ويدعم سانديب كورانا من قبل المعاهد الوطنية للصحة (K08DKO81479). ويدعم فيكرانت Rachakonda التي كتبها (T32DK067872).

<ol>
	<li>Christensen, K. L., Mulvany, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Location+of+resistance+arteries.">Location of resistance arteries.</a> J Vasc Res. 38, 1-12 (2001).</li><li>Rietzschel, E. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxidized+low-density+lipoprotein+cholesterol+is+associated+with+decreases+in+cardiac+function+independent+of+vascular+alterations.">Oxidized low-density lipoprotein cholesterol is associated with decreases in cardiac function independent of vascular alterations.</a> Hypertension. 52, 535-541 (2008).</li><li>Hill, M. A., Ege, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Active+and+passive+mechanical+properties+of+isolated+arterioles+from+STZ-induced+diabetic+rats.+Effect+of+aminoguanidine+treatment.">Active and passive mechanical properties of isolated arterioles from STZ-induced diabetic rats. Effect of aminoguanidine treatment.</a> Diabetes. 43, 1450-1456 (1994).</li><li>Osol, G., Cipolla, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interaction+of+myogenic+and+adrenergic+mechanisms+in+isolated,+pressurized+uterine+radial+arteries+from+late-pregnant+and+nonpregnant+rats.">Interaction of myogenic and adrenergic mechanisms in isolated, pressurized uterine radial arteries from late-pregnant and nonpregnant rats.</a> Am J Obstet Gynecol. 168, 697-705 (1993).</li><li>Cipolla, M. J., McCall, A. L., Lessov, N., Porter, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reperfusion+decreases+myogenic+reactivity+and+alters+middle+cerebral+artery+function+after+focal+cerebral+ischemia+in+rats.">Reperfusion decreases myogenic reactivity and alters middle cerebral artery function after focal cerebral ischemia in rats.</a> Stroke. 28, 176-180 (1997).</li><li>Ren, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhanced+myogenic+response+in+the+afferent+arteriole+of+spontaneously+hypertensive+rats.">Enhanced myogenic response in the afferent arteriole of spontaneously hypertensive rats.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 298, H1769-H1775 (2010).</li><li>Hayashi, K., Epstein, M., Saruta, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Altered+myogenic+responsiveness+of+the+renal+microvasculature+in+experimental+hypertension.">Altered myogenic responsiveness of the renal microvasculature in experimental hypertension.</a> J Hypertens. 14, 1387-1401 (1996).</li><li>Schubert, R., Mulvany, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+myogenic+response:+established+facts+and+attractive+hypotheses.">The myogenic response: established facts and attractive hypotheses.</a> Clin Sci (Lond). 96, 313-326 (1999).</li><li>Bridges, L. E., Williams, C. L., Pointer, M. A., Awumey, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenteric+artery+contraction+and+relaxation+studies+using+automated+wire+myography.">Mesenteric artery contraction and relaxation studies using automated wire myography.</a> J Vis Exp. , (2011).</li><li>Buus, N. H., Vanbavel, E., Mulvany, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differences+in+Sensitivity+of+Rat+Mesenteric+Small+Arteries+to+Agonists+When+Studied+as+Ring+Preparations+or+as+Cannulated+Preparations.">Differences in Sensitivity of Rat Mesenteric Small Arteries to Agonists When Studied as Ring Preparations or as Cannulated Preparations.</a> British Journal of Pharmacology. 112, 579-587 (1994).</li><li>Falloon, B. J., Stephens, N., Tulip, J. R., Heagerty, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+small+artery+sensitivity+and+morphology+in+pressurized+and+wire-mounted+preparations.">Comparison of small artery sensitivity and morphology in pressurized and wire-mounted preparations.</a> Am J Physiol. 268, H670-H678 (1995).</li><li>Schubert, R., Wesselman, J. P. M., Nilsson, H., Mulvany, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noradrenaline-induced+depolarization+is+smaller+in+isobaric+compared+to+isometric+preparations+of+rat+mesenteric+small+arteries.">Noradrenaline-induced depolarization is smaller in isobaric compared to isometric preparations of rat mesenteric small arteries.</a> Pflugers Archiv-European Journal of Physiology. 431, 794-796 (1996).</li><li>Khurana, S., Raina, H., Pappas, V., Raufman, J. P., Pallone, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+deoxycholylglycine,+a+conjugated+secondary+bile+acid,+on+myogenic+tone+and+agonist-induced+contraction+in+rat+resistance+arteries.">Effects of deoxycholylglycine, a conjugated secondary bile acid, on myogenic tone and agonist-induced contraction in rat resistance arteries.</a> PLoS One. 7, e32006 (2012).</li><li>Bayliss, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+the+local+reactions+of+the+arterial+wall+to+changes+of+internal+pressure.">On the local reactions of the arterial wall to changes of internal pressure.</a> J Physiol. 28, 220-231 (1902).</li><li>Hughes, J. M., Bund, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arterial+myogenic+properties+of+the+spontaneously+hypertensive+rat.">Arterial myogenic properties of the spontaneously hypertensive rat.</a> Exp Physiol. 87, 527-534 (2002).</li><li>Mulvany, M. J., Halpern, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+properties+of+vascular+smooth+muscle+cells+in+situ.">Mechanical properties of vascular smooth muscle cells in situ.</a> Nature. 260, 617-619 (1976).</li><li>Raina, H., Zacharia, J., Li, M., Wier, W. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+by+Ca2+/calmodulin+of+an+exogenous+myosin+light+chain+kinase+in+mouse+arteries.">Activation by Ca2+/calmodulin of an exogenous myosin light chain kinase in mouse arteries.</a> J Physiol. 587, 2599-2612 (2009).</li><li>Fenger-Gron, J., Mulvany, M. J., Christensen, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenteric+blood+pressure+profile+of+conscious,+freely+moving+rats.">Mesenteric blood pressure profile of conscious, freely moving rats.</a> J Physiol. 488 (Pt 3), 753-760 (1995).</li><li>Davis, M. J., Hill, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Signaling+mechanisms+underlying+the+vascular+myogenic+response).">Signaling mechanisms underlying the vascular myogenic response).</a> Physiol Rev. 79, 387-423 (1999).</li><li>Osmond, J. M., Mintz, J. D., Dalton, B., Stepp, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Obesity+increases+blood+pressure,+cerebral+vascular+remodeling,+and+severity+of+stroke+in+the+Zucker+rat.">Obesity increases blood pressure, cerebral vascular remodeling, and severity of stroke in the Zucker rat.</a> Hypertension. 53, 381-386 (2009).</li><li>Ge, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endogenously+produced+20-HETE+modulates+myogenic+and+TGF+response+in+microperfused+afferent+arterioles.">Endogenously produced 20-HETE modulates myogenic and TGF response in microperfused afferent arterioles.</a> Prostaglandins Other Lipid Mediat. 102-103, 42-48 (2013).</li><li>Ryan, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Placental+ischemia+impairs+middle+cerebral+artery+myogenic+responses+in+the+pregnant+rat.">Placental ischemia impairs middle cerebral artery myogenic responses in the pregnant rat.</a> Hypertension. 58, 1126-1131 (2011).</li><li>Bagi, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Type+2+diabetic+mice+have+increased+arteriolar+tone+and+blood+pressure:+enhanced+release+of+COX-2-derived+constrictor+prostaglandins.">Type 2 diabetic mice have increased arteriolar tone and blood pressure: enhanced release of COX-2-derived constrictor prostaglandins.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 25, 1610-1616 (2005).</li></ol>

الكتاب ليس لديهم الصراعات المالية.

خطوات حاسمة، استكشاف الأخطاء وإصلاحها وتعديلها في إعداد سفينة إسوي الضغط نموذجي، يتم ضغط الشريان في 70 مم زئبق بين اثنين قنية الزجاج مع perfused دافئ (37 درجة مئوية) PSS. بعد 30-45 دقيقة والشرايين تطوير MT، التي تتميز بانخفاض عفوية في قطر أن يستقر في 20-30 دقيقة. الشرايين المقاومة من مختلف سرير الأوعية الدموية تطوير MT متغير. على سبيل المثال مقاومة الفئران الشرايين المساريقي تطوير MT ~ 25٪ من PD، في حين الشرايين cremastric قد تحقق MT ~ 40٪ من PD. يجب التخلص من الشرايين التي لا تتطور MT غضون 60 دقيقة. قد تختلف هذه المدة وفقا لسرير والأنواع الأوعية الدموية. الشرايين مع عدم كفاية استجابة لPHE وأدن تشافيز كما ينبغي التخلص منها. الرقم الهيدروجيني ودرجة حرارة PSS يكون لها تأثير كبير على تطوير MT. درجة الحموضة من جهاز الأمن الوقائي، الذي يجلس لفترات طويلة دون تهوية، قد يزيد. بالإضافة إلى ذلك، في غرفة من غير المرجح أن د الشرايين درجة الحرارةevelop MT. وبالتالي PSS ينبغي الغازية في أقرب وقت ممكن باستخدام خليط الغاز المشار إليها في القسم البروتوكول ودرجة حرارة غرفة نضح ينبغي رصدها بشكل مستمر والحفاظ على ~ 37 درجة مئوية باستخدام سخان التدفق. وبما أن هذه التجارب هي 3-5 ساعة في مدة، تتعرض غرف نضح والأنابيب المرتبطة PSS لفترات طويلة؛ يمكن الملح رواسب تتراكم في كل من غرفة والأنابيب التي قد تتداخل مع تجارب لاحقة. ومن هنا فمن الأهمية بمكان أن يغسل جيدا غرفة نضح وشطف الأنابيب مع دي المتأينة المياه بعد كل تجربة. وبالمثل، يجب الحرص على تنظيف شامل الطبق المغلفة sylgard تستخدم لتشريح مع دي المتأينة المياه بعد كل تشريح. القيود على الرغم من أهميته، PM ديها قيود مختلفة. أولا، فإن تكلفة الجماعية لحيازة PM معدات عالية (~ 22،000 $) ويمكن أن تكون باهظة على وجه اليقين لاإفطار. ويظهر على قائمة مفصلة من المعدات في الجدول 3 ثانيا، هناك حاجة إلى الأوعية جديدة لمعظم التجارب؛ ومن ثم الموت الرحيم حيوان جديد لكل تجربة، إضافة إلى التكلفة الإجمالية. الثالث، تشريح الشرايين المساريقي صغيرة مملة ويتطلب أدوات أخرى مثل المجهر تشريح وتسليخ مجهري الأدوات، التي هي عرضة للضرر. رابعا، هناك منحنى التعلم. اكتساب الخبرات في إنشاء وPM في المختبر يتطلب الموظفين المتفانين والوقت والجهد. أهمية فيما يتعلق بأساليب أخرى والتطبيقات المستقبلية البروتوكولات التجريبية إسوي الضغط ومتساوي القياس هما النهج الرئيسية المستخدمة لتحديد تفاعل الأوعية الدموية. وعلى النقيض من الاستعدادات إسوي الضغط، يتم تحديد vasoactivity في الأعمال التحضيرية متساوي القياس عن طريق قياس الأوعية الدموية توتر العضلات الملساء باستخدام نظام الأسلاك مخطاط العضل. بالإضافة إلى الاختلافات في المعدات المطلوبة لهذه البروتوكولات التجريبية اثنين، ناهض-Iانكماش nduced مختلفة بين هذه المناهج التجريبية في ما يخص الحجم، الوقت مسار واتجاه جدار الأوعية الدموية التوتر 11،19. بسبب الراحة التقنية والقيود، سواء الاستعدادات تخدم أدوارا هامة. على سبيل المثال، لأنه من الأسهل للحفاظ على التركيز على التحضيرات المجهرية متساوي القياس، وغالبا ما تستخدم لقياس وقت واحد من تفاعل الأوعية الدموية وتغيرات في الأوعية الدموية العضلات الملساء الكالسيوم 2+. من ناحية أخرى، وأفضل طريقة لتقييم نشاط عضلي في الأعمال التحضيرية الضغط التي تعتبر لتقليد في الجسم الحي الحالة الفسيولوجية عن كثب. ويرد استعراض مفصل من الاختلافات بين هذه الاستعدادات سابقا 19. في الختام، الضغط تخطيط العضل هو أسلوب موثوق بها لدراسة استجابة عضلي في الأوعية مقاومة صغيرة في ظروف شبه الفسيولوجية. على الرغم من قصوره، قدمت PM مساهمات كبيرة في فهم التغيرات فيوظيفة الأوعية الدموية في ظروف طبيعية ومرضية 3-7،20-23. تنظيم نغمة الأوعية الدموية الجهازية معقد للغاية وينطوي على عوامل محلية والعصبية الهرموني وبالتالي عزل دور آليات محددة تنظم لهجة الأسرة الأوعية الدموية في الجسم الحي صعبة. في هذا الصدد، خارج الحي الاستعدادات الشرياني الضغط تخدم بدائل ممتازة. ويشار إلى المهتمين في آليات تنبيغ MT والاستجابة عضلي لسبق نشرها ملاحظات ممتازة 15،19. في المستقبل قد نرى التقدم في المعدات التي تعمل على دمج تقييم استجابة عضلي والتغيرات في رسل المصب مثل الكالسيوم 2+ على الرغم من أنه من غير المرجح أننا سوف تشهد تخفيضا في تكاليف المعدات. لكن، وكما تم اعتماد هذه التقنية من قبل العلماء مع خلفية متنوعة، ونحن من المرجح أن نرى تطبيقه لتقييم التغيرات في وظيفة الاوعية الدموية الدقيقة في أمراض أخرى غير ارتفاع ضغط الدم والسكري وصدمة مثل تليف الكبد، وديmentia الخ

الشرايين مقاومة صغيرة هي المحددات الرئيسية للSVR وتلعب دورا هاما في الفيزيولوجيا المرضية لكثير من الأمراض 1،2. أمراض مثل السكري 3، 4 الحمل، نقص التروية، ضخه 5، والسمنة وارتفاع ضغط الدم 6،7 كثيرا ما ترتبط مع وظيفة الاوعية الدموية الدقيقة المتغيرة. يمكن تخطيط العضل الأوعية الدموية ليس فقط توفير معلومات هامة إلى تغيرات في وظيفة الاوعية الدموية الدقيقة في أمراض مختلفة ولكنها تساعد أيضا في تحديد الأهداف العلاجية وتقييم فعالية مركبات فعال في الأوعية. وقد درس وظيفة الأوعية الدموية باستخدام الشرايين الصغيرة المعزولة في ظل ظروف سفينة متساوي القياس أو إسوي الضغط 8. وتقدم وصفا تفصيليا للتخطيط العضل متساوي القياس في أماكن أخرى 9. ولكن هناك اختلافات في البيانات التي تم الحصول عليها من متساوي القياس مقابل الاستعدادات إسوي الضغط 10-12. منذ الاستعدادات الشرايين الضغط تسمح للدراسة وظيفة الاوعية الدموية الدقيقة في ظروف شبه الفسيولوجية، والنتائج التي تم الحصول عليها قد ترتبط بشكل أفضل مع السلوك في الجسم الحي من السرير الوعائي 8،13. في عام 1902 وصف بايليس أول تأثير الضغط على الأوعية الدموية بطريق قطر 14. ولاحظ في الشرايين مقاومة صغيرة من مختلف سرير الأوعية الدموية من الأرانب والقطط والكلاب التي تم إتباع انخفاض في الضغط من قبل توسع الأوعية، وأعقب زيادة في الضغوط التي تضيق الأوعية. وتعرف هذه الظاهرة باسم استجابة عضلي. لاحظ بايليس والمحققين لاحقا أنه في الظروف إسوي الضغط الشرايين مقاومة صغيرة تتطور انقباض مستمر المعروفة باسم MT 15،16. كلا استجابة عضلي وMT يمكن تقييمها باستخدام الضغط تخطيط العضل (PM) تقنية. يستخدم PM أساسا لتحديد vasoactivity من الشرايين الصغيرة والأوردة والأوعية الأخرى. بالإضافة إلى تقييم أثر فعال في الأوعية المركبات على قطر الأوعية الدموية، وPM - كما يشير الاسم - يستخدم لتقييم داخل الأوعية الفصل الضغط بوساطةفي نفس الفئة على قطر الأوعية الدموية. على مدى العقود القليلة الماضية التقدم في برامج الكمبيوتر، مما عزز المجهر الفيديو والزجاج ماصة سحب، جعلت PM اسهل أداء. ومع ذلك، تشريح قطاعات سليمة قابلة للحياة من الأوعية الدموية الصغيرة لا تزال شاقة وصعبة في بعض الأحيان. نحن هنا الخطوط العريضة لبروتوكول مفصلة لدراسة استجابة عضلي في الشرايين مقاومة المساريقي صغيرة معزولة عن الفئران.

<table border="1">
		<tbody>
		 <tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Chemical</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Acetylcholine</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>A6625</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Calcium chloride (CaCl2)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>223506</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>D-(+)-Glucose</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>G5767</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Ethylene glycol-bis(2-aminoethylether)-N,N,N',N'-tetra acetic acid (EGTA)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>E3889</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Ethylene diamine tetra acetic acid (EDTA)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>E9884</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>H3784</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Magnesium sulfate (MgSO4)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>M7506</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>MOPS</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>M5162</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Phenylephrine</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P6126</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Potassium chloride (KCl)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P3911</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Potassium phosphate (KH2PO4)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P5655</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Sodium bicarbonate (NaHCO3 )</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>S6014</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Sodium chloride (NaCl)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>S7653</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Sodium hydroxide (NaOH)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>S5881</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Sodium nitroprusside</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>13451</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Sodium phosphate monobasic monohydrate (NaH2PO4)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>S9638</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Sodium pyruvate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P8574</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Table 1.</td>
		 </tr>
		 <tr>
		 <td></td>
		 <td></td>
		 <td></td>
		 <td>
 <table border="1">
		<tbody>
		 <tr>
			<td>Physiological salt solution (1000 ml)</td>
			<td> mM</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>KCl</td>
			<td>4.9</td>
			<td>0.365 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>112</td>
			<td>6.545 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>MgSO4.7H2O</td>
			<td>1.2</td>
			<td>0.296 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>KH2PO4</td>
			<td>1.2</td>
			<td>0.163 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>11.5</td>
			<td>2.072 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>NaHCO3</td>
			<td>26</td>
			<td>2.184 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>10</td>
			<td>2.383 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>CaCl2</td>
			<td>2</td>
			<td>2 ml (1M stock)</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>De-ionized water</td>
			<td></td>
			<td>998 ml</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Ca2+ free physiological salt solution (100 ml)</td>
			<td> mM</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>KCl</td>
			<td>4.9</td>
			<td>0.036 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>112</td>
			<td>0.645 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>MgSO4.7H2O</td>
			<td>1.2</td>
			<td>0.029 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>KH2PO4</td>
			<td>1.2</td>
			<td>0.016 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>11.5</td>
			<td>0.207 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>NaHCO3</td>
			<td>26</td>
			<td>0.218 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>10</td>
			<td>0.238 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>EGTA </td>
			<td>0.39</td>
			<td>0.015 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Sodium nitroprusside </td>
			<td>0.1</td>
			<td>0.0026 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>De-ionized water</td>
			<td></td>
			<td>100 ml</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Dissection solution, stock (500 ml)</td>
			<td> mM</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>145</td>
			<td>21.18 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>KCl</td>
			<td>4.7</td>
			<td>0.875 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>MgSO4</td>
			<td>1.2</td>
			<td>0.739 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>MOPS</td>
			<td>2</td>
			<td>1.049 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>EDTA</td>
			<td>0.02</td>
			<td>0.019 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>De-ionized water</td>
			<td></td>
			<td>500 ml</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Working dissection solution (100 ml)</td>
			<td> mM</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Dissection solution stock</td>
			<td>20 ml</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>1.2</td>
			<td>0.091 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>NaH2PO4</td>
			<td>5</td>
			<td>0.016 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Sodium pyruvate</td>
			<td>2</td>
			<td>0.022 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>CaCl2</td>
			<td>2</td>
			<td>0.2 ml (1M stock)</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>De-ionized water</td>
			<td></td>
			<td>79.8 ml</td>
		 </tr>
	 </tbody>
</table>
 </td>
	 </tr>
		 <tr>
		 <td></td>
		 <td></td>
		 <td></td>
		 <td>Table 2. Composition of Experimetnal solutions</td>
	 </tr>
		 <tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Equipment</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>CCD Monochrome Camera</td>
			<td>The imaging Source</td>
			<td>DMK 21AU04</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Single inline solution heater</td>
			<td>Warner Instruments</td>
			<td>64-0102</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Thermistor</td>
			<td>Warner Instruments</td>
			<td>64-0108</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Dual automatic temperature controller</td>
			<td>Warner Instruments</td>
			<td>TC-344B</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Flaming/Brown micropipette puller</td>
			<td>Sutter Instruments </td>
			<td>P-97</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Fluorescence System Interface</td>
			<td>IonOptix</td>
			<td>model FSI-700</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Forceps and scissors </td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td></td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Ion Wizard-Core and Analysis</td>
			<td>IonOptix</td>
			<td>Ion Wizard 6.0</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Laboratory tubing</td>
			<td>Silastic </td>
			<td>508-005</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Male Sprague Dawley rat</td>
			<td>Harlan Laboratories</td>
			<td></td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Master flex console drive</td>
			<td>Cole-parmer</td>
			<td></td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Milli-Q Plus Ultrapure Water System</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>ZD5211584</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Ophthalmic monofilament nylon suture </td>
			<td>Ethicon </td>
			<td>9007G</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Photometry and Dimensioning Microscope</td>
			<td>Motic</td>
			<td>AE31</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Pressure Servo Controller with peristaltic pump and pressure transducer</td>
			<td>Living Systems Instrumentation</td>
			<td>PS-200</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Stereomicroscope</td>
			<td>Nikon Instruments Inc</td>
			<td>SMZ660</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Vessel Chamber</td>
			<td>Living Systems Instrumentation</td>
			<td>CH-1</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Dissection dish</td>
			<td>Living Systems Instrumentation</td>
			<td>DD-90-S</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Thin Wall Glass Capillaries</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>TW120-6</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Microforge</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td>51550</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Table 3.</td>
		 </tr>
	 </tbody>
</table>

assessing myogenic response and vasoactivity in resistance mesenteric arteries using pressure myography

الشرايين مقاومة صغيرة انقباض وتمدد على التوالي ردا على زيادة أو نقصان الضغط داخل اللمعة. هذه الظاهرة المعروفة باسم استجابة عضلي هو المنظم الرئيسي لتدفق الدم المحلي. في ظروف إسوي الضغط الشرايين مقاومة صغيرة تتطور يستمر انقباض عضلي يعرف لهجة (MT)، والذي هو أحد المحددات الرئيسية لمقاومة الأوعية الدموية الجهازية (SVR). وبالتالي، خارج الحي الاستعدادات الضغط في الشرايين مقاومة صغيرة هي الأدوات الرئيسية لدراسة وظيفة الاوعية الدموية الدقيقة في ولايات شبه الفسيولوجية. لتحقيق ذلك، هي التي شنت على قطاع سليمة المعزولة حديثا في الشريان مقاومة صغيرة (قطر ~ 260 ميكرون) على اثنين قنية كوب صغير والضغط. هذه الاستعدادات الشرايين تحتفظ معظم الخصائص في الجسم الحي وتقييم تصريح لهجة الأوعية الدموية في الوقت الحقيقي. هنا نقدم بروتوكول مفصلة لتقييم vasoactivity في ضغط الشرايين الصغيرة مقاومة المساريقي من الفئران. هذه الشرايين تطويرتضيق الأوعية المستدام - ما يقرب من 25٪ من القطر الأقصى - عند الضغط على 70 مم زئبقي. ويمكن استخدام هذه الاستعدادات الشرايين لدراسة تأثير مجمعات الفحص على العلاقة بين الضغط داخل الشريان وvasoactivity وتحديد التغيرات في وظيفة الاوعية الدموية الدقيقة في النماذج الحيوانية من الأمراض المختلفة.

ويرد التمثيل التخطيطي الضغط نموذجي مخطاط العضل انشاء في الشكل 1. ومقنى طرفي السفينة مع micropipette الزجاج والمضمون مع الغرز على الجانبين. عبر أنابيب ومحبس مفتوحة، يتم توصيل قنية واحد إلى الضغط المنظم التي تسيطر عليها مضاعفات. يتم توصيل قنية أخرى إلى محبس مغلقة. وperfused لغرفة مع ويلاحظ من خلال مجهر مقلوب متصلة كاميرا CCD PSS وقطر الأوعية الدموية التغييرات. وحضنت الجزء الشرياني الضغط على 70 مم زئبقي في طازجة PSS الدافئ، الذي يتدفق من خلال غرفة الشرايين في 2-4 مل / دقيقة وشفط بها. ويتم رصد قطر الشرياني وتسجيلها باستخدام videomicroscopy والكشف عن الحافة البرمجيات. بعد ~ 40 دقيقة، وقطاعات الشرايين تضيق بشكل عفوي بنسبة 20-40٪ من قطرها بدايتها (الشكل 2A). في أيدينا الشرايين مقاومة الفئران الصغيرة انقباض بنسبة 25-30٪ (متوسط ​​فاريوفاق وفقا للإعدادات، المشغل، وسرير الشرياني). ثم، يتم تقييم الجدوى الفنية من خلال عائي ومضيق للأوعية الردود على أدن تشافيز (1 ميكرومتر) والفنيل ألانين (1 ميكرومتر)، على التوالي (الشكل 2A). في حين موسعات أخرى يمكن استخدامها، أدن تشافيز يحث تعتمد على البطانة توسع الأوعية وبالتالي من المفيد في تقييم كل من البطانية وكذلك قابلية العضلات الملساء في الأوعية الدموية. في وقت لاحق هذا الجزء الشرياني وإعادة المحتضنة في PSS وبمجرد أن يستقر في قطر، وانها مستعدة للتجربة. في نهاية كل تجربة، يتم تحضين شرائح الشرايين في كا 2+ مجانا PSS لقياس PD (الشكل 2B). يتم جدولتها أقطار المسجلة في الشكل 2A و 2B في الشكل 2C. مطلق MT هو الفرق بين PD وقطر مستقر يتحقق على تضيق الأوعية عفوية في 70 مم زئبق. وبالتالي، فإن MT يلاحظ من تتبع المبين هو 33٪ من PD. كما رأينا هنا، استجابة لأدن تشافيز (1 ميكرومتر) هي شركة جنرال الكتريك<html> تشبه nerally لتلك التي لوحظت ل Ca 2+ مجانا PSS. لاحظ أنه في التجارب تقييم توسع الأوعية، قد تكون هناك حاجة إلى ذلك مسبقة من مضيق للأوعية. لتحديد استجابة عضلي، تتعرض الفئران شرائح الشرايين المساريقي إلى زيادة الضغط داخل اللمعة الخطوات ما بين 20 و 100 مم زئبق. يتم عرض مثال في الشكل 3A. يسمح الشرايين لتحقيق القطر مستقر بعد كل خطوة (~ 5 دقائق، الخطوط المتقطعة). وفي وقت لاحق، يتعرض هذا الجزء الشرياني نفسه لضغوط للاستجابة في كا 2+ خالية PSS مع 0.39 ملي EGTA و 0.1 ملي SNP (الشكل 3A). قطر حققت في نهاية كل خطوة الضغط قد يكون كما هو مبين في الرسم البياني خط (الشكل 3B). MT المحسوبة على النحو الفرق في المئة في قطر ل Ca 2+ المحتوية مقابل الكالسيوم 2+ خالية PSS في كل الضغوط قد تكون على النحو المبين خط أو شريط الرسم البياني (الشكل 3C). <html> الإقليم الشمالي &quot;FO: المحافظة على together.within صفحة =&quot; دائما &quot;&gt; <img alt="الشكل 1" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50997/50997fig1highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50997/50997fig1.jpg" /> الشكل 1: مثال على الضغط مخطاط العضل انشاء (A) يشار إلى المكونات الرئيسية. انظر الجدول 3 للاطلاع على قائمة بجميع المعدات. ويرد (B) سرير المساريقي المقطوع معقود على طبق المغلفة sylgard. يظهر (C) A الكرتون من المساريقي الممرات الشرايين. وتمثل النقاط السوداء مواقف دبوس. يمثل القسم متقطع شريحة الشرايين إلى أن تشريح. أشرطة خضراء صغيرة تشير إلى مواقع شق على الشريان. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50997/50997fig1large.jpg" target="_blank">انقر هنا لعرض أكبر شخصية</a> . /ftp_upload/50997/50997fig2.jpg &quot;/&gt; الشكل 2: (A) كما أشار البحث عن المفقودين، وقطره من الشرايين المساريقي صغيرة من الفئران، عندما ضغط على 70 مم زئبقي، ويقلل من تلقاء أنفسهم. إضافة أدن تشافيز (1 ميكرومتر) زادت قطر (إلى قطر بدءا القريب). إضافة الفنيل ألانين (1 ميكرومتر) إلى حمام الأنسجة تنخفض قطر الشرايين. (B) الحضانة في كا 2+ خالية PSS يزيد قطرها الشرايين. وتبويبها (C) ويبلغ قطر شريحة الشرايين ضغط واحد في مختلف perfusates هو مبين في A و B. <img alt="الشكل (3)" fo:content-width="5.5in" fo:src="/files/ftp_upload/50997/50997fig3highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50997/50997fig3.jpg" /> الرقم 3: (A) قطر الشرياني يتم تسجيلها بشكل مستمر مع زيادة الضغط داخل اللمعة بشكل متزايد في وجود جهاز الأمن الوقائي والكالسيوم 2+ خاليةPSS. (B) منحنى خط قطرها الشرايين التي تحققت في خطوة كل الضغوط. (C) بار الرسم البياني للMT يتحقق في كل خطوة الضغط. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50997/50997fig3large.jpg" target="_blank">انقر هنا لعرض أكبر شخصية</a> .

Watch this Scientific Journal Video about Assessing Myogenic Response and Vasoactivity In Resistance Mesenteric Arteries Using Pressure Myography at JoVE.com

Assessing Myogenic Response and Vasoactivity In Resistance Mesenteric Arteries Using Pressure Myography

يستخدم تخطيط العضل الضغط لتقييم vasoactivity من الشرايين الصغيرة التي تطور انقباض مستمر عند الضغط. توفر هذه المخطوطة بروتوكول مفصلة لتقييم في قطاعات معزولة الشرايين المساريقي صغيرة من الفئران، vasoactivity وتأثير الضغط داخل اللمعة على قطر الأوعية الدموية.

تقييم استجابة عضلي وVasoactivity في الشرايين المقاومة مساريقي عن طريق تخطيط العضل الضغط

Small resistance arteries constrict and dilate respectively in response to increased or decreased intraluminal pressure; this phenomenon known as myogenic ...

assessing-myogenic-response-vasoactivity-resistance-mesenteric

Google

Research

JoVE Journal

Medicine

16.6K Views.  Georgia Regents University.  يستخدم تخطيط العضل الضغط لتقييم vasoactivity من الشرايين الصغيرة التي تطور انقباض مستمر عند الضغط. توفر هذه المخطوطة بروتوكول مفصلة لتقييم في قطاعات معزولة الشرايين المساريقي صغيرة من الفئران، vasoactivity وتأثير الضغط داخل اللمعة على قطر الأوعية ا?...

Video: Assessing Myogenic Response and Vasoactivity In Resistance Mesenteric Arteries Using Pressure Myography

Mesenteric Artery Contraction and Relaxation Studies Using Automated Wire Myography

Proximal resistance vessels, such as the mesenteric arteries, contribute substantially to the peripheral resistance. These small vessels of between 100-400 &mu;m in diameter function primarily in directing blood flow to various organs according to the overall requirements of the body. The rat mesenteric artery has a diameter greater than 100 &mu;m. The myography technique, first described by Mulvay and Halpern1, was based on the method proposed by Bevan and Osher2. The technique provides information about small vessels under isometric conditions, where substantial shortening of the muscle preparation is prevented. Since force production and sensitivity of vessels to different agonists is dependent on the extent of stretch, according to active tension-length relation, it is essential to conduct contraction studies under isometric conditions to prevent compliance of the mounting wires. Stainless steel wires are preferred to tungsten wires because of oxidation of the latter, which affects recorded responses3.The technique allows for the comparison of agonist-induced contractions of mounted vessels to obtain evidence for normal function of vascular smooth muscle cell receptors.
We have shown in several studies that isolated mesenteric arteries that are contracted with phenylyephrine relax upon addition of cumulative concentrations of extracellular calcium (Ca2+e). The findings led us to conclude that perivascular sensory nerves, which express the G protein-coupled Ca2+-sensing receptor (CaR), mediate this vasorelaxation response. Using an automated wire myography method, we show here that mesenteric arteries from Wistar, Dahl salt-sensitive(DS) and Dahl salt-resistant (DR) rats respond differently to Ca2+e. Tissues from Wistar rats showed higher Ca2+-sensitivity compared to those from DR and DS. Reduced CaR expression in mesenteric arteries from DS rats correlates with reduced Ca2+e-induced relaxation of isolated, pre-contracted arteries. The data suggest that the CaR is required for relaxation of mesenteric arteries under increased adrenergic tone, as occurs in hypertension, and indicate an inherent defect in the CaR signaling pathway in Dahl animals, which is much more severe in DS.
The method is useful in determining vascular reactivity ex vivo in mesenteric resistance arteries and similar small blood vessels and comparisons between different agonists and/or antagonists can be easily and consistently assessed side-by-side6,7,8.

An automated myography method for force measurements in isolated mesenteric arteries is described. It employs a Mulvany-Halpern Auto Dual Wire Myograph 510A to determine responses to phenylephrine and extracellular calcium. The method allows consistent determination of isometric responses to agonists in small vessels of diameters of 60 - 300 &mu;m, independently.

الشريان المساريقي تقلص والاسترخاء عن طريق الدراسات الآلي Myography أسلاك

Proximal resistance vessels, such as the mesenteric arteries, contribute substantially to the peripheral resistance. These small vessels of between ...

Epidural Intracranial Pressure Measurement in Rats Using a Fiber-optic Pressure Transducer

Elevated intracranial pressure (ICP) is a significant problem in several forms of ischemic brain injury including stroke, traumatic brain injury and cardiac arrest. This elevation may result in further neurological injury, in the form of transtentorial herniation1,2,3,4, midbrain compression, neurological deficit or increased cerebral infarct2,4. Current therapies are often inadequate to control elevated ICP in the clinical setting5,6,7 . Thus there is a need for accurate methods of ICP measurement in animal models to further our understanding of the basic mechanisms and to develop new treatments for elevated ICP.
In both the clinical and experimental setting ICP cannot be estimated without direct measurement. Several methods of ICP catheter insertion currently exist. Of these the intraventricular catheter has become the clinical 'gold standard' of ICP measurement in humans8. This method involves the partial removal of skull and the instrumentation of the catheter through brain tissue. Consequently, intraventricular catheters have an infection rate of 6-11%9. For this reason, subdural and epidural cannulations have become the preferred methods in animal models of ischemic injury. 
Various ICP measurement techniques have been adapted for animal models, and of these, fluid-filled telemetry catheters10 and solid state catheters are the most frequently used11,12,13,14,15. The fluid-filled systems are prone to developing air bubbles in the line, resulting in false ICP readings. Solid state probes avoid this problem (Figure 1). An additional problem is fitting catheters under the skull or into the ventricles without causing any brain injury that might alter the experimental outcomes. Therefore, we have developed a method that places an ICP catheter contiguous with the epidural space, but avoids the need to insert it between skull and brain. 
An optic fibre pressure catheter (420LP, SAMBA Sensors, Sweden) was used to measure ICP at the epidural location because the location of the pressure sensor (at the very tip of the catheter) was found to produce a high fidelity ICP signal in this model. There are other manufacturers of similar optic fibre technologies13 that may be used with our methodology. Alternative solid state catheters, which have the pressure sensor located at the side of the catheter tip, would not be appropriate for this model as the signal would be dampened by the presence of the monitoring screw. 
Here, we present a relatively simple and accurate method to measure ICP. This method can be used across a wide range of ICP related animal models.

A novel technique to record the pressures within the skull is described. The minimally invasive method uses a fibre-optic pressure sensing system to accurately measure intracranial pressure (ICP) in anaesthetized rats without causing significant brain trauma. The technique may be used in a wide range of experimental models.

فوق الجافية قياس الضغط داخل الجمجمة في الفئران باستخدام محول ضغط الألياف الضوئية

Elevated intracranial pressure (ICP) is a significant problem in several forms of ischemic brain injury including stroke, traumatic brain injury and ...

Isolating and Using Sections of Bovine Mesenteric Artery and Vein as a Bioassay to Test for Vasoactivity in the Small Intestine

Mammalian gastrointestinal systems are constantly exposed to compounds (desirable and undesirable) that can have an effect on blood flow to and from that system. Changes in blood flow to the small intestine can result in effects on the absorptive functions of the organ. Particular interest in toxins liberated from feedstuffs through fermentative and digestive processes has developed in ruminants as an area where productive efficiencies could be improved. The video associated with this article describes an in vitro bioassay developed to screen compounds for vasoactivity in isolated cross-sections of bovine mesenteric artery and vein using a multimyograph. Once the blood vessels are mounted and equilibrated in the myograph, the bioassay itself can be used: as a screening tool to evaluate the contractile response or vasoactivity of compounds of interest; determine the presence of receptor types by pharmacologically targeting receptors with specific agonists; determine the role of a receptor with the presence of one or more antagonists; or determine potential interactions of compounds of interest with antagonists. Through all of this, data are collected real-time, tissue collected from a single animal can be exposed to a large number of different experimental treatments (an in vitro advantage), and represents vasculature on either side of the capillary bed to provide an accurate picture of what could be happening in the afferent and efferent blood supply supporting the small intestine.

The small intestine is frequently exposed to toxins that can influence blood flow and negatively impact nutrient absorption. Using a multimyograph and mesenteric artery and vein isolates, compounds or toxins of interest can be screened for vasoactivity.

عزل وعن طريق أقسام الأبقار الشريان والوريد المساريقي باعتباره الأحيائي لاختبار لVasoactivity في الأمعاء الدقيقة

Mammalian gastrointestinal systems are constantly exposed to compounds (desirable and undesirable) that can have an effect on blood flow to and from that ...

Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo

A complex integration of molecular and electrical signals is needed to transform a quiescent uterus into a contractile organ at the end of pregnancy. Despite the discovery of key regulators of uterine contractility, this process is still not fully understood. Transgenic mice provide an ideal model in which to study parturition. Previously, the only method to study uterine contractility in the mouse was ex vivo isometric tension recordings, which are suboptimal for several reasons. The uterus must be removed from its physiological environment, a limited time course of investigation is possible, and the mice must be sacrificed. The recent development of radiometric telemetry has allowed for longitudinal, real-time measurements of in vivo intrauterine pressure in mice. Here, the implantation of an intrauterine telemeter to measure pressure changes in the mouse uterus from mid-pregnancy until delivery is described. By comparing differences in pressures between wild type and transgenic mice, the physiological impact of a gene of interest can be elucidated. This technique should expedite the development of therapeutics used to treat myometrial disorders during pregnancy, including preterm labor.

Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo

This manuscript provides a protocol for implanting telemeters in the mouse for the purpose of measuring intrauterine pressures during pregnancy.

القياس عن بعد داخل الرحم لقياس ماوس مقلص الضغط<em&gt; في فيفو</em

A complex integration of molecular and electrical signals is needed to transform a quiescent uterus into a contractile organ at the end of pregnancy. ...

Trabecular Meshwork Response to Pressure Elevation in the Living Human Eye

The mechanical characteristics of the trabecular meshwork (TM) are linked to outflow resistance and intraocular pressure (IOP) regulation. The rationale behind this technique is the direct observation of the mechanical response of the TM to acute IOP elevation. Prior to scanning, IOP is measured at baseline and during IOP elevation. The limbus is scanned by spectral-domain optical coherence tomography at baseline and during IOP elevation (ophthalmodynamometer (ODM) applied at 30 g force). Scans are processed to enhance visualization of the aqueous humor outflow pathway using ImageJ. Vascular landmarks are used to identify corresponding locations in baseline and IOP elevation scan volumes. Schlemm canal (SC) cross-sectional area (SC-CSA) and SC length from anterior to posterior along its long axis are measured manually at 10 locations within a 1 mm segment of SC. Mean inner to outer wall distance (short axis length) is calculated as the area of SC divided by its long axis length. To examine the contribution of adjacent tissues to the effect IOP elevations, measurements are repeated without and with smooth muscle relaxation with instillation of tropicamide. TM migration into SC is resisted by TM stiffness, but is enhanced by the support of its attachment to adjacent smooth muscle within the ciliary body. This technique is the first to measure the living human TM response to pressure elevation in situ under physiological conditions within the human eye.

Trabecular meshwork (TM) migration into Schlemm&#8217;s canal space can be induced by acute pressure elevation by ophthalmodynamometer, and observed by spectral domain optical coherence tomography. The goal of this method is to quantify the morphometric response of the living outflow tract to acute pressure elevation in living tissues in situ.

استجابة الشبكة التربيقية إلى الارتفاع الضغط في العين البشرية المعيشة

The mechanical characteristics of the trabecular meshwork (TM) are linked to outflow resistance and intraocular pressure (IOP) regulation. The rationale ...

Forskolin-induced Swelling in Intestinal Organoids: An In Vitro Assay for Assessing Drug Response in Cystic Fibrosis Patients

Recently-developed cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR)-modulating drugs correct surface expression and/or function of the mutant CFTR channel in subjects with cystic fibrosis (CF). Identification of subjects that may benefit from these drugs is challenging because of the extensive heterogeneity of CFTR mutations, as well as other unknown factors that contribute to individual drug efficacy. Here, we describe a simple and relatively rapid assay for measuring individual CFTR function and response to CFTR modulators in vitro. Three dimensional (3D) epithelial organoids are grown from rectal biopsies in standard organoid medium. Once established, the organoids can be bio-banked for future analysis. For the assay, 30-80 organoids are seeded in 96-well plates in basement membrane matrix and are then exposed to drugs. One day later, the organoids are stained with calcein green, and forskolin-induced swelling is monitored by confocal live cell microscopy at 37 &#176;C. Forskolin-induced swelling is fully CFTR-dependent and is sufficiently sensitive and precise to allow for discrimination between the drug responses of individuals with different and even identical CFTR mutations. In vitro swell responses correlate with the clinical response to therapy. This assay provides a cost-effective approach for the identification of drug-responsive individuals, independent of their CFTR mutations. It may also be instrumental in the development of future CFTR modulators.

Forskolin-induced Swelling in Intestinal Organoids: An In Vitro Assay for Assessing Drug Response in Cystic Fibrosis Patients

This protocol describes an assay for measuring CFTR function and CFTR modulator responses in cultured tissue from subjects with cystic fibrosis (CF). Biopsy-derived intestinal organoids swell in a cAMP-driven fashion, a response that is defective (or strongly reduced) in CF organoids and can be restored by exposure to CFTR modulators.

Forskolin-الناجم عن تورم في الأمعاء Organoids: ل<em&gt; في المختبر</em&gt; الفحص لتقييم الاستجابة للدواء في التليف الكيسي المرضى

Recently-developed cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR)-modulating drugs correct surface expression and/or function of the mutant ...

A Cell Culture Model of Resistance Arteries

The myoendothelial junction (MEJ), a unique signaling microdomain in small diameter resistance arteries, exhibits localization of specific proteins and signaling processes that can control vascular tone and blood pressure. As it is a projection from either the endothelial or smooth muscle cell, and due to its small size (on average, an area of ~1 &#181;m2), the MEJ is difficult to study in isolation. However, we have developed a cell culture model called the vascular cell co-culture (VCCC) that allows for in vitro MEJ formation, endothelial cell polarization, and dissection of signaling proteins and processes in the vascular wall of resistance arteries. The VCCC has a multitude of applications and can be adapted to suit different cell types. The model consists of two cell types grown on opposite sides of a filter with 0.4 &#181;m pores in which the in vitro MEJs can form. Here we describe how to create the VCCC via plating of cells and isolation of endothelial, MEJ, and smooth muscle fractions, which can then be used for protein isolation or activity assays. The filter with intact cell layers can be fixed, embedded, and sectioned for immunofluorescent analysis. Importantly, many of the discoveries from this model have been confirmed using intact resistance arteries, underscoring its physiological relevance.

A cell culture model of resistance arteries is described, allowing for the dissection of signaling pathways in endothelium, smooth muscle, or between endothelium and smooth muscle (the myoendothelial junction). The selective application of agonists or protein isolation, electron microscopy, or immunofluorescence can be utilized using this cell culture model.

نموذج خلية ثقافة مقاومة الشرايين

The myoendothelial junction (MEJ), a unique signaling microdomain in small diameter resistance arteries, exhibits localization of specific proteins and ...

Evaluation of Vascular Control Mechanisms Utilizing Video Microscopy of Isolated Resistance Arteries of Rats

This protocol describes the use of in vitro television microscopy to evaluate vascular function in isolated cerebral resistance arteries (and other vessels), and describes techniques for evaluating tissue perfusion using Laser Doppler Flowmetry (LDF) and microvessel density utilizing fluorescently labeled Griffonia simplicifolia (GS1) lectin. Current methods for studying isolated resistance arteries at transmural pressures encountered in vivo and in the absence of parenchymal cell influences provide a critical link between in vivo studies and information gained from molecular reductionist approaches that provide limited insight into integrative responses at the whole animal level. LDF and techniques to selectively identify arterioles and capillaries with fluorescently-labeled GS1 lectin provide practical solutions to enable investigators to extend the knowledge gained from studies of isolated resistance arteries. This paper describes the application of these techniques to gain fundamental knowledge of vascular physiology and pathology in the rat as a general experimental model, and in a variety of specialized genetically engineered &#34;designer&#34; rat strains that can provide important insight into the influence of specific genes on important vascular phenotypes. Utilizing these valuable experimental approaches in rat strains developed by selective breeding strategies and new technologies for producing gene knockout models in the rat, will expand the rigor of scientific premises developed in knockout mouse models and extend that knowledge to a more relevant animal model, with a well understood physiological background and suitability for physiological studies because of its larger size.

This manuscript describes in vitro video microscopy protocols for evaluating vascular function in rat cerebral resistance arteries. The manuscript also describes techniques for evaluating microvessel density with fluorescently labeled lectin and tissue perfusion using Laser Doppler Flowmetry.

تقييم آليات مراقبة الأوعية الدموية استخدام الفحص المجهري الفيديو الشرايين المقاومة المعزولة من الفئران

This protocol describes the use of in vitro television microscopy to evaluate vascular function in isolated cerebral resistance arteries (and other ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and drugs. It is widely used in many studies on the physiological functions of vascular smooth muscle, the pathogenesis of vascular diseases such as hypertension, and the development of smooth muscle relaxant drugs. The mouse is a widely used model animal with a large pool of disease models and genetically modified strains. We introduced this method to measure the isometric contraction of mouse mesenteric artery in detail. A 1.4-mm segment of mouse mesenteric resistance artery was isolated and mounted on a myograph chamber by passing two steel wires through its lumen. After equilibration and normalization steps, the vessel segment was potentiated by a high-K+ solution twice prior to the contraction assay. As an example of the application of this method in drug development, we measured the relaxant effect of a novel natural substance, neoliensinine, isolated from a Chinese herb, embryos of the lotus seed (Nelumbo nucifera Gaertn.) on mouse mesenteric arteries. The vessel segments mounted on the myograph chamber were stimulated with a high-K+ solution. When the force tension reached a stable sustained phase, cumulative doses of neoliensinine were added to the chamber. We found that neoliensinine had a dose-dependent relaxant effect on smooth muscle contraction, thus suggesting that it bears potential activity against hypertension. In addition, as the vessel segment can survive at least 4 hours after mounting and maintain contractility induced by the high-K+ solution for many times, we suggest that the wire myograph system may be used for the time-consuming process of drug screening.

The wire myograph technique is used to investigate vascular smooth muscle functions and screen new drugs. We report a detailed protocol for measuring the isometric contractility of the mouse mesenteric artery and for screening new relaxants of vascular smooth muscle.

متساوي القياس كونتراكتيليتي القياس الشريان المساريقي العلوي الماوس باستخدام أسلاك ميوجرافي

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Cardiac Response to &#946;-Adrenergic Stimulation Determined by Pressure-Volume Loop Analysis

Determination of the cardiac function is a robust endpoint analysis in animal models of cardiovascular diseases in order to characterize effects of specific treatments on the heart. Due to the feasibility of genetic manipulations the mouse has become the most common mammalian animal model to study cardiac function and to search for new potential therapeutic targets. Here we describe a protocol to determine cardiac function&#160;in vivo using pressure-volume loop measurements and analysis during basal conditions and under &#946;-adrenergic stimulation by intravenous infusion of increasing concentrations of isoproterenol. We provide a refined protocol including ventilation support taking into account the positive end-expiratory pressure to ameliorate negative effects during open-chest measurements, and potent analgesia (Buprenorphine) to avoid uncontrollable myocardial stress evoked by pain during the procedure. All together the detailed description of the procedure and discussion about possible pitfalls enables highly standardized and reproducible pressure-volume loop analysis, reducing the exclusion of animals from the experimental cohort by preventing possible methodological bias.

Cardiac Response to &amp;#946;-Adrenergic Stimulation Determined by Pressure-Volume Loop Analysis

Here we describe a cardiac pressure-volume loop analysis under increasing doses of intravenously infused isoproterenol to determine the intrinsic cardiac function and the &#946;-adrenergic reserve in mice. We use a modified open-chest approach for the pressure-volume loop measurements, in which we include ventilation with positive end-expiratory pressure.

استجابة القلب لتحفيز β الأدرينالية التي يحددها تحليل حلقة حجم الضغط

Determination of the cardiac function is a robust endpoint analysis in animal models of cardiovascular diseases in order to characterize effects of ...