Re-artérialisé Transplantation de foie partielle de Rat in vivo axée sur le navire 70 % hépatectomie

Résumé

Ici, un protocole impliquant une transplantation hépatique partielle rat re-artérialisé est présenté. Plus précisément, 70 % foie a été réséquée en vivo en utilisant une technique de mise à jour d’une hépatectomie axée sur le navire. L’artère hépatique a été reconstruite d’une manière d’extrémité à l’autre. La technique de Brassard a été modifiée pour raccourcir le temps de l’abouchement de la veine cave infrahepatic.

Résumé

Scinder une transplantation du foie et transplantation hépatique du foie donneur vivant ont été développés dans la clinique d’utiliser des organes foie de manière plus efficace. Pour mieux comprendre le mécanisme derrière ces interventions chirurgicales, un modèle de transplantation hépatique partielle (PLTx) chez le rat a été créé pour les études pertinentes chirurgicales. En raison de la complexité du modèle PLTx chez rat, il faut un protocole avec des descriptions détaillées. Un article publié précédemment un protocole dans lequel ex vivo hépatectomie a été utilisée pour atteindre 50 % rat PLTx. Contrairement à ce protocole, nous avons introduit un nouveau artérialisé PLTx avec une hépatectomie de 70 % en vivo . Une mise à jour hépatectomie axée sur le navire a été incorporée dans le rat PLTx d’affiner la procédure microchirurgicale. Les veines et artères hépatiques de la lobe latéral gauche et le lobe médian étaient individuellement disséqués et ligaturés avant l’enlèvement du parenchyme hépatique, ce qui diminue la probabilité de saignement dans le moignon de vestige du foie. En outre, une anastomose bout à l’autre navire entre l’artère hépatique commune et l’artère hépatique approprié élargie a été introduite pour re-arterialize de l’artère hépatique. En utilisant cette technique d’anastomose bout à l’autre navire, le diamètre de l’anastomose a été agrandi, ainsi diminuer la difficulté de suture de la main et maintenir un taux élevé de perméabilité anastomotique. En outre, l’anastomose de la manchette de la veine cave infrahepatic a été légèrement modifié. Une section du parenchyme hépatique circonférentielle autour de la veine d’un destinataire a été préservée au cours de l’anastomose de Brassard pour maintenir la forme tridimensionnelle de la lumière vasculaire. Cette section du parenchyme hépatique a été retirée après avoir terminé l’anastomose. Avec cette modification, l’étape impliquant le placement des sutures de séjour a été omise, ainsi encore raccourcir le temps d’anastomose de Brassard. En utilisant ce protocole de rat PLTx, un niveau faible d’enzymes hépatiques, une architecture lobulaire du foie intacte et un taux de survie élevé ont été réalisées après la microchirurgie.

Introduction

Actuellement, il y a un grand écart entre le nombre d’organes foie donnés et le nombre de patients en attente d’un foie donné. La pénurie d’organes foie est un problème mondial. Pour élargir le vivier de donateurs, les fractionner une transplantation hépatique (LTx) et donneur vivant LTx ont été développés pour servir un foie partielle un greffon¹.

Afin d’étudier le mécanisme derrière une transplantation hépatique partielle (PLTx), modèles animaux pertinents ont été établis^2,3,4,5. Chez le rat PLTx, les lobes du foie sont réséqués in vivo et ex vivo pour imiter les conditions du vivant du donateur LTx et diviser LTx, respectivement, chez les humains. Un article publié dans Journal of Visualized Experiments a présenté un protocole détaillé mettant en cause un rat 50 % PLTx utilisant un ex vivo hépatectomie⁵. Toutefois, un rat PLTx avec une hépatectomie en vivo n’a pas encore été signalé dans la littérature visualisée.

En plus de la différence entre hepatectomies in vivo et ex vivo , la technique d’effectuer une hépatectomie lui-même joue également un rôle important en déterminant les résultats de PLTx. actuellement, dans de nombreuses études chirurgicales utilisant le rat PTLx modèle, le foie lobes étaient réséqués après avoir placé une ligature simple au pédicule du lobe hépatique^2,3,6,7,8,9. Toutefois, placer une ligature simple avant la résection n’est pas appropriée pour tous les lobes du foie, comme différents lobes du foie ont différentes formes et tailles. Une ligature simple à la base du lobe médian comporte un risque élevé de provoquer un rétrécissement de la veine cave, qui pourrait finalement affecter l’écoulement du greffon hépatique partielle^10,11. Par conséquent, une mise à jour hépatectomie technique basée sur la connaissance de l’anatomie hépatique de rat est requise dans le domaine du rat PTLx.

Dans le protocole décrit dans cette étude, une hépatectomie mise à jour de 70 % axées sur le navire fut incorporée dans la procédure du rat PLTx. Les veines et les artères hépatiques du lobe latéral gauche (LLL) et lobe médian (ML) ont été disséquées et répartis individuellement avant l’enlèvement du parenchyme hépatique. Ensuite, les veines hépatiques de la LLL et ML ont été ligaturés en perçant les sutures. En utilisant des trompes individuelles et multiples sutures piercing plutôt que de placer une ligature simple, le moignon de vestige de la ML était capable de se répandre sur la veine cave. Par conséquent, la constriction de la veine cave infrahepatic causée par une ligature chirurgicale a été évitée. En outre, l’occlusion de l’approvisionnement en sang de la LLL et ML par des trompes individuels avant l’enlèvement du parenchyme hépatique diminue le taux de saignement dans le moignon de vestige du foie, réduisant ainsi l’influence de la perte de sang sur les expériences de¹¹.

Pour microchirurgiens, c’est un défi important pour reconstruire l’artère hépatique approprié (PHA) d’une greffe du foie à cause de l’extrêmement petit diamètre de ce navire. Bien que la question de savoir si les re-arterialization en LTx est vraiment nécessaire est en cours de débat^12,13,14, nombreuses techniques microchirurgicales pour la reconstruction de l’artère hépatique ont été proposées¹⁴ . Ici, nous présentons une nouvelle technique pour re-arterialization de la greffe du foie, qui rejoint l’artère hépatique commune (CHA) la PHA élargie d’une manière d’extrémité à l’autre. En utilisant cette technique d’extrémité à l’autre, deux artères hépatiques sont connectés avec une anastomose d’un diamètre plus grand. Plus le diamètre de l’anastomose est, la suture de main plus facile consiste à effectuer, et devient plus de l’amélioration de la perméabilité de l’anastomose.

Protocole

Toutes les procédures a suivi les directives de la chirurgie de rongeur approuvé par le Wenzhou Medical University Animal politique et le Comité sur le bien-être ¹⁵.

1. les animaux

1. Utiliser des rats Lewis mâles pesant 250-350 g comme donneurs et des receveurs.

2. environnement

1. Effectuez toutes les procédures microchirurgicales sous un microscope chirurgical avec un grossissement allant de 7 X à 20 X. Stériliser tous les instruments chirurgicaux avant de l’utiliser dans l’opération.
   NOTE : La salle d’opération et la table d’opération sont propres, mais non stérile.

3. base manoeuvres microchirurgicales

1. Gratuit, disséquer et mobiliser le navire.
   1. Tout d’abord, utilisez droite micro-pince pour soulever les tissus environnants à bord du navire.
   2. Deuxièmement, à plusieurs reprises et doucement ouvrir et fermer les bouts de la micro-pince courbe telle que les pointes fines peuvent couper ouverts et peler le tissu environnant sur la paroi antérieure du navire.
   3. En troisième lieu, utilisez droite micro-pinces pour serrer puis soulevez le navire pour exposer l’espace postérieur. Ensuite, suivez les astuces de la micro-pince courbée à éplucher le tissu environnant sur la paroi postérieure du navire. Enfin, un navire chauve sans n’importe quel tissu environnant connecté doit être présenté.
2. Diviser ou double ligaturer et diviser un navire ou un tissu.
   1. Tout d’abord, attachez deux noeuds de la place sur le bateau ou le tissu à l’aide de deux pinces micro¹⁶. Ensuite, coupez le navire ou le tissu entre les deux noeuds de place à l’aide de micro-ciseaux.

4. préparation du brassard et Stent biliaire

1. Faire les manchettes de la veine porte et la veine cave infrahepatic à l’aide de cathéters intraveineux calibre 12 et de calibre 14, respectivement, tandis que le stent biliaire utilisé est un cathéter intraveineux de calibre 22. Les poignets se composent d’une partie du corps et une partie de la poignée. Utilisez un lenticulaire sur la partie du corps pour fixer la paroi des vaisseaux sur le brassard (Figure 1).

5. l’anesthésie et la Fixation des Rats

1. Placez délicatement le rat Lewis dans un coffre à induction avec 5 % isoflurane mélangé avec de l’oxygène de 0,5 L/min pour induire l’anesthésie par inhalation. Surveiller la fréquence respiratoire du rat pour empêcher la mort inattendue, provoquée par une surdose d’isoflurane. Réduire la concentration d’isoflurane à 2 % pour maintenir l’anesthésie lorsque le rat ne répond pas à la stimulation de la douleur.
2. Passer le rat à une planche de 30 x 30 cm chêne recouverte par une serviette mat chirurgicale stérilisée et placez le rat en position couchée. Attachez les quatre branches du rat à l’aide de la bande médiane et ensuite fixer le ruban avec quatre punaises. Désinfecter la peau à l’aide d’alcool à 70 % une heure et les iodophores trois fois.

6. donneur opération

1. Exposer le champ opératoire
   1. Couper une petite incision transversale sur l’abdomen supérieur transect navires épigastriques inférieures bilatérales en utilisant un coagulateur électrique.
   2. Prolonger l’incision transversale près du rebord costal sur le haut de l’abdomen à l’aide de ciseaux chirurgicaux.
   3. Inverser et fixer la paroi de l’abdomen supérieur et le processus xiphoïde, respectivement, au côté du crâne.
   4. Déplacer l’intestin dans la cavité abdominale avec deux bâtons de coton humide. Couvrir l’intestin à l’aide d’une pièce humide de gaze.
2. Couper les ligaments et le règlage de la veine sus-hépatique (SHVC)
   1. Couper la falciformal ligament, le ligament coronaire et le ligament triangulaire en séquence.
   2. Gratuitement la veine diaphragmatique gauche du diaphragme avec une micro-pincette. Ensuite, double ligaturer à l’aide de sutures en soie de 6-0.
      Remarque : Ne pas diviser cette veine dans cette étape.
   3. Couper le ligament gastrohépatiques à l’aide de micro-ciseaux pour libérer le lobe caudé inférieur et le ligament hepatoesophageal et artère.
3. Occlusion de l’approvisionnement en sang de la LLL et ML avant résection (Figure 2)
   1. Tout d’abord, utilisez pince courbée pour disséquer attentivement la paroi postérieure du tronc commun du PV qui fournit la LLL et le lobe médian gauche (LML) à partir du parenchyme. Deuxièmement, double ligaturer et divisez-le ensemble avec les correspondants du cholédoque et l’artère hépatique.
   2. Disséquer et diviser le PV de la RML doucement car cette veine adhère étroitement au parenchyme hépatique.
      NOTE : 14 X grossissement est recommandé. Ne pas blesser le PV du lobe supérieur droit, qui se trouve à proximité de la PV de la RML.
   3. Identifier l’artère hépatique et les canaux biliaires de la RML situé entre le PVs de la RML et l’amour de ma vie. Double ligaturer et diviser l’artère hépatique et les canaux biliaires de la RML à l’aide de sutures en soie de 6-0.
      Remarque : Un changement de la couleur de la LLL et ML du rouge rouge foncé est un indicateur de succès occlusion de l’approvisionnement en sang. Connaissance approfondie de l’anatomie vasculaire est indispensable à l’identification et la dissection des vaisseaux correspondants. Une étude antérieure chez le rat montre clairement l’anatomie hépatique corrosion moulages¹⁰.
4. Résection de la LLL
   1. Ligaturer le pédicule de la LLL en utilisant un circonférentielle suture de soie de 3-0 à obstruer la circulation du sang de la veine hépatique latérale gauche. À l’aide de micro-ciseaux, couper le foie immédiatement au-dessus de la ligature pour enlever la masse du foie.
5. Réséquer l’amour de ma vie
   1. Fixez la veine hépatique médiane gauche par pinces hémostatiques moustique placés le long de la fissure médiane (Figure 3 a). Supprimer l’ensemble de parenchyme hépatique de l’amour ma vie qui précède immédiatement la pince à l’aide de micro-ciseaux.
   2. Place une suture perçante qui pénètre dans le parenchyme hépatique immédiatement sous la pince autour de la médiane gauche hépatique veine. Puis, attacher un noeud carré pour ligaturer il avant de relâcher la pince.
   3. Placez un autre deux sutures piercing sous les pinces pour entourer le reste de l’incision ouverte de l’amour de ma vie. Ensuite, attachez deux noeuds de la place pour fermer le reste de l’incision. Relâcher la pince hémostatique de moustique pour vérifier les saignements.
6. RESECTION RML (Figure 4)
   1. Placer moustique pince hémostatique pour entourer la base de la RML à une distance de 0,5 cm à le SHVC (Figure 4 b). Puis, Croix-pince la base à l’aide de la pince hémostatique de moustique d’occlure la veine hépatique droite médiane.
   2. Micro-ciseaux, prélever à la totalité du parenchyme hépatique de la RML le long de la face supérieure de la pince. N’oubliez pas de travailler très près de la surface de la pince, laissant un moignon lisses et mince de la ML.
   3. Place la première suture piercing pénétrant le parenchyme hépatique sous la pince pour entourer la moyenne médiane hépatique veine. Puis, attacher un noeud carré pour ligaturer la veine hépatique médiane du milieu. Placez la seconde suture piercing pour ligaturer la veine hépatique droite médiane en utilisant la même méthode. Placez un autre deux sutures piercing près le reste de l’incision après la description en 6.5.2.
7. Règlage de la veine cave infrahepatic (IHVC)
   1. Fend le rétropéritoine pour exposer le IHVC. Utilisez incurvé micro-pince pour libérer la IHVC et la veine rénale droite du tissu environnant. Disséquer et ligaturer la veine surrénalienne droite, qui se jette dans le IHVC de l’arrière.
   2. Réaliser une néphrectomie droite après ligature de la veine rénale droite et artère rénale droite pour sauver assez vasculaire de la longueur pour installer le brassard sur le IHVC dans une étape ultérieure.
8. Installer le stent biliaire
   1. Mobiliser le canal cholédoque (CBD) de la première hile hépatique avec une micro-pincette. Ligaturer la CDB à la croisée de la veine pylorique et la CDB à l’aide d’une suture de soie de 6-0.
   2. Couper une incision transversale sur la paroi antérieure de la CDB sur la partie proximale de la ligature. Insérer une endoprothèse biliaire, faite d’un cathéter intraveineux de calibre 22, dans la lumière de la CDB par l’incision. Sécuriser le stent biliaire avec une circonférence de suture de soie de 6-0. Transect de la CDB, entre les deux sutures soie de 6-0.
9. Tailler le PV
   1. Ligaturer la veine pylorique à l’aide d’une suture de soie de 6-0 distal de la PV. Ensuite, ligaturer la veine pylorique à l’aide d’une suture en polypropylène 7-0 à proximité de la PV. Transect la veine pylorique entre ces deux trompes. Double ligaturer et diviser la veine splénique de la même manière.
      Remarque : Utilisez une suture en polypropylène 7-0 pour ligaturer le navire pour faire un noeud de ligature plus petit comparé à celle de la suture de soie de 6-0. Un gros noeud peut interférer avec l’installation de Brassard dans la dernière étape. La paroi vasculaire de la veine pylorique et la veine splénique est mince, donc des manipulations douces sont essentielles au cours de la dissection. Un article précédemment publié avec des descriptions et des illustrations sur la dissection et divisant la veine pylorique et la veine splénique plus technique doit être lu avant opération¹⁷.
10. Règlage de l’artère hépatique commune (CHA)
    1. Soigneusement libérer le CHA et ses deux bifurcations, le PHA et l’artère de gastroduodenal (GDA), les tissus environnants à l’aide de deux micro-pinces. Double ligaturer la GDA à l’aide de sutures en soie de 6-0 à la bifurcation de la LCS à GDA.
11. Heparinizing et perfusant la greffe du foie
    1. Injecter 50 UI d’héparine dans 1 mL de sérum physiologique via la veine du pénis. Attendre 5 min atteindre héparinisation.
    2. Collier en croix les PV, IHVC et CHA à l’aide de trois courbes micro-serrefines à bloquer le débit sanguin hépatique. Effectuer une petite incision sur la paroi antérieure du PV à insérer un cathéter de calibre 22. Perfuse la greffe du foie partielle avec une solution saline à 4 ° C, par l’intermédiaire du cathéter sous une pression de 20 cmH₂O.
    3. Rapidement coupé ouvrir la cavité thoracique et intrathoracique veine cave supérieure à l’aide de ciseaux chirurgicaux pour drainer le sang et le milieu de perfusion. Ne pas arrêter la perfusion jusqu'à ce que la couleur de la greffe du foie partielle entière devient uniformément jaune.
12. Précisant la greffe du foie partielle
    1. Transect la veine diaphragmatique gauche entre les deux trompes (décrit en 6.2.2) à l’aide de micro-ciseaux.
    2. Ensuite, transect le SHVC à proximité de la membrane pour garder la longueur vasculaire le plus longtemps possible. Transect le PV au niveau de la veine splénique à l’aide de micro-ciseaux. Diviser la GDA entre les double des trompes et transect le CHA près du tronc coeliaque.
    3. Transect les surrénales vaisseaux du côté distal de la 6-0 la ligature soie placée dans 6.7.2. La IHVC au niveau de la veine rénale gauche à l’aide de ciseaux chirurgicaux du transect.
    4. Accise et transfert le foie partiel à un plat arrière de table (boîte de Petri de 30 mm) rempli de solution saline à 4 ° C.

7. back-Table opération (préparation)

1. Installer le brassard vasculaire (Figure 5)
   1. Tirez sur le PV par la lumière d’un brassard avec un cathéter intraveineux de calibre 12 avec une micro-pincette. Fixer temporairement la poignée de la manchette et le PV ensemble à l’aide d’une pince de navire. Evert la paroi des vaisseaux PV pour couvrir la surface extérieure de la manchette. Fixer la paroi vasculaire et le brassard en position avec une suture de soie circonférentielle 6-0.
      Remarque : Ne tournez pas le navire. La poignée de la manchette doit rester dans la direction de 12:00.
   2. Installer le brassard IHVC suivant les descriptions en 7.1.1.
2. Préréglage deux séjour sutures sur le SHVC
   1. Pénétrer dans la paroi des vaisseaux de la SHVC d’à l’extérieur à l’intérieur à l’aide de deux polypropylène 7-0 sutures le long du 03:00 et 09:00 directions, respectivement.
      Remarque : Ne pas attacher un noeud.
3. Préservation du greffon
   1. Immerger la greffe du foie partielle dans une solution saline à 4 ° C pour la conservation après l’opération de retour de table.

8. destinataire opération

1. Répéter les procédures en 6.1 et 6.2 et 6.7, à l’exception de la néphrectomie droite, chez le receveur d’exposer le champ opératoire, les ligaments du transect et couper les vaisseaux.
2. Préparation du IHVC, canal cholédoque, artère hépatique et la veine porte du receveur
   1. Tout d’abord, mobiliser la section de la IHVC jusqu'à la veine rénale droite. Deuxièmement, ligaturer les vaisseaux surrénales droite à l’aide d’une suture de soie de 6-0. En troisième lieu, mobiliser la CDB partir du hile hépatique première avec une micro-pincette.
      Remarque : Ne pas tailler sur le tissu adipeux autour de la CDB.
   2. Transect de la CDB à la première bifurcation dans le hile hépatique après ligature double à l’aide d’une suture de soie de 6-0. Puis, transect le PHA à l’aide de ciseaux micro-à la suite de la ligature double à l’aide d’une suture de soie de 6-0. Mobiliser l’article de la PV depuis le hile hépatique à la veine pylorique.
3. Mobilisation de l’arrière du foie
   1. Rétracter le destinataire du foie vers le côté gauche à l’aide de deux bâtons de coton. Puis, coupez le ligament à l’arrière du foie de la SHVC à la veine surrénalienne droite comme décrit dans un précédent article visualisé¹⁸. Après cela, introduire un élastique à travers l’espace arrière de la SHVC.
4. Préparer les instruments et les matériaux au cours de la phase anhépatique
   1. Re-vérifier la disponibilité de tous les instruments et les matériaux nécessaires à la phase anhépatique, comme une seringue de 5 mL avec une aiguille courbe, support micro-ciseaux, micro-aiguille, micro-pinces, deux pinces micro-hémostatique, sutures polypropylène deux 7-0 et 6-0 matériel de suture en soie.
      NOTE : La recherche de matériaux ou d’instruments pourrait prolonger la phase anhépatique.
5. Excision du foie chez le receveur
   1. Croix-pince le IHVC immédiatement au-dessus de la veine rénale à l’aide d’une pince de navire et le PV immédiatement au-dessus de la veine pylorique. Enregistrer la durée de la phase anhépatique partir de ce moment jusqu’au relâchement de la pince sur le PV.
   2. Réduire immédiatement la concentration d’isoflurane à 0,5 %.
   3. Tirer la SHVC et le diaphragme vers le bas de la bande de caoutchouc préréglée. Fixer les parties de la membrane ainsi que de la veine cave intrathoracique à l’aide d’une pince Bulldog, maintenir une distance de 0,5 cm à le SHVC.
      Remarque : Ne pas clamper le poumon de rat.
   4. À l’aide de micro-ciseaux, coupez la paroi des vaisseaux de la SHVC soigneusement le long du bord supérieur du parenchyme hépatique pour maintenir la paroi vasculaire le plus longtemps possible.
   5. Transect le PV à la première bifurcation dans le hile hépatique à l’aide de micro-ciseaux. Puis, transect de la veine cave inférieure dans le parenchyme du lobe inférieur droit, plutôt que dans la paroi des vaisseaux, laissant le parenchyme hépatique circonférentiel autour de la veine cave. Gardez la pointe dans le lobe inférieur droit à une distance de 4 mm à la IHVC. Après transection des vaisseaux, déplacez le foie entier hors de la cavité abdominale.
6. Reconstruction de la SHVC
   1. Placer la prothèse partielle du foie dans l’orthotopically de la cavité abdominale. Percer la paroi des vaisseaux de la SHVC de l’intérieur à extérieur dans les directions de 03:00 et 09:00 à l’aide de deux sutures séjour prédéfini. Tirer sur les sutures de deux séjour à droite et à gauche après que qu’ils sont liés à un noeud avec leurs propres fins.
   2. Percer la SHVC paroi vasculaire d’à l’extérieur à l’intérieur près du noeud dans le sens de 03:00 pour introduire l’aiguille de la suture du droit de séjour dans la lumière vasculaire.
   3. S’anastomosent à la paroi postérieure de la SHVC par une suture en cours d’exécution à l’intérieur de la lumière vasculaire de la direction de 03:00, à la direction de 09:00.
   4. À l’angle de la direction de 09:00, percer la paroi des vaisseaux de l’intérieur à extérieur près du noeud d’introduire l’aiguille hors de la lumière vasculaire.
   5. Cette suture permet d’effectuer l’anastomose entre la paroi antérieure, à l’aide d’une suture en cours d’exécution en dehors de la lumière vasculaire de la direction de 09:00 à 3 les heures de direction. Enfin, attachez le fil de suture avec sa propre fin 3 fois (Figure 6).
      NOTE : Injecter 3 à 5 mL de sérum physiologique dans la lumière de la SHVC reconstruit pour forcer les bulles d’air avant le dernier 2-3 points de suture. Une description plus détaillée de l’anastomose SHVC se trouvent dans l’article par Delriviere et al. ¹⁹.
7. Reconstruire le PV
   1. Placez deux sutures de polypropylène séjour 7-0 à la fin du PV du bénéficiaire après la description au point 7.2. Tirez deux sutures de séjour dans la direction opposée pour étendre la paroi des vaisseaux. Fixer deux sutures de séjour à l’aide de deux pinces hémostatiques micro-moustique.
   2. Injecter 1 mL environ de solution saline dans la lumière vasculaire de la PV chez le receveur pour forcer les bulles d’air. Insérer rapidement le brassard de la veine porte dans la lumière vasculaire de la PV dans le destinataire à la force lorsqu’il est ouvert à l’aide de micro-pinces. Fixez l’anastomose de la manchette à l’aide d’une suture de soie circonférentielle 6-0. Croix-pince la CHA.
8. Reperfusion au greffe du foie
   1. Débloquer les mors sur le SHVC et le PV en séquence à naviguent la greffe du foie. Enregistrer l’heure de la phase anhépatique. Vous recherchez un saignement de l’anastomose. Augmenter la concentration d’isoflurane pour 1 à 2 % selon la réaction du rat à la stimulation de la douleur.
9. Reconstruction de la IHVC
   1. Injecter 1 mL de solution saline dans la lumière vasculaire de la IHVC chez le receveur à faire sortir les bulles d’air. Insérer la manchette dans la lumière vasculaire cylindrique de la IHVC, qui est soutenu par le parenchyme hépatique circonférentiel (Figure 7). Introduire une suture de soie de 6-0 par le biais de l’espace arrière de la IHVC. Rapidement sécuriser l’anastomose de la manchette à l’aide d’une suture de soie de 6-0.
   2. Libération du navire deux pinces dans le IHVC pour remettre en marche la perfusion. Coupez le parenchyme hépatique environnant soigneusement au-dessus de la suture circonférentielle de soie à l’aide de micro-ciseaux.
10. Reconstruction de l’artère hépatique
    1. Pénétrer dans la paroi des vaisseaux de l’ACh dans la greffe du foie d’à l’extérieur à l’intérieur à l’aide de deux polypropylène 11-0 sutures dans le 03:00 et 09:00 directions, respectivement. Bloquer le flux sanguin de la CHA et le GDA chez le receveur à l’aide de deux courbes micro-serrefines.
    2. Transect le PHA du destinataire à sa racine pour exposer la lumière vasculaire à l’aide de micro-ciseaux. Agrandir la lumière vasculaire de la PHA chez le receveur de la partie coupante de la paroi des vaisseaux longitudinalement pour accueillir le diamètre de l’ACh dans la greffe du foie.
    3. S’anastomosent le CHA du greffon hépatique pour le PHA élargie d’une manière d’extrémité à l’autre en utilisant la technique de suture en cours d’exécution pour l’anastomose SHVC (8.6.2-8.6.7).
       Remarque : Les illustrations détaillées se trouvent dans l’article par Huang et al.¹⁴.
11. Reconstruction de la CDB
    1. Remettre l’intestin dans la cavité abdominale afin de réduire la distance entre les deux extrémités de la voie biliaire principale. Effectuer une incision transversale sur la paroi antérieure de la voie biliaire principale chez le receveur.
    2. Déroulez le stent biliaire dans la greffe du foie partielle pour l’insérer dans la lumière de la voie biliaire principale chez le receveur par l’incision transversale. Fixez le stent à l’aide d’une suture soie circonférentielle de 6-0.
    3. Nouez les deux sutures soie circonférentielle de 6-0 dans le canal cholédoque entre eux pour réduire la tension de l’anastomose.
12. Fermeture de l’abdomen
    1. Fermer l’abdomen en deux couches à l’aide de suture de soie de 3-0 dans le modèle de suture en cours d’exécution.

9. postopératoires traitements (les analgésiques et les antibiotiques)

1. Traiter tous les destinataires ayant buprénorphine 0,1 mg/kg par voie sous-cutanée. Administrer par voie sous-cutanée cefuroxime (16 mg/kg) en plus du médicament analgésique. Offrir l’eau du robinet et laboratoire standard chow animaux pour les rats ad libitum.

Résultats

Au total, 31 cas de rat artérialisé syngénique PLTx ont été achevés en utilisant ce protocole. Tous les lauréats ont survécu jusqu'à la fin de l’heure de l’observation. Le poids corporel des destinataires ont commencé à récupérer après jour postopératoire (POD) 4. La pente du poids du corps était proche de celle d’un rat Lewis normal après 6 POD (Figure 8), qui implique indirectement la récupération du destinataire. Sur le plan histol...

Discussion

Rat PLTx est une procédure microchirurgicale sophistiquée avec un programme de formation qui est riche en coût et longue durée²⁰. La complexité du rat PLTx protocole a empêché les chercheurs d’utiliser ce modèle animal. Par rapport à la pleine grandeur rat LTx, rat PLTx présente le microsurgeon non seulement avec le défi d’une procédure de transplantation, mais aussi avec le défi de la résection hépatique dans un petit animal. Un protocole de microchirurgie visualisé décrivant...

matériels

Name	Company	Catalog Number	Comments
Surgical microscope	Möller-Wedel, Germany	654359
Light source	OSRAM (China) Lighting Co., Ltd	64627
Isoflurane Vaporizer	MIDMARK Corporation	VIP3000
Isoflurane	Baxter Healthcare Corporation	40032609	For Inhalation anesthesia
Normal Saline	Zhejiang Tianrui Pharmaceutical Co., Ltd.	716092103
Povidone Iodine Solution	HANGZHOU MINSHENG PHARMACEUTICAL	H33021567	For disinfection
Hemostatic forceps	Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd	J31020
Surgical scissors	Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd	JC2116
Needle-holder	Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd	J32030
Dressing Forceps	Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd	J42020
Mosquito hemostatic forceps	Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd	W40340	For liver resection; For retracting the stay sutures.
Micro-scissors	Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd	WA1040
Micro needle-holder	Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd	WA2060
Curved micro typing forceps	Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd	WA3061
straight micro typing forceps	Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd	WA3060
Micro hemostatic forceps	Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd	WA3020
Bulldog clamp	Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd	XEC350
Vessel clamps	Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd	W40160
Micro Serrefine-curved	Fine Science Tools, Inc	18055-05
Dacryosyrinx	Shi Zhuo medical instruments Co., Ltd.	5# curve	Use as the curved needle for forcing out the air bubbles in the vascular lumen
Sterilized gauze swabs	Fuqing Health & Integral Medical	20230R
5mL syringe	Zhejiang Yusheng Medical Instrument Co.,Ltd	811932416
18G needles	Shanghai Kindly Enterprise Development Group Co., Ltd	01-014	For fixing the upper abdomen wall
Intima II 22G intraveous catheter	Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd.	383207y	For making biliary stent; For infusing perfusate
7-0 polypropylene sutures	Ningbo Medical Needle Co., Ltd	151026	For SHVC anastomsis
6-0 silk suture	Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd	2650182	For ligation
Culture dish (100mm)	Corning Incorporated	430165	used in back table for storage ice. The back table dish was placed on it.
Culture dish (30 mm)	Corning Incorporated	3296	As a vessel for organ preservation
Angiocath 12G intravenous catheter	Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd.	382277	For making a IHVC cuff
Angiocath 14G intravenous catheter	Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd.	382269	For making a PV cuff
Buprenorphine (hydrochloride)	Tianjin Institute of Pharmaceutical Research Pharmaceutical Co., Ltd	H12020275	For analgesic
Cefuroxime sodium for injection	Esseti FarmaceuticiS.r.l	H20160013	As an antibiotics