سيكون الكتاب أن نعترف الدكاترة. بول هوانغ وديمتري Atochin للاستخدام من DMT الضغط مخطاط العضل والدكاترة. Binglan يو تشونغ لى وعن توفير الفئران التي تغذت على حمية عالية الدهون أو نظاما غذائيا عاديا. مصدر التمويل وأيد هذا العمل من قبل عالم التنمية المنحة 10SDG2610313 من جمعية القلب الأمريكية (لES بايز)، وإلينور ومايلز شور 50 برنامج زمالة الذكرى للعلماء في الطب من كلية الطب في جامعة هارفارد (لES بايز).

1. إعداد الحل <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الأسهم 500X EDTA: تزن 500 ملغ EDTA نا 2 • 2H 2 O وتذوب في 50 مل من الماء منزوع الأيونات. تخزين في درجة حرارة الغرفة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بوكل إزالة إستقطاب حل. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد محلول المخزون K10X: 3.69 غرام كلوريد الصوديوم، 18.64 ز بوكل، 0.36 G MgSO 4 اللامائية، 0.41 غ KH 2 PO 4، 0.46 G و CaCl 2 • 2H 2 O. تذوب في 250 مل من الماء منزوع الأيونات. تخزين في درجة حرارة الغرفة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ل100 مل بوكل النهائي إزالة إستقطاب حل 1X: ذوب 0.21 NaHCO 3، 0.18 ز الجلوكوز في 90 مل من الماء منزوع الأيونات. إضافة 10 مل من محلول المخزون K10X. إضافة 95 ميكرولتر من EDTA 500X حل. تخلط جيدا. تخزينها في 4 درجة مئوية. استخدام في غضون أسبوع واحد. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد الطازجة HEPES-PSS حل في يوم من التجربة (1 ليتر). <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 6.96 غرام كلوريد الصوديوم، 0.35 ز بوكل، 0.288 غرام MgSO 4 • 7H 2 O، 0.1605 ز KH 2 PO 4، 2.38 G HEPES. تذوب في 100 ملالماء منزوع الأيونات. إجعلها قارورة A. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 0.312 غرام و CaCl 2 • 2H 2 O. تذوب في 100 مل من الماء منزوع الأيونات. احتفالا ب قارورة B. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 1.25 غرام NaHCO 3، 0.991 غرام جلوكوز. تذوب في 98 مل من الماء منزوع الأيونات. احتفالا ب قارورة C. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إضافة 2 مل من EDTA في قارورة 500X C. خذ 700 مل من الماء منزوع الأيونات في قارورة كبيرة. صب محتويات القارورة A، B و C في قارورة كبيرة مع vortexing لالمستمر. ضبط الرقم الهيدروجيني إلى 7.4 مع هيدروكسيد الصوديوم. </li></ol> 2. العقاقير المستخدمة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> فينيليفرين (10 -2 M): ذوب 20.37 ملغ في 10 مل من الماء منزوع الأيونات. قسامة 1 مل وتخزينها في -80 درجة مئوية. تمييع متسلسل للحصول على 10 -3، 10 -4، 10 -5، و 10 -6 مول / لتر في اليوم من التجربة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> أستيل كولين (10 -2 M): ذوب 18.17 ملغ في 10 مل من الماء منزوع الأيونات. قسامة 1 مل وتخزينها في -80 درجة مئوية. تمييع متسلسل للحصول على 10 -3، 10 -4، 10 -5، و 10 -6مول / لتر في اليوم من التجربة. </li></ol> 3. الفئران تم دراسة الفئران على خلفية S6 و B6 طوال هذه الدراسة - ذكر WT وsGCα 1 - /. وsGCα 1 - / - تم إنشاؤها كما هو موضح سابقا 4،5. تمت الموافقة الإسكان والإجراءات التي تنطوي على حيوانات التجارب (الفئران) من خلال اللجنة الفرعية للبحوث رعاية الحيوان من مستشفى ماساتشوستس العام في بوسطن، MA. 4. قياس تفاعل الأوعية الدموية في الشريان المساريقي <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الموت ببطء الفئران مع بنتوباربيتال (200 ملغ / كغ، والملكية الفكرية). فتح تجويف البطن وتشريح الأنسجة المساريقي. عزل وتشريح الشريان المساريقي من 3 طريق النظام الحر من الضام والأنسجة الدهنية، ووضع الشريان في الجليد الباردة HEPES-PSS حل قبل معايرتها مع 95٪ O 2/5٪ CO 2 لمدة 15 دقيقة. قطع حلقات من 2-3 مم طول مع عدم وجود المتفرعة من المساريقيالشريان. التفريق بين الشرايين والأوردة على مستوى السفن الصغيرة هي إشكالية عندما لا يكون هناك دم في الأوعية. ولذلك، فإننا نوصي تحديد السفينة حين انها لا تزال على حالها في الحيوان قبل تشريح بها. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في ملء قنية الزجاج في الضغط مخطاط العضل غرفة (DMT نموذج 110P &amp; 11P الإصدار 1.31، الشكل 2) مع حل HEPES-PSS بمساعدة حقنة 10 مل من خلال مدخل ومخرج الصمامات. ملء قنية وينبغي أن يتم برفق وبعناية كما الضغط المفرط يمكن أن تلحق الضرر محول هشة متصلا قنية. بعد ملء قنية إغلاق كل مدخل ومخرج الصمامات بإحكام. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحميل واحدة من نهاية السفينة على قنية حق وربط بعناية مع واحد حبلا غرامة من الخيط النايلون. مع مساعدة من حقنة، الاحمرار وملء وعاء مع حل HEPES عبر صمام مدخل. جلب قنية اليسار أقرب إلى السفينة وتحميل الطرف الآخر من السفينة على ذلك. ادراك التعادل مع الدرز النايلون. شغلغرفة مع ما يصل الى 10 مل مع HEPES حل. التحقق من وجود تسرب عن طريق دفع بلطف HEPES حل عن طريق صمام مدخل بمساعدة حقنة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تثبيت الدائرة على مخطاط العضل وتحت كاميرا الفيديو. بدء الأوكسجين والحرارة (37 درجة مئوية) في القاعة. ربط صمام مدخل مع P1 أنبوب من حل HEPES أول خزان، بينما هو صمام مغلقة. تدع أي فقاعة وتمرير حل من خلال أنبوب حتى عدم وجود فقاعات في أنبوب. فتح صمام. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ربط صمام الأيسر من الغرفة مع P2 أنبوب قادمة من منظم الضغط. مرة أخرى تحقق من وجود أي فقاعات. لا ينبغي أن يكون هناك أي فقاعات أو تسرب في النظام بأكمله. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> انتقل إلى القائمة ضغط على لوحة ميو واجهة أو في البرنامج وقم بتشغيل مضخة في حين إيقاف التدفق. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> افتح البرنامج وانقر فوق تجميع. ينبغي أن ينظر إلى السفينة على الشاشة الآن (الشكل 3). السفينة هو تصور مع كاميرا تركيبها على المجهر، مما يسمح monitoriنانوغرام وتحليل لمعة السفينة، سفينة القطر، وسمك الجدار. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> رفع الضغط تدريجيا interluminal عبر صمام P1 من خلال تحديد الضغط P1 في لوحة ميو واجهة أو في البرنامج وأدخل القيمة الضغط على النحو التالي؛ 5 ملم زئبقي → 10 → 20 → 40 → 60 مم زئبق. سفينة يميل في بعض الأحيان إلى تحريف أو ملفوف في حين الضغط يتزايد؛ ضبط التوتر أو توتر وفقا لذلك مع مساعدة من micropositioner العمودي أو الطولي (الشكل 2). تتوازن هذه السفينة على بعد 60 ملم زئبقي و 37 درجة مئوية على الأقل لمدة 45 دقيقة. تغيير الحل حمام مرة واحدة مع HEPES قبل تحسنت خلال موازنة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تطبيق 10 مل من بوكل حل إزالة إستقطاب، prewarmed عند 37 درجة مئوية، إلى الحمام ليزيل الاستقطاب تماما خلايا العضلات الملساء وتحقيق أقصى قدر من انقباض. بعد انقباض مستقرة، وشطف الحمام مع HEPES حل 3 مرات كل 10 دقيقة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التحقق من صلاحية السفينة وسلامة البطانة بواسطة مستقرة والإنجابيردود إيبل إلى إضافة فينيليفرين (10 -5 M) والأستيل كولين (10 -5 M). شطف 3 مرات مع حل HEPES كل 10 دقيقة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إضافة فينيليفرين (10 -5 م) لpreconstrict السفينة، وعندما تم الحصول على انقباض مستقرة، إجراء منحنى استجابة تركيز-توسع الأوعية التراكمي (CRC) بإضافة متتابعة من جرعات متزايدة من الأستيل كولين (10 -9، 3 × 10 - 9، 10 -8، 3 × 10 -8، 10 -7، 3 × 10 -7، 10 -6، 3 × 10 -6، و 10 -5 م). بعد آخر جرعة، وشطف 3 مرات مع حل HEPES كل 10 دقيقة قبل البدء في CRC جديدة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحديد قطر التجويف السلبي من خلال تطبيق كا 2 PSS مجانا + التي تحتوي على 2 ملي EGTA. من اقتفاء مسجل التدبير قطر التجويف لكل الاستجابة للجرعة (الشكل 4)، والتي سيتم استخدامها لحساب جميع المعلمات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التعبير عن جميع الردود الاسترخاء أستيل كما PERCالتغيير entage في قطر التجويف بعد preconstriction فينيليفرين مقارنة مع الفرق بين قطر خالية من الكالسيوم وقطر بعد انقباض فينيليفرين، وذلك باستخدام المعادلة التالية: </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نسبة تمدد = 100٪ X [(د خ - د ط) / (D كا خالية - D ط)]، حيث D هو قطر التجويف قياس وX، I، وخالية من الكالسيوم دلالة بأقطار الشرياني في كل جرعة من ناهض (خ)، فينيليفرين التالية قطره الأولي انقباض (ط)، وفي كا 2 +-عازلة خالية (خالية من الكالسيوم). </li></ol> 5. التحليل الإحصائي يتم التعبير عن جميع القياسات المستمرة كما يعني ± SEM. يتم تحليل تفاعل الأوعية الدموية في الشرايين المساريقي بواسطة المتكررة تدابير في اتجاهين ANOVA. في جميع الحالات، P يعتبر &lt;0.05 ذات دلالة إحصائية.

<ol>
	<li>Bridges, L. E., Williams, C. L., Pointer, M. A., Awumey, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenteric+artery+contraction+and+relaxation+studies+using+automated+wire+myography.">Mesenteric artery contraction and relaxation studies using automated wire myography.</a> J. Vis .Exp. (55), e3119 (2011).</li><li>Arribas, S. M., Daly, C. J., McGrath, I. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurements+of+vascular+remodeling+by+confocal+microscopy.">Measurements of vascular remodeling by confocal microscopy.</a> Methods Enzymol. 307, 246-273 (1999).</li><li>Lei, C., Yu, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhaled+Nitric+Oxide+Attenuates+the+Adverse+Effects+of+Transfusing+Stored+Syngeneic+Erythrocytes+in+Mice+with+Endothelial+Dysfunction+after+Hemorrhagic+Shock.">Inhaled Nitric Oxide Attenuates the Adverse Effects of Transfusing Stored Syngeneic Erythrocytes in Mice with Endothelial Dysfunction after Hemorrhagic Shock.</a> Anesthesiology. , (2012).</li><li>Buys, E. S., Cauwels, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=sGC&#945;1&#946;1+attenuates+cardiac+dysfunction+and+mortality+in+murine+inflammatory+shock+models.">sGC&#945;1&#946;1 attenuates cardiac dysfunction and mortality in murine inflammatory shock models.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 297 (2), H654-H663 (2009).</li><li>Buys, E. S., Sips, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gender-specific+hypertension+and+responsiveness+to+nitric+oxide+in+sGC&#945;1+knockout+mice.">Gender-specific hypertension and responsiveness to nitric oxide in sGC&#945;1 knockout mice.</a> Cardiovasc. Res. 79 (1), 179-186 (2008).</li><li>Panza, J. A., Quyyumi, A. A., Brush, J. E., Epstein, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Abnormal+endothelium-dependent+vascular+relaxation+in+patients+with+essential+hypertension.">Abnormal endothelium-dependent vascular relaxation in patients with essential hypertension.</a> N. Engl. J. Med. 323 (1), 22-27 (1990).</li><li>Huang, P. L., Huang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypertension+in+mice+lacking+the+gene+for+endothelial+nitric+oxide+synthase.">Hypertension in mice lacking the gene for endothelial nitric oxide synthase.</a> Nature. 377 (6546), 239-242 (1995).</li><li>Friebe, A., Koesling, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+function+of+NO-sensitive+guanylyl+cyclase:+what+we+can+learn+from+genetic+mouse+models.">The function of NO-sensitive guanylyl cyclase: what we can learn from genetic mouse models.</a> Nitric Oxide. 21 (3-4), 149-156 (2009).</li><li>Ehret, G. B., Munroe, P. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+variants+in+novel+pathways+influence+blood+pressure+and+cardiovascular+disease+risk.">Genetic variants in novel pathways influence blood pressure and cardiovascular disease risk.</a> Nature. 478 (7367), 103-109 (2011).</li><li>Buys, E. S., Raher, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+modifiers+of+hypertension+in+soluble+guanylate+cyclase+alpha1-deficient+mice.">Genetic modifiers of hypertension in soluble guanylate cyclase alpha1-deficient mice.</a> J. Clin. Invest. 122 (6), 2316-2325 (2012).</li><li>Kauffenstein, G., Laher, I., Matrougui, K., Guerineau, N. C., Henrion, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Emerging+role+of+G+protein-coupled+receptors+in+microvascular+myogenic+tone.">Emerging role of G protein-coupled receptors in microvascular myogenic tone.</a> Cardiovascular Research. 95 (2), 223-232 (2012).</li><li>Ruilope, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypertension+in+2010:+Blood+pressure+and+the+kidney.">Hypertension in 2010: Blood pressure and the kidney.</a> Nat. Rev. Nephrol. 7 (2), 73-74 (2011).</li><li>Michael, S. K., Surks, H. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+blood+pressure+arising+from+a+defect+in+vascular+function.">High blood pressure arising from a defect in vascular function.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 105 (18), 6702-6707 (2008).</li><li>Mendelsohn, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+hypertension,+the+kidney+is+not+always+the+heart+of+the+matter.">In hypertension, the kidney is not always the heart of the matter.</a> J. Clin. Invest. 115 (4), 840-844 (2005).</li></ol>

الكتاب ليس لديهم ما يكشف.

الفئران هي نموذج تجريبي المفضل لكثير من المحققين، وذلك جزئيا بسبب إمكانية إدخال تعديلات وراثية، وبالتالي توليد نماذج الماوس لالفيزيولوجيا المرضية الإنسان. وضع فعال في الأوعية المقاومة الصغيرة ولكن ليس من السفن قناة أكبر يحدد إلى حد كبير تنظيم تدفق الدم في جميع أنح?...

وتستخدم أنظمة مخطاط العضل الضغط لقياس وظيفة فسيولوجية وخصائص الشرايين الصغيرة والأوردة والأوعية الأخرى. هي التي شنت على شريحة صغيرة سليمة من الشريان أو الوريد على اثنين قنية زجاجية صغيرة وضغط لضغط اللمعية مناسبة، والسماح للسفينة للحفاظ على معظم الخصائص في الجسم الحي (الشكلان 1 و 2). في حالة فسيولوجية قرب في مخطاط العضل ضغط يعكس السلوك في الجسم الحي من السرير الأوعية الدموية، مما يسمح التحقيق في الخصائص الذاتية (على سبيل المثال لهجة عضلي) من سفن معزولة. بعض من مزايا تخطيط العضل الضغط على تخطيط العضل الأسلاك، حيث يتم تقييم تقلص العضلات عن طريق اقتران الميكانيكية مباشرة إلى محول القوة 1، وتشمل (ط) أن الشرايين المقاومة الصغرى، التي تحدد المقاومة الشاملة وضعت في نظام الأوعية الدموية، ويمكن دراستها، في حين ومخطاط العضل سلك تقتصر على الشرايين قناة أكبر، (الثاني) ريتم تقليل قبعة من مخاطر تضر البطانة منذ أي أسلاك يجب أن تمرر من خلال التجويف السفينة، (الثالث) أن الشكل الطبيعي للسفينة يتم الاحتفاظ أفضل، و (رابعا) أن البعد سفينة يمكن دراستها في مجموعة واسعة من الضغوط أو إجهاد القص 2. يمكن دراسة السفن الصغيرة تكون أكثر إفصاحا من دراسة الشرايين قناة أكبر للمساعدة في فهم الآليات الجزيئية الفيزيولوجيا المرضية والتي تساهم في تغير نغمة الأوعية الدموية في أمراض القلب والشرايين مثل ارتفاع ضغط الدم. على سبيل المثال، يمكن أن يظهر ضعف في وظيفة بطانة الأوعية الدموية المرتبطة تغذية الفئران حمية عالية الدهون لمدة 8 أسابيع في 2 ND-النظام الشرايين المساريقي 3 ولكن ليس في حلقات الأبهر (الشكل 3). ميزة أخرى لتخطيط العضل ضغط انقباض عضلي هو أن الجوهرية للسفينة الضغط موجود، وأن دور ووظيفة البطانة في هذه الظاهرة يمكن دراستها. هنا، ونحن أن descrمتد استخدام مخطاط العضل الضغط لدراسة تفاعل الأوعية الدموية من الماوس المساريقي 3 ش النظام الشرايين مقاومة في محيط من أكسيد النيتريك ضعف (NO)، المركب الإشارة.

<table border="1">
		<tbody>
		 <tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Cataloge No.</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP358</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>CaCl2 (2H2O)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>C79-500</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>KCl</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P9333</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>MgSO4 </td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>M65-500</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>KH2PO4 </td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P3786</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>NaHCO3 </td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP328</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>NaOH</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>S318</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>D-Glucose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G8270</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>EDTA</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP121</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H3375</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Phenylephrine</td>
			<td>Acros Organics</td>
			<td>AC20724</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Acetylcholine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A6625</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Pressure Myograph System</td>
			<td>DMT</td>
			<td></td>
		 </tr>
		</tbody>
 </table>

assessing murine resistance artery function using pressure myography

نظم مخطاط العضل الضغط هي بشكل رائع مفيد في تقييم وظيفي من الشرايين الصغيرة، ضغط لضغط بطريق مناسبة. في حالة فسيولوجية قرب المحرز في تخطيط العضل الضغط يسمح توصيف متعمقة من الاستجابات الذاتية للمؤثرات الدوائية والفسيولوجية، والتي يمكن استقراء لفي السلوك المجراة من السرير الوعائي. مخطاط العضل الضغط لديها العديد من المزايا أكثر من myographs الأسلاك التقليدية. على سبيل المثال، يمكن دراستها سفن أصغر مقاومة في الضغوط داخل اللمعة لرقابة مشددة وذات الصلة من الناحية الفسيولوجية. هنا، علينا أن ندرس قدرة 3 ش النظام الشرايين المساريقي (3-4 مم طويل)، preconstricted مع فينيليفرين، لايتي-الاسترخاء في استجابة لأستيل. هي التي شنت الشرايين المساريقي على اثنين قنية متصلا نظام الضاغط ومختومة أن يتم الحفاظ على الضغط المستمر من 60 مم زئبق. قطر التجويف والخارجي للسفينة هي المستمر وسجلت خبيث باستخدام كاميرا الفيديو، مما يسمح الكمي الوقت الحقيقي من تضيق الأوعية وارتخاء وعائي ردا على فينيليفرين وأستيل كولين، على التوالي. للتدليل على تطبيق تخطيط العضل الضغط لدراسة مسببات مرض القلب والأوعية الدموية، قمنا بتقييم وظائف الاوعية الدموية التي تعتمد على البطانة في نموذج الفئران من ارتفاع ضغط الدم النظامية. الفئران تعاني من نقص في α 1 الوحيدات من محلقة يعترضه القابلة للذوبان (sGCα 1 - / -) هي ارتفاع ضغط الدم عندما على 129S6 (S6) الخلفية (sGCα 1 -/-S6) ولكن ليس عندما على C57BL / 6 (B6) الخلفية (sGCα 1 -/-B6). باستخدام تخطيط العضل الضغط، علينا أن نظهر أن sGCα النتائج 1 نقص في ضعف ارتخاء وعائي التي تعتمد على البطانة. الخلل الأوعية الدموية أكثر وضوحا في sGCα 1 من -/-S6 في sGCα 1 -/-B6 الفئران، من المحتمل contributiنانوغرام إلى ارتفاع ضغط الدم في sGCα 1 من -/-S6 في sGCα 1 -/-B6 الفئران. تخطيط العضل الضغط هي تقنية بسيطة نسبيا، ولكن حساسة ومفيدة ميكانيكيا التي يمكن استخدامها لتقييم تأثير مختلف المحفزات على انقباض الأوعية الدموية والاسترخاء، وبالتالي زيادة البصيرة لدينا في الآليات الكامنة وراء مرض القلب والأوعية الدموية.

NO تشارك مركزيا في الحفاظ على توازن ضغط الدم سواء في البشر 6 و 7 في النماذج الحيوانية. وتتوسط قدرة NO للسيطرة على استرخاء العضلات الملساء الوعائية القابلة للذوبان التي كتبها يعترضه محلقة (SGC)، انزيم heterodimeric المحتوية على الهيم الذي يولد المركب 8. مؤخرا، ت?...

Watch this Scientific Journal Video about Assessing Murine Resistance Artery Function Using Pressure Myography at JoVE.com

Assessing Murine Resistance Artery Function Using Pressure Myography

في تخطيط العضل الضغط، هي التي شنت على شريحة صغيرة سليمة من سفينة على اثنين قنية صغيرة وضغط لضغط اللمعية مناسبة. هنا، نحن تصف طريقة لقياس استجابة ارتخاء وعائي من الفأرة 3<sup&gt; طريق</sup&gt; النظام الشرايين المساريقي في C57 وsGCα<sub&gt; 1</sub<sup&gt; - / -</sup&gt; الفئران باستخدام تخطيط العضل الضغط.

تقييم الشريان المقاومة الفئران وظيفة عن طريق الضغط تخطيط العضل

Pressure myograph systems are  exquisitely useful in the functional assessment of small arteries, pressurized  to a suitable transmural pressure. The  ...

assessing-murine-resistance-artery-function-using-pressure-myography

Research

JoVE Journal

Biology

21.8K Views.  Massachusetts General Hospital, Harvard Medical School. في تخطيط العضل الضغط، هي التي شنت على شريحة صغيرة سليمة من سفينة على اثنين قنية صغيرة وضغط لضغط اللمعية مناسبة. هنا، نحن تصف طريقة لقياس استجابة ارتخاء وعائي من الفأرة 3 طريق النظام الشرايين المساريقي في C57 وsGCα 1

Video: Assessing Murine Resistance Artery Function Using Pressure Myography

Measuring Blood Pressure in Mice using Volume Pressure Recording, a Tail-cuff Method

The CODA 8-Channel High Throughput Non-Invasive Blood Pressure system measures the blood pressure in up to 8 mice or rats simultaneously. The CODA tail-cuff system uses Volume Pressure Recording (VPR) to measure the blood pressure by determining the tail blood volume. A specially designed differential pressure transducer and an occlusion tail-cuff measure the total blood volume in the tail without the need to obtain the individual pulse signal. Special attention is afforded to the length of the occlusion cuff in order to derive the most accurate blood pressure readings. VPR can easily obtain readings on dark-skinned rodents, such as C57BL6 mice and is MRI compatible. The CODA system provides you with measurements of six (6) different blood pressure parameters; systolic and diastolic blood pressure, heart rate, mean blood pressure, tail blood flow, and tail blood volume. Measurements can be made on either awake or anesthetized mice or rats. The CODA system includes a controller, laptop computer, software, cuffs, animal holders, infrared warming pads, and an infrared thermometer. There are seven different holder sizes for mice as small as 8 grams to rats as large as 900 grams.

The CODA 8-Channel High Throughput Non-Invasive Blood Pressure system measures the blood pressure in up to 8 mice or rats simultaneously. This tail-cuff system uses Volume Pressure Recording (VPR) to measure the blood pressure by determining the tail blood volume.

قياس ضغط الدم في الفئران باستخدام تسجيل حجم الضغط ، وهو أسلوب الذيل الكفة

The CODA 8-Channel High Throughput Non-Invasive Blood Pressure system measures the blood pressure in up to 8 mice or rats simultaneously. The CODA ...

Bioassays for Monitoring Insecticide Resistance

Pest resistance to pesticides is an increasing problem because pesticides are an integral part of high-yielding production agriculture. When few products are labeled for an individual pest within a particular crop system, chemical control options are limited. Therefore, the same product(s) are used repeatedly and continual selection pressure is placed on the target pest. There are both financial and environmental costs associated with the development of resistant populations. The cost of pesticide resistance has been estimated at approximately $ 1.5 billion annually in the United States. This paper will describe protocols, currently used to monitor arthropod (specifically insects) populations for the development of resistance. The adult vial test is used to measure the toxicity to contact insecticides and a modification of this test is used for plant-systemic insecticides. In these bioassays, insects are exposed to technical grade insecticide and responses (mortality) recorded at a specific post-exposure interval. The mortality data are subjected to Log Dose probit analysis to generate estimates of a lethal concentration that provides mortality to 50% (LC50) of the target populations and a series of confidence limits (CL's) as estimates of data variability. When these data are collected for a range of insecticide-susceptible populations, the LC50 can be used as baseline data for future monitoring purposes. After populations have been exposed to products, the results can be compared to a previously determined LC50 using the same methodology.

This manuscript demonstrates and discusses techniques used to survey pesticide susceptibility and detect resistance to contact and systemic pesticides in arthropod pests.

اختبارات بيولوجية على مقاومة المبيدات الحشرية الرصد

Pest resistance to pesticides is an increasing problem because pesticides are an integral part of high-yielding production agriculture. When few products ...

Exploring Arterial Smooth Muscle Kv7 Potassium Channel Function using Patch Clamp Electrophysiology and Pressure Myography

Contraction or relaxation of smooth muscle cells within the walls of resistance arteries determines the artery diameter and thereby controls flow of blood through the vessel and contributes to systemic blood pressure. The contraction process is regulated primarily by cytosolic calcium concentration ([Ca2+]cyt), which is in turn controlled by a variety of ion transporters and channels. Ion channels are common intermediates in signal transduction pathways activated by vasoactive hormones to effect vasoconstriction or vasodilation. And ion channels are often targeted by therapeutic agents either intentionally (e.g. calcium channel blockers used to induce vasodilation and lower blood pressure) or unintentionally (e.g. to induce unwanted cardiovascular side effects).
Kv7 (KCNQ) voltage-activated potassium channels have recently been implicated as important physiological and therapeutic targets for regulation of smooth muscle contraction. To elucidate the specific roles of Kv7 channels in both physiological signal transduction and in the actions of therapeutic agents, we need to study how their activity is modulated at the cellular level as well as evaluate their contribution in the context of the intact artery.
The rat mesenteric arteries provide a useful model system. The arteries can be easily dissected, cleaned of connective tissue, and used to prepare isolated arterial myocytes for patch clamp electrophysiology, or cannulated and pressurized for measurements of vasoconstrictor/vasodilator responses under relatively physiological conditions. Here we describe the methods used for both types of measurements and provide some examples of how the experimental design can be integrated to provide a clearer understanding of the roles of these ion channels in the regulation of vascular tone.

Measurements of Kv7 (KCNQ) potassium channel activity in isolated arterial myocytes (using patch clamp electrophysiological techniques) in parallel with measurements of constrictor/dilator responses (using pressure myography) can reveal important information about the roles of Kv7 channels in vascular smooth muscle physiology and pharmacology.

استكشاف الشرياني العضلات الملساء قناة البوتاسيوم Kv7 الدالة باستخدام المشبك التصحيح الكهربية وتخطيط العضل الضغط

Contraction  or relaxation of smooth muscle cells within the walls of resistance arteries  determines the artery diameter and thereby controls flow of ...

RNA Secondary Structure Prediction Using High-throughput SHAPE

Understanding the function of RNA involved in biological processes requires a thorough knowledge of RNA structure. Toward this end, the methodology dubbed "high-throughput selective 2' hydroxyl acylation analyzed by primer extension", or SHAPE, allows prediction of RNA secondary structure with single nucleotide resolution. This approach utilizes chemical probing agents that preferentially acylate single stranded or flexible regions of RNA in aqueous solution. Sites of chemical modification are detected by reverse transcription of the modified RNA, and the products of this reaction are fractionated by automated capillary electrophoresis (CE). Since reverse transcriptase pauses at those RNA nucleotides modified by the SHAPE reagents, the resulting cDNA library indirectly maps those ribonucleotides that are single stranded in the context of the folded RNA. Using ShapeFinder software, the electropherograms produced by automated CE are processed and converted into nucleotide reactivity tables that are themselves converted into pseudo-energy constraints used in the RNAStructure (v5.3) prediction algorithm. The two-dimensional RNA structures obtained by combining SHAPE probing with in silico RNA secondary structure prediction have been found to be far more accurate than structures obtained using either method alone.

High-throughput selective 2' hydroxyl acylation analyzed by primer extension (SHAPE) utilizes a novel chemical probing technology, reverse transcription, capillary electrophoresis and secondary structure prediction software to determine the structures of RNAs from several hundred to several thousand nucleotides at single nucleotide resolution.

RNA تنبؤ هيكل الثانوية باستخدام الشكل عالي الإنتاجية

Understanding the function of RNA involved in biological processes requires a thorough knowledge of RNA structure. Toward this end, the methodology dubbed ...

Assessing Cerebral Autoregulation via Oscillatory Lower Body Negative Pressure and Projection Pursuit Regression

The process by which cerebral perfusion is maintained constant over a wide range of systemic pressures is known as &#8220;cerebral autoregulation.&#8221; Effective dampening of flow against pressure changes occurs over periods as short as ~15 sec and becomes progressively greater over longer time periods. Thus, slower changes in blood pressure are effectively blunted and faster changes or fluctuations pass through to cerebral blood flow relatively unaffected. The primary difficulty in characterizing the frequency dependence of cerebral autoregulation is the lack of prominent spontaneous fluctuations in arterial pressure around the frequencies of interest (less than ~0.07 Hz or ~15 sec). Oscillatory lower body negative pressure (OLBNP) can be employed to generate oscillations in central venous return that result in arterial pressure fluctuations at the frequency of OLBNP. Moreover, Projection Pursuit Regression (PPR) provides a nonparametric method to characterize nonlinear relations inherent in the system without a priori assumptions and reveals the characteristic non-linearity of cerebral autoregulation. OLBNP generates larger fluctuations in arterial pressure as the frequency of negative pressure oscillations become slower; however, fluctuations in cerebral blood flow become progressively lesser. Hence, the PPR shows an increasingly more prominent autoregulatory region at OLBNP frequencies of 0.05 Hz and below (20 sec cycles). The goal of this approach it to allow laboratory-based determination of the characteristic nonlinear relationship between pressure and cerebral flow and could provide unique insight to integrated cerebrovascular control as well as to physiological alterations underlying impaired cerebral autoregulation (e.g., after traumatic brain injury, stroke, etc.).

Cerebral perfusion is maintained across a range of pressures via cerebral autoregulation. However, characterizing autoregulation requires prominent pressure fluctuations at regulated frequencies. The described protocol will show how oscillatory lower body negative pressure can generate pressure fluctuations to provide data for projection pursuit regression for quantification of the autoregulatory curve.

تقييم الشلل تنظيم ذاتي عبر تذبذبي الجسم السفلى ضغط سلبي والإسقاط السعي الانحدار

The process by which cerebral perfusion is maintained constant over a wide range of systemic pressures is known as &#8220;cerebral autoregulation.&#8221; ...

Measuring Respiratory Function in Mice Using Unrestrained Whole-body Plethysmography

Respiratory dysfunction is one of the leading causes of morbidity and mortality in the world and the rates of mortality continue to rise. Quantitative assessment of lung function in rodent models is an important tool in the development of future therapies. Commonly used techniques for assessing respiratory function including invasive plethysmography and forced oscillation. While these techniques provide valuable information, data collection can be fraught with artefacts and experimental variability due to the need for anesthesia and/or invasive instrumentation of the animal. In contrast, unrestrained whole-body plethysmography (UWBP) offers a precise, non-invasive, quantitative way by which to analyze respiratory parameters. This technique avoids the use of anesthesia and restraints, which is common to traditional plethysmography techniques. This video will demonstrate the UWBP procedure including the equipment set up, calibration and lung function recording. It will explain how to analyze the collected data, as well as identify experimental outliers and artefacts that results from animal movement. The respiratory parameters obtained using this technique include tidal volume, minute volume, inspiratory duty cycle, inspiratory flow rate and the ratio of inspiration time to expiration time. UWBP does not rely on specialized skills and is inexpensive to perform. A key feature of UWBP, and most appealing to potential users, is the ability to perform repeated measures of lung function on the same animal.

The assessment of respiratory physiology has traditionally relied upon techniques, which require restraint or sedation of the animal. Unrestrained whole-body plethysmography, however, provides precise, non-invasive, quantitative analysis of respiratory physiology in animal models. In addition, the technique allows repeated respiratory assessment of mice allowing for longitudinal studies.

قياس وظيفة الجهاز التنفسي في الفئران عن طريق تخطيط التحجم غير مقيد كامل الجسم

Respiratory dysfunction is one of the leading causes of morbidity and mortality in the world and the rates of mortality continue to rise. Quantitative ...

Evaluation of Zebrafish Kidney Function Using a Fluorescent Clearance Assay

The zebrafish embryo offers a tractable model to study organogenesis and model human genetic disease. Despite its relative simplicity, the zebrafish kidney develops and functions in almost the same way as humans. A major difference in the construction of the human kidney is the presence of millions of nephrons compared to the zebrafish that has only two. However, simplifying such a complex system into basic functional units has aided our understanding of how the kidney develops and operates. In zebrafish, the midline located glomerulus is responsible for the initial blood filtration into two pronephric tubules that diverge to run bilaterally down the embryonic axis before fusing to each other at the cloaca. The pronephric tubules are heavily populated by motile cilia that facilitate the movement of filtrate along the segmented tubule, allowing the exchange of various solutes before finally exiting via the cloaca2-4. Many genes responsible for CKD, including those related to ciliogenesis, have been studied in zebrafish5. However, a major draw back has been the difficulty in evaluating zebrafish kidney function after genetic manipulation. Traditional assays to measure kidney dysfunction in humans have proved non translational to zebrafish, mainly due to their aquatic environment and small size. For example, it is not physically possible to extract blood from embryonic staged fish for analysis of urea and creatinine content, as they are too small. In addition, zebrafish do not produce enough urine for testing on a simple proteinuria &#8216;dipstick&#8217;, which is often performed during initial patient examinations. We describe a fluorescent assay that utilizes the optical transparency of the zebrafish to quantitatively monitor the clearance of a fluorescent dye, over time, from the vasculature and out through the kidney, to give a read out of renal function1,6-9.

The zebrafish is a popular tool to model chronic kidney disease (CKD). However, their small size makes it impossible to evaluate renal function using traditional methods. We describe a fluorescent dye kidney clearance assay1 that allows quantitative analysis of zebrafish kidney function in CKD.

تقييم الزرد وظائف الكلى باستخدام التخليص الفحص الفلورسنت

The zebrafish embryo offers a tractable model to study organogenesis and model human genetic disease. Despite its relative simplicity, the zebrafish ...

Cardiac Pressure-Volume Loop Analysis Using Conductance Catheters in Mice

Cardiac pressure-volume loop analysis is the &#8220;gold-standard&#8221; in the assessment of load-dependent and load-independent measures of ventricular systolic and diastolic function. Measures of ventricular contractility and compliance are obtained through examination of cardiac response to changes in afterload and preload. These techniques were originally developed nearly three decades ago to measure cardiac function in large mammals and humans. The application of these analyses to small mammals, such as mice, has been accomplished through the optimization of microsurgical techniques and creation of conductance catheters. Conductance catheters allow for estimation of the blood pool by exploiting the relationship between electrical conductance and volume. When properly performed, these techniques allow for testing of cardiac function in genetic mutant mouse models or in drug treatment studies. The accuracy and precision of these studies are dependent on careful attention to the calibration of instruments, systematic conduct of hemodynamic measurements and data analyses. We will review the methods of conducting pressure-volume loop experiments using a conductance catheter in mice.

Cardiac pressure-volume loop analysis is the most comprehensive way to measure cardiac function in the intact heart. We describe a technique to perform and analyze cardiac pressure volume loops, using conductance catheters.

القلب حجم الضغط تحليل حلقة عن طريق القسطرة المواصلة في الفئران

Cardiac pressure-volume loop analysis is the &#8220;gold-standard&#8221; in the assessment of load-dependent and load-independent measures of ventricular ...

Intracavernosal Pressure Recording to Evaluate Erectile Function in Rodents

Erectile dysfunction (ED) is defined as the inability to attain or keep an erection of the penis, and this has become a prevalent male sexual disorder. Rodents are employed by many studies to research the physiology/pathology of erectile function. Erectile function in rodents can be evaluated by measuring the intracavernosal pressure (ICP). In practice, ICP can be monitored following electrical stimulation of the cavernous nerves (CNs). The arterial pressure of the carotid artery (the mean arterial pressure) is used as the reference for ICP. Using ICP recording protocols, many key parameters of erectile function can be measured from the ICP response curve. The ICP measurement provides more information than the apomorphine-induced penile erection test, and is cheaper than telemetric monitoring of the corpus spongiosum penis, making this method the most popular one to evaluate erectile function. However, compared to the easily-performed APO-induced erectile function test, successful ICP recordings require attention to detail, practice, and adherence to the operation method. In this work, an introduction to ICP recording in rats is provided to complement the procedure efficiently.

Intracavernosal pressure recording (ICP) is an important method to evaluate the erectile function of experimental animals. Here, a detailed protocol is demonstrated for the recording procedure of ICP by catheterizing the crura penis and then electrically stimulating the cavernous nerves in rats.

تسجيل الضغط إينتراكافيرنوسال لتقييم وظيفة الانتصاب في القوارض

Erectile dysfunction (ED) is defined as the inability to attain or keep an erection of the penis, and this has become a prevalent male sexual disorder. ...

Induction of Right Ventricular Failure by Pulmonary Artery Constriction and Evaluation of Right Ventricular Function in Mice

The mechanism of right ventricular failure (RVF) requires clarification due to the uniqueness, high morbidity, high mortality, and refractory nature of RVF. Previous rat models imitating RVF progression have been described. Compared with rats, mice are more accessible, economical, and widely used in animal experiments. We developed a pulmonary artery constriction (PAC) approach which is comprised of banding the pulmonary trunk in mice to induce right ventricular (RV) hypertrophy. A special surgical latch needle was designed that allows for easier separation of the aorta and the pulmonary trunk. In our experiments, the use of this fabricated latch needle reduced the risk of arteriorrhexis and improved the surgical success rate to 90%. We used different padding needle diameters to precisely create quantitative constriction, which can induce different degrees of RV hypertrophy. We quantified the degree of constriction by evaluating the blood flow velocity of the PA, which was measured by noninvasive transthoracic echocardiography. RV function was precisely evaluated by right heart catheterization at 8 weeks after surgery. The surgical instruments made inhouse were composed of common materials using a simple process that is easy to master. Therefore, the PAC approach described here is easy to imitate using instruments made in the lab and can be widely used in other labs. This study presents a modified PAC approach that has a higher success rate than other models and an 8-week postsurgery survival rate of 97.8%. This PAC approach provides a useful technique for studying the mechanism of RVF and will enable an increased understanding of RVF.

Here, we provide a useful approach for studying the mechanism of right ventricular failure. A more convenient and efficient approach to pulmonary artery constriction is established using surgical instruments made inhouse. In addition, methods to evaluate the quality of this approach by echocardiography and catheterization are provided.

تحريض الفشل البطيني الأيمن عن طريق انقباض الشريان الرئوي وتقييم وظيفة البطين الأيمن في الفئران

The mechanism of right ventricular failure (RVF) requires clarification due to the uniqueness, high morbidity, high mortality, and refractory nature of ...