وقدم التمويل من جانب النضال من أجل البصر. تم الحصول على أنسجة العين من ولاية ايوا البنك الليونز.

1. الجزء الأمامي للتشريح. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم إزالة القرنية عن طريق شق أولا في حوف في الغرفة الأمامية باستخدام شفرة 15 درجة (الشكل 1). ثم يتم إدخال شفرة واحدة من مقص القرنية الصلبة ، منحنية في الغرفة الأمامية. يتم إجراء تخفيضات كفافي في القرنية ، الأمامي فقط لحوف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وتستخدم 0.12 COLIBRI ملقط ومقص يستكوت لقطع القزحية الأمامي circumferentially إلى الجسم الهدبي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم إزالة نواة العدسة مع ملقط COLIBRI 0.12 أو 15 درجة شفرة (supersharp) والقشرة وكبسولة بالملقط. </li></ol> 2. الزجاجي الأساسية الطموح. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم إدخال إبرة عيار 23 على حقنة 5 سم مكعب في منتصف الزجاجي (الشكل 1). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ويستنشق حوالي بلطف 1 مل أو أكثر من جوهر الزجاجي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ثم يتم وضع العينة في أنبوب microfuge ثم في النيتروجين السائل. </li></ol> 3. تشريح الجسم الزجاجي الأمامي. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وينظر في الجسم الزجاجي الأمامي وحلقة شبه شفافة من خلال تعديل على ضوء الحادث من مجهر الضوء أوزة الرقبة. الطموح السابقة من صميم زجاجي يفصل بين الجسم الزجاجي الأمامي من الهياكل الأخرى لتسهيل عملية تحديد الهوية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم سحبها بعناية ورقة من الأنسجة المرنة بعيدا عن الجسم الهدبي مع COLIBRI أو ملقط خلع الملابس وقطع مع مقص Vannas. يتم تكرار هذه المناورة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ثم يتم وضع العينة في أنبوب microfuge ثم في النيتروجين السائل. </li></ol> 4. الزجاجي قاعدة تشريح. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> باستخدام الملقط 0.12 لتحقيق الاستقرار في كوب العين ، ويتم استخدام مقص يستكوت الى &quot;زهرة&quot; للعين عن طريق صنع اربع فترات متساوية تخفيف الإجهاد تخفيضات من الجسم الهدبي نحو الرأس العصب البصري. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تتم إزالة الجزء ذو ثنيات الجسم الهدبي (الشكل 2) من كل من الأرباع باستخدام مقص يستكوت. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ثم يتم اغتنامها قاعدة الزجاجي على جانبي مشرشر ORA مع ملقط على مسطح بارس وشبكية العين (الشكل 2). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم تطبيق الجر المستمر على قاعدة الزجاجي مع ملقط. قطع متسلسلة مع مقص يستكوت مقتطفات نسيج شبه شفافة مع ظهور &quot;سلسلة من اللؤلؤ&quot; كما هو مفروض ضريبة عليه. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ثم يتم وضع العينة في أنبوب microfuge ثم في النيتروجين السائل. </li></ol> 5. الزجاجي إزالة القشرة. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يستأصل فيه مسطح الجزء من كل من الأرباع مع مقص يستكوت بقطع النشرة حوالي 3 ملم الخلفي للمشرشر أورا (الشكل 2). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بين منشورات الأنسجة ، والقشرة الزجاجية كما هو تصور فيلم شبه شفافة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> هو أدرك أن الفيلم إما مرونة مع 0.12 ملقط أو تحتجزهم التمسك اسفنجة ويك - سيل الجراحية. ثم يتم سحبها القشرة الزجاجية بعيدا عن شبكية العين ورفعه مع مقص يستكوت (الشكل 1). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم وضع العينة في أنبوب microfuge ثم إلى النيتروجين السائل. يتم تخزين جميع العينات في -80 درجة مئوية لحين الاستفادة منها للتجريب. </li></ol> 6. ممثل النتائج يمكن معالجة عينات الأنسجة من جانب مجموعة متنوعة من الأساليب لتجارب معينة. في حالتنا ، وقدمت عينات للتحليل البروتين بواسطة SDS - PAGE (الشكل 3). <img src="/files/ftp_upload/2455/2455fig1.jpg" alt="الشكل 1" /> الشكل 1. مستعرضة رأي العين البشرية تصور الأساسات مختلفة من الجسم الزجاجي ، ومعظم الزجاجي الأمامي هو طبقة رقيقة تسمى كولاجيني الزجاجية الأمامية. جوهر الزجاجي تشمل المنطقة بأسرها المركزية من الجسم الزجاجي. هذا الجزء من الجسم الزجاجي هو أكثر مائي على النقيض من قاعدة الزجاجي ، وهو ما يكفي للزج يجب اغتنامها بواسطة ملقط ويرد بحزم على الجسم الهدبي الكامنة وشبكية العين. تشمل جوهر الزجاجي هو قشرة رقيقة جدا كولاجيني يسمى القشرة الزجاجية. <img src="/files/ftp_upload/2455/2455fig2.jpg" alt="الشكل 2" /> الشكل 2. تشريح الجسم الزجاجي قاعدة ، وقاعدة الزجاجي هو طيدة شبه شفافة من الجسم الزجاجي الموجود على طول مشرشر أورا (السهام البيضاء) ، والذي هو خط فاصل يفصل بين الجسم الهدبي والشبكية. الحدود الأمامية للقاعدة زجاجي مسطح تمتد على الجزء (الخط الأبيض) من الجسم الهدبي. الحدود الخلفي من قاعدة زجاجي يمتد 2-3 ملم الخلفي للمشرشر أورا (اندفاعة بيضاء). لاستئصال القاعدة الزجاجية ، وتستخدم لفهم ملقط الأنسجة وتسحبه بعيدا عن الجسم الهدبي وراء شبكية العين. وتستخدم مرة واحدة مرتفعة ، مقص لقطع يستكوت على طول القاعدة. <img src="/files/ftp_upload/2455/2455fig3.jpg" alt="الشكل 3" /> الشكل 3. أحادية البعد SDS - PAGE من عناصر الجسم الزجاجي. تركيزات البروتين الكلي للالزجاجية الأمامية ، وقاعدة زجاجي ، فيتامينوreous الأساسية ، والقشرة الزجاجية 11.24 ، 20.1 ، 16.61 ، 14.24 ملغ / مل ، على التوالي. تم تنفيذ الكهربائي للهلام في 200 كيلو فولت لمدة 45 دقيقة ، ملون مع فلامينغو (بيو راد) ، وتصور باستخدام التصوير VersaDoc النظام (بيو راد). لمحات عن الأنسجة المختلفة تظهر عصابات مماثلة عدة ، مما يدل إما الحفظ أو عبر تلويث البروتينات ، فضلا عن العصابات فريد (النجمة) ، مشيرا الى البروتينات المترجمة تفاضليا.

<ol>
	<li>Bishop, P. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structural+macromolecules+and+supramolecular+organisation+of+the+vitreous+gel.">Structural macromolecules and supramolecular organisation of the vitreous gel.</a> Prog Retin Eye Res. 19, 323-344 (2000).</li><li>Sebag, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+biology+of+pharmacologic+vitreolysis.">Molecular biology of pharmacologic vitreolysis.</a> Trans Am Ophthalmol Soc. 103, 473-494 (2005).</li><li>Yoshimura, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comprehensive+analysis+of+inflammatory+immune+mediators+in+vitreoretinal+diseases.">Comprehensive analysis of inflammatory immune mediators in vitreoretinal diseases.</a> PLoS One. 4, e8158-e8158 (2009).</li><li>Gao, B. B., Chen, X., Timothy, N., Aiello, L. P., Feener, E. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+the+vitreous+proteome+in+diabetes+without+diabetic+retinopathy+and+diabetes+with+proliferative+diabetic+retinopathy.">Characterization of the vitreous proteome in diabetes without diabetic retinopathy and diabetes with proliferative diabetic retinopathy.</a> J Proteome Res. 7, 2516-2525 (2008).</li><li>Izuta, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+SOD+and+VEGF+are+increased+in+vitreous+bodies+from+proliferative+diabetic+retinopathy+patients.">Extracellular SOD and VEGF are increased in vitreous bodies from proliferative diabetic retinopathy patients.</a> Mol Vis. 15, 2663-2672 (2009).</li><li>Azimzadeh, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Formalin-fixed+paraffin-embedded+(FFPE)+proteome+analysis+using+gel-free+and+gel-based+proteomics.">Formalin-fixed paraffin-embedded (FFPE) proteome analysis using gel-free and gel-based proteomics.</a> J Proteome Res. 9, 4710-4720 (2010).</li></ol>

الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

الجسم الزجاجي هو مادة هلامية شبه شفافة الجزيئية التي يتم تكوينها غير مفهومة ، لا سيما على مستوى الأساسات وهي : قاعدة الزجاجي ، الأساسية ، والقشرة ، والزجاجية الأمامية. جوهر زجاجي يحتوي collagens الثاني والخامس والتاسع ، والحادي عشر ، جنبا إلى جنب مع البروتيوغليكان كبريتات شوندروتن ، والبروتيوغليكان كبريتات heparan وhyaluronan. بروتين 1،2 المؤشرات الحيوية الأساسية في الجسم الزجاجي ارتبطت بأمراض مثل اعتلال الشبكية السكري. 3-5 كيف يتم التعبير عن هذه البروتينات بشكل مختلف في كل من الأساسات ، وفي كثير من الحالات لا يعرف هويات بروتين معين. قد تعطي هذه التفاصيل البصيرة إلى الأصل من البروتينات المرتبطة بالأمراض الشبكية محددة ومساعدة في المستقبل العلاجات المستهدفة. على الرغم من أنه لم يكن الفاصل الزمني الأمثل لتشريح الجثة بعد الوفاة تحديد الأنسجة ، قد تدهور البروتين يؤثر على التجارب المصب. على سبيل المثال ، يتأثر المناعية في العيون بعد الوفاة لمدة 12 ساعة ويمكن تخفيض بعض الأنشطة انزيم معين في غضون ساعات قليلة (المراقبة غير منشورة). وقد جمعت جميع الأنسجة في هذه الدراسة ما بين 2 و 8 ساعات من وفاة دون تغييرات كبيرة في التعبير عن البروتين أو صلاحيتها للanalsyis البروتيوميات. يتم اختيار تجميد النيتروجين السائل أكثر من طريقة لتثبيت الحفظ من أجل منع إجراء تغييرات صغيرة في بنية البروتينات التي تسببها عبر ربط تثبيتي ، والذي تجلى في الأنسجة الأخرى التي LC-MS/MS. 6 والدراسات البروتين تعتمد على القدرة على الدقة تشريح المقصورات مختلفة من الجسم الزجاجي ، كما تجلى في هذه التجربة الفيديو. لقد قمنا التحقق باستخدام تقنية تشريح 1 الابعاد SDS - PAGE. كما تشير نتائجنا ، وهناك وأعرب تفاضلي البروتينات في الجسم الزجاجي الأساسات المختلفة. وسوف تحدد هذه البروتينات توفير فهم أكثر تفصيلا من التقسيم الزجاجي.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم </td><td> شركة </td><td> رقم كتالوج </td></tr><tr><td> 0.12 ملقط </td><td> STORZ Ophthalmics </td><td> E1502 </td></tr><tr><td> 5 سم حقنة </td><td> بيكتون ديكنسون ، </td><td> 309603 </td></tr><tr><td> مستقيم الملقط خلع الملابس مع التسنين </td><td> STORZ Ophthalmics </td><td> E1400 </td></tr><tr><td> إبرة قياس 23 </td><td> بيكتون ديكنسون ، </td><td> 305145 </td></tr><tr><td> COLIBRI ملقط </td><td> STORZ Ophthalmics </td><td> 2 / 132 </td></tr><tr><td> مقص Castroviejo القرنية الزاوية </td><td> STORZ Ophthalmics </td><td> E3223 </td></tr><tr><td> Vannas منحني مقص محفظة </td><td> STORZ Ophthalmics </td><td> E3387 </td></tr><tr><td> ويك ، سل الرماح الجراحية </td><td> ميدترونيك </td><td> 0008680 </td></tr><tr><td> مقص منحني يستكوت بضع الوتر </td><td> STORZ Ophthalmics </td><td> E3320 </td></tr></tbody></table>

dissection of human vitreous body elements for proteomic analysis

والزجاجي هو ، كولاجيني واضحة بصريا المصفوفة خارج الخلية التي تملأ داخل العين ويعتلي الشبكية. الشاذ 1،2 التفاعلات بين الأساسات الزجاجي والشبكية وراء أمراض الشبكية عدة ، بما في ذلك المسيل للدموع وانفصال الشبكية ، تجعد البقعة الصفراء ، الثقب البقعي ، سن المتصلة تحلل البقعة الصفراء vitreomacular الجر ، vitreoretinopathy التكاثري ، اعتلال الشبكية السكري التكاثري ، وvitreoretinopathies الموروثة ، 1،2 ولا يعرف التركيب الجزيئي للالأساسات الزجاجي. لأن الجسم الزجاجي شفافا مع وصول جراحية محدودة ، فقد كان من الصعب دراسة الأساسات على المستوى الجزيئي. طورنا طريقة لفصل والحفاظ على هذه الأنسجة للتحليل البروتين والبيوكيميائية. تقنية التشريح في هذا الفيديو التجريبية تبين كيفية عزل القاعدة الزجاجية ، الزجاجية الأمامية ، الزجاجي الأساسية ، والقشرة الزجاجية من عيني بعد الوفاة الإنسان. وأظهر أحد الأبعاد SDS - PAGE تحليل كل عنصر زجاجي أن أسلوبنا تشريح أدى في أربعة ملامح البروتين فريد المقابلة لكل طيدة من الجسم الزجاجي الإنسان. سوف تحديد البروتينات مجزأة تفاضليا تكشف مرشح جزيئات الأمراض الكامنة الشبكية المختلفة.

Watch this Scientific Journal Video about Dissection of Human Vitreous Body Elements for Proteomic Analysis at JoVE.com

Dissection of Human Vitreous Body Elements for Proteomic Analysis

هذا الفيديو يظهر تقنية فعالة للتمييز وتشريح مختلف هياكل شبه شفافة من الجسم الزجاجي في العين البشرية بعد الوفاة.

تشريح الإنسان عناصر الجسم الزجاجي لتحليل البروتين

The vitreous is an optically clear, collagenous extracellular matrix that fills the inside of the eye and overlies the retina. 1,2 Abnormal interactions ...

dissection-of-human-vitreous-body-elements-for-proteomic-analysis

Research

JoVE Journal

Medicine

31.8K Views.  University of Iowa. هذا الفيديو يظهر تقنية فعالة للتمييز وتشريح مختلف هياكل شبه شفافة من الجسم الزجاجي في العين البشرية بعد الوفاة.

Video: Dissection of Human Vitreous Body Elements for Proteomic Analysis

Network Analysis of the Default Mode Network Using Functional Connectivity MRI in Temporal Lobe Epilepsy

Functional connectivity MRI (fcMRI) is an fMRI method that examines the connectivity of different brain areas based on the correlation of BOLD signal fluctuations over time. Temporal Lobe Epilepsy (TLE) is the most common type of adult epilepsy and involves multiple brain networks. The default mode network (DMN) is involved in conscious, resting state cognition and is thought to be affected in TLE where seizures cause impairment of consciousness. The DMN in epilepsy was examined using seed based fcMRI. The anterior and posterior hubs of the DMN were used as seeds in this analysis. The results show a disconnection between the anterior and posterior hubs of the DMN in TLE during the basal state. In addition, increased DMN connectivity to other brain regions in left TLE along with decreased connectivity in right TLE is revealed. The analysis demonstrates how seed-based fcMRI can be used to probe cerebral networks in brain disorders such as TLE.

The Default Mode Network (DMN) in Temporal Lobe Epilepsy (TLE) is analyzed in the resting state of the brain using seed-based functional connectivity MRI (fcMRI).

تحليل شبكة من وضع الشبكة الافتراضية باستخدام التصوير بالرنين المغناطيسي الوظيفي الربط في صرع الفص الصدغي

Functional connectivity MRI (fcMRI) is an fMRI method that examines the connectivity of different brain areas based on the correlation of BOLD signal ...

Whole Vitreous Humor Dissection for Vitreodynamic Analysis

The authors propose an effective technique to isolate whole, intact vitreous core and cortex from post mortem enucleated porcine eyes. While previous studies have shown the results of such dissections, the detailed steps have not been described, precluding researchers outside the field from replicating their methods. Other studies harvest vitreous either through aspiration, which does not maintain the vitreous structure anatomy, or through partial dissection, which only isolates the vitreous core. The proposed method isolates the whole vitreous body, with the vitreous core and cortex intact, while maintaining vitreous anatomy and structural integrity. In this method, a full thickness scleral flap in an enucleated porcine eye is first created and through this, the choroid tissue can be separated from the sclera. The scleral flap is then expanded and the choroid is completely separated from the sclera. Finally the choroid-retina tissue is peeled off the vitreous to leave an isolated intact vitreous body. The proposed vitreous dissection technique can be used to study physical properties of the vitreous humor. In particular, this method has significance for experimental studies involving drug delivery, vitreo-retinal oxygen transport, and intraocular convection.

The goal of this protocol is to show an effective technique to isolate whole, intact vitreous core and cortex from post mortem enucleated porcine eyes.

زجاجي كله فكاهة تشريح لتحليل Vitreodynamic

The authors propose an effective technique to isolate whole, intact vitreous core and cortex from post mortem enucleated porcine eyes. While previous ...

Laser-capture Microdissection of Human Prostatic Epithelium for RNA Analysis

The prostate gland contains a heterogeneous milieu of stromal, epithelial, neuroendocrine and immune cell types. Healthy prostate is comprised of fibromuscular stroma surrounding discrete epithelial-lined secretory lumens and a very small population of immune and neuroendocrine cells. In contrast, areas of prostate cancer have increased dysplastic luminal epithelium with greatly reduced or absent stromal population. Given the profound difference between stromal and epithelial cell types, it is imperative to separate the cell types for any type of downstream molecular analysis. Despite this knowledge, the bulk of gene expression studies compare benign prostate to cancer without micro-dissection, leading to stromal bias in the benign samples. Laser-capture micro-dissection (LCM) is an effective method to physically separate different cell types from a specimen section. The goal of this protocol is to show that RNA can be successfully isolated from LCM-collected human prostatic epithelium and used for downstream gene expression studies such as RT-qPCR and RNAseq.

The goal of this protocol is to use laser-capture micro-dissection as an effective method to isolate pure populations of cell types from heterogeneous prostate tissues for downstream RNA analysis.

الليزر التقاط تسليخ مجهري من الإنسان البروستات الظهارة لتحليل الحمض النووي الريبي

The prostate gland contains a heterogeneous milieu of stromal, epithelial, neuroendocrine and immune cell types.  Healthy prostate is comprised of ...

Dissection of the Mouse Pancreas for Histological Analysis and Metabolic Profiling

We have been investigating the pancreas specific transcription factor, 1a cre-recombinase; lox-stop-lox- Kristen rat sarcoma, glycine to aspartic acid at the 12 codon (Ptf1acre/+;LSL-KrasG12D/+) mouse strain as a model of human pancreatic cancer. The goal of our current studies is to identify novel metabolic biomarkers of pancreatic cancer progression. We have performed metabolic profiling of urine, feces, blood, and pancreas tissue extracts, as well as histological analyses of the pancreas to stage the cancer progression. The mouse pancreas is not a well-defined solid organ like in humans, but rather is a diffusely distributed soft tissue that is not easily identified by individuals unfamiliar with mouse internal anatomy or by individuals that have little or no experience performing mouse organ dissections. The purpose of this article is to provide a detailed step-wise visual demonstration to guide novices in the removal of the mouse pancreas by dissection. This article should be especially valuable to students and investigators new to research that requires harvesting of the mouse pancreas by dissection for metabolic profiling or histological analyses.

This video article provides a detailed demonstration of the procedures required to successfully remove the pancreas from a mouse by dissection for histological analysis and metabolic profiling.

تشريح البنكرياس الماوس للتحليل النسيجي والتنميط الأيضية

We have been investigating the pancreas specific transcription factor, 1a cre-recombinase; lox-stop-lox- Kristen rat sarcoma, glycine to aspartic acid at ...

Dissection and Explant Culture of Murine Allantois for the In Vitro Analysis of Allantoic Attachment

The placenta is essential for the growth and development of mammalian embryos. For this reason, numerous genetic alterations and likely also environmental insults that disturb placenta development or function can cause early pregnancy loss in mice and humans. Nevertheless, simple in vitro assays to screen for potential effects on placenta formation are lacking. Here, we focus on modeling the first and critical step in placenta formation, which consists of the attachment of the allantois to the chorion. We describe a method to rapidly assess the attachment of allantoic explants on immobilized &#945;4&#946;1 integrin, which serves as a chorio-mimetic substrate.This in vitro approach enables a qualitative evaluation of the attachment and spreading behavior of multiple allantois explants at different consecutive time points. The protocol may be used to investigate the effect of targeted mouse mutations, drugs, or various environmental factors that have been linked to pregnancy complications or fetal loss on allantois attachment ex vivo.

Dissection and Explant Culture of Murine Allantois for the In Vitro Analysis of Allantoic Attachment

We describe an in vitro assay to model chorioallantoic attachment, the first step in placenta formation. The protocol demonstrates the dissection and explant culture of murine allantoides on immobilized &#945;4&#946;1 integrin. Allantois attachment is evaluated microscopically at pre-determined time points.

تشريح وثقافة Explant موريني Allantois للتحليل في المختبر للحجز الانتويك

The placenta is essential for the growth and development of mammalian embryos. For this reason, numerous genetic alterations and likely also environmental ...

Body Composition and Metabolic Caging Analysis in High Fat Fed Mice

Alterations to body composition (fat or lean mass), metabolic parameters such as whole-body oxygen consumption, energy expenditure, and substrate utilization, and behaviors such as food intake and physical activity can provide important information regarding the underlying mechanisms of disease. Given the importance of body composition and metabolism to the development of obesity and its subsequent sequelae, it is necessary to make accurate measures of these parameters in the pre-clinical research setting. Advances in technology over the past few decades have made it possible to derive these measures in rodent models in a non-invasive and longitudinal fashion. Consequently, these metabolic measures have proven useful when assessing the response of genetic manipulations (for example knockout or transgenic mice, viral knock-down or overexpression of genes), experimental drug/compound screening and dietary, behavioral or physical activity interventions. Herein, we describe the protocols used to measure body composition and metabolic parameters using an animal monitoring system in chow-fed and high fat diet-fed mice.

This protocol describes the use of a body composition analyzer and metabolic animal monitoring system to characterize body composition and metabolic parameters in mice. An obesity model induced by high-fat feeding is used as an example for the application of these techniques.

تكوين الجسم والتحليل الأيضي حبس في الفئران بنك الاحتياطي الفيدرالي الدهون عالية

Alterations to body composition (fat or lean mass), metabolic parameters such as whole-body oxygen consumption, energy expenditure, and substrate ...

Quantitative Micro-CT Analysis of Aortopathy in a Mouse Model of &#946;-aminopropionitrile-induced Aortic Aneurysm and Dissection

Aortic aneurysm and dissection is associated with significant morbidity and mortality in the population and can be highly lethal. While animal models of aortic disease exist, in vivo imaging of the vasculature has been limited. In recent years, micro-computerized tomography (micro-CT) has emerged as a preferred modality for imaging both large and small vessels both in vivo and ex vivo. In conjunction with a method of vascular casting, we have successfully used micro-CT to characterize the frequency and distribution of aortic pathology in &#946;-aminopropionitrile-treated C57/Bl6 mice. Technical limitations of this method include variations in the quality of the perfusion introduced by poor animal preparation, the application of proper methodologies for vessel size quantification, and the non-survivability of this procedure. This article details a methodology for the intravascular perfusion of a lead-based radiopaque silicone rubber for the quantitative characterization of aortopathy in a mouse model of aneurysm and dissection. In addition to visualizing aortic pathology, this method may be used for examining other vascular beds in vivo or vascular beds removed post-mortem.

This article describes a detailed methodology of using a radiopaque lead-based silicone rubber to perfuse the murine vasculature for aortic diameter quantification in a mouse model of aortic aneurysm and dissection.

التحليل الكمي للأشعة المقطعية الصغرى من أورتوباثي في نموذج ماوس β-أمينوبروبيونيتريلي-المستحث الابهر والتشريح

Aortic aneurysm and dissection is associated with significant morbidity and mortality in the population and can be highly lethal. While animal models of ...

Segmentation and Linear Measurement for Body Composition Analysis using Slice-O-Matic and Horos

Body composition is associated with risk of disease progression and treatment complications in a variety of conditions. Therefore, quantification of skeletal muscle mass and adipose tissues on Computed Tomography (CT) and/or Magnetic Resonance Imaging (MRI) may inform surgery risk evaluation and disease prognosis. This article describes two quantification methods originally described by Mourtzakis et al. and Avrutin et al.: tissue segmentation and linear measurement of skeletal muscle. Patients' cross-sectional image at the midpoint of the third lumbar vertebra was obtained for both measurements. For segmentation, the images were imported into Slice-O-Matic and colored for skeletal muscle, intramuscular adipose tissue, visceral adipose tissue, and subcutaneous adipose tissue. Then, surface areas of each tissue type were calculated using the tag surface area function. For linear measurements, the height and width of bilateral psoas and paraspinal muscles at the level of the third lumbar vertebra are measured and the calculation using these four values yield the estimated skeletal muscle mass. Segmentation analysis provides quantitative, comprehensive information about the patients' body composition, which can then be correlated with disease progression. However, the process is more time-consuming and requires specialized training. Linear measurements are an efficient and clinic-friendly tool for quick preoperative evaluation. However, linear measurements do not provide information on adipose tissue composition. Nonetheless, these methods have wide applications in a variety of diseases to predict surgical outcomes, risk of disease progression and inform treatment options for patients.

Segmentation and linear measurements quantify skeletal muscle mass and adipose tissues using Computed Tomography and/or Magnetic Resonance Imaging images. Here, we outline the use of Slice-O-Matic software and Horos image viewer for rapid and accurate analysis of body composition. These methods can provide important information for prognosis and risk stratification.

تجزئة وقياس خطي لتحليل تكوين الجسم باستخدام شريحة-O-ماتيتش وهوروس

Body composition is associated with risk of disease progression and treatment complications in a variety of conditions. Therefore, quantification of ...

Location, Dissection, and Analysis of the Murine Stellate Ganglion

The autonomic nervous system is a substantial driver of cardiac electrophysiology. Especially&#160;the role of its sympathetic branch is an ongoing matter of investigation in the pathophysiology of ventricular arrhythmias (VA). Neurons in the stellate ganglia (SG)&#160;&#8211;&#160;bilateral star-shaped structures of the sympathetic chain &#8211;&#160;are an important component of the sympathetic infrastructure. The SG are a recognized target for&#160;treatment via cardiac sympathetic denervation in patients with therapy-refractory VA. While neuronal remodeling and glial activation in the SG have been described in patients with VA, the underlying cellular and molecular processes that potentially precede the onset of arrhythmia are only insufficiently understood and should be elucidated to improve autonomic modulation. Mouse models allow us to study sympathetic neuronal remodeling, but identification of the murine SG is challenging for the inexperienced investigator. Thus, in-depth cellular and molecular biological studies of the murine SG are lacking for many common cardiac diseases. Here, we describe a basic repertoire for dissecting and studying the SG in adult mice for analyses at RNA level (RNA isolation for gene expression analyses, in situ hybridization), protein level (immunofluorescent whole mount staining), and cellular level (basic morphology, cell size measurement). We present potential solutions to overcome challenges in the preparation technique, and how to improve staining via quenching of autofluorescence. This allows for the visualization of neurons as well as glial cells via established markers in order to determine cell composition and remodeling processes. The methods presented here allow characterizing the SG to gain further information on autonomic dysfunction in mice prone to VA and can be complemented by additional techniques investigating neuronal and glial components of the autonomic nervous system in the heart.

Pathophysiological changes in the cardiac autonomic nervous system, especially in its sympathetic branch, contribute to the onset and maintenance of ventricular arrhythmias. In the present protocol, we show how to characterize murine stellate ganglia to improve the understanding of the underlying molecular and cellular processes.

الموقع، تشريح، وتحليل عصابة مورين ستيلاتي

The autonomic nervous system is a substantial driver of cardiac electrophysiology. Especially&#160;the role of its sympathetic branch is an ongoing matter ...

A Non-Invasive Method for Generating the Cyclic Loading-Induced Intra-Articular Cartilage Lesion Model of the Rat Knee

The pathophysiology of primary osteoarthritis (OA) remains unclear. However, a specific subclassification of OA in relatively younger age groups is likely correlated with a history of articular cartilage damage and ligament avulsion. Surgical animal models of OA of the knee play an important role in understanding the onset and progression of post-traumatic OA and aid in the development of novel therapies for this disease. However, non-surgical models have been recently considered to avoid traumatic inflammation that could affect the evaluation of the intervention. 
In this study, an intra-articular cartilage lesion rat model induced by in vivo cyclic compressive loading was developed, which allowed researchers to (1) determine the optimal magnitude, speed, and duration of load that could cause focal cartilage damage; (2) assess post-traumatic spatiotemporal pathological changes in chondrocyte vitality; and (3) evaluate the histological expression of destructive or protective molecules that are involved in the adaptation and repair mechanisms against joint compressive loads. This report describes the experimental protocol for this novel cartilage lesion in a rat model.

Here, we present the cyclic loading-induced intra-articular cartilage lesion model of the rat knee, generated by 60 cyclic compressions over 20 N, resulting in damage to the femoral condylar cartilage in rats.

طريقة غير جراحية لتوليد نموذج آفة الغضروف داخل المفصل الناجم عن التحميل الدوري لركبة الجرذ

The pathophysiology of primary osteoarthritis (OA) remains unclear. However, a specific subclassification of OA in relatively younger age groups is likely ...