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Resumen

Aquí, se presenta un protocolo de trasplante hepático parcial rata vuelva a arterializada. Específicamente, hígado 70% fue resecado en vivo mediante el uso de una técnica actualizada de hepatectomía orientada al buque. La arteria hepática fue reconstruida de manera final a otro. La técnica del manguito fue modificada para acortar el tiempo de anastomosis de la cava de infrahepatic.

Resumen

Fractura del trasplante hepático y trasplante de hígado hígado donante vivo se desarrollaron en la clínica para utilizar órganos hígados de una manera más eficiente. Para comprender mejor el mecanismo detrás de estos procedimientos quirúrgicos, se establece un modelo de parcial trasplante del hígado (PLTx) rata para estudios quirúrgicos pertinentes. Debido a la complejidad del modelo de PLTx de rata, se requiere un protocolo con descripciones detalladas. Un artículo publicado anteriormente informó un protocolo en el que ex vivo hepatectomía se utilizó para alcanzar 50% rata PLTx. En contraste con este protocolo, hemos introducido un nuevo arterializada PLTx con una hepatectomía del 70% en vivo . Una hepatectomía actualizada orientada al buque fue incorporado a la rata PLTx a perfeccionar el procedimiento microsurgical. Las venas porta y arterias hepáticas del lóbulo lateral izquierdo y el lóbulo mediano individualmente fueron disecadas y ligarse antes del retiro de la parenquimia del hígado, disminuyendo la probabilidad de sangrado en el tocón remanente hepático. Además, se introdujo una anastomosis extremo a otro buque entre la arteria hepática común y la arteria hepática apropiada ampliada para volver a arterialize la arteria hepática. Mediante el uso de esta técnica de anastomosis extremo a otro buque, el diámetro de la anastomosis fue ampliado, lo que disminuye la dificultad de la sutura de la mano y mantener una alta tasa de permeabilidad de la anastomosis. Por otra parte, la anastomosis del pun ¢ o de la infrahepatic vena cava fue ligeramente modificada. Una sección del parénquima hepático circunferencial alrededor de la vena cava del receptor fue preservada durante la anastomosis del manguito para mantener la forma tridimensional de la luz vascular. Esta sección de la parenquimia del hígado fue quitada después de completar la anastomosis. Con esta modificación, el paso que implica la colocación de suturas de estancia fue omitido, aún más, acortando el tiempo de anastomosis de brazalete. Mediante este protocolo de rata PLTx, un nivel bajo de enzimas hepáticas, una arquitectura lobular hepática intacta y un índice de supervivencia alto fueron alcanzadas después de la microcirugía.

Introducción

Actualmente, existe una gran discrepancia entre el número de órganos hígados donados y el número de enfermos en espera de un hígado donado. La escasez de órganos hígados es un problema global. Para ampliar el pool de donantes, partida de trasplante hepático (LTx) y donante vivo LTx fueron desarrollados para utilizar un hígado parcial como injerto1.

Para investigar el mecanismo detrás del trasplante del hígado parcial (PLTx), los modelos animales relevantes han sido establecidos2,3,4,5. En ratas PLTx, los lóbulos hepáticos son resecados en vivo y ex vivo para imitar las condiciones del donante vivo LTx y partido LTx, respectivamente, en humanos. Un artículo publicado en el Diario de experimentos visualizados presenta un protocolo detallado que implica una rata de 50% PLTx con un ex vivo hepatectomía5. Sin embargo, una rata PLTx con una hepatectomía en vivo no todavía se ha divulgado en la literatura visualizada.

Además de la diferencia entre hepatectomías in vivo y ex vivo , la técnica de realizar una hepatectomía sí mismo también juega un papel importante en determinar el resultado de PLTx. en la actualidad, en muchos estudios quirúrgicos utilizando la rata PTLx modelo, el hígado en lóbulos fueron resecados después de colocar una ligadura simple en el pedículo de los lóbulo del hígado2,3,6,7,8,9. Sin embargo, colocar una ligadura simple antes de la resección no es adecuada para todos los lóbulos hepáticos, como diferentes lóbulos hepáticos tienen diferentes formas y tamaños. Una simple ligadura en la base del lóbulo mediano lleva un alto riesgo de provocar una constricción de la vena cava, que eventualmente podría afectar la salida del injerto hepático parcial10,11. Por lo tanto, es necesaria una actualización de hepatectomía técnica basada en el conocimiento de la Anatomía hepática de rata en el campo de la rata PTLx.

En el protocolo descrito en este estudio, un actualizado hepatectomía del 70% orientada al buque fue incorporado en el procedimiento de la rata PLTx. Las venas porta y arterias hepáticas del lóbulo lateral izquierdo (LLL) y del lóbulo medio (ML) fueron disecadas y divididas individualmente antes de la eliminación de la parenquimia del hígado. Luego, las venas hepáticas de la LLL y ML se unen por perforación de las suturas. Utilizando trompas individuales y suturas perforantes múltiples en lugar de colocar una ligadura simple, el tocón remanente de la ML pudo repartidas en la vena cava. Por lo tanto, era evitar la constricción de la vena cava de infrahepatic causada por una ligadura quirúrgica. Además, la oclusión de la irrigación sanguínea de la LLL y ML por trompas individuales antes de retiro de la parenquimia del hígado disminuyó la tasa de sangrado en el tocón remanente hepático, minimizando la influencia de la pérdida de sangre en los experimentos11.

Para microsurgeons, es un reto importante para reconstruir la arteria hepática apropiada (PHA) de un injerto del hígado debido al diámetro extremadamente pequeño de este buque. Aunque la cuestión de si es realmente necesario la arterialización en LTx está aún bajo debate12,13,14, numerosas técnicas microquirúrgicas de reconstrucción de la arteria hepática han sido propuestos14 . Aquí, presentamos una técnica novedosa para la arterialización del injerto hepático, que la anastomosis de la arteria hepática común (CHA) a la PHA agrandado de manera final a lado. Mediante el uso de esta técnica de extremo a lateral, dos arterias hepáticas están conectadas con una anastomosis de un diámetro más grande. Cuanto mayor es el diámetro de la anastomosis, la sutura de mano más fácil es llevar a cabo y mayor será la mejora de la permeabilidad de la anastomosis se convierte.

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Protocolo

Todos los procedimientos siguieron las pautas de roedor cirugía aprobado por la Universidad Animal política de Wenzhou médica y Comité de bienestar 15.

1. los animales

  1. Utilizar ratas Lewis macho 250-350 g de peso como donantes y receptores.

2. operativo medio ambiente

  1. Realizar todos los procedimientos de microcirugía microscopio quirúrgico con aumentos desde 7 X hasta 20 X. Esterilizar todos los instrumentos quirúrgicos antes de su uso en la operación.
    Nota: La sala de operaciones y la mesa de operaciones son limpias pero no estériles.

3. básicas microquirúrgicos maniobras

  1. Libre, diseccionar y movilizar la nave.
    1. En primer lugar, usar pinzas de micro rectos para levantar el tejido circundante en el buque.
    2. En segundo lugar, varias veces y suavemente abra y cierre las puntas de las pinzas de micro curva tal que las puntas finas pueden abrir y pelar el tejido circundante en la pared anterior de la nave.
    3. En tercer lugar, usar pinzas de micro rectos de la abrazadera y levante el recipiente para exponer el espacio posterior. A continuación, utilice las puntas de las pinzas de micro curva para pelar el tejido circundante en la pared posterior de la embarcación. Por último, debe presentarse un buque calvo sin cualquier tejido circundante conectado.
  2. Dividir o doble ligar y dividir un vaso o tejido.
    1. En primer lugar, haga dos nudos de Plaza en el buque o tejido con dos micro-pinzas16. En segundo lugar, corte el vaso o tejido entre los dos nudos de Plaza con micro tijeras.

4. preparación de la banda y Stent biliar

  1. Los puños de la vena porta y infrahepatic de la vena cava mediante catéteres intravenosos calibre 12 y calibre 14, respectivamente, mientras que el stent biliar utilizado es un catéter intravenoso calibre 22. Los puños consisten en una parte del cuerpo y la pieza de la manija. Utilice una redonda en la parte del cuerpo para sujetar la pared del vaso en el manguito (figura 1).

5. anestesia y fijación de las ratas

  1. Coloque suavemente la rata Lewis en una caja de la inducción con isoflurano 5% mezclado con el oxígeno de 0,5 L/min para inducir la anestesia inhalatoria. Vigilar la frecuencia respiratoria de la rata para evitar la muerte inesperada causada por una sobredosis de isoflurano. Reducir la concentración de isoflurano al 2% para mantener la anestesia cuando la rata no responde al estímulo de dolor.
  2. Pasar la rata a un tablón de roble 30 cm x 30 cm cubierto por una toalla tapete quirúrgica esterilizada y la rata en una posición supina. Atan los cuatro miembros de la rata con cinta intermedia y posteriormente fijar la cinta con cuatro chinchetas. Desinfectar la piel con alcohol al 70% una vez y yodóforos tres veces.

6. donantes operación

  1. Exponer el campo operatorio
    1. Corte una pequeña incisión transversal en la parte superior del abdomen a los vasos epigástricos inferiores bilaterales con un coagulador eléctrico del transecto.
    2. Extender la incisión transversal cerca de la margen costal en la parte superior del abdomen con tijeras quirúrgicas.
    3. Invertir y fijar la parte superior del abdomen pared y proceso del xiphoid, respectivamente, en el lado craneal.
    4. Mover el intestino fuera de la cavidad abdominal con dos palillos de algodón húmedo. Cubra el intestino con un trozo mojado de Gasa.
  2. Cortar los ligamentos y recorte la cava suprahepática (SHVC)
    1. Cortar el ligamento falciformal, ligamento coronario y ligamento triangular en secuencia.
    2. Libre de la vena diafragmática izquierda del diafragma mediante micro pinzas. Luego, doble ligan con suturas de seda 6-0.
      Nota: No se dividen esta vena en este paso.
    3. Cortar el ligamento gastrohepático con micro tijeras para liberar el lóbulo caudado inferior y el ligamento hepatoesophageal y arteria.
  3. Ocluye el suministro de sangre de la LLL y ML antes de la resección (figura 2)
    1. En primer lugar, utilizar fórceps curvado para disecar cuidadosamente la pared posterior del tronco común de la PV que suministra la LLL y lóbulo medio izquierdo (LML) de la parenquimia. En segundo lugar, doble ligar y dividir con el correspondiente conducto biliar y la arteria hepática juntos.
    2. Disecar y dividir el PV de la RML suavemente ya que esta vena se adhiere estrechamente a la parenquimia del hígado.
      Nota: se recomiendan 14 aumentos. No herir la PV del lóbulo superior derecho, que está cerca de la PV de la RML.
    3. Identificar la arteria hepática y conducto biliar de la RML situado entre el PVs de la RML y el amor de mi vida. Doble ligar y dividir la arteria hepática y conducto biliar de la RML utilizando suturas de seda 6-0.
      Nota: Un cambio en el color de la LLL y ML de rojo oscuro es un indicador de éxito oclusión de la irrigación sanguínea. Conocimiento profundo de la anatomía vascular es esencial para identificar y disecar los vasos correspondientes. Un estudio en rata claramente ilustra la Anatomía hepática por corrosión moldes10.
  4. Resecando el LLL
    1. Ligar el pedículo del LLL con sutura de seda 3-0 un circunferencial para ocluir el flujo sanguíneo de la vena hepática lateral izquierda. Utilizando micro tijeras, cortar el hígado inmediatamente por encima de la ligadura para retirar la masa del hígado.
  5. Resecando el amor de mi vida
    1. Fije la vena hepática media izquierda por pinzas hemostáticas mosquito colocados a lo largo de la fisura mediana (Figura 3A). Eliminar a todos de la parenquimia del hígado del amor mi vida inmediatamente anterior el fórceps con micro tijeras.
    2. Lugar una sutura de perforación que penetra en el parénquima hepático inmediatamente debajo de las pinzas alrededor de la media izquierda hepática de la vena. Entonces, un nudo cuadrado para ligar antes de soltar las pinzas.
    3. Coloque otro dos suturas piercing bajo el fórceps para rodear el resto de la incisión abierta del amor de mi vida. A continuación, haga dos nudos de Plaza para cerrar el resto de la incisión. Soltar las pinzas hemostáticas de mosquito para verificar sangrado.
  6. Resección de RML (figura 4)
    1. Colocar pinzas hemostáticas de mosquito para rodear la base de la RML en una distancia de 0,5 cm a SHVC (Figura 4B). Entonces, Cruz-abrazadera de la base usando las pinzas hemostáticas de mosquito para ocluir la vena suprahepática derecha mediana.
    2. Utilizando micro tijeras, quite de la parenquimia del hígado de la RML a lo largo de la superficie superior de las pinzas. Asegúrese de trabajar muy cerca de la superficie de las pinzas, dejando un tocón de la ML liso y fino.
    3. Lugar la primera sutura piercing penetrando la parenquimia del hígado bajo el fórceps para rodear la mediana media hepática de la vena. Entonces, un nudo cuadrado para ligar la vena hepática media media. Lugar la segunda sutura de perforación para ligar la vena hepática derecha mediana utilizando el mismo método. Coloque otro dos suturas piercing cerca del resto de la incisión después de la descripción en 6.5.2.
  7. Recorte de la cava de infrahepatic (IHVC)
    1. Corte el retroperitoneo para exponer la IHVC. Utilizar un micro-pinzas curvas para liberar la IHVC y la vena renal derecha del tejido circundante. Disecar y ligar la vena suprarrenal derecha, que desagua en el IHVC de la parte posterior.
    2. Realizar una nefrectomía derecha después de la ligadura de la vena renal derecha y la arteria renal derecha para guardar suficiente longitud vascular para instalar el manguito en el IHVC en un paso posterior.
  8. Instalación de stent biliar
    1. Conducto biliar común (CBD) a movilizar desde el hilio hepático primer usar micro pinzas. Ligar el CDB en el punto de Cruz de la vena pilórica y CDB mediante una sutura de seda 6-0.
    2. Cortar una incisión transversal en la pared anterior de la CDB en la parte proximal de la ligadura. Insertar un stent biliar, hecho de un catéter intravenoso calibre 22, en el lumen del CDB a través de la incisión. Asegure el stent biliar con un circunferencial sutura de seda 6-0. Transecto del CDB entre las dos suturas de seda 6-0.
  9. Recorte a la fotovoltaica
    1. Ligar la vena pilórica con una sutura de seda 6-0 distal a la PV. A continuación, ligar la vena pilórica con una sutura de polipropileno 7-0 cerca de la PV. Transecto la vena pilórica entre estos dos trompas. Doble ligar y dividir la vena esplénica, de la misma manera.
      Nota: Utilice una sutura de polipropileno 7-0 para ligar el vaso para hacer un nudo ligadura menor comparado con la de la sutura de seda 6-0. Un nudo grande puede interferir con la instalación del manguito en el ultimo paso. La pared vascular de la vena pilórica y la vena esplénica es delgada, por lo que las manipulaciones suaves son esenciales durante la disección. Un artículo anteriormente publicado con más descripciones e ilustraciones acerca de disección y dividiendo la vena pilórica y la vena esplénica se debe leer antes de la operación17.
  10. Recorte de la arteria hepática común (CHA)
    1. Con cuidado libre del CHA y sus dos bifurcaciones, la PHA y la arteria gastroduodenal (GDA), del tejido circundante con dos micro-pinzas. Doble ligar el GDA usando las suturas de seda 6-0 en la bifurcación de la CHA a GDA.
  11. Heparinización y perfundiendo el injerto hepático
    1. Inyectar 50 UI de heparina en 1 mL de solución salina a través de la vena del pene. Espere 5 minutos lograr la heparinización sistémica.
    2. Pinzamiento de la PV, IHVC y CHA con tres micro-serrefines curvadas para ocluir el flujo sanguíneo hepático. Realizar una pequeña incisión en la pared anterior de la PV para insertar un catéter de calibre 22. Perfusión del injerto hepático parcial con solución salina a 4 ° C mediante el catéter bajo una presión de 20 cmH2O.
    3. Rápidamente la corte Abra la cavidad torácica e intratorácico de la vena cava con tijeras quirúrgicas para drenar la sangre y la solución. No deje la perfusión hasta que el color del injerto hepático parcial todo llega a ser uniformemente amarillo.
  12. Explantar el injerto hepático parcial
    1. Transecto la vena diafragmática izquierda entre las dos trompas (descrito en 6.2.2) utilizando tijeras micro.
    2. A continuación, transecto la SHVC cerca del diafragma para guardar la longitud vascular mayor tiempo posible. Transecto de la PV en el nivel de la vena esplénica con micro tijeras. Divida el GDA entre las trompas dobles y transecto CHA cerca del tronco celíaco.
    3. Transecto los vasos suprarrenales en el lado distal del 6-0 seda ligadura colocada en 6.7.2. Transecto de la IHVC a nivel de la vena renal izquierda con tijeras quirúrgicas.
    4. Impuestos y transferencia el hígado parcial a un plato de la mesa de detrás (placa de cultivo de 30 mm) llena de solución salina a 4 ° C.

7. tabla de espalda operación (preparación)

  1. Instalar los manguitos vasculares (figura 5)
    1. Tire de la PV a través del lumen de un brazalete con un catéter intravenoso calibre 12 con micro pinzas. Fijar temporalmente el brazalete mango y PV usando una abrazadera de buque. Vuelque la pared PV para cubrir la superficie exterior del manguito. Asegure la pared del vaso y manguito en posición con una sutura de seda 6-0 circunferencial.
      Nota: No gire el vaso. El mango del manguito debe conservarse en la dirección de 12:00.
    2. Instale el manguito IHVC después de las descripciones en 7.1.1.
  2. Preestablecimiento de las dos estancia suturas en el SHVC
    1. Penetrar la pared del vaso de la SHVC de fuera a dentro con dos polipropileno 7-0 suturas a lo largo de las 3:00 y 9:00 direcciones, respectivamente.
      Nota: No haga un nudo.
  3. Preservación del injerto
    1. Sumerja el injerto hepático parcial en solución salina a 4 ° C para la conservación después de la operación de la mesa de atrás.

8. receptor operación

  1. Repita los procedimientos 6.1-6.2 y 6.7, excepto la nefrectomía derecha, en el recipiente para exponer el campo operatorio, los ligamentos del transecto y recortar los vasos.
  2. Preparación de la IHVC, hepático, arteria hepática y vena porta en el recipiente
    1. En primer lugar, movilizar a la sección de la IHVC hasta la vena renal derecha. En segundo lugar, ligar los vasos suprarrenales derecho usando una sutura de seda 6-0. En tercer lugar, movilizar el CDB desde el hilio hepático primer usar micro pinzas.
      Nota: No corte el tejido graso alrededor del CDB.
    2. Transecto del CDB en la primera bifurcación en el hilum hepático después de la ligadura doble utilizando una sutura de seda 6-0. Entonces, transecto del PHA con micro tijeras después de la ligadura doble utilizando una sutura de seda 6-0. Movilizar a la sección de la PV desde el hilio hepático la vena pilórica.
  3. Movilización de la parte posterior del hígado
    1. Retraiga al receptor hepático a la izquierda con dos palillos de algodón. Luego, cortar el ligamento en la parte posterior del hígado de la SHVC a la vena suprarrenal derecho como se describe en un anterior artículo visualizado18. Después de esto, introducir una banda de caucho a través del espacio detrás de la SHVC.
  4. Preparar los instrumentos y materiales durante la fase anhepatic
    1. Vuelva a verificar la disponibilidad de todos los instrumentos y materiales necesarios en la fase anhepatic, como una jeringa de 5 mL con una aguja curva, soporte micro-tijeras, aguja micro, micro pinzas, dos pinzas hemostáticas de micro, suturas polipropileno 7-dos 0 y 6-0 material de sutura de seda.
      Nota: Búsqueda de materiales o instrumentos puede prolongar la fase anhepatic.
  5. Suprimir el hígado del receptor
    1. Pinzamiento de la IHVC inmediatamente por encima de la vena renal con una abrazadera del buque y el PV inmediatamente por encima de la vena pilórica. Registrar la duración de la fase anhepatic desde este momento hasta que se suelte la abrazadera en el PV.
    2. Reducir la concentración de isoflurano al 0,5% de inmediato.
    3. Baje el SHVC y el diafragma por la banda de goma predefinida. Sujete las piezas del diafragma junto con la vena cava intratorácica utilizando una pinza de Bulldog, manteniendo una distancia de 0,5 cm para el SHVC.
      Nota: No fije el pulmón de la rata.
    4. Con micro tijeras, corte la pared del vaso de la SHVC cuidadosamente el borde superior de la parenquimia del hígado para mantener la pared vascular mayor tiempo posible.
    5. Transecto de la PV en la primera bifurcación en el hilio hepático con micro tijeras. Transecto, la vena cava inferior en la parenquimia del lóbulo inferior derecho, en lugar de la pared del vaso, dejando la parenquimia del hígado circunferencial alrededor de la vena cava. Mantener la vanguardia en el lóbulo inferior derecho, a una distancia de 4 m m para el IHVC. Después de transecting los vasos, mueva el hígado entero fuera de la cavidad abdominal.
  6. Reconstruir la SHVC
    1. Colocar el injerto parcial del hígado en la cavidad abdominal orthotopically. Perforar la pared del vaso de la SHVC de dentro a fuera a lo largo de las 3:00 y 9:00 indicaciones mediante dos suturas de estancia preestablecido. Tirar de las suturas de dos estancia a derecha e izquierda después se atan en un nudo con sus propios fines.
    2. Perforar la SHVC pared de fuera a dentro cerca del nudo en la dirección de 3:00 para introducir la aguja de la sutura de la derecha de la estancia en el lumen vascular.
    3. Anastomizar la pared posterior de la SHVC sutura corriente dentro del lumen vascular desde la dirección de 3:00 a 9:00 dirección.
    4. En la esquina de la dirección de 9:00, perforar la pared del vaso de dentro a fuera cerca del nudo para introducir la aguja fuera de la luz vascular.
    5. Uso de esta sutura para anastomizar la pared anterior utilizando una sutura corriente fuera del lumen vascular desde la dirección de 9:00 a 3 la hora dirección. Por último, atar la sutura con su propio final 3 veces (figura 6).
      Nota: Inyectar 3 a 5 mL de solución salina en el lumen de la SHVC reconstruido para eliminar burbujas de aire antes de los últimos 2-3 puntos. Una descripción más detallada de anastomosis SHVC puede encontrarse en el artículo por Delriviere et al. 19.
  7. Reconstrucción de la PV
    1. Coloque dos suturas de polipropileno estancia 7-0 en el extremo de la PV del receptor después de la descripción en 7.2. Tire dos suturas de estancia en la dirección opuesta para extender de la pared del vaso. Fijar dos suturas de estancia usando dos pinzas hemostáticas de mosquito micro.
    2. Inyectar aproximadamente 1 mL de solución salina en el lumen vascular de la PV en el recipiente para eliminar las burbujas de aire. Inserte rápidamente el brazalete de la vena porta en el lumen vascular de la PV en el recipiente a la fuerza cuando se abre con unas pinzas de micro. Asegure la anastomosis del manguito mediante una sutura de seda 6-0 circunferencial. Pinzamiento del CHA.
  8. Reperfusión a injerto del hígado
    1. Suelte las abrazaderas en el SHVC y PV en secuencia a reperfuse el injerto hepático. Registrar el tiempo de la fase anhepatic. Si hay sangrado de la anastomosis. Aumentar la concentración de isoflurano al 1-2% según la reacción de la rata para el estímulo de dolor.
  9. Reconstrucción de la IHVC
    1. Inyectar 1 mL de solución salina en el lumen vascular de la IHVC en el recipiente para eliminar las burbujas de aire. Inserte el manguito en el lumen vascular cilíndrico de la IHVC, que es apoyado por el parénquima hepático circunferencial (figura 7). Introducir una sutura de seda 6-0 por el espacio posterior de la IHVC. Asegurar rápidamente la anastomosis del manguito mediante una sutura de seda 6-0.
    2. Suelte las abrazaderas de dos buques en el IHVC para reiniciar la perfusión. Recorte de la parenquimia del hígado circundante con cuidado encima de la sutura de seda circunferencial con micro tijeras.
  10. Reconstrucción de la arteria hepática
    1. Penetrar la pared del vaso del CHA en el injerto hepático de fuera a dentro con dos polipropileno de 11-0 suturas en el 3:00 y 9:00 direcciones, respectivamente. Ocluir el flujo sanguíneo de la CHA y GDA en el destinatario mediante dos curvas micro-serrefines.
    2. Transecto del PHA del destinatario en su raíz para exponer el lumen vascular con micro tijeras. Agrandar el lumen vascular de la PHA en el receptor por parte de la corte de la pared del vaso longitudinalmente para acomodar el diámetro del CHA en el injerto hepático.
    3. Anastomizar el CHA del injerto hepático a la PHA agrandado de manera final a lado usando la técnica de sutura corriente descrita para la anastomosis SHVC (8.6.2-8.6.7).
      Nota: Ilustraciones detalladas pueden encontrarse en el artículo por Huang et al14.
  11. Reconstrucción de la CDB
    1. Volver el intestino a la cavidad abdominal para reducir la distancia entre los dos extremos de la vía biliar. Realizar una incisión transversal en la pared anterior del conducto biliar del receptor.
    2. Baje el stent biliar en el injerto hepático parcial para insertar en el lumen del conducto biliar en el destinatario a través de la incisión transversal. Asegure el stent utilizando una sutura de seda circunferencial de 6-0.
    3. Atar las dos suturas de seda circunferencial de 6-0 en el conducto biliar entre sí para reducir la tensión de la anastomosis.
  12. Cierre del abdomen
    1. Cerrar el abdomen en dos capas, con sutura de seda 3-0 en el patrón de sutura corriente.

9. tratamientos postoperatorios (Analgesia y antibióticos)

  1. Tratar a todos los destinatarios con 0.1 mg/kg de buprenorfina por vía subcutánea. Administrar cefuroxima (16 mg/kg) por vía subcutánea además de la droga analgésica. Ofrecen agua del grifo y estándar del laboratorio animal chow a las ratas ad libitum.

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Resultados

En total, 31 casos de rata arterializada syngeneic PLTx terminaron usando este protocolo. Todos los receptores sobrevivieron hasta el final del tiempo de observación. El peso corporal de los receptores comenzó a recuperarse después de día postoperatorio (POD) 4. La cuesta del peso corporal era cercano de una rata normal de Lewis después POD 6 (figura 8), que indirectamente implica la recuperación del receptor. Histológicamente, se observó una leve pro...

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Discusión

PLTx de la rata es un sofisticado procedimiento microsurgical con un programa de entrenamiento que es alto en costo y tiempo de duración20. La complejidad de la rata PLTx protocolo ha impedido que los investigadores utilizando este modelo animal. Comparado con el mismo tamaño rata LTx, rata PLTx presenta el microsurgeon no sólo con el desafío de un procedimiento de trasplante, pero también con el reto de la resección hepática en un animal pequeño. Por lo tanto, un protocolo microsurgical v...

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Divulgaciones

Todos los autores tienen intereses contradictorios a revelar.

Agradecimientos

Esta investigación fue apoyada por la Fundación Nacional de Ciencias naturales de China (Grant no. 81501382) y de Zhejiang Provincial Ciencias naturales Fundación de China (Grant no. LQ13H100003 y LQ16H100002).

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Materiales

NameCompanyCatalog NumberComments
Surgical microscopeMöller-Wedel, Germany654359
Light sourceOSRAM (China) Lighting Co., Ltd64627
Isoflurane VaporizerMIDMARK CorporationVIP3000
IsofluraneBaxter Healthcare Corporation40032609For Inhalation anesthesia
Normal SalineZhejiang Tianrui Pharmaceutical Co., Ltd.716092103
Povidone Iodine SolutionHANGZHOU MINSHENG PHARMACEUTICALH33021567For disinfection
Hemostatic forcepsShanghai Medical Instruments(Group) LtdJ31020
Surgical scissorsShanghai Medical Instruments(Group) LtdJC2116
Needle-holderShanghai Medical Instruments(Group) LtdJ32030
Dressing ForcepsShanghai Medical Instruments(Group) LtdJ42020
Mosquito hemostatic forcepsShanghai Medical Instruments(Group) LtdW40340For liver resection; For retracting the stay sutures. 
Micro-scissorsShanghai Medical Instruments(Group) LtdWA1040
Micro needle-holderShanghai Medical Instruments(Group) LtdWA2060
Curved micro typing forcepsShanghai Medical Instruments(Group) LtdWA3061
straight micro typing forcepsShanghai Medical Instruments(Group) LtdWA3060
Micro hemostatic forcepsShanghai Medical Instruments(Group) LtdWA3020
Bulldog clampShanghai Medical Instruments(Group) LtdXEC350
Vessel clampsShanghai Medical Instruments(Group) LtdW40160
Micro Serrefine-curved Fine Science Tools, Inc18055-05
DacryosyrinxShi Zhuo medical instruments Co., Ltd.5# curveUse as the curved needle for forcing out the air bubbles in the vascular lumen
Sterilized gauze swabsFuqing Health & Integral Medical20230R
5mL syringeZhejiang Yusheng Medical Instrument Co.,Ltd811932416
18G needlesShanghai Kindly Enterprise Development Group Co., Ltd01-014For fixing the upper abdomen wall
Intima II 22G intraveous catheterBecton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd.383207yFor making biliary stent; For infusing perfusate
7-0 polypropylene suturesNingbo Medical Needle Co., Ltd151026For SHVC anastomsis
6-0 silk sutureShanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd2650182For ligation
Culture dish (100mm)Corning Incorporated430165used in back table for storage ice. The back table dish was placed on it. 
Culture dish (30 mm)Corning Incorporated3296As a vessel for organ preservation
Angiocath 12G intravenous catheterBecton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd.382277For making a IHVC cuff
Angiocath 14G intravenous catheterBecton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd.382269For making a PV cuff
Buprenorphine (hydrochloride)Tianjin Institute of Pharmaceutical Research Pharmaceutical Co., LtdH12020275For analgesic
Cefuroxime sodium for injectionEsseti FarmaceuticiS.r.lH20160013As an antibiotics

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