نموذج خنزير للانسداد الرئوي الذاتي الحاد

Summary

تقدم هذه الدراسة نموذجا للانسداد الرئوي (PE) باستخدام صمات ذاتية كبيرة تكرر PE الحاد متوسط الخطورة. النموذج مناسب تماما لتقييم كل من الفيزيولوجيا المرضية واستجابات العلاج.

Abstract

الانسداد الرئوي الحاد (PE) هو حالة قد تهدد الحياة وتسبب انسدادا مفاجئا للشرايين الرئوية ، مما يؤدي إلى قصور القلب الأيمن الحاد. يتم تطوير طرق تشخيصية جديدة وعلاجات موجهة بالقسطرة بسرعة ، وهناك حاجة واضحة لنموذج حيواني واقعي PE يمكن استخدامه للتقييم الفيزيولوجي المرضي والاختبارات قبل السريرية.

يقدم هذا البروتوكول نموذجا للخنازير يستخدم الصمات الرئوية الذاتية الكبيرة. يتم تنفيذ الأجهزة بتقنيات طفيفة التوغل ، مما يخلق نموذجا قريبا من الصدر يتيح التحقيق في خيارات العلاج المختلفة ذات قابلية التكاثر العالية. بعد ثلاث ساعات من سحب الدم لتكوين صمات ذاتية الجسم الحي ، تسبب تحريض PE في زيادة فورية في متوسط الضغط الشرياني الرئوي (17 ± 3 مم زئبق إلى 33 ± 6 مم زئبق ، ص < 0.0001) ومعدل ضربات القلب (50 ± 9 نبضات ·دقيقة ^إلى 63 ± 6 نبضات ·دقيقة ^-1 ، ص < 0.0003) مصحوبا بانخفاض النتاج القلبي (5.0 ± 0.8 لتر / دقيقة إلى 4.5 ± 0.9 لتر / دقيقة ، ص < 0.037) مقارنة بخط الأساس. كشف تصوير الأوعية الرئوية بالتصوير المقطعي المحوسب عن صمات متعددة ، وزادت نسبة الانسداد الرئوي مقارنة بخط الأساس (0٪ [0-0] إلى 57.1٪ [38.8-63.3] ، ص < 0.0001). في المرحلة الحادة ، يكون النمط الظاهري مشابها ل PE متوسط الخطورة.

يمثل النموذج نمطا ظاهريا واقعيا ومميزا جيدا ل PE متوسط المخاطر ويخلق فرصة لاختبار طرق التشخيص الجديدة والعلاجات التداخلية والصيدلانية والتدريب العملي للعاملين في مجال الرعاية الصحية في الإجراءات التدخلية.

Introduction

الانسداد الرئوي الحاد (PE) هو ثالث أكثر الأسباب شيوعا للوفاة القلبية الوعائية وهو مظهر من مظاهر الجلطات الدموية الوريدية (VTE)¹. يتراوح معدل الإصابة بالجلطات الدموية الوريدية بين 75 إلى 269 لكل 100,000 من السكان سنويا ويتزايد مع سن^{الثانية}. يواجه الناجون الأوليون خطر الوفاة لمدة 30 يوما يتراوح بين 0.5٪ للمرضى منخفضي الخطورة وما يصل إلى 22٪ للمرضى المعرضين لمخاطر^{عالية 3}. سبب الوفاة هو فشل البطين الأيمن (RV) ، والذي يحدث في الغالب في غضون ساعات ^4,5. حتى لو نجا المرضى ، فلا يزال هناك خطر الإصابة بأمراض كبيرة وأمراض مزمنة.

تشمل خيارات العلاج في المرحلة الحادة من المرض استئصال الصمام الجراحي ، وانحلال الخثرة القائم على القسطرة أو الجهازي ، والهيبارين منخفض الوزن الجزيئي ، ومضادات التخثر الفموية¹. يتوسع عدد خيارات العلاج وتنوعها ، ويتم تطوير تقنيات وطرق جديدة للتشخيص وتقييم الشدة باستمرار. قبل إجراء الدراسات السريرية ، يجب تحديد الجدوى والسلامة في إعداد قابل للتكرار ومتسق ، كما يمكن تحقيقه في نموذج حيواني. علاوة على ذلك ، يتطلب التحقيق في الفيزيولوجيا المرضية الحادة ل PE نموذجا حيوانيا مع فسيولوجيا القلب والأوعية الدموية والرئوية شبه البشرية. تم تطوير نماذج في كل من القوارض الكبيرة ، أي الخنازير^{، 6}. تتمثل ميزة النموذج الحيواني الكبير في إمكانية استخدام التقنيات السريرية وتقييم المعدات والتدخلات الجراحية المستخدمة في الممارسة السريرية. ومع ذلك ، فإن معظم هذه النماذج تستخدم مواد اصطناعية ، مثل الكرات البلاستيكية أو البالونات الانسدادية ، أو تتطلب إجراءات جراحية كبيرة لربط الشرايين الرئوية لتقليد قصور القلب الأيمن^{الحاد 7،8،9}. استخدمت إحدى الدراسات مرشح الوريد الأجوف السفلي لإحداث تجلط الدم في الموقع¹⁰. ومع ذلك ، فإن هذا يستغرق وقتا طويلا ، ويصعب التحكم في عبء الجلطة. خلقت دراسات أخرى صمات ذاتية المنشأ خارج الجسم الحي، لكن PE كان أصغر حجما^11،12. وبالتالي ، قد لا تكون هذه النماذج مناسبة لاختبار الإجراءات التداخلية.

هناك حاجة إلى نموذج حيواني يمكنه تكرار علم الأمراض البشرية ل PE. بناء على الدراسات السابقة التي أجرتها مجموعتنا^{13،14،15،16} ، نهدف إلى تقديم نموذج خنزير من PE الحاد.

Protocol

أجريت هذه الدراسة بموافقة مفتشية الدنماركية (ترخيص رقم 2021-15-0201-00944) ووفقا للمبادئ التوجيهية الدنماركية والجامعية بشأن رعاية المختبر وأخلاقياتها.

ملاحظة: اتبعت هذه الدراسة إرشادات ARRIVE 2.0¹⁷. تم احترام مبادئ 3Rs (الاستبدال والتخفيض والصقل) من خلال تقييم كل بشكل متكرر ليكون بمثابة سيطرته الخاصة ، وبالتالي تقليل عدد المطلوبة وتعظيم المعلومات التي تم جمعها. كانت الخنازير المستخدمة في هذا النموذج الحيواني عبارة عن إناث خنازير ذبح دنماركية يبلغ وزنها 60 كجم (تهجين من يوركشاير ودوروك وسلالة دنماركية). اتبعت جميع الخنازير برنامج الدنماركي الخالي من مسببات الأمراض المحددة (SPF). تم تأقلم الخنازير في مزرعة الأبحاث قبل أسبوع واحد من الدراسة لتدريب الاتصال البشري. تم إيواء الخنازير في حظائر ذات أرضيات خرسانية صلبة وفراش من القش. يبلغ قياس كل قلم 2.35 م × 2.9 م مع أقلام مجاورة للسماح بملامسة الخطم. كان للخنازير حرية الوصول إلى الماء وتم إطعامها مرتين يوميا بنظام غذائي تقليدي للخنازير ، مع إضافة البنجر المبشور لتقليل زيادة الوزن. كان للإسطبل دورة 12:12 ساعة من الضوء والظلام (الأضواء مضاءة من الساعة 6 صباحا حتى 6 مساء).

1. التخدير والتنبيب والتهوية

1. قم بتخدير الخنزير مسبقا بحقن عضلي (0.1 مل / كجم) يتكون من 2.5 مل من التيلامين (25 مجم / مل) ، و 2.5 مل من الزولازيبام (25 مجم / مل) ، و 2.5 مل من البوروفانول (10 مجم / مل) ، و 1.25 مل من الكيتامينول (100 مجم / مل) ، و 6.25 مل من الزيلازين (20 مجم / مل) لتقليل الألم المحتمل والتوتر والقلق للحيوان قبل النقل من منشأة إسكان.
2. انقل في صندوق نقل معتمد مع فراش من قش القمح.
3. إنشاء الوصول عن طريق الوريد عند الوصول.
   1. ضع عاصبة في الجزء القريب من الأذن وشدها برفق للحصول على ركود الدم الوريدي. تطهير الجلد على الوريد مرتين باستخدام مسحة الإيثانول.
   2. استخدم قسطرة وريدية 20 جم لثقب الوريد. حرر العاصبة. قم بتثبيت الوصول بعناية بشكل صحيح لتجنب الإزاحة.
   3. تحقق من الموضع الصحيح عن طريق شطف المدخل بالماء المالح متساوي التوتر.
      ملاحظة: سيظهر انتفاخ تحت الجلد إذا لم تعد القسطرة في الوريد. يمكن اعتبار إنشاء وصول وريدي ثان في الأذن المعاكسة أمرا طارئا.
4. انقل إلى طاولة العمليات وضعه مستلقا.
5. قم بتنبيب الخنزير باستخدام تنظير الحنجرة المباشر بأنبوب قصبة هوائية بحجم 7.5 وقم بتضخيم صفعة القصبة الهوائية. ثبت الأنبوب على خطم / رأس. سيمنع هذا نزع الأنبوب غير المقصود. تحقق من وضع الأنبوب الصحيح من خلال مراقبة قيمة ثاني أكسيد الكربون الزفيري على شاشة جهاز التنفس الصناعي.
6. قم بتوصيل الأنبوب بجهاز التنفس الصناعي الذي تم اختباره مسبقا وابدأ التهوية الميكانيكية.
   1. اختر إعداد التهوية المتحكم في الضغط والبوابات الحجمية واضبط مستوى صوت المد والجزر (TV) على 8 مل / كجم مع تهوية منخفضة التدفق. اضبط ضغط الزفير الموجب (PEEP) على 5 سم H₂O.
   2. اضبط جزء الأكسجين المشهم (FiO₂) على نورموكسيا (0.21) أو أعلى ، اعتمادا على البروتوكول التجريبي. تبلغ قيمة ثاني أكسيد الكربون المستهدف في نهاية المد والجزر (EtCO₂) حوالي 5.0-5.5 كيلو باسكال. اضبط معدل التنفس (RR) لتحقيق ذلك.
7. بدء التخدير العام والحفاظ عليه من خلال الوصول الوريدي إلى الأذن باستخدام البروبوفول بمعدل 4.0 مجم / كجم / ساعة والفنتانيل بمعدل 12.5 ميكروغرام / كجم / ساعة. تحقق من عدم وجود ردود أفعال القرنية والاستجابات للمنبهات المؤلمة للتأكد من إعطاء التخدير الكافي. قم بزيادة معدل التسريب في حالة وجود ردود أفعال أو استجابات وتحقق من ردود الفعل على فترات منتظمة.
   تنبيه: لا تترك دون رقابة في أي وقت أثناء البروتوكول. الامتناع عن استخدام عوامل الانسداد العصبي العضلي ، لأنها قد تحجب علامات عدم كفاية التخدير.
8. قم بتوصيل أسلاك مخطط كهربية القلب (ECG) ذات 3 أسلاك ومستشعر قياس التأكسج النبضي لمراقبة معدل ضربات القلب وإيقاع القلب وتشبع الأكسجين.
9. راقب درجة الحرارة الأساسية باستخدام مقياس حرارة المستقيم. استهدف درجة حرارة الخنازير العادية من 38-39 درجة مئوية. إذا لزم الأمر ، قم بتسخين باستخدام بطانية تسخين الهواء القسري.
10. أدخل قسطرة المثانة البولية وقم بتوصيل الطرف الخارجي بكيس عينة بول.
11. ضع مرهم العين البيطري لمنع الجفاف.

2. الوصول داخل الأوعية الدموية الموجهة بالموجات فوق الصوتية

ملاحظة: يتم إنشاء مداخل الأوعية الدموية كما هو موضح^{سابقا 18}.

1. إنشاء الوصول داخل الأوعية الدموية في الوريد الوداجي الخارجي الأيمن, الوريد الفخذي الأيمن, والشريان الفخذي الأيسر كحد أدنى.
   ملاحظة: يمكن الحصول على مزيد من الوصول اعتمادا على البروتوكول التجريبي.
   1. حلق وتطهير الجلد بالكلورهيكسيدين.
   2. تحت إجراء معقم ، استخدم جهاز الموجات فوق الصوتية لتوجيه قسطرة وريدية 17 جم إلى وضع الأوعية الدموية.
   3. قم بإزالة الإبرة من القسطرة الوريدية واستخدم تقنية Seldinger لإدخال سلك توجيهي. قم بإزالة القسطرة الوريدية واترك السلك التوجيهي في مكانه.
   4. عند نقطة الوصول ، قم بقطع شق صغير في الجلد وأدخل الغمد فوق السلك التوجيهي.
   5. لضمان الوضع الصحيح للأغماد ، اسحب الدم من كل غمد باستخدام حقنة سعة 10 مل أو 20 مل. لن يكون للغمد الموجود بشكل صحيح أي مقاومة عند شفط الدم أو مسح الوصول بالمحلول الملحي.
2. خياطة الأغماد على الجلد (مقاس 4.0).
3. قم بتوصيل غمد الشريان الفخذي بمحول ضغط الطاقة. قم بالمعايرة للضغط الجوي وراقب الشاشة للحصول على منحنى الضغط الشرياني الصحيح.
4. قم بتوصيل مضخات التسريب بمحلول ملحي متساوي التوتر بأغماد الوريد. هذا يمنع تخثر الدم داخل اللمعة.
5. لمواجهة نقص حجم الدم من الصيام قبل التجربة وسحب الدم لتكوين الصمات ، ابدأ ضخ بلعة بمقدار 800 مل على مدى 30-60 دقيقة على المضخة المتصلة بالوريد الوداجي الخارجي الأيمن.
6. لتصحيح فقدان السوائل كل ساعة من التعرق والتبول، ابدأ بتسريب 4 مل/كغ/ساعة على المضخة المتصلة بالوريد الفخذي.

3. تشكيل الجلطة

1. قم بفك عبوة نظام الأكسجين القلبي الرئوي وحدد موقع أنابيب البولي فينيل كلوريد (PVC) غير المطلية بالهيبارين بقطر خارجي وداخلي يبلغ 1/2 بوصة و 3/32 بوصة ، على التوالي. مقطعة إلى قطع طولها ~ 30 سم. تصنيع سبعة أنابيب في المجموع.
   ملاحظة: يمكن استخدام أي أنابيب PVC ذات قطر أصغر إذا كان يفضل الصمات الرقيقة.
2. إغلاق أحد طرفي الأنابيب بملقط تمرق كبير.
3. أوقف التسريب الملحي متساوي التوتر مؤقتا على أحد الأغماد الوريدية واسحب ما مجموعه 180 مل من الدم.
4. قسم الدم إلى ستة أنابيب PVC (30 مل × 6) وأغلق الجزء العلوي من الأنبوب PVC بملقط مرقئ آخر. قم بتعليق الأنابيب عموديا لمدة لا تقل عن 3 ساعات في درجة حرارة الغرفة (RT) (الشكل 1 أ).
5. اغسل المحلول الملحي في الغمد وأعد تشغيل التسريب الملحي.

4. إدخال غمد 26 فهرنهايت موجه بالتنظير الفلوري

تنبيه: يجب ارتداء معدات الحماية ، مثل مآزر الرصاص وأطواق الغدة الدرقية ، ضد الإشعاع المؤين ، عند استخدام التنظير الفلوري.

1. أوقف مضخة التسريب المتصلة بالغمد في الوريد الوداجي الخارجي الأيمن.
2. أدخل سلكا توجيهيا طويلا شديد الصلابة من خلال الغمد. استخدم التنظير الفلوري لمراقبة السلك الذي يغادر الغمد. تقدم السلك ، مسترشدا بالتنظير الفلوري ، الذيلية عبر الأوردة المركزية العلوية ، والوريد الأجوف العلوي (SVC) ، والأذين الأيمن (RA) ، وإلى الوريد الأجوف السفلي (IVC).
   ملاحظة: قد تحدث أحداث الانقباضية المبكرة أثناء مرور السلك عبر التهاب المفاصل الروماتويدي. لا ينبغي الشعور بأي مقاومة في أي وقت أثناء تقدم السلك.
3. استخرج الغمد ببطء مع ملاحظة التنظير الفلوري أن السلك التوجيهي يبقى في IVC. ضغط نقطة الدخول بمنديل معقم عند سحب الغمد.
4. استخدم تقنية Seldinger لاستبدال الغمد بموسع 16 درجة فهرنهايت. قم بتمديد شق الجلد إذا كان هناك الكثير من المقاومة. ادفع الغمد إلى الدورة الدموية الوريدية مسترشدا بالتنظير الفلوري. نقع مسبقا بالمحلول الملحي لتقليل المقاومة (الشكل 2 ب).
   ملاحظة: من المهم للغاية اتباع مسار سلك التوجيه باستخدام الموسع والتأكد من أن الموسع لا ينحرف عن السلك ، وبالتالي تجويف الوعاء.
5. استخدم تقنية Seldinger لاستبدال موسع 16 فهرنهايت بغمد 26 درجة فهرنهايت. قم بتمديد شق الجلد بمقدار 10 مم على الأقل. تقدم غمد 26 فهرنهايت ببطء ، مسترشدا بالتنظير الفلوري ، عبر الأوردة الكبيرة حتى يصل طرف الغمد ، المشار إليه بعلامة ظليل للإشعاع (وليس الموسع) ، إلى SVC (الشكل 2 د). توقع بعض المقاومة عند التقدم عبر طبقات العضلات.
   ملاحظة: إذا كانت المقاومة كبيرة جدا ، فيمكن سحب الغمد ، وإجراء شق أكبر وأعمق يشمل الأنسجة العضلية القريبة من نقطة الدخول.
6. تحت إشراف التنظير الفلوري ، اسحب الموسع وسلك التوجيه بعناية من الخنزير مع التأكد من بقاء الغمد في مكانه.
7. سحب الدم للتأكد من أن الغمد لا يزال في مكانه. اغسل ب 90 مل من المحلول الملحي لضمان تنظيف الطول الكامل للغمد.
8. ضع كومة من المناديل المعقمة أسفل الطرف الخارجي للغمد (وتحت الستارة المعقمة) لرفعه فوق مستوى القلب وتجنب إعادة ملء الدم في الغمد (الشكل 2 ج).
9. أعد توصيل مضخة التسريب واستأنف التسريب الملحي.

5. قسطرة القلب الأيمن

1. اغسل كلا منفذي قسطرة Swan-Ganz (SG) بالماء المالح. تحقق مما إذا كان البالون ينتفخ بشكل صحيح.
2. قم بتوصيل كل منفذ من منافذ قسطرة SG بمحبس 3 أو 4 اتجاهات. قم بتوصيل منفذ غير مستخدم من محبس الطاقة بمحولات الضغط. يمكن استخدام المنفذ المتبقي لكل محبس لاحقا لأخذ عينات من غازات الدم في الشريان الوريدي المركزي والرئو.
3. أعد ضبط محولات الطاقة على الضغط الجوي عن طريق تثبيت المنافذ البعيدة لقسطرة SG عند المستوى الأوسط الإبطي للخنزير.
4. أدخل قسطرة SG من خلال غمد 26 درجة فهرنهايت (الشكل 2C).
5. استخدم التنظير الفلوري لملاحظة متى يترك الطرف البعيد لقسطرة SG الغمد. لاحظ أن البالون ينتفخ بشكل صحيح. يجب أن يكون التضخم خاليا من المقاومة.
   ملاحظة: يمكن أن يتلف البالون إذا تم نفخه داخل الغمد. يتم استخدام عرض أمامي خلفي لجميع الإجراءات. لا تسحب القسطرة أبدا أثناء نفخ البالون. قد يتسبب ذلك في إزاحة البالون أو تلف الصمامات والأوتار.
6. مع نفخ البالون ، قم بدفع البالون ببطء عبر الأوردة المركزية ، التهاب المفاصل الروماتويدي ، البطين الأيمن (RV) ، وإلى الشريان الرئوي الرئيسي (MPA) (الشكل 2E).
7. لاحظ أن إشارة الضغط وشكل منحنى الضغط يتغيران مع تحرك المنفذ البعيد إلى عربة سكن متنقلة ومرة أخرى إلى المحمية المحمية.
   1. تأكد من أن إشارة الضغط تتغير من 2-8 مم زئبق في الدورة الدموية الوريدية المركزية إلى ضغط RV الانقباضي والانبساطي من 20-30 مم زئبق و 0-5 مم زئبق ، على التوالي. عند التقدم إلى MPA ، تأكد من أن الضغط الانقباضي هو 25-35 مم زئبق والانبساطي 10-15 مم زئبق.
8. تفريغ البالون. تأكد من أن قسطرة SG لا تزال في مكانها باستخدام التنظير الفلوري والإفراط في حفظ إشارات الضغط والمنحنيات.
   ملاحظة: يمكن إيقاف التجربة مؤقتا في هذه المرحلة.

6. تجميع جهاز توصيل الصمة (الشكل 3)

ملاحظة: يتكون جهاز الصمة من جزأين ، يشار إليهما باسم الجزء A والجزء B من الآن فصاعدا (الشكل 3).

1. قم بتفريغ باقي نظام الأكسجين القلبي الرئوي باستخدام خط شلل القلب المتكامل وقنية نضح الأبهر في ظل ظروف معقمة.
2. من مجموعة نقل الدم التلقائي ، حدد موقع أنبوب السيليكون بطول 10 سم (3/8 بوصة خارجي وقطر داخلي 3/32 بوصة) المتصل بالجزء السفلي من حاوية بضع القلب وقطعة الموصل 3/8 إلى 1/4 بوصة المرفقة بأنبوب السيليكون (الشكل 3 أ).
3. قطع أنبوب السيليكون إلى أنبوبين متساويين في الحجم. ضع النصف بدون الموصل جانبا في الوقت الحالي.
4. حدد موقع الخط الأولي السريع. قم بقص الخط حوالي 20 سم من نهاية قفل Luer وقم بتوصيل الطرف المفتوح للخط الأساسي السريع بنهاية 1/4 بوصة لقطعة الموصل (الشكل 3 أ).
5. حدد موقع قطعة موصل من 3/8 بوصة إلى 1/2 بوصة. قم بتوصيله بالطرف المفتوح لأنبوب السيليكون. اكتمل الجزء أ الآن (الشكل 3 أ ، ج).
6. قم بتوصيل النصف المتبقي من أنبوب السيليكون بالطرف البعيد من قنية التروية الأبهري. حدد موقع أي موصل 3/8 بوصة إلى 1/2 بوصة وأرفقه بالطرف المفتوح لأنبوب السيليكون. اكتمل الجزء B الآن (الشكل 3 ب ، جيم).

7. تقييم خط الأساس

ملاحظة: من المهم تحقيق التثبيت الديناميكي الدموي بعد الأجهزة وقبل تقييم خط الأساس. يوصى باتخاذ التدابير التالية. يمكن تعديل نطاق قياس خط الأساس وفقا للبروتوكول المحدد.

1. سجل قيم الضغط الشرياني الجهازي والرئوي ، وكذلك الضغط الوريدي المركزي.
   ملاحظة: الضغط الشرياني الرئوي المقبول هو الضغط الانقباضي < 40 مم زئبق ومتوسط الضغط الشرياني الرئوي (mPAP) ≤ 20 مم زئبق.
2. سجل درجة حرارة الجسم المركزية والتشبع المحيطي ومعدل ضربات القلب.
3. على جهاز التنفس الصناعي ، سجل قيم FiO₂ و EtCO₂ و TV وحجم الدقيقة (MV) و RR وضغط الذروة (Ppeak).
4. اسحب عينات دم 1 مل من غمد الشريان والمنفذ البعيد (الأصفر) لقسطرة SG (الوريد المختلط) لتحليل غازات الدم.
   1. في حالة وجوده ، قم بتصحيح أي خلل في الإلكتروليت و / أو انخفاض نسبة الجلوكوز في الدم لتحقيق قيم ضمن المعدل الطبيعي.
5. اعتمادا على البروتوكول التجريبي ، اسحب عينات الدم الوريدية في حاويات مناسبة لمزيد من التحليل.
6. الحصول على النتاج القلبي (CO) عن طريق التخفيف الحراري من خلال قسطرة SG. تأكد من الحصول على متوسط ثلاثة قياسات ضمن هامش 10٪.
7. الحصول على ضغط إسفين الشعيرات الدموية الرئوية (PAWP) من خلال قسطرة SG.

8. تقييم الجلطة

ملاحظة: بعد 3 ساعات على الأقل ، تكون الصمات جاهزة للحث. سيحتوي الأنبوب PVC على الصمة المشكلة والمادة الطافية السائلة. إذا لم يتخثر الدم ، انتظر لمدة 30 دقيقة أخرى قبل استرداد صمة أخرى.

1. استرجع أحد أنابيب PVC التي تحتوي على صمة مكتملة التكوين وضع الصمة برفق على منديل جراحي ، وتخلص من المادة الطافية. تأكد من أن الصمة صلبة ومستقرة للحقن (الشكل 1 ب).

9. إحداث الانسداد الرئوي الحاد (الشكل 4)

1. ضع كيسا 1000 مل من المحلول الملحي متساوي التوتر في كيس التسريب بالضغط. أدخل مجموعة التسريب وقم بنفخ كيس الضغط إلى 200 مم زئبق على الأقل (ولكن ليس بما يتجاوز الضغط الموصى به).
2. خذ الجزء A من جهاز توصيل الصمة وقم بتوصيله بالمنفذ الجانبي لمحبس ثلاثي الاتجاهات (الشكل 4 أ).
3. قم بتوصيل آخر أنبوب PVC بالطرف المفتوح من الجزء أ.
4. ضع صمة واحدة في الأنبوب واملأ النظام بالمحلول الملحي (الشكل 4 ب).
5. قم بتوصيل الجزء B بالطرف الآخر من أنبوب PVC (الشكل 4C).
   ملاحظة: تأكد من أن النظام بأكمله مليء بالمحلول الملحي.
6. أدخل جهاز الصمة في غمد 26 فهرنهايت وقم بغرس الصمة عن طريق فتح التدفق الملحي المضغوط لمدة 5 ثوان تقريبا (الشكل 4 د).
   تنبيه: راقب بعناية المعلمات الحيوية قبل وبعد حقن الصمة. إذا لم يلاحظ أي استجابة ، فقد يظل الانسداد قيد العبور ، ويتدفق المحلول الملحي لمدة 3 ثوان إضافية.

10. نموذج PE الحاد (الشكل 5 والشكل 6)

1. إحداث الصمات حتى يتضاعف mPAP من خط الأساس أو حتى يتم تحفيز الصمات الستة. راقب الاستجابة الديناميكية الدموية وانتظر الاستقرار قبل إحداث انسداد آخر.
   تنبيه: يمكن أن يصبح الخنزير غير مستقر من الناحية الديناميكية الدموية أثناء تحريض الصمة. إذا انخفض متوسط الضغط الشرياني الجهازي إلى 50 مم زئبق، فقد يكون من الضروري استخدام بلعة 0.02 مجم نورادرينالين. كرر البلعة إذا لزم الأمر.
2. بعد حقن العدد المناسب من الصمات ، يكون الخنزير مستقرا لمدة 30 دقيقة.
   ملاحظة: مظهر PE هو حالة مفرطة الديناميكية. لذلك ، يجب أن يكون mPAP في هضبة قبل الانتقال إلى القسم 11.

11. ديناميكا الدم

1. بعد 30 دقيقة من الاستقرار ، قم بإجراء تقييم PE حاد في التسجيل لتقييم خط الأساس الذي تم إجراؤه في القسم 7.
2. اعتمادا على البروتوكول ، يمكن أن تبدأ التدخلات الآن.

12. تصوير الأوعية الرئوية بالتصوير المقطعي المحوسب (CTPA) (الشكل 7)

ملاحظة: يمكن استبعاد هذا الجزء من البروتوكول اعتمادا على النطاق العلمي.

1. بينما لا يزال التنبيب والتخدير ، قم بتوصيل الخنزير بجهاز تهوية ميكانيكي قابل للنقل وانقل الخنزير إلى مرافق CTPA.
2. قم بإجراء CTPA أثناء حبس التنفس قبل تحريض PE كجزء من التقييم الأساسي.
   1. استخدم التحكم التلقائي في التعريض الضوئي عند 120 كيلو فولت مع ضبط الموازاة على 0.5 × 80 مم.
   2. عن طريق وريد الأذن بواسطة مضخة حقن آلية، يتم حقن 75 مل من محلول التباين من Iomeron (350 ملغم/مل) بتدفق 0.5 مل/ثانية متبوعا ب 30 مل من المحلول الملحي المحقون بمعدل 3.0 مل/ثانية.
3. انقل الخنزير مرة أخرى إلى غرفة المشغل واستمر في البروتوكول.
4. بعد تحريض PE ، كرر الخطوات 12.1-12.2 لتقييم PE.

13. طرق أخرى

1. اعتمادا على نطاق العمل العلمي ، قم بتقييم الخنزير وفقا لذلك.
   ملاحظة: يمكن تطبيق العديد من طرق التقييم ، غير الموصوفة بالتفصيل في هذا البروتوكول ، في النموذج: التصوير بالرنين المغناطيسي ، تخطيط صدى القلب عبر المريء ، تسجيلات حلقة حجم الضغط ثنائي البطين ، الكيمياء الحيوية ، علم وظائف الأعضاء خارج الجسم الحي والتحليل النسيجي تم استخدامها في العمل السابق^{13،14،15،16،18،19،20}.

14. القتل الرحيم والتشريح

1. قتل الخنزير بجرعة قاتلة من البنتوباربيتال (1.5 مل / كجم ، 400 مجم / مل) في نهاية البروتوكول.
   ملاحظة: اعتمادا على البروتوكول ، يمكن إجراء تشريح ، ويمكن الحصول على أخذ عينات نسيجية (الشكل 8).

النتائج

في تحليل مجمع للخنازير المدرجة في الدراسات السابقة ، نقدم النتائج التي تميز نموذج PE الحاد الموصوف في هذا البروتوكول^15،16. توفي خنزيران بسبب قصور حاد في القلب الأيمن بعد التربية البدنية. في المجموع ، قمنا بتضمين 24 خنزيرا.

...

Discussion

تصف هذه الورقة نموذجا خنزيريا من PE الحاد متوسط الخطورة باستخدام الصمات الذاتية التي تكون طفيفة التوغل وقابلة للتكاثر.

هناك بعض الخطوات الحاسمة في هذا البروتوكول. أولا ، يعد توسيع الوصول في الوريد الوداجي الخارجي الأيمن أمرا بالغ الأهمية للنموذج لأنه يعم?...

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
12L-RS	GE Healthcare Japan	5141337	Ultrasound probe
50 mL BD Luer-Lock	BD Plastipak	300865
Adhesive Aperature Drape (OneMed)	evercare	1515-01	75 cm x 90 cm (hole: 6 cm x 8 cm)
Alaris GP Guardrails plus	CareFusion	9002TIG01-G	Infusion pump
Alaris Infusion set	BD Plastipak	60593
Alcohol swap	MEDIQ Danmark	3340012	82% ethanol, 0.5% chlorhexidin, skin disinfection
Amplatz Support Wire Guide Extra-Stiff	Cook Medical	THSF-25-260-AES	diameter: 0.025 inches, length: 260 cm
Aortic Perfusion Cannula	Edwards Lifesciences	AA024TFTA	Size: 24F. Length: 30 cm.
BD Connecta	BD	394601	Luer-Lock
BD Emerald	BD	307736	10 mL syringe
BD Platipak	BD	300613	20 mL syringe
BD Venflon Pro	Becton Dickinson Infusion Therapy	393204	20 G
BD Venflon Pro	Becton Dickinson Infusion Therapy	393208	17 G
Butomidor Vet	Richter Pharma AG	531943	10 mg/mL
Chlorhexidine 0.5%	Meda AB	N/A
Cios Connect S/N 20015	Siemens Healthineers	N/A	C-arm
CP Oxygenation System Adult With Fusion and Cardioplegia 1/B	Medtronic	M450311W	Custom cardiopulmonary oxygenation system including a cardioplegia line.
D-LCC12A-01	GE Healthcare Finland	N/A	Pressure measurement monitor
Durapore	3M	N/A	Adhesive tape
E-PRESTIN-00	GE Healthcare Finland	6152932	Respirator tubes
Euthanimal	Alfasan	136278	Pentobarbitalnatrium 400 mg/mL (0.5 mL/kg for euthanasia)
Favorita II	Aesculap	GT104
Fentanyl	B. Braun	71036	50 µg/mL
Glucose isotonic	SAD	419358	55 mg/mL Isotonic glucose (500 mL bag)
Gore DrySeal Flex Introducer Sheath	GORE	DSF2633	Size: 26 French. Working length: 33 cm.
Ketaminol Vet	MSD/Intervet International B.V.	511519	100 mg/mL
Lawton 85-0010 ZK1	Lawton	N/A	Laryngoscope
Lectospiral	VYGON	1159.90	400 cm (Luer-LOCK)
MBH qufora	MBH-International A/S	13853401	Urine bag
Natriumchlorid	Fresenius Kabi	7340022100528	9 mg/mL Isotonic saline
Noradrenalin	Macure Pharma	425318	1 mg/mL
PICO50 Aterial Blood Sampler	Radiometer	956-552	2 mL
Portex Tracheal Tube	Smiths Medical	100/150/075	Cuffed Clear Oral/Nasal Murphy Eye
Pressure Extension set	CODAN	7,14,020	Tube for anesthetics, 150 cm long, inner diameter 0.9 mm
Propolipid	Fresenius Kabi	21636	Propofol, 10 mg/mL
Radiofocus Introducer II	Radiofocus/Terumo	RS+B80N10MQ	7 + 8F sheaths
Rompun Vet	Beyer	86450917	Xylazin, 20 mg/mL
Rüsch Brilliant AquaFlate Glycerine	Teleflex	178000	Bladder catheter, size 14
S/5 Avance	Datex-Ohmeda	N/A	Mechanical ventilator
Safersonic Conti Plus & Safergel	SECMA medical innovation	SAF.612.18120.WG.SEC	18 cm x 120 cm (Safersonic Sterile Transducer Cover with Adhesive Area and Safergel)
Standard Dilator	Cook Medical	G01212	Size: 16 French. Length: 20 cm.
Swan-Ganz CCOmbo	Edwards Lifesciences	744F75	110 cm
TruWave Pressure Monitoring Set	Edwards Lifesciences	T434303A	210 cm
Vigilance VGS Patient Monitor	Edwards Lifesciences	N/A
Vivid iq	GE Medical Systems China	Vivid iq
Zoletil 50 Vet (tiletamin 125 mg and zolazepam 125 mg)	Virbac	83046805	Zoletil Mix for pigs: 1 vial of Zoletil 50 Vet (dry matter); add 6.25 mL Xylozin (20 mg/mL), 1.25 mL ketamin (100 mg/mL) and 2.5 mL Butorphanol (10 mg/mL). Dose for pre-anesthesia: 0.1 mL/kg as intramuscular injection