급성 자가 폐색전증의 돼지 모델

요약

이 연구는 급성 중간 위험 PE를 복제하는 큰 자가 색전증을 사용하는 폐색전증(PE)의 돼지 모델을 제시합니다. 이 모델은 병태생리학과 치료 반응을 모두 평가하는 데 적합합니다.

초록

급성 폐색전증(PE)은 폐동맥의 갑작스러운 폐색을 유발하여 급성 우심부전을 유발하는 잠재적으로 생명을 위협하는 상태입니다. 새로운 진단 방법과 카테터 유도 요법이 빠르게 개발되고 있으며, 병태생리학적 평가 및 전임상 검사에 사용할 수 있는 현실적인 PE 동물 모델에 대한 필요성이 분명합니다.

이 프로토콜은 큰 자가 폐색전을 사용하는 돼지 모델을 도입합니다. 기구 삽입은 최소 침습 기법으로 수행되며, 높은 재현성으로 다양한 치료 옵션을 조사할 수 있는 폐쇄 흉부 모델을 만듭니다. 체외에서 자가 색전을 만들기 위해 혈액을 채취한 지 3시간 후, PE의 유도는 평균 폐동맥압(17 ± 3 mmHg to 33 ± 6 mmHg, p < 0.0001)과 심박수(50 ± 9 beats·^min-1 to 63 ± 6 beats·^min-1, p < 0.0003)의 즉각적인 증가를 동반하여 심박출량(5.0 ± 0.8 L/min에서 4.5 ± 0.9 L/min, p < 0.037)를 기준선과 비교했습니다. CT 폐혈관조영술에서 다발성 색전이 확인되었고, 폐폐색율이 기준선에 비해 증가했다(0%[0-0] - 57.1%[38.8-63.3], p < 0.0001). 급성기에서 표현형은 중간 위험 PE와 비슷합니다.

이 모델은 중간 위험 PE의 현실적이고 잘 특성화된 표현형을 나타내며 새로운 진단 방법, 중재 및 약물 치료, 중재 절차에서 의료 종사자를 위한 실습 교육을 테스트할 수 있는 기회를 제공합니다.

서문

급성 폐색전증(PE)은 심혈관 질환으로 인한 사망 원인 중 세 번째로 흔한 질환으로, 정맥혈전색전증(VTE)의 징후입니다¹. VTE의 발병률은 연간 인구 100,000명당 75명에서 269명 사이이며²세에 따라 증가하고 있습니다. 초기 생존자는 30일 내 사망 위험에 직면해 있으며, 저위험 환자의 경우 0.5%, 고위험 환자의 경우 최대 22%에 이른다³. 사망 원인은 우심실(RV) 부전으로, 주로 ^4,5시간 이내에 발생합니다. 환자가 생존하더라도 여전히 심각한 이환율과 만성 질환의 위험이 있습니다.

급성기의 치료 방법으로는 외과적 색전제거술, 카테터 기반 또는 전신 혈전용해술, 저분자량 헤파린, 경구용 항응고제^{등이 있다 1}. 치료 옵션의 수와 다양성이 확대되고 있으며, 진단 및 중증도 평가를 위한 새로운 기술과 방법이 지속적으로 개발되고 있습니다. 임상 연구를 수행하기 전에 동물 모델에서와 같이 재현 가능하고 일관된 설정에서 타당성과 안전성을 결정해야 합니다. 또한 PE의 급성 병태생리학을 조사하기 위해서는 인간에 가까운 심혈관 및 폐 생리학을 가진 동물 모델이 필요합니다. 설치류와 더 큰 동물, 즉 돼지 모두에 대한 모델이 개발되었습니다⁶. 대형 동물 모델의 장점은 임상 기술을 사용하고 임상 실습에 사용되는 장비 및 수술 개입을 평가할 수 있다는 것입니다. 그러나 이러한 모델의 대부분은 플라스틱 구체 또는 폐색성 풍선과 같은 인공 물질을 사용하거나 급성 우심부전을 모방하기 위해 폐동맥 밴딩에 대한 대규모 침습적 절차가 필요합니다 ^7,8,9. 한 연구에서는 하대정맥 필터를 사용하여 제¹⁰항 내 혈전증을 일으켰다. 그러나 이는 시간이 많이 걸리고 혈전 부담을 제어하기 어렵습니다. 다른 연구에서는 체외(ex vivo)의 자가 색전을 만들었지만, PE는 크기가 더 작았다^11,12. 따라서 이러한 모델은 중재적 절차를 테스트하는 데 적합하지 않을 수 있습니다.

PE의 인간 병리학을 복제할 수 있는 동물 모델이 필요합니다. 우리 그룹^13,14,15,16에서 수행한 이전 연구를 기반으로 급성 PE의 돼지 모델을 제시하는 것을 목표로 합니다.

프로토콜

본 연구는 덴마크 동물검사국(면허번호 2021-15-0201-00944)의 승인을 받고 실험실 동물 복지 및 윤리에 관한 덴마크 및 대학의 가이드라인에 따라 수행되었습니다.

참고: 이 연구는 ARRIVE 가이드라인 2.0¹⁷을 따랐다. 3R(Replacement, Reduction, and Refinement)의 원칙은 각 동물을 반복적으로 평가하여 자체 통제 역할을 함으로써 필요한 동물의 수를 줄이고 수집된 정보를 극대화함으로써 존중되었습니다. 이 동물 모델에 사용된 돼지는 60kg의 암컷 덴마크 도축용 돼지(Yorkshire, Duroc 및 Danish Landrace의 교배종)였습니다. 모든 돼지는 덴마크 특이 병원균 무함유(SPF) 프로그램을 따랐습니다. 돼지들은 인간 접촉을 훈련시키기 위해 연구 일주일 전에 연구 농장에서 순응했습니다. 돼지들은 단단한 콘크리트 바닥과 짚으로 만든 침구가 깔린 우리에 사육되었다. 각 펜의 크기는 2.35m x 2.9m였으며 주둥이가 접촉할 수 있도록 인접한 펜이 있었습니다. 돼지는 물을 자유롭게 마실 수 있었고 체중 증가를 줄이기 위해 잘게 썬 비트를 첨가한 기존 돼지 식단으로 하루에 두 번 먹이를 주었습니다. 마구간은 12시 12분의 명암 주기(오전 6시부터 오후 6시까지 점등)를 가졌습니다.

1. 마취, 삽관 및 인공호흡

1. 틸레타민(25mg/mL) 2.5mL, 졸라제팜 2.5mL(25mg/mL), 부로판올 2.5mL(10mg/mL), 케타미놀 1.25mL(100mg/mL), 자일라진 6.25mL(20mg/mL)로 구성된 근육 주사(0.1mL/kg)로 돼지를 사전 마취하여 동물 사육 시설에서 이송되기 전에 동물의 잠재적인 통증, 스트레스 및 불안을 줄입니다.
2. 밀짚 침구와 함께 승인된 운송 상자에 동물을 넣어 운송합니다.
3. 도착 시 정맥 주사를 설정하십시오.
   1. 귀의 근위부에 지혈대를 놓고 가볍게 조여 정맥혈 정체를 얻습니다. 에탄올 면봉으로 정맥 위의 피부를 두 번 소독합니다.
   2. 20g의 정맥 카테터를 사용하여 정맥에 구멍을 뚫습니다. 지혈대를 풀어줍니다. 변위를 피하기 위해 접근을 적절하게 조심스럽게 고정하십시오.
   3. 등장성 식염수로 접근을 세척하여 올바른 배치를 확인하십시오.
      참고: 카테터가 더 이상 정맥에 없으면 피하 팽창이 나타납니다. 반대쪽 귀에 두 번째 정맥 주사를 설정하는 것은 우발적인 상황으로 간주될 수 있습니다.
4. 동물을 수술대로 옮기고 눕힙니다.
5. 7.5 크기의 기관관을 이용한 직접 후두경 검사를 사용하여 돼지를 삽관하고 기관 커프를 팽창시킵니다. 튜브를 동물의 주둥이/머리에 고정합니다. 이렇게 하면 의도하지 않은 발관을 방지할 수 있습니다. 인공호흡기 스크린에서 호기성 이산화탄소 값을 관찰하여 올바른 튜브 위치를 확인하십시오.
6. 튜브를 사전 테스트된 인공호흡기에 연결하고 기계적 환기를 시작합니다.
   1. 압력 제어, 체적 게이트 환기 설정을 선택하고 저유량 환기로 일회 호흡량(TV)을 8mL/kg으로 설정합니다. 양의 호기말 압력(PEEP)을 5cmH₂O로 설정합니다.
   2. 실험 프로토콜에 따라 흡기 산소의 분율(FiO₂)을 노목시아(0.21) 이상으로 설정합니다. 목표 호기말 이산화탄소(EtCO₂) 값은 약 5.0-5.5kPa입니다. 이를 위해 호흡수(RR)를 조정하십시오.
7. 4.0mg/kg/h의 프로포폴과 12.5μg/kg/h의 펜타닐을 사용하여 귀에 정맥 주사를 통해 전신 마취를 시작하고 유지합니다. 각막 반사 작용이 부족하고 고통스러운 자극에 반응하지 않는지 확인하여 충분한 마취가 이루어지고 있는지 확인합니다. 반사 또는 반응이 있는 경우 주입 속도를 높이고 일정한 간격으로 반사를 확인합니다.
   주의: 프로토콜 중 어느 시점에서도 동물을 방치하지 마십시오. 신경근 차단제는 부적절한 마취의 징후를 가릴 수 있으므로 사용을 삼가십시오.
8. 3리드 심전도(ECG) 와이어와 맥박 산소 측정 센서를 연결하여 심박수, 심장 박동 및 산소 포화도를 모니터링합니다.
9. 직장 온도계로 심부 온도를 모니터링하십시오. 38-39 °C의 일반 돼지 온도를 목표로 합니다. 필요한 경우 강제 공기 가온 담요를 사용하여 동물을 가열하십시오.
10. 방광 카테터를 삽입하고 바깥쪽 끝을 소변 샘플 백에 연결합니다.
11. 건조를 방지하기 위해 수의사의 안연고를 바르십시오.

2. 초음파 유도 혈관 내 접근

참고: 혈관내 접근은 앞서 설명한 바와 같이 확립된다¹⁸.

1. 최소한 오른쪽 외부 경정맥, 오른쪽 대퇴 정맥 및 왼쪽 대퇴 동맥에 혈관 내 접근을 확립합니다.
   참고: 실험 프로토콜에 따라 추가 액세스 권한을 얻을 수 있습니다.
   1. 클로르헥시딘으로 피부를 면도하고 소독하십시오.
   2. 멸균 절차에서는 초음파 장치를 사용하여 17G 정맥 카테터를 혈관 내 위치로 안내합니다.
   3. 정맥 카테터에서 바늘을 제거하고 Seldinger 기술을 사용하여 가이드와이어를 삽입합니다. 정맥 카테터를 제거하고 가이드와이어를 제자리에 둡니다.
   4. 액세스 포인트에서 피부를 작게 절개하고 가이드와이어 위에 덮개를 삽입합니다.
   5. 덮개의 올바른 배치를 위해 10mL 또는 20mL 주사기를 사용하여 각 덮개에서 혈액을 채취하십시오. 올바르게 배치된 칼집은 혈액을 흡입하거나 접근을 식염수로 씻어낼 때 저항이 없습니다.
2. 칼집을 피부에 봉합합니다(크기 4.0).
3. 대퇴 동맥의 덮개를 압력 변환기에 연결합니다. 대기압으로 보정하고 올바른 동맥압 곡선에 대한 화면을 관찰합니다.
4. 등장성 식염수가 있는 주입 펌프를 정맥초에 연결합니다. 이것은 내강내 혈액 응고를 방지합니다.
5. 실험 전 공복으로 인한 저혈량증을 완화하고 혈액을 채취하여 색전을 생성하려면 오른쪽 외부 경정맥에 연결된 펌프에서 30-60분에 걸쳐 800mL의 볼루스 주입을 시작합니다.
6. 땀과 배뇨로 인한 시간당 체액 손실을 교정하려면 대퇴 정맥에 연결된 펌프에 4mL/kg/h의 주입을 시작하십시오.

3. 응고 형성

1. 심폐 산소화 시스템의 포장을 풀고 외부 및 내부 직경이 각각 1/2인치 및 3/32인치인 비헤파린 코팅 폴리염화비닐(PVC) 튜브를 찾습니다. ~30cm 길이의 조각으로 자릅니다. 총 7개의 튜브를 제작합니다.
   참고: 더 얇은 색전을 선호하는 경우 더 작은 직경의 PVC 튜브를 사용할 수 있습니다.
2. 큰 지혈 겸자로 튜브의 한쪽 끝을 닫습니다.
3. 정맥초 중 하나에서 등장성 식염수 주입을 일시 중지하고 총 180mL의 혈액을 뽑습니다.
4. 혈액을 6개의 PVC 튜브(30mL x 6)로 나누고 다른 지혈 겸자로 PVC 튜브의 상단을 닫습니다. 실온(RT)에서 최소 3시간 동안 튜브를 수직으로 걸어둡니다(그림 1A).
5. 칼집에 식염수를 씻어내고 식염수 주입을 다시 시작합니다.

4. 26 F 칼집의 Fluoroscopy 유도 삽입

주의 : 전리 방사선에 대한 납 앞치마 및 갑상선 목걸이와 같은 보호 장비는 형광 투시법을 사용할 때마다 착용해야 합니다.

1. 오른쪽 외부 경정맥의 덮개에 연결된 주입 펌프를 일시 중지합니다.
2. 피복을 통해 길고 뻣뻣한 가이드와이어를 삽입합니다. 형광투시법을 사용하여 피복에서 나오는 와이어를 관찰합니다. 형광투시법의 안내에 따라 꼬리를 통해 상부 중앙 정맥, 상대정맥(SVC), 우심방(RA) 및 하대정맥(IVC)으로 와이어를 전진시킵니다.
   알림: 와이어가 RA를 통과할 때 조기 수축기 이벤트가 발생할 수 있습니다. 와이어를 전진시키는 동안 어떤 지점에서도 저항을 느껴서는 안 됩니다.
3. 가이드와이어가 IVC에 남아 있는 것을 형광투시법으로 관찰하면서 덮개를 천천히 추출합니다. 덮개를 집어넣을 때 멸균 냅킨으로 입구를 압축합니다.
4. Seldinger 기술을 사용하여 피복을 16F 확장기로 교체하십시오. 저항이 너무 많으면 피부 절개 부위를 연장합니다. 형광투시법에 의해 안내되는 정맥 순환으로 칼집을 전진시킵니다. 저항을 최소화하기 위해 식염수를 미리 담그십시오(그림 2B).
   알림: 확장기로 가이드와이어의 경로를 따르고 확장기가 와이어에서 벗어나지 않아 용기의 루멘에서 벗어나지 않는지 확인하는 것이 매우 중요합니다.
5. Seldinger 기법을 사용하여 16F 확장기를 26F 보호관으로 교체합니다. 피부 절개 부위를 최소 10mm 연장합니다. 방사선 불투과성 마커(확장기가 아님)로 표시된 초의 끝이 SVC에 도달할 때까지 형광투시법의 안내에 따라 26F 초를 큰 정맥을 통해 천천히 전진시킵니다(그림 2D). 근육 층을 통해 전진할 때 약간의 저항을 예상하십시오.
   참고: 저항이 너무 크면 덮개를 후퇴시키고 진입점에 가까운 근육 조직을 포함하는 더 크고 깊은 절개를 만들 수 있습니다.
6. 형광투시법의 안내에 따라 확장기와 가이드와이어를 돼지에서 조심스럽게 집어넣으면서 칼집이 제자리에 유지되도록 합니다.
7. 피를 뽑아 칼집이 제자리에 있는지 확인합니다. 90mL의 식염수로 씻어내어 칼집의 전체 길이가 씻겨 나오도록 합니다.
8. 멸균 냅킨 더미를 덮개의 바깥쪽 끝 아래(및 멸균 드레이프 아래)에 놓아 심장 수준 이상으로 올리고 덮개에 혈액이 다시 채워지지 않도록 합니다(그림 2C).
9. 주입 펌프를 다시 연결하고 식염수 주입을 재개합니다.

5. 우측 심장 카테터 삽입

1. Swan-Ganz(SG) 카테터의 양쪽 포트를 식염수로 세척합니다. 풍선이 제대로 팽창하는지 확인하십시오.
2. 각 SG 카테터 포트를 3방향 또는 4방향 스톱콕에 연결합니다. 스토콕의 사용하지 않는 포트를 압력 변환기에 연결합니다. 각 마개의 나머지 포트는 나중에 중심 정맥 및 폐 동맥 혈액 가스 샘플링에 사용될 수 있습니다.
3. SG 카테터의 원위 포트를 돼지의 중간 겨드랑이 높이에 유지하여 트랜스듀서를 대기압으로 재설정합니다.
4. 26F 덮개를 통해 SG 카테터를 삽입합니다(그림 2C).
5. 형광투시법을 사용하여 SG 카테터의 원위부 끝이 칼집을 떠나는 시점을 관찰합니다. 풍선이 제대로 팽창하는지 관찰하십시오. 인플레이션은 저항이 없어야 합니다.
   알림: 풍선은 덮개 내부를 팽창시키면 손상될 수 있습니다. 전방-후방 보기는 모든 절차에 사용됩니다. 풍선이 팽창된 동안 카테터를 집어넣지 마십시오. 이로 인해 풍선이 밸브와 척막을 분리하거나 손상시킬 수 있습니다.
6. 풍선을 부풀린 상태에서 풍선을 중앙 정맥, RA, 우심실(RV)을 통해 주폐동맥(MPA)으로 천천히 전진시킵니다(그림 2E).
7. 말단 포트가 RV로 이동하고 다시 MPA로 이동함에 따라 압력 신호 및 압력 곡선 모양이 변경되는 것을 관찰합니다.
   1. 압력 신호가 중심 정맥 순환에서 2-8mmHg에서 수축기 및 이완기 RV 압력이 각각 20-30mmHg 및 0-5mmHg로 변경되는지 확인합니다. MPA로 진행할 때 수축기 혈압이 25-35mmHg이고 이완기 혈압이 10-15mmHg인지 확인하십시오.
8. 풍선의 공기를 빼십시오. 형광투시법을 사용하고 압력 신호와 곡선을 과도하게 보존하여 SG 카테터가 여전히 제자리에 있는지 확인합니다.
   참고: 이 시점에서 실험을 일시 중지할 수 있습니다.

6. 색전처리 장치 조립(그림 3)

알림: 색전 장치는 여기서부터 파트 A와 파트 B라고 하는 두 부분으로 구성됩니다(그림 3).

1. 통합 심정지 라인과 대동맥 관류 캐뉼라가 있는 나머지 심폐 산소 공급 시스템의 포장을 무균 상태에서 풉니다.
2. 자가수혈 세트에서 심절개술 용기 바닥에 부착된 10cm 길이의 실리콘 튜브(외부 직경 3/8인치 및 내부 직경 3/32인치)와 실리콘 튜브에 부착된 3/8-1/4인치 커넥터 조각을 찾습니다(그림 3A).
3. 실리콘 튜브를 동일한 크기의 두 개의 튜브로 자릅니다. 지금은 커넥터가 없는 절반을 제쳐두세요.
4. 빠른 프라임 라인을 찾습니다. Luer 잠금 끝에서 라인을 약 20cm 자르고 퀵 프라임 라인의 열린 끝을 커넥터 피스의 1/4인치 끝에 부착합니다(그림 3A).
5. 3/8인치에서 1/2인치 커넥터 조각을 찾습니다. 실리콘 튜브의 열린 끝 부분에 연결합니다. 이제 파트 A가 완료되었습니다(그림 3A, C).
6. 실리콘 튜브의 나머지 절반을 대동맥 관류 캐뉼라의 원위 끝에 부착합니다. 3/8인치에서 1/2인치 커넥터를 찾아 실리콘 튜브의 열린 끝에 연결합니다. 이제 파트 B가 완료되었습니다(그림 3B,C).

7. 기준선 평가

참고: 기기 삽입 후와 기준선 평가 전에 혈역학적 안정화를 달성하는 것이 중요합니다. 다음과 같은 조치를 취하는 것이 좋습니다. 기준선 측정 범위는 특정 프로토콜에 따라 조정할 수 있습니다.

1. 전신 및 폐 동맥압과 중심 정맥압의 값을 기록합니다.
   참고: 허용 가능한 폐동맥압은 수축기 혈압 < 40mmHg이고 평균 폐동맥압(mPAP)≤ 20mmHg입니다.
2. 중심 체온, 말초 포화도 및 심박수를 기록합니다.
3. 호흡보호구에서 FiO₂, EtCO₂, TV, 분 부피(MV), RR 및 최고 압력(Ppeak)의 값을 기록합니다.
4. 혈액 가스 분석을 위해 SG 카테터(혼합 정맥)의 동맥초와 원위(노란색) 포트에서 1mL 혈액 샘플을 채취합니다.
   1. 존재하는 경우 전해질 불균형 및/또는 저혈당을 수정하여 정상 범위 내의 값을 달성하십시오.
5. 실험 프로토콜에 따라 추가 분석에 적합한 용기에 정맥혈 샘플을 채취합니다.
6. SG 카테터를 통한 열희석으로 심박출량(CO)을 확보합니다. 10% 마진 내에서 3개의 측정값 평균을 얻어야 합니다.
7. SG 카테터를 통해 폐 모세혈관 쐐기 압력(PAWP)을 얻습니다.

8. 혈전 평가

알림: 최소 3시간이 지나면 색전이 유도될 준비가 됩니다. PVC 튜브에는 형성된 색전과 액체 상등액이 포함됩니다. 혈액이 응고되지 않으면 다른 색전을 회수하기 전에 30분 더 기다립니다.

1. 완전히 형성된 색전이 들어 있는 PVC 튜브 중 하나를 꺼내 수술용 냅킨에 색전을 부드럽게 놓고 상층액을 버립니다. 색전이 주입을 위해 단단하고 안정적으로 느껴지는지 확인합니다(그림 1B).

9. 급성 폐색전증 유발(그림 4)

1. 1000mL의 등장성 식염수 백을 압력 주입 백에 넣습니다. 주입 세트를 삽입하고 압력 백을 최소 200mmHg(권장 압력을 넘지 않음)로 팽창시킵니다.
2. 색전처리 장치의 A 부분을 3방향 스톱콕의 측면 포트에 연결합니다(그림 4A).
3. 마지막 PVC 튜브를 파트 A의 열린 끝에 연결합니다.
4. 튜브에 색전을 하나 넣고 시스템에 식염수를 채웁니다(그림 4B).
5. B 부분을 PVC 튜브의 다른 쪽 끝에 부착합니다(그림 4C).
   알림: 전체 시스템이 식염수로 채워져 있는지 확인하십시오.
6. 색전 장치를 26F 외피에 삽입하고 약 5초 동안 가압 식염수 흐름을 열어 색전을 주입합니다(그림 4D).
   주의: 색전을 주입하기 전과 후에 중요한 매개변수를 주의 깊게 관찰하십시오. 반응이 관찰되지 않으면 색전증이 여전히 진행 중일 수 있으며 추가로 3초 동안 식염수를 씻어냅니다.

10. 급성 PE 모델(그림 5 및 그림 6)

1. mPAP가 기준선에서 두 배가 될 때까지 또는 6개의 색전이 모두 유도될 때까지 색전을 유도합니다. 혈역학적 반응을 모니터링하고 다른 색전을 유도하기 전에 안정화를 기다립니다.
   주의: 돼지는 색전이 유도되는 동안 혈역학적으로 불안정해질 수 있습니다. 평균 전신 동맥압이 50mmHg로 감소하면 0.02mg 노르에피네프린 덩어리가 필요할 수 있습니다. 필요한 경우 볼루스를 반복합니다.
2. 적합한 수의 색전을 주입한 후 돼지는 30분 동안 안정됩니다.
   참고: PE의 발현은 초역동적인 상태입니다. 따라서 mPAP는 섹션 11로 진행하기 전에 안정기에 있어야 합니다.

11. 혈류역학

1. 30분 동안 안정화한 후 섹션 7에서 수행된 기준선 평가에 기록하여 급성 PE 평가를 수행합니다.
2. 프로토콜에 따라 이제 개입을 시작할 수 있습니다.

12. 컴퓨터 단층 촬영 폐 혈관 조영술(CTPA)(그림 7)

참고: 프로토콜의 이 부분은 과학적 범위에 따라 제외될 수 있습니다.

1. 삽관 및 마취 상태에서 돼지를 이동식 기계식 인공호흡기에 연결하고 CTPA 시설로 돼지를 이송합니다.
2. 기준선 평가의 일환으로 PE 유도 전에 흡기 호흡 참기 중에 CTPA를 수행합니다.
   1. 120 KV에서 시준을 0.5 x 80 mm로 설정하여 자동 노출 제어를 사용합니다.
   2. 자동 주입 펌프를 통해 75mL의 이오메론 조영제(350mg/mL)를 0.5mL/s의 유량으로 주입한 다음 30mL의 식염수 용액을 3.0mL/s로 주입합니다.
3. 돼지를 작업자실로 다시 운반하고 프로토콜을 계속합니다.
4. PE 유도 후 PE 평가를 위해 12.1-12.2 단계를 반복합니다.

13. 기타 방법

1. 과학적 연구의 범위에 따라 그에 따라 돼지를 평가합니다.
   참고: 이 프로토콜에 자세히 설명되지 않은 수많은 평가 방법을 모델에 적용할 수 있습니다: 자기 공명 영상, 경식도 심장 초음파, 양심실 압력 볼륨 루프 기록, 생화학적, 생체 외 생리학 및 조직학적 분석은 이전 연구에서 사용되었습니다 13,14,15,16,18,19,20.

14. 안락사와 부검

1. 프로토콜이 끝날 때 치사량의 펜토바르비탈(1.5mL/kg, 400mg/mL)을 돼지에게 안락사시킵니다.
   참고: 프로토콜에 따라 부검을 수행할 수 있으며 조직학적 샘플링을 얻을 수 있습니다(그림 8).

결과

이전 연구에 포함된 돼지에 대한 통합 분석에서 본 프로토콜^15,16에 설명된 급성 PE 모델을 특징짓는 결과를 제시합니다. 체육 후 급성 우측 심부전으로 돼지 2마리가 사망했습니다. 총 24마리의 돼지를 포함했습니다.

혈액유동
각 색전증 후의 반응은 그림 5에서 분명하게...

토론

이 논문은 최소 침습적이고 재현 가능한 자가 색전을 사용하는 급성 중간 위험 PE의 돼지 모델을 설명합니다.

이 프로토콜에는 몇 가지 중요한 단계가 있습니다. 첫째, 오른쪽 외부 경정맥의 접근부 확장은 색전의 접근 지점 역할을 하기 때문에 모델에 매우 중요합니다. 큰 피복을 전진시킬 때는 주요 혈관 또는 오른쪽 심장실의 파열이나 박리를 방지?...

자료

Name	Company	Catalog Number	Comments
12L-RS	GE Healthcare Japan	5141337	Ultrasound probe
50 mL BD Luer-Lock	BD Plastipak	300865
Adhesive Aperature Drape (OneMed)	evercare	1515-01	75 cm x 90 cm (hole: 6 cm x 8 cm)
Alaris GP Guardrails plus	CareFusion	9002TIG01-G	Infusion pump
Alaris Infusion set	BD Plastipak	60593
Alcohol swap	MEDIQ Danmark	3340012	82% ethanol, 0.5% chlorhexidin, skin disinfection
Amplatz Support Wire Guide Extra-Stiff	Cook Medical	THSF-25-260-AES	diameter: 0.025 inches, length: 260 cm
Aortic Perfusion Cannula	Edwards Lifesciences	AA024TFTA	Size: 24F. Length: 30 cm.
BD Connecta	BD	394601	Luer-Lock
BD Emerald	BD	307736	10 mL syringe
BD Platipak	BD	300613	20 mL syringe
BD Venflon Pro	Becton Dickinson Infusion Therapy	393204	20 G
BD Venflon Pro	Becton Dickinson Infusion Therapy	393208	17 G
Butomidor Vet	Richter Pharma AG	531943	10 mg/mL
Chlorhexidine 0.5%	Meda AB	N/A
Cios Connect S/N 20015	Siemens Healthineers	N/A	C-arm
CP Oxygenation System Adult With Fusion and Cardioplegia 1/B	Medtronic	M450311W	Custom cardiopulmonary oxygenation system including a cardioplegia line.
D-LCC12A-01	GE Healthcare Finland	N/A	Pressure measurement monitor
Durapore	3M	N/A	Adhesive tape
E-PRESTIN-00	GE Healthcare Finland	6152932	Respirator tubes
Euthanimal	Alfasan	136278	Pentobarbitalnatrium 400 mg/mL (0.5 mL/kg for euthanasia)
Favorita II	Aesculap	GT104
Fentanyl	B. Braun	71036	50 µg/mL
Glucose isotonic	SAD	419358	55 mg/mL Isotonic glucose (500 mL bag)
Gore DrySeal Flex Introducer Sheath	GORE	DSF2633	Size: 26 French. Working length: 33 cm.
Ketaminol Vet	MSD/Intervet International B.V.	511519	100 mg/mL
Lawton 85-0010 ZK1	Lawton	N/A	Laryngoscope
Lectospiral	VYGON	1159.90	400 cm (Luer-LOCK)
MBH qufora	MBH-International A/S	13853401	Urine bag
Natriumchlorid	Fresenius Kabi	7340022100528	9 mg/mL Isotonic saline
Noradrenalin	Macure Pharma	425318	1 mg/mL
PICO50 Aterial Blood Sampler	Radiometer	956-552	2 mL
Portex Tracheal Tube	Smiths Medical	100/150/075	Cuffed Clear Oral/Nasal Murphy Eye
Pressure Extension set	CODAN	7,14,020	Tube for anesthetics, 150 cm long, inner diameter 0.9 mm
Propolipid	Fresenius Kabi	21636	Propofol, 10 mg/mL
Radiofocus Introducer II	Radiofocus/Terumo	RS+B80N10MQ	7 + 8F sheaths
Rompun Vet	Beyer	86450917	Xylazin, 20 mg/mL
Rüsch Brilliant AquaFlate Glycerine	Teleflex	178000	Bladder catheter, size 14
S/5 Avance	Datex-Ohmeda	N/A	Mechanical ventilator
Safersonic Conti Plus & Safergel	SECMA medical innovation	SAF.612.18120.WG.SEC	18 cm x 120 cm (Safersonic Sterile Transducer Cover with Adhesive Area and Safergel)
Standard Dilator	Cook Medical	G01212	Size: 16 French. Length: 20 cm.
Swan-Ganz CCOmbo	Edwards Lifesciences	744F75	110 cm
TruWave Pressure Monitoring Set	Edwards Lifesciences	T434303A	210 cm
Vigilance VGS Patient Monitor	Edwards Lifesciences	N/A
Vivid iq	GE Medical Systems China	Vivid iq
Zoletil 50 Vet (tiletamin 125 mg and zolazepam 125 mg)	Virbac	83046805	Zoletil Mix for pigs: 1 vial of Zoletil 50 Vet (dry matter); add 6.25 mL Xylozin (20 mg/mL), 1.25 mL ketamin (100 mg/mL) and 2.5 mL Butorphanol (10 mg/mL). Dose for pre-anesthesia: 0.1 mL/kg as intramuscular injection