JoVE Logo
Authors
Contact Us

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • النتائج
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

تقدم هذه المخطوطة بروتوكولا موحدا لاستئصال الكلية 5/6 عن طريق استئصال ثنائي القطب الحاد عن طريق بضع البطن في خط الوسط في نموذج الفئران ، بهدف إحداث حالة من القصور الكلوي عن طريق تصغير الحمة الكلوية بدرجة كبيرة من الدقة المنهجية وانخفاض خطر الخطأ الفني.

Abstract

يصيب مرض الكلى المزمن أكثر من 10٪ من سكان العالم ، ويبلغ عددهم أكثر من 800 مليون شخص في جميع أنحاء العالم. كان للتقدم في علاج مرض الكلى المزمن تأثير كبير على نتائج المرضى. بينما في الماضي ، كان يعتبر مرض الكلى المزمن في كثير من الأحيان حكما بالإعدام ، حيث استسلم العديد من المرضى لمضاعفات مرض الكلى في المرحلة النهائية ، يتم الآن إدارته بشكل متزايد كحالة مزمنة مع توافر غسيل الكلى وزرع الكلى ، بالإضافة إلى التطورات الصيدلانية الجديدة مثل مثبطات SGLT2 أو مضادات مستقبلات القشرانيات المعدنية غير الستيرويدية.

ومع ذلك ، لا يزال هناك طلب متزايد لمزيد من الاستكشاف في العمليات الفيزيولوجية المرضية والتدخلات العلاجية المحتملة. تلعب النماذج البيولوجية الموثوقة دورا مهما في تسهيل هذا البحث. نظرا للطبيعة متعددة الأوجه لأمراض الكلى ، والتي لا تشمل بيولوجيا الخلية فحسب ، بل تشمل أيضا التشريح الدقيق للأوعية الدموية وإشارات الغدد الصماء ، يجب أن يمتلك النموذج المناسب مستوى من التعقيد البيولوجي لا يمكن أن يقدمه سوى نموذج حيواني ، مما يجعل القوارض خيارا واضحا.

لذلك ، توفر هذه المخطوطة بروتوكولا معقدا ومنهجيا لتقليل الحمة الكلوية جراحيا من خلال شق البطن في خط الوسط واستئصال الكلية الكلي والجزئي المشترك في الفئران للبقاء على قيد الحياة وكذلك التطبيقات غير القابلة للبقاء على قيد الحياة. ويؤكد على الدور الحاسم للتقنيات الجراحية الدقيقة في ضمان نتائج متسقة وموثوقة. تشمل الأمثلة الرئيسية للتطبيقات المحتملة لهذا النموذج الدراسات الجزيئية الحيوية والصيدلانية بالإضافة إلى تطوير طرائق تصوير مبتكرة أثناء الجراحة ، مثل التصوير الفائق الطيفي ، لتصور سوء التروية الكلوي وتمييزه بشكل موضوعي.

Introduction

مرض الكلى المزمن (CKD) هو حالة تقدمية تصيب جزءا كبيرا من سكان العالم. يتميز بالفقدان التدريجي لوظائف الغدد الصماء والترشيح بمرور الوقت ، مما يؤدي إلى تراكم الفضلات والسوائل في الجسم واختلال في نظام الغدد الصماء. تشير البيانات الحديثة إلى أن 9.1٪ إلى 13.4٪ من سكان العالم (بين 700 مليون ومليار شخص) مصابون بمرض الكلىالمزمن 1. يزداد انتشار مرض الكلى المزمن مع تقدم العمر ، مما يؤثر على حوالي 34٪ من الأشخاص الذين تبلغ أعمارهم 65 عاما أو أكثر في الولايات المتحدة ، مقارنة ب 12٪ في أولئك الذين تتراوح أعمارهم بين 45-64 عاما و 6٪ في أولئك الذين تتراوح أعمارهم بين 18-44 عاما2.

لذلك ، فإن مرض الكلى المزمن مساهم كبير في العبء العالمي للأمراض ومعدلات الوفيات. يعد الكشف المبكر عن مرض الكلى المزمن وإدارته أمرا بالغ الأهمية في إبطاء تقدمه وتقليل مخاطر حدوث مضاعفات ، مثل أمراض القلب والأوعية الدموية وفقر الدم ، وفي النهاية ، مرض الكلى في المرحلة النهائية ، والذي يتطلب غسيل الكلى أو زرع الكلى للبقاءعلى قيد الحياة 3.

شهدت التدخلات العلاجية لمرض الكلى المزمن في المرحلة النهائية تطورا ملحوظا على مدى العقود القليلة الماضية. تاريخيا ، اقتصرت إدارة مرض الكلى المزمن في المرحلة النهائية على الرعاية الداعمة ، مع ظهور غسيل الكلى كطريقة تحافظ على الحياة في الستينيات. منذ ذلك الحين ، تم إحراز تقدم كبير في تقنيات غسيل الكلى ، بما في ذلك تطوير أغشية أكثر توافقا حيويا ، وتحسين الوصول إلى الأوعية الدموية ، وظهور غسيل الكلى البريتوني4. بالإضافة إلى ذلك ، برزت زراعة الكلى كعلاج مثالي لمرض الكلى المزمن في المرحلة النهائية ، مما يوفر بقاء محسنا ونوعية حياة مقارنة بغسيل الكلى5. ومع ذلك ، لا يزال النقص في الأعضاء المتبرعة يمثل تحديا كبيرا ، مما يدفع البحث في استراتيجيات جديدة مثل زراعة الأعضاء وأساليب الطب التجديدي. علاوة على ذلك ، تم تعزيز إدارة المضاعفات المرتبطة بمرض الكلى المزمن في المرحلة النهائية ، مثل فرط نشاط الغدة الجار درقية الثانوي ، من خلال إدخال عوامل محاكاة الكلسية مثل إيتلكالسيتيد ، والتي تعدل بشكل فعال مستويات هرمون الغدة الجار درقية6.

على الرغم من هذه التطورات ، يستمر السعي للحصول على علاجات أكثر فعالية واستهدافا ، مدفوعا بالبحث المستمر في الآليات الجزيئية الكامنة وراء تطور مرض الكلى المزمن في المرحلة النهائية والأمراض المصاحبة المرتبطة به. لذلك ، لا يزال مرض الكلى المزمن مصدر قلق كبير في رعاية المرضى ، مما يؤدي إلى استمرار الحاجة إلى إجراء بحث مكثف في العمليات الطبية الحيوية والأساليب العلاجية. النماذج البيولوجية القوية ضرورية لتسهيل مثل هذه التحقيقات. بالنظر إلى الطبيعة متعددة الأوجه ل CKD ، والتي تشمل جوانب تتراوح من البيولوجيا الخلوية إلى إشارات الغدد الصماء بين الأعضاء ، والتشريح الوظيفي للأوعية الدموية ، والريولوجيا ، يجب أن يمتلك النموذج المثالي مستوى من التعقيد البيولوجي لا يمكن أن يوفره سوى كائن حي نموذجي شامل. وبالتالي ، تظهر القوارض كنموذج مفضل نظرا لقدرتها على تضمين هذه الأبعاد البيولوجية المختلفة بشكل فعال.

يعمل نموذج الكلى المتبقي لاستئصال الكلية 5/6 كأداة شائعة في أبحاث مرض الكلى المزمن لتجارب الفئران والفئران نظرا لتحريضه المستقر للقصور الكلوي7،8،9،10،11،12،13،14. يستلزم هذا النموذج إزالة كلية كاملة و 2/3 من الأخرى. يمكن تحقيق تكوين الكلى المتبقية من خلال الاستئصال الجراحي للأعمدة الكلوية ، والتي تسمى نموذج استئصال الحديد ، أو عن طريق ربط الشرايين الكلوية القطاعية العلوية والسفلية ، مما يؤدي إلى احتشاء القطب7،15،16،17،18،19،20.

في حين أن نموذج استئصال الكلية 5/6 مع استئصال الحضجة هو تقنية راسخة ، فقد تم تقديمه فقط كبروتوكول شفاف ومفهوم مع وصول خلف الصفاق الظهريالجانبي 21. يمكن أن يكون هذا الوصول مفيدا لإجراء أحادي الجانب مع تصغير الحمة الكلوية على جانب واحد فقط أو لإجراء من مرحلتين بمسافة زمنية لبضعة أيام من أجل زيادة بقاء بعد الجراحة22. ومع ذلك ، فإن استخدام نهج شق البطن في خط الوسط يوفر مزايا مميزة على طريق الوصول إلى خلف الصفاق اللاحق.

من خلال استخدام شق واحد في البطن في خط الوسط ، يكتسب الجراح وصولا دون عوائق إلى تجويف البطن بأكمله ، وبالتالي تسهيل الاستكشاف الشامل والتلاعب بالأعضاء داخل البطن. لا يعمل هذا المجال الجراحي الموسع على تبسيط عملية استئصال الكلية فحسب ، بل يتيح أيضا التنفيذ المتزامن للتدخلات الإضافية التي قد تكون مطلوبة لبروتوكولات تجريبية محددة ، على سبيل المثال ، الإجراءات على الحالب ، مثل الربط أو الاستئصال أو إعادة البناء ، والتي قد تكون ضرورية لدراسة الفيزيولوجيا المرضية لاعتلال المسالك البولية الانسدادي. علاوة على ذلك ، يسمح هذا النهج بالاستئصال أو التلاعب المتزامن بأعضاء البطن الأخرى ، مثل الكبد أو الطحال أو الجهاز الهضمي ، وبالتالي توسيع نطاق التحقيقات التجريبية في تفاعلات متعددة الأعضاء أو نماذج الأمراض الجهازية.

علاوة على ذلك ، يسهل نهج شق البطن في خط الوسط بناء قناة الدقاق أو المثانة الجديدة ، وهو إجراء جراحي يتضمن إنشاء تحويل بولي باستخدام جزء من الدقاق ، وهو أمر مهم بشكل خاص في الدراسات التي تبحث في خلل المثانة أو تقنيات المسالك البولية الترميمية. هذا التنوع في الجمع بين استئصال الكلية والتدخلات الجراحية الأخرى في نفس المجال الجراحي لا يبسط البروتوكولات التجريبية فحسب ، بل يقلل أيضا من الصدمات الجراحية التراكمية والمخاطر المرتبطة بها على الأشخاص الحيوانيين. لذلك ، في حالة جراحة الكلى الثنائية أحادية المرحلة أو الإجراءات الإضافية المتزامنة داخل البطن ، يجب أن يكون الوصول البطني عن طريق شق البطن هو الخيار المفضل.

حاليا ، لا يوجد منشور أو بروتوكول متاح يصف هذه الاستراتيجية الجراحية. لذلك ، من خلال هذا العمل ، هدفنا هو تقديم دليل إجرائي مفصل لإجراء الاستئصال الكلوي والتحريض الجراحي ل CKD عن طريق شق البطن في خط الوسط في الفئران ، وهو ينطبق على كل من دراسات البقاء على قيد الحياة وعدم البقاء على قيد الحياة. يخلق هذا النموذج التجريبي بيئة منظمة مواتية للتحقيق في الديناميكيات المعقدة لمرض الكلى المزمن ، ويحاكي السيناريوهات المهمة سريريا. تم تصميم هذا البروتوكول خصيصا لتوضيح التقنية الجراحية. لذلك تم إجراء التدخل في بيئة غير قابلة للبقاء على قيد الحياة على مجموعة متجانسة من 10 ذكور من الفئران. نظرا لعدم وجود سبب ذي مغزى للمقارنة مع خط الأساس أو التدخل البديل، لم يكن إدراج مجموعة مرجعية ضروريا. يشير استئصال الكلية 5/6 صراحة إلى مدى استئصال الحمة الجراحي. هذا يترجم بالتأكيد إلى انخفاض وظيفي بمعنى انخفاض معدل الترشيح الكبيبي. ومع ذلك ، لا يمكن التنبؤ بالدرجة الوظيفية الدقيقة ولكن يجب قياسها بشكل فردي لكل ، على سبيل المثال ، باستخدام إزالة الأنسولين أو حمض p-aminohippuric23،24 إذا لزم الأمر.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

تم تنفيذ جميع الإجراءات الحيوانية الموضحة في هذه الوثيقة داخل مرافق معتمدة وتم منحها الموافقة من قبل اللجنة المؤسسية لرعاية واستخدامه (IACUC) التابعة لمجلس بادن فورتمبيرغ الإقليمي في كارلسروه ، ألمانيا (35-9185.81 / G-62/23). تم التعامل مع التجارب وفقا للبروتوكولات المؤسسية ووفقا للتشريعات الألمانية التي تحكم رعاية ، بالإضافة إلى الالتزام بالمبادئ التوجيهية التي وضعها مجلس الشراكة الأوروبية (2010/63 / EU) وإرشادات ARRIVE. تم استخدام ذكور فئران Sprague Dawley التي يبلغ وزنها الأولي 400 غرام بعد فترة تأقلم مدتها أسبوع واحد.

1. التخدير والتسكين

  1. تخدير نموذج الفئران مع المستحضرات الصيدلانية المختارة. لاتباع هذا البروتوكول ، قم بإجراء تحريض متطاير للتخدير باستخدام الأيزوفلوران متبوعا بحقن داخل الصفاق بمقدار 100 مجم / كجم من وزن الجسم كيتامين للتخدير الانفصامي و 4 مجم / كجم من وزن الجسم زيليازين. احصل على تسكين الألم بالحقن تحت الجلد بمقدار 5 مجم / كجم من وزن الجسم كاربروفين.
    ملاحظة: يمكن العثور على بروتوكول مفصل في الأدبيات المذكورة25.
  2. تأكد من عمق مسكن كاف من خلال البحث عن ردود الفعل الألمية أثناء اختبار قرصة إصبع القدم باستخدام ملقط جراحي وأعد تقييم عمق التخدير بانتظام أثناء العملية.
  3. ضع مزلق العين على العينين لمنع جفاف القرنية.

2. إعداد الإجراء

  1. قم بإعداد موقع التشغيل بجميع المواد والأدوات المطلوبة ، بما في ذلك الأربطة متعددة الشعيرات ، وحلقات أوعية السيليكون ، والمشابك الزائدة الحادة ، ومقص التحضير الدقيق والملقط ، بالإضافة إلى البقع المرقئة المقطعة إلى قطع 0.8 × 0.6 سم (الشكل 1A-G). قم بإعداد جهاز التعرض الجراحي للقوارض ، ووسادة التدفئة ، وخطافات التحضير الجراحي كما هو محدد في الأدبياتالمذكورة 25.
  2. حلق طول الوصول المطلوب ، وتطهير موقع الجراحة بثلاثة مقشرات متناوبة مع 70٪ من الإيثانول واليود أو مسحات التنظيف القائمة على الكلورهيكسيدين بحركة دائرية ، وتحقيق الأكسجين المناسب عن طريق استنشاق الأكسجين بنسبة 100٪ باستخدام قناع الوجه لحديثي الولادة (الشكل 1H-J). قم بتغطية باقي الجسم خارج فتحة التعليق الجراحية بالستائر لتجنب التلوث.
    ملاحظة: لم يتم لف التمثيلي الذي تم استخدامه للحصول على صور الشكل للسماح بتصور أفضل للمعالم التشريحية.
  3. قم بإجراء بضع البطن المصغر المتوسط عن طريق شق جلدي متوسط أولي على طول البطن المطلوب ~ 3 سم وشق لاحق أصغر قليلا في اللفافة على طول الخط ألبا (الشكل 1K-M).
  4. تحقيق التعرض الجراحي للكلية باستخدام الكمادات الجراحية وخطافات التحضير الجراحي (الشكل 1N-O). المس الحمة الكلوية فقط بأدوات تحضير غير رضحية مثل قطعة قطن مبللة أو كمادات مبللة باستخدام ملقط أو مشابك غير حادة.

figure-protocol-2865
الشكل 1: الأدوات التجريبية والمواد والإعدادات. (أ) الأدوات الجراحية المطلوبة؛ (ب) ربط متعدد الشعيرات ؛ (ج) حلقة وعاء السيليكون. (د) مقص تحضير جيد. (E-G) رقعة مرقئ مقطعة إلى قطع 0.8 × 0.6 سم. (H-J) نموذج الفئران حليق والأكسجين بقناع الوجه. لم يتم لف التمثيلي الذي تم استخدامه للحصول على صور الشكل من أجل السماح بتصور أفضل للمعالم التشريحية. (ك ، ل) شق جلدي متوسط على طول البطن المطلوب ~ 3 سم. (M) شق البطن المصغر المتوسط. (ن) تعرض الكلية اليسرى باستخدام كمادات جراحية وخطافات تحضير جراحية وحامل معدني؛ (O) التعرض المماثل للكلية اليمنى واستئصال لفافة الجرجيرة. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

3. استئصال الكلية الجزئي

  1. كشف الكلية المعنية ، وامسك الدهون حول الكلى المرتبطة بفافة Gerota الرقيقة ، وقم بتطبيق بعض التوتر لرفع اللفافة محليا عن الحمة الكلوية (الشكل 2 أ ، ب 2).
  2. قم بشق اللفافة وتقويضها بنهاية حادة لحافة مقص واحد واستمر في التشريح الطولي لفافة Gerota (الشكل 2 ب).
  3. قم بإجراء فك حاد لفافة Gerota باستخدام مقص مغلق عن طريق تقويض اللفافة تدريجيا في جميع أنحاء الحمة وطي الكبسولة اللفافية بشكل اختياري جزئيا (الشكل 2C).
  4. حبال النقير الكلوي باستخدام حلقة وعاء سيليكون لتحسين التحكم في الأوعية الدموية (الشكل 2 د).
  5. ضع طرف الملقط في الفضاء خلف الصفاق لتثبيت الكلى لتجنب الهروب الظهري للكلية أثناء عملية القطع وإجراء استئصال القحوطية الحادة 1/3 الكلى في ضربة واحدة دقيقة باستخدام المقص (الشكل 2E).
    ملاحظة: يجب اختيار خط التشريح عن طريق التقييم السريري بحيث يفصل العضو في 1/3 من ارتفاع العضو في الجمجمة والذيلية.
  6. حقق الإرقاء عن طريق تطبيق رقعة مرقئ ، أو عن طريق الضغط اليدوي ، أو عن طريق الضغط باستخدام أدوات حادة ، أو عن طريق شد الهيلار عبر حلقة وعاء السيليكون ، مما يقلل بشكل فعال من تدفق الدم الهيري (الشكل 2F-J).
    ملاحظة: تم تحقيق الإرقاء بانتظام عن طريق السحب المتزامن لحلقة الأوعية الدموية وتطبيق رقعة مرقئ لمدة 2.5-3 دقائق.
  7. يتبع ذلك باستئصال الحديد الكلوي الذيلية الحاد 1/3 بطريقة مماثلة (الشكل 2K-N). بالنسبة لكلتا السكتات الدماغية المقصية ، استهدف مستوى تشريح بزاوية طفيفة من شأنه أن يترك المزيد من الحمة الكلوية في الجانب الحجري وأنسجة أقل على الجانب الجانبي لتجنب إصابة النقير غير المقصودة وتقليل تسرب البول من الجهاز الحوضي (الشكل 2O). إذا كان هناك رغبة في توحيد أعلى لاستئصال الحمة الدقيق 5/6 ، فقم بوزن استئصال الكلية الكلي على الجانب المقابل الموضح أدناه ، وقم بوزن استئصال الكلية الجزئي 2/3 ، وكرر التشريح بتقنية "تقطيع السلامي" حتى يتم الحصول على 2/3 الوزن بالضبط.

figure-protocol-6045
الشكل 2: استئصال الكلية الجزئي. (أ) التعرض الجراحي لكلية واحدة. (ب) شق طولي في لفافة الدربة باستخدام مقص حاد. (ج) تفكيك حاد لفافة الدربة باستخدام مقص مغلق. (د) حبال النقير الكلوي باستخدام حلقة وعاء سيليكون. (ه) استئصال القحف الحاد 1/3 باستخدام المقص والملقط كإرشاد. (و) تحقيق الإرقاء بوضع رقعة مرقئ؛ (ز) تحقيق الإرقاء بالضغط اليدوي؛ (H-J) تحقيق الإرقاء عن طريق الضغط باستخدام أدوات غير حادة وشد السقف عبر حلقة وعاء السيليكون. (K-N) استئصال الحديد الذيلي الحاد 1/3 في القياس. (س) تصوير تخطيطي لطائرات التشريح الموصى بها لتجنب إصابة النقير غير المقصودة (الخطوط السوداء). الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

4. استئصال الكلية الكلي الكلي

  1. قم بتعبئة الكلى قياسا على الخطوات الموضحة أعلاه ونفق النقير الكلوي باستخدام مشابك أوفرهولت حادة (الشكل 3 أ ، ب).
  2. حبال النقير الكلوي باستخدام رباط متعدد الشعيرات ووضع عقدة منزلقة آمنة على النقير الكلوي أقرب إلى الأوعية البطنية لحجب تدفق الدم الكلوي والحالب (الشكل 3 ج ، د).
  3. قم بتشريح النقير بحدة باستخدام المقص وإزالة الكلى (الشكل 3E ، F).
  4. التحكم في الإرقاء وقطع نهايات الرباط (الشكل 3G-J).

figure-protocol-7847
الشكل 3: استئصال الكلية الكلي. (أ) التعرض الجراحي للكلية المقابلة. (ب) الإزالة المماثلة لفافة الدربة النفقية في النهار الكلوي باستخدام مشابك أوفرهولت حادة ؛ (ج) حبال النقير باستخدام ربط متعدد الشعيرات. (د) وضع ربط عقدة منزلقة على النقير الكلوي ؛ (E ، F) تشريح حاد للنقير باستخدام المقص وإزالة الكلى ؛ (G-I) التحكم في الإرقاء وقطع الرباط ينتهي (ي) تصوير تخطيطي لارتفاع الرباط الموصى به (الخط المتقطع) ومستوى التشريح (الخط الأسود). الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

5. إغلاق جدار البطن

  1. ضع خياطة زاوية على اللفافة البطنية باستخدام خياطة متعددة الشعيرات (الشكل 4A-D).
  2. استمر في خياطة اللفافة البطنية بخياطة جارية مع ~ 2 مم من الأنسجة التي يتم الإمساك بها مع كل لدغة وحوالي 4 مم بين اللدغات (الشكل 4E-I).
  3. خياطة الطبقة الجلدية باستخدام غرز مفردة مع ~ 3 مم من الأنسجة التي يتم الإمساك بها مع كل لدغة و ~ 6 مم بين اللدغات (الشكل 4J-Q).

figure-protocol-9328
الشكل 4: إغلاق جدار البطن. (A-D) وضع خياطة زاوية على اللفافة البطنية باستخدام خياطة متعددة الشعيرات. (E-I) خياطة تشغيل اللفافة البطنية. (J-Q) خياطة الطبقة الجلدية باستخدام غرز مفردة. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

6. خطوات أخرى

  1. اعتمادا على السيناريو المطلوب ، والغرض من البحث ، ودرجة القصور الكلوي المطلوبة ، ضع في اعتبارك الانحرافات عن هذا البروتوكول ، بما في ذلك الاختلاف في كمية الحمة الكلوية المستقيلة ، على سبيل المثال ، استئصال الكلية الكلي من جانب واحد (3/6 استئصال الكلية) ، استئصال الكلية الكلي الثنائي (6/6 استئصال الكلية) ، استئصال أحادي القطب من جانب واحد (1/6 استئصال الكلية) ، استئصال أحادي القطب الثنائي (2/6 استئصال الكلية) ، واستئصال ثنائي القطب الثنائي (4/6 استئصال الكلية).
  2. بشكل عام ، إما القتل الرحيم للحيوانات عن طريق استئصال القلب الحاد دون إغلاق جدار البطن مسبقا لتطبيقات عدم البقاء على قيد الحياة أو إجراء إغلاق البطن التدريجي كما هو موضح أعلاه في حالة تجارب البقاء على قيد الحياة المخطط لها مع المتابعة.
  3. في حالة تطبيقات البقاء على قيد الحياة ، حافظ على ظروف معقمة في جميع الأوقات أثناء الجراحة. قبل الجراحة ، قم بإعداد الجلد بشكل معقم في موقع الجراحة باستخدام كل من المقشر (القائم على اليود أو الكلورهيكسيدين) والكحول. استخدم حزمة جديدة من الأدوات المعقمة لكل.
  4. بعد الجراحة ، راقب حتى يصبح واعيا بما يكفي للحفاظ على الاستلقاء القصي وعزله حتى يتعافى تماما.
  5. كعلاج ما بعد الجراحة للحيوان ، يشمل الزيارات اليومية من خلال الطاقم الطبي بالإضافة إلى علاج الألم بعد الجراحة باستخدام الحقن تحت الجلد بوزن 5 مجم / كجم من الكاربروفين 2x يوميا لمدة يومين.
  6. استخدم أوراق الدرجات مع معايير إنهاء محددة بوضوح للمدة حتى الشفاء الكامل بعد الجراحة. استخدم مقياس تجهم الفئران26 أو درجة حالةالجسم 27 من الأدبيات المقتبساة. قم بإنهاء التجربة إذا كانت درجة التجهم ≥ 6 أو درجة حالة الجسم = 1 بعد تطبيق الكاربروفين. بالإضافة إلى ذلك ، قم بالإنهاء في حالة حدوث مضاعفات جراحية مثل عدوى الجرح بعد الجراحة أو قصور إغلاق جدار البطن.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

النتائج

تم إجراء هذا البروتوكول على 10 ذكور من الفئران (متوسط الوزن 398 ± 35 جم) في بيئة غير قابلة للبقاء على قيد الحياة وتم إجراء العملية من قبل طبيب مقيم في السنة الثالثة في الجراحة. كان معدل النجاح المحدد من خلال البقاء على قيد الحياة بعد 20 دقيقة من إغلاق جدار البطن 100٪. كان متوسط مد?...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

يتم تعريف مرض الكلى المزمن عن طريق تلف الكلى أو انخفاض وظائف الكلى لمدة 3 أشهر على الأقل ، بغض النظر عن السبب28،29. يشمل تلف الكلى التشوهات المرضية في الكلى الأصلية أو المزروعة ، والتي يتم تحديدها عن طريق التصوير أو الخزعة أو استنتاجها من الع...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

ليس لدى المؤلفين أي تضارب في المصالح للإعلان عنه.

Acknowledgements

لم يكن هناك تمويل خاص لهذا المشروع. يعرب المؤلفون عن امتنانه لخدمة تخزين البيانات SDS@hd بدعم من وزارة العلوم والبحث والفنون في بادن فورتمبيرغ (MWK) ومؤسسة الأبحاث الألمانية (DFG) من خلال منحة INST 35 / 1314-1 FUGG و INST 35 / 1503-1 FUGG. علاوة على ذلك ، يقر المؤلفون بامتنان بالدعم المقدم من NCT (المركز الوطني لأمراض الأورام في هايدلبرغ ، ألمانيا) من خلال برنامج ما بعد الدكتوراه المنظم وبرنامج جراحة الأورام. كما نعترف بالدعم من خلال أموال الدولة التي وافق عليها برلمان ولاية بادن فورتمبيرغ لتحالف Innovation Campus Health + Life Science Alliance Heidelberg Mannheim من برنامج ما بعد الدكتوراه المنظم لألكسندر ستودييه فيشر: الذكاء الاصطناعي في الصحة (AIH) - تعاون بين DKFZ و EMBL وجامعة هايدلبرغ ومستشفى جامعة هايدلبرغ ومستشفى مانهايم الجامعي والمعهد المركزي للصحة العقلية ، ومعهد ماكس بلانك للبحوث الطبية. علاوة على ذلك ، فإننا نقدر الدعم من خلال معهد DKFZ Hector للسرطان في المركز الطبي الجامعي في مانهايم. بالنسبة لرسوم النشر، نقر بالدعم المالي المقدم من Deutsche Forschungsgemeinschaft ضمن برنامج التمويل "Open Access Publikationskosten" وكذلك من قبل جامعة هايدلبرغ.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
atraumatic preparation forcepsAesculapFB395RDE BAKEY ATRAUMATA atraumatic forceps, straight
blunt overholt clampAesculapBJ012RBABY-MIXTER preparation and ligature clamp, bent, 180 mm
cannulaBD (Beckton, Dickinson)301300BD Microlance 3 cannula 20 G
fixation rodslegefirm‎500343896tuning forks used as y-shaped metal fixation rods
heating padRoyal GardineerIP67Royal Gardineer Heating Pad Size S, 20 Watt
plastic perfusor tubeM. Schilling GmbHS702NC150connecting tube COEX 150 cm
polyfilament sutureCovidienCL-769Covidien Polysorb Braided Absorbable Suture 2-0 75 cm
preparation scissorsAesculapBC177RJAMESON preparation scissors, bent, fine model, blunt/blunt, 150 mm (6")
sealing hemostat patchBaxter1506257Hemopatch Sealing Hemopatch Baxter 45 x 90 mm
silicone vessel loop tieSERAG WIESSNERSL26silicone vessel loop tie 2.5 mm red
Spraque Dawley ratJanvier LabsRN-SD-MSpraque Dawley rat
steel plateMaschinenbau Feld GmbHC010206Galvanized sheet plate, 40 x 50 cm, thickness 4.0 mm
Yasargil clipAesculapFE795KYASARGIL Aneurysm Clip System
Phynox Temporary (Standard) Clip
Yasargil clip applicatorAesculapFE558KYASARGIL Aneurysm Clip Applicator
Phynox (Standard)

References

  1. Kovesdy, C. P. Epidemiology of chronic kidney disease: An update 2022. Kidney Int Suppl (2011). 12 (1), 7-11 (2022).
  2. Sundström, J., et al. Prevalence, outcomes, and cost of chronic kidney disease in a contemporary population of 2·4 million patients from 11 countries: The careme ckd study. Lancet Reg Health Eur. 20, 100438(2022).
  3. Webster, A. C., Nagler, E. V., Morton, R. L., Masson, P. Chronic kidney disease. Lancet. 389 (10075), 1238-1252 (2017).
  4. Fassett, R. G. Current and emerging treatment options for the elderly patient with chronic kidney disease. Clin Interv Aging. 9, 191-199 (2014).
  5. Tarun, T., et al. Updates on new therapies for patients with ckd. Kidney Int Rep. 9 (1), 16-28 (2024).
  6. Dudar, I., Shifris, I., Dudar, S., Kulish, V. Current therapeutic options for the treatment of secondary hyperparathyroidism in end-stage renal disease patients treated with hemodialysis: A 12-month comparative study. Pol Merkur Lekarski. 50 (299), 294-298 (2022).
  7. Adam, R. J., Williams, A. C., Kriegel, A. J. Comparison of the surgical resection and infarct 5/6 nephrectomy rat models of chronic kidney disease. Am J Physiol Renal Physiol. 322 (6), F639-F654 (2022).
  8. Huang, Y., et al. The impact of senescence on muscle wasting in chronic kidney disease. J Cachexia Sarcopenia Muscle. 14 (1), 126-141 (2023).
  9. Makhloufi, C., et al. Assessment of thrombotic and bleeding tendency in two mouse models of chronic kidney disease: Adenine-diet and 5/6th nephrectomy. TH Open. 4 (2), e66-e76 (2020).
  10. Liu, J., Lilly, M. N., Shapiro, J. I. Targeting na/k-atpase signaling: A new approach to control oxidative stress. Curr Pharm Des. 24 (3), 359-364 (2018).
  11. Laget, J., et al. Cafeteria diet-induced obesity worsens experimental CKD. Nutrients. 15 (15), 3331(2023).
  12. Gritter, M., et al. Chronic kidney disease increases the susceptibility to negative effects of low and high potassium intake. Nephrol Dial Transplant. 39 (5), 795-807 (2024).
  13. Bovée, D. M., et al. Dietary salt modifies the blood pressure response to renin-angiotensin inhibition in experimental chronic kidney disease. Am J Physiol Renal Physiol. 320 (4), F654-F668 (2021).
  14. Vettoretti, S., et al. Renal endothelial function is associated with the anti-proteinuric effect of ace inhibition in 5/6 nephrectomized rats. Am J Physiol Renal Physiol. 310 (10), F1047-F1053 (2016).
  15. Zhang, Y., Kompa, A. R. A practical guide to subtotal nephrectomy in the rat with subsequent methodology for assessing renal and cardiac function. Nephrology (Carlton). 19 (9), 552-561 (2014).
  16. Ibrahim, H. N., Hostetter, T. H. The renin-aldosterone axis in two models of reduced renal mass in the rat. J Am Soc Nephrol. 9 (1), 72-76 (1998).
  17. Griffin, K. A., Picken, M., Bidani, A. K. Method of renal mass reduction is a critical modulator of subsequent hypertension and glomerular injury. J Am Soc Nephrol. 4 (12), 2023-2031 (1994).
  18. Garber, S. L., et al. Effect of relaxin in two models of renal mass reduction. Am J Nephrol. 23 (1), 8-12 (2003).
  19. Griffin, K. A., Picken, M. M., Churchill, M., Churchill, P., Bidani, A. K. Functional and structural correlates of glomerulosclerosis after renal mass reduction in the rat. J Am Soc Nephrol. 11 (3), 497-506 (2000).
  20. Vavrinec, P., et al. Vascular smooth muscle function of renal glomerular and interlobar arteries predicts renal damage in rats. Am J Physiol Renal Physiol. 303 (8), F1187-F1195 (2012).
  21. Van Koppen, A., Verhaar, M. C., Bongartz, L. G., Joles, J. A. 5/6th nephrectomy in combination with high salt diet and nitric oxide synthase inhibition to induce chronic kidney disease in the lewis rat. J Vis Exp. (77), e50398(2013).
  22. Wang, X., et al. A mouse 5/6th nephrectomy model that induces experimental uremic cardiomyopathy. J Vis Exp. (129), e55825(2017).
  23. Harvey, A. M., Malvin, R. L. Comparison of creatinine and inulin clearances in male and female rats. Am J Physiol. 209 (4), 849-852 (1965).
  24. Gloff, C. A., Benet, L. Z. Differential effects of the degree of renal damage on p-aminohippuric acid and inulin clearances in rats. J Pharmacokinet Biopharm. 17 (2), 169-177 (1989).
  25. Studier-Fischer, A., et al. Endotracheal intubation via tracheotomy and subsequent thoracotomy in rats for non-survival applications. J Vis Exp. (205), e66684(2024).
  26. Sotocinal, S. G., et al. The rat grimace scale: A partially automated method for quantifying pain in the laboratory rat via facial expressions. Mol Pain. 7, 55(2011).
  27. Hickman, D. L., Swan, M. Use of a body condition score technique to assess health status in a rat model of polycystic kidney disease. J Am Assoc Lab Anim Sci. 49 (2), 155-159 (2010).
  28. Levey, A. S., et al. Definition and classification of chronic kidney disease: A position statement from kidney disease: Improving global outcomes (kdigo). Kidney Int. 67 (6), 2089-2100 (2005).
  29. Wilson, S., Mone, P., Jankauskas, S. S., Gambardella, J., Santulli, G. Chronic kidney disease: Definition, updated epidemiology, staging, and mechanisms of increased cardiovascular risk. J Clin Hypertens (Greenwich). 23 (4), 831-834 (2021).
  30. Dobaria, V., et al. Clinical and financial impact of chronic kidney disease in emergency general surgery operations. Surg Open Sci. 10, 19-24 (2022).
  31. Copur, S., et al. Novel strategies in nephrology: What to expect from the future. Clin Kidney J. 16 (2), 230-244 (2022).
  32. Pradhan, N., Dobre, M. Emerging preventive strategies in chronic kidney disease: Recent evidence and gaps in knowledge. Curr Atheroscler Rep. 25 (12), 1047-1058 (2023).
  33. Dietrich, M., et al. Hyperspectral imaging for perioperative monitoring of microcirculatory tissue oxygenation and tissue water content in pancreatic surgery - an observational clinical pilot study. Perioper Med (Lond). 10 (1), 42(2021).
  34. Stone, L. Kidney xenotransplantation. Nat Rev Urol. 20 (11), 641-641 (2023).
  35. Xu, H., He, X. Developments in kidney xenotransplantation. Front Immunol. 14, 1242478(2023).
  36. Dos Santos, R. M. N. Kidney xenotransplantation: Are we ready for prime time. Curr Urol Rep. 24 (6), 287-297 (2023).
  37. Nasci, V. L., et al. Mir-21-5p regulates mitochondrial respiration and lipid content in h9c2 cells. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 316 (3), H710-H721 (2019).
  38. Nickel, F., et al. Optimization of anastomotic technique and gastric conduit perfusion with hyperspectral imaging and machine learning in an experimental model for minimally invasive esophagectomy. Eur J Surg Oncol. S0748-7983 (23), 00444-00454 (2023).
  39. Seidlitz, S., et al. Robust deep learning-based semantic organ segmentation in hyperspectral images. Med Image Anal. 80, 102488(2022).
  40. Studier-Fischer, A., et al. Icg-augmented hyperspectral imaging for visualization of intestinal perfusion compared to conventional icg fluorescence imaging: An experimental study. Int J Surg. 109 (12), 3883-3895 (2023).
  41. Studier-Fischer, A., et al. Heiporspectral - the heidelberg porcine hyperspectral imaging dataset of 20 physiological organs. Sci Data. 10 (1), 414(2023).
  42. Studier-Fischer, A., et al. Spectral organ fingerprints for machine learning-based intraoperative tissue classification with hyperspectral imaging in a porcine model. Sci Rep. 12 (1), 11028(2022).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

218

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved