نشكر Tzlil Rozenblat، بيلو الكسندرا وSpuhler كارل لتقديم المساعدة التقنية. وأيد هذا العمل من قبل الكلية الجامعية فاسار معهد بحوث الصيف (URSI)، لوسي بحوث سمك السلمون صندوق ماينارد وجائزة NASA # NX09AU90A، المؤسسة الوطنية للعلوم مركز التميز البحثي في ​​العلوم والتكنولوجيا (NSF-CREST) ​​جائزة # 0630388 وNSF لل # 1058385 الجائزة.

1. C. ايليجانس التحضير لتحليل الفيديو <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نقل الديدان الخيطية الكبار 10-20 حامل لوحات أجار NGM جديدة بتري مليئة باستخدام رقيقة، والأسلاك المسطحة اختيار البلاتين. أطباق بتري مليئة أجار NGM تحتوي على بقعة صغيرة دائرية من E. القولونية (سلالة النمو المحدود، OP50، ويعطي أفضل النتائج) لالديدان الخيطية لتناول الطعام. السماح للالديدان الخيطية لوضع البيض لمدة 3-5 ساعة ثم قم بإزالة البالغين، وبذلك صغيرة، والثقافة تنمويا، متزامنة من 50-150 الديدان الخيطية. السماح للالديدان الخيطية في النمو إلى مرحلة البلوغ المبكرة من احتضان لوحات بيتري في C ° 20 لمدة 4-5 أيام. وتستند هذه الأساليب الثقافة على إجراءات المعمول بها (Stiernagle 2006) .. 5 </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في اليوم من تحليل الفيديو، طرد الديدان الخيطية لوحة من الشباب البالغين مع 1 مل من الماء، منزوع الأيونات المقطر، وجمع بذلك 50-150 الديدان من ثقافة متزامنة. ويمكن أيضا حل العازلة مثل M9 أو PBS استخدامها. استخدام ميكروسنتريفوج تدور ثorms إلى أسفل الأنبوب، أو السماح لهم تسوية عن طريق الجاذبية لمدة 15 دقيقة. إزالة الغالبية العظمى من المياه من الأنبوب واستبدالها مع 1 مل من الماء، منزوع الأيونات المقطر من أجل غسل أي بكتيريا الالتزام من الديدان الخيطية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نقل النيماتودا في الماء أو المخزن المؤقت إلى كوفيت الكوارتز باستخدام micropipette. من المهم العمل مع عدد قليل، عن النيماتودا 5-10 في مجموع في وقت واحد أو أقل وذلك حتى أن أحد الديدان الخيطية في وقت من المرجح أن تكون مضيئة بواسطة الليزر. إذا كان عدد الديدان الخيطية على لوحات ثقافة كبيرة جدا، يخفف من الديدان في الماء أو المخزن المؤقت حتى يتم التوصل إلى الكثافة المطلوبة. ومن الممكن أيضا لاختيار الديدان الخيطية الفردية لقطرة ماء أو المخزن المؤقت على طبق أجار جديدة لغسلها ونقل الديدان الفردية إلى كوفيت. في دراستنا، استخدمنا 1 مم، 2 مم و 5 مم أحجام كوفيت لدراسة آثار القيود الفعلية على السباحة السلوك. </li></ol> 2. البصرية الإعداد لs تحليل الفيديوق <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> أداء الإعداد كما هو موضح في الشكل 1 نانومتر باستخدام 543 (أخضر) الهيليوم النيون (HeNe) الليزر، واثنين من المرايا الألومنيوم الأمامية السطح، حامل كوفيت، شاشة الإسقاط، وكاميرا عالية السرعة (كاسيو Exilim ت عالي السرعة) قادرة من التصوير في FPS 240 ~. وتستخدم اثنين من المرايا لتوجيه شعاع الليزر من خلال كوفيت. ويمكن استخدام أحجام مختلفة من cuvettes تبعا لطبيعة الدراسة. وعلى سبيل المثال، استخدمنا cuvettes التي هي 5 مم لإظهار آثار القيود المكانية على ترددات السباحة. يجب أن شعاع الليزر يستوفي شروط الإفراط؛ أي كائن يجب أن لا تعيق أكثر من ثلث من شعاع الليزر. لC. ايليجانس، يجب أن يكون شعاع الليزر حوالي 2 مم في القطر عندما يتفاعل مع الديدان الخيطية. ينبغي أن لا يكون شعاع الليزر أكبر من 5 مم في القطر منذ نمط حيود سيكون من الصعب العثور عليها. ينبغي أن المسافة من الحي diffracting إلى الشاشة تكون أكبر بكثير منالكائن الحي نفسه. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مكان parafilm على الجزء العلوي من كوفيت وعكس ذلك لخلط النيماتودا في عمود الماء. وضع كوفيت في حامل كوفيت بحيث الديدان في البداية بالقرب من الجزء العلوي من كوفيت. باستخدام المرايا، توجيه شعاع الليزر من خلال مركز كوفيت. لأن الديدان الخيطية هي أكثر كثافة من الماء، فإنها تقع ببطء إلى أسفل كوفيت، بينما في الوقت نفسه السباحة في عمود الماء. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> على لون الإسقاط، شاشة البقعة المقابلة لشعاع الليزر المنقولة السوداء للحد من تشتت وشعاع المنقولة يفي شاشة العرض (الشكل 2). وبدلا من وضع فتحة في شاشة العرض للسماح للشعاع المنقولة لتمرير من خلال الشاشة. والقضاء على أو الحد من تشتت شعاع المنقولة حفاظ على مجموعة من الكاميرا CCD من تشبع نظرا لشعاع المنقولة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لالتقاط مقياس لحجم نمط حيود، رسم خطحوالي 5 سم على شاشة العرض المقبل الى مكان الحادث شعاع الليزر المنقولة دون التدخل في صورة ضوء محلل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بدء التسجيل مع الكاميرا في حين أن ضوء الغرفة على ذلك أن الخط 5 سم على لقطات نفس الصور الحيود. تحويل قبالة ضوء الغرفة. صور الحيود القياسي على الشاشة مع الكاميرا والديدان تمر من خلال شعاع الليزر. </li></ol> 3. الفيديو إعداد البيانات <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تثبيت برنامج الفيديو التحليل (المسجل برو: <a href="http://www.vernier.com/products/software/lp/" target="_blank">http://www.vernier.com/products/software/lp/</a> ) على الكمبيوتر. استيراد الفيديو في برنامج تحليل الفيديو </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تعيين الأصل ليتزامن مع بقعة الليزر المنقولة. تعيين النطاق باستخدام سطر 5 سم على شاشة العرض. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تتبع التشريد الزاوي للصورة الحيود التي شكلتها كل الديدان الخيطية باستخدام برنامج تحليل الفيديو (الشكل 3) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> العثور على انجولاص النزوح عن طريق اتخاذ ظل الزاوية القوسي (Y / X)، ونسخة لصق البيانات في جدول بيانات (اكسل) وإضافة 180 درجة أو π لجميع الزوايا السلبية لإنتاج رسم بياني مستمر (Figure. 4). </li></ol> 4. الحصول على البيانات الحقيقية الوقت لمراقبة فورية للترددات سباحة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> باستخدام نفس الإعداد لتحليل الفيديو، ضع الثنائي الضوئي (DET10A من ThorLabs) مع منطقة صغيرة (~ 1 ملم 2) قبالة مركز في نمط حيود الحق أمام شاشة العرض. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> توصيل الثنائي الضوئي إلى الذبذبات الرقمية (PicoScope الذي أدلى به التكنولوجيا بيكو) الذي يربط إلى جهاز الكمبيوتر عبر منفذ USB. مراقبة أنماط سحق على شاشة الكمبيوتر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حفظ البيانات المكتسبة في شكل مجموعات ASCII أو النص. </li></ol> 5. تحليل البيانات <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استيراد البيانات باستخدام الفيديو أو المكتسبة الثنائي الضوئي وإلى تحليل بيانات البرنامج قادر على الطول الموجي المناسب باستخدام خي مربع الحد. البرنامج المستخدم هنا هو الاصل ( <a href="http://www.originlab.com/" target="_blank">http://www.originlab.com/</a> ). تناسب منحنى الجيبية لتحديد تردد سحق (أرقام 4 و 5). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الترددات سباحة متوسط ​​من عينات مختلفة، وتحديد التباين. لهذه الدراسة، تم تحليل البيانات إحصائيا باستخدام ANOVA واحد عامل يليه اختبار Bonferroni مقارنات متعددة. واعتبر A ف قيمة &lt;0.05 ذات دلالة إحصائية. </li></ol> 6. أنماط الحيود باستخدام نموذج الرياضيات كمثال ملاحظة: يمكن أن تكون على غرار أنماط الحيود باستخدام العديد من الأدوات الحاسوبية المختلفة. وهذا الإجراء تختلف عن الأدوات الحسابية المختلفة مثل Matlab، إكسل، الخ المنشأ <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إنشاء الصورة: التقط صورا من الديدان الخيطية على شريحة المجهر باستخدام مجهر التقليدي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Binarize الصورة: استيراد &quot;دودة&quot; صورة دودة طn لالرياضيات عن طريق سحب الصورة في الرياضيات. تحويل الصورة إلى صورة بالأبيض والأسود (binarize). ويمكن تحقيق هذا الأمر مع &#39;Binarize&#39; في الرياضيات: BlackandWhiteImage = Binarize [دودة]. ويمكن بعد ذلك أن ينظر إلى صورة كصورة بالأبيض والأسود. بدلا من ذلك، استخدم الأمر &quot;EdgeDetect &#39;لإنشاء BlackandWhiteImage: EdgeDetect [دودة، 6.0،0.035]، حيث الرقمين زائدة السيطرة على خشونة الحواف الناتجة عن ذلك. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحويل الصورة إلى مصفوفة من أصفار ومنها: ويمكن تحقيق ذلك باستخدام الأمر &quot;ImageData &#39;في الرياضيات: مصفوفة = ImageData [BlackandWhiteImage]. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحويل فورييه مصفوفة: استخدام &quot;فورييه&quot; الأمر في الرياضيات لتحويل فورييه المصفوفة باستخدام FourierParameters المبين: FTransform = فورييه [مصفوفة، FourierParameters -&gt; {0، -2}]. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> معامل مربع من المصفوفة للحصول على مصفوفة حيود وتحسين تباين الصورة: ساحة المطلقةقيمة مصفوفة وعرض الصورة الناتجة عن ذلك، والذي هو نمط حيود الموافق الصورة الأصلية. أيضا، استخدم &#39;سجل&#39; وظيفة لقياس تباين الصورة: صورة ImageContrast = [سجل [1 + (القيمة المطلقة [FTransform]) ^ 2] / 0.5]. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تغيير حجم الصورة لعرض سهلة: المحاصيل نمط حيود وسط وتغيير حجم كما هو مطلوب: ImageResize [ImageContrast [ص، 100]، 500]. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مقارنة مع أنماط الحيود غرار أنماط الحيود تم الحصول عليها من الديدان السباحة بحرية. (الشكل 6) </li></ol>

<ol>
	<li>Korta, J., Clark, D. A., Gabel, C. V., Mahadevan, L., Samuel, A. D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanosensation+and+mechanical+load+modulate+the+locomotory+gait+of+swimming+C.+elegans.">Mechanosensation and mechanical load modulate the locomotory gait of swimming C. elegans.</a> J. Exp. Biol. 210, (2007).</li><li>James, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> A student's guide to Fourier transforms with applications in physics and engineering. , (1995).</li><li>Pierce-Shimomura, J. T., Chen, B. L., Mun, J. J., Ho, R., Sarkis, R., McIntire, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+analysis+of+crawling+and+swimming+locomotory+patterns+in+C.+elegans.">Genetic analysis of crawling and swimming locomotory patterns in C. elegans.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 105, 20982-20987 (2008).</li><li>Li, W., Feng, Z., Sternbert, P. W., Xu, X. Z. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+C.+elegans+stretch+receptor+neuron+revealed+by+a+mechanosensitive+TRP+channel+homologue.">A C. elegans stretch receptor neuron revealed by a mechanosensitive TRP channel homologue.</a> Nature. 440, 684-687 (2006).</li><li>Stiernagle, T., ed, W. o. r. m. B. o. o. k. ,. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maintenance+of+C.+elegans.">Maintenance of C. elegans.</a> WormBook. , (2006).</li><li>Eells, R., Lueckheide, M., Magnes, J., Susman, K., Rozenblat, T., Kakhurel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+Diffraction+Analysis+and+the+Transformation+of+C.+elegans.">Dynamic Diffraction Analysis and the Transformation of C. elegans.</a> , (2011).</li><li>Magnes, J., Raley-Susman, K. M., Melikechi, N., Sampson, A., Eells, R., Bello, A., Lueckheide, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+Freely+Swimming+C.+elegans+using+Laser+Diffraction.">Analysis of Freely Swimming C. elegans using Laser Diffraction.</a> O. J. Biphys. , (2012).</li><li>Magnes, J., Raley-Susman, K. M., Sampson, A., Eells, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Locomotive+Analysis+of+C.+Elegans+through+Diffraction,+Control+number:+348+Session:+JTuA+-+Joint+FiO/LS+Poster+Session+I+Pres.+number:+JTuA39.">Locomotive Analysis of C. Elegans through Diffraction, Control number: 348 Session: JTuA - Joint FiO/LS Poster Session I Pres. number: JTuA39.</a> , (2010).</li><li>Kim, N., Dempsey, C. M., Kuan, C. J., Zoval, J., O'Rourke, E., Ruvkun, G., Madou, M. J., Sze, J. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gravity+fource+transduced+by+the+MEC-4/MEC-10+DEG/EnaC+channel+modulates+DAF-16/FoxO+activity+in+Caenorhabditis+elegans.">Gravity fource transduced by the MEC-4/MEC-10 DEG/EnaC channel modulates DAF-16/FoxO activity in Caenorhabditis elegans.</a> Genetics. 177, 835-845 (2007).</li><li>Park, S., Hwang, H., Nam, S. -. W., Martinez, F., Austin, R. H., Ryu, W. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhanced+Caenorhabditis+elegans+locomotion+in+a+structured+microfluidic+environment.">Enhanced Caenorhabditis elegans locomotion in a structured microfluidic environment.</a> PLOS One. 3, e2550 (2008).</li><li>Keller, H. E., Pawley, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Objective+Lenses+for+Confocal+Microscopy.">Objective Lenses for Confocal Microscopy.</a> Handbook of Biological Confocal Microscopy. , 145-161 (2006).</li><li>Martin, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> TECHNICAL OPTICS. II, (1950).</li></ol>

الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

وقد وضعنا نهجا جديدا لقياس الوقت الحقيقي من الحركة والسلوك الحركي بسيطة في الكائنات الحية المجهرية مثل الديدان الخيطية التي لا تتطلب استخدام المجاهر. يمكن أيضا 8 وهذا النهج المنهجية استخدامها لدراسة الكائنات الحية المجهرية مثل العديد من الأولانيات. ويقتصر هذا الأسلوب فقط من الطول الموجي للضوء المستخدم. يجب أن لا يكون الكائن أصغر من الطول الموجي للضوء. بالإضافة إلى وفورات التكلفة وقابلية المعدات اللازمة، واحد الميزة الرئيسية لهذا النهج هو القدرة على قياس السلوك في الوقت الحقيقي وفي ثلاثة أبعاد، دون قيود ضيقة من طائرات صورة تحت المجهر. من الممكن أيضا مع هذه التقنية لدراسة تأثيرات قوى الجاذبية أو ظروف أخرى عديدة على السلوك الذي لا يمكن دراستها باستخدام المجهر النهج القائمة على .. 9 وهكذا، يمكننا تحقيق فهم أفضل لالحركي الدقيق beha الطبيعيةviors تحررت من حدود قطرات المجهر الشريحة أو غرف متخصصة ميكروفلويديك (بارك وآخرون، 2008) 10 عدم وجود معلومات في مرحلة نمط حيود لا يسمح لاسترجاع المباشر للصورة المقابلة لكائن diffracting منذ نمط حيود بعيدة مجال يتناسب مع مربع القيمة المطلقة للتحويل فورييه. ولذلك نحن حساب أنماط الحيود من الصور الدودة بحيث يمكن مطابقتها مع أنماط الحيود من الديدان الخيطية السباحة بحرية (الشكل 6). وقد أسفرت نتائج هذه الطريقة لحقا السباحة بحرية C. يمكن تطبيقها على أي ايليجانس والأنواع المجهرية التي مناورات في بيئة شفافة بصريا مثل الماء أو العديد من الحلول الأيونية مختلفة. المجاهر التقليدية لا تسمح الدراسات وعلى عمق التنسيق بناء على أمر من ميكرومتر. 11 هذا ويرجع ذلك إلى محدوديةعمق الميدان عندما تركز الضوء: <img alt="المعادلة 1" src="/files/ftp_upload/4412/4412eq1.jpg" /> حيث F-N عدد لديه علاقة متبادلة مع دائرة الارتباك (ج) بحيث يرتبط بطول قصير التنسيق مع ج كبيرة. 12،13 في حين أن هذا الأسلوب الحيود هي بالتأكيد ليست بديلا للفحص المجهري التقليدية، وأنها قادرة لتقديم النتائج الكمية بسرعة بحيث يمكن أن يتم التلاعب حتى الأنواع في الوقت الحقيقي بتكلفة منخفضة. يمكن الحصول على أنماط الحيود مع أي مؤشر ليزر. ويمكن تصوير أنماط الحيود في القرار ألف الزمنية انخفاض باستخدام كاميرا رقمية العادية. في حين أن المستخدم قد لا يكون المجهر الضوئي أو متاحة بسهولة ل، يمكن إكمال الأجزاء الرئيسية من هذه التجربة مثل قياس الترددات سحق وتقييم أنماط الحيود بتكلفة منخفضة للغاية.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم </td><td> شركة </td><td> كتالوج رقم </td><td> التعليقات (اختياري) </td></tr><tr><td> 543 نانومتر ليزر HeNe </td><td> ميليس Griot </td><td> LGX1 </td><td> ويمكن استخدام الليزر في أي مجموعة مرئية مع أقل من 5 ميغاواط. </td></tr><tr><td> 2 ألمنيوم السطح الأمامي مرايا </td><td> Thorlabs </td><td> PF10-03-F01 </td><td></td></tr><tr><td> كاميرا عالية السرعة Exilim ت </td><td> كاسيو </td><td></td><td></td></tr><tr><td> الكوارتز كوفيت </td><td> خلايا Starna </td><td> 21/G/5 </td><td></td></tr><tr><td> LoggerPro (برمجيات) </td><td> الورنية مقياس الكسور </td><td></td><td> <a href="http://www.vernier.com/products/software/lp/" target="_blank">http://www.vernier.com/products/software/lp/</a> </td></tr><tr><td> 8 الرياضيات </td><td> التنجستين عنصر فلزي </td><td></td><tد&gt; <a href="http://www.wolfram.com/" target="_blank">http://www.wolfram.com/</a> </td></tr></tbody></table>

quantitative locomotion study of freely swimming micro-organisms using laser diffraction

التربة والكائنات الحية المجهرية المائية الحية والتصرف في بيئة ثلاثية الأبعاد المعقدة. معظم الدراسات للسلوك الكائن المجهري، في المقابل، أجريت باستخدام المجهر النهج القائمة على، التي تحد من الحركة والسلوك إلى الساحة الضيقة، التنسيق ما يقرب من الأبعاد. 1 نحن تقديم نهجا جديدا التحليلية التي توفر في الوقت الحقيقي تحليل السباحة بحرية C. ايليجانس في كوفيت دون الاعتماد على المعدات القائمة على المجهر. يتكون هذا النهج من تتبع وتيرة الزمني للأنماط الحيود الناتجة عن توجيه ضوء الليزر عبر كوفيت. نقيس الترددات التذبذب للالنيماتودا السباحة بحرية. تحليل أنماط الحيود بعيدة الميدان يكشف أدلة حول الطول الموجي من الديدان الخيطية. الحيود هو عملية الانحناء الضوء حول كائن. في هذه الحالة الضوء محلل من الكائنات الحية. موجات الضوء تتداخل ويمكن أن تشكل إعلانiffraction النمط. حقل بعيد، أو فراونهوفر، يتم تشكيل نمط حيود إذا كانت المسافة الشاشة إلى كائن هو أكبر بكثير من الكائن diffracting. في هذه الحالة، يمكن حساب نمط حيود (على غرار) باستخدام تحويل فورييه .. 2 ايليجانس C. أحرار المعيشة التربة التي تعيش الديدان الخيطية التي تنقل في ثلاثة أبعاد. تتحرك كلا على مصفوفة صلبة مثل التربة أو أجار في نمط الحركي الجيبية تسمى الزحف والسائل في نمطا مختلفا دعا السباحة. 3 والأدوار التي تقوم بها المعلومات الحسية التي تقدمها ميكانيكية حسية، حسي كيميائي، والخلايا التي تحكم thermosensory التغييرات التجميلية في الحركي أنماط ومفاتيح في أنماط هي بداية فقط إلى توضيح .. 4 وصفنا هذا النهج البصرية لقياس تنقل الديدان الخيطية في ثلاثة أبعاد التي لا تتطلب المجهر وسوف تمكننا من البدء في استكشاف التعقيدات للتنقل الديدان الخيطية تحت المشارك مختلفةnditions.

<html> وكمثال على ذلك، درسنا C. ايليجانس في الطول الكوارتز 1 كوفيت واسعة، 5 مم و 4 سم كوفيت طويل القامة. أخذ العينات دودة واحدة باستخدام تحليل الفيديو، وتواتر سباحة متوسط ​​تم الحصول عليها من تحليل الفيديو في كوفيت سميكة 5 مم هو حوالي 2.5 هرتز (الشكل 4). وبالمثل، وأخذ العينات دودة واحد باستخدام طريقة الحصول على البيانات الحقيقية الوقت، ونحن الحصول على تردد من السباحة نحو 2.7 هرتز (الشكل 5)، وذلك باستخدام الذبذبات الرقمية (PicoScope). ويمكن تكرار هذا الإجراء للديدان كثيرة. دراسة تفصيلية من الديدان السباحة بحرية كشفت تردد سباحة متوسط ​​يبلغ 2.37 هرتز في كوفيت مم 5 .. 6 وكما هو متوقع، وتواتر السباحة أعلى من دودة الزحف (~ 0،8 هرتز) 3 الحيود باستخدام هذا الأسلوب، في الترددات سباحة متوسط ​​C. وقد وجد ايليجانس، والذي يقتصر على شريحة المجهر، لتتناسب مع القيمة التي تم نشرها مسبقا من 2 هرتز. 1،7 ve_content &quot;&gt; الإجراءات التالية 3) ثم 6.) يسمح للنمذجة أنماط الحيود السباحة بمساعدة من الصور التي تم الحصول عليها مع دودة المجهر التقليدية. وتستخدم أنماط الحيود على غرار لمحاكاة دورة السباحة للايليجانس C. ( الشكل 6). نموذجا ناجحا يتكون من الممكن جسديا أنماط السباحة المتعاقبة مطابقة الترددات السباحة. الدودة يجب أن تكون في نفس الشكل في نهاية دورة السباحة كما كان في بداية دورة السباحة. <img alt="الشكل 1" src="/files/ftp_upload/4412/4412fig1.jpg" /> الشكل 1. تم استخدام الليزر الأخضر HeNe لخلق نمط حيود الديناميكية باستخدام الحية C. ايليجانس. تم تصوير هذا نمط حيود في 240 إطارا في الثانية. <img alt="الشكل 2" src="/files/ftp_upload/4412/4412fig2.jpg" /> الشكل 2. ذراع<html> الجناح نقطة سوداء يزيد امتصاص شعاع المنقولة. يتم تقليل التشبع من الكاميرا بسبب الضوء المتناثرة ونمط حيود تصبح مرئية. <img alt="الشكل 3" src="/files/ftp_upload/4412/4412fig3.jpg" /> الشكل 3. لقطة من الشاشة للفيديو برامج التحليل (المسجل برو) مع دودة نمط حيود التي يتم تتبعها. <a href="http://www.jove.com/files/ftp_upload/4412/4412fig3large.jpg" target="_blank">اضغط هنا لمشاهدتها بشكل اكبر شخصية</a> . <img alt="الشكل 4" src="/files/ftp_upload/4412/4412fig4.jpg" /> الشكل 4. بيانات الفيديو المقابلة لدورة السباحة من الديدان الخيطية في كوفيت 5 مم. تناسب منحنى يكشف عن تردد من السباحة هرتز 2.5 ~. &quot;/&gt; الشكل 5. البيانات في الوقت الحقيقي المقابلة لدورة السباحة من الديدان الخيطية في كوفيت 5 مم. تناسب منحنى يكشف عن تردد السباحة من 2،7 هرتز ~. <img alt="الشكل 6" src="/files/ftp_upload/4412/4412fig6.jpg" /> الشكل 6. الصف العلوي يمثل أنماط الحيود الفعلية ويتم مطابقة لأنماط الحيود غرار في الصف السفلي. تم إنتاج أنماط الحيود باستخدام غرار الديدان على شريحة المجهر (الصف الأوسط).

Watch this Scientific Journal Video about Quantitative Locomotion Study of Freely Swimming Micro-organisms Using Laser Diffraction at JoVE.com

Quantitative Locomotion Study of Freely Swimming Micro-organisms Using Laser Diffraction

المجهرية الحية مثل الديدان الخيطية السباحة الحرة<em&gt; C. ايليجانس</em&gt; والعيش والتصرف في بيئة ثلاثية الأبعاد المعقدة. نحن تقريرا عن نهج الرواية التي يقدم تحليلا لل<em&gt; C. ايليجانس</em&gt; باستخدام أنماط الحيود. يتكون هذا النهج من تتبع وتيرة الزمني للأنماط الحيود الناتجة عن توجيه ضوء الليزر عبر كوفيت.

دراسة كمية تحرك بحرية من حوض الكائنات الحية الدقيقة باستخدام حيود الليزر

Soil and aquatic microscopic organisms live and behave in a complex three-dimensional environment. Most studies of microscopic organism behavior, in ...

quantitative-locomotion-study-freely-swimming-micro-organisms-using

Research

JoVE Journal

Bioengineering

11.4K Views.  Vassar College. المجهرية الحية مثل الديدان الخيطية السباحة الحرة C. ايليجانس والعيش والتصرف في بيئة ثلاثية الأبعاد المعقدة. نحن تقريرا عن نهج الرواية التي يقدم تحليلا لل C. ايليجانس باستخدام أنماط الحيود. يتكون هذا النهج من تتبع وتيرة الزمني للأنماط الحيود النا?...

Video: Quantitative Locomotion Study of Freely Swimming Micro-organisms Using Laser Diffraction

Improved Visualization and Quantitative Analysis of Drug Effects Using Micropatterned Cells

To date, most HCA (High Content Analysis) studies are carried out with adherent cell lines grown on a homogenous substrate in tissue-culture treated micro-plates. Under these conditions, cells spread and divide in all directions resulting in an inherent variability in cell shape, morphology and behavior. The high cell-to-cell variance of the overall population impedes the success of HCA, especially for drug development. The ability of micropatterns to normalize the shape and internal polarity of every individual cell provides a tremendous opportunity for solving this critical bottleneck 1-2.
To facilitate access and use of the micropatterning technology, CYTOO has developed a range of ready to use micropatterns, available in coverslip and microwell formats. In this video article, we provide detailed protocols of all the procedures from cell seeding on CYTOOchip micropatterns, drug treatment, fixation and staining to automated acquisition, automated image processing and final data analysis. With this example, we illustrate how micropatterns can facilitate cell-based assays. Alterations of the cell cytoskeleton are difficult to quantify in cells cultured on homogenous substrates, but culturing cells on micropatterns results in a reproducible organization of the actin meshwork due to systematic positioning of the cell adhesion contacts in every cell. Such normalization of the intracellular architecture allows quantification of even small effects on the actin cytoskeleton as demonstrated in these set of protocols using blebbistatin, an inhibitor of the actin-myosin interaction.

Adhesive micropatterns that normalize cellular architecture can be used to increase sensitivity in the detection of drug effects, improve reproducibility and simplify automated image acquisition and analysis. Such technology will benefit drug/siRNA screening assays, performed on conventional cell culture supports and consequently suffering from excessive cell-to-cell variability.

تحسن التصور والتحليل الكمي لتأثيرات الدواء باستخدام خلايا Micropatterned

To date, most HCA (High Content Analysis) studies are carried out with adherent cell lines grown on a homogenous substrate in tissue-culture treated ...

Constructing a Low-budget Laser Axotomy System to Study Axon Regeneration in C. elegans

Laser axotomy followed by time-lapse microscopy is a sensitive assay for axon regeneration phenotypes in C. elegans1. The main difficulty of this assay is the perceived cost ($25-100K) and technical expertise required for implementing a laser ablation system2,3. However, solid-state pulse lasers of modest costs (&lt;$10K) can provide robust performance for laser ablation in transparent preparations where target axons are "close" to the tissue surface. Construction and alignment of a system can be accomplished in a day. The optical path provided by light from the focused condenser to the ablation laser provides a convenient alignment guide. An intermediate module with all optics removed can be dedicated to the ablation laser and assures that no optical elements need be moved during a laser ablation session. A dichroic in the intermediate module allows simultaneous imaging and laser ablation. Centering the laser beam to the outgoing beam from the focused microscope condenser lens guides the initial alignment of the system. A variety of lenses are used to condition and expand the laser beam to fill the back aperture of the chosen objective lens. Final alignment and testing is performed with a front surface mirrored glass slide target. Laser power is adjusted to give a minimum size ablation spot (&lt;1um). The ablation spot is centered with fine adjustments of the last kinematically mounted mirror to cross hairs fixed in the imaging window. Laser power for axotomy will be approximately 10X higher than needed for the minimum ablation spot on the target slide (this may vary with the target you use). Worms can be immobilized for laser axotomy and time-lapse imaging by mounting on agarose pads (or in microfluidic chambers4). Agarose pads are easily made with 10% agarose in balanced saline melted in a microwave. A drop of molten agarose is placed on a glass slide and flattened with another glass slide into a pad approximately 200 um thick (a single layer of time tape on adjacent slides is used as a spacer). A "Sharpie" cap is used to cut out a uniformed diameter circular pad of 13mm. Anesthetic (1ul Muscimol 20mM) and Microspheres (Chris Fang-Yen personal communication) (1ul 2.65% Polystyrene 0.1 um in water) are added to the center of the pad followed by 3-5 worms oriented so they are lying on their left sides. A glass coverslip is applied and then Vaseline is used to seal the coverslip and prevent evaporation of the sample.

Constructing a Low-budget Laser Axotomy System to Study Axon Regeneration in C. elegans

Laser axotomy followed by time-lapse imaging is a sensitive way to assay the effects of mutations in C. elegans on axon regeneration. A high quality, but inexpensive, laser ablation system can be easily added to most microscopes. Time lapse imaging over 15 hours requires careful immobilization of the worm.

بناء منخفض الميزانية Axotomy نظام ليزر لدراسة التجديد في أكسون C. ايليجانس</em

Laser axotomy followed by time-lapse microscopy is a sensitive assay for axon regeneration phenotypes in C. elegans1.  The main difficulty of this assay ...

Microfluidic-based Electrotaxis for On-demand Quantitative Analysis of Caenorhabditis elegans' Locomotion

The nematode Caenorhabditis elegans is a versatile model organism for biomedical research because of its conservation of disease-related genes and pathways as well as its ease of cultivation. Several C. elegans disease models have been reported, including neurodegenerative disorders such as Parkinson's disease (PD), which involves the degeneration of dopaminergic (DA) neurons 1. Both transgenes and neurotoxic chemicals have been used to induce DA neurodegeneration and consequent movement defects in worms, allowing for investigations into the basis of neurodegeneration and screens for neuroprotective genes and compounds 2,3.
Screens in lower eukaryotes like C. elegans provide an efficient and economical means to identify compounds and genes affecting neuronal signaling. Conventional screens are typically performed manually and scored by visual inspection; consequently, they are time-consuming and prone to human errors. Additionally, most focus on cellular level analysis while ignoring locomotion, which is an especially important parameter for movement disorders.
We have developed a novel microfluidic screening system (Figure 1) that controls and quantifies C. elegans' locomotion using electric field stimuli inside microchannels. We have shown that a Direct Current (DC) field can robustly induce on-demand locomotion towards the cathode ("electrotaxis") 4. Reversing the field's polarity causes the worm to quickly reverse its direction as well. We have also shown that defects in dopaminergic and other sensory neurons alter the swimming response 5. Therefore, abnormalities in neuronal signaling can be determined using locomotion as a read-out. The movement response can be accurately quantified using a range of parameters such as swimming speed, body bending frequency and reversal time.
Our work has revealed that the electrotactic response varies with age. Specifically, young adults respond to a lower range of electric fields and move faster compared to larvae 4. These findings led us to design a new microfluidic device to passively sort worms by age and phenotype 6.
We have also tested the response of worms to pulsed DC and Alternating Current (AC) electric fields. Pulsed DC fields of various duty cycles effectively generated electrotaxis in both C. elegans and its cousin C. briggsae 7. In another experiment, symmetrical AC fields with frequencies ranging from 1 Hz to 3 KHz immobilized worms inside the channel 8.
Implementation of the electric field in a microfluidic environment enables rapid and automated execution of the electrotaxis assay. This approach promises to facilitate high-throughput genetic and chemical screens for factors affecting neuronal function and viability.

Microfluidic-based Electrotaxis for On-demand Quantitative Analysis of Caenorhabditis elegans&#039; Locomotion

A semi-automated micro-electro-fluidic method to induce on-demand locomotion in Caenorhabditis elegans is described. This method is based on the neurophysiologic phenomenon of worms responding to mild electric fields (&#x201C;electrotaxis&#x201D;) inside microfluidic channels. Microfluidic electrotaxis serves as a rapid, sensitive, low-cost, and scalable technique to screen for factors affecting neuronal health.

انجذاب كهربي المستندة ميكروفلويديك للتحليل الكمي بناء على الطلب<em&gt; انواع معينة ايليجانس</em&gt; &#39;تنقل

The nematode Caenorhabditis elegans is a versatile model organism for biomedical research because of its conservation of disease-related genes and ...

Drug-induced Sensitization of Adenylyl Cyclase: Assay Streamlining and Miniaturization for Small Molecule and siRNA Screening Applications

Sensitization of adenylyl cyclase (AC) signaling has been implicated in a variety of neuropsychiatric and neurologic disorders including substance abuse and Parkinson&#39;s disease. Acute activation of G&#945;i/o-linked receptors inhibits AC activity, whereas persistent activation of these receptors results in heterologous sensitization of AC and increased levels of intracellular cAMP. Previous studies have demonstrated that this enhancement of AC responsiveness is observed both in vitro and in vivo following the chronic activation of several types of G&#945;i/o-linked receptors including D2 dopamine and &#956; opioid receptors. Although heterologous sensitization of AC was first reported four decades ago, the mechanism(s) that underlie this phenomenon remain largely unknown. The lack of mechanistic data presumably reflects the complexity involved with this adaptive response, suggesting that nonbiased approaches could aid in identifying the molecular pathways involved in heterologous sensitization of AC. Previous studies have implicated kinase and Gb&#947; signaling as overlapping components that regulate the heterologous sensitization of AC. To identify unique and additional overlapping targets associated with sensitization of AC, the development and validation of a scalable cAMP sensitization assay is required for greater throughput. Previous approaches to study sensitization are generally cumbersome involving continuous cell culture maintenance as well as a complex methodology for measuring cAMP accumulation that involves multiple wash steps. Thus, the development of a robust cell-based assay that can be used for high throughput screening (HTS) in a 384&#160;well format would facilitate future studies. Using two D2 dopamine receptor cellular models (i.e.&#160;CHO-D2L and HEK-AC6/D2L), we have converted our 48-well sensitization assay (&#62;20 steps 4-5 days) to a five-step, single day assay in 384-well format. This new format is amenable to small molecule screening, and we demonstrate that this assay design can also be readily used for reverse transfection of siRNA in anticipation of targeted siRNA library screening.

Persistent activation of inhibitory G protein-coupled receptors results in sensitization of adenylyl cyclase signaling. To identify the essential molecular pathways, nonbiased approaches are necessary; however, this strategy requires the development of a scalable cell-based cAMP sensitization assay. Herein, we describe a sensitization assay for small molecule and siRNA screening.

المخدرات التي يسببها-توعية انزيمات محلقة: تبسيط الفحص والتصغير لجزيء صغير وسيرنا تطبيقات الفحص

Sensitization of adenylyl cyclase (AC) signaling has been implicated in a variety of neuropsychiatric and neurologic disorders including substance abuse ...

Human Cartilage Tissue Fabrication Using Three-dimensional Inkjet Printing Technology

Bioprinting, which is based on thermal inkjet printing, is one of the most attractive enabling technologies in the field of tissue engineering and regenerative medicine. With digital control&#160;cells, scaffolds, and growth factors can be precisely deposited to the desired two-dimensional (2D) and three-dimensional (3D) locations rapidly. Therefore, this technology is an ideal approach to fabricate tissues mimicking their native anatomic structures. In order to engineer cartilage with native zonal organization, extracellular matrix composition (ECM), and mechanical properties, we developed a bioprinting platform using a commercial inkjet printer with simultaneous photopolymerization capable for 3D cartilage tissue engineering. Human chondrocytes suspended in poly(ethylene glycol) diacrylate (PEGDA) were printed for 3D neocartilage construction via layer-by-layer assembly. The printed cells were fixed at their original deposited positions, supported by the surrounding scaffold in simultaneous photopolymerization. The mechanical properties of the printed tissue were similar to the native cartilage. Compared to conventional tissue fabrication, which requires longer UV exposure, the viability of the printed cells with simultaneous photopolymerization was significantly higher. Printed neocartilage demonstrated excellent glycosaminoglycan (GAG) and collagen type II production, which was consistent with gene expression. Therefore, this platform is ideal for accurate cell distribution and arrangement for anatomic tissue engineering.

The methods described in this paper show how to convert a commercial inkjet printer into a bioprinter with simultaneous UV polymerization. The printer is capable of constructing 3D tissue structure with cells and biomaterials. The study demonstrated here constructed a 3D neocartilage.

الغضروف الإنسان الأنسجة التصنيع باستخدام ثلاثي الأبعاد تكنولوجيا الطباعة النافثة للحبر

Bioprinting, which is based on thermal inkjet printing, is one of the most attractive enabling technologies in the field of tissue engineering and ...

Double Emulsion Generation Using a Polydimethylsiloxane (PDMS) Co-axial Flow Focus Device

Double emulsions are useful in a number of biological and industrial applications in which it is important to have an aqueous carrier fluid. This paper presents a polydimethylsiloxane (PDMS) microfluidic device capable of generating water/oil/water double emulsions using a coaxial flow focusing geometry that can be fabricated entirely using soft lithography. Similar to emulsion devices using glass capillaries, double emulsions can be formed in channels with uniform wettability and with dimensions much smaller than the channel sizes. Three dimensional flow focusing geometry is achieved by casting a pair of PDMS slabs using two layer soft lithography, then mating the slabs together in a clamshell configuration. Complementary locking features molded into the PDMS slabs enable the accurate registration of features on each of the slab surfaces. Device testing demonstrates formation of double emulsions from 14 &#181;m to 50 &#181;m in diameter while using large channels that are robust against fouling and clogging.

Double Emulsion Generation Using a Polydimethylsiloxane PDMS Co-axial Flow Focus Device

Microfluidic double emulsions generation typically involves devices with patterned wettability or custom-fabricated glass components. Here we describe the fabrication and testing of an all polydimethylsiloxane (PDMS) double emulsion generator that does not require surface treatment or complicated fabrication processes, and is capable of producing double emulsions down to 14 &#181;m.

ضعف مستحلب الجيل باستخدام Polydimethylsiloxane (PDMS) المشارك المحوري تدفق التركيز الأجهزة

Double emulsions are useful in a number of biological and industrial applications in which it is important to have an aqueous carrier fluid. This paper ...

In Vivo Quantitative Assessment of Myocardial Structure, Function, Perfusion and Viability Using Cardiac Micro-computed Tomography

The use of Micro-Computed Tomography (MicroCT) for in vivo studies of small animals as models of human disease has risen tremendously due to the fact that MicroCT provides quantitative high-resolution three-dimensional (3D) anatomical data non-destructively and longitudinally. Most importantly, with the development of a novel preclinical iodinated contrast agent called eXIA160, functional and metabolic assessment of the heart became possible. However, prior to the advent of commercial MicroCT scanners equipped with X-ray flat-panel detector technology and easy-to-use cardio-respiratory gating, preclinical studies of cardiovascular disease (CVD) in small animals required a MicroCT technologist with advanced skills, and thus were impractical for widespread implementation. The goal of this work is to provide a practical guide to the use of the high-speed Quantum FX MicroCT system for comprehensive determination of myocardial global and regional function along with assessment of myocardial perfusion, metabolism and viability in healthy mice and in a cardiac ischemia mouse model induced by permanent occlusion of the left anterior descending coronary artery (LAD).

In Vivo Quantitative Assessment of Myocardial Structure, Function, Perfusion and Viability Using Cardiac Micro-computed Tomography

This method outlines the use of Quantum Micro-Computed Tomography (MicroCT) to assess cardiac morphology, function, perfusion, metabolism and viability with iodinated contrast agent in mice with experimentally-induced myocardial ischemia. The technique can be applied for non-destructive high-throughput longitudinal in vivo imaging of various animal models of human heart disease.

في فيفو التقييم الكمي للبنية عضلة القلب، وظيفة، الإرواء والجدوى عن طريق احتساب الصغرى القلب المقطعي

The use of Micro-Computed Tomography (MicroCT) for in vivo studies of small animals as models of human disease has risen tremendously due to the fact that ...

Multicolor Fluorescence Detection for Droplet Microfluidics Using Optical Fibers

Fluorescence assays are the most common readouts used in droplet microfluidics due to their bright signals and fast time response. Applications such as multiplex assays, enzyme evolution, and molecular biology enhanced cell sorting require the detection of two or more colors of fluorescence. Standard multicolor detection systems that couple free space lasers to epifluorescence microscopes are bulky, expensive, and difficult to maintain. In this paper, we describe a scheme to perform multicolor detection by exciting discrete regions of a microfluidic channel with lasers coupled to optical fibers. Emitted light is collected by an optical fiber coupled to a single photodetector. Because the excitation occurs at different spatial locations, the identity of emitted light can be encoded as a temporal shift, eliminating the need for more complicated light filtering schemes. The system has been used to detect droplet populations containing four unique combinations of dyes and to detect sub-nanomolar concentrations of fluorescein.

Multicolor fluorescence detection in droplet microfluidics typically involves bulky and complex epifluorescence microscope-based detection systems. Here we describe a compact and modular multicolor detection scheme that utilizes an array of optical fibers to temporally encode multicolor data collected by a single photodetector.

متعدد الألوان كشف الإسفار عن القطرة على microfluidics عن طريق الألياف البصرية

Fluorescence assays are the most common readouts used in droplet microfluidics due to their bright signals and fast time response. Applications such as ...

An Efficient and Reproducible Protocol for Distraction Osteogenesis in a Rat Model Leading to a Functional Regenerated Femur

This protocol describes the use of a newly developed external fixator for distraction osteogenesis in a rat femoral model. Distraction osteogenesis (DO) is a surgical technique leading to bone regeneration after an osteotomy. The osteotomized extremities are moved away from each other by gradual distraction to reach the desired elongation. This procedure is widely used in humans for lower and upper limb lengthening, treatment after a bone nonunion, or the regeneration of a bone defect following surgery for bone tumor excision, as well as in maxillofacial reconstruction. Only a few studies clearly demonstrate the efficiency of their protocol in obtaining a functional regenerated bone, i.e., bone that will support physiological weight-bearing without fracture after removal of the external fixator. Moreover, protocols for DO vary and reproducibility is limited by lack of information, making comparison between studies difficult. The aim of this study was to develop a reproducible protocol comprising an appropriate external fixator design for rat limb lengthening, with a detailed surgical technique that permits physiological weight-bearing by the animal after removal of the external fixator.

This study describes a reproducible and detailed protocol using a newly developed external fixator for distraction osteogenesis (DO) in a femoral rat model which permits physiological weight-bearing by the animal after removal of the external fixator.

وضع بروتوكول فعال وقابل لإعادة الإنتاج لالهاء تكون العظم في نموذج الفئران مما أدى إلى عظم الفخذ المجددة الوظيفية

This protocol describes the use of a newly developed external fixator for distraction osteogenesis in a rat femoral model. Distraction osteogenesis (DO) ...

Dual Raster-Scanning Photoacoustic Small-Animal Imager for Vascular Visualization

Imaging of vascular networks on small animals has played an important role in basic biomedical research. Photoacoustic imaging technology has great potential for application in the imageology of small animals. The wide-field photoacoustic imaging of small animals can provide images with high spatiotemporal resolution, deep penetration, and multiple contrasts. Also, the real-time photoacoustic imaging system is desirable to observe the hemodynamic activities of small-animal vasculature, which can be used to research the dynamic monitoring of small-animal physiological features. Here, a dual-raster-scanning photoacoustic imager is presented, featuring a switchable double-mode imaging function. The wide-field imaging is driven by a two-dimensional motorized translation stage, while the real-time imaging is realized with galvanometers. By setting different parameters and imaging modes, in vivo visualization of small-animal vascular network can be performed. The real-time imaging can be used to observe pulse change and blood flow change of drug-induced, etc. The wide-field imaging can be used to track the growth change of tumor vasculature. These are easy to be adopted in various areas of basic biomedicine research.

A dual raster-scanning photoacoustic imager was designed, which integrated wide-field imaging and real-time imaging.

المزدوج النقطي المسح الضوئي photoacoustic صورة الحيوانات الصغيرة للتصور الأوعية الدموية

Imaging of vascular networks on small animals has played an important role in basic biomedical research. Photoacoustic imaging technology has great ...