인 Sandeep Khurana는 NIH (K08DKO81479)에 의해 지원됩니다. Vikrant Rachakonda은 (T32DK067872)에 의해 지원됩니다.

여기에 표시된 예는 조지아 리전트 대학에서 IACUC의 승인을 실험이다 - 프로토콜 번호 : # 2011-0408 시약 1. 준비 <ol><li> 해부 솔루션 주식을 준비 : 스톡 해부 용액 (5 배)의 500 ml를 들어, 21.18 g의 NaCl, 0.875 g의 KCl, 0.739 g을 황산, 1.049 g을 MOPS와 밀리 Q 물 450 ㎖ 중의 0.019 g의 EDTA를 녹인다. 1 N의 NaOH를 사용하여 7.3-7.4로 산도를 조정합니다. 밀리 Q 물 500 ml의에 볼륨을 확인합니다. 원액 7-10 일 저장할 수 있습니다. 화학 물질과 그들의 공급 업체의 목록은 표 1을 참조하십시오. mM의 농도는 표 2를 참조하십시오. </li><li> 작업 해부 솔루션을 준비 : 매일 신선한 작업 해부 솔루션을 준비합니다. 100 ㎖ 작업 솔루션의 경우, 0.091 g의 포도당, 밀리 Q 물 79.8 용액에 0.016 그램의 NaH 2 PO 4, 0.022 g의 피루브산 나트륨을 용해. volu을 가지고 0.2 ml의 1M 염화칼슘이 20 ml의 해부 솔루션 주식을 추가100 ㎖에 나. </li><li> 생리 식염수 (PSS)를 준비 : 950 ml의에, 1000 ml의 PSS를 준비하려면 0.365 g의 KCl, 6.545 g의 NaCl, 0.296 g을 황산, 0.163 g의 KH 2 PO 4를 용해, 2.072 g의 포도당, 2.184 g을 수 NaHCO3 및 2.383 g을 HEPES 밀리 Q 물. 1 N의 NaOH를 사용하여 7.3-7.4로 산도를 조정합니다. 밀리 Q 물 1,000 ㎖의에 볼륨을 확인합니다. 용액 2 ㎖를 제거하고 1 M CaCl2를 2 ㎖로 교체합니다. (신선한 PSS는 매일 준비해야합니다) </li><li> , 칼슘없이 100 ㎖ PSS의 경우 0.036 g의 KCl, 0.654 g의 NaCl, 0.029 g을 황산, 0.016 g의 KH 2 PO 4, 0.207 g의 포도당, 0.218 g을 NaHCO3를, 0.238을 용해 : 칼슘 (Ca 2+) 무료 PSS 준비 G HEPES, 0.015 g을 EGTA 및 0.0026 g의 나트륨 니트 로프 루시드 (SNP) 밀리-Q의 95 ml의 물에. 1 N의 NaOH를 사용하여 7.3-7.4로 산도를 조정합니다. 밀리 Q 물 100 ㎖에 볼륨을 확인합니다. </li></ol> 유리 캐 뉼러 2. 준비 <ol><li> 유리 피펫을 당겨제조업체의 지침에 따라 피펫 풀러를 사용하여 100 ~ 150 μm의 팁 캐 뉼러를 생성합니다. </li><li> 베벨 beveller 미세 전극을 이용하여 유리 캐 뉼러 팁 화재 그들 연마 및 히터 프로브를 사용하여 45 ~ 유리 캐 뉼러 팁 구부러. </li><li> 마이크로 피펫 홀더에 캐 뉼러를 넣고 관류 챔버에 마이크로 피펫 홀더를 연결합니다. </li></ol> 관류 상공 회의소 3. 준비 <ol><li> 5 분마다 해부 솔루션 다음에 밀리-Q의 물로 씻어 관류 실. 해부 시액 2 mL로 챔버를 넣습니다. </li><li> 정맥을 통해 흡입 해부 솔루션 10 ML의 주사기를 사용하여 조심스럽게 기포없이 전체 정맥과 연결된 튜브를 입력합니다. 거품의 발생을 방지하기 위해 부드럽게 흡입을 적용한다. </li><li> 각 무딘 집게를 사용하여 반 매듭이 봉합을 준비합니다. 안과 모노 필라멘트 나일론 봉합사 때문에 (10-0, 0.2 메트릭) 만있는 노트를 준비하는 데 사용됩니다직경 1-2mm은, 해부 현미경이 필요 할 수있다. </li><li> 해부 현미경으로 시각화, 약간 멀리 끝에서 부분적으로 폐쇄 봉합 매듭으로 모두 캐 뉼러를로드 해부 집게를 사용합니다. 나중에이 노트는 유관 동맥 끝 부분에 조심스럽게 미끄러되고 완전히 마감했다. </li></ol> 흰쥐에서 장간막 동맥 아케이드 4. 컬렉션 <ol><li> 이 실험을 수행하기 전에 지역 기관 동물 관리 및 사용위원회 (IACUC)의 승인을 얻을 수 있습니다. 제어 온도와 조명과 물을 무료로 이용할 수 있도록하고 상업 쥐 차우와 동물 시설 하우스 동물. </li><li> 케타민 복강 주사 하였다 (80 mg / kg)과 자일 라진 (10 밀리그램 / kg)로 쥐를 마취. 발가락 핀치에 의해 필요한 관리] 추가 마취제 경우 깊은 마취를 확인합니다. </li><li> 외과 적 마취를 확인한 후, 단두하여 동물을 안락사. 요로 감염에 대한 AAALAC의 지침을 따르십시오동물 안락사에 대한 적절한 방법을 LIZING. </li><li> 흉골 골반으로부터 중심선 개복 수술을 수행하기 위해 해부 가위와 집게를 사용한다. 이 두 단계로 수행된다 : 첫째, 피부를 절개하고 둘째, 기본 근육층 절개. 케어는 복강 내 장기를 손상하지 않도록주의해야합니다. </li><li> 유문에 장 가까이 ileo - 맹장 접합에 가까운 선단의 근위 끝을 잘라. 모두 미즙 때문에 입욕 세포 용액의 오염을 방지 배설물 누설을 방지하기 위해 별도로 묶어 종료한다. 급전 혈관 즉, 상 장간막 동맥 근처의 기지 장간막을 절개하고 빙냉 해부 용액을 함유하는 50 ㎖의 비커에 전체 소장 장간막 침대 옮긴다. </li><li> 수확 된 조직이 5 분 동안 차가운 얼음 해부 용액에 머물면서 혈액 없애 신선한 해부 용액으로 씻어 수 있습니다. </li></ol> 5. 분리 및 제 4의 캐 뉼러 </SUP&gt; 주문 장간막 동맥 <ol><li> 실 가드 코팅 접시에 오른쪽에 소장의 기단부 아래에 핀. (도 1) 장간막 확산 아래 세그먼트를 피닝 및 혈관 노출, 반 시계 방향의 경로에 남아있는 부위를 확장. 참고 : 우리는 실온에서 동맥 세그먼트를 격리 할 것. 그렇지 않으면 우리는 얼음에 접시를 포함하는 장간막 아케이드를 놓습니다. 우리 기관에 포함 일부 실험실, 4 ℃에서 동맥을 해부하기 위해 냉각 장치를 사용합니다. </li><li> 스테레오 줌 현미경 위해 작은 장간막 동맥 제 3 차 및 4 작은 가위를 사용하여 소장에 (~ 260 μm의) 평행을 해부하다. 우선 피복 지방을 멀리 해부하다. 그런 다음 정맥을 해부하고 V 자형 분기점과 동맥을 격리 할 것. 선택된 세그먼트에 구멍을하지 않도록주의하십시오. 2 차 주문 지점 근처에 지방을 해부 시작하고 3 번째 또는 4 번째 ORD에 방법을 찾아어 선박. <ol><li> 주 : 동맥과 정맥들은 벽의 두께에 기초하여 구별 될 수있다 - 동맥 벽 혈관의보다 두껍다. 또한, 결합 조직 인접 때하는 동맥하지 쉽게하면서 혈관, 정맥의 붕괴를 조심스럽게 수직으로 당겨진다. 루멘 직경 동맥 때문에 &lt;400 μm의 우리가 (직경 &lt;300 μm의 루멘) 주문 쥐 장간막 동맥 번째 4를 사용하는이 프로토콜에 대한 전신 혈관 저항의 주요 사이트입니다. </li></ol></li><li> 소장에 동맥 평행 4-5mm 섹션을 분리합니다. 소장에 포함 된 모든 5 번째 순서 지점을 시각화하고 약간 떨어진 지점의 원점에서 그들을 잘라 일부를 보존 할 수 있습니다. 지점이 보존 된 부분은 이후 자신의 삽관을 안내, 관류 챔버에 동맥 세그먼트를 전송 (해부 포셉) 사이트를 잡고 역할을한다. </li><li> 이어서 2 절개 원위함으로써 동맥 세그먼트를 잘라5 번째 순서의 동맥의 각각의 측면에 분기 및 관류 챔버로 이동시켜 (도 1C 및 범례 참조). </li><li> (: 100-150 ㎛의 직경) 해부 집게 동맥 세그먼트의 끝을 잡고 해부 집게를 사용하여 유리 마이크로 피펫의 하나에 용기의 한쪽 끝을 Cannulate. 유관 끝에 이전에로드 된 부분적으로 폐쇄 봉합을 밀어 고정합니다. 주 : 동맥의 기단부는 동일계 환경에서 모방하는 서보 제어 압력 조절 장치에 연결되어 유리 캐 뉼러로 캐 뉼러를 삽입 할 수있다. </li><li> 박리 용액을 캐 뉼러와 스톱 콕을 접속 배관에 박리 액을 주사기에두고 병합되도록이 캐 뉼러에 접속 콕에 10 ㎖ 주사기를 연결로드. 조심스럽게 주사기를 올립니다. 용액에 중력이 용기의 개방 단부에서의 혈관 내 혈액을 제거 할 것이다. 동맥 혈액을 제거한 후,, 꼭지를 닫습니다. 대안 적으로, 상기 압력 컨트롤러에 콕을 부착를 켜 부드럽게 동일한 결과를 얻을 5-10 mmHg 이상으로 압력을 증가 참고. </li><li> 신중 동맥 세그먼트의 묶이지 단부에 가능한 한 가까운 다른 뉼러를 가져와 2 유리 캐 뉼러 상 혈관의 말단부 넥타이. 유관 끝에 이전에로드 된 부분적으로 폐쇄 봉합을 밀어 고정합니다. 케어는 예인선 또는 동맥 세그먼트 당기지 않도록주의해야합니다. 모두 캐 뉼러에 부착 된 마개가 닫혀 있는지 확인하십시오. </li><li> 라이브 비디오 녹화를 갖춘 거꾸로 현미경의 무대에 관류 챔버를 전송합니다. </li><li> 서보 제어 압력 조절 장치에 동맥 세그먼트 (segment)의 기단부에 연결 정맥의 꼭지를 연결하고 안정된 관내 압력을 유지하기 위해 폐쇄 상태를 유지 꼭지는 다른 정맥에 연결해야합니다. </li><li> 이어서, 흡입 포트를 진공 튜빙을 첨부ND 관류 챔버의 관류 포트 튜빙. 참고 : 경 사진 바늘 포트가 관류에 대한 흡입 및 무딘 바늘 포트에 사용됩니다. </li><li> 단일 인라인 용액 히터 통해 따뜻한 PSS와 용기의 관류 시작 (37 ° C, 기체 혼합물로 평형화 : 중성 pH 및 충분한 산소 (17)을 유지하기 위해 5 % CO 2, 5 % O 2, 90 % N)이 용액에 / min의 연동 펌프. 뿐만 아니라에 진공을 돌립니다. 연속적으로 온도를 모니터링하기 위해 챔버 내에 서미스터를 배치. </li><li> 챔버의 PSS의 온도가 가까워지면 ~ 37 ° C (보통 5 분 이내), 천천히 20 ~ 100 mmHg로에서 관내 압력을 증가시키고 혈관 누출을 확인합니다. 이것은 압력 조절기의 압력을 자동 설정을 사용하여 수행된다. 누출과 혈관을 취소하고 다른 세그먼트로 교체. 누수와 혈관의 압력을 유지 할 수 없습니다. </li><li> 100 mmHg의 압력에서 유지하면서 굽힘위한 동맥 분절을 평가.나사 레버를 사용하여 동맥 세그먼트를 곧게 캐 뉼러를 이동합니다. 이상 동맥 세그먼트를 늘리지 않습니다; 목표는 생체 동맥 세그먼트 길이에 모방하는 것이다. </li><li> 70 mmHg로에 압력을 감소 (장간막 아케이드 (18) 생체 내 압력의 모방)과 동맥 세그먼트 안정과 근육 조직 톤을 개발 할 수 있습니다. 동맥은 (40 ~ 70 mmHg로) 실험 전략 및 혈관 침대에 따라 가변적으로 가압 할 수있다. 이전에 출판 된 리뷰는 다른 혈관 침대 8에서 동맥 부문에서 MT에 변화의 우수한 리뷰를 제공합니다. </li></ol> 동맥 직경의 6 측정 <ol><li> 단색 영상 전하 결합 소자 카메라를 구비 10X 현미경 대물 렌즈에 볼 동맥. 비디오 프레임 그래버 실시간 에지 검출 시스템을 사용하여 내강 직경을 측정한다. 사용 된 장비의 목록은 표 3에 제공된다. </li><li> 모니터 및 기록 용기 D계속 iameter. </li><li> MT의 개발을위한 관찰한다. 참고 : 우리는 쥐 장간막 저항 동맥, 70 mmHg로에서, MT의 개발은 직​​경이 20 % 감소 ~ 특징입니다 것을 관찰했다. MT는 혈관 침대와 동물 종에 따라 달라집니다. </li><li> 1 μM의 페닐 (Phe가) 1 μm의 아세틸 콜린 (ACH)에 혈관 수축과 혈관 확장 반응을 평가하여 혈관 가능성을 확인합니다. </li><li> 각 실험의 끝에서 20 분 동안 불 함유 PSS 칼슘으로 동맥을 배양함으로써 수동적 직경 (PD)를 결정한다. </li></ol> 7. 근육 조직 응답 <ol><li> 20mm 수은에 압력을 줄이고 직경이 안정 될 수 있도록. 증분 단계 (20, 40, 60, 80, 100)의 관내 압력을 증가시키고, 각 압력 단계에서 동맥 (통상 5 분 이내) 직경 안정을 달성 할 수있다. </li><li> 20 mmHg로에 관내 압력을 줄이고 2+ - 무료 PSS 0.39 mM의를 포함하는 칼슘의 동맥 세그먼트를 품다EGTA 및 0.1 mM의 SNP. 동맥 직경이 (보통 15 분)을 안정화 할 수 있습니다. </li><li> 0.39 mM의 EGTA 0.1 mM의 SNP를 포함하는 칼슘 - 무료 PSS의 압력 단계의 응답을 반복합니다. </li></ol> 데이터의 결과 및 계산 8. 해석 <ol><li> 칼슘 관찰 직경 %의 차이는 다음과 같은 계산에 따라 각 압력에서 2 + - 무료 PSS 칼슘에 비해 함유로 MT를 계산한다 : <img alt="식 (1)" fo:src="/files/ftp_upload/50997/50997eq1highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50997/50997eq1.jpg" /></li><li> 직경 vasomotion 겪고 동맥 들어 1 분 동안 플래 위상을 평균함으로써 계산 될 수있다. 관계에 따라 최대 휴식 (%의 PD)의 퍼센트로 수집 된 데이터를 표현 %의 PD = 100 × [ΔD / PD] ΔD 전에 어떤 임상 화합물 (예 : Phe가)을 첨가 한 후, 직경의 차이이고; PD는 패시브 직경 (인최대 직경). </li></ol>

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중요한 단계, 문제 해결 및 수정 전형적인 동중 선박 대비, 동맥 따뜻한 (37 ° C) PSS와 관류이 유리 캐 뉼러 사이에 70 mmHg로에서 가압된다. 30-45 분 후에, 동맥 20-30 분에서 안정화 직경 감소에 의해 자발적 특징 MT 개발. 다양한 혈관 침대에서 저항 동맥 변수 MT를 개발한다. cremastric 동맥 PD의 MT ~ 40 %를 달성 할 수있다 예를 쥐 저항 장간막 동맥 ~ PD의 25 %를 MT를 개발한다. 60 분 이내?...

작은 저항 동맥 SVR의 주요 결정 요인이며, 많은 질병 1, 2의 병태 생리에 중요한 역할을한다. 당뇨병 3, 임신 4, 허혈 - 재관류 5, 비만과 고혈압 6,7 등의 조건은 자주 변경된 미세 혈관 기능과 연관되어 있습니다. 혈관 myography 다양한 질환에서 미세 혈관 기능의 변화에​​ 중요한 통찰력을 제공 할뿐만 아니라, 치료 목표를 식별하고 혈관 활성 화합물의 효능을 평가할 수 있습니다뿐만 아니라. 혈관 기능이 아이소 메트릭 또는 등압 선박 조건 (8)에서 고립 된 작은 동맥을 이용하여 연구하고있다. 아이소 myography의 상세한 설명은도 9 곳이 제공된다. 그러나 동중 준비 10 ~ 12 대 아이소 메트릭에서 얻은 정보에 차이가 있습니다. 가압 된 제제는 동맥 거의 생리적 조건에서 미세 혈관 기능 연구를 허용하기 때문에,얻어진 결과는 혈관 침대 8, 13의 생체 내 행동을 더 잘 상관 관계 수 있습니다. 1902 년 베일리스 먼저 혈관 직경 14 전층 압력의 효과를 설명했다. 그는 압력의 감소는 혈관 확장으로 이어졌습니다 토끼, 개와 고양이의 다양한 혈관 침대에서 작은 저항 동맥에서 관찰, 압력의 증가는 혈관 수축으로 이어졌습니다. 이 현상은 근육 조직 반응으로 알려져있다. 베일리스 이후 연구자들은 동중 조건에서 작은 저항 동맥 MT (15, 16)로 알려진 지속적인 수축을 개발하는 것을 관찰했다. 근육 조직 응답 및 MT 모두 myography 압력 (PM) 기법을 사용하여 평가할 수있다. 오후는 작은 동맥, 정맥 및 기타 선박의 vasoactivity를 결정하는 데 주로 사용된다. 이름에서 알 수 있듯이 - - 혈관 직경의 혈관 활성 화합물의 효과를 평가뿐만 아니라, 혈관 내 압력 PM 매개 CH 관용법혈관 직경에 ANGES. 지난 수십 년 동안 비디오 현미경 유리 피펫은, PM을 수행하기 쉽게 만든 당기기 향상된 컴퓨터 소프트웨어에 진행한다. 그러나, 작은 혈관의 가능한 손상 부분의 절개는 지루하고 때로는 도전 남아있다. 여기에서 우리는 쥐에서 고립 된 작은 장간막 저항 동맥의 근육 조직 반응을 연구하기 위해 상세한 프로토콜을 설명합니다.

<table border="1">
		<tbody>
		 <tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Chemical</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Acetylcholine</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>A6625</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Calcium chloride (CaCl2)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>223506</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>D-(+)-Glucose</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>G5767</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Ethylene glycol-bis(2-aminoethylether)-N,N,N',N'-tetra acetic acid (EGTA)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>E3889</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Ethylene diamine tetra acetic acid (EDTA)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>E9884</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>H3784</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Magnesium sulfate (MgSO4)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>M7506</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>MOPS</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>M5162</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Phenylephrine</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P6126</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Potassium chloride (KCl)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P3911</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Potassium phosphate (KH2PO4)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P5655</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Sodium bicarbonate (NaHCO3 )</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>S6014</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Sodium chloride (NaCl)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>S7653</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Sodium hydroxide (NaOH)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>S5881</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Sodium nitroprusside</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>13451</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Sodium phosphate monobasic monohydrate (NaH2PO4)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>S9638</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Sodium pyruvate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P8574</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Table 1.</td>
		 </tr>
		 <tr>
		 <td></td>
		 <td></td>
		 <td></td>
		 <td>
 <table border="1">
		<tbody>
		 <tr>
			<td>Physiological salt solution (1000 ml)</td>
			<td> mM</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>KCl</td>
			<td>4.9</td>
			<td>0.365 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>112</td>
			<td>6.545 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>MgSO4.7H2O</td>
			<td>1.2</td>
			<td>0.296 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>KH2PO4</td>
			<td>1.2</td>
			<td>0.163 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>11.5</td>
			<td>2.072 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>NaHCO3</td>
			<td>26</td>
			<td>2.184 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>10</td>
			<td>2.383 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>CaCl2</td>
			<td>2</td>
			<td>2 ml (1M stock)</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>De-ionized water</td>
			<td></td>
			<td>998 ml</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Ca2+ free physiological salt solution (100 ml)</td>
			<td> mM</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>KCl</td>
			<td>4.9</td>
			<td>0.036 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>112</td>
			<td>0.645 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>MgSO4.7H2O</td>
			<td>1.2</td>
			<td>0.029 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>KH2PO4</td>
			<td>1.2</td>
			<td>0.016 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>11.5</td>
			<td>0.207 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>NaHCO3</td>
			<td>26</td>
			<td>0.218 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>10</td>
			<td>0.238 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>EGTA </td>
			<td>0.39</td>
			<td>0.015 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Sodium nitroprusside </td>
			<td>0.1</td>
			<td>0.0026 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>De-ionized water</td>
			<td></td>
			<td>100 ml</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Dissection solution, stock (500 ml)</td>
			<td> mM</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>145</td>
			<td>21.18 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>KCl</td>
			<td>4.7</td>
			<td>0.875 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>MgSO4</td>
			<td>1.2</td>
			<td>0.739 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>MOPS</td>
			<td>2</td>
			<td>1.049 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>EDTA</td>
			<td>0.02</td>
			<td>0.019 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>De-ionized water</td>
			<td></td>
			<td>500 ml</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Working dissection solution (100 ml)</td>
			<td> mM</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Dissection solution stock</td>
			<td>20 ml</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>1.2</td>
			<td>0.091 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>NaH2PO4</td>
			<td>5</td>
			<td>0.016 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Sodium pyruvate</td>
			<td>2</td>
			<td>0.022 g</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>CaCl2</td>
			<td>2</td>
			<td>0.2 ml (1M stock)</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>De-ionized water</td>
			<td></td>
			<td>79.8 ml</td>
		 </tr>
	 </tbody>
</table>
 </td>
	 </tr>
		 <tr>
		 <td></td>
		 <td></td>
		 <td></td>
		 <td>Table 2. Composition of Experimetnal solutions</td>
	 </tr>
		 <tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Equipment</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>CCD Monochrome Camera</td>
			<td>The imaging Source</td>
			<td>DMK 21AU04</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Single inline solution heater</td>
			<td>Warner Instruments</td>
			<td>64-0102</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Thermistor</td>
			<td>Warner Instruments</td>
			<td>64-0108</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Dual automatic temperature controller</td>
			<td>Warner Instruments</td>
			<td>TC-344B</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Flaming/Brown micropipette puller</td>
			<td>Sutter Instruments </td>
			<td>P-97</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Fluorescence System Interface</td>
			<td>IonOptix</td>
			<td>model FSI-700</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Forceps and scissors </td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td></td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Ion Wizard-Core and Analysis</td>
			<td>IonOptix</td>
			<td>Ion Wizard 6.0</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Laboratory tubing</td>
			<td>Silastic </td>
			<td>508-005</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Male Sprague Dawley rat</td>
			<td>Harlan Laboratories</td>
			<td></td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Master flex console drive</td>
			<td>Cole-parmer</td>
			<td></td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Milli-Q Plus Ultrapure Water System</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>ZD5211584</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Ophthalmic monofilament nylon suture </td>
			<td>Ethicon </td>
			<td>9007G</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Photometry and Dimensioning Microscope</td>
			<td>Motic</td>
			<td>AE31</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Pressure Servo Controller with peristaltic pump and pressure transducer</td>
			<td>Living Systems Instrumentation</td>
			<td>PS-200</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Stereomicroscope</td>
			<td>Nikon Instruments Inc</td>
			<td>SMZ660</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Vessel Chamber</td>
			<td>Living Systems Instrumentation</td>
			<td>CH-1</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Dissection dish</td>
			<td>Living Systems Instrumentation</td>
			<td>DD-90-S</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Thin Wall Glass Capillaries</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>TW120-6</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Microforge</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td>51550</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Table 3.</td>
		 </tr>
	 </tbody>
</table>

assessing myogenic response and vasoactivity in resistance mesenteric arteries using pressure myography

작은 저항 동맥 수축 증가 또는 관내 압력의 감소에 응답하여 각각 팽창; 근육 조직 응답이라고하는이 현상은 로컬 혈류 키 레귤레이터이다. 동중 조건에서 작은 저항 동맥 전신 혈관 저항 (SVR)의 주요 결정 요인 인 근육 조직 톤 (MT)로 알려진 수축을 지속 개발한다. 따라서, 작은 저항 동맥의 생체 가압 준비는 거의 생리적 상태에서 미세 혈관의 기능을 연구하는 중요한 도구입니다. 이를 달성하기 위해, 작은 저항 동맥 (~ 260 μm의 직경)의 갓 고립 세그먼트는 손대지 개의 작은 유리 캐 뉼러 및 가압에 장착된다. 이들 제제는 생체 동맥의 특성과 실시간으로 혈관의 색조 평가에 허용 최대한 유지. 여기에서 우리는 쥐에서 가압 작은 저항 장간막 동맥에 vasoactivity을 평가하기위한 상세한 프로토콜을 제공한다; 이러한 동맥 개발지속적인 혈관 수축 - 최대 직경의 약 25 % - 70 mmHg로에서 가압. 이러한 동맥 제제는 다양한 질병의 동물 모델에서 미세 혈관 기능의 변화를 동맥 압력 및 vasoactivity 사이의 관계에 대한 임상 시험 화합물의 효과를 연구하고 결정하는데 사용될 수있다.

전형적인 압력 myograph 설정의 개략적 인 대표도 1에 도시된다. 용기의 양단은 유리 마이크로 피펫으로 삽관과 양측 봉합사로 고정된다. 배관 및 오픈 콕 통해 하나 뉼러는 서보 제어식 압력 조절기에 접속되고; 다른 캐 뉼러가 클로즈 콕에 접속된다. 챔버는 CCD 카메라와 접속 도립 현미경으로 관찰 PSS 및 혈관 직경의 변화와 관류된다. 70 mmHg로 가압하는 동맥 분절?...

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Assessing Myogenic Response and Vasoactivity In Resistance Mesenteric Arteries Using Pressure Myography

압력 myography는 가압 할 때 지속적인 수축을 개발하는 작은 동맥의 vasoactivity을 평가하는 데 사용됩니다. 이 원고는 쥐, vasoactivity 혈관 직경에 관내 압력의 영향에서 작은 장간막 동맥의 고립 된 세그먼트에서 평가하기위한 세부 프로토콜을 제공합니다.

압력 Myography를 사용하여 저항 장간막 동맥에서 근육 조직 대응 및 Vasoactivity 평가

Small resistance arteries constrict and dilate respectively in response to increased or decreased intraluminal pressure; this phenomenon known as myogenic ...

assessing-myogenic-response-vasoactivity-resistance-mesenteric

Research

JoVE Journal

Medicine

16.6K 조회수.  Georgia Regents University.  압력 myography는 가압 할 때 지속적인 수축을 개발하는 작은 동맥의 vasoactivity을 평가하는 데 사용됩니다. 이 원고는 쥐, vasoactivity 혈관 직경에 관내 압력의 영향에서 작은 장간막 동맥의 고립 된 세그먼트에서 평가하기위한 세부 프로토콜을 제공합니다. 