أرتيرياليزيد إعادة "زرع الكبد الجزئي الفئران" مع في فيفو المنحى السفينة 70% ظهرت

Summary

ويرد هنا، بروتوكول التي تنطوي على الفئران أرتيرياليزيد إعادة زرع الكبد الجزئي. على وجه التحديد، كان الكبد 70% مستأصل في فيفو باستخدام أسلوب تحديث لظهرت السفينة المنحى. الشريان الكبدي الذي أعيد بطريقة نهاية-إلى-جانب. تعديل أسلوب الكفة لتقصير وقت ملامسة الأجوف فينا إينفراهيباتيك.

Abstract

تم وضع تقسيم زرع الكبد وزرع الكبد الكبد المانحين الذين يعيشون في العيادة استخدام أجهزة الكبد بطريقة أكثر كفاءة. أنشئ نموذج فأر زرع كبد جزئي (بلتكس) لفهم أفضل لهذه الآلية وراء هذه الإجراءات الجراحية، دراسات الجراحية ذات الصلة. بسبب تعقيد الطراز بلتكس الفئران، مطلوب بروتوكولا مع أوصاف مفصلة. وأفادت مقال نشر سابقا بروتوكول الذي كان يستخدم السابقين فيفو ظهرت لتحقيق 50% الفئران بلتكس. وعلى النقيض من هذا البروتوكول، قدمنا بلتكس إعادة أرتيرياليزيد مع ظهرت 70% في فيفو . تحديث ظهرت السفينة المنحى أدمج في الفئران بلتكس صقل هذا الإجراء ميكروسورجيكال. بوابة الأوردة والشرايين الكبدية الفص الجانبي الأيسر والفص المتوسط تم تشريح منفردة ومتصلة قبل إزالة لحمه الكبد، مما يقلل من احتمال النزيف في عقب السيجارة بقايا الكبد. وعلاوة على ذلك، بدأ ملامسة نهاية إلى جانب سفينة بين الشريان الكبدي شيوعاً والشريان الكبدي السليم الموسع إعادة أرتيرياليزي الشريان الكبدي. باستخدام هذا الأسلوب ملامسة نهاية إلى جانب السفينة، وتم توسيع قطر ملامسة، وبالتالي تقليل صعوبة خياطة اليد والحفاظ على معدل مرتفع من سالكيه أناستوموتيك. وعلاوة على ذلك، تعديل طفيف ملامسة الكفة من الأجوف فينا إينفراهيباتيك. وقد حافظت قسم من حمة الكبد كفافى حولها الوريد الأجوف مستلم أثناء ملامسة الكفة للحفاظ على الشكل ثلاثي الأبعاد التجويف الأوعية الدموية. تمت إزالة هذا المقطع للحمة الكبد بعد الانتهاء ملامسة. مع هذا التعديل، أسقطت بالخطوة التي تنطوي على وضع خيوط البقاء، وبالتالي تقصير الوقت ملامسة الكفة. باستخدام هذا البروتوكول للفئران بلتكس، تحققت على مستوى منخفض من إنزيم كبد وبنية مفصص كبد سليمة ومعدل بقاء عالية بعد الجراحة.

Introduction

وهناك حاليا تفاوت كبير بين عدد الأجهزة الكبد المتبرع بها وعدد المرضى الذين ينتظرون كبد المتبرع بها. النقص في أجهزة الكبد مشكلة عالمية. لتوسيع قاعدة المانحين، وتقسيم زرع الكبد (LTx) والمانحين الذين يعيشون LTx وضعت لاستخدام كبد جزئي ك الاختلاس¹.

لمواصلة التحقيق الآلية وراء زرع الكبد الجزئي (بلتكس)، كانت نماذج حيوانية ذات الصلة المنشأة^2،3،،من⁴⁵. في الفئران بلتكس، هي الفصوص الكبد مستأصل في فيفو و السابقين فيفو تحاكي ظروف المعيشة المانحة LTx وتقسيم LTx، على التوالي، في الإنسان. قدمت ورقة نشرت في مجلة تجارب تصور بروتوكول مفصلة التي تنطوي على الفئران 50% بلتكس استخدام السابقين فيفو ظهرت⁵. ومع ذلك، فأر بلتكس مع ظهرت في فيفو لا بعد أبلغ في الأدب تصور.

بالإضافة إلى الفرق بين هيباتيكتوميس في فيفو و السابقين فيفو ، أسلوب أداء ظهرت نفسها تلعب أيضا دوراً هاما في تحديد نتائج بلتكس. حاليا، في العديد من دراسات العمليات الجراحية باستخدام الفئران تل النموذجي، والكبد كانت مستأصل الفصوص بعد وضع ربط بسيط في بيديكلي للكبد الفص^{2،3،6،7،،}من⁸⁹. ومع ذلك، وضع ربط بسيط قبل بتر ليست مناسبة لجميع الفصوص الكبد، الفصوص الكبد مختلفة قد أشكال وأحجام مختلفة. ربط بسيط في القاعدة من الفص المتوسط ينطوي على مخاطر عالية تسبب انقباض من الأجوف فينا، مما قد يؤثر في نهاية المطاف على تدفق^10،الفساد الكبد الجزئي¹¹. ولذلك، مطلوب أسلوب ظهرت تحديث استناداً إلى المعرفة بتشريح الكبد في الفئران في ميدان فأر تل.

في البروتوكول، المذكورة في هذه الدراسة، أدمج المنحى السفينة ظهرت 70% حدثت في إجراء الفئران بلتكس. بوابة الأوردة والشرايين الكبدية الفص الجانبي الأيسر (التعلم مدى الحياة) والفص المتوسط (ML) تم تشريح وتقسيم على حدة قبل إزالة لحمه الكبد. ثم، كانت متصلة الأوردة الكبدية للتعلم مدى الحياة ومل بثقب خياطة الجروح. باستخدام ليجيشنز الفردية وخيوط خارقة متعددة بدلاً من وضع ربط بسيط، تمكن السيجارة بقايا مل منتشرة الوريد الأجوف. ومن ثم، تم تفادي انقباض الأجوف فينا إينفراهيباتيك تسببها ربط العمليات جراحية. بالإضافة إلى ذلك، انسداد إمدادات الدم للتعلم مدى الحياة، ومل من ليجاتيونس الفردية قبل إزالة لحمه الكبد انخفض معدل النزيف في عقب السيجارة بقايا الكبد، وبالتالي تقليل تأثير فقدان الدم على تجارب¹¹.

ميكروسورجيونس، يشكل تحديا كبيرا لإعادة بناء الشريان الكبدي السليم (فا) من طعم الكبد بسبب قطر صغير للغاية من هذه السفينة. على الرغم من أن مسألة ما إذا كانت إعادة أرتيرياليزاتيون في LTx ضروري حقاً لا يزال قيد المناقشة^12،،من¹³¹⁴، كان العديد من التقنيات ميكروسورجيكال لإعادة بناء الشريان الكبدي المقترحة¹⁴ . وهنا، نقدم تقنية جديدة لإعادة أرتيرياليزيشن للابتزاز الكبد، الذي أناستوموسيس الشريان الكبدي الشائعة (تشأ) فا الموسع بطريقة نهاية-إلى-من جانب. باستخدام هذا الأسلوب في النهاية إلى جانب، اثنين من الشرايين الكبدية مرتبطة ملامسة قطرها أكبر. قطر ملامسة أكبر وخياطة اليد أسهل من القيام بأكبر يصبح التحسن الذي طرأ السالكيه لملامسة.

Protocol

كافة الإجراءات التي اتبعت المبادئ التوجيهية لجراحة القوارض التي أقرتها الجامعة الطبية ونتشو الحيوان السياسة ولجنة الرعاية الاجتماعية ¹⁵.

1-الحيوانات

1. استخدام ذكور الفئران لويس وزنها 250-350 غ كالجهات المانحة والمتلقية.

2-منطوق البيئة

1. تنفيذ جميع الإجراءات microsurgical تحت مجهر جراحي مع تكبير تتراوح بين 7 X 20 X. تعقيم كل الأدوات الجراحية قبل استخدامها في العملية.
   ملاحظة: غرفة العمليات والتشغيل الجدول نظيفة ولكن ليست عقيمة.

3-الأساسية من المناورات ميكروسورجيكال

1. مجاناً وتشريح وتعبئة السفينة.
   1. أولاً، استخدام الملقط الصغير على التوالي لرفع الأنسجة المحيطة على متن السفينة.
   2. ثانيا، مرارا وتكرارا ولطف فتح وإغلاق النصائح من المنحنى الصغير-الملقط أن هذه النصائح الجميلة يمكن قص مفتوحة وقشر الأنسجة المحيطة على الجدار الأمامي للسفينة.
   3. ثالثا، استخدام الملقط الصغير على التوالي على المشبك ورفع السفينة لفضح الفضاء الخلفي. ثم استخدم النصائح من المنحنى الصغير-الملقط لقشر الأنسجة المحيطة على الجدار الخلفي للسفينة. وأخيراً، ينبغي أن تعرض سفينة أصلع دون أي الأنسجة المحيطة متصلة.
2. تقسيم أو ضعف سد وتقسيم سفينة أو الأنسجة.
   1. أولاً، هما ساحة عقده التعادل في السفينة أو الأنسجة باستخدام الملقط الصغير¹⁶. ثانيا، قطع السفينة أو الأنسجة بين عقده ساحة اثنين باستخدام مقص الصغرى.

4-إعداد الكفة وتركيب دعامات الصفراوية

1. جعل الأصفاد الوريد البابي وإينفراهيباتيك الوريد الأجوف استخدام القسطرة الوريدية عيار 12 وعيار 14، على التوالي، في حين تستخدم دعامات الصفراوية قسطرة الوريدية عيار 22. الأصفاد تتألف من جزء من الجسم والتعامل مع جزء. استخدام رأس محدبة في الجزء الأساسي لتأمين جدار الوعاء على الكفة (الشكل 1).

5-التخدير والتثبيت من الفئران

1. مع 5% isoflurane مختلطة مع الأكسجين 0.5 لتر في الدقيقة للحث على التخدير استنشاق مكان بلطف الفئران لويس في مربع التعريفي. رصد وتيرة التنفس من الفئران لمنع الوفاة غير متوقعة من جراء جرعة زائدة من إيسوفلوراني. خفض تركيز isoflurane إلى % 2 للمحافظة على التخدير عند الفئران لم يستجب لتحفيز الألم.
2. نقل الفئران إلى لوح 30 سم × 30 سم بلوط تغطيها منشفة حصيرة تعقيم جراحي، ووضع الفئران في موقف ضعيف. ربط أطرافه الأربعة من الفئران باستخدام الشريط الآنسي، وفيما بعد إصلاح الشريط مع أربعة ثومبتاكس. تطهير الجلد الكحول 70% واحد باستخدام الوقت وإيودوفورس ثلاث مرات.

6-الجهات المانحة العملية

1. يعرض الحقل من المنطوق
   1. قص شق عرضية صغيرة في الجزء العلوي من البطن قطاع السفن شرسوفي أدنى الثنائية باستخدام كواجولاتور كهربائية.
   2. تمديد شق عرضية قريبة من الهامش الساحلي في الجزء العلوي من البطن باستخدام مقص جراحي.
   3. عكس وإصلاح عملية جدار البطن العلوي والرهابه، على التوالي، إلى جانب الجمجمة.
   4. نقل الأمعاء خارج تجويف البطن مع اثنين من العصي القطن الرطب. تغطي الأمعاء باستخدام قطعة مبللة من الشاش.
2. قطع الأربطة والتشذيب الأجوف فينا سوبراهيباتيك (شفك)
   1. قطع فالسيفورمال الرباط، الرباط الشريان التاجي والرباط الثلاثي في التسلسل.
   2. مجاناً وعلى المنوال حجابي اليسرى من الحجاب الحاجز باستخدام الملقط الصغير. ثم، اضطر مزدوجة باستخدام خيوط الحرير 6-0.
      ملاحظة: لا تقسم ومن هذا المنطلق في هذه الخطوة.
   3. قطع في الرباط جاستروهيباتيك استخدام مقص الصغرى الفص كودات أقل شأنا والرباط هيباتويسوفاجيل والشريان مجاناً.
3. أوككلودينج إمدادات الدم للتعلم مدى الحياة ومل قبل بتر (الشكل 2)
   1. أولاً، استخدام منحنى ملقط تشريح الجدار الخلفي لجذع مشترك الكهروضوئية التي لوازم التعلم مدى الحياة، والفص الأيسر الوسيط (حب حياتي) من حمة بعناية. ثانيا، ضعف سد وتقسم مع القناة الصفراوية المقابلة والشريان الكبدي معا.
   2. تشريح وتقسيم الكهروضوئية RML برفق لأنه من هذا المنطلق تلتزم لحمه الكبد عن كثب.
      ملاحظة: ينصح 14 X التكبير. لا تجرح الكهروضوئية الفص حق متفوقة، الذي يقع بالقرب من الكهروضوئية RML.
   3. تحديد الشريان الكبدي والقناة الصفراوية من RML الواقعة بين المحاضر الحرفية RML وأحب حياتي. ضعف سد وتقسيم الشريان الكبدي والقناة الصفراوية من RML استخدام خيوط الحرير 6-0.
      ملاحظة: تغيير اللون للتعلم مدى الحياة، ومل من الأحمر اللون الأحمر للظلام مؤشرا من مؤشرات التغطية الناجحة لإمدادات الدم. المعرفة الدقيقة بتشريح الأوعية الدموية من الضروري تحديد وتشريح السفن المقابلة. دراسة سابقة في الفئران يبين بوضوح في تشريح الكبد بالتآكل يلقي¹⁰.
4. ريسيكتينج التعلم مدى الحياة
   1. سد بيديكلي للتعلم مدى الحياة استخدام كفافى خياطة الحرير 3-0 إلى أوككلودي تدفق الدم الوريد الكبدي الجانبي الأيسر. باستخدام مقص الصغرى، قطع الكبد مباشرة فوق ربط لإزالة كتلة الكبد.
5. ريسيكتينج الحب حياتي
   1. المشبك على المنوال كبدي الوسط الأيسر ملقط مرقئ البعوض يوضع على طول الشق الوسيط (الشكل 3A). قم بإزالة كافة لحمه الكبد من الحب حياتي أعلاه مباشرة الملقط استخدام مقص الصغرى.
   2. المكان خياطة ثقب التي تخترق لحمه الكبد فورا تحت الملقط المحيطة بالوسط الأيسر كبدي الوريد. ثم، قرانهما ساحة سد ذلك قبل الإفراج الملقط.
   3. مكان آخر خيوط ثقب اثنين تحت الملقط لتطويق بقية شق مفتوحة للحب في حياتي. ثم، عقده ساحة اثنين لإغلاق بقية الشق التعادل. الإصدار ملقط مرقئ البعوض للتحقق من النزيف.
6. ريسيكتينج RML (الشكل 4)
   1. ضع ملقط مرقئ البعوض لتطويق قاعدة RML على مسافة 0.5 سم شفك (الشكل 4 باء). ثم، عبر المشبك قاعدة استخدام ملقط مرقئ البعوض إلى أوككلودي الوريد الكبدي يمين الوسط.
   2. باستخدام مقص الصغرى، إزالة كافة لحمه الكبد من RML على طول السطح العلوي الملقط. من المؤكد أن العمل جداً قريبة من سطح الملقط، ترك السيجارة عادي ورقيقة مل.
   3. مكان خياطة ثقب أول اختراق لحمه الكبد تحت الملقط لتطويق الوسيط الأوسط كبدي الوريد. ثم، قرانهما ساحة سد الوريد الكبدي الوسيط الأوسط. مكان خياطة ثقب الثانية لسد الوريد الكبدي يمين الوسط باستخدام نفس الأسلوب. مكان آخر خيوط ثقب اثنين قريبة من بقية شق بعد الوصف في 6.5.2.
7. تقليم الأجوف فينا إينفراهيباتيك (إيهفك)
   1. قص فتح ريتروبيريتونيوم لفضح إيهفك. استخدام الملقط الصغير منحنى على إيهفك والوريد الكلوي الحق من الأنسجة المحيطة بالمجان. تشريح واضطر على المنوال حق الغدة الكظرية، مما يستنزف في إيهفك من الخلف.
   2. القيام استئصال حق بعد ليجاتينج بالوريد الكلوي الحق وشريان كلوي حق لحفظ ما يكفي طول الأوعية الدموية لتثبيت الرباط على إيهفك في خطوة لاحقة.
8. تركيب دعامات الصفراوية
   1. تعبئة القناة الصفراوية المشتركة (اتفاقية التنوع البيولوجي) من هيلم كبدي أول استخدام الملقط الصغير. اضطر اتفاقية التنوع البيولوجي في هذه النقطة عبر الوريد البواب واتفاقية التنوع البيولوجي باستخدام خياطة حرير 6-0.
   2. قص شق عرضية على الجدار الأمامي لاتفاقية التنوع البيولوجي في الجهة الدانية من الربط. قم بإدراج دعامات الصفراوية، مصنوعة من عيار 22 القسطرة الوريدية، في التجويف اتفاقية التنوع البيولوجي عن طريق الشق. تأمين تركيب دعامات الصفراوية مع كفافى خياطة الحرير 6-0. قطاع التنوع البيولوجي بين خيوط الحرير اثنين في 6-0.
9. تقليم الكهروضوئية
   1. سد الوريد البواب استخدام خياطة حرير 6-0 القاصي إلى الكهروضوئية. بعد ذلك، اضطر على المنوال البواب استخدام 7-0 خياطة البوليبروبيلين قريبة من الكهروضوئية. قطاع على المنوال البواب بين هذه ليجاتيونس اثنين. ضعف سد وتقسم على المنوال الطحال بنفس الطريقة.
      ملاحظة: استخدم خياطة البوليبروبيلين 7-0 لسد السفينة جعل عقده ربط أصغر بالمقارنة بخياطة الحرير 6-0. عقده كبيرة قد تتداخل مع التثبيت الكفة في الخطوة الأخيرة. جدار الأوعية الدموية الوريد البواب والطحال المنوال رقيقة، حيث تلاعب لطيف ضرورية أثناء التشريح. وينبغي قراءة مقالة منشورة سابقا مع الوصف أكثر تقنية، والرسوم التوضيحية حول تشريح وتقسيم الوريد البواب والطحال المنوال قبل العملية¹⁷.
10. قطع الشريان الكبدي الشائعة (تشأ)
    1. مجاناً بعناية تشأ وبه بيفوركيشنز اثنين، فا وقصور الشريان (GDA)، من الأنسجة المحيطة باستخدام الملقط الصغير اثنين. ضعف سد GDA استخدام خيوط الحرير 6-0 في التشعب تشأ إلى GDA.
11. هيبارينيزينج وبيرفوسينج الاختلاس الكبد
    1. حقن 50 وحدة دولية من الهيبارين في 1 مل من المحلول الملحي عن طريق الوريد القضيب. انتظر لمدة 5 دقائق لتحقيق هيبارينيزاتيون النظامية.
    2. عبر المشبك الكهروضوئية، إيهفك وتشا استخدام مايكرو منحنى ثلاثة-سيريفينيس إلى أوككلودي تدفق الدم الكبد. إجراء شق صغير في الجدار الأمامي من الكهروضوئية لإدخال قسطرة عيار 22. نتخلل الاختلاس الكبد الجزئي مع المالحة عند 4 درجة مئوية عن طريق القسطرة تحت ضغط من 20 غروهارلم₂o.
    3. سرعة قطع فتح تجويف الصدر والوعائي الوريد الأجوف باستخدام المقص الجراحي لاستنزاف الدم وبيرفوساتي. لا تتوقف التروية حتى يصبح لون الاختلاس الكبد الجزئي كامل موحد الأصفر.
12. اكسبلانتينج الاختلاس الكبد الجزئي
    1. قطاع على المنوال حجابي الأيسر بين ليجيشنز اثنين (المبين في 6.2.2) باستخدام مقص الصغرى.
    2. وبعد ذلك، قطاع شفك قريبة من الحجاب الحاجز للحفاظ على طول الأوعية الدموية أطول وقت ممكن. قطاع الكهروضوئية على مستوى الوريد الطحال باستخدام مقص الصغرى. تقسيم GDA بين ليجيشنز مزدوجة، وقطاع تشأ القريبة من الجذع الزلاقي.
    3. قطاع سفن الغدة الكظرية في الجهة البعيدة من ربط الحرير توضع في 6.7.2 6-0. قطاع إيهفك على مستوى الوريد الكلوي الأيسر استخدام المقص الجراحي.
    4. المكوس ونقل الكبد الجزئي لطبق الظهر-الجدول (طبق الثقافة 30 ملم) مملوءة بالمياه المالحة في 4 درجات مئوية.

7-مرة أخرى--الجدول تشغيل (الإعداد للابتزاز)

1. تركيب الأصفاد والأوعية الدموية (الشكل 5)
   1. سحب الكهروضوئية من خلال التجويف الرباط قسطرة الوريدية 12-قياس استخدام الملقط الصغير. مؤقتاً إصلاح مقبض الكفة والكهروضوئية معا باستخدام المشبك سفينة. جدار الوعاء إيفرت الكهروضوئية لتغطية السطح الخارجي للرباط. تأمين جدار الوعاء والكفة في الموقف مع خياطة حرير كفافى 6-0.
      ملاحظة: لا تطور السفينة. ينبغي أن يوضع المؤشر الكفة في اتجاه 12:00 م.
   2. تثبيت الرباط إيهفك بعد الوصف في 7.1.1.
2. التعيين المسبق خيوط البقاء سنتين على شفك
   1. اختراق جدار السفينة شفك من خارج إلى الداخل باستخدام اثنين 7-0 بولي بروبلين خياطة الجروح على طول 03:00 ص واتجاهات 09:00 ص، على التوالي.
      ملاحظة: لا يتم ربط عقده.
3. الاحتفاظ الاختلاس
   1. تزج الاختلاس الكبد الجزئي في المحلول الملحي في 4 درجات مئوية للحفاظ عليها بعد العملية الجدول مرة أخرى.

8-المستفيدة من العملية

1. كرر الإجراءات الموجودة في 6.1-6-2 و 6-7، باستثناء استئصال الحق، في المستلم لفضح ميدان المنطوق، قطاع الأربطة وتقليم السفن.
2. إعداد إيهفك والقناة الصفراوية والشريان الكبدي والوريد البابي في المتلقي
   1. أولاً، تعبئة مقطع إيهفك وصولاً إلى الوريد الكلوي الحق. وثانيا، اضطر السفن الغدة الكظرية حق استخدام خياطة حرير 6-0. وثالثاً، تعبئة اتفاقية التنوع البيولوجي من هيلم كبدي أول استخدام الملقط الصغير.
      ملاحظة: القطع لا قبالة الأنسجة الدهنية حول اتفاقية التنوع البيولوجي.
   2. قطاع التنوع البيولوجي في التشعب الأولى في هيلوم كبدي بعد ربط مزدوجة تستخدم خياطة حرير 6-0. ثم قطاع فا استخدام مقص الصغرى بعد ربط مزدوجة تستخدم خياطة حرير 6-0. تعبئة المقطع الكهروضوئية من هيلم الكبدية إلى الوريد البواب.
3. تعبئة الجزء خلفي الكبد
   1. سحب المتلقي الكبد إلى الجانب الأيسر باستخدام اثنين من العصي القطن. ثم قطع في الرباط في الجزء خلفي الكبد من شفك على المنوال حق الغدة الكظرية كما هو موضح في تصور المادة سابقة¹⁸. بعد ذلك، يعرض شريط المطاطي عبر الفضاء مرة أخرى من شفك.
4. إعداد الأدوات والمواد مرحلة أنهيباتيك
   1. إعادة فحص توافر جميع الأدوات والمواد المطلوبة في المرحلة أنهيباتيك، مثل حقنه 5 مل بإبرة منحنية وحامل المقص الصغير، الإبرة الدقيقة، الملقط الصغير، الملقط الصغير-مرقئ اثنين، وخيوط البولي بروبلين اثنين 7-0 و 6-0 مواد خياطة الحرير.
      ملاحظة: البحث عن مواد أو أدوات قد تطيل في مرحلة أنهيباتيك.
5. نسق الكبد في المتلقي
   1. عبر المشبك إيهفك مباشرة فوق الوريد الكلوي باستخدام المشبك سفينة والكهروضوئية مباشرة فوق الوريد البواب. تسجيل مدة المرحلة أنهيباتيك من هذه اللحظة وحتى يتم الإفراج عن المشبك في الكهروضوئية.
   2. خفض تركيز isoflurane إلى 0.5 في المائة فورا.
   3. سحب شفك والحجاب الحاجز إلى أسفل بالفرقة المطاط مسبقاً. المشبك في الأجزاء من الحاجز إلى جانب الأجوف فينا الوعائي باستخدام المشبك لدغ، الحفاظ على مسافة 0.5 سم شفك.
      ملاحظة: لا المشبك في الرئة للفئران.
   4. باستخدام المقص الصغير، قطع جدار السفينة شفك بعناية على طول الحافة العلوية من حمة الكبد للحفاظ على الأوعية الدموية الجدار أطول وقت ممكن.
   5. قطاع الكهروضوئية في التشعب الأولى في هيلم الكبد باستخدام مقص الصغرى. ثم قطاع الأجوف فينا أقل شأنا في حمة الفص حق أدنى بدلاً من جدار الوعاء، ترك لحمه الكبد كفافى حولها الوريد الأجوف. تبقى حافة القطع في الفص اليمين السفلي على مسافة من 4 مم إلى إيهفك. بعد ترانسيكتينج السفن، نقل الكبد كله خارج تجويف البطن.
6. إعادة إعمار شفك
   1. ضع الاختلاس الكبد الجزئي في أورثوتوبيكالي تجويف البطن. اختراق جدار السفينة شفك من داخل إلى خارج على طول التوجيهات 03:00 ص و 09:00 ص باستخدام خيوط الإقامة مسبقاً اثنين. سحب خيوط البقاء اثنين إلى اليمين واليسار بعد يتم تقييدهم إلى عقده مع غاياتها الخاصة.
   2. بيرس شفك السفينة الجدار من خارج إلى داخل قريبة من العقدة في اتجاه 03:00 ص لإدخال إبرة خياطة حق الإقامة في التجويف الأوعية الدموية.
   3. أناستوموسي الجدار الخلفي شفك واسطة خياطة قيد تشغيل داخل التجويف الأوعية الدموية من اتجاه 03:00 ص في اتجاه 09:00 ص.
   4. في زاوية باتجاه 09:00 ص، بيرس السفينة الجدار من داخل إلى خارج قريبة من عقده لإدخال الإبرة خارج التجويف الأوعية الدموية.
   5. استخدم هذا الخياطة ل anastomose الجدار الأمامي باستخدام خياطة قيد تشغيل خارج التجويف الأوعية الدموية من اتجاه 09:00 ص إلى 3 اتجاه الساعة. أخيرا، إدراك التعادل الخياطة مع نهاية الخاصة به 3 مرات (الشكل 6).
      ملاحظة: حقن 3-5 مل من المحلول الملحي في التجويف شفك أعيد القوة إلى فقاعات الهواء قبل الأخير 2-3 غرز. يمكن الاطلاع على وصف أكثر تفصيلاً لملامسة شفك في المقالة التي ديلريفيري et al. ¹⁹.
7. إعمار الكهروضوئية
   1. ضع اثنين خيوط البولي بروبلين إقامتهم 7-0 في نهاية الكهروضوئية المستلم بعد الوصف في 7-2. سحب اثنين البقاء خياطة الجروح في الاتجاه المعاكس لتمديد جدار الوعاء. إصلاح اثنين خيوط إقامتهم استخدام ملقط مرقئ الصغرى-البعوض اثنين.
   2. ضخ حوالي 1 مل من المحلول الملحي في التجويف الأوعية الدموية الكهروضوئية في المستلم بالقوة إلى فقاعات الهواء. بسرعة إدراج الكفة الوريد البابي في التجويف الأوعية الدموية الكهروضوئية في المستلم بقوة عند فتحه باستخدام الملقط الصغير. تأمين ملامسة الكفة استخدام خياطة حرير كفافى 6-0. عبر المشبك تشأ.
8. ضخه إلى الابتزاز الكبد
   1. الإفراج عن المشابك على شفك والكهروضوئية في تسلسل ريبيرفوسي الاختلاس الكبد. تسجيل الوقت لمرحلة أنهيباتيك. تحقق من وجود النزيف لملامسة. زيادة تركيز إيسوفلوراني % 1-2 ووفقا لرد فعل الفئران على تحفيز الألم.
9. إعادة بناء إيهفك
   1. حقن 1 مل من المحلول الملحي في التجويف الأوعية الدموية إيهفك في المستلم بالقوة إلى فقاعات الهواء. إدراج الكفة في التجويف الأوعية الاسطوانية إيهفك، الذي يدعمه لحمه الكبد كفافى (الشكل 7). وضع خياطة حرير من خلال الفضاء مرة أخرى إيهفك 6-0. بسرعة تأمين ملامسة الكفة استخدام خياطة حرير 6-0.
   2. الإفراج عن السفينة اثنين المشابك في إيهفك إلى إعادة تشغيل التروية. تقليم قبالة لحمه الكبد المحيطة بعناية أعلاه خياطة الحرير كفافى استخدام مقص الصغرى.
10. إعادة بناء شريان كبدي
    1. اختراق جدار السفينة تشأ في الاختلاس الكبد من خارج إلى الداخل باستخدام اثنين 11-0 بولي بروبلين خياطة الجروح في 03:00 ص واتجاهات 09:00 ص، على التوالي. أوككلودي تدفق الدم تشأ و GDA في المتلقي استخدام اثنين المنحنى الصغير-سيريفينيس.
    2. قطاع فا للمستلم في جذوره فضح التجويف الأوعية الدموية باستخدام مقص الصغرى. توسيع الأوعية الدموية التجويف فا في المستلم بقطع جزء من الجدار السفينة طوليا لاستيعاب قطر تشأ في الاختلاس الكبد.
    3. أناستوموسي تشأ الاختلاس الكبد إلى فا الموسع بطريقة نهاية إلى جانب استخدام الأسلوب تشغيل خياطة الجروح الموصوفة لملامسة شفك (8.6.2-8.6.7).
       ملاحظة: يمكن الرسوم التوضيحية مفصلة في المقالة هوانغ وآخرون¹⁴.
11. إعمار اتفاقية التنوع البيولوجي
    1. نقل الأمعاء مرة أخرى في تجويف البطن لتقليل المسافة بين طرفي القناة الصفراوية. تنفيذ شق عرضية على الجدار الأمامي للقناة الصفراوية في المتلقي.
    2. هدم دعامات الصفراوية في الاختلاس الكبد الجزئي لإدراجه في التجويف القناة الصفراوية في المتلقي عبر شق عرضية. تأمين تركيب دعامات استخدام خياطة حرير كفافى 6-0.
    3. ربط خيوط الحرير كفافى اثنين 6-0 في القناة الصفراوية لبعضها البعض للحد من التوتر لملامسة.
12. إغلاق البطن
    1. إغلاق البطن في طبقتين باستخدام 3-0 خياطة الحرير في نمط خياطة قيد التشغيل.

9-بعد العملية الجراحية علاجات (التسكين والمضادات الحيوية)

1. معاملة كافة المستلمين مع 0.1 مغ/كغ البوبرينورفين تحت الجلد. إدارة سيفروكسيم (16 مغ/كغ) تحت الجلد بالإضافة إلى الدواء مسكن. توفر مياه الحنفية والمختبرات القياسية تشاو الحيوان للفئران libitum الإعلانية.

النتائج

وفي المجموع، أنجزت 31 حالة من الفئران أرتيرياليزيد سينجينيك بلتكس استخدام هذا البروتوكول. كافة المستلمين على قيد الحياة حتى نهاية فترة المراقبة. وزن الجسم من المستلمين بدأت في الانتعاش بعد يوم بعد العملية الجراحية (جراب) 4. كان منحدر وزن الجسم قريب من الفئران لويس العادية ...

Discussion

بلتكس الجرذ هو إجراء microsurgical متطورة مع برنامج تدريب الذي ارتفاع في التكلفة وطويل في مدة²⁰. تعقد الفئران بروتوكول بلتكس منعت الباحثين من استخدام هذا النموذج الحيواني. بالمقارنة مع الحجم الكامل الفئران LTx، يعرض الفئران بلتكس ميكروسورجيون ليس فقط مع التحدي المتمثل في إجراء الزرع...

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Surgical microscope	Möller-Wedel, Germany	654359
Light source	OSRAM (China) Lighting Co., Ltd	64627
Isoflurane Vaporizer	MIDMARK Corporation	VIP3000
Isoflurane	Baxter Healthcare Corporation	40032609	For Inhalation anesthesia
Normal Saline	Zhejiang Tianrui Pharmaceutical Co., Ltd.	716092103
Povidone Iodine Solution	HANGZHOU MINSHENG PHARMACEUTICAL	H33021567	For disinfection
Hemostatic forceps	Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd	J31020
Surgical scissors	Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd	JC2116
Needle-holder	Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd	J32030
Dressing Forceps	Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd	J42020
Mosquito hemostatic forceps	Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd	W40340	For liver resection; For retracting the stay sutures.
Micro-scissors	Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd	WA1040
Micro needle-holder	Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd	WA2060
Curved micro typing forceps	Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd	WA3061
straight micro typing forceps	Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd	WA3060
Micro hemostatic forceps	Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd	WA3020
Bulldog clamp	Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd	XEC350
Vessel clamps	Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd	W40160
Micro Serrefine-curved	Fine Science Tools, Inc	18055-05
Dacryosyrinx	Shi Zhuo medical instruments Co., Ltd.	5# curve	Use as the curved needle for forcing out the air bubbles in the vascular lumen
Sterilized gauze swabs	Fuqing Health & Integral Medical	20230R
5mL syringe	Zhejiang Yusheng Medical Instrument Co.,Ltd	811932416
18G needles	Shanghai Kindly Enterprise Development Group Co., Ltd	01-014	For fixing the upper abdomen wall
Intima II 22G intraveous catheter	Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd.	383207y	For making biliary stent; For infusing perfusate
7-0 polypropylene sutures	Ningbo Medical Needle Co., Ltd	151026	For SHVC anastomsis
6-0 silk suture	Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd	2650182	For ligation
Culture dish (100mm)	Corning Incorporated	430165	used in back table for storage ice. The back table dish was placed on it.
Culture dish (30 mm)	Corning Incorporated	3296	As a vessel for organ preservation
Angiocath 12G intravenous catheter	Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd.	382277	For making a IHVC cuff
Angiocath 14G intravenous catheter	Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd.	382269	For making a PV cuff
Buprenorphine (hydrochloride)	Tianjin Institute of Pharmaceutical Research Pharmaceutical Co., Ltd	H12020275	For analgesic
Cefuroxime sodium for injection	Esseti FarmaceuticiS.r.l	H20160013	As an antibiotics