A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Method Article
الحركة المعقدة في بيئات طبيعي تتطلب التنسيق الدقيق لأطرافه تشمل مناطق القشرة الجدارية. وصف بروتوكول التالية استخدام عكسها التعطيل الناجم عن التبريد لإثبات دور المنطقة الجدارية 5 في تجنب عقبة تسترشد الذاكرة في القط سيرا على الأقدام.
على التضاريس المعقدة، وطبيعي، يمكن استخدام المعلومات الحسية عن عقبة بيئية لضبط سرعة الحركات الحركي للإبطال. على سبيل المثال، في اتفاقية مناهضة التعذيب، يمكن أن تعدل المعلومات المرئية عن عقبة وشيكة الخطو للإبطال. يمكن أن يحدث التكيف الحركي أيضا مستقلة عن الرؤية، كما يمكن تعديل المدخلات عن طريق اللمس المفاجئ في الساق بعقبة المتوقعة يخطو كل أربعة أرجل للإبطال. هذا التنسيق الحركي معقدة تنطوي على هياكل سوبراسبينال، مثل القشرة الجدارية. ويصف هذا البروتوكول استخدام التعطيل القشرية عكسها، الناجم عن التبريد لتقييم مساهمات القشرة الجدارية للحركة الموجهة بالذاكرة عقبة في القط. وتتشكل الحلقات التبريد الصغيرة، المعروفة باسم كريولوبس، خصيصا لإلغاء تنشيط مناطق منفصلة من الاهتمام تقييم مساهماتهم إلى سلوك علني. وقد استخدمت هذه الأساليب توضيح دور المنطقة الجدارية 5 في تجنب عقبة تسترشد الذاكرة في القط.
على طبيعي، تفاوت التضاريس، تعديل المعلومات الحسية عن عقبة، التي يمكن الحصول عليها عن طريق الرؤية أو اللمس، سرعة الحركة للإبطال. ويشمل هذا التنسيق الدقيق لحركات التنقل متعددة المناطق القشرية1،2. على سبيل المثال، قد تورط مناطق القشرة الحركية3،4 والقشرة الجدارية5،،من67 خلال المهام الحركية المعقدة مثل تجنب عقبة. الحيوانات كوادروبيدال، الخطوة التحويرات اللازمة لتجنب عقبة يجب أن يمتد إلى اليدين و hindlegs على السواء. إذا تم تأجيل الحركة إلى الأمام بين إزالة عقبة قوله وهيندليج (التي يمكن أن تنشأ كحيوان معالجته بعناية عن طريق فريسة المطاردة بيئة المعقدة، وطبيعي)، يتم استخدام المعلومات حول العقبة التي تحتفظ في الذاكرة لتوجيه هيندليج تخطي عقبة مرة السير الذاتية.
يمكن استخدام تقنيات تجريبية تهدف إلى تنشيط المناطق القشرية منفصلة لدراسة المساهمات القشرية للحركة عقبة الموجهة بالذاكرة. الناجم عن التبريد التعطيل القشرية يوفر طريقة موثوقة، واستنساخه بعكسها، لتقييم مساهمات القشرية ل سلوك علني8. كريولوبس مصنوعة من الفولاذ المقاوم للصدأ الأنابيب تتشكل محددة إلى المنطقة القشرية للفائدة، ضمان التعطيل انتقائية للغاية ومنفصلة من المكاني. مجرد مزروع، الميثانول مبردة يتم ضخه من خلال التجويف كريولوب يبرد منطقة اللحاء مباشرة أسفل الحلقة إلى < 20 درجة مئوية. أدناه هذا درجة الحرارة الحرجة، تحول دون انتقال متشابك في منطقة القشرة مباشرة أسفل الحلقة. يمكن عكس هذا التعطيل ببساطة عن طريق وقف تدفق الميثانول. وقد استخدم هذا الأسلوب لدراسة المساهمات القشرية لمعالجة حسية والسلوكيات9،10،11،،من1213،،من1415 , 16 , 17، فضلا عن التحكم في المحركات ل حركات العين ساككاديك18 وتسترشد الذاكرة عقبة الحركة19.
والغرض من هذا البروتوكول استخدام عكسها ديكتيفيشنز الناجم عن التبريد لتقييم مشاركة المناطق القشرية الجدارية للتنسيق الحركي في القط. على وجه التحديد، تم فحص الحركة عقبة تسترشد الذاكرة مع أو بدون نشاط القشرة الجدارية. وقد استخدمت هذه الأساليب بنجاح تثبت دور المنطقة الجدارية 5 في تجنب عقبة تسترشد الذاكرة في القط المشي19.
وأجريت جميع الإجراءات امتثالا للدليل "مجلس البحوث الوطني" لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية (الطبعة الثامنة؛ 2011) والمجلس الكندي لرعاية الحيوان دليل لرعاية واستخدام الحيوانات التجريبية (1993)، وكانت ووافقت جامعة ويسترن أونتاريو الحيوان استخدام اللجنة الفرعية "مجلس الجامعة" في "رعاية الحيوان".
يمكن تطبيق الإجراء التالي إلى تجارب دراسة المساهمات القشرية للتحكم الحركي في القط سيرا على الأقدام.
1-جهاز
2-تدريب الإجراءات
ملاحظة: للحصول على البيانات الناجحة، فترة التدريب السابقة لاختبار سلوكية يضمن أن كل الحيوانات هو تأقلم بشكل صحيح إلى غرفة الاختبار والأجهزة. التعرض المتكرر لبيئة رواية سيساعد في الحد من السلوكيات المجهدة مذهلة أو غيرها. التأقلم قد تختلف بين الحيوانات، وقد يتطلب 1-2 أشهر تدريب. قد تكون دورات التأقلم الأولية تصل إلى 5 دقائق في طول اعتماداً على التركيز والحافز للحيوان لتناول الطعام. ينبغي أن تهدف الدورات اللاحقة لزيادة مدة الزمن أن الحيوان الدافع للعمل (عادة حوالي 20-25 دقيقة).
3-السلوكية تدريب واختبار البروتوكول
ملاحظة: يتم تقييم الذاكرة عقبة في نماذج اثنين: مهمة ذاكرة بصريا تعتمد على عقبة، وتعتمد على اللمس عقبة مهمة ذاكرة. وينبغي استخدام كلا النماذج خلال التدريب الأولى والتجارب اللاحقة.
4-الفيديو تحليلات
ملاحظة: تشمل التحليلات خلال التدريب الأولى والتجارب اللاحقة بعد التبريد غرس حلقة لتقييم الذاكرة عقبة، التحديد الكمي لذروة الارتفاع خطوة وخطوة إزالة المسافة الأفقية بين إصبع القدم وعقبة في ذروة كل خطوة نماذج visual واللمس على حد سواء (الشكل 2).
5-تبريد غرس حلقة (كريولوب)
6-القشرية بروتوكول التبريد
7-التحقق من مدى التبريد
هذا البروتوكول قد استخدمت بنجاح لدراسة المساهمات القشرة الجدارية للذاكرة عقبة في القط المشي19. في هذه الدراسة، تم كريولوبس مزروع على الصعيد الثنائي عبر المناطق الجدارية 5 و 7 في الثلاثة الكبار (> 6 أشهر من العمر) القطط الإناث (الشكل 5A). وجرى تقيي?...
يستخدم نموذج وصف المستحثة بتبريد ديكتيفيشنز من المناطق القشرية منفصلة باستخدام كريولوب بغية دراسة الحركة الموجهة بالذاكرة عقبة في القط. نماذج الذاكرة عقبة اللمسية والبصرية بسيطة إلى حد كبير للحيوانات لتنفيذ كما أنها تستغل طبيعي السلوكيات الحركية التي تحدث مع الحد الأدنى من الجهد عند حي...
الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.
ونعترف مع الامتنان الدعم من المعاهد الكندية للبحوث الصحية، والعلوم الطبيعية والهندسة بحوث المجلس من كندا (مقدمة)، والمؤسسة الكندية للابتكار. وأيد C.W. بالكسندر غراهام بيل كندا الدراسات العليا المنح الدراسية (مقدمة).
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Camera | IDS Imaging Development Systems GmbH | Model: UI-5240CP-C-HQ | |
Intake tubing | Restek | 25306 | Unflanged end is submerged in the methanol reservoir while the flanged end is connected to the pump |
Pump | Fluid Metering, Inc. | Model: QG 150 | |
Nalgene Dewar vacuum flask | Sigma-Aldrich | F9401 | |
Teflon tubing | Ezkem | A051754 | |
Microprobe thermometer | Physitemp | Model: BAT-12 | |
Flanged tube end fittings | Valco Instruments Co. Inc. | CF-1BK | Assorted colours available for colour coding. Packages include the same number of washers as fittings |
Washers | Valco Instruments Co. Inc. | CF-W1 | Extra washers |
Flanging kit | Pro Liquid GmbH | 201553 | |
Tubing connector | Restek | 25323 | |
Tubing cutter | Restek | 25069 | |
Male thermocouple connector | Omega | SMPW-T-M | Used to make cable connection to thermometer |
Thermocouple wire | Omega | PP-T-24S | Used to make cable connection to thermometer |
MATLAB | MathWorks | n/a |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionThis article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved