنمية لكل من الذكور والإناث، وهو تقدم متزامن أقل مما في حاويات مع 0.5 ملغ غذاء. إذا لم يتم توفير الغذاء الكافي طوال مدة الت...

Discussion

يتبع البروتوكول المعروضة هنا لصيانة ولبخيه-ينبغي أن تكفل المصابة Ae. مصرية أن البعوض صحية نوعية متسقة يتم إنتاجها للتجارب وفتح مجال النشرات. خلافا للبروتوكولات الأخرى التي تعطي الأولوية لإنتاج كميات أسلحة من البعوض (انظر المرجع⁵⁷)، الأساليب التي تركز على تحقيق الحد ا...

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Wild type Aedes aegypti			Collected from field locations in Queensland, Australia, see Yeap and others39 for details
w Mel-infected Aedes aegypti			Provided by Monash University. Refer to Walker and others23 for information on the strain
w AlbB-infected Aedes aegypti			Provided by Monash University. Refer to Xi and others21 for information on the strain
w MelPop-infected Aedes aegypti			Provided by Monash University. Refer to McMeniman and others22 for information on the strain
Instant dried yeast	Lowan		Stimulates egg hatching. Found in general grocery stores. Other brands may be used
5 L plastic tub	Quadrant	Q110950	Used for hatching and rearing larvae. Other products may be used
Fish Food (Tetramin Tropical Tablets)	Tetra	16152	Provided to larvae as a source of food. Web address: https://www.amazon.com/Tetra-16152-TetraMin-Tropical-10-93-Ounce/dp/B00025Z6SE
Plastic containers			Used for rearing larvae. Any plastic container above 500 mL should be suitable
Glass pipette			Used for transferring larvae and pupae between containers. Web address: https://www.aliexpress.com/item/10Pcs-Durable-Long-Glass-Experiment-Medical-Pipette-Dropper-Transfer-Pipette-Lab-Supplies-With-Red-Rubber-Cap/32704471109.html?spm=2114.40010308.4.2.py4Kez
Clicker counter	RS Pro	710-5212	Used to assist in the counting of larvae, pupae and eggs. Web address: http://au.rs-online.com/web/p/products/7105212/?grossPrice=Y
Rearing trays	Gratnells		Used for rearing larvae. Web address: http://www.gratnells.com
Nylon mesh			Used to transfer larvae and pupae to containers of fresh water. Other brands may be used. Web address: https://www.spotlightstores.com/fabrics-yarn/specialty-apparel-fabrics/nettings-tulles/nylon-netting/p/BP80046941001-white
Cages	BugDorm	DP1000	Houses adult mosquitoes. Alternative products may be used. Web address: http://bugdorm.megaview.com.tw/bugdorm-1-insect-rearing-cage-30x30x30-cm-pack-of-one-p-29.html
35 mL plastic cup	Huhtamaki	AA272225	Used to provide water or sucrose to adult mosquitoes. Other brands may be used
35 mL plastic cup lid	Huhtamaki	GB030005	Used to provide sucrose to adult mosquitoes. Other brands may be used
Cotton wool	Cutisoft	71841-13	Moist cotton wool is provided as a source of water to adults. Other brands may be used
White Sugar			Provided as a source of sugar to adult mosquitoes. Found in general grocery stores
Rope	M Recht Accessories	C323C/W	Used to provide sucrose solution to adults. Other brands may be used. Web address: https://mrecht.com.au/haberdashery/braids-cords-and-tapes/cords/plaited-cord/cotton/
Plastic cup (large)			Used as an oviposition container. Any plastic cup that holds 100 mL of water should be suitable
Sandpaper	Norton Master Painters	CE015962	Provided as an oviposition substrate. Alternative products may be used, but we use this brand because it is relatively odorless. Lighter colors are used for contrast with eggs. Web address: https://www.bolt.com.au/115mm-36m-master-painters-bulk-roll-p80-medium-p-9396.html
Filter paper	Whatman	1001-150	Used as an alternative oviposition substrate. Other brands may be used
Latex gloves	SemperGuard	Z560979	Prevents mosquito bites on hands when blood feeding. Other brands may be used. Web address: http://www.sempermed.com/en/products/detail/semperguardR_latex_puderfrei_innercoated/