Authors
Contact Us

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • النتائج
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

يصف البروتوكول الحالي تطوير نموذج التهاب القولون الشبيه بكرون في القوارض. يؤدي الالتهاب عبر الجدارية إلى تضيق في موقع تقطير TNBS ، ويلاحظ تضخم ميكانيكي في الجزء القريب من التضيق. تسمح هذه التغييرات بدراسة الإجهاد الميكانيكي في التهاب القولون.

Abstract

أمراض الأمعاء الالتهابية (IBD) مثل مرض كرون (CD) هي اضطرابات التهابية مزمنة في الجهاز الهضمي تؤثر على ما يقرب من 20 لكل 1,00,000 في أوروبا والولايات المتحدة الأمريكية. يتميز CD بالالتهاب عبر الجدارية والتليف المعوي وتضيق اللمعان. على الرغم من أن العلاجات المضادة للالتهابات قد تساعد في السيطرة على الالتهاب ، إلا أنها لا تحتوي على أي فعالية على التليف والتضيق في CD. التسبب في CD ليست مفهومة جيدا. تركز الدراسات الحالية بشكل أساسي على تحديد آليات الاستجابة المناعية للأمعاء غير المنظمة. في حين أن الالتهاب عبر الجدارية المرتبط ب CD والتليف المعوي والتضيق المضيء كلها تمثل إجهادا ميكانيكيا لجدار الأمعاء ، فإن دور الإجهاد الميكانيكي في CD غير محدد جيدا. لتحديد ما إذا كان الإجهاد الميكانيكي يلعب دورا إمراضيا مستقلا في CD ، تم تطوير بروتوكول لنموذج التهاب القولون الشبيه بالقرص المضغوط الناجم عن TNBS في القوارض. يشبه هذا الالتهاب والتليف عبر الجدارية الناجم عن TNBS السمات المميزة المرضية ل CD في القولون. يتم تحريضه عن طريق التقطير داخل القولون من TNBS في القولون البعيد من الفئران Sprague-Dawley البالغة. في هذا النموذج ، يؤدي الالتهاب عبر الجدارية إلى تضيق في موقع تقطير TNBS (الموقع الأول). لوحظ انتفاخ ميكانيكي في الجزء القريب من موقع التقطير (الموقع P) ، مما يمثل الإجهاد الميكانيكي ولكن الالتهاب غير المرئي. الجزء القولوني البعيد عن الالتهاب (الموقع D) لا يمثل التهابا ولا إجهادا ميكانيكيا. لوحظت تغيرات مميزة في التعبير الجيني والاستجابة المناعية والتليف ونمو العضلات الملساء في مواقع مختلفة (P و I و D) ، مما يسلط الضوء على التأثير العميق للإجهاد الميكانيكي. لذلك ، سيساعدنا هذا النموذج من التهاب القولون الشبيه ب CD على فهم آليات CD المسببة للأمراض بشكل أفضل ، وخاصة دور الإجهاد الميكانيكي والتعبير الجيني الناجم عن الإجهاد الميكانيكي في خلل التنظيم المناعي والتليف المعوي وإعادة تشكيل الأنسجة في CD.

Introduction

يتميز مرض التهاب الأمعاء (IBD) ، بما في ذلك التهاب القولون التقرحي (UC) ومرض كرون (CD) ، بالتهاب مزمن في الجهاز الهضمي (GI). يؤثر على ~ 1-2 مليون أمريكي1. تبلغ التكاليف السنوية المقدرة لرعاية مرض الأمعاء الالتهابي في الولايات المتحدة 11.8 مليار دولار. على عكس UC ، يتميز القرص المضغوط بالتهاب عبر الجدارية وتشكيل تضيق 2,3. يحدث تكوين التضيق (التضيق) في ما يصل إلى 70٪ من مرضى CD3 وقد يكون سببه التهاب عبر الجدارية (تضيق التهابي) أو تليف معوي (تضيق ليفي)4,5. يتميز التليف المعوي بترسب الكولاجين المفرط والمصفوفات الأخرى خارج الخلية (ECM) مع خلايا العضلات الملساء (SMC) كأحد أنواع الخلايا الوسيطة الرئيسية المشاركة في العملية 3,4. تضخم العضلات الملساء المرتبط بالتضخم هو تغيير نسيجي كبير آخر في تضيق التضيق الليفي في CD6. على الرغم من أن تكوين التضيق في CD يرتبط بالالتهاب المزمن ، إلا أنه لا يوجد علاج مضاد للالتهابات فعال ، باستثناء العلاج الجراحي 2,6. ومع ذلك ، فإن تكرار ما بعد الجراحة هو ما يقرب من 100 ٪ ، مع إعطاء الوقت الكافي 2,7. كاستجابة التهابية ، قد يتطور التليف وتضخم SMC أيضا في الحالات غير الالتهابية (أي انسداد الأمعاء) في الأمعاء 8,9 ؛ ويعتقد أن كلا من الآليات المعتمدة على الالتهاب والمستقلة تشارك في تشكيل تضيق 3,4. بالنظر إلى أن الأبحاث المكثفة في الآليات المعتمدة على الالتهاب لم تترجم إلى أي علاج فعال لتشكيل التضيق ، هناك حاجة إلى دراسات حول الدور المحتمل للآليات المستقلة عن الالتهاب في التليف المعوي.

كعامل غير التهابي ، عادة ما يصادف الإجهاد الميكانيكي (MS) المرتبط بالوذمة ، وتسلل الخلايا الالتهابية ، وتشوه الأنسجة ، والتليف ، والتضيق 10،11،12،13 في IBD ، وخاصة CD ، الذي يتميز بالالتهاب عبر الجدارية. الإجهاد الميكانيكي هو الأكثر بروزا في CD stenotic ، حيث يمثل التضيق (التهابي أو الليفي) في موقع الالتهاب إجهادا ميكانيكيا في الأنسجة المحلية ويؤدي إلى انتفاخ التجويف في الجزء القريب من موقع الانسداد10,14. وقد أظهرت الدراسات السابقة في المختبر أن الإجهاد الميكانيكي يغير التعبير الجيني لوسطاء التهابيين محددين (أي COX-2 ، IL-6) 8،14،15 وعوامل النمو (أي TGF-β) في أنسجة الجهاز الهضمي ، وخاصة خلايا العضلات الملساء المعوية (SMC) 16. وجدت الدراسات الحديثة أيضا أن التعبير عن وسطاء محددين مؤيدين للتليف مثل عامل نمو النسيج الضام (CTGF) حساس للغاية للإجهاد الميكانيكي17,18. كان من المفترض أن الإجهاد الميكانيكي قد يلعب دورا مسببا مستقلا للأمراض في الالتهاب المرتبط بالقرص المضغوط والتليف وإعادة تشكيل الأنسجة. ومع ذلك ، فإن الأهمية المسببة للأمراض للإجهاد الميكانيكي في التهاب الأمعاء والتليف وتضخم العضلات الملساء في CD لا تزال غير مستكشفة إلى حد كبير. قد يكون هذا جزئيا لأن الالتهاب هو عملية أكثر وضوحا وأفضل دراسة من الإجهاد الميكانيكي. الأهم من ذلك ، لم يكن هناك نموذج حيواني محدد جيدا ل IBD للتمييز بين تأثير الإجهاد الميكانيكي وتأثير الالتهاب.

يصف العمل الحالي نموذجا للقوارض لالتهاب القولون الشبيه بكرون الناجم عن الحقن داخل القولون لكاشف هابتن 2,4,6-ثلاثي نيتروبنزين حمض السلفونيك (TNBS)19,20 ، والذي قد يخدم الغرض من دراسة دور الإجهاد الميكانيكي في CD. وقد وجد أن تقطير TNBS تسبب في التهاب موضعي (~ 2 سم في الطول) عبر الجدارية مع تضييق التجويف (تضيق) في القولون البعيد. يؤدي التضيق إلى انتفاخ الأمعاء الملحوظ (الإجهاد الميكانيكي) 14,15 ولكن لا يوجد التهاب مرئي في الجزء الذكري القريب من موقع التقطير. على العكس من ذلك ، فإن جزء القولون البعيد إلى موقع التضيق لا يمثل التهابا أو إجهادا ميكانيكيا. لوحظت تغيرات كبيرة خاصة بالموقع في التعبير الجيني والالتهاب والتليف وتضخم SMC في المواقع الثلاثة المختلفة. وتشير النتائج إلى أن الإجهاد الميكانيكي، وخاصة التعبير الجيني الناجم عن الإجهاد الميكانيكي، قد يلعب دورا حاسما في تطوير التليف وتضخم التنسج في التهاب القولون كرون.

Protocol

أجريت جميع التجارب على الحيوانات وفقا للجنة المؤسسية لرعاية الحيوانات واستخدامها التابعة للفرع الطبي لجامعة تكساس (#0907051C). تم استخدام ذكور أو إناث فئران Sprague-Dawley ، التي يبلغ عمرها حوالي 8-9 أسابيع ، للدراسة.

1. إعداد الحيوان

  1. الفئران السريعة لمدة 24 ساعة ومعالجتها مع ملين (منظف الأمعاء، انظر جدول المواد) بين عشية وضحاها.
  2. في اليوم التالي ، تخدير الفئران باستخدام نظام التخدير (انظر جدول المواد) عن طريق تعريضها ل 2٪ من الإيسوفلوران جنبا إلى جنب مع 1 لتر / دقيقة من الأكسجين أثناء إعطاء TNBS. تحقق من وجود ردود فعل أو قرصة أصابع القدم لتأكيد التخدير.
  3. تحضير محلول TNBS الطازج وفقا لأوزان الجسم.
    ملاحظة: TNBS - تم استخدام 65 ملغم / كغم من وزن الجسم في 250 ميكرولتر من الإيثانول 40 ٪.
  4. ضع الفئران في وضع ضعيف على طاولة التخدير. للحث على التهاب القولون ، أدخل من خلال فتحة الشرج قسطرة بولي يوريثين مفتوحة النهاية من الدرجة الطبية لمدة ~ 7-8 سم من حافة الشرج وغرس بلطف TNBS (أعدت في الخطوة 1.3) في القولون19. إدارة الفئران السيطرة الوهمية مع 250 ميكرولتر من المياه المالحة فقط.
  5. بعد غرس TNBS أو المالحة ، احتفظ بالفئران في وضع ضعيف ورأسا لأسفل قليلا (~ 30 درجة) ، مع إغلاق فتحة الشرج لمدة 2 دقيقة للمساعدة في توزيع TNBS وتجنب الانسكابات.
  6. تزويد الفئران بالطعام والماء لمدة 7 أيام ومراقبة الفئران يوميا لوزن الجسم وامتصاص الطعام والبراز والحالة الصحية العامة.

2. مستحضرات الأنسجة

  1. في يوم القتل الرحيم ، القتل الرحيم للفئران باستخدام استنشاق CO2 وتأكيد القتل الرحيم مع خلع عنق الرحم.
  2. افتح بطن الفئران باستخدام مقص وملقط جراحي.
  3. قم بإزالة القولون بالكامل بعناية (فوق القناة الشرجية) وانقل القولون على الفور إلى المخزن المؤقت 1x HBSS البارد على الجليد.
  4. قم بتصويب القولون في المخزن المؤقت وقياس طول القولون باستخدام مسطرة. خذ خيط النايلون ودائرة حول القولون لقياس المحيط الخارجي لأجزاء القولون في السيطرة والفئران المعالجة ب TNBS. خذ أنسجة كاملة السماكة لعلم الأنسجة.
  5. اقطع القولون على طول لوح المساريق ونظف القولون جيدا باستخدام المخزن المؤقت HBSS. تقييم القولون للحصول على درجة الالتهاب العياني بناء على المعايير كما هو موضح سابقا19 مع الحد الأدنى من التعديلات.
    ملاحظة: 0 = الغشاء المخاطي الطبيعي; 1 = احتقان الدم الموضعي ولكن لا تآكل أو قرحة; 2 = القرحة والتضيق (المنطقة المصابة < 5 مم) ؛ 3 = قرحة شديدة وندبة وتضيق (المنطقة المصابة > 5 مم).
  6. جمع عينات أنسجة القولون من الموقع P (الجزء 2-3 سم قبل الهامش الفموي لموقع الالتهاب) ، والموقع الأول (موقع الالتهاب ، عادة 4-6 سم من نهاية القولون ، حيث يتم غرس TNBS إلى) ، والموقع D (الجزء 1-2 سم بعيد إلى الهامش الفموي لموقع الالتهاب) ، على التوالي من الفئران المعالجة ب TNBS.
    ملاحظة: تم أخذ أنسجة القولون التي يبلغ طولها ~ 1-2 سم من كل جزء. بالإضافة إلى ذلك ، تم أخذ أنسجة القولون التي يبلغ طولها 2 سم (~ 4-6 سم من نهاية القولون) للفئران المعالجة بالمحلول الملحي كعنصر تحكم زائف (S) (الشكل 1).
  7. خذ عينات الأنسجة من كل موقع لإعداد كامل السماكة ، وإذا رغبت في ذلك ، الغشاء المخاطي / تحت المخاطية وطبقات العضلات الخارجية ، على التوالي ، وكذلك21،22.
  8. قم بتجميد عينات الأنسجة في النيتروجين السائل أولا قبل تخزينها عند -80 درجة مئوية للتخزين لمدة تصل إلى عام واحد ولأغراض مستقبلية (أي مستحضرات الحمض النووي الريبي).

3. التقييم النسيجي المرضي لالتهاب الأمعاء والتليف

  1. إصلاح أنسجة القولون كاملة السماكة في 10 ٪ من الفورمالين لمدة 48 ساعة ، ثم نقلها إلى 70 ٪ من الإيثانول لمدة 24-48 ساعة.
  2. استخدم ميكروتوم لقطع أقسام البارافين بسماكة 5 ميكرومتر للهيماتوكسيلين والإيوسين (H&E) وبقع تريكروم من ماسون6،19،23 (انظر جدول المواد) ، على التوالي.
  3. احصل على الصور وعرضها باستخدام مجهر مستقيم مزود بكاميرا عالية الدقة مزودة ببرامج متوافقة (انظر جدول المواد).
  4. مؤشرات التهاب الصف والتليف من قبل اثنين من الباحثين المستقلين ، بما في ذلك أخصائي علم الأمراض الجراحي المعدي المعوي وفقا للمعايير الموضحة سابقا 6,23 مع التعديلات. انظر الملف التكميلي 1 للاطلاع على الدرجات.
  5. قم بقياس سمك وأعداد الخلايا لطبقات العضلات الدائرية والطولية لكل مقطع عرضي في أربع طرق عرض لكل عينة ملطخة H & E وخذ متوسط القياسات الأربعة لكل عينة.

4. استخراج الحمض النووي الريبي والكمية RT-PCR

  1. تجانس أنسجة القولون المستخلصة التي تم الحصول عليها من التحكم الوهمي وثلاثة مواقع (P و I و D) لفئران التهاب القولون TNBS في كاشف استخراج مجموعة استخراج الحمض النووي الريبي (انظر جدول المواد).
  2. اعزل الحمض النووي الريبي عن كل عينة باستخدام المجموعة. قم بالتخلص من بيليه الحمض النووي الريبي في 30 ميكرولتر من الماء الخالي من RNase.
  3. حدد تركيز الحمض النووي الريبي وتحقق من النقاء باستخدام مقياس الطيف الضوئي للأشعة فوق البنفسجية UV-Vis صغير الحجم (انظر جدول المواد).
  4. استخدم 1 ميكروغرام من إجمالي الحمض النووي الريبي لتوليف cDNA 21,22 باستخدام مجموعة توليف الحمض النووي الريبي (انظر جدول المواد).
  5. تحليل مستويات التعبير الجيني وقياسها كميا من خلال إجراء تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الفعلي باستخدام 50 نانوغرام من cDNA كقالب ، ومجسات IL-6 ، و CTGF باستخدام مجموعة PCR تجارية لنظام PCR في الوقت الفعلي (انظر جدول المواد).
  6. استخدم جين التحكم 18S rRNA لتطبيع العينات وتحديد التعبير الجيني النسبي باستخدام قيم Cq التي تم الحصول عليها.

5. التحليل الإحصائي

  1. استخدم برنامج التحليل الإحصائي (انظر جدول المواد) لمقارنة التحكم الوهمي وفئران التهاب القولون TNBS.
  2. ضع في اعتبارك أن قيمة p < 0.05 ذات دلالة إحصائية15,19.
  3. لاختبار الاختلافات بين مجموعتين ، استخدم تحليل اختبار t الخاص بالطالب وقم بإجراء اختبار ANOVA إذا كانت المقارنات أكثر من مجموعتين15,19.

النتائج

منظر عياني لالتهاب القولون الشبيه بكرون الناجم عن التقطير داخل القولون ل TNBS
كما هو موضح في الشكل 1 ، أدى التقطير داخل القولون ل TNBS في الفئران إلى التهاب موضعي عبر الجدارية (~ 2 سم في الطول) مع جدار الأمعاء السميك وتجويف ضيق (تضيق) في موقع التقطير في القولون البعيد (

Discussion

تم إدخال التهاب القولون الناجم عن TNBS في عام 1989 وتم استخدامه كنموذج تجريبي لمرض كرون منذ ذلك الحين19،20،23. تشمل السمات المهمة لهذا النموذج في القوارض تطور التهاب عبر الجدارية يشبه إلى حد كبير الآفات النسيجية المرضية التي تطورت في مرض كرون ا?...

Disclosures

لم يبلغ المؤلفون عن أي تضارب في المصالح وليس لديهم ما يكشفون عنه.

Acknowledgements

يتم دعم هذا العمل جزئيا من خلال منح من المعاهد الوطنية للصحة (R01 DK124611 إلى XZS) ووزارة الدفاع الأمريكية (W81XWH-20-1-0681 إلى XZS). تم إجراء أعمال علم الأنسجة بمساعدة مختبر علم الأمراض الجراحي UTMB.

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
ACT-1 Control Software Ver2.63NikonDXM1200F
C1000 Touch Thermal Cycler with 96-Well Fast Reaction ModuleBIO-RAD1851196
CFX96 Optical Reaction Module for Real-Time PCR SystemsBIO-RAD1845097
Dako Agilent Artisan Link Pro Special stainerDakoAR310
Dako-Agilent Masson's Trichrome Kit ref# AR173DakoAR173
DXM1200 Digital Color HR CameraNikonDXM1200
Eukaryotic 18S rRNA Endogenous ControlThermoFisher Scientific4352930E
E-Z AnesthesiaE-Z Systems Inc.EZ-155
GraphPad Prism 9GraphPad9.0.2 (161)
Hard-Shell 96-Well PCR Plates, low profile, thin wall, skirted, white/clearBIO-RADHSP9601
HBSS (Corning Hank's Balanced Salt Solution, 1x without calcium and magnesium)CORNING21-021-CV
HM 325 MicrotomeThermo Scientific23-900-667
IsofluranePiramalNDC 66794-017-10
LI-COR Odyssey Digital Imaging SystemLI-COR9120
Mastercycler epGradient Thermal Cycler with Control Panel 5340 Thermal CyclerEppendorf5341
Medical grade open end polyurethane catheterCovidien8890703013
NanoDrop 2000/2000c SpectrophotometersThermo Fisher ScientificND2000CLAPTOP
Nikon Eclipse E800 Upright MicroscopeNikonE800
Nitrocellulose/Filter Paper Sandwiches Pkg of 50, 0.45 μm, 7 x 8.5 cmBIO-RAD1620215
Polyethylene Glycol 3350, Osmotic LaxativeMiralaxC8175Dose: 17g in 226 mL of water
RNeasy Mini Kit (250)
250 RNeasy Mini Spin Columns, Collection Tubes (1.5 mL and 2 mL), RNase-free Reagents and Buffers		QIAGEN74106
SuperScript III First-Strand Synthesis SystemThermoFisher Scientific18080051
TaqMan Gene Expression Assays Rn00573960_g1 CTGF ProbeThermoFisher Scientific4331182
TaqMan Gene Expression Assays Rn99999011_m1 IL6 ProbeThermoFisher Scientific4331182
TaqMan Fast Advanced Master MixThermoFisher Scientific4444557
Tissue-Tek Prisma H&E Stain Kit #1Sakura6190
Tissue-Tek Prisma Plus Automated Slide StainerSakura6171
TNBS (Picrylsulfonic acid solution)SIGMA-ALDRICH92822

References

  1. Kappelman, M. D., et al. The prevalence and geographic distribution of Crohn's disease and ulcerative colitis in the United States. Clinical Gastroenterology and Hepatology. 5 (12), 1424-1429 (2007).
  2. Hwang, J. M., Varma, M. G. Surgery for inflammatory bowel disease. World Journal of Gastroenterology. 14 (17), 2678-2690 (2008).
  3. Latella, G., Rieder, F. Intestinal fibrosis: Ready to be reversed. Current Opinion in Gastroenterology. 33 (4), 239-245 (2017).
  4. Rieder, F., Fiocchi, C., Rogler, G. Mechanisms, management, and treatment of fibrosis in patients with inflammatory bowel diseases. Gastroenterology. 152 (2), 340-350 (2017).
  5. Bettenworth, D., et al. Assessment of Crohn's disease-associated small bowel strictures and fibrosis on cross-sectional imaging: A systematic review. Gut. 68 (6), 1115-1126 (2019).
  6. Chen, W., Lu, C., Hirota, C., Iacucci, M., Ghosh, S., Gui, X. Smooth muscle hyperplasia/hypertrophy is the most prominent histological change in Crohn's fibrostenosing bowel strictures: A semiquantitative analysis by using a novel histological grading scheme. Journal of Crohn's and Colitis. 11 (1), 92-104 (2017).
  7. Olaison, G., Smedh, K., Sjödahl, R. Natural course of Crohn's disease after ileocolic resection: Endoscopically visualised ileal ulcers preceding symptoms. Gut. 33 (3), 331-335 (1992).
  8. Lin, Y. M., Li, F., Shi, X. Z. Mechanical stress is a pro-inflammatory stimulus in the gut: In vitro, in vivo and ex vivo evidence. PLoS One. 9, 106242 (2014).
  9. Gabella, G., Yamey, A. Synthesis of collagen by smooth muscle in the hyertrophic intestine. Experimental Physiology. 62 (3), 257-264 (1977).
  10. Katsanos, K. H., Tsianos, V. E., Maliouki, M., Adamidi, M., Vagias, I., Tsianos, E. V. Obstruction and pseudo-obstruction in inflammatory bowel disease. Annals of Gastroenterology. 23 (4), 243-256 (2010).
  11. Johnson, L. A., et al. Matrix stiffness corresponding to strictured bowel induces a fibrogenic response in human colonic fibroblasts. Inflammatory Bowel Disease. 19 (5), 891-903 (2013).
  12. Gayer, C. P., Basson, M. D. The effects of mechanical forces on intestinal physiology and pathology. Cell Signalling. 21 (8), 1237-1244 (2009).
  13. Cox, C. S., et al. Hypertonic saline modulation of intestinal tissue stress and fluid balance. Shock. 29 (5), 598-602 (2008).
  14. Shi, X. Z. Mechanical regulation of gene expression in gut smooth muscle cells. Frontiers in Physiology. 8, 1000 (2017).
  15. Shi, X. Z., Lin, Y. M., Powell, D. W., Sarna, S. K. Pathophysiology of motility dysfunction in bowel obstruction: Role of stretch-induced COX-2. American Journal of Physiology-Gastrointestinal and Liver. 300 (1), 99-108 (2011).
  16. Gutierrez, J. A., Perr, H. A. Mechanical stretch modulates TGF-beta1 and alpha1(I) collagen expression in fetal human intestinal smooth muscle cells. American Journal of Physiology. 277 (5), 1074-1080 (1999).
  17. Lipson, K. E., Wong, C., Teng, Y., Spong, S. CTGF is a central mediator of tissue remodeling and fibrosis and its inhibition can reverse the process of fibrosis. Fibrogenesis Tissue Repair. 5, 24 (2012).
  18. Chaqour, B., Goppelt-Struebe, M. Mechanical regulation of the Cyr61/CCN1 and CTGF/CCN2 proteins. The FEBS Journal. 273 (16), 3639-3649 (2006).
  19. Shi, X. Z., Winston, J. H., Sarna, S. K. Differential immune and genetic responses in rat models of Crohn's colitis and ulcerative colitis. American Journal of Physiology-Gastrointestinal and Liver. 300 (1), 41-51 (2011).
  20. Antoniou, E., et al. The TNBS-induced colitis animal model: An overview. Annals of Medicine and Surgery (London). 11, 9-15 (2016).
  21. Shi, X. Z., Sarna, S. K. Gene therapy of Cav1.2 channel with VIP and VIP receptor agonists and antagonists: A novel approach to designing promotility and antimotility agents. American Journal of Physiology-Gastrointestinal and Liver. 295 (1), 187-196 (2008).
  22. Lin, Y. M., Sarna, S. K., Shi, X. Z. Prophylactic and therapeutic benefits of COX-2 inhibitor on motility dysfunction in bowel obstruction: Roles of PGE2 and EP receptors. American Journal of Physiology-Gastrointestinal and Liver. 302 (2), 267-275 (2012).
  23. Morris, G. P., Beck, P. L., Herridge, M. S., Depew, W. T., Szewczuk, M. R., Wallace, J. L. Hapten-induced model of chronic inflammation and ulceration in the rat colon. Gastroenterology. 96 (3), 795-803 (1989).
  24. Mudter, J., Neurath, M. F. Il-6 signaling in inflammatory bowel disease: Pathophysiological role and clinical relevance. Inflammatory Bowel Disease. 13 (8), 1016-1023 (2007).
  25. Geesala, R., Lin, Y. M., Zhang, K., Shi, X. Z. Targeting mechano-transcription process as therapeutic intervention in gastrointestinal disorders. Frontiers in Pharmacology. 12, 809350 (2021).

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

181

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved