ويدعم TKMcG من قبل دراسية لمن جمعية أمراض الصدر الكندية. مساهمة المؤلفين اخذ كل جزء من الكتاب في مفهوم المخطوطة. وبالإضافة إلى ذلك، شرع TKMcG المشروع، جمعت النتائج التجريبية، ساهم في كتابة المخطوطة واستعراضها حرجة. AR جمعها وتحليل النتائج التجريبية، صياغة المخطوط وساهم في استعراضه حرجة. LF جمعت النتائج التجريبية وساهم في مراجعة نقدية للمخطوطة. TFS وJGM ساهم في مراجعة نقدية للمخطوطة.

تمت الموافقة على الإجراءات الموضحة أدناه من قبل لجنة جامعة ماكغيل المؤسسي رعاية الحيوان وفقا للمبادئ التوجيهية للمجلس الكندي للرعاية الحيوان (CCAC). 1. الخطوات التحضيرية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الحلول: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ميثاكولين: إعداد محلول المخزون بنسبة 50 ملغ / مل وجعل التخفيفات المتسلسلة (1:1) استنادا إلى تركيزات لفحصها 5. تسمح الحلول للوصول إلى درجة حرارة الغرفة قبل nebulizing 5. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وكلاء مخدر: تم الإبلاغ عن بنظم مختلفة في الأدب في سلالات مختلفة من الفئران (الجدول 1) ملاحظة: 1 حمية استخدمت في إطار هذا البروتوكول. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> المعدات: يتم تطبيق هذا البروتوكول إلى أي من الأجيال flexiVent اثنين يدعمها البرنامج flexiWare 7. يتم تجميع وظائف البرنامج بموجب ثلاث وحدات: تعريف الدراسات والتخطيط والتجريب Sessioن ومراجعة وإعداد التقارير. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بدوره على نظام (flexiVent FX فقط) و / أو بدء تشغيل البرنامج. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في الدورة الأولى التجريب أو في أي وقت قبل ذلك، فتح تعريف دراسة وحدة التخطيط إلى تحديد مسبق لهيكل الدراسة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> انقر على زر دراسة جديدة إنشاء واتبع المعالج لإنشاء دراسة، الخطوط العريضة للبروتوكول وتحديد المجموعات التجريبية والموضوعات المراد دراستها. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بدء جلسة التجريب من خلال فتح وحدة الدورة التجريب وبعد تسلسل بدء التشغيل للدراسة واختيار القالب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تعيين الموضوع إلى موقع القياس وتأكيد وزنه. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> المضي قدما في معايرة النظام عن طريق اتباع الخطوات الموضحة في البرنامج التشغيل. سيطلب منك عند نقطة واحدة لإرفاق قنية لاستخدامها (الخطوة 1.3.3) إلى Y-أنابيب للمعايرة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> خطوة حاسمة. Repeaر الخطوة 1.2.6 إذا كانت القيم المعايرة التي تم الحصول عليها هي خارج النطاق المقبول. (يرجى الرجوع إلى flexiVent FX أو flexiWare 7 دليل المستخدم للحصول على وحدة نطاقات مقبولة محددة من القيم المعايرة). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إلغاء المطالبات لبدء التهوية وتسجيل البيانات ما لم يكن على استعداد لبدء التجربة. ويمكن البدء في هذه في وقت لاحق. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> المواضيع: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخدير موضوع باستخدام جرعات مناسبة من وكلاء مخدر (الجدول 1). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحقق من أن هذا الموضوع قد وصلت إلى مستوى من التخدير الجراحي. هذا الموضوع يجب أن لا تظهر أي رد فعل لقرصة أخمص قدميها، ويجب أن يكون التنفس العادية وليس جاهد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إجراء القصبة الهوائية ويقني؛ يدخل القنية القصبة الهوائية. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع الحيوان على ظهرها وتوفير مصدر للحرارة (مثل درجة الحرارة التي تسيطر عليها بطانية التدفئة أو مصباح مع لمبة 60 واط يقع ما يقرب من 45 سم من الماوس لتجنب الإفراط في التدفئة). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ال نظيفةمنطقة الحلق ه مع الكحول وفضح القصبة الهوائية عن طريق إجراء شق الجلد وفصل بلطف الغدة تحت الفك العلوي وطبقة العضلات التي تغطي ذلك. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> رفع بلطف القصبة الهوائية باستخدام زوج من ملقط الصغرى وتمرير الخيط تحته. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطع ما بين حلقتين من غضروف الحنجرة أقرب إلى إجراء شق صغير في القصبة الهوائية دون باجتزاء ذلك. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدراج قنية معايرة سابقا في شق ودفع برفق داخل القصبة الهوائية طول ما يقرب من 5 حلقات ملاحظة: أجريت التجارب الحالية باستخدام 1.2 سم طويل معدنية قياس 18 قنية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> خطوة حاسمة. تأمين قنية في مكانها باستخدام الخيط. المرفق ينبغي أن تشكل ختم محكم حول قنية. </li></ol></li></ol></li></ol> 2. التهوية الميكانيكية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جلب هذا الحيوان على مقربة من التنفس الصناعي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بدء التهوية الميكانيكية عن طريق اختيار محددة سلفاأو لمحة التهوية مخصص في عامل ميناء التهوية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ربط الحيوان إلى التنفس الصناعي عن طريق Y-الأنابيب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> خطوة حاسمة. محاذاة الحيوان إلى التنفس الصناعي والتأكد من أن قنية القصبة الهوائية هو في نفس المستوى مثل جهاز التنفس الصناعي لتجنب احتمال انسداد قنية أو تحريف القصبة الهوائية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> خطوة حاسمة. تنفيذ اضطراب عميق التضخم عن طريق النقر المزدوج على اسم اضطراب للتحقق من الإدراج قنية والمرفقات. في حالة عدم وجود تسرب، يجب أن يكون النظام قادرا على اجراء الضغط من 30 CMH 2 O لمدة 3 ثانية دون الإفراط في حجم الإزاحة (الشكل 1). وينبغي أيضا أن يكون حجم تسجيلها وآثار ضغط على نحو سلس مع عدم وجود علامات على تعويض أو تشوه لأن هذه يمكن أن تشير إلى وجود انسداد قنية أو في غير موضعها. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إذا لزم الأمر، وربط محولات علامة حيوية لمعدل ضربات القلب ورصد درجة حرارة الجسم. ويمكن البدء في تسجيل البيانات eitheR يدويا أو تلقائيا عن طريق برنامج نصي. </li></ol> 3. وظيفة الرئة المقاييس قياسات أو الأوامر (على سبيل المثال تفعيل البخاخات، وعلامات الحدث) يمكن الآلي باستخدام البرامج النصية المعرفة مسبقا أو المخصصة لعملية تجريبية رقابة شديدة ومتكررة (الشكل 2). ست عائلات من الاضطرابات التي أدت إلى عدد من المعلمات يمكن استخدامها لوصف موضوع ميكانيكا الجهاز التنفسي في الأساس، وبعد التحدي معين (الجدول 2). <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> خطوة حاسمة. عندما تصبح جاهزة للبدء في اتخاذ القياسات، تشغيل التضخم العميق لتجنيد المناطق المغلقة الرئة وتوحيد الرئة التاريخ حجم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> خطوة حاسمة. التحقق من عدم وجود جهود الشهيق العفوي عن طريق تشغيل اختبار القياس (مثل المحاضر الحرفية أو المحاضر الحرفية-P-V). مراقبة آثار إشارة الضغط في عرض مجموعة البيانات المحددة. مع منحنيات PV متدرج،الهضاب الضغط يجب أن يتم تعريف بشكل جيد مع أي أسفل الانحرافات. ومن شأن التحول نحو الانخفاض في ضغط تشير إلى وجود جهد الشهيق من الحيوان (الشكل 3). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بدء البرنامج النصي المحدد من قبل النقر المزدوج على لقبها. النصوص المستخدمة في هذه الدراسة شملت عموما لقياس: <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> A سلسلة من قياسات خط الأساس في ثلاث نسخ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تفعيل البخاخات لتقييم استجابة مجرى الهواء لاستنشاق ميثاكولين ملاحظة: عند المطالبة من قبل النظام، وتحميل ما يقرب من 100 ميكرولتر من المياه المالحة أو من محلول ميثاكولين في البخاخات. وسوف تبدأ إرذاذ وتتوقف تلقائيا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> A سلسلة من قياسات متباعدة عن كثب (كل 10-15 ثانية) لمدة حوالي 3 دقائق بعد تفعيل البخاخات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> موجه لأداء تحديا آخر وتكرار سلسلة من القياسات ملاحظة: تجفيف داخل البخاخات جبل مع مسحة في بيمكن أن التحديات إلى صف تساعد على منع قطرات أو التكثيف من بناء ما يصل في خط الشهيق. </li></ul></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في نهاية التجربة، ووقف التهوية وفصل هذا الموضوع. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التبديل إلى الموضوع التالي في برنامج التشغيل وتأكد من وزنه. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> خطوة حاسمة. شطف وتجفيف البخاخات، محول، Y-الأنابيب، وقنية بين الموضوعات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كرر الخطوات من 1.2.6 إلى 3.6. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في نهاية اليوم، إغلاق جلسة تجريبية. تذكر لشطف وتجفيف البخاخات، محول، Y-الأنابيب، وقنية وتنظيف صمام الزفير نظام قبل مغادرته المختبر باتباع إرشادات الشركة المصنعة. </li></ol> 4. تحليل البيانات البرنامج تلقائيا بحساب ويعرض المعلمات المرتبطة اضطراب. كما يوفر معامل التحديد (COD) الذي يعكس نوبة من النموذج الرياضي للبيانات. كل مجموعة بيانات مع تأمهو المسمى COD fficient كما استبعدت من قبل البرنامج. استعراض الدورات التجريبية، وتتم إعادة تحليل البيانات وإنشاء سيناريوهات التصدير في وحدة ومراجعة التقارير من البرنامج. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> فتح وحدة مراجعة وإعداد التقارير وإنشاء السيناريو التصدير، مع الحرص على أن تشمل قواعد البيانات فقط وجود COD كافية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تصدير كمعلمات حاجة للضغط أو تدفق حجم منحنى، وإشارات مجموعة البيانات الخام أو معلومات تخضع لتطبيق جدول بيانات (انظر الجدول 3). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> متوسط ​​قياسات خط الأساس لكل معلمة ومؤامرة جميع القياسات بوصفها وظيفة من الزمن (انظر الشكل 4). ثم قد اخترت لحساب المساحة تحت منحنى، وتحليل الوضع العام للمنحنيات أو إجراء التحليل الإحصائي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> للتعبير عن النتائج استجابة مجرى الهواء كدالة للتركيز ميثاكولين، وتحديد لكل موضوع، والمعلمة حالة تجريبية إما محددةنقطة (على سبيل المثال الذروة) أو وقت محدد بعد كل تحد ميثاكولين. حساب المتوسطات مجموعة والتقرير أو نتائج مؤامرة لكل حالة تجريبية (الجدول 4، الشكل 5). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يمكنك أيضا التفكير في حساب تركيز إنتاج مضاعفة قيمة خط الأساس معلمة معينة (PC 200؛ الشكل 5C)، وتطبيق التطبيع (على سبيل المثال٪ خط الأساس) أو إجراء التحليل الإحصائي. </li></ol>

<ol>
	<li>Bates, J. H. T., Irvin, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measuring+lung+function+in+mice:+the+phenotyping+uncertainty+principle.">Measuring lung function in mice: the phenotyping uncertainty principle.</a> J. Appl. Physiol. 94, 1297-1306 (2003).</li><li>Bates, J. H. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Lung mechanics. An inverse modeling approach. , (2009).</li><li>Hantos, Z., Daroczy, B., Suki, B., Nagy, S., Fredberg, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Input+impedance+and+peripheral+inhomogeneity+in+dog+lungs.">Input impedance and peripheral inhomogeneity in dog lungs.</a> J. Appl. Physiol. 72, 168-178 (1992).</li><li>McGovern, T. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dimethylthiourea+protects+against+chlorine+induced+changes+in+airway+function+in+a+murine+model+of+irritant+induced+asthma.">Dimethylthiourea protects against chlorine induced changes in airway function in a murine model of irritant induced asthma.</a> Respir. Res. 11, 138 (2010).</li><li>Hayes, R. D., Beach, J. R., Rutherford, D. M., Sim, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stability+of+methacholine+chloride+solutions+under+different+storage+conditions+over+a+9+month+period.">Stability of methacholine chloride solutions under different storage conditions over a 9 month period.</a> Eur. Respir. J. 11, 946-948 (1998).</li><li>North, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Augmentation+of+arginase+1+expression+by+exposure+to+air+pollution+exacerbates+the+airways+hyperresponsiveness+in+murine+models+of+asthma.">Augmentation of arginase 1 expression by exposure to air pollution exacerbates the airways hyperresponsiveness in murine models of asthma.</a> Respir. Res. 12, (2011).</li><li>Siddiqui, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Site+of+allergic+airway+narrowing+and+the+influence+of+exogenous+surfactant+in+the+brown+norway+rat.">Site of allergic airway narrowing and the influence of exogenous surfactant in the brown norway rat.</a> PloS ONE. 7, e29381 (2012).</li><li>Cohen, J. C., Lundblad, L. K. A., Bates, J. H. T., Levitzky, M., Larson, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+"Goldilocks+Effect"+in+cystic+fibrosis:+identification+of+a+lung+phenotype+in+the+cftr+knockout+and+heterozygous+mouse.">The "Goldilocks Effect" in cystic fibrosis: identification of a lung phenotype in the cftr knockout and heterozygous mouse.</a> BMC Genetics. 5, 21 (2004).</li><li>Shalaby, K. H., Gold, L. G., Schuessler, T. F., Martin, J. G., Robichaud, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combined+forced+oscillation+and+forced+expiration+measurements+in+mice+for+the+assessment+of+airway+hyperresponsiveness.">Combined forced oscillation and forced expiration measurements in mice for the assessment of airway hyperresponsiveness.</a> Respir Res. 11, 82 (2010).</li><li>Thiesse, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lung+structure+phenotype+variation+in+inbred+mouse+strains+revealed+through+in+vivo+micro-CT+imaging.">Lung structure phenotype variation in inbred mouse strains revealed through in vivo micro-CT imaging.</a> J. Appl. Physiol. 109, 1960-1968 (2010).</li><li>Amatullah, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+cardiopulmonary+effects+of+size-fractionated+airborne+particulate+matter.">Comparative cardiopulmonary effects of size-fractionated airborne particulate matter.</a> Inhalation Toxicology. 24, 161-171 (2012).</li><li>Salazar, E., Knowles, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+analysis+of+pressure-volume+characteristics+of+the+lungs.">An analysis of pressure-volume characteristics of the lungs.</a> J. Appl. Physiol. 19, 97-104 (1963).</li><li>Balakrishna, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Environmentally+persistent+free+radicals+induce+airway+hyperresponsiveness+in+neonatal+rat+lungs.">Environmentally persistent free radicals induce airway hyperresponsiveness in neonatal rat lungs.</a> Particle Fibre Tox. 8, 11 (2011).</li><li>Fahmy, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+and+in+vivo+assessment+of+pulmonary+risk+associated+with+exposure+to+combustion+generated+fine+particles.">In vitro and in vivo assessment of pulmonary risk associated with exposure to combustion generated fine particles.</a> Environ. Toxicol. Pharmacol. 29, 173 (2010).</li><li>Duguet, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bronchial+responsiveness+among+inbred+mouse+strains.+Role+of+airway+smooth-muscle+shortening+velocity.">Bronchial responsiveness among inbred mouse strains. Role of airway smooth-muscle shortening velocity.</a> Am. J. Respir. Crit. Care Med. 161, 839-848 (2000).</li><li>Bozanich, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+changes+in+airway+and+tissue+mechanics+in+mice.">Developmental changes in airway and tissue mechanics in mice.</a> J. Appl. Physiol. 99, 108-113 (2005).</li><li>Schwartz, B. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+central+airway+shunting+on+the+mechanical+impedance+of+the+mouse+lung.">Effects of central airway shunting on the mechanical impedance of the mouse lung.</a> Ann. Biomed. Eng. 39, 497-507 (2011).</li><li>De Vleeschauwer, S. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repeated+invasive+lung+function+measurements+in+intubated+mice:+an+approach+for+longitudinal+lung+research.">Repeated invasive lung function measurements in intubated mice: an approach for longitudinal lung research.</a> Lab Anim. 45, 81-89 (2011).</li><li>Takubo, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=&#945;1-Antitrypsin+determines+the+pattern+of+emphysema+and+function+in+tobacco+smoke-exposed+mice.">&#945;1-Antitrypsin determines the pattern of emphysema and function in tobacco smoke-exposed mice.</a> Am. J. Respir. Crit. Care Med. 166, 1596-1603 (2002).</li><li>Salerno, F. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+PEEP+on+induced+constriction+is+enhanced+in+decorin-deficient+mice.">Effect of PEEP on induced constriction is enhanced in decorin-deficient mice.</a> Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. 293, L1111-L1117 (2007).</li><li>Therien, A. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adenovirus+IL-13-induced+airway+disease+in+mice.">Adenovirus IL-13-induced airway disease in mice.</a> Am. J. Respir. Cell. Mol. Biol. 39, 26-35 (2008).</li><li>Bates, J. H. T., Cojocaru, A., Lundblad, L. K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bronchodilatory+effect+of+deep+inspiration+on+the+dynamics+of+bronchoconstriction+in+mice.">Bronchodilatory effect of deep inspiration on the dynamics of bronchoconstriction in mice.</a> J. Appl. Physiol. 103, 1696-1705 (2007).</li><li>Wagers, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intrinsic+and+antigen-induced+airway+hyperresponsiveness+are+the+result+of+diverse+physiological+mechanisms.">Intrinsic and antigen-induced airway hyperresponsiveness are the result of diverse physiological mechanisms.</a> J. Appl. Physiol. 102, 221-230 (2007).</li><li>Collins, R. A., Sly, P. D., Turner, D. J., Herbert, C., Kumar, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Site+of+inflammation+influences+site+of+hyperresponsiveness+in+experimental+asthma.">Site of inflammation influences site of hyperresponsiveness in experimental asthma.</a> Respir. Physiol. Neurobiol. 139, 51-61 (2003).</li><li>Bishai, J. M., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+severe+calorie+restriction+on+the+lung+in+two+strains+of+mice.">Effect of severe calorie restriction on the lung in two strains of mice.</a> Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. 295, L356-L362 (2008).</li><li>Song, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postexposure+administration+of+&#946;2-agonist+decreases+chlorine-induced+airway+hyperreactivity+in+mice.">Postexposure administration of &#946;2-agonist decreases chlorine-induced airway hyperreactivity in mice.</a> Am. J. Respir. Crit. Care Med. 45, 88-94 (2011).</li><li>Hirota, J. A., Ellis, R., Inman, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regional+differences+in+the+pattern+of+airway+remodeling+following+chronic+allergen+exposure+in+mice.">Regional differences in the pattern of airway remodeling following chronic allergen exposure in mice.</a> Respir. Res. 7, 120 (2006).</li><li>Llop-Guevara, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo-to-in+silico+iterations+to+investigate+aeroallergen-host+interactions.">In vivo-to-in silico iterations to investigate aeroallergen-host interactions.</a> PloS ONE. 3, e2426 (2008).</li></ol>

AR، LF، ويعمل TFS بواسطة SCIREQ أجهزة تنفسية العلمية وشركة TFS كما تملك الأوراق المالية. وترعى حرية الوصول إلى هذه المقالة عن طريق SCIREQ أجهزة تنفسية العلمية، وشركة

الدراسة استمرار ضعف مجرى الهواء من حيث صلته الربو وأمراض الرئة الأخرى لا تزال قصوى لفهم الآليات الكامنة وراء المرض وتطوير خيارات العلاج. وقد تم استخدام الفئران لنموذج المرض الهوائية أساسي في الحصول على فهم آليات المرض في هذه. عند النظر في تقييم ضعف مجرى الهواء في موضوع صغيرة مثل الماوس، وجود أدوات موثوقة ودقيقة يمكن من خلالها قياس وظائف الرئة أمر بالغ الأهمية. وعلاوة على ذلك، وجود أدوات قادرة على تقديم رؤى على موقع مجرى الهواء أو ضعف التأثير العلاجي لا تقدر بثمن. يجمع بين تقنية FOT كل هذه الصفات ويوفر نهجا قوية، تكاملية ومتعدية لتقييم التغيرات الفسيولوجية. لكي تنجح مع هذا النوع من القياس في الفئران، وينبغي إيلاء اهتمام خاص لبضع خطوات، وهي معايرة النظام، ومقاومة CA القصبة الهوائيةnnula، نوع من البخاخات (وكذلك إعدادات التشغيل) لتحديد المواقع من الحيوان وتوحيد الرئة التاريخ حجم. وبالإضافة إلى ذلك، لا بد من أجل الحصول على مجموعات البيانات صالحة أن الجهاز التنفسي هذا الموضوع لا يزال السلبي خلال القياسات. ويمكن تحقيق ذلك من خلال إدارة وكيل تشل العضلات، ويعمل في الطائرة عميقة من التخدير أو عن طريق اللهاث هذا الموضوع للحث على توقف التنفس أثناء (انظر الجدول 1). يمكن للمحققين تبدأ من خلال اتقان النظام والبرامج التشغيلية، إذا رغبت في ذلك، مع الأحمال اختبار، في حين اكتساب المهارات اللازمة للقياسات في الفئران. وسيكون من المنطقي ثم لتوليد نتائج قابلة للتكرار في الحيوانات ساذجة قبل أن ينتقل إلى نماذج المرض أو الفئران المعالجة. إذ أن نسبة هامة من نماذج مرض في الجهاز التنفسي تشمل البحوث تعريض الحيوانات لعوامل مثل المواد المثيرة للحساسية، والسموم والملوثات، ودخان السجائر أو الغازات، وتقلب في النتائج المتحصل عليها مع measuremenيمكن بالتالي ر تقنية الموضحة في هذه المقالة أن يتأثر الإجراء التعرض المستخدمة. توحيد العمليات التجريبية الرئيسية (مثل التعرض باستخدام الكمبيوتر التي تسيطر عليها ونظم قياس 6، 13، 14) يمكن أن يكون لها تأثيرا كبيرا في الحد من التباين. الأمثلة المقدمة في هذه المقالة تمثل مجموعة مختارة من نتائج نموذجية من السذاجة والكلور المعرضة للفئران التجارب مع تسليط الضوء على نقاط القوة وكذلك القيود المفروضة على تقنية. كما يمكن أن يرى على سبيل المثال في الشكل (6)، والتقنية هي قادرة على توليد استنساخه قياسات وظائف الرئة. في حين تم الإبلاغ عن قيم المقاومة خط الأساس مماثلة بين سلالات الفئران، ولكن لوحظ اختلاف في مرانية 15. تغييرات كبيرة هي أيضا من المتوقع بين الرضع والفئران البالغة 16. أما بالنسبة للأخرى في الجسم الحي تقييم الفسيولوجية، ونتائج عالية الدقة، مثل البيئة نظام التشغيل التي تم إنشاؤها بواسطة FOT، وتأتي مع تنازل عن الحالة الطبيعية من الموضوعات. هذا المبدأ، الذي يشار إليه على أنه مبدأ عدم اليقين phenotyping 1، ينطبق على هذا البروتوكول، بمعنى أن القياسات تحتاج إلى أن يتم في تخدير، tracheotomised (أو مدخل أنبوب شفويا) والتهوية ميكانيكيا المواضيع. يتم ملاحظتها الحد آخر من تقنية في الشكل 5D-5F حيث لم تكن البيانات متاحة على أعلى تركيزات للمجموعة الكلور المعرضة لأن نوبة من المرحلة ثابت نموذج للبيانات ضعيفة فوق مستويات معتدلة من ضيق الشعب الهوائية. ومع ذلك، يمكن تقييم الحيوانات bronchoconstricted بشدة من خلال تحليل ZRS مباشرة 15، أو باستخدام طرف ثالث البرمجيات في مرحلة ما بعد التحليل لتناسب النماذج الرياضية أكثر تعقيدا، على سبيل المثال مع مراعاة عدم تجانس وظيفة الميكانيكية 17. ويمكن أيضا ملاحظة مجموعات البيانات استبعادها اذا الخطوط الجوية الحيوان ليست كافية فassive أو إذا كانت المقاومة للقنية عالية جدا. وكقاعدة عامة من الإبهام، وينبغي مقاومة قنية لا تتجاوز مقاومة الحيوان في الأساس. وسوف تعمل مع قنية من القطر الداخلي أكبر و / أو أقصر طول يساعد على التقليل من مقاومة قنية. وأخيرا، قد ينظر إلى المظاهرة الحالية للقياسات FOT في الفئران كمنهجية تستغرق وقتا طويلا، وبالتالي أقل كفاءة أو أقل ينطبق على دراسات طولية مقارنة مع تقنيات أقل الغازية. ومع ذلك ترتبط هذه الأخيرة مع قدر كبير من عدم اليقين فيما يتعلق أساس نتائجها وينظر إليها من قبل العديد على أنها معيبة 1. القياسات الغازية المتكررة ممكنة في الحيوانات مدخل أنبوب شفويا، على الرغم من أن أكثر تحديا من الناحية التقنية 17. من الأمثلة المقدمة، أظهرت النتائج تكافؤ الجيلين من النظام flexiVent في إنتاج قياسات الميكانيكا الجهاز التنفسي، وكذلك مجرى الهواء hyperreactivity وفرط الحساسية للميثاكولين استنشاق الكلور بعد التعرض في الفئران. عندما تستخدم لوصف أو فهم التغيرات الفسيولوجية أو نماذج المرض، فإن الجانب قياس التفصيلية المتصلة تقنية يمكن أن تساهم في تمديد الوضع الحالي للمعرفة.

أصبح توصيف كاف من الخواص الميكانيكية للالرئتين في الحيوانات الصغيرة الأساسية منذ المزدهرة في نماذج الفئران في علم الجهاز التنفسي. عندما أجريت باستخدام تقنية التذبذب القسري (FOT)، وهي تقنية تستخدم أيضا في البشر، هذه القياسات توفير نهج قوي، تكاملية ومتعدية لدراسة التغيرات الفسيولوجية ذات مغزى. وعادة ما يتم الحصول على قياسات FOT من خلال تحليل الضغط وحجم الإشارات المكتسبة في رد فعل على معرفة مسبقا، والسعة الصغيرة، متذبذبة تدفق الهواء الموجي (ويشار إلى اضطراب أو إشارة المدخلات أيضا) المطبقة في هذا الموضوع في مجرى الهواء الافتتاح 1. في أبسط أشكالها، فإن اضطراب FOT يكون الموجي الجيبية واحد على تردد محددة جيدا. تتكون اضطرابات أكثر تعقيدا عادة من تراكب مجموعة مختارة من معين (رئيس متبادل) تردد الطول الموجي تغطي طيفا واسعا. التحلل من متعدد الترددالمدخلات والمخرجات الإشارات إلى ناخبيهم باستخدام تحويل فورييه يسمح حساب الجهاز التنفسي مقاومة المدخلات (ZRS)، أي وظيفة النقل بين المدخلات والمخرجات الإشارات، في كل تردد المدرجة في اضطراب 2. ولذلك، FOT يسمح تقييم في وقت واحد لميكانيكا الجهاز التنفسي أكثر من مجموعة من الترددات في 2 مناورة واحدة. النماذج الرياضية المتقدمة المناسب (مثل المرحلة نموذج ثابت 3) لبيانات مقاومة ثم تسمح لتقسيم الاستجابة إلى مجرى الهواء (المركزية والطرفية) ومتني الرئة المعلمات تعتمد الأنسجة 1 و 3. لأن العديد من العوامل التي تؤثر على الاستجابة الفسيولوجية (على سبيل المثال تردد في التنفس، وحجم المد والجزر، وحجم الرئة، بالممرات الهوائية العليا، الجهود التنفس العفوي، توقيت القياسات) يتم التحكم وموحدة من قبل نظام القياس والإجراءات التجريبية، 1 والتقنية هي قبعةقادرة على توليد قياسات دقيقة وقابلة للتكرار شريطة أن يتم تنفيذ ذلك بشكل صحيح. الهدف من هذه المقالة هو لتوفير تفصيلا، وصف التسلسل الزمني للإجراءات اللازمة لتنفيذ هذه القياسات في الفئران. يتكون البروتوكول من أربعة أجزاء هي: الخطوات التحضيرية (الكواشف والمعدات والمواد الدراسية)، والتهوية الميكانيكية، وقياسات وظائف الرئة، وتحليل البيانات. ولدت أمثلة من نتائج ممثل ميكانيكا الجهاز التنفسي باستخدام جهاز التنفس الصناعي مكبس الكمبيوتر التي تسيطر عليها (flexiVent، SCIREQ المؤتمر الوطني العراقي، مونتريال، QC، كندا) وتقدم. تم الحصول على هذه الفئران من السذاجة وكذلك من نموذج يحركها من الإجهاد التأكسدي الضرر الهوائية يتميز التهاب الشعب الهوائية، تلف الخلايا الظهارية وزيادة الاستجابة لمجرى الهواء المستنشق ميثاكولين رذاذ 4. في حين غالبا ما يستخدم هذا البروتوكول لتقييم استجابة مجرى الهواء المستنشق إلى ميثاكولين، بل يمتد إلى نتائج والمتنوع أخرىق الأمراض بما فيها الربو ومرض الانسداد الرئوي المزمن (COPD)، وانتفاخ الرئة، تليف الرئة، إصابة الرئة فضلا عن نماذج الماوس المعدلة وراثيا من الأمراض مماثلة لمرض الإنسان. نتائج البحوث باستخدام هذه الأداة يمكن أن تسهم في توصيف وفهم أفضل للتغيرات الفسيولوجية أو نماذج المرض، وكذلك إلى التوسع في مجالات بحثية جديدة.

<table border="1">
 <tbody>
 <tr>
 <td>Name of Reagent/Material</td>
 <td>Company</td>
 <td>Catalogue Number</td>
 <td>Comments</td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>REAGENTS</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Acetyl-&beta;-methylcholine chloride </td>
 <td>Sigma-Aldrich</td>
 <td>A-2251</td>
 <td>Methacholine</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Micro-Adson forceps, serrated 12 cm</td>
 <td>Fine Science Tools</td>
 <td>11018-12</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Moria MC31 forceps, serrated-curved</td>
 <td>Fine Science Tools</td>
 <td>11370-31</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Iris scissors-tough cut, straight 11.5 cm</td>
 <td>Fine Science Tools</td>
 <td>14058-11</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Spring scissors-2.5 mm blades, straight</td>
 <td>Fine Science Tools</td>
 <td>15000-08</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Non-sterile blunt needle (18g x &frac12;")</td>
 <td>Brico Medical Supplies Inc.</td>
 <td>BN1805</td>
 <td>Endotracheal cannula</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Non-sterile 5-0 silk suture</td>
 <td>Seraflex</td>
 <td>IDI58000</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Phosphate buffered solution</td>
 <td>Gibco</td>
 <td>14190-144</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>15 ml conical tubes</td>
 <td>Starstedt</td>
 <td>SS-4001</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>1 ml TB syringes</td>
 <td>Becton Dickinson</td>
 <td>309626</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>200 &mu;l filter tips</td>
 <td>Biosphere</td>
 <td>70.760.211</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>EQUIPMENT</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>flexiVent FX</td>
 <td>SCIREQ Inc. </td>
 <td>sales@scireq.com</td>
 <td><a href="http://www.scireq.com/" target="_blank">www.scireq.com</a></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Aerogen Aeroneb nebulizer</td>
 <td>SCIREQ Inc.</td>
 <td>sales@scireq.com</td>
 <td><a href="http://www.scireq.com/" target="_blank">www.scireq.com</a></td>
 </tr>
 </tbody>
 </table>

evaluation of respiratory system mechanics in mice using the forced oscillation technique

أسلوب التذبذب القسري (FOT) هي قوية وأداة تكاملية ومتعدية السماح بتقييم التجريبية من وظيفة الرئة في الفئران في مفصل، بطريقة شاملة ودقيقة وقابلة للتكرار. أنها توفر قياسات الميكانيكا الجهاز التنفسي من خلال تحليل الضغط وحجم الإشارات المكتسبة في رد فعل على معرفة مسبقا، والسعة الصغيرة، متذبذبة تدفق الهواء الطول الموجي، والتي يتم تطبيقها عادة في هذا الموضوع في مجرى الهواء الافتتاح. تفاصيل البروتوكول الخطوات المطلوبة لتنفيذ القياسات على نحو كاف التذبذب القسري في الفئران باستخدام جهاز التنفس الصناعي مكبس الكمبيوتر التي تسيطر عليها (flexiVent؛ SCIREQ المؤتمر الوطني العراقي، مونتريال، QC، كندا). وينقسم إلى أربعة أجزاء الوصف: الخطوات التحضيرية، والتهوية الميكانيكية، وقياسات وظائف الرئة، وتحليل البيانات. وهو يتضمن أيضا تفاصيل عن كيفية تقييم استجابة مجرى الهواء المستنشق إلى ميثاكولين في تخدير الفئران، تطبيق شيوعا لهذا التقنيهه الذي يمتد أيضا إلى النتائج الأخرى ومختلف الأمراض الرئة. يتم عرض القياسات التي تم الحصول عليها في الفئران السذاجة وكذلك من نموذج يحركها من الإجهاد التأكسدي الضرر مجرى الهواء لتوضيح كيفية هذه الأداة يمكن أن تسهم في توصيف وفهم التغيرات الفسيولوجية درس أو نماذج المرض بشكل أفضل وكذلك للتطبيقات في مجالات بحثية جديدة.

الجهاز التنفسي الميكانيكا القياسات. الجدول 4 يبين نتائج نموذجية من السذاجة A / J الفئران التي تم الحصول عليها في الأساس، والشعب الهوائية ميثاكولين التالية التي يسببها (12.5 ملغ / مل) باستخدام أي من الأجيال flexiVent اثنين يدعمها البرنامج flexiWare 7. تم تقييم الميكانيكا في الجهاز التنفسي، أي في ظل ظروف الصدر مغلقة، بالتناوب الاضطرابات من وتيرة التذبذب أسر واحد واسع النطاق أجبرت بطريقة متباعدة عن كثب (لقطة-150، سريعة رئيس-3 على التوالي). منذ التهوية بشكل مؤقت خلال القياسات، وسريعة رئيس-3، التي تغطي مجموعة وتردد مماثلة لرئيس-8 ولكن لديه مدة أقصر (3 ضد 8 ثانية)، وقد تم اختيار من أجل تقصير فترة انقطاع التنفس، وتقليل تأثير الاضطراب على غازات الدم وتوفير أفضل قرار للاستجابة. وحسبت المعلمات المرتبطة بكل اضطراب ل ticaLLY بواسطة برنامج التشغيل. توضح النتائج أن الجيلين من النظام flexiVent أنتجت القياسات يعادل ميكانيكا الجهاز التنفسي. موقع من استجابة الرئة. تميز موقع من استجابة الرئة يسمح للمحقق لمواصلة تحديد المناطق المتضررة وكذلك لتحديد النقاط المحتملة من التدخل الدوائي 6. على سبيل المثال، تظهر السذاجة A / J الفئران بزيادة قدرها مقاومة خط الأساس عندما يتم زيادة الضغط زفيري نهاية أساسها يتم إجراء قياسات 3-9 CMH 2 O (الشكل 6A، لقطة-150). في المثال الحالي، شريطة أن يكون استخدام القياسات FOT النطاق العريض (سريعة رئيس-3) التفاصيل لتوضيح الأساس للتغيير في المقاومة: نتج عن تغير في نهاية الزفير الضغط في الانخفاض في مقاومة مجرى الهواء (R N) بما يتفق مع آثار bronchodilating من حجم الرئة أعلى والصحافة التضخم أكبرلدى عودتهم (الشكل 6D) وزيادة في الأنسجة التخميد (G؛ الشكل 6E)، معلمة ترتبط ارتباطا وثيقا مقاومة الأنسجة التي تعكس زوجة مطاطية الأنسجة وربما المقاومة في الشعب الهوائية الصغيرة 7. ومن المعروف أن هذه الأخيرة إلى زيادة مع زيادة حجم الرئة. فرط الاستجابة مجرى الهواء. بعد التعرض للغاز الكلور، والاستجابة لمجرى الهواء المستنشق ميثاكولين الزيادات مقارنة مع التعرض الجوي في الفئران BALB / ج نتيجة للضرر مجرى الهواء 4 (الشكل 2). ومن المعروف الكلور للحث على الاكسدة، مما يؤدي إلى تدمير خلايا هيكلية في الشعب الهوائية، وبخاصة الخلايا الظهارية، وحفزه تجنيد خلايا التهابية. كما هو ممثل في الشكل (5)، ويمكن رؤية التغييرات في جميع المعلمات واصفا ميكانيكا الجهاز التنفسي استجابة لتحديات متزايدة ميثاكولين. بالمقارنة مع الفئران المعرضة للهواء، الفئران المعرضة إلى chloriعرض الغاز شمال شرق الردود القصوى أكبر في جميع المعلمات FOT (الشكل 5A، 5B، 5D-5F)، وكذلك التحول باتجاه اليسار ذات دلالة إحصائية من منحنى تركيز الاستجابة أمثلته تخفيض تركيز ميثاكولين المطلوبة ليتسبب في مضاعفة في المقاومة ومرانية (PC 200؛ الشكل 5C). توضح تلك النتائج، على التوالي، فرط الاستجابة الهوائية وفرط الحساسية للميثاكولين بعد التعرض لاستنشاق غاز الكلور. القياسات الأخرى. بالإضافة إلى FOT، ويمكن أيضا أن تستخدم نظام flexiVent لجمع أنواع أخرى من 8-10 وظيفة الرئة أو القلب والأوعية الدموية 11 القياسات. يعرض الشكل 7 متدرج، يحركها ضغط منحنى الضغط الحجم ممثل في السذاجة A / J الفئران في ظل ظروف خط الأساس . وتناسب الجزء العلوي من أطرافهم الانكماش من منحنى إلى المعادلة سالازار-نولز 12 </<html> سوب&gt; وتحسب المعلمات تلقائيا من قبل البرنامج. <img src="/files/ftp_upload/50172/50172table1.jpg" alt="الجدول 1" fo:src="/files/ftp_upload/50172/50172table1highres.jpg" fo:content-width="6in" /> الجدول 1. أمثلة من نظم مخدر يستخدم في الفئران. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50172/50172table1large.jpg" target="_blank">انقر هنا لعرض جدول أكبر</a> . <img src="/files/ftp_upload/50172/50172table2.jpg" alt="الجدول 2" fo:src="/files/ftp_upload/50172/50172table2highres.jpg" fo:content-width="5in" /> الجدول 2. الاضطرابات المستخدمة لقياس وظائف الرئة في الفئران. * ملحق اللازمة لهذا النظام. يحتاج هذا الموضوع أيضا أن يكون في غرفة مغلقة مخطاط التحجم خلال القياسات.ضامر &quot;&gt; اضغط هنا لمشاهدة الجدول أكبر. <img src="/files/ftp_upload/50172/50172table3.jpg" alt="الجدول 3" fo:src="/files/ftp_upload/50172/50172table3highres.jpg" fo:content-width="6in" /> الجدول 3. مثال المعلمات تصديرها من وتيرة التذبذب تضطر الأسر اضطراب واحد واسع النطاق. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50172/50172table3large.jpg" target="_blank">انقر هنا لمشاهدة الجدول أكبر</a> . <img src="/files/ftp_upload/50172/50172table4.jpg" alt="الجدول 4" fo:src="/files/ftp_upload/50172/50172table4highres.jpg" fo:content-width="6in" /> الجدول 4. مقارنة النظام. مقارنة بين الرئة ميكانيكا المعلمات التي تم جمعها باستخدام اثنين من الأجيال من النظام flexiVent تشغلها البرامج flexiWare 7. وقد تم توليد النتائج في السذاجة A / J الفئران (ن = 5 /<html> المجموعة) في الأساس والشعب الهوائية ميثاكولين التالية التي يسببها (صحة الأم والطفل 12.5 ملغ / مل). وتمت مقارنة * المجموعات باستخدام ANOVA اتجاهين للقياسات المتكررة وسجل 10 من الاستجابات الفردية للتجانس الفروق (GraphPad بريزم، الإصدار 5.03؛ GraphPad البرامج، سان دييغو، الولايات المتحدة الأمريكية). <img src="/files/ftp_upload/50172/50172fig1.jpg" alt="الشكل 1" fo:content-width="4.5in" fo:src="/files/ftp_upload/50172/50172fig1highres.jpg"/> الشكل 1. قطة لتضخم الرئة العميقة. تعرض اللوحة العلوية حجم شردهم مكبس من التنفس الصناعي (التتبع الحمراء) وحجم تسليمها الى موضوع (تتبع الرمادي). تعرض لوحة انخفاض ضغط الأسطوانة المتزايد لضغط مجموعة من 30 شركة بيت إدارة المال 2 O على مدى فترة من 3 ثوان، وثبات لنفس الفترة الزمنية. 172/50172fig2.jpg &quot;بديل =&quot; الشكل 2 &quot;/&gt; الشكل 2. مثال نموذجي النصي المستخدمة لتقييم ميكانيكا الجهاز التنفسي في الأساس. <img src="/files/ftp_upload/50172/50172fig3.jpg" alt="الشكل (3)" /> الشكل (3). جهود الشهيق عفوية أثناء تنفيذ متدرج على منحنى الضغط الحجم. <img src="/files/ftp_upload/50172/50172fig4.jpg" alt="الشكل 4" fo:content-width="2.6in" fo:src="/files/ftp_upload/50172/50172fig4highres.jpg"/> الشكل 4. الوقت طبعا التالية استجابة تحديات متزايدة ميثاكولين المستنشقة. يتم التعبير عن النتائج كما يعني (± الانحراف المعياري) من مجموعة من 5 السذاجة رد الفعل الزائد بشكل عفوي A / J الفئران. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50172/50172fig4large.jpg" target="_blank">انقر هنا لعرض أكبر شخصية</a> . &lt;ف الطبقة = &quot;jove_content&quot; FO: المحافظة على together.within الصفحات = &quot;دائما&quot;&gt; <img src="/files/ftp_upload/50172/50172fig5.jpg" alt="الرقم 5" fo:content-width="6in" fo:src="/files/ftp_upload/50172/50172fig5highres.jpg"/> الشكل 5. التغييرات في الميكانيكا الجهاز التنفسي بعد تزايد التحديات ميثاكولين في الكلور والهواء تتعرض الفئران BALB / ج. تم تحديد قيمة الذروة لكل معلمة في كل موضوع وحالة تجريبية. ثم تم حساب المتوسطات مجموعة (يعني ± الانحراف المعياري، ن = 4-6). تم تقييم الاختلافات بين الجماعات بواسطة تحليل التباين باستخدام سجل 10 من الاستجابات الفردية للتجانس الفروق. تم الحصول على تركيز ميثاكولين إنتاج مضاعفة خط الأساس (PC 200) من المناسب متعدد الحدود من الدرجة الثانية إلى الفردية منحنيات الاستجابة للجرعة والاستيفاء من منحنى المجهزة. نقاط البيانات مفقودة في D، E و F في الفئران المعرضة الكلورفي تركيزات أعلى ميثاكولين اثنين بسبب معاملات عالية بالقدر الكافي من تقرير يعكس تناسب الفقراء من النموذج الرياضي للبيانات. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50172/50172fig5large.jpg" target="_blank">انقر هنا لعرض أكبر شخصية</a> . <img src="/files/ftp_upload/50172/50172fig6.jpg" alt="الشكل (6)" fo:content-width="6in" fo:src="/files/ftp_upload/50172/50172fig6highres.jpg"/> الشكل (6). تقسيم لاستجابة الجهاز التنفسي في مجرى الهواء والميكانيكا أنسجة الرئة. تتبع التجريبية من السذاجة A / J الفئران تبين تردد واحد (2.5 هرتز) والنطاق العريض (1-20.5Hz) اضطر القياسات التذبذب ميكانيكا الجهاز التنفسي في ثلاث نسخ في اثنين من مختلف الضغوط نهاية الزفير (3 و 9 CMH 2 O). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50172/50172fig6large.jpg" target="_blank">انقر هنا لعرض أكبر شخصية</a> </A&gt;. <img src="/files/ftp_upload/50172/50172fig7.jpg" alt="الرقم 7" fo:content-width="4in" fo:src="/files/ftp_upload/50172/50172fig7highres.jpg"/> الرقم 7. وقد تم توليد منحنى الضغط الحجم في السذاجة A / J الفئران في ظل ظروف خط الأساس. منحنيات الضغط الحجم باستخدام اضطراب يحركها الضغط المتدرج (ص ف-P) للتأكد من أن كل الرئتين الماوس تم نفخه إلى نفس الضغط، بصرف النظر عن حالتها. تم سالازار-نولز أيضا بلغ متوسط ​​معلمات المعادلة المستخرجة من فرد منحنيات الضغط حجم وذكرت في شكل جدول. يتم التعبير عن النتائج على النحو الانحراف المتوسط ​​± القياسية (ن = 6).

Watch this Scientific Journal Video about Evaluation of Respiratory System Mechanics in Mice using the Forced Oscillation Technique at JoVE.com

Evaluation of Respiratory System Mechanics in Mice using the Forced Oscillation Technique

يوفر هذا البروتوكول وصفا خطوة بخطوة مفصل للإجراءات المطلوبة لتنفيذ القياسات الميكانيكا الجهاز التنفسي وكذلك تقييم استجابة مجرى الهواء المستنشق إلى ميثاكولين في الفئران باستخدام تقنية التذبذب القسري (flexiVent؛ SCIREQ المؤتمر الوطني العراقي، مونتريال، QC ، كندا).

تقييم ميكانيكا الجهاز التنفسي في الفئران باستخدام تقنية التذبذب القسري

The  forced oscillation technique (FOT) is a powerful, integrative and translational  tool permitting the experimental assessment of lung function in mice ...

evaluation-respiratory-system-mechanics-mice-using-forced-oscillation

Research

JoVE Journal

Biology

56.1K Views.  McGill University. يوفر هذا البروتوكول وصفا خطوة بخطوة مفصل للإجراءات المطلوبة لتنفيذ القياسات الميكانيكا الجهاز التنفسي وكذلك تقييم استجابة مجرى الهواء المستنشق إلى ميثاكولين في الفئران باستخدام تقنية التذبذب القسري (flexiVent؛ SCIREQ المؤتمر الوطني العراقي، مونتريال، QC ، كندا).

Video: Evaluation of Respiratory System Mechanics in Mice using the Forced Oscillation Technique

Evaluation of the Spatial Distribution of &gamma;H2AX following Ionizing Radiation

An early molecular response to DNA double-strand breaks (DSBs) is phosphorylation of the Ser-139 residue within the terminal SQEY motif of the histone H2AX1,2. This phosphorylation of H2AX is mediated by the phosphatidyl-inosito 3-kinase (PI3K) family of proteins, ataxia telangiectasia mutated (ATM), DNA-protein kinase catalytic subunit and ATM and RAD3-related (ATR)3. The phosphorylated form of H2AX, referred to as &gamma;H2AX, spreads to adjacent regions of chromatin from the site of the DSB, forming discrete foci, which are easily visualized by immunofluorecence microscopy3. Analysis and quantitation of &gamma;H2AX foci has been widely used to evaluate DSB formation and repair, particularly in response to ionizing radiation and for evaluating the efficacy of various radiation modifying compounds and cytotoxic compounds4.
Given the exquisite specificity and sensitivity of this de novo marker of DSBs, it has provided new insights into the processes of DNA damage and repair in the context of chromatin. For example, in radiation biology the central paradigm is that the nuclear DNA is the critical target with respect to radiation sensitivity. Indeed, the general consensus in the field has largely been to view chromatin as a homogeneous template for DNA damage and repair. However, with the use of &gamma;H2AX as molecular marker of DSBs, a disparity in &gamma;-irradiation-induced &gamma;H2AX foci formation in euchromatin and heterochromatin has been observed5-7. Recently, we used a panel of antibodies to either mono-, di- or tri- methylated histone H3 at lysine 9 (H3K9me1, H3K9me2, H3K9me3) which are epigenetic imprints of constitutive heterochromatin and transcriptional silencing and lysine 4 (H3K4me1, H3K4me2, H3K4me3), which are tightly correlated actively transcribing euchromatic regions, to investigate the spatial distribution of &gamma;H2AX following ionizing radiation8. In accordance with the prevailing ideas regarding chromatin biology, our findings indicated a close correlation between &gamma;H2AX formation and active transcription9. Here we demonstrate our immunofluorescence method for detection and quantitation of &gamma;H2AX foci in non-adherent cells, with a particular focus on co-localization with other epigenetic markers, image analysis and 3D-modeling.

Evaluation of the Spatial Distribution of &amp;#947;H2AX following Ionizing Radiation

Microscopic analysis of &gamma;H2AX foci, which form following the phosphorylation of H2AX at Ser-139 in response to DNA double-strand breaks, has become an invaluable tool in radiation biology. Here we used an antibody to mono-methylated histone H3 at lysine 4 as an epigenetic marker of actively transcribing euchromatin, to evaluate the spatial distribution of radiation-induced &gamma;H2AX formation within the nucleus.

تقييم التوزيع المكاني للγH2AX التالية الإشعاعات المؤينة

An early molecular response to DNA double-strand breaks (DSBs) is phosphorylation of the Ser-139 residue within the terminal SQEY motif of the histone ...

Visualization of DNA Replication in the Vertebrate Model System DT40 using the DNA Fiber Technique

Maintenance of replication fork stability is of utmost importance for dividing cells to preserve viability and prevent disease. The processes involved not only ensure faithful genome duplication in the face of endogenous and exogenous DNA damage but also prevent genomic instability, a recognized causative factor in tumor development.
Here, we describe a simple and cost-effective fluorescence microscopy-based method to visualize DNA replication in the avian B-cell line DT40. This cell line provides a powerful tool to investigate protein function in vivo by reverse genetics in vertebrate cells1. DNA fiber fluorography in DT40 cells lacking a specific gene allows one to elucidate the function of this gene product in DNA replication and genome stability. Traditional methods to analyze replication fork dynamics in vertebrate cells rely on measuring the overall rate of DNA synthesis in a population of pulse-labeled cells. This is a quantitative approach and does not allow for qualitative analysis of parameters that influence DNA synthesis. In contrast, the rate of movement of active forks can be followed directly when using the DNA fiber technique2-4. In this approach, nascent DNA is labeled in vivo by incorporation of halogenated nucleotides (Fig 1A). Subsequently, individual fibers are stretched onto a microscope slide, and the labeled DNA replication tracts are stained with specific antibodies and visualized by fluorescence microscopy (Fig 1B). Initiation of replication as well as fork directionality is determined by the consecutive use of two differently modified analogues. Furthermore, the dual-labeling approach allows for quantitative analysis of parameters that influence DNA synthesis during the S-phase, i.e. replication structures such as ongoing and stalled forks, replication origin density as well as fork terminations. Finally, the experimental procedure can be accomplished within a day, and requires only general laboratory equipment and a fluorescence microscope.

DT40, a model vertebrate genetic system, provides a powerful tool to analyze protein function. Here we describe a simple method that allows qualitative analysis of parameters that influence DNA synthesis during the S-phase in DT40 cells at the single molecule level.

تصور تكرار الحمض النووي في DT40 النظام النموذجي الفقارية باستخدام تقنيات الحمض النووي الألياف

Maintenance of replication fork stability is of utmost importance for dividing cells to preserve viability and prevent disease. The processes involved not ...

Visualization of Caenorhabditis elegans Cuticular Structures Using the Lipophilic Vital Dye DiI

The cuticle of C. elegans is a highly resistant structure that surrounds the exterior of the animal1-4. The cuticle not only protects the animal from the environment, but also determines body shape and plays a role in motility4-6. Several layers secreted by epidermal cells comprise the cuticle, including an outermost lipid layer7.
Circumferential ridges in the cuticle called annuli pattern the length of the animal and are present during all stages of development8. Alae are longitudinal ridges that are present during specific stages of development, including L1, dauer, and adult stages2,9. Mutations in genes that affect cuticular collagen organization can alter cuticular structure and animal body morphology5,6,10,11. While cuticular imaging using compound microscopy with DIC optics is possible, current methods that highlight cuticular structures include fluorescent transgene expression12, antibody staining13, and electron microscopy1. Labeled wheat germ agglutinin (WGA) has also been used to visualize cuticular glycoproteins, but is limited in resolving finer cuticular structures14. Staining of cuticular surface using fluorescent dye has been observed, but never characterized in detail15. We present a method to visualize cuticle in live C. elegans using the red fluorescent lipophilic dye DiI (1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethylindocarbocyanine perchlorate), which is commonly used in C. elegans to visualize environmentally exposed neurons. This optimized protocol for DiI staining is a simple, robust method for high resolution fluorescent visualization of annuli, alae, vulva, male tail, and hermaphrodite tail spike in C. elegans.

Visualization of Caenorhabditis elegans Cuticular Structures Using the Lipophilic Vital Dye DiI

We present a method to visualize cuticle in live C. elegans using the red fluorescent lipophilic dye DiI (1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethylindocarbocyanine perchlorate), which is commonly used in C. elegans to visualize environmentally exposed neurons. With this optimized protocol, alae and annular cuticular structures are stained by DiI and observed using compound microscopy.

تصور انواع معينة ايليجانس</emالهياكل البشرة> استخدام الصبغة الحيوية محبة للدهون ، صلاح الغيدان

The cuticle of C. elegans is a highly resistant structure that surrounds the exterior of the animal1-4. The cuticle not only protects the animal from the ...

Do-It-Yourself Device for Recovery of Cryopreserved Samples Accidentally Dropped into Cryogenic Storage Tanks

Liquid nitrogen is colorless, odorless, extremely cold (-196 &deg;C) liquid kept under pressure. It is commonly used as a cryogenic fluid for long term storage of biological materials such as blood, cells and tissues 1,2. The cryogenic nature of liquid nitrogen, while ideal for sample preservation, can cause rapid freezing of live tissues on contact - known as 'cryogenic burn'2, which may lead to severe frostbite in persons closely involved in storage and retrieval of samples from Dewars. Additionally, as liquid nitrogen evaporates it reduces the oxygen concentration in the air and might cause asphyxia, especially in confined spaces2.
In laboratories, biological samples are often stored in cryovials or cryoboxes stacked in stainless steel racks within the Dewar tanks1. These storage racks are provided with a long shaft to prevent boxes from slipping out from the racks and into the bottom of Dewars during routine handling. All too often, however, boxes or vials with precious samples slip out and sink to the bottom of liquid nitrogen filled tank. In such cases, samples could be tediously retrieved after transferring the liquid nitrogen into a spare container or discarding it. The boxes and vials can then be relatively safely recovered from emptied Dewar. However, the cryogenic nature of liquid nitrogen and its expansion rate makes sunken sample retrieval hazardous. It is commonly recommended by Safety Offices that sample retrieval be never carried out by a single person. Another alternative is to use commercially available cool grabbers or tongs to pull out the vials3. However, limited visibility within the dark liquid filled Dewars poses a major limitation in their use.
In this article, we describe the construction of a Cryotolerant DIY retrieval device, which makes sample retrieval from Dewar containing cryogenic fluids both safe and easy.

Here we present a low cost, durable cryotolerant device for sample retrieval from Dewar tanks filled with liquid nitrogen. The ease of construction and modular design of the device makes the process of sample retrieval from cryogenic tanks safe and easy.

افعل ذلك بنفسك جهاز لاستخراج العينات Cryopreserved سقطت سهوا في صهاريج التخزين المبردة

Liquid nitrogen is colorless, odorless, extremely cold (-196 &deg;C) liquid kept under pressure. It is commonly used as a cryogenic fluid for long term ...

A High-throughput Method for Measurement of Glomerular Filtration Rate in Conscious Mice

The measurement of glomerular filtration rate (GFR) is the gold standard in kidney function assessment. Currently, investigators determine GFR by measuring the level of the endogenous biomarker creatinine or exogenously applied radioactive labeled inulin (3H or 14C). Creatinine has the substantial drawback that proximal tubular secretion accounts for ~50% of total renal creatinine excretion and therefore creatinine is not a reliable GFR marker. Depending on the experiment performed, inulin clearance can be determined by an intravenous single bolus injection or continuous infusion (intravenous or osmotic minipump). Both approaches require the collection of plasma or plasma and urine, respectively. Other drawbacks of radioactive labeled inulin include usage of isotopes, time consuming surgical preparation of the animals, and the requirement of a terminal experiment. Here we describe a method which uses a single bolus injection of fluorescein isothiocyanate-(FITC) labeled inulin and the measurement of its fluorescence in 1-2 &mu;l of diluted plasma. By applying a two-compartment model, with 8 blood collections per mouse, it is possible to measure GFR in up to 24 mice per day using a special work-flow protocol. This method only requires brief isoflurane anesthesia with all the blood samples being collected in a non-restrained and awake mouse. Another advantage is that it is possible to follow mice over a period of several months and treatments (i.e. doing paired experiments with dietary changes or drug applications). We hope that this technique of measuring GFR is useful to other investigators studying mouse kidney function and will replace less accurate methods of estimating kidney function, such as plasma creatinine and blood urea nitrogen.

Measurement of glomerular filtration rate (GFR) is the gold standard for kidney function assessment. Here we describe a high-throughput method which allows the determination of GFR in conscious mice by using a single bolus injection, determination of fluorescein isothiocyanate (FITC)-inulin in plasma and calculation of GFR by a two-phase exponential decay model.

وهناك طريقة عالية الإنتاجية لقياس معدل الترشيح الكبيبي في الفئران وإدراكا

The measurement of  glomerular filtration rate (GFR) is the gold standard in kidney function  assessment. Currently, investigators determine GFR by ...

Using Caenorhabditis elegans as a Model System to Study Protein Homeostasis in a Multicellular Organism

The folding and assembly of proteins is essential for protein function, the long-term health of the cell, and longevity of the organism. Historically, the function and regulation of protein folding was studied in vitro, in isolated tissue culture cells and in unicellular organisms. Recent studies have uncovered links between protein homeostasis (proteostasis), metabolism, development, aging, and temperature-sensing. These findings have led to the development of new tools for monitoring protein folding in the model metazoan organism Caenorhabditis elegans. In our laboratory, we combine behavioral assays, imaging and biochemical approaches using temperature-sensitive or naturally occurring metastable proteins as sensors of the folding environment to monitor protein misfolding. Behavioral assays that are associated with the misfolding of a specific protein provide a simple and powerful readout for protein folding, allowing for the fast screening of genes and conditions that modulate folding. Likewise, such misfolding can be associated with protein mislocalization in the cell. Monitoring protein localization can, therefore, highlight changes in cellular folding capacity occurring in different tissues, at various stages of development and in the face of changing conditions. Finally, using biochemical tools ex vivo, we can directly monitor protein stability and conformation. Thus, by combining behavioral assays, imaging and biochemical techniques, we are able to monitor protein misfolding at the resolution of the organism, the cell, and the protein, respectively.

Using Caenorhabditis elegans as a Model System to Study Protein Homeostasis in a Multicellular Organism

To study the relationship between protein homeostasis, stress and aging, we monitored changes in protein folding by following protein dysfunction, protein localization in the cell and protein stability at the organismal, cellular and protein levels, using the genetically tractable metazoan Caenorhabditis elegans as a model system.

The folding and assembly of proteins is essential for protein function, the long-term health of the cell, and longevity of the organism. Historically, the ...

Measuring Respiratory Function in Mice Using Unrestrained Whole-body Plethysmography

Respiratory dysfunction is one of the leading causes of morbidity and mortality in the world and the rates of mortality continue to rise. Quantitative assessment of lung function in rodent models is an important tool in the development of future therapies. Commonly used techniques for assessing respiratory function including invasive plethysmography and forced oscillation. While these techniques provide valuable information, data collection can be fraught with artefacts and experimental variability due to the need for anesthesia and/or invasive instrumentation of the animal. In contrast, unrestrained whole-body plethysmography (UWBP) offers a precise, non-invasive, quantitative way by which to analyze respiratory parameters. This technique avoids the use of anesthesia and restraints, which is common to traditional plethysmography techniques. This video will demonstrate the UWBP procedure including the equipment set up, calibration and lung function recording. It will explain how to analyze the collected data, as well as identify experimental outliers and artefacts that results from animal movement. The respiratory parameters obtained using this technique include tidal volume, minute volume, inspiratory duty cycle, inspiratory flow rate and the ratio of inspiration time to expiration time. UWBP does not rely on specialized skills and is inexpensive to perform. A key feature of UWBP, and most appealing to potential users, is the ability to perform repeated measures of lung function on the same animal.

The assessment of respiratory physiology has traditionally relied upon techniques, which require restraint or sedation of the animal. Unrestrained whole-body plethysmography, however, provides precise, non-invasive, quantitative analysis of respiratory physiology in animal models. In addition, the technique allows repeated respiratory assessment of mice allowing for longitudinal studies.

قياس وظيفة الجهاز التنفسي في الفئران عن طريق تخطيط التحجم غير مقيد كامل الجسم

Respiratory dysfunction is one of the leading causes of morbidity and mortality in the world and the rates of mortality continue to rise. Quantitative ...

A New Technique for Quantitative Analysis of Hair Loss in Mice Using Grayscale Analysis

Alopecia is a common form of hair loss which can occur in many different conditions, including male-pattern hair loss, polycystic ovarian syndrome, and alopecia areata. Alopecia can also occur as a side effect of chemotherapy in cancer patients. In this study, our goal was to develop a consistent and reliable method to quantify hair loss in mice, which will allow investigators to accurately assess and compare new therapeutic approaches for these various forms of alopecia. The method utilizes a standard gel imager to obtain and process images of mice, measuring the light absorption, which occurs in rough proportion to the amount of black (or gray) hair on the mouse. Data that has been quantified in this fashion can then be analyzed using standard statistical techniques (i.e., ANOVA, T-test). This methodology was tested in mouse models of chemotherapy-induced alopecia, alopecia areata and alopecia from waxing. In this report, the detailed protocol is presented for performing these measurements, including validation data from C57BL/6 and C3H/HeJ strains of mice. This new technique offers a number of advantages, including relative simplicity of application, reliance on equipment which is readily available in most research laboratories, and applying an objective, quantitative assessment which is more robust than subjective evaluations. Improvements in quantification of hair growth in mice will improve study of alopecia models and facilitate evaluation of promising new therapies in preclinical studies.

Alopecia is a common form of hair loss which can occur in many different conditions, including as a side-effect of chemotherapy. We have developed a method to quantify hair loss in mice, utilizing a standard gel imager to perform a grayscale analysis, to facilitate study of promising new alopecia therapies.

تقنية جديدة لتحليل الكمي لتساقط الشعر في الفئران عن طريق تحليل درجات الرمادي

Alopecia is a common form of hair loss which can occur in many different conditions, including male-pattern hair loss, polycystic ovarian syndrome, and ...

The Mouse Isolated Perfused Kidney Technique

The mouse isolated perfused kidney (MIPK) is a technique for keeping a mouse kidney under ex vivo conditions perfused and functional for 1 hr. This is a prerequisite for studying the physiology of the isolated organ and for many innovative applications that may be possible in the future, including perfusion decellularization for kidney bioengineering or the administration of anti-rejection or genome-editing drugs in high doses to prime the kidney for transplantation. During the time of the perfusion, the kidney can be manipulated, renal function can be assessed, and various pharmaceuticals administered. After the procedure, the kidney can be transplanted or processed for molecular biology, biochemical analysis, or microscopy.
This paper describes the perfusate and the surgical technique needed for the ex vivo perfusion of mouse kidneys. Details of the perfusion apparatus are given and data are presented showing the viability of the kidney&#39;s preparation: renal blood flow, vascular resistance, and urine data as functional, transmission electron micrographs of different nephron segments as morphological readouts, and western blots of transport proteins of different nephron segments as molecular readout.

The mouse isolated perfused kidney (MIPK) is a technique for keeping a mouse kidney under ex vivo conditions perfused and functional for 1 hr. The buffers and surgical technique are described in detail.

الماوس معزولة تقنية الكلى Perfused

The mouse isolated perfused kidney (MIPK) is a technique for keeping a mouse kidney under ex vivo conditions perfused and functional for 1 hr. This is a ...

Induction of Right Ventricular Failure by Pulmonary Artery Constriction and Evaluation of Right Ventricular Function in Mice

The mechanism of right ventricular failure (RVF) requires clarification due to the uniqueness, high morbidity, high mortality, and refractory nature of RVF. Previous rat models imitating RVF progression have been described. Compared with rats, mice are more accessible, economical, and widely used in animal experiments. We developed a pulmonary artery constriction (PAC) approach which is comprised of banding the pulmonary trunk in mice to induce right ventricular (RV) hypertrophy. A special surgical latch needle was designed that allows for easier separation of the aorta and the pulmonary trunk. In our experiments, the use of this fabricated latch needle reduced the risk of arteriorrhexis and improved the surgical success rate to 90%. We used different padding needle diameters to precisely create quantitative constriction, which can induce different degrees of RV hypertrophy. We quantified the degree of constriction by evaluating the blood flow velocity of the PA, which was measured by noninvasive transthoracic echocardiography. RV function was precisely evaluated by right heart catheterization at 8 weeks after surgery. The surgical instruments made inhouse were composed of common materials using a simple process that is easy to master. Therefore, the PAC approach described here is easy to imitate using instruments made in the lab and can be widely used in other labs. This study presents a modified PAC approach that has a higher success rate than other models and an 8-week postsurgery survival rate of 97.8%. This PAC approach provides a useful technique for studying the mechanism of RVF and will enable an increased understanding of RVF.

Here, we provide a useful approach for studying the mechanism of right ventricular failure. A more convenient and efficient approach to pulmonary artery constriction is established using surgical instruments made inhouse. In addition, methods to evaluate the quality of this approach by echocardiography and catheterization are provided.

تحريض الفشل البطيني الأيمن عن طريق انقباض الشريان الرئوي وتقييم وظيفة البطين الأيمن في الفئران

The mechanism of right ventricular failure (RVF) requires clarification due to the uniqueness, high morbidity, high mortality, and refractory nature of ...