Akut Otolog Pulmoner Embolinin Domuz Modeli

Özet

Bu çalışma, akut orta riskli PE'yi tekrarlayan büyük otolog emboli kullanan bir pulmoner emboli (PE) modeli sunmaktadır. Model, hem patofizyoloji hem de tedavi yanıtlarının değerlendirilmesi için çok uygundur.

Özet

Akut pulmoner emboli (PE), pulmoner arterlerin ani tıkanmasına neden olan ve akut sağ kalp yetmezliğine yol açan, potansiyel olarak hayatı tehdit eden bir durumdur. Yeni tanı yöntemleri ve kateter yönelimli tedaviler hızla geliştirilmektedir ve patofizyolojik değerlendirme ve klinik öncesi testler için kullanılabilecek gerçekçi bir PE hayvan modeline açık bir ihtiyaç vardır.

Bu protokol, büyük otolog pulmoner emboli kullanan bir domuz modeli sunar. Enstrümantasyonlar minimal invaziv tekniklerle gerçekleştirilir ve yüksek tekrarlanabilirlik ile çeşitli tedavi seçeneklerinin araştırılmasını sağlayan yakın göğüs modeli oluşturur. Otolog emboli ex vivo oluşturmak için kan alındıktan üç saat sonra, PE indüksiyonu ortalama pulmoner arter basıncında ani bir artışa neden oldu (17 ± 3 mmHg ila 33 ± 6 mmHg, p < 0.0001) ve kalp hızında ani bir artışa neden oldu (50 ± 9 atım · ^min-1 ila 63 ± 6 atım · ^min-1, p < 0.0003) azalmış kardiyak debi (5.0 ± 0.8 L / dk ila 4.5 ± 0.9 L / dk) ile birlikte, p < 0.037) taban çizgisine kıyasla. BT pulmoner anjiyografide multipl emboli saptandı ve pulmoner obstrüksiyon yüzdesi başlangıca göre artmıştı (%0 [0-0] ila %57.1 [38.8-63.3], p < 0.0001). Akut fazda, fenotip orta riskli PE ile karşılaştırılabilir.

Model, orta riskli PE'nin gerçekçi ve iyi karakterize edilmiş bir fenotipini temsil eder ve girişimsel prosedürlerde sağlık çalışanları için yeni tanı yöntemlerini, girişimsel ve farmasötik tedavileri ve uygulamalı eğitimi test etme fırsatı yaratır.

Giriş

Akut pulmoner emboli (PE), kardiyovasküler ölümün üçüncü en yaygın nedenidir ve venöz tromboembolizmin (VTE) bir ^{belirtisidir1}. VTE insidansı yılda 100.000 nüfus başına 75 ila 269 arasında değişmektedir ve² yaşla birlikte artmaktadır. İlk hayatta kalanlar, düşük riskli hastalar için % 0,5 ve yüksek riskli hastalar için % 22'ye kadar değişen 30 günlük bir ölüm riskiyle karşı karşıyadır³. Ölüm nedeni sağ ventrikül (RV) yetmezliğidir ve ağırlıklı olarak ^4,5 saat içinde meydana gelir. Hastalar hayatta kalsa bile, hala önemli morbidite ve kronik hastalık riski vardır.

Hastalığın akut fazındaki tedavi seçenekleri arasında cerrahi embolektomi, kateter bazlı veya sistemik tromboliz, düşük moleküler ağırlıklı heparin ve oral antikoagülanlar bulunur¹. Tedavi seçeneklerinin sayısı ve çeşitliliği genişlemektedir ve tanı ve şiddet değerlendirmesi için sürekli olarak yeni teknikler ve yöntemler geliştirilmektedir. Klinik çalışmalar yapılmadan önce, fizibilite ve güvenlik, bir hayvan modelinde elde edilebileceği gibi, tekrarlanabilir ve tutarlı bir kurulumda belirlenmelidir. Ayrıca, PE'nin akut patofizyolojisini araştırmak, insana yakın kardiyovasküler ve pulmoner fizyolojiye sahip bir hayvan modeli gerektirir. Hem kemirgenlerde hem de daha büyük hayvanlarda, yani domuzlarda modeller geliştirilmiştir⁶. Büyük bir hayvan modelinin avantajı, klinik teknikleri kullanma ve klinik uygulamada kullanılan ekipman ve cerrahi müdahaleleri değerlendirme olasılığıdır. Bununla birlikte, bu modellerin çoğu, plastik küreler veya tıkayıcı balonlar gibi yapay malzemeler kullanır veya akut sağ kalp yetmezliğini taklit etmek için pulmoner arteriyel bantlama için büyük invaziv prosedürler gerektirir ^7,8,9. Bir çalışmada, in situ¹⁰ trombozu oluşturmak için inferior vena kava filtresi kullanılmıştır. Ancak bu zaman alıcıdır ve pıhtı yükünün kontrol edilmesi zordur. Diğer çalışmalar ex vivo otolog emboli oluşturmuştur, ancak PE^11,12 boyutunda daha küçüktür. Bu nedenle, bu modeller girişimsel prosedürleri test etmek için uygun olmayabilir.

PE'nin insan patolojisini kopyalayabilecek bir hayvan modeline ihtiyaç vardır. ^13,14,15,16 grubumuz tarafından yapılan önceki çalışmalara dayanarak, akut PE'nin bir domuz modelini sunmayı amaçlıyoruz.

Protokol

Bu çalışma, Danimarka Hayvan Müfettişliği'nin (lisans no. 2021-15-0201-00944) onayı ile ve laboratuvar hayvanlarının refahı ve etiğine ilişkin Danimarka ve üniversite yönergelerine uygun olarak gerçekleştirilmiştir.

NOT: Bu çalışma ARRIVE yönergeleri 2.0^17'yi takip etmiştir. 3R'lerin (Değiştirme, Azaltma ve İyileştirme) ilkelerine, her bir hayvanın kendi kontrolü olarak hizmet etmesi için tekrar tekrar değerlendirilmesi, böylece ihtiyaç duyulan hayvan sayısının azaltılması ve toplanan bilgilerin en üst düzeye çıkarılması ile saygı gösterildi. Bu hayvan modelinde kullanılan domuzlar, 60 kg'lık dişi Danimarka kesim domuzlarıydı (Yorkshire, Duroc ve Danimarka Landrace'in bir melezi). Tüm domuzlar Danimarka Spesifik Patojen İçermez (SPF) programını takip etti. Domuzlar, insan temasını eğitmek için çalışmadan bir hafta önce araştırma çiftliğinde iklimlendirildi. Domuzlar, sağlam beton zeminli ve saman yataklı ağıllara yerleştirildi. Her bir kalem 2,35 m x 2,9 m ölçülerindeydi ve burun temasına izin vermek için bitişik kalemler vardı. Domuzların suya ücretsiz erişimi vardı ve günde iki kez geleneksel bir domuz diyetiyle beslendiler ve kilo alımını azaltmak için kıyılmış pancar eklendi. Ahırın 12:12 saatlik bir aydınlık-karanlık döngüsü vardı (ışıklar sabah 6'dan akşam 6'ya kadar açık).

1. Anestezi, entübasyon ve ventilasyon

1. Domuzu 2.5 mL tiletamin (25 mg / mL), 2.5 mL zolazepam (25 mg / mL), 2.5 mL burofanol (10 mg / mL), 1.25 mL ketaminol (100 mg / mL) ve 6.25 mL ksilazin (20 mg / mL) içeren intramüsküler enjeksiyon (0.1 mL / kg) ile önceden anestezik hale getirin.
2. Hayvanı, buğday samanı yataklı onaylı bir taşıma kutusunda taşıyın.
3. Varışta intravenöz erişim sağlayın.
   1. Kulağın proksimal kısmına bir turnike yerleştirin ve venöz kan stazı elde etmek için hafifçe sıkın. Cildi bir etanol çubuğuyla iki kez bir damar üzerinde dezenfekte edin.
   2. Damarı delmek için 20 G'lik bir venöz kateter kullanın. Turnikeyi serbest bırakın. Yer değiştirmeyi önlemek için erişimi dikkatli bir şekilde düzgün bir şekilde sabitleyin.
   3. Erişimi izotonik tuzlu suyla yıkayarak doğru yerleşimi kontrol edin.
      NOT: Kateter artık damar içinde değilse deri altı bir çıkıntı ortaya çıkacaktır. Karşı kulakta ikinci bir intravenöz erişim kurulması bir olasılık olarak kabul edilebilir.
4. Hayvanı bir ameliyat masasına taşıyın ve sırtüstü yatırın.
5. Domuzu 7.5 boyutunda bir trakeal tüp ile doğrudan laringoskopi kullanarak entübe edin ve trakeal manşeti şişirin. Tüpü hayvanın burnuna/kafasına sabitleyin. Bu, kasıtsız ekstübasyonu önleyecektir. Ventilatör ekranında ekspiratuar karbondioksit değerini gözlemleyerek tüp konumunun doğru olup olmadığını kontrol edin.
6. Tüpü önceden test edilmiş bir ventilatöre bağlayın ve mekanik ventilasyona başlayın.
   1. Basınç kontrollü, hacim kapılı ventilasyon ayarını seçin ve düşük akışlı ventilasyon ile tidal hacmi (TV) 8 mL/kg'a ayarlayın. Pozitif ekspirasyon sonu basıncını (PEEP) 5 cmH₂O'ya ayarlayın.
   2. Deneysel protokole bağlı olarak, solunan oksijen oranını (FiO₂) normoxia (0.21) veya daha yükseğe ayarlayın. Hedef gelgit sonu karbondioksit (EtCO₂) değeri yaklaşık 5.0-5.5 kPa'dır. Bunu başarmak için solunum hızını (RR) ayarlayın.
7. 4.0 mg / kg / s'de propofol ve 12.5 μg / kg / s'de fentanil kullanarak kulakta intravenöz erişim yoluyla genel anesteziyi başlatın ve sürdürün. Yeterli anestezinin uygulandığından emin olmak için kornea reflekslerinin eksikliğini ve ağrılı uyaranlara verilen yanıtları kontrol edin. Refleksler veya yanıtlar varsa infüzyon hızını artırın ve düzenli aralıklarla refleksleri kontrol edin.
   DİKKAT: Protokol sırasında hiçbir noktada hayvanı gözetimsiz bırakmayın. Yetersiz anestezi belirtilerini gizleyebilecekleri için nöromüsküler bloke edici ajanları kullanmaktan kaçının.
8. Kalp atış hızını, kalp ritmini ve oksijen doygunluğunu izlemek için 3 uçlu elektrokardiyogram (EKG) kabloları ve nabız oksimetre sensörü takın.
9. Rektal termometre ile çekirdek sıcaklığını izleyin. 38-39 °C'lik normal bir domuz sıcaklığını hedefleyin. Gerekirse, hayvanı cebri hava ısıtma battaniyesi kullanarak ısıtın.
10. Bir idrar kesesi kateteri yerleştirin ve dış ucunu bir idrar örneği torbasına bağlayın.
11. Kuruluğu önlemek için veteriner göz merhemi uygulayın.

2. Ultrason eşliğinde intravasküler erişimler

NOT: İntravasküler erişimler daha önce tarif edildiği gibi kurulur¹⁸.

1. En azından sağ dış juguler ven, sağ femoral ven ve sol femoral arterde intravasküler erişim sağlayın.
   NOT: Deneysel protokole bağlı olarak daha fazla erişim elde edilebilir.
   1. Cildi klorheksidin ile tıraş edin ve dezenfekte edin.
   2. Steril prosedür altında, 17 G venöz kateteri intravasküler pozisyona yönlendirmek için bir ultrason cihazı kullanın.
   3. İğneyi venöz kateterden çıkarın ve bir kılavuz tel yerleştirmek için Seldinger tekniğini kullanın. Venöz kateteri çıkarın ve kılavuz teli yerinde bırakın.
   4. Erişim noktasında, deride küçük bir kesi kesin ve kılıfı kılavuz telin üzerine yerleştirin.
   5. Kılıfların doğru yerleştirilmesini sağlamak için, 10 mL veya 20 mL'lik bir şırınga kullanarak her kılıftan kan alın. Doğru yerleştirilmiş bir kılıf, kan aspire edildiğinde veya erişim salinle yıkandığında hiçbir direnç göstermez.
2. Kılıfları cilde dikin (boyut 4.0).
3. Femoral arterdeki kılıfı bir basınç dönüştürücüsüne bağlayın. Atmosferik basınca kalibre edin ve doğru bir arteriyel basınç eğrisi için ekranı gözlemleyin.
4. İzotonik salin ile infüzyon pompalarını venöz kılıflara bağlayın. Bu, intraluminal kanın pıhtılaşmasını önler.
5. Deneyden önce oruç tutmaktan kaynaklanan hipovolemiyi önlemek ve emboli oluşturmak için kan almak için, sağ dış juguler ven'e bağlı pompada 30-60 dakika boyunca 800 mL'lik bir bolus infüzyonu başlatın.
6. Terleme ve idrara çıkmadan kaynaklanan saatlik sıvı kaybını düzeltmek için, femoral vene bağlı pompada 4 mL/kg/s'lik bir infüzyon başlatın.

3. Pıhtı oluşumu

1. Bir kardiyopulmoner oksijenasyon sistemini ambalajından çıkarın ve sırasıyla 1/2 inç ve 3/32 inç dış ve iç çapa sahip heparin kaplı olmayan polivinil klorür (PVC) tüplerini bulun. ~30 cm uzunluğunda parçalar halinde kesin. Toplamda yedi tüp üretin.
   NOT: Daha ince emboliler tercih edilirse daha küçük çaplı PVC tüpler kullanılabilir.
2. Tüplerin bir ucunu büyük hemostat forsepsleri ile kapatın.
3. Venöz kılıflardan birinde izotonik salin infüzyonunu duraklatın ve toplam 180 mL kan çekin.
4. Kanı altı PVC tüpe (30 mL x 6) bölün ve PVC tüpün üst kısmını başka bir hemostat forseps ile kapatın. Tüpleri oda sıcaklığında (RT) en az 3 saat dikey olarak asın (Şekil 1A).
5. Kılıftaki salini yıkayın ve tuzlu su infüzyonunu yeniden başlatın.

4. Floroskopi eşliğinde 26 F kılıfın yerleştirilmesi

DİKKAT: Floroskopi kullanımda olduğunda iyonlaştırıcı radyasyona karşı kurşun önlükler ve tiroid yakaları gibi koruyucu giysiler giyilmelidir.

1. Sağ dış juguler vendeki kılıfa bağlı infüzyon pompasını duraklatın.
2. Kılıfın içinden uzun, ekstra sert bir kılavuz tel yerleştirin. Kılıftan çıkan teli gözlemlemek için floroskopi kullanın. Floroskopi ile yönlendirilen teli, üst merkezi venlerden, superior vena kava'dan (SVC), sağ atriyumdan (RA) ve inferior vena kava'ya (IVC) kaudal ilerletin.
   NOT: Tel RA'dan geçerken erken sistolik olaylar meydana gelebilir. Tel ilerletilirken herhangi bir noktada herhangi bir direnç hissedilmemelidir.
3. Floroskopi ile kılavuz telin IVC'de kaldığını gözlemlerken kılıfı yavaşça çıkarın. Kılıfı geri çekerken giriş noktasını steril bir peçete ile sıkıştırın.
4. Kılıfı 16 F dilatör ile değiştirmek için Seldinger tekniğini kullanın. Çok fazla direnç varsa cilt kesisini uzatın. Kılıfı floroskopi ile yönlendirilen venöz dolaşıma ilerletin. Direnci en aza indirmek için tuzlu su ile önceden ıslatın (Şekil 2B).
   NOT: Dilatör ile kılavuz telin seyrini takip etmek ve dilatörün telden ve dolayısıyla kabın lümeninden sapmadığından emin olmak son derece önemlidir.
5. 16 F dilatörü 26 F kılıfla değiştirmek için Seldinger tekniğini kullanın. Cilt kesisini en az 10 mm uzatın. 26 F kılıfı, floroskopi ile yönlendirilen 26 F kılıfı, radyoopak bir işaretleyici (dilatör değil) ile gösterilen kılıfın ucu SVC'ye ulaşana kadar büyük damarlar boyunca yavaşça ilerletin (Şekil 2D). Kas katmanları boyunca ilerlerken biraz direnç bekleyin.
   NOT: Direnç çok büyükse, kılıf geri çekilebilir ve giriş noktasına yakın kas dokusunu kapsayan daha büyük ve daha derin bir kesi yapılabilir.
6. Floroskopi rehberliğinde, kılıfın yerinde kaldığından emin olurken dilatörü ve kılavuz teli dikkatlice domuzdan geri çekin.
7. Kılıfın hala yerinde olduğundan emin olmak için kan alın. Kılıfın tam uzunluğunun yıkandığından emin olmak için 90 mL tuzlu su ile yıkayın.
8. Kılıfın dış ucunun altına (ve steril örtünün altına) bir yığın steril peçete yerleştirin, böylece kılıfı kalp seviyesinin üzerine yükseltin ve kılıfın içine kan doldurmaktan kaçının (Şekil 2C).
9. İnfüzyon pompasını tekrar bağlayın ve tuzlu su infüzyonuna devam edin.

5. Sağ kalp kateterizasyonu

1. Swan-Ganz (SG) kateterinin her iki portunu da tuzlu suyla yıkayın. Balonun doğru şekilde şişip şişmediğini kontrol edin.
2. SG kateter portlarının her birini 3 veya 4 bir vanaya bağlayın. Vananın kullanılmayan bir portunu basınç transdüserlerine bağlayın. Her bir musluğun kalan portu daha sonra merkezi venöz ve pulmoner arteriyel kan gazı örneklemesi için kullanılabilir.
3. SG kateterinin distal portlarını domuzun orta aksiller seviyesinde tutarak dönüştürücüleri atmosferik basınca sıfırlayın.
4. SG kateterini 26 F kılıftan geçirin (Şekil 2C).
5. SG kateterinin distal ucunun kılıftan ne zaman ayrıldığını gözlemlemek için floroskopi kullanın. Balonun düzgün bir şekilde şiştiğini gözlemleyin. Enflasyon dirençsiz olmalıdır.
   NOT: Kılıfın içinde şişirilirse balon zarar görebilir. Tüm işlemler için ön-arka görünüm kullanılır. Balon şişirilirken kateteri asla geri çekmeyin. Bu, balonun yerinden çıkmasına veya valflere ve kordalara zarar vermesine neden olabilir.
6. Balon şişirildiğinde, balonu merkezi venlerden, RA'dan, sağ ventrikülden (RV) ve ana pulmoner artere (MPA) yavaşça ilerletin (Şekil 2E).
7. Distal port RV'ye ve tekrar MPA'ya hareket ettikçe basınç sinyalinin ve basınç eğrisi şeklinin değiştiğini gözlemleyin.
   1. Basınç sinyalinin merkezi venöz dolaşımda 2-8 mmHg'den sırasıyla 20-30 mmHg ve 0-5 mmHg'lik sistolik ve diyastolik RV basıncına değiştiğinden emin olun. MPA'ya ilerlerken sistolik basıncın 25-35 mmHg ve diyastolik 10-15 mmHg olduğundan emin olun.
8. Balonu söndürün. Floroskopi kullanarak ve basınç sinyallerini ve eğrilerini aşırı servis ederek SG kateterinin hala yerinde olduğundan emin olun.
   NOT: Bu noktada deney duraklatılabilir.

6. Emboli dağıtım cihazının montajı (Şekil 3)

NOT: Emboli cihazı buradan itibaren A ve B kısımları olarak anılacak olan iki parçadan oluşmaktadır (Şekil 3).

1. Steril koşullar altında entegre bir kardiyopleji hattı ve aort perfüzyon kanülü ile kardiyopulmoner oksijenasyon sisteminin geri kalanını ambalajından çıkarın.
2. Ototransfüzyon setinden, kardiyotomi kabının dibine takılan 10 cm uzunluğundaki silikon tüpü (3/8 inç dış ve 3/32 inç iç çap) ve silikon tüpe bağlı 3/8 ila 1/4 inç konektör parçasını bulun (Şekil 3A).
3. Silikon tüpü eşit büyüklükte iki tüpe kesin. Konektörsüz yarısını şimdilik bir kenara koyun.
4. Hızlı prime çizgisini bulun. Hattı Luer kilit ucundan yaklaşık 20 cm uzakta kesin ve hızlı prime hattının açık ucunu konektör parçasının 1/4 inç ucuna takın (Şekil 3A).
5. 3/8 inç ila 1/2 inç konektör parçası bulun. Silikon tüpün açık ucuna bağlayın. Bölüm A şimdi tamamlanmıştır (Şekil 3A, C).
6. Silikon tüpün kalan yarısını aort perfüzyon kanülünün distal ucuna takın. Silikon tüpün açık ucuna herhangi bir 3/8 inç ila 1/2 inç konektörü bulun ve takın. Bölüm B şimdi tamamlanmıştır (Şekil 3B,C).

7. Temel değerlendirme

NOT: Enstrümantasyondan sonra ve başlangıç değerlendirmesinden önce hemodinamik stabilizasyonun sağlanması önemlidir. Aşağıdaki önlemler önerilir. Temel ölçümün kapsamı, belirli protokole göre ayarlanabilir.

1. Sistemik ve pulmoner arter basınçlarının yanı sıra merkezi venöz basıncın değerlerini kaydedin.
   NOT: Kabul edilebilir pulmoner arter basınçları 40 mmHg'< sistolik basınç ve 20 mmHg≤ ortalama pulmoner arter basıncıdır (mPAP).
2. Merkezi vücut sıcaklığını, periferik doygunluğu ve kalp atış hızını kaydedin.
3. Solunum cihazında FiO₂, EtCO₂, TV, dakika hacmi (MV), RR ve tepe basıncı (Ppeak) değerlerini kaydedin.
4. Kan gazı analizi için arteriyel kılıftan ve SG kateterinin (karışık venöz) distal (sarı) portundan 1 mL kan örneği alın.
   1. Varsa, normal aralıktaki değerlere ulaşmak için herhangi bir elektrolit dengesizliğini ve/veya düşük kan şekerini düzeltin.
5. Deneysel protokole bağlı olarak, daha fazla analiz için uygun kaplarda venöz kan örnekleri alın.
6. SG kateteri yoluyla termodilüsyon yoluyla kardiyak debi (CO) elde edin. %10'luk bir marj içinde ortalama üç ölçüm elde edildiğinden emin olun.
7. SG kateterinden pulmoner kılcal kama basıncı (PAWP) elde edin.

8. Pıhtı değerlendirmesi

NOT: En az 3 saat sonra, emboli indüklenmeye hazırdır. PVC tüp, oluşan emboliyi ve sıvı süpernatanı içerecektir. Kan pıhtılaşmadıysa, başka bir emboli almadan önce 30 dakika daha bekleyin.

1. Tamamen oluşturulmuş bir emboli içeren PVC tüplerden birini alın ve emboliyi nazikçe cerrahi bir peçeteye yerleştirin ve süpernatanı atın. Embolinin enjeksiyon için sert ve stabil olduğundan emin olun (Şekil 1B).

9. Akut pulmoner embolinin indüklenmesi (Şekil 4)

1. Bir basınçlı infüzyon torbasına 1000 mL'lik bir izotonik salin torbası yerleştirin. Bir infüzyon seti yerleştirin ve basınç torbasını en az 200 mmHg'ye kadar şişirin (ancak önerilen basıncın ötesinde değil).
2. Emboli uygulama cihazının A parçasını alın ve 3 vananın yan portuna bağlayın (Şekil 4A).
3. Son PVC boruyu A parçasının açık ucuna bağlayın.
4. Tüpe bir embolu yerleştirin ve sistemi tuzlu su ile doldurun (Şekil 4B).
5. B parçasını PVC borunun diğer ucuna takın (Şekil 4C).
   NOT: Tüm sistemin tuzlu su ile doldurulduğundan emin olun.
6. Emboli cihazını 26 F kılıfın içine yerleştirin ve basınçlı tuzlu su akışını yaklaşık 5 saniye açarak emboliyi infüze edin (Şekil 4D).
   DİKKAT: Emboli enjeksiyonundan önce ve sonra hayati parametreleri dikkatlice gözlemleyin. Herhangi bir yanıt gözlenmezse, emboli hala yolda olabilir ve salini 3 saniye daha yıkayın.

10. Akut PE modeli (Şekil 5 ve Şekil 6)

1. mPAP taban çizgisinden iki katına çıkana kadar veya altı embolinin tümü indüklenene kadar emboliyi indükleyin. Hemodinamik yanıtı izleyin ve başka bir emboli indüklemeden önce stabilizasyonu bekleyin.
   DİKKAT: Domuz, bir emboli indüksiyonu sırasında hemodinamik olarak kararsız hale gelebilir. Ortalama sistemik arter basıncı 50 mmHg'ye düşerse, 0.02 mg norepinefrin bolusu gerekli olabilir. Gerekirse bolusu tekrarlayın.
2. Uygun sayıda emboli enjekte edildikten sonra, domuz 30 dakika boyunca stabildir.
   NOT: PE'nin tezahürü hiperdinamik bir durumdur. Bu nedenle, mPAP bölüm 11'e geçmeden önce bir platoda olmalıdır.

11. Hemodinamik

1. 30 dakikalık stabilizasyondan sonra, bölüm 7'de gerçekleştirilen temel değerlendirmeye kayıt yaparken akut PE değerlendirmesi yapın.
2. Protokole bağlı olarak, müdahaleler artık başlayabilir.

12. Bilgisayarlı tomografi pulmoner anjiyografi (BTPA) (Şekil 7)

NOT: Protokolün bu kısmı bilimsel kapsama bağlı olarak hariç tutulabilir.

1. Hala entübe ve anestezi altındayken, domuzu taşınabilir bir mekanik ventilatöre bağlayın ve domuzu CTPA tesislerine taşıyın.
2. Başlangıç değerlendirmesinin bir parçası olarak PE indüksiyonundan önce inspiratuar nefes tutma sırasında CTPA gerçekleştirin.
   1. 0,5 x 80 mm'ye ayarlanmış bir kolimasyon ile 120 KV'de otomatik pozlama kontrolünü kullanın.
   2. Otomatik bir enjeksiyon pompası ile bir kulak damarı yoluyla, 0.5 mL / s'lik bir akışla 75 mL kontrast Iomeron çözeltisi (350 mg / mL) enjekte edin ve ardından 3.0 mL / s'de enjekte edilen 30 mL salin çözeltisi enjekte edin.
3. Domuzu operatör odasına geri taşıyın ve protokole devam edin.
4. PE indüksiyonundan sonra, PE değerlendirmesi için 12.1-12.2 adımlarını tekrarlayın.

13. Diğer yöntemler

1. Bilimsel çalışmanın kapsamına bağlı olarak, domuzu buna göre değerlendirin.
   NOT: Bu protokolde ayrıntılı olarak açıklanmayan çok sayıda değerlendirme yöntemi modelde uygulanabilir: manyetik rezonans görüntüleme, transözofageal ekokardiyografi, bi-ventriküler basınç-hacim döngü kayıtları, biyokimyasal, ex vivo-fizyoloji ve histolojik analiz önceki çalışmalarda kullanılmıştır 13,14,15,16,18,19,20.

14. Ötenazi ve nekropsi

1. Protokolün sonunda domuzu öldürücü dozda pentobarbital (1.5 mL / kg, 400 mg / mL) ile ötenazi yapın.
   NOT: Protokole bağlı olarak nekropsi yapılabilir ve histolojik örnekleme yapılabilir (Şekil 8).

Sonuçlar

Önceki çalışmalarda yer alan domuzların birleştirilmiş bir analizinde, bu protokolde^15,16 açıklanan akut PE modelini karakterize eden sonuçları sunuyoruz. İki domuz, PE'yi takiben akut sağ kalp yetmezliğinden öldü. Toplamda 24 domuzu dahil ettik.

Hemodinamik
Her emboli sonrası yanıt Şekil 5'te belirgindir. PE indüksiyonu (5 ± 1), mP...

Tartışmalar

Bu yazıda, minimal invaziv ve tekrarlanabilir otolog emboli kullanan akut, orta riskli bir PE domuz modeli anlatılmaktadır.

Bu protokolde bazı kritik adımlar vardır. İlk olarak, sağ eksternal juguler vendeki erişimin genişlemesi, emboli için erişim noktası görevi gördüğü için model için çok önemlidir. Büyük kılıfı ilerletirken, ana damarların veya sağ kalp odacıklarının yırtılmasını veya diseksiyonunu önlemek için sürekli...

Malzemeler

Name	Company	Catalog Number	Comments
12L-RS	GE Healthcare Japan	5141337	Ultrasound probe
50 mL BD Luer-Lock	BD Plastipak	300865
Adhesive Aperature Drape (OneMed)	evercare	1515-01	75 cm x 90 cm (hole: 6 cm x 8 cm)
Alaris GP Guardrails plus	CareFusion	9002TIG01-G	Infusion pump
Alaris Infusion set	BD Plastipak	60593
Alcohol swap	MEDIQ Danmark	3340012	82% ethanol, 0.5% chlorhexidin, skin disinfection
Amplatz Support Wire Guide Extra-Stiff	Cook Medical	THSF-25-260-AES	diameter: 0.025 inches, length: 260 cm
Aortic Perfusion Cannula	Edwards Lifesciences	AA024TFTA	Size: 24F. Length: 30 cm.
BD Connecta	BD	394601	Luer-Lock
BD Emerald	BD	307736	10 mL syringe
BD Platipak	BD	300613	20 mL syringe
BD Venflon Pro	Becton Dickinson Infusion Therapy	393204	20 G
BD Venflon Pro	Becton Dickinson Infusion Therapy	393208	17 G
Butomidor Vet	Richter Pharma AG	531943	10 mg/mL
Chlorhexidine 0.5%	Meda AB	N/A
Cios Connect S/N 20015	Siemens Healthineers	N/A	C-arm
CP Oxygenation System Adult With Fusion and Cardioplegia 1/B	Medtronic	M450311W	Custom cardiopulmonary oxygenation system including a cardioplegia line.
D-LCC12A-01	GE Healthcare Finland	N/A	Pressure measurement monitor
Durapore	3M	N/A	Adhesive tape
E-PRESTIN-00	GE Healthcare Finland	6152932	Respirator tubes
Euthanimal	Alfasan	136278	Pentobarbitalnatrium 400 mg/mL (0.5 mL/kg for euthanasia)
Favorita II	Aesculap	GT104
Fentanyl	B. Braun	71036	50 µg/mL
Glucose isotonic	SAD	419358	55 mg/mL Isotonic glucose (500 mL bag)
Gore DrySeal Flex Introducer Sheath	GORE	DSF2633	Size: 26 French. Working length: 33 cm.
Ketaminol Vet	MSD/Intervet International B.V.	511519	100 mg/mL
Lawton 85-0010 ZK1	Lawton	N/A	Laryngoscope
Lectospiral	VYGON	1159.90	400 cm (Luer-LOCK)
MBH qufora	MBH-International A/S	13853401	Urine bag
Natriumchlorid	Fresenius Kabi	7340022100528	9 mg/mL Isotonic saline
Noradrenalin	Macure Pharma	425318	1 mg/mL
PICO50 Aterial Blood Sampler	Radiometer	956-552	2 mL
Portex Tracheal Tube	Smiths Medical	100/150/075	Cuffed Clear Oral/Nasal Murphy Eye
Pressure Extension set	CODAN	7,14,020	Tube for anesthetics, 150 cm long, inner diameter 0.9 mm
Propolipid	Fresenius Kabi	21636	Propofol, 10 mg/mL
Radiofocus Introducer II	Radiofocus/Terumo	RS+B80N10MQ	7 + 8F sheaths
Rompun Vet	Beyer	86450917	Xylazin, 20 mg/mL
Rüsch Brilliant AquaFlate Glycerine	Teleflex	178000	Bladder catheter, size 14
S/5 Avance	Datex-Ohmeda	N/A	Mechanical ventilator
Safersonic Conti Plus & Safergel	SECMA medical innovation	SAF.612.18120.WG.SEC	18 cm x 120 cm (Safersonic Sterile Transducer Cover with Adhesive Area and Safergel)
Standard Dilator	Cook Medical	G01212	Size: 16 French. Length: 20 cm.
Swan-Ganz CCOmbo	Edwards Lifesciences	744F75	110 cm
TruWave Pressure Monitoring Set	Edwards Lifesciences	T434303A	210 cm
Vigilance VGS Patient Monitor	Edwards Lifesciences	N/A
Vivid iq	GE Medical Systems China	Vivid iq
Zoletil 50 Vet (tiletamin 125 mg and zolazepam 125 mg)	Virbac	83046805	Zoletil Mix for pigs: 1 vial of Zoletil 50 Vet (dry matter); add 6.25 mL Xylozin (20 mg/mL), 1.25 mL ketamin (100 mg/mL) and 2.5 mL Butorphanol (10 mg/mL). Dose for pre-anesthesia: 0.1 mL/kg as intramuscular injection