Yazarlar
Bize Ulaşın

Oturum Aç

Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir. Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.

Bu Makalede

  • Özet
  • Özet
  • Giriş
  • Protokol
  • Sonuçlar
  • Tartışmalar
  • Açıklamalar
  • Teşekkürler
  • Malzemeler
  • Referanslar
  • Yeniden Basımlar ve İzinler

Özet

Burada, yeniden arterialized sıçan kısmi karaciğer nakli ile ilgili bir protokol sunulmuştur. Özellikle, % 70 karaciğer rezeke vivo içinde gemi odaklı hepatectomy Güncellenme Zamanı bir tekniğin kullanmaktı. Hepatik arter bir uç-yan şekilde yeniden. Manşet tekniği infrahepatic vena cava anastomoz süresini kısaltmak için güncellenmiştir.

Özet

Bölünmüş karaciğer nakli ve yaşam karaciğer bağışı karaciğer transplantasyonu klinikte karaciğer organları daha verimli bir şekilde kullanmak için geliştirilmiştir. Bu cerrahi arkasında mekanizması daha iyi anlamak için bir sıçan kısmi karaciğer transplantasyonu (PLTx) modeli ilgili cerrahi çalışmalar için kurulmuştur. Sıçan PLTx modeli karmaşıklığı nedeniyle, ayrıntılı açıklamalar ile bir protokol gereklidir. Bir makale yayınlanan daha önce % 50 sıçan PLTx ulaşmak için ex vivo hepatectomy kullanıldığı bir protokol bildirdi. Bu iletişim kuralı aksine, biz bir vivo içinde % 70 hepatectomy ile yeniden arterialized bir PLTx tanıttı. Güncellenme Zamanı bir gemi odaklı hepatectomy sıçan mikrocerrahi yordamı iyileştirmek için PLTx dahil oldu. Portal damarları ve hepatik arter sol yan lob ve medyan LOB tek tek parçalara ve böylece kalan karaciğer güdük kanama olasılığını azaltarak karaciğer parankimi kaldırılmasını önce bakmaksızın. Ayrıca, ortak hepatik arter ile genişlemiş uygun hepatik arter arasındaki bir uç-yan gemi anastomoz hepatik arter yeniden arterialize için kullanılmaya başlandı. Bu uç-yan gemi anastomoz tekniği kullanarak, anastomoz çapını, böylece el dikiş zorluğu azalan ve anastomoz a_ılabilinirse yüksek orandaki Bakımı genişletilmiştir. Ayrıca, infrahepatic vena kava manşet anastomoz biraz güncellenmiştir. Bir alıcının vena kava çevresinde çevresel karaciğer parankimi bir bölümünü vasküler Lümen üç boyutlu şeklini korumak için manşet anastomoz sırasında korundu. Karaciğer parankimi bu bölümünü anastomoz tamamlandıktan sonra kaldırıldı. Bu değişiklik ile kalış dikiş yerleşimini içeren adım, ihmal böylece daha da manşet anastomoz zaman kısaltma. Sıçan PLTx bu iletişim kuralını kullanarak, bir düşük karaciğer enzim düzeyi, sağlam bir karaciğer lobular mimari ve yüksek sağkalım oranı mikrocerrahi sonra elde edildi.

Giriş

Şu anda, bağışlanan karaciğer organ sayısı ile bağışlanan bir karaciğer için bekleyen hasta sayısı arasında büyük farklılık yoktur. Karaciğer organ sıkıntısı küresel bir sorundur. Donör havuzu genişletin, karaciğer transplantasyonu (LTx) ve canlı donör LTx bölmek için kısmi bir karaciğer nakli1olarak kullanmak için geliştirilmiştir.

Kısmi karaciğer transplantasyonu (PLTx) arkasında mekanizması daha fazla araştırmak için kurulan2,3,4,5ilgili hayvan modelleri olmuştur. Fare PLTx, karaciğer lobları canlı donör LTx koşulları taklit ve LTx, sırasıyla, insanda bölmek için rezeke vivo içinde ve ex vivo vardır. Bir kağıt olarak Görüntülenmiştir deneyler günlük Yayınlanan % 50 ispiyoncu PLTx ex vivo hepatectomy5kullanarak içeren detaylı bir protokol sundu. Ancak, bir vivo içinde hepatectomy bir fareyle PLTx henüz görüntülenmeyecektir literatürde bildirilmemiştir.

Vivo ve ex vivo hepatectomies arasındaki fark yanı sıra, bir hepatectomy sahne tekniği de sonucunu PLTx. şu anda, PTLx sıçan kullanarak birçok cerrahi çalışmalarda belirlemede önemli bir rol oynar model, karaciğer lobları karaciğer LOB2,3,6,7,8,9Transpediküler basit bir ligasyonu koyduktan sonra rezeke. Ancak, rezeksiyon farklı karaciğer lobları olarak tüm karaciğer lobları için uygun değildir önce basit bir ligasyonu yerleştirerek farklı şekil ve boyutlarda vardır. Medyan LOB basit bir ligasyonu üssünde vena kava, sonunda kısmi karaciğer nakli10,11çıkış etkileyebilecek bir daralma neden bir yüksek risk taşır. Bu nedenle, fare hepatik anatomi bilgisine dayalı bir güncelleştirme hepatectomy tekniği sıçan PTLx alanında gereklidir.

Bu çalışmada açıklanan protokolünde Güncellenme Zamanı bir gemi odaklı % 70 hepatectomy sıçan PLTx yordam dahil oldu. Portal damarları ve hepatik arter sol yan lob (LLL) ve medyan LOB (ML) disseke ve ayrı ayrı karaciğer parankimi kaldırılmasını önce ayrıldı. O zaman, LLL ve ML hepatik damar dikiş piercing tarafından tane. Bireysel d ve birden çok delici dikiş yerine kullanarak tarafından basit bir ligasyonu yerleştirerek, ML kalıntısı güdük vena kava yayılmış başardı. Bu nedenle, cerrahi ligasyonu tarafından neden infrahepatic vena kava daralma kaçınılması. Ayrıca, tıkanıklığı karaciğer parankimi kaldırılması böylece deneyler11kan kaybı etkisi en aza indirerek kalan karaciğer stump, kanama oranı azalmıştır önce bireysel d tarafından LLL ve ML kan arz.

Microsurgeons için bir karaciğer nakli uygun hepatik arter (PHA) bu geminin son derece küçük çaplı nedeniyle yeniden oluşturmak için önemli bir sorundur. LTx yeniden arterialization gerçekten gerekli olup olmadığı sorusu hala tartışma12,13,14altında olsa da, hepatik arter yeniden inşa için sayısız mikrocerrahi teknikleri önerilen14 olmuştur . Burada, bir uç-yan şekilde genişlemiş PHA ortak hepatik arter (CHA) anastomoses karaciğer nakli yeniden arterialization bir roman tekniği tanıtmak. Bu uç-yan tekniği kullanarak, iki hepatik arterler daha büyük çaplı bir anastomoz ile bağlanır. Anastomoz çapı daha büyük olduğunu, el dikiş daha kolay gerçekleştirmek için ve büyük anastomoz a_ılabilinirse iyileşme olur.

Protokol

Tüm yordamları kemirgen cerrahi Wenzhou Tıp Üniversitesi hayvan ilke ve refahı Komitesi 15tarafından onaylanmış yönergeleri takip etti.

1. hayvanlar

  1. Bağış ve alıcıların 250-350 g ağırlığında erkek Lewis rats kullanın.

2. ameliyat çevre

  1. 7 X 20 X arasında değişen bir büyütme ile cerrahi mikroskop altında tüm mikrocerrahi yordamları gerçekleştirin. Operasyonda kullanmadan önce tüm cerrahi aletler sterilize.
    Not: Ameliyathane ve ameliyat masasına temiz ancak değil steril değildir.

3. temel mikrocerrahi manevralar

  1. Ücretsiz, incelemek ve gemi seferber.
    1. İlk olarak, düz mikro-forseps çevreleyen doku gemide kaldırmak için kullanın.
    2. İkinci olarak, tekrar tekrar ve yavaşça açıp öyle ki iyi ipuçları kesmek ve çevreleyen doku geminin ön duvarında soyma eğri mikro-forseps ipuçları kapatın.
    3. Üçüncü olarak, düz mikro-forseps kelepçe ve arka alan açığa çıkaracak olan gemi Asansör için kullanın. Sonra gemi posterior duvarda çevreleyen doku soyma için eğri mikro-forseps ipuçlarını kullanın. Son olarak, herhangi bir çevreleyen doku bağlı olmadan kel bir gemi sunulmalıdır.
  2. Bölmek veya çift ligate ve bir gemi veya doku bölün.
    1. İlk olarak, gemi veya iki mikro-forseps16kullanarak doku üzerinde iki kare knot kravat. İkinci olarak, gemi veya mikro-makas kullanarak iki kare düğümleri arasındaki doku kesti.

4. kol ve safra Stent hazırlanması

  1. Portal ven kelepçelerin olun ve infrahepatic vena kava 12'lik ve 14'lük intravenöz Kateterler, sırasıyla, safra stent kullanılan kullanırken bir 22'lik intravenöz kateter. Kelepçeleri bir vücut parçası ve kolu bölümü oluşur. Bir silindir başlı kol düğmesi (şekil 1) gemi duvara güvenliğini sağlamak için vücut parçası üzerinde kullanın.

5. anestezi ve fareler fiksasyonu

  1. Yavaşça Lewis fare ile %5 isoflurane inhalasyon anestezi ikna etmek için 0,5 L/dak oksijen ile karışık bir indüksiyon kutuya koyun. Aşırı dozda isoflurane tarafından neden beklenmedik ölümü önlemek için fareyi solunum sıklığını izlemek. İsoflurane 2 anestezi değiştirirken, fareyi ağrı uyarmaya yanıt vermiyor % konsantrasyon azaltmak.
  2. Steril cerrahi hasır havlu tarafından örtülü bir 30 cm x 30 cm meşe tahta fare taşımak ve fare sırtüstü pozisyonda yerleştirin. Medial bant kullanarak fare dört ekstremitelerin kravat ve daha sonra kaseti dört raptiye ile düzeltmek. % 70 alkol kullanarak cilt dezenfekte zaman ve iodophors üç kez.

6. donör işlemi

  1. Operatif alan açığa
    1. Enine küçük bir insizyon attım bir elektrik coagulator kullanarak bilateral inferior epigastrik damarları transect için üst karın bölgesinde kesti.
    2. Cerrahi makas kullanarak üst karın üzerinde kostal kenar boşluğu yakın enine kesi genişletir.
    3. Ters ve üst karın duvarı ve xiphoid süreci, sırasıyla, kafatası tarafına düzeltin.
    4. Bağırsak karın boşluğu iki ıslak pamuk çubuğu ile dışarı taşıyın. Gazlı bez ıslak bir parça kullanılarak bağırsak kapsar.
  2. Ligament kesme ve suprahepatic vena kava (SHVC) düzeltme
    1. Sırayla kestim falciformal bağ, koroner bağ ve üçgen bağ.
    2. Ücretsiz soldaki diyafragmatik mikro-forseps kullanarak diyaframdan damar. O zaman, çift 6-0 ipek sütür kullanarak ligate.
      Not: Bu adımda bu ven bölün değil.
    3. Ücretsiz aşağı kaudat LOB ve hepatoesophageal bağ ve Arter için mikro-makas kullanma belgili tanımlık gastrohepatic kiriş kesti.
  3. LLL ve ML kan akımı rezeksiyon (Şekil 2) önce occluding
    1. İlk olarak, kıvrımlı pensler LLL ve sol medyan LOB (hayatımı seviyorum) parankimi verir PV ortak gövde arka duvarına dikkatle incelemek için kullanın. İkinci olarak, çift ligate ve karşılık gelen safra kanalını ve hepatik arter ile birlikte bölün.
    2. İncelemek ve bu damar yakından karaciğer parankimi bağlıdır çünkü RML PV yavaşça ayırın.
      Not: 14 X büyütme önerilir. PV RML BD yakın sağ üst LOB zarar değil.
    3. Hepatik arter ve safra kanalını RML PVs arasında yer alan RML, tanımlamak ve hayatımı seviyorum. Çift ligate ve hepatik arter ve 6-0 ipek sütür kullanarak RML safra kanalını bölün.
      Not: LLL ve ML renkten koyu Kızıl, yani kızıl bir değişiklik başarılı tıkanıklığı kan akımı bir göstergesidir. Vasküler anatomisi hakkında eksiksiz bilgisi belirlenmesi ve karşılık gelen gemiler dissekan için esastır. Sıçan bir önceki çalışmada açıkça karaciğer anatomi korozyon yayınları10tarafından resimli.
  4. LLL sanıyordum
    1. Bir çevresel 3-0 ipek sütür sol yanal hepatik ven kan akışının doldurmak kullanarak LLL Transpediküler ligate. Mikro-makas kullanırken, Karaciğer karaciğer kitle kaldırmak için ligasyonu hemen yukarıda kesmek.
  5. Aşk hayatım sanıyordum
    1. Sivrisinek Kan durdurucu sargı forseps medyan yarığın (şekil 3A) yerleştirilen tarafından sol medyan hepatik ven kelepçe. Tüm karaciğer parankimi aşk hayatımı hemen üzerindeki mikro-makas kullanarak forseps kaldırmak.
    2. Yer altında hemen sol medyan hepatik çevreleyen forseps karaciğer parankimi nüfuz delici dikiş damar. Sonra bir kare forseps serbest bırakmadan önce ligate için düğüm.
    3. Başka bir iki delici dikiş açık belgili tanımlık kesme aşk geri kalanı benim hayatı çevreleyen forseps altında yerleştirin. O zaman, belgili tanımlık kesme kalan kapatmak için iki kare knot kravat. Yayın için kanama kontrol etmek için sivrisinek Kan durdurucu sargı forseps.
  6. RML (şekil 4) sanıyordum
    1. Sivrisinek Kan durdurucu sargı forseps RML SHVC (şekil 4B) için 0.5 cm uzaklıkta temelini çevreleyecek biçimde yerleştirin. O zaman, çapraz-kelepçe şu medyan hepatik ven doldurmak için sivrisinek Kan durdurucu sargı forseps kullanarak Bankası.
    2. Mikro-makas kullanarak, tüm RML forseps üst yüzeyi boyunca karaciğer parankimi kaldırmak. Çok sade ve ince güdük bir pipet bırakarak forseps, yüzeye yakın çalışmak emin olun.
    3. Orta medyan hepatik çevreleyen için yer altında forseps karaciğer parankimi delici ilk delici dikiş damar. Sonra bir kare orta medyan hepatik ven ligate için düğüm. Aynı yöntemi kullanarak şu medyan hepatik ven ligate ikinci delici dikiş yerleştirin. Başka bir iki delici dikiş 6.5.2 açıklamasında takip kesi geri kalanını yakın yerleştirin.
  7. İnfrahepatic vena kava (IHVC) düzeltme
    1. IHVC ortaya çıkarmak için retroperitoneum kesmiş. Eğri mikro-forseps ücretsiz olarak IHVC ve çevreleyen doku üzerinden Sağ renal ven için kullanın. İncelemek ve arka IHVC içine akmak şu adrenal ven ligate.
    2. Doğru nefrektomi Sağ renal ven ve IHVC üzerine kol daha sonraki bir adımda yüklemek için yeterli damar uzunluğu kaydetmek için sağ renal arter birleştirilmesi (ligasyon) sonra gerçekleştirin.
  8. Safra stent yükleme
    1. Ortak safra kanalını (CBD) mikro-forseps kullanarak ilk karaciğer hilus seferber. Pilor damarın çapraz noktada CBD ve 6-0 ipek dikiş kullanarak CBD ligate.
    2. CBD ligasyonu proksimal tarafındaki ön duvarında enine bir kesi kesti. 22'lik intravenöz kateter yolu ile belgili tanımlık kesme CBD Lümen içine yapılan safra stent, yerleştirin. Bir çevresel ile safra stent 6-0 ipek sütür güvenli. Transect CBD arasında iki 6-0 ipek sütür.
  9. PV kırpma
    1. 6-0 ipek dikiş PV için distal kullanarak Pilor ven ligate. Ardından, 7-0 polipropilen sütür PV yakın kullanarak Pilor ven ligate. Bu iki d arasında Pilor ven transect. Çift ligate ve splenik ven aynı şekilde bölün.
      Not: 7-0 polipropilen sütür ligate 6-0 ipek sütür ile kıyasla daha küçük bir tüp ligasyonu düğüm yapın yapabilmesi için kullanın. Büyük bir düğüm son adımda manşet kurulumu ile girişime neden olabilir. Pilor ven ve splenik ven damar duvarına ince, bu yüzden nazik manipülasyonlar sırasında diseksiyon gereklidir. Daha fazla teknik açıklamaları ve illüstrasyonlar anatomi ve Pilor ven ve splenik ven bölme hakkında daha önce yayımlanmış bir makaleye işlem17önce okunmalıdır.
  10. Ortak hepatik arter (CHA) bağlı olan Temizleme taşları
    1. Dikkatle CHA ve onun iki bifurcations, PHA ve gastroduodenal arter (GDA), iki mikro-forseps kullanarak çevre dokudan ücretsiz. Çift GDA CHA çatallanma, 6-0 ipek sütür kullanarak GDA ligate.
  11. Heparinizing ve karaciğer nakli Ventriküler
    1. 50 IU salin penis damar yolu ile 1 ml heparin enjekte. Sistemik heparinization elde etmek 5 dakika bekleyin.
    2. Çapraz-kelepçe PV, IHVC ve hepatik kan akımı doldurmak için üç eğri mikro-serrefines kullanarak CHA. Küçük bir insizyon attım bir 22'lik kateter eklemek için PV ön duvarında gerçekleştirin. Kısmi karaciğer nakli 20 cmH2O. baskısı altında kateter yolu ile 4 ° C'de salin ile sıvı
    3. Hızla kesik göğüs boşluğuna ve İntratorasik vena cava kan ve perfusate boşaltmak için Cerrahi makas kullanarak açın. Perfüzyon tüm kısmi karaciğer grefti rengini düzgün sarı hale gelene kadar sakın durma.
  12. Kısmi karaciğer nakli explanting
    1. Mikro-makas kullanarak iki d (açıklandığı 6.2.2) arasında sol diyafragmatik ven transect.
    2. Daha sonra damar uzunluğu mümkün olduğunca tutmaya SHVC diyafram yakın transect. Mikro-makas kullanarak splenik ven düzeyinde PV transect. GDA çift d arasında bölmek ve çölyak gövde yakın CHA transect.
    3. 6-0 ipek ligasyonu 6.7.2 içinde yer distal tarafındaki adrenal damarları transect. Cerrahi makas kullanırken sol renal ven düzeyinde IHVC transect.
    4. Tüketim ve transfer arka-tablo çanak (30 mm kültür çanak) kısmi karaciğer serum 4 ° C'de dolu

7. geri-tablo işlemi (greft hazırlık)

  1. Vasküler kelepçeleri (şekil 5) yükleme
    1. PV bir 12-gauge intravenöz kateter mikro-forseps kullanarak yapılan bir manşet Lümen üzerinden çek. Geçici olarak tamir manşet kolu ve birlikte bir damar kıskacı kullanılarak PV. Manşet dış yüzeyi kapsayacak şekilde PV damar duvar çıkar. Gemi duvar ve kol sirkumferansiyel 6-0 ipek sütür ile pozisyonda güvenli.
      Not: geminin büküm değil. Manşet kolu saat 12 yönünde tutulmalıdır.
    2. 7.1.1 yer alan açıklamalar takip IHVC manşet yükleyin.
  2. SHVC üzerine iki konaklama dikiş iyileştirilir
    1. SHVC gemi duvar nüfuz üzerinden dışında için iki kullanarak içinde 7-0 polipropilen 03: 00 ve 09: 00 yön, sırasıyla tasarlamak.
      Not: bir düğüm kravat değil.
  3. Dokuları koruyarak
    1. Kısmi karaciğer grefti arka-tablo işlemi sonra korunmasına ilişkin 4 ° C'de serum içinde bırakın.

8. alıcı işlemi

  1. 6.1 6.2 ve operatif bu alanın ortaya çıkarmak için alıcı içinde doğru nefrektomi dışında 6,7 yordamlarda ligament transect ve damarlara trim yineleyin.
  2. IHVC, safra kanalını, hepatik arter ve alıcının portal ven hazırlanıyor
    1. İlk olarak, sağ renal ven aşağı IHVC bölümünü seferber. İkinci olarak, 6-0 ipek dikiş kullanarak şu adrenal damarları ligate. Üçüncü olarak, mikro-forseps kullanarak ilk karaciğer hilus üzerinden CBD seferber.
      Not: CBD çevresinde yağ dokusunda kapalı döşeme değil.
    2. 6-0 ipek dikiş kullanarak Çift Kişilik ligasyonu sonra karaciğer hilus içinde çatallanma ilk, CBD transect. O zaman, mikro-makas 6-0 ipek dikiş kullanarak Çift Kişilik ligasyonu sonraki kullanarak PHA transect. Karaciğer hilus üzerinden PV Pilor ven için bölümünü seferber.
  3. Karaciğer arkası seferber
    1. Alıcının sol tarafında iki pamuk çubuğu kullanarak karaciğer geri çek. Sonra karaciğer arka belgili tanımlık kiriş SHVC şu adrenal ven bir önceki görüntülenmeyecektir makale18' açıklandığı gibi kesti. Bundan sonra bir lastik bant SHVC arka uzayda tanıtmak.
  4. Aletleri ve malzemeler anhepatic aşamasında hazırlanması
    1. Tüm aletler ve malzemeler anhepatic aşamasında, kavisli iğne ile 5 mL şırınga gibi gerekli kullanılabilirliği, mikro-makas, mikro-iğne tutucu, mikro-forseps, iki mikro-hemostatik forseps, iki 7-0 polipropilen sütür ve 6-0 yeniden denetle İpek suture maddi.
      Not: malzeme ve aletleri için arama anhepatic faz uzatmak.
  5. Alıcının karaciğerde bilincin
    1. Çapraz-kelepçe IHVC hemen bir gemi kelepçe ve PV hemen üstündeki Pilor damar kullanarak renal ven yukarıda. Kayıt anhepatic faz PV üzerinde kelepçe yayımlanıncaya kadar bu andan itibaren süresi.
    2. İsoflurane %0,5 konsantrasyon hemen azaltın.
    3. SHVC ve diyafram tarafından önceden ayarlanmış lastik bant aşağı çekin. Diyafram ile birlikte SHVC için 0.5 cm mesafe bakımı bir Bulldog kelepçe kullanarak İntratorasik vena kava bölümlerini kelepçe.
      Not: fareyi akciğer kelepçe değil.
    4. Mikro-makas kullanılarak, mümkün olduğunca vasküler duvar tutmak için dikkatli bir şekilde karaciğer parankimi üst kenarı boyunca SHVC damar duvarına kesme.
    5. Mikro-makas kullanarak karaciğer hilus ilk çatallanma, PV transect. O zaman, inferior vena kava sağ inferior LOB parankimi yerine vena kava çevresinde çevresel karaciğer parankimi bırakarak damar duvarında transect. Kesme kenarı sağ inferior LOB olarak 4 mm için IHVC unutmayın. Gemilerin transecting sonra bütün karaciğer karın boşluğu dışına taşıyın.
  6. SHVC yeniden yapılandırma
    1. Kısmi karaciğer grefti karın boşluğu orthotopically yerleştirin. SHVC içinde için dışında iki önceden ayarlanmış kal dikiş kullanarak 03: 00 ve 09: 00 yön boyunca damar duvarı delip. Bir düğüm kendi amaçları ile içine bağlılar sonra sağ ve sol iki konaklama dikiş çek.
    2. Sağ kalmak dikiş iğne damar Lümen tanıtmak için saat 3'te yönde SHVC gemi duvardan dışarı için iç düğüm yakın pierce.
    3. Saat 9 yönüne saat 3 yönden Lümen damar içinde çalışan dikiş tarafından SHVC arka duvarına anastomose.
    4. Saat 9 yönüne köşesinde, gemi duvardan içeri için dışarıda iğne damar lümen dışarı tanıtmak için düğüm yakın pierce.
    5. Bu dikiş 3 saat 9'dan yönden Lümen vasküler dışında çalışan dikiş kullanarak ön duvar anastomose kullanmak yönünde yön. Son olarak, dikiş, kendi son ile 3 kez kravat (şekil 6).
      Not: 3-5 mL serum dışarı hava kabarcıkları önce son 2-3 dikiş zorlamak için yeniden oluşturulan SHVC Lümen enjekte. SHVC anastomoz daha ayrıntılı bir açıklama-ebilmek bulunmak içinde belgili tanımlık eşya tarafından Delriviere vd. 19.
  7. PV yeniden yapılandırma
    1. PV alıcının 7.2 açıklamasında takip sonunda iki 7-0 polipropilen kalış dikiş yerleştirin. İki konaklama dikiş damar duvar genişletmek için ters yönde çek. İki mikro-sivrisinek Kan durdurucu sargı forseps kullanarak iki konaklama dikiş düzeltmek.
    2. Hava kabarcıkları zorlamak için alıcının PV vasküler Lümen içine yaklaşık 1 mL serum enjekte. Hızlı bir şekilde alıcının mikro-forseps kullanarak açıldığında zorlamak için PV vasküler Lümen portal ven manşet takın. Çevresel 6-0 ipek dikiş kullanarak manşet anastomoz güvenli. Çapraz-kelepçe CHA.
  8. Reperfüzyon karaciğer nakli için
    1. SHVC ve PV kıskaçları sağlanması karaciğer nakli için sırada. Anhepatic faz zamanını kaydetmek. Anastomoz kanama için kontrol edin. İsoflurane fare tepki ağrı uyarılması için göre % 1-2 konsantrasyonu artırmak.
  9. IHVC yeniden yapılandırma
    1. 1 mL serum fizyolojik içinde hava kabarcıkları zorlamak için alıcının IHVC vasküler Lümen içine enjekte. Manşet sirkumferansiyel karaciğer parankimi (Şekil 7) tarafından desteklenen IHVC silindirik vasküler Lümen içine yerleştirin. 6-0 ipek sütür IHVC arka uzayda tanıtmak. Hızlı bir şekilde 6-0 ipek dikiş kullanarak manşet anastomoz güvenli.
    2. İki gemi kıskaçları perfüzyon yeniden başlatmak için IHVC içinde. Çevredeki karaciğer parankimi dikkatle mikro-makas kullanarak sirkumferansiyel ipek dikiş yukarıda kapalı döşeme.
  10. Hepatik arter yeniden yapılandırma
    1. Karaciğer grefti CHA damar duvar nüfuz üzerinden dışında için iki kullanarak içinde 11-0 polipropilen 03: 00 ve 09: 00 yön, sırasıyla tasarlamak. İki eğri mikro-serrefines kullanan alıcı CHA ve GDA kan akışında doldurmak.
    2. Mikro-makas kullanarak vasküler Lümen ortaya çıkarmak için alıcının kendi kök, PHA transect. Karaciğer grefti CHA çapı boyuna karşılamak için gemi duvar parçası kesme tarafından alıcının PHA vasküler Lümen büyütmek.
    3. Karaciğer nakli için genişlemiş PHA CHA bir uç-yan şekilde SHVC anastomoz (8.6.2-8.6.7) açıklanan çalışan dikiş tekniği kullanılarak anastomose.
      Not: Ayrıntılı çizimler Huang ve ark14tarafından makalesinde bulunabilir.
  11. CBD yeniden yapılandırma
    1. Bağırsak, safra kanalını iki ucu arasındaki uzaklığı azaltmak için karın boşluğu içine geri taşıyın. Alıcının safra kanalı ön duvarında enine bir kesi gerçekleştirin.
    2. Kısmi karaciğer grefti safra stent alıcının enine kesi ile safra kanalı Lümen içine eklemek için aşağı çekin. 6-0 sirkumferansiyel ipek dikiş kullanarak stent güvenli.
    3. İki 6-0 sirkumferansiyel ipek dikiş safra kanalını anastomoz gerilimi azaltmak için birbirine bağla.
  12. Karın kapanış
    1. Karın içinde iki kat 3-0 ipek sütür çalışan dikiş deseni kullanarak kapatın.

9. ameliyat sonrası tedaviler (analjezi ve antibiyotik)

  1. Tüm alıcılar ile 0.1 mg/kg buprenorfin subkutan tedavi. Sefuroksim (16 mg/kg) subkutan yanı sıra analjezik ilacı vermek. Musluk suyu ve standart laboratuvar fareler ad libitumiçin hayvan yemek sunuyoruz.

Sonuçlar

Toplamda, bu iletişim kuralını kullanan syngeneic arterialized sıçan PLTx 31 olgu tamamlandı. Tüm alıcıların gözlem kıyamete kadar hayatta kaldı. Vücut ağırlığı alıcıları ile ameliyat sonrası (POD) 4 gün sonra geri başladı. Vücut ağırlığı eğimi normal Lewis ispiyoncu yakın POD hangi dolaylı olarak alıcı kurtarılması ima 6'dan sonra (şekil 8) olduğunu. Histolojik olarak, safra kanalını hafif bir proliferasyon alan kim...

Tartışmalar

Sıçan PLTx yüksek maliyet ve uzun süre20içinde bir eğitim programı ile sofistike bir mikrocerrahi işlemdir. Sıçan PLTx Protokolü karmaşıklığı araştırmacılar bu hayvan modeli kullanmasını engelledi. Tam boyutlu fare LTx ile karşılaştırıldığında, sıçan PLTx microsurgeon sadece bir nakli prosedürünün meydan aynı zamanda küçük bir hayvan karaciğer rezeksiyonu meydan sunar. Bu nedenle, tüm prosedürü ayrıntılı olarak açıklayan bir görüntülenmeyecektir mi...

Açıklamalar

Tüm yazarlar ifşa etmek çakışan hiçbir ilgi alanlarına sahip.

Teşekkürler

Bu araştırma Ulusal Doğa Bilimleri Foundation of China (Grant No. 81501382) ve Zhejiang il doğal Bilim Vakfı Çin (Grant No tarafından desteklenmiştir LQ13H100003 ve LQ16H100002).

Malzemeler

NameCompanyCatalog NumberComments
Surgical microscopeMöller-Wedel, Germany654359
Light sourceOSRAM (China) Lighting Co., Ltd64627
Isoflurane VaporizerMIDMARK CorporationVIP3000
IsofluraneBaxter Healthcare Corporation40032609For Inhalation anesthesia
Normal SalineZhejiang Tianrui Pharmaceutical Co., Ltd.716092103
Povidone Iodine SolutionHANGZHOU MINSHENG PHARMACEUTICALH33021567For disinfection
Hemostatic forcepsShanghai Medical Instruments(Group) LtdJ31020
Surgical scissorsShanghai Medical Instruments(Group) LtdJC2116
Needle-holderShanghai Medical Instruments(Group) LtdJ32030
Dressing ForcepsShanghai Medical Instruments(Group) LtdJ42020
Mosquito hemostatic forcepsShanghai Medical Instruments(Group) LtdW40340For liver resection; For retracting the stay sutures. 
Micro-scissorsShanghai Medical Instruments(Group) LtdWA1040
Micro needle-holderShanghai Medical Instruments(Group) LtdWA2060
Curved micro typing forcepsShanghai Medical Instruments(Group) LtdWA3061
straight micro typing forcepsShanghai Medical Instruments(Group) LtdWA3060
Micro hemostatic forcepsShanghai Medical Instruments(Group) LtdWA3020
Bulldog clampShanghai Medical Instruments(Group) LtdXEC350
Vessel clampsShanghai Medical Instruments(Group) LtdW40160
Micro Serrefine-curved Fine Science Tools, Inc18055-05
DacryosyrinxShi Zhuo medical instruments Co., Ltd.5# curveUse as the curved needle for forcing out the air bubbles in the vascular lumen
Sterilized gauze swabsFuqing Health & Integral Medical20230R
5mL syringeZhejiang Yusheng Medical Instrument Co.,Ltd811932416
18G needlesShanghai Kindly Enterprise Development Group Co., Ltd01-014For fixing the upper abdomen wall
Intima II 22G intraveous catheterBecton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd.383207yFor making biliary stent; For infusing perfusate
7-0 polypropylene suturesNingbo Medical Needle Co., Ltd151026For SHVC anastomsis
6-0 silk sutureShanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd2650182For ligation
Culture dish (100mm)Corning Incorporated430165used in back table for storage ice. The back table dish was placed on it. 
Culture dish (30 mm)Corning Incorporated3296As a vessel for organ preservation
Angiocath 12G intravenous catheterBecton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd.382277For making a IHVC cuff
Angiocath 14G intravenous catheterBecton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd.382269For making a PV cuff
Buprenorphine (hydrochloride)Tianjin Institute of Pharmaceutical Research Pharmaceutical Co., LtdH12020275For analgesic
Cefuroxime sodium for injectionEsseti FarmaceuticiS.r.lH20160013As an antibiotics

Referanslar

  1. Yan, J. Q., Becker, T., Peng, C. H., Li, H. W., Klempnauer, J. Split liver transplantation: a reliable approach to expand donor pool. Hepatobiliary Pancreat Dis Int. 4, 339-344 (2005).
  2. Xia, R., Emond, J. C. Orthotopic partial liver transplantation in the rat: a model of 70% hepatectomy and reduced size liver transplantation. Transplantation. 56, 1041-1043 (1993).
  3. Omura, T., Ascher, N. L., Emond, J. C. Fifty-percent partial liver transplantation in the rat. Transplantation. 62, 292-293 (1996).
  4. Foss, A., et al. Function of reduced-size liver transplant in the rat. Res Exp Med (Berl). 197, 91-99 (1997).
  5. Nagai, K., Yagi, S., Uemoto, S., Tolba, R. H. Surgical procedures for a rat model of partial orthotopic liver transplantation with hepatic arterial reconstruction. J Vis Exp. , e4376 (2013).
  6. Sun, J., Qin, G., Wu, L., Wang, C., Sheil, A. G. Antigenic load and peripheral chimeric levels in entire and partial liver allograft recipients. Microsurgery. 21, 183-187 (2001).
  7. Ninomiya, M., et al. Deceleration of regenerative response improves the outcome of rat with massive hepatectomy. Am J Transplant. 10, 1580-1587 (2010).
  8. Yamanaka, K., et al. Effect of olprinone on liver microstructure in rat partial liver transplantation. J Surg Res. 183, 391-396 (2013).
  9. Wang, W., et al. Mesenchymal stem cells promote liver regeneration and prolong survival in small-for-size liver grafts: involvement of C-Jun N-terminal kinase, cyclin D1, and NF-kappaB. PLoS One. 9, e112532 (2014).
  10. Madrahimov, N., Dirsch, O., Broelsch, C., Dahmen, U. Marginal hepatectomy in the rat: from anatomy to surgery. Ann. Surg. 244, 89-98 (2006).
  11. Martins, P. N., Theruvath, T. P., Neuhaus, P. Rodent models of partial hepatectomies. Liver Int. 28, 3-11 (2008).
  12. Kamada, N., Sumimoto, R., Kaneda, K. The value of hepatic artery reconstruction as a technique in rat liver transplantation. Surgery. 111, 195-200 (1992).
  13. Steger, U., Sawitzki, B., Gassel, A. M., Gassel, H. J., Wood, K. J. Impact of hepatic rearterialization on reperfusion injury and outcome after mouse liver transplantation. Transplantation. 76, 327-332 (2003).
  14. Huang, H., et al. A novel end-to-side anastomosis technique for hepatic rearterialization in rat orthotopic liver transplantation to accommodate size mismatches between vessels. Eur Surg Res. 47, 53-62 (2011).
  15. Bernal, J., et al. Guidelines for rodent survival surgery. J.Invest Surg. 22, 445-451 (2009).
  16. Johnson, A. J., Stulting, R. D., Macsai, M. S. . Ophthalmic Microsurgical Suturing Techniques. , 21-28 (2007).
  17. Delriviere, L., et al. Detailed modified technique for safer harvesting and preparation of liver graft in the rat. Microsurgery. 17, 690-696 (1996).
  18. Oldani, G., Lacotte, S., Morel, P., Mentha, G., Toso, C. Orthotopic liver transplantation in rats. J Vis Exp. , (2012).
  19. Delriviere, L., et al. Technical details for safer venous and biliary anastomoses for liver transplantation in the rat. Microsurgery. 18, 12-18 (1998).
  20. Jin, H., et al. Preliminary experience of a PDCA-cycle and quality management based training curriculum for rat liver transplantation. J Surg Res. 176, 409-422 (2012).
  21. Selzner, N., Selzner, M., Tian, Y., Kadry, Z., Clavien, P. A. Cold ischemia decreases liver regeneration after partial liver transplantation in the rat: A TNF-alpha/IL-6-dependent mechanism. Hepatology. 36, 812-818 (2002).
  22. Tanaka, H., Hashizume, K., Enosawa, S., Suzuki, S. Successful transplantation of a 20% partial liver graft in rats: a technical innovation. J Surg Res. 110, 409-412 (2003).
  23. Bockhorn, M., et al. Erythropoietin treatment improves liver regeneration and survival in rat models of extended liver resection and living donor liver transplantation. Transplantation. 86, 1578-1585 (2008).
  24. Martins, P. N., Neuhaus, P. Surgical anatomy of the liver, hepatic vasculature and bile ducts in the rat. Liver Int. 27, 384-392 (2007).
  25. Kamada, N., Calne, R. Y. Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage. Transplantation. 28, 47-50 (1979).
  26. Kashfi, A., et al. A review of various techniques of orthotopic liver transplantation in the rat. Transplant.Proc. 37, 185-188 (2005).
  27. Wain, R. A. J., Hammond, D., McPhillips, M., Whitty, J. P. M., Ahmed, W., Ahmed, W., Jackson, M. J. . Surgical Tools and Medical Devices. , 545-562 (2016).
  28. Huang, H., et al. Hepatic arterial perfusion is essential for the spontaneous recovery from focal hepatic venous outflow obstruction in rats. Am J Transplant. 11, 2342-2352 (2011).
  29. Czigany, Z., et al. Improving Research Practice in Rat Orthotopic and Partial Orthotopic Liver Transplantation: A Review, Recommendation, and Publication Guide. Eur Surg Res. 55, 119-138 (2015).

Yeniden Basımlar ve İzinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi

Izin talebi

Daha Fazla Makale Keşfet

T psay 134karaci er naklihepatectomyyeniden arterializations anhepatik damark smi karaci er nakligemi odaklman etanastomoz

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Gizlilik

Kullanım Şartları

İlkeler

Bize Ulaşın

KÜTÜPHANEYE TAVSİYE ET

JoVE HABER BÜLTENLERİ

Araştırma

Eğitim

Yazarlar

Kütüphaneciler

JoVE Hakkında

Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır