JoVE Logo
Authors
Contact Us

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • תוצאות
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

כאן, מוצג פרוטוקול מעורבים השתלת כבד חלקית עכברוש arterialized מחדש. באופן ספציפי, 70% הכבד היה resected ויוו באמצעות טכניקת מעודכן של hepatectomy מונחה כלי השיט. עורק הכבד שוחזר בצורה הקצה לצד. הטכניקה השרוול שונה כדי לקצר את זמן השקה של infrahepatic את הווריד הנבוב.

Abstract

לפצל השתלת כבד והשתלות כבד כבד תורם חי פותחו במרפאה כדי לנצל את האיברים כבד באופן יעיל יותר. כדי להבין טוב יותר את המנגנון מאחורי ניתוחים אלה, מודל עכברוש השתלת כבד חלקית (PLTx) הוקמה ללימודי כירורגי הרלוונטיים. בגלל המורכבות של המודל PLTx חולדה, נדרש פרוטוקול עם תיאורים מפורטים. במאמר שפורסם קודם לכן דיווח פרוטוקול שבו שמחוץ hepatectomy נעשה שימוש כדי להשיג 50% עכברוש PLTx. בניגוד פרוטוקול זה, הצגנו PLTx arterialized מחדש עם hepatectomy 70% ויוו . Hepatectomy מונחה כלי מעודכן סופחה העכברוש PLTx כדי לחדד את ההליך השתלה. הפורטל ורידים, עורקים הכבד של האונה השמאלית לרוחב, האונה החציוני היו בנפרד גזור, מאתרים לפני הסרת parenchyma הכבד, ובכך להקטין את ההסתברות של דימום כבד שריד הגדם. יתר על כן, כלי הקצה לצד לחיבור תעלות בין עורק הכבד נפוץ עורק הכבד תקין מוגדלת הוצג מחדש arterialize של עורק הכבד. באמצעות טכניקה זו השקה סוף לצד כלי, הוגדל הקוטר של ההשקה, ובכך להקטין את הקושי של יד תפר, שמירה על שיעור גבוה של anastomotic patency. יתר על כן, והחיבור השרוול של infrahepatic את הווריד הנבוב היה שונה במקצת. קטע של במבניו הכבד parenchyma סביב הווריד הנבוב של נמען השתמר במהלך השקה השרוול כדי לשמור על צורה תלת מימדי של לומן כלי הדם. קטע זה של parenchyma הכבד הוסר לאחר השלמת ההשקה. עם שינוי זה, השלב לערב השמה של התפרים הושמט, ובכך יותר קיצור הזמן השקה השרוול. באמצעות פרוטוקול זה של עכברוש PLTx, רמה נמוכה אנזים בכבד, ארכיטקטורה lobular הכבד ללא פגע, סיכויי הישרדות גבוהים הושגו לאחר תיאום.

Introduction

כיום, יש פער גדול בין מספר כבד ביום גשום, מספר החולים מחכים שנתרמו כבד. בעיית המחסור באיברים כבד הינה בעיה עולמית. כדי להרחיב את המאגר התורם, לפצל השתלת כבד (LTx) החיים התורם LTx פותחו לשימוש כבד חלקית שתל1.

להמשיך לחקור את המנגנון מאחורי השתלת כבד חלקית (PLTx), מודלים בעלי חיים רלוונטי כבר הוקמה2,3,4,5. בשנת העכברוש PLTx, האונות בכבד הם resected ויוו שמחוץ לחקות את התנאים של התורם החי LTx ולהתחלק LTx, בהתאמה, בן אנוש. מאמר שפורסם היומן של ניסויים דמיינו הציגה פרוטוקול נתונים היסטוריים המערבים חולדה 50% PLTx משתמש של ex-vivo hepatectomy5. עם זאת, חולדה PLTx עם hepatectomy ויוו לא עוד דווח בספרות מטמיעים.

בנוסף, ההבדל בין hepatectomies ויוו , שמחוץ הטכניקה של ביצוע hepatectomy עצמו גם ממלא תפקיד חשוב בקביעת התוצאה של PLTx. כיום במחקרים כירורגי רבים לשימוש בחולדה PTLx מודל, הכבד אונות היו resected לאחר הנחת מצדו פשוטה-pedicle של האונה כבד2,3,6,7,8,9. אולם, הצבת מצדו פשוטה לפני כריתה אינו מתאים כל אונות הכבד, כמו אונות הכבד שונים יש בצורות ובגדלים שונים. מצדו פשוטה בבסיס של האונה החציוני סיכון גבוה של גרימת כיווץ של הווריד הנבוב, דבר שעשוי בסופו של דבר להשפיע על זרימה יוצאת של השתלת כבד חלקי10,11. לכן, שיטת hepatectomy עדכון המבוססים על ידע של האנטומיה הכבד עכברוש נדרש בשדה של עכברוש PTLx.

בפרוטוקול המתוארים במחקר זה, מעודכן מונחה כלי 70% hepatectomy סופחה ההליך של העכברוש PLTx. הפורטל ורידים, עורקים הכבד של האונה השמאלית לרוחב (LLL), חציון האונה (ML) היו גזור, מחולקים בנפרד לפני הסרת parenchyma בכבד. לאחר מכן, הורידים הכבד של LLL ו- ML היו מאתרים על ידי פירסינג התפרים. על-ידי שימוש ligations בודדים מרובים התפרים פירסינג במקום הצבת מצדו פשוט, הגדם שריד של ML היה מסוגל להתפשט על-פני הווריד הנבוב. לפיכך, הכיווץ של הווריד הנבוב infrahepatic הנגרמת על ידי מצדו כירורגי היה נמנע. בנוסף, סגר אספקת הדם של LLL ו- ML מאת ligations בודדים לפני הסרת parenchyma כבד ירד שיעור של דימום כבד שריד הגדם, ובכך למזער את ההשפעה של איבוד דם על ניסויים11.

עבור microsurgeons, זהו אתגר משמעותי לשחזר עורק הכבד תקין (פא) של השתלה כבד בגלל קוטר קטן מאוד של כלי השיט הזה. אמנם השאלה של arterialization מחדש ב- LTx הוא אכן נחוץ עדיין תחת הדיון12,13,14, רבות בטכניקה מיקרוכירורגית לשחזור עורק הכבד היה המוצע14 . כאן, אנו להכיר טכניקה חדשנית עבור arterialization מחדש של השתל הכבד, אשר anastomoses את עורק הכבד נפוץ (צ'ה) פא מוגדלת בצורה הקצה לצד. באמצעות טכניקה זו הקצה לצד, קשורים שני העורקים הכבד לחיבור תעלות של קוטר גדול יותר. הקוטר של ההשקה הוא גדול יותר, תפירת יד קל יותר הוא לבצע והופכת יותר לשיפור patency של ההשקה.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

בעקבות כל הנהלים המנחים של ניתוח מכרסמים אושרה על ידי ה וונג'ואו לרפואה אוניברסיטת חיה מדיניות וועדת הרווחה 15.

1. בעלי חיים

  1. השתמש חולדות לואיס זכר במשקל של 250-350 גר' כמו תורמים ומקבלים.

2. פעיל סביבה

  1. ביצוע כל ההליכים המיקרוכירורגית תחת מיקרוסקופ כירורגי עם הגדלה ועד 7 X 20 X. לעקר כל מכשירי ניתוח לפני השימוש בפעולה.
    הערה: חדר הניתוח ואת שולחן הניתוחים הם נקיים אך לא סטרילי.

3. תמרונים המיקרוכירורגית בסיסי

  1. חינם, לנתח, ולגייס את הספינה.
    1. תחילה, השתמש ישר מיקרו-מלקחיים להרים את הרקמה שמסביב על הספינה.
    2. שנית, שוב ושוב, בעדינות לפתוח ולסגור את קצות המלקחיים-המיקרו מעוקל כך הטיפים בסדר ניתן לגזור פתוח, לקלף את הרקמה שמסביב על הקיר הקדמי של כלי השיט.
    3. שלישית, להשתמש ישר מיקרו-מלקחיים מלחציים ולהרים את הכלי כדי לחשוף את החלל האחורי. לאחר מכן, השתמש בעצות של המיקרו-המלקחיים מעוקל לקלף את הרקמה שמסביב על הקיר האחורי של כלי השיט. לבסוף, קיבול קירח ללא כל הרקמה הסובבת מחובר צריכה להיות מוצגת.
  2. לחלק או כפול מאתרים ומפסיקים ולא לחלק של כלי השיט או רקמה.
    1. ראשית, קשרים כיכר שני לקשור על כלי השיט או רקמות באמצעות מיקרו-מלקחיים שני16. שנית, חתוך או רקמות בין שני הקשרים ריבוע באמצעות מיקרו-מספריים.

4. הכנת השרוול, סטנטים לדרכי המרה

  1. להפוך את האזיקים של וריד שער הכבד, infrahepatic הנבוב באמצעות ציד ו-14 קטטרים תוך ורידי, בהתאמה, ואילו סטנט בכיס המרה בשימוש צנתר תוך ורידי 22-מד. האזיקים מורכבות של חלק הגוף וכן חלק אחיזה. השתמש fillister על החלק הגוף כדי לאבטח את הקיר כלי על גבי שהקפל (איור 1).

5. קיבוע של החולדות והרדמה

  1. הנח בעדינות את החולדה לואיס בתיבת אינדוקציה עם 5% איזופלוריין מעורבב עם חצי ליטר/דקה חמצן כדי לגרום הרדמה אינהלציה. נטר את תדירות הנשימה של העכברוש כדי למנוע מוות לא צפוי שנגרם ממנת יתר של איזופלוריין. להפחית את ריכוז איזופלוריין ל-2% כדי לשמור על הרדמה כאשר העכברוש אינו מגיב לגירוי כאב.
  2. לעבור את החולדה קרש עץ אלון 30 ס"מ על 30 ס"מ מכוסה על ידי מגבת סטיריליים mat כירורגי, ולמקם את החולדה במצב פרקדן. לקשור את ארבעת הגפיים של העכברוש באמצעות הקלטת המדיאלי ולאחר מכן לתקן את הקלטת עם נעצים ארבע. לחטא את העור באמצעות אלכוהול 70% אחד וזמן iodophors שלוש פעמים.

6. התורם המבצע

  1. חשיפת השדה פעיל
    1. חותכים חתך רוחבי קטן על הבטן העליונה כדי transect בכלי הדם הדו-צדדיים הצפק נחות באמצעות של coagulator חשמלי.
    2. להרחיב את החתך רוחבי קרוב השוליים costal על הבטן העליונה באמצעות מספריים כירורגיים.
    3. הפוך ולתקן את קיר הבטן העליונה ואת תהליך מצאתי, בהתאמה, לצד הגולגולת.
    4. תעבור המעי הבטני עם שני מקלות צמר גפן רטוב. מכסים את המעי באמצעות פיסת גזה רטוב.
  2. לחתוך את הרצועות, זמירה את הווריד הנבוב suprahepatic (SHVC)
    1. לחתוך את falciformal רצועה, רצועה כלילית, רצועה משולש ברצף.
    2. חינם את הווריד השמאלי סרעפתית מהסרעפת באמצעות מיקרו-מלקחיים. ואז, כפול מאתרים ומפסיקים אותו באמצעות תפרים משי 6-0.
      הערה: אין לחלק את הווריד בשלב זה.
    3. לחתוך רצועה gastrohepatic באמצעות מיקרו-מספריים לשחרר באונה המזונבת נחות ואת hepatoesophageal רצועה העורק.
  3. Occluding את אספקת הדם של LLL ו- ML לפני כריתה (איור 2)
    1. תחילה, השתמש מעוקל מלקחיים לנתח בזהירות את הקיר האחורי של המטען נפוצות של PV המספק את LLL ואת האונה השמאלית החציוני (לאהוב את. החיים שלי) מ- parenchyma. שנית, כפול מאתרים ומפסיקים, ומחלקים אותו עם צינור המרה המתאים, עורק הכבד ביחד.
    2. לנתח, לחלק PV של RML בעדינות כי הוריד הזה מקרוב לאנאפוליס parenchyma בכבד.
      הערה: מומלץ 14 X הגדלה. שלא פוגעים PV של האונה ממש מעולה, אשר קרוב PV של RML.
    3. לזהות את עורק הכבד ואת צינור המרה של RML ממוקם בין PVs של RML, אוהב את החיים שלי. כפול מאתרים ומפסיקים ולחלק את עורק הכבד ואת צינור המרה של RML בעזרת תפרים משי 6-0.
      הערה: שינוי צבע של LLL ו מ ל אדום אדום כהה הוא מצביע על חסימה מוצלחת אספקת הדם. ידע מעמיק של האנטומיה כלי הדם חיונית לזיהוי, לנתח את כלי המתאים. מחקר קודם של עכברוש בבירור שממחישים את האנטומיה הכבד קורוזיה הטלות10.
  4. Resecting את LLL
    1. מאתרים ומפסיקים pedicle של LLL באמצעות במבניו תפר משי 3-0 כדי occlude את זרימת הדם וריד הכבד הלטראלי השמאלי. באמצעות מיקרו-מספריים, חותכים את הכבד מיד מעל מצדו כדי להסיר את הגידול בכבד.
  5. Resecting אהבת חיי
    1. תהדק את וריד הכבד השמאלי החציוני על ידי יתוש hemostatic מלקחיים שהוצבו על פיסורה החציוני (איור 3 א). להסיר את כל parenchyma הכבד של אהבת חיי שמעליה המלקחיים באמצעות מיקרו-מספריים.
    2. מקום suture פירסינג החודר parenchyma כבד מיד תחת המלקחיים סביב החציון הימני הכבד הווריד. לאחר מכן, לקשור קשר מרובע כדי מאתרים ומפסיקים את זה לפני שחרור המלקחיים.
    3. מניחים עוד שני תפרים פירסינג תחת המלקחיים להקיף שאר החתך פתוח של אהבת חיי. לאחר מכן, לקשור קשרים ריבוע שני כדי לסגור את שאר החתך. שחרור יתושים המלקחיים hemostatic כדי לבדוק אם הדימום.
  6. Resecting RML (איור 4)
    1. במקום יתושים מלקחיים hemostatic להקיף את בסיס RML במרחק של 0.5 ס מ SHVC (איור 4B). לאחר מכן, מלחציים צולבים הבסיס עם המלקחיים יתוש hemostatic כדי occlude את וריד הכבד נכון החציוני.
    2. באמצעות מיקרו-מספריים, להסיר את כל parenchyma הכבד של RML לאורך פני השטח העליון של המלקחיים. הקפד לעבוד מאוד קרוב לפני השטח של המלקחיים, עוזב גזע דק ורגיל של ML.
    3. המקום התפר פירסינג הראשון חודר parenchyma כבד תחת המלקחיים להקיף את החציון האמצעי הכבד הווריד. לאחר מכן, לקשור קשר מרובע כדי מאתרים ומפסיקים את וריד הכבד החציוני האמצעי. מקם את התפר פירסינג השני כדי מאתרים ומפסיקים את וריד הכבד החציוני בדיוק באותה שיטה. מניחים עוד שני תפרים פירסינג קרוב שאר החתך בעקבות את תיאור 6.5.2.
  7. זמירה את הווריד הנבוב infrahepatic (IHVC)
    1. לחתוך את מקבץ לחשוף את IHVC. שימוש מעוקל מיקרו-מלקחיים כדי לשחרר את IHVC ואת וריד הכליה נכון מן הרקמה שמסביב. לנתח, מאתרים ומפסיקים את הווריד יותרת הכליה, אשר מנקז לתוך IHVC מאחור.
    2. ביצוע של כריתת כליה נכון לאחר נבדק וריד הכליה נכון של עורק הכליה נכון לשמור מספיק אורך כלי הדם כדי להתקין את השרוול על גבי IHVC בשלב מאוחר יותר.
  8. התקנת סטנט בכיס המרה
    1. לגייס את צינור המרה (המע ר) מ hilum הכבד הראשון באמצעות מיקרו-מלקחיים. מאתרים ומפסיקים CBD בנקודת-הצלב של הווריד של מולדת, CBD באמצעות 6-0 בתפר משי.
    2. חותכים חתך רוחבי על הקיר הקדמי של CBD בצד הפרוקסימלית של מצדו. הכנס סטנט בכיס המרה, עשויים של קטטר תוך ורידי 22-מד, לתוך לומן של CBD דרך החתך. לאבטח סטנט בכיס המרה עם במבניו 6-0 בתפר משי. Transect CBD בין התפרים משי 6-0 שני.
  9. זמירה PV
    1. מאתרים ומפסיקים את הווריד מולדת שימוש של 6-0 בתפר משי דיסטלי כדי PV. בשלב הבא, מאתרים ומפסיקים את הווריד מולדת באמצעות 7-0 בתפר פוליפרופילן קרוב PV. Transect את הווריד מולדת בין אלה ligations שני. כפול מאתרים ומפסיקים ולחלק את וריד הטחול באותה דרך.
      הערה: השתמש בתפר פוליפרופילן 7-0 כדי מאתרים ומפסיקים את הכלי כדי קשר מצדו קטן יותר בהשוואה לזה של 6-0 את התפר משי. קשר גדול עלולים להפריע ההתקנה השרוול בשלב האחרון. הקיר כלי הדם של מולדת עורק, וריד הטחול הוא דק, כך ומניפולציות עדינות חיוניים בזמן. יש לקרוא מאמר שפורסם בעבר עם טכני יותר תיאורים ואיורים לנתח ועל חלוקת וריד מולדת של וריד הטחול לפני המבצע17.
  10. זמירה עורק הכבד נפוץ (צ'ה)
    1. בזהירות חינם את צ'ה ואת פלוקה שני שלה, פא את העורק gastroduodenal (GDA), מן הרקמה שמסביב באמצעות מיקרו שני-מלקחיים. כפול מאתרים ומפסיקים את GDA בעזרת תפרים משי 6-0 על ההסתעפות של צ'ה כדי GDA.
  11. Heparinizing, פרפוזיה השתל כבד
    1. להזריק 50 IU של הפארין ב 1 מ"ל של תמיסת מלח דרך הווריד של הפין. המתן 5 דקות כדי להשיג heparinization מערכתית.
    2. . מלחציים צולבים PV, IHVC ומאתגר באמצעות שלושה מעוקל מיקרו-serrefines כדי occlude זרימת דם הכבד. לבצע חתך קטן על הקיר הקדמי של PV להכניס צנתר 22-מד. Perfuse השתל כבד חלקית עם תמיסת מלח ב 4 ° C דרך הקטטר תחת לחץ של 20 cmH2O.
    3. במהירות רבה חתך לפתוח את חלל בית החזה ואת intrathoracic הנבוב באמצעות מספריים כירורגיים כדי לנקז את הדם, perfusate. לא מפסיקים את זלוף עד הצבע של כל חלקי השתל הכבד הופך צהוב בצורה אחידה.
  12. Explanting השתל כבד חלקית
    1. Transect את הווריד סרעפתית שמאל בין ligations שני (שמתואר 6.2.2) באמצעות מיקרו-מספריים.
    2. לאחר מכן, transect את SHVC קרוב הסרעפת כדי לשמור על כלי הדם לאורך כמה שיותר זמן. Transect PV ברמה של הווריד של הטחול באמצעות מיקרו-מספריים. לחלק את GDA בין ligations זוגי, transect את צ'ה קרוב המטען צליאק.
    3. Transect בכלי הדם האדרנל בצד דיסטלי של 6-0 משי מצדו ממוקם ב- 6.7.2. Transect את IHVC ברמה של הווריד השמאלי של הכליות באמצעות מספריים כירורגיים.
    4. בלו והעברת הכבד חלקית על צלחת הגב-טבלה (תבשיל תרבות 30 מ מ) מלא עם תמיסת מלח ב 4 º C.

7. חזרה טבלה מבצע (שתל הכנה)

  1. התקנת את האזיקים כלי הדם (איור 5)
    1. משוך את PV דרך לומן של מגבון עשה עם צנתר תוך ורידי ציד באמצעות מיקרו-מלקחיים. באופן זמני לתקן את השרוול ידית ואת PV יחד באמצעות מלחציים כלי. אוורט הקיר כלי PV כדי לכסות את המשטח החיצוני של השרוול. לאבטח כלי לקיר, השרוול בעמדה בתפר משי במבניו 6-0.
      הערה: אל תסובבו את כלי הקיבול. הידית השרוול צריך להישמר בכיוון בשעה 12.
    2. התקן שהקפל IHVC בעקבות התיאורים ב 7.1.1.
  2. לקבוע מראש את התפרים שני על גבי SHVC
    1. לחדור את הקיר כלי של SHVC מ מחוץ ל בתוך משתמשת בשני 7-0 פוליפרופילן תפרים לאורך בשעה 3, בשעה 9 כיוונים, בהתאמה.
      הערה: לא לקשור קשר.
  3. שמירה על השתל
    1. לטבול השתל כבד חלקית בתוך תמיסת מלח ב 4 ° C לשימור לאחר הניתוח חזרה-טבלה.

8. הנמען מבצע

  1. חזור פי הפרוצדורות ב 6.1-6.2 6.7, למעט כריתת כליה נכון, של הנמען כדי לחשוף את שדה פעיל, transect הרצועות ולחיתוך בכלי הדם.
  2. הכנת IHVC, צינור המרה, עורק הכבד, וריד שער הכבד של הנמען
    1. ראשית, לגייס את המקטע של IHVC למטה הווריד כליות. שנית, מאתרים ומפסיקים את כלי נכון יותרת הכליה באמצעות 6-0 בתפר משי. שלישית, לגייס CBD מ hilum הכבד הראשון באמצעות מיקרו-מלקחיים.
      הערה: לא לקצץ את רקמת שומן סביב CBD.
    2. Transect CBD-ההסתעפות הראשון ב hilum הכבד לאחר מצדו כפול באמצעות 6-0 בתפר משי. לאחר מכן, transect את פא באמצעות מיקרו-מספריים מיד לאחר מצדו כפול באמצעות 6-0 בתפר משי. לגייס את המקטע של PV מ hilum הכבד לוריד מולדת.
  3. גיוס האחורי של הכבד
    1. . משכי הנמען כבד בצד שמאל באמצעות שני מקלות צמר גפן. לאחר מכן, מנותקת רצועה בחלק האחורי של הכבד SHVC לוריד הכליה נכון כפי שמתואר במאמר מטמיעים הקודם18. אחרי זה, מציגים גומייה בחלל האחורי של SHVC.
  4. הכנת את מכשירים וחומרים במהלך שלב anhepatic
    1. בדוק מחדש את הזמינות של כל הכלים הנדרשים בשלב anhepatic, כגון מזרק 5 מ עם מחט מעוקל, מחזיק מיקרו-מספריים, מיקרו מחט, מיקרו-מלקחיים, מלקחיים מיקרו-hemostatic שני, התפרים פוליפרופילן שני 7-0, 6-0 חומר תפרים משי.
      הערה: בחיפוש אחר חומרים או כלי נגינה עשויה להאריך את שלב anhepatic.
  5. Excising הכבד של הנמען
    1. . מלחציים צולבים IHVC מיד מעל וריד הכליה באמצעות מלחציים כלי ו- PV מיד מעל הווריד מולדת. להקליט את משך השלב anhepatic מרגע זה עד לפרסומו את המלחציים ב- PV.
    2. להפחית את ריכוז איזופלוריין ל- 0.5% באופן מיידי.
    3. למשוך את SHVC ואת הסרעפת למטה על ידי הלהקה גומי מראש. תהדק את החלקים של הסרעפת יחד עם intrathoracic הנבוב באמצעות מלחציים בולדוג, שמירה על מרחק של 0.5 ס מ כדי SHVC.
      הערה: לא תהדק את הריאות של העכברוש.
    4. באמצעות מיקרו-מספריים, חתך בדופן כלי SHVC בקפידה לאורך הקצה העליון של parenchyma כבד כדי לשמור על הקיר כלי הדם כמה שיותר זמן.
    5. Transect PV-ההסתעפות הראשון ב hilum הכבד באמצעות מיקרו-מספריים. לאחר מכן, transect הכלילי התחתון parenchyma של האונה נכון נחות, במקום הקיר כלי, עוזב parenchyma הכבד במבניו סביב הווריד הנבוב. לשמור את חוד החנית באונה נכון נחות ממרחק של 4 מ מ IHVC. לאחר transecting את כלי הדם, תעבור הכבד כל חלל הבטן.
  6. שיחזור של SHVC
    1. מקום השתל כבד חלקית orthotopically חלל הבטן. פירס בדופן הכלי SHVC מ פנימה כדי בחוץ לאורך ההוראות בשעה 3 ו-9 באמצעות שני התפרים מראש. הצמד את התפרים שני מימין לאחר שהם קשורות לתוך קשר עם קצוות משלהם.
    2. פירס SHVC הקיר כלי מ מחוץ ל בתוך קרוב הקשר בשעה 3 כיוון כדי להחדיר את המחט של התפר השהייה ב נכון לתוך לומן כלי הדם.
    3. Anastomose הקיר האחורי של SHVC מאת בתפר רץ לתוך לומן וסקולרית מהכיוון בשעה 3 לכיוון בשעה 9.
    4. בפינה של הכיוון בשעה 9, פירס הקיר כלי מ פנימה כדי מחוץ קרוב הקשר כדי להחדיר את המחט אל מחוץ לכלי הדם לומן.
    5. להשתמש את. התפר כדי anastomose הקיר הקדמי בתפר רץ מחוץ לומן וסקולרית מהכיוון בשעה 9 3 השעה כיוון. לבסוף, לקשור את התפר עם סוף משלו 3 פעמים (איור 6).
      הערה: להזריק 3-5 מ"ל של תמיסת מלח לתוך לומן של SHVC המשוחזרת כדי לאלץ את בועות האוויר לפני האחרון 2-3 תפרים. ניתן למצוא תיאור מפורט יותר של SHVC השקה המאמר על ידי. Delriviere et al. 19.
  7. שיחזור PV
    1. הצב התפרים פוליפרופילן שני של 7-0 בסוף PV של הנמען בעקבות התיאור ב- 7.2. משוך שתי התפרים בכיוון ההפוך כדי להאריך את הקיר כלי. לתקן את התפרים שני באמצעות מלקחיים hemostatic שני של מיקרו-יתושים.
    2. להזריק כ 1 מ"ל של תמיסת מלח לתוך לומן כלי הדם של PV של הנמען כדי לאלץ את בועות האוויר. להוסיף במהירות שהקפל וריד שער לתוך לומן כלי הדם של PV של הנמען לכפות כאשר הוא נפתח באמצעות מיקרו-מלקחיים. לאבטח ההשקה השרוול באמצעות בתפר משי במבניו 6-0. . מלחציים צולבים צ'ה.
  8. פגיעה reperfusion כדי השתלת כבד
    1. לשחרר את המלחציים על SHVC ועל PV ברצף כדי reperfuse השתל בכבד. רשום את הזמן של שלב anhepatic. בדוק אם יש דימום של ההשקה. להגדיל את ריכוז איזופלוריין ל- 1-2% לפי התגובה של העכברוש הגירוי לכאב.
  9. שיחזור של IHVC
    1. להזריק 1 מ"ל של תמיסת מלח לתוך לומן כלי הדם של IHVC של הנמען כדי לאלץ את הבועות אוויר. הכנס שהקפל לתוך לומן וסקולרית גליל של IHVC, אשר נתמך על ידי parenchyma כבד במבניו (איור 7). מציג 6-0 בתפר משי דרך החלל האחורי של IHVC. במהירות לאבטח ההשקה השרוול באמצעות 6-0 בתפר משי.
    2. שחרר את התפסים כלי שני ב IHVC כדי להפעיל מחדש את זלוף. חתוך את parenchyma הכבד שמסביב בזהירות מעל התפר משי במבניו באמצעות מיקרו-מספריים.
  10. שיחזור עורק הכבד
    1. לחדור את הקיר כלי של צ'ה של השתל כבד מן בחוץ כדי בתוך משתמשת בשני 11-0 פוליפרופילן תפרים בשעה 3 ו-9 כיוונים, בהתאמה. Occlude את זרימת הדם של צ'ה, GDA של הנמען באמצעות שני מעוקל מיקרו-serrefines.
    2. Transect את פא של הנמען מבסיסה לחשוף לומן כלי הדם באמצעות מיקרו-מספריים. להגדיל את לומן כלי הדם של פא של הנמען על ידי חיתוך חלק של הקיר כלי longitudinally כדי להכיל את הקוטר של צ'ה של השתל בכבד.
    3. Anastomose את צ'ה של השתל כבד פא מוגדל באופן הקצה לצד בטכניקה תפר פועל המתוארות עבור ההשקה SHVC (8.6.2-8.6.7).
      הערה: איורים מפורט ניתן למצוא במאמר מאת הואנג ואח14.
  11. שיחזור CBD
    1. להעביר את המעי חזרה לתוך חלל הבטן כדי לצמצם את המרחק בין שני הקצוות של המרה. לבצע חתך רוחבי על הקיר הקדמי של המרה של הנמען.
    2. לנתץ סטנט בכיס המרה של השתל כבד חלקית כדי להכניס אותו לתוך לומן של המרה של הנמען באמצעות חתך רוחבי. לאבטח סטנט באמצעות 6-0 בתפר משי במבניו.
    3. לקשור את התפרים 6-0 משי במבניו שני בצינור המרה אחד לשני כדי להפחית את המתח של ההשקה.
  12. סוגרים את הבטן
    1. סגור את הבטן בשתי שכבות באמצעות תפרים משי 3-0 בתבנית תפר פועל.

9. לאחר הניתוח טיפולים (שיכוך כאבים, אנטיביוטיקה)

  1. להתייחס לכל הנמענים עם 0.1 מ"ג/ק"ג. הבופרנורפין subcutaneously. לנהל הספורוקסים (16 מ"ג/ק"ג) subcutaneously בנוסף התרופה להרגעה. מציעים מי ברז, מעבדה סטנדרטיים צ'או בעלי חיים חולדות ad libitum.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

תוצאות

בסך הכל, 31 מקרים של עכברוש arterialized syngeneic PLTx הושלמו באמצעות פרוטוקול זה. כל הנמענים שרדו עד סוף הזמן תצפית. משקל הגוף של הנמענים החלה להתאושש לאחר יום לאחר הניתוח (POD) 4. השיפוע של משקל הגוף היה קרוב לזה של עכברוש לואיס נורמלי אחרי 6 POD (איור 8), ומזה משתמע בעקיפין ?...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

PLTx עכברוש הוא הליך המיקרוכירורגית מתוחכם עם תוכנית אימונים גבוה עלות, זמן משך20. המורכבות של העכברוש PLTx פרוטוקול מנעה חוקרים באמצעות מודל זה בעל חיים. לעומת עכברוש בגודל מלא LTx, עכברוש PLTx מציג את microsurgeon לא רק עם האתגר של הליך ההשתלה, אלא גם עם האתגר של הכבד כריתה של חיה קטנה. לכן, ?...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

כל המחברים יש אינטרסים סותרים לא לחשוף.

Acknowledgements

מחקר זה נתמך על ידי הלאומי מדעי הטבע קרן של סין (מענק מס 81501382) ג'ג'יאנג המחוז מדעי הטבע קרן של סין (מענק מס ' LQ13H100003, LQ16H100002).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
Surgical microscopeMöller-Wedel, Germany654359
Light sourceOSRAM (China) Lighting Co., Ltd64627
Isoflurane VaporizerMIDMARK CorporationVIP3000
IsofluraneBaxter Healthcare Corporation40032609For Inhalation anesthesia
Normal SalineZhejiang Tianrui Pharmaceutical Co., Ltd.716092103
Povidone Iodine SolutionHANGZHOU MINSHENG PHARMACEUTICALH33021567For disinfection
Hemostatic forcepsShanghai Medical Instruments(Group) LtdJ31020
Surgical scissorsShanghai Medical Instruments(Group) LtdJC2116
Needle-holderShanghai Medical Instruments(Group) LtdJ32030
Dressing ForcepsShanghai Medical Instruments(Group) LtdJ42020
Mosquito hemostatic forcepsShanghai Medical Instruments(Group) LtdW40340For liver resection; For retracting the stay sutures. 
Micro-scissorsShanghai Medical Instruments(Group) LtdWA1040
Micro needle-holderShanghai Medical Instruments(Group) LtdWA2060
Curved micro typing forcepsShanghai Medical Instruments(Group) LtdWA3061
straight micro typing forcepsShanghai Medical Instruments(Group) LtdWA3060
Micro hemostatic forcepsShanghai Medical Instruments(Group) LtdWA3020
Bulldog clampShanghai Medical Instruments(Group) LtdXEC350
Vessel clampsShanghai Medical Instruments(Group) LtdW40160
Micro Serrefine-curved Fine Science Tools, Inc18055-05
DacryosyrinxShi Zhuo medical instruments Co., Ltd.5# curveUse as the curved needle for forcing out the air bubbles in the vascular lumen
Sterilized gauze swabsFuqing Health & Integral Medical20230R
5mL syringeZhejiang Yusheng Medical Instrument Co.,Ltd811932416
18G needlesShanghai Kindly Enterprise Development Group Co., Ltd01-014For fixing the upper abdomen wall
Intima II 22G intraveous catheterBecton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd.383207yFor making biliary stent; For infusing perfusate
7-0 polypropylene suturesNingbo Medical Needle Co., Ltd151026For SHVC anastomsis
6-0 silk sutureShanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd2650182For ligation
Culture dish (100mm)Corning Incorporated430165used in back table for storage ice. The back table dish was placed on it. 
Culture dish (30 mm)Corning Incorporated3296As a vessel for organ preservation
Angiocath 12G intravenous catheterBecton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd.382277For making a IHVC cuff
Angiocath 14G intravenous catheterBecton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd.382269For making a PV cuff
Buprenorphine (hydrochloride)Tianjin Institute of Pharmaceutical Research Pharmaceutical Co., LtdH12020275For analgesic
Cefuroxime sodium for injectionEsseti FarmaceuticiS.r.lH20160013As an antibiotics

References

  1. Yan, J. Q., Becker, T., Peng, C. H., Li, H. W., Klempnauer, J. Split liver transplantation: a reliable approach to expand donor pool. Hepatobiliary Pancreat Dis Int. 4, 339-344 (2005).
  2. Xia, R., Emond, J. C. Orthotopic partial liver transplantation in the rat: a model of 70% hepatectomy and reduced size liver transplantation. Transplantation. 56, 1041-1043 (1993).
  3. Omura, T., Ascher, N. L., Emond, J. C. Fifty-percent partial liver transplantation in the rat. Transplantation. 62, 292-293 (1996).
  4. Foss, A., et al. Function of reduced-size liver transplant in the rat. Res Exp Med (Berl). 197, 91-99 (1997).
  5. Nagai, K., Yagi, S., Uemoto, S., Tolba, R. H. Surgical procedures for a rat model of partial orthotopic liver transplantation with hepatic arterial reconstruction. J Vis Exp. , e4376(2013).
  6. Sun, J., Qin, G., Wu, L., Wang, C., Sheil, A. G. Antigenic load and peripheral chimeric levels in entire and partial liver allograft recipients. Microsurgery. 21, 183-187 (2001).
  7. Ninomiya, M., et al. Deceleration of regenerative response improves the outcome of rat with massive hepatectomy. Am J Transplant. 10, 1580-1587 (2010).
  8. Yamanaka, K., et al. Effect of olprinone on liver microstructure in rat partial liver transplantation. J Surg Res. 183, 391-396 (2013).
  9. Wang, W., et al. Mesenchymal stem cells promote liver regeneration and prolong survival in small-for-size liver grafts: involvement of C-Jun N-terminal kinase, cyclin D1, and NF-kappaB. PLoS One. 9, e112532(2014).
  10. Madrahimov, N., Dirsch, O., Broelsch, C., Dahmen, U. Marginal hepatectomy in the rat: from anatomy to surgery. Ann. Surg. 244, 89-98 (2006).
  11. Martins, P. N., Theruvath, T. P., Neuhaus, P. Rodent models of partial hepatectomies. Liver Int. 28, 3-11 (2008).
  12. Kamada, N., Sumimoto, R., Kaneda, K. The value of hepatic artery reconstruction as a technique in rat liver transplantation. Surgery. 111, 195-200 (1992).
  13. Steger, U., Sawitzki, B., Gassel, A. M., Gassel, H. J., Wood, K. J. Impact of hepatic rearterialization on reperfusion injury and outcome after mouse liver transplantation. Transplantation. 76, 327-332 (2003).
  14. Huang, H., et al. A novel end-to-side anastomosis technique for hepatic rearterialization in rat orthotopic liver transplantation to accommodate size mismatches between vessels. Eur Surg Res. 47, 53-62 (2011).
  15. Bernal, J., et al. Guidelines for rodent survival surgery. J.Invest Surg. 22, 445-451 (2009).
  16. Johnson, A. J., Stulting, R. D. Ophthalmic Microsurgical Suturing Techniques. Macsai, M. S. , Springer. Berlin Heidelberg. 21-28 (2007).
  17. Delriviere, L., et al. Detailed modified technique for safer harvesting and preparation of liver graft in the rat. Microsurgery. 17, 690-696 (1996).
  18. Oldani, G., Lacotte, S., Morel, P., Mentha, G., Toso, C. Orthotopic liver transplantation in rats. J Vis Exp. , (2012).
  19. Delriviere, L., et al. Technical details for safer venous and biliary anastomoses for liver transplantation in the rat. Microsurgery. 18, 12-18 (1998).
  20. Jin, H., et al. Preliminary experience of a PDCA-cycle and quality management based training curriculum for rat liver transplantation. J Surg Res. 176, 409-422 (2012).
  21. Selzner, N., Selzner, M., Tian, Y., Kadry, Z., Clavien, P. A. Cold ischemia decreases liver regeneration after partial liver transplantation in the rat: A TNF-alpha/IL-6-dependent mechanism. Hepatology. 36, 812-818 (2002).
  22. Tanaka, H., Hashizume, K., Enosawa, S., Suzuki, S. Successful transplantation of a 20% partial liver graft in rats: a technical innovation. J Surg Res. 110, 409-412 (2003).
  23. Bockhorn, M., et al. Erythropoietin treatment improves liver regeneration and survival in rat models of extended liver resection and living donor liver transplantation. Transplantation. 86, 1578-1585 (2008).
  24. Martins, P. N., Neuhaus, P. Surgical anatomy of the liver, hepatic vasculature and bile ducts in the rat. Liver Int. 27, 384-392 (2007).
  25. Kamada, N., Calne, R. Y. Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage. Transplantation. 28, 47-50 (1979).
  26. Kashfi, A., et al. A review of various techniques of orthotopic liver transplantation in the rat. Transplant.Proc. 37, 185-188 (2005).
  27. Wain, R. A. J., Hammond, D., McPhillips, M., Whitty, J. P. M., Ahmed, W. Surgical Tools and Medical Devices. Ahmed, W., Jackson, M. J. , Springer International Publishing. 545-562 (2016).
  28. Huang, H., et al. Hepatic arterial perfusion is essential for the spontaneous recovery from focal hepatic venous outflow obstruction in rats. Am J Transplant. 11, 2342-2352 (2011).
  29. Czigany, Z., et al. Improving Research Practice in Rat Orthotopic and Partial Orthotopic Liver Transplantation: A Review, Recommendation, and Publication Guide. Eur Surg Res. 55, 119-138 (2015).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

134hepatectomyarterialization

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved