وأيد هذا العمل من قبل المعاهد الوطنية للصحة منح 1R01EY022901، وجائزة التطوير المهني من البحوث للوقاية من العمى (RPB)، CMReeves &amp; MA مؤسسة ريفز، ومؤسسة E. ماتيلدا زيغلر للمكفوفين، ومؤسسة فرسان الهيكل العين، ومنحة غير المقيد إلى إدارة طب العيون في جامعة ولاية يوتا من RPB. نشكر Balamurali Ambati للحصول على المساعدة التقنية على نظام متعدد القيد التصوير Spectralis وتشانغ تاو للمناقشات وتعليقات على المخطوطة.

1. إعداد الأدوات <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم تنفيذ الإجراء في غرفة الداخلي في منشأة الحيوان. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ارتداء الأقنعة، الاغطيه الشعر، العباءات الجراحية، معقمة القدم الأغطية، وقفازات قبل البدء في التجربة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> المياه الحرارية في كوب إلى ~ 40 درجة مئوية على موقد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع وسادة زرقاء معقمة على رأس وسادة التدفئة التي سيتم استخدامها في وقت لاحق للحفاظ على درجة حرارة الجسم الماوس، أثناء التصوير. بدوره على وسادة التدفئة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد نظام التصوير: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة الغطاء الغبار وتشغيل الليزر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إخراج العدسة 55 درجة وتركيبها على الجهاز. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> فتح برامج التصوير من الكمبيوتر وإدخال المعلومات من الفأرة للتصوير تحت رقة المريض الجديد (مثل التركيب الوراثي، والعمر، وغيرها). تحت عنوان &quot;نوع الجهاز&quot;، اختر الأشعة تحت الحمراء (IR) واسطة. </li></ol></li></ol> ملاحظة: وقد أفيد أن استخدام سو عدسة شبه كروي مزدوج خارجي يمكن تحسين جودة الصورة 17-20 على الرغم من أن ليس لدينا أي مشكلة في الحصول على صور ذات جودة عالية من قبل IV-ICGA دون استخدام العدسات الخارجية (انظر نتائج ممثل، أرقام 1-4). 2. الذيل الوريد حقن ICGA <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تمدد عيون الفأر مع 1٪ تروبيكاميد حل العيون والانتظار 5 دقائق. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وزن الماوس لتحديد كمية التخدير (الكيتامين / زيلازين / آسيبرومازين 65-100/10-20/1-3 ملغ / كلغ) الحاجة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استرداد العقيمة حقنة 1 مل جنبا إلى جنب مع إبرة G 32. حقن الفأر الغشاء البريتونى مع التخدير (13 ملغ / مل الكيتامين، 2.6 ملغ / مل زيلازين، 0.3 ملغ / مل في برنامج تلفزيوني العقيمة آسيبرومازين). الانتظار حتى يتم تخدير الماوس بالكامل (~ 5 دقائق). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع ذيل الماوس إلى 40 درجة مئوية الماء الدافئ لتسبب توسع الأوعية من الوريد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استرداد حقنة 1 مل مع إبرة G 32. سحب المبلغ المطلوب من ICG، وعادة 50 ميكرولتر من 1 ملغ / مل ICG، وهو العقيمة تصفيتها مع مرشح حقنة 0.2 ميكرومتر في أنبوب العقيمة، ل25 غ الماوس (2 ملغ / كلغ). يجب الحرص على عدم إدخال أي الهواء في حقنة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مسح الذيل مع مسحة الكحول لتعقيم المنطقة المراد حقنها. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عقد ذيل بيد واحدة بحيث الوريد الذيل الأفقي هو أعلى. مع شطبة من الإبرة التي تواجه التصاعدي، حقن إبرة ~ 2 مم في الوريد في زاوية الحد الأدنى. يجب الحرص على عدم خرم الوريد. التراجع قليلا على حقنة والبحث عن آثار تدفق الدم في محور إبرة، مما يدل على أن الإبرة تم إدراجها بنجاح في الوريد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حقن ببطء ICG في الوريد. ينبغي أن يكون هناك الحد الأدنى من المقاومة عند حقن. إزالة الإبرة وتطبيق مسحة الكحول مباشرة إلى موقع الحقن ل~ 5-10 ثانية لوقف أي نزيف. الماوس ثم هو على استعداد للتصوير. من أجل اللحاق المرحلة المبكرة (0-4 دقيقة بعد حقن)، فمن ESSEntial لصورة الماوس بسرعة. </li></ol> ملاحظة: يمكن الحصول على عيون ماوس بسهولة الجافة ويمكن أن تتطور الساد تحت التخدير. فمن المهم للحفاظ على العين رطبة من خلال تطبيق برنامج تلفزيوني العقيمة أثناء العملية. تمحو PBS الزائدة مع مسحة القطن المعقم قبل تسجيل ICGA. وقد استخدمت مختبرات أخرى العدسات اللاصقة لتجنب جفاف القرنية 17-20. 3. ICG تصوير الأوعية الدموية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بدء لالتقاط صور 30-40 ثانية بعد حقن ICG، الذي يسمح القبض على المرحلة المبكرة من ملء المشيمية حتى التداولات الشبكية والمشيمية هي في أقصى سطوع (0-4 دقيقة). هو تصور الأوعية الدموية في شبكية العين أفضل في التركيز ~ 35-45 ديوبتر والأوعية الدموية المشيمية هو تصور في 10-15 ديوبتر. ملاحظة: خلال الفحص الأول من نموذج حيواني، فمن المستحسن لالتقاط الصور من جميع الزوايا (الأنف والزمانية، الظهرية والبطنية) لتحديد جميع abno ممكنrmalities في الأوعية الدموية. خلال المرحلة المبكرة، وتصور بشكل جيد سواء الشرايين والأوردة المشيمية المتوسطة والكبيرة. في نموذج حيواني المستخدمة في هذا البروتوكول، والآفات المشيمية (مثل polypoidal التوسعات) قد تبدأ في الظهور 1 دقيقة في مرحلة مبكرة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضبط تركيز الصورة على الأوعية الدموية. التحكم عن السطوع والتركيز باستخدام وحدة التحكم ومقبض التركيز، على التوالي. هذه القيم قابلة للتعديل رقميا ويتم الاحتفاظ بسهولة ثابتة. الحفاظ على مسافة من العين الماوس إلى عدسة الكاميرا ثابتة لضمان جودة الصورة هو تكرار باستخدام تقنية الذي يلي. ملاحظة: منذ الجهاز يمكن أن الصورة سوى جزء من العين الخلفي، ونحن نحاول الحفاظ على التركيز، والسطوع، والمسافة بين عدسة الكاميرا والعين الماوس ثابتة ونحن صورة العين الخلفي بأكمله من زوايا مختلفة. المفتاح لهذا هو لمحاذاة التلألؤ على شكل دائرة المنبعثة من ICG من خلال العين مع مجال VIEث الكاميرا. ويتم إنجاز ذلك عن طريق جعل من اليسار إلى اليمين، صعودا ونزولا، والدخول والخروج من التعديلات موقف الكاميرا حتى تكون الصورة بأكملها لا يوجد لديه المناطق المظلمة. عندما تصطف التلألؤ ومجال الرؤية للكاميرا، وسوف المسافة من العين إلى عدسة تكون قابلة للتكرار للمجموعة التالية من الصور وكذلك على مسافة والأمثل لجودة التصوير. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مرة واحدة في الأوعية الدموية هو في التركيز، التقاط إطارات الصور عن طريق الضغط على الزر الأسود جولة على حدة الاستحواذ. يمكن أن تستخدم أيضا على الزر الأسود جولة لخفض أو زيادة إشارة ICG للحصول على أفضل جودة الصورة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحديد زاوية رأي الأمثل والتركيز على عمق الصورة الآفات المشيمية. فمن المهم للحفاظ على موقف العين، وعمق التركيز، وإعدادات جهاز آخر ثابت لكامل الوقت بالطبع ICGA. يتم حفظ الصور عن طريق الضغط على زر في لوحة اكتساب الشاشات التي تعمل باللمس وحدة الاستحواذ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الحصول على صور في المرحلة المتوسطة في 6-15 دقيقة الخلفإيه الحقن. ملاحظة: كل من المشيمية والشبكية السفن سيصبح أقل وضوحا. يبدو الأوعية الدموية المشيمية مضان منتشر كما. الآفات المشيمية اظهار hyperfluorescence الظهور على النقيض من يتلاشى المحيطة مضان الخلفية العادية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الحصول على صور في المرحلة في وقت متأخر من 17-25 دقيقة بعد الحقن. ملاحظة: Hyperfluorescence يتلاشى. لم يعد كل من الأوعية المشيمية والشبكية مرئية. يصبح رأس العصب البصري السوداء. الآفات المشيمية Hyperfluorescent يكون المقابل القصوى مع الخلفية يتلاشى. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد الانتهاء من اقتناء الصور، وتطبيق مواد التشحيم واضحة هلام العين لعيون الماوس وترك الماوس على وسادة التدفئة لتحقيق الانتعاش. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> العودة الفئران لأقفاصها ومنطقة قابضة. تصدير الصور كما المشاجرة أو JPEG ملفات لمزيد من التحليل. </li></ol> ملاحظة: توقيت كل مرحلة ليست مطلقة. وجدنا أن توقيت عصامقد تتغير مرحلة الفصل اعتمادا على كمية من ICG حقن. أكثر ICG يميل إلى إطالة أمد كل مرحلة. أفضل طريقة لتحديد المرحلة هو وفقا لخصائص كل مرحلة رئيسية من المذكورة أعلاه.

<ol>
	<li>Duane, T. D., Tasman, W., Jaeger, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Chapter 4a, Indocyanine Green Angiography. Duane's clinical ophthalmology on CD-ROM. , (2002).</li><li>Alfaro, D. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Age-related macular degeneration : a comprehensive textbook. , (2006).</li><li>Yannuzzi, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Indocyanine+green+angiography:+a+perspective+on+use+in+the+clinical+setting.">Indocyanine green angiography: a perspective on use in the clinical setting.</a> Am. J. Ophthalmol. 151, 745-751 (2011).</li><li>Destro, M., Puliafito, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Indocyanine+green+videoangiography+of+choroidal+neovascularization.">Indocyanine green videoangiography of choroidal neovascularization.</a> Ophthalmology. 96, 846-853 (1989).</li><li>Scheider, A., Schroedel, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+resolution+indocyanine+green+angiography+with+a+scanning+laser+ophthalmoscope.">High resolution indocyanine green angiography with a scanning laser ophthalmoscope.</a> Am. J. Ophthalmol. 108, 458-459 (1989).</li><li>Guyer, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Digital+indocyanine-green+angiography+in+chorioretinal+disorders.">Digital indocyanine-green angiography in chorioretinal disorders.</a> Ophthalmology. 99, 287-291 (1992).</li><li>Yannuzzi, L. A., Slakter, J. S., Sorenson, J. A., Guyer, D. R., Orlock, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Digital+indocyanine+green+videoangiography+and+choroidal+neovascularization.">Digital indocyanine green videoangiography and choroidal neovascularization.</a> Retina. 12, 191-223 (1992).</li><li>Regillo, C. D., Benson, W. E., Maguire, J. I., Annesley, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Indocyanine+green+angiography+and+occult+choroidal+neovascularization.">Indocyanine green angiography and occult choroidal neovascularization.</a> Ophthalmology. 101, 280-288 (1994).</li><li>Scheider, A., Kaboth, A., Neuhauser, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+subretinal+neovascular+membranes+with+indocyanine+green+and+an+infrared+scanning+laser+ophthalmoscope.">Detection of subretinal neovascular membranes with indocyanine green and an infrared scanning laser ophthalmoscope.</a> Am. J. Ophthalmol. 113, 45-51 (1992).</li><li>Kuck, H., Inhoffen, W., Schneider, U., Kreissig, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnosis+of+occult+subretinal+neovascularization+in+age-related+macular+degeneration+by+infrared+scanning+laser+videoangiography.">Diagnosis of occult subretinal neovascularization in age-related macular degeneration by infrared scanning laser videoangiography.</a> Retina. 13, 36-39 (1993).</li><li>Imamura, Y., Engelbert, M., Iida, T., Freund, K. B., Yannuzzi, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polypoidal+choroidal+vasculopathy:+a+review.">Polypoidal choroidal vasculopathy: a review.</a> Surv. Ophthalmol. 55, 501-515 (2010).</li><li>Ciardella, A. P., Donsoff, I. M., Yannuzzi, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polypoidal+choroidal+vasculopathy.">Polypoidal choroidal vasculopathy.</a> Ophthalmol. Clin. N. Am. 15, 537-554 (2002).</li><li>Spaide, R. F., Yannuzzi, L. A., Slakter, J. S., Sorenson, J., Orlach, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Indocyanine+green+videoangiography+of+idiopathic+polypoidal+choroidal+vasculopathy.">Indocyanine green videoangiography of idiopathic polypoidal choroidal vasculopathy.</a> Retina. 15, 100-110 (1995).</li><li>Coppens, G., Spielberg, L., Leys, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polypoidal+choroidal+vasculopathy,+diagnosis+and+management.">Polypoidal choroidal vasculopathy, diagnosis and management.</a> Bull. Soc. belge d'Ophtalmol.. , 39-44 (2011).</li><li>Tsujikawa, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pigment+epithelial+detachment+in+polypoidal+choroidal+vasculopathy.">Pigment epithelial detachment in polypoidal choroidal vasculopathy.</a> Am. J. Ophthalmol. 143, 102-111 (2007).</li><li>Jones, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+expression+of+multifunctional+serine+protease,+HTRA1,+in+retinal+pigment+epithelium+induces+polypoidal+choroidal+vasculopathy+in+mice.">Increased expression of multifunctional serine protease, HTRA1, in retinal pigment epithelium induces polypoidal choroidal vasculopathy in mice.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 108, 14578-14583 (2011).</li><li>Alex, A. F., Heiduschka, P., Eter, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retinal+fundus+imaging+in+mouse+models+of+retinal+diseases.">Retinal fundus imaging in mouse models of retinal diseases.</a> Methods Mol. Biol. 935, 41-67 (2013).</li><li>Seeliger, M. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+confocal+imaging+of+the+retina+in+animal+models+using+scanning+laser+ophthalmoscopy.">In vivo confocal imaging of the retina in animal models using scanning laser ophthalmoscopy.</a> Vision Res. 45, 3512-3519 (2005).</li><li>Fischer, M. D., Zhour, A., Kernstock, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phenotyping+of+mouse+models+with+OCT.">Phenotyping of mouse models with OCT.</a> Methods Mol. Biol. 935, 79-85 (2013).</li><li>Jian, Y., Zawadzki, R. J., Sarunic, M. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adaptive+optics+optical+coherence+tomography+for+in+vivo+mouse+retinal+imaging.">Adaptive optics optical coherence tomography for in vivo mouse retinal imaging.</a> J. Biomed. Opt. 18, 56007 (2013).</li><li>Ciardella, A. P., Donsoff, I. M., Huang, S. J., Costa, D. L., Yannuzzi, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polypoidal+choroidal+vasculopathy.">Polypoidal choroidal vasculopathy.</a> Surv. Ophthalmol. 49, 25-37 (2004).</li><li>Sasahara, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polypoidal+choroidal+vasculopathy+with+choroidal+vascular+hyperpermeability.">Polypoidal choroidal vasculopathy with choroidal vascular hyperpermeability.</a> Am. J. Ophthalmol. 142, 601-607 (2006).</li><li>Silva, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polypoidal+choroidal+vasculopathy+and+photodynamic+therapy+with+verteporfin.">Polypoidal choroidal vasculopathy and photodynamic therapy with verteporfin.</a> Graefes Arch. Clin. Exp. Ophthalmol. 243, 973-979 (2005).</li><li>Yannuzzi, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polypoidal+choroidal+vasculopathy+masquerading+as+central+serous+chorioretinopathy.">Polypoidal choroidal vasculopathy masquerading as central serous chorioretinopathy.</a> Ophthalmology. 107, 767-777 (2000).</li><li>Janssen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Abnormal+vessel+formation+in+the+choroid+of+mice+lacking+tissue+inhibitor+of+metalloprotease-3.">Abnormal vessel formation in the choroid of mice lacking tissue inhibitor of metalloprotease-3.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 49, 2812-2822 (2008).</li><li>Ding, X., Patel, M., Chan, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+pathology+of+age-related+macular+degeneration.">Molecular pathology of age-related macular degeneration.</a> Prog. Retin. Eye Res. 28, 1-18 (2009).</li><li>Grossniklaus, H. E., Kang, S. J., Berglin, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+choroidal+and+retinal+neovascularization.">Animal models of choroidal and retinal neovascularization.</a> Prog. Retin. Eye Res. 29, 500-519 (2010).</li><li>Pennesi, M. E., Neuringer, M., Courtney, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+age+related+macular+degeneration.">Animal models of age related macular degeneration.</a> Mol. Aspects Med. 33, 487-509 (2012).</li><li>Elizabeth Rakoczy, P., Yu, M. J., Nusinowitz, S., Chang, B., Heckenlively, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+of+age-related+macular+degeneration.">Mouse models of age-related macular degeneration.</a> Exp. Eye Res. 82, 741-752 (2006).</li></ol>

YF هو مخترع اثنين من براءات الاختراع في انتظار التي هي ذات الصلة إلى نموذج الفأر AMD المستخدمة في هذا العمل. SK، ZB، وADJ ليس لديهم ما يكشف.

في هذه الدراسة، أثبتنا استخدام ICGA لصورة الآفات المشيمية في HTRA1 الفئران المعدلة وراثيا. خصائص في وقت مبكر، المتوسطة، والمراحل المتأخرة من ICGA في نموذج الفأر لدينا تطابق بالطبع الوقت جيدا في الدراسات الإنسانية 1. هذا مهم لإجراء مقارنات أفضل بين أمراض الحيوان والظ?...

تصوير الأوعية الخضراء الإندوسيانين (ICGA) هو اختبار تشخيصي للمشاكل المتعلقة صورة الأوعية الدموية في العين. الامتصاص من ICG يتراوح 790-805 نانومتر بينما يتراوح الطيف الانبعاثات 770-880 نانومتر مع الانبعاثات ذروتها في 835 نانومتر 1. هذا يختلف عن الصبغة الشعبية الأخرى، فلوريسئين الصوديوم، الذي يقع في المدى المرئي الطيف. الطيف بالأشعة تحت الحمراء يمكن ICG لاختراق من خلال الشبكية ظهارة الصباغ (RPE)، والسوائل مصلي دموي، والإفرازات الدهنية، والتي يمكن أن تسد بسهولة عن طريق التصور الصوديوم فلوريسئين مقرها فلوريسئين تصوير الأوعية (FA). ICG في الأوعية الدموية مما يؤدي إلى تسرب أقل 98٪ من البروتين ملزمة، مما يتيح تعزيز تصوير الأوعية المشيمية والآفات المشيمية 1،2. ICGA يكاد يكون الخيار الوحيد لتصور الأوعية الدموية المشيمية، وهو الخلفي لRPE. الشكل 1 يبين المقارنة بين ICGA وFA في الأوعية الدموية في العينين التصوير الماوس. FA يمكن به استخدامها لصورة الأوعية الدموية في شبكية العين بشكل جيد ولكن ليس الأوعية الدموية المشيمية. في المقابل، ICGA يمكن استخدامها لصورة كل من شبكية العين والأوعية الدموية المشيمية. يتم تنفيذ ICGA مع أنظمة التصوير الرقمية عالية الدقة أو ناظور العيون المسح الضوئي ليزر (سلوفاكيا) جنبا إلى جنب مع كاميرات الفيديو الحساسة الأشعة تحت الحمراء، والتي سوف نستخدم في هذه الدراسة. في العيادة، وقد أوصى ICGA في تشخيص عدد من الاضطرابات المشيمية و الشبكية التي تنطوي على الأوعية الدموية المشيمية بما في ذلك Polypoidal غلاف العين المشيمي وعائي (PCV)، الشبكية الورم الوعائي انتشار (RAP)، والشرائط شبيه الأوعية، المحي الشكل البقعي الضمور، اعتلال المشيمية و الشبكية المصلي المركزي، ورم وعائي المشيمية، نزيف في شبكية العين macroaneurysms تصلب والأورام المشيمية، وأشكال معينة من التهاب القزحية الخلفي 1،3. مزيج من ICGA مع الاتحاد الانجليزي والبصرية بالاتساق التصوير المقطعي (أكتوبر) توفير أدوات قوية لالأطباء في تشخيص وإدارة نضحي البقعي المرتبط بالعمرالضمور (AMD) 4-10. ICGA مفيد خاصة لتشخيص الظروف التي تنطوي على المشيمية. في الواقع، يعتبر ICGA المعيار الذهبي لتشخيص PCV، وهو البديل من نضحي AMD 11-13. يتميز PCV من خلال شبكة من الأوعية المتفرعة مع التوسعات polypoidal محطة في الأوعية الدموية المشيمية 11-13. كثيرا ما يرتبط PCV مع مفارز مصلي دموي المتكررة من RPE والشبكية مع التسرب ونزيف من مكونات polypoidal 11،14،15. نحن ذكرت مؤخرا توليد أول نموذج حيواني PCV بالإعراب عن transgenically HTRA1 الإنسان، وهو الأنزيم البروتيني سيرين متعددة الوظائف، في شبكية العين الماوس الظهارة الصبغية (RPE) 16. أظهرنا أن زيادة HTRA1 يسببها السمات المميزة لPCV، مثل الآفات polypoidal. نحن هنا أثبتت الاستفادة من الوقت بالطبع ICGA بواسطة ذيل حقن الوريد في مجال البحوث AMD باستخدام لدينا HTRA1 نموذج الفأر. وتشير البيانات المتوفرة لدينا أنIV-ICGA متفوقة على الملكية الفكرية (أو تحت الجلد (SC)) ICGA التي يتم استخدامها حاليا في مجال 17،18 لوصف الآفات في المشيمية. بيان للبحوث الحيوان وأجريت التجارب على الحيوانات وفقا لبروتوكولات المعتمدة من قبل المؤسسات ورعاية الحيوان اللجنة استخدم (IACUC)، وأجريت وفقا للبيان ARVO لاستخدام الحيوانات في العيون والبحوث الرؤية.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="667">
	<tbody>
		<tr height="50">
			<td height="50" style="height:50px;width:216px;">Spectralis Multi-Modality Imaging System</td>
			<td style="width:152px;">Heidelberg Engineering, Germany</td>
			<td style="width:132px;">SPECTRALIS HRA+OCT</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Tropicamide ophthalmic solution (1%)</td>
			<td style="width:152px;">Bausch &#38; Lomb</td>
			<td style="width:132px;">NDC 24208-585-64</td>
			<td>for dilation of pupils</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">GenTeal Gel</td>
			<td style="width:152px;">Genteal</td>
			<td style="width:132px;">NDC 58768-791-15</td>
			<td>&#160;clear lubricant eye gel&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Ketamine</td>
			<td style="width:152px;">Vedco Inc</td>
			<td style="width:132px;">NDC 50989-996-06</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Xylazine</td>
			<td style="width:152px;">Lloyd Laboratories</td>
			<td style="width:132px;">NADA 139-236</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Acepromazine</td>
			<td style="width:152px;">Vedco Inc</td>
			<td style="width:132px;">NDC 50989-160-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">32-G Needle</td>
			<td>Steriject</td>
			<td style="width:132px;">PRE-32013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">1-ml syringe</td>
			<td style="width:152px;">BD</td>
			<td style="width:132px;">309659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Indocyanine Green</td>
			<td style="width:152px;">Pfaltz &#38; Bauer</td>
			<td style="width:132px;">I01250</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

detecting abnormalities in choroidal vasculature in a mouse model of age-related macular degeneration by time-course indocyanine green angiography

الإندوسيانين الأخضر تصوير الأوعية الدموية (أو ICGA) هي تقنية التي يقوم بها أطباء العيون لتشخيص تشوهات في الأوعية الدموية المشيمية والشبكية من أمراض العيون المختلفة مثل الضمور البقعي المرتبط بالعمر (AMD). ICGA يكون مفيدا بشكل خاص لصورة الأوعية الدموية المشيمية الخلفي من العين نظرا لقدرتها على اختراق من خلال طبقة مصطبغة مع الطيف بالأشعة تحت الحمراء. ويمكن تقسيم ICGA بالطبع الوقت في وقت مبكر، والمتوسطة، والمراحل المتأخرة. تقدم المراحل الثلاث معلومات قيمة عن علم الأمراض من مشاكل في العين. على الرغم من أن الوقت بالطبع ICGA بواسطة الوريد (IV) ويستخدم على نطاق واسع الحقن في عيادة لتشخيص وإدارة المشاكل المشيمية، ICGA طريق الحقن داخل الصفاق (IP) يشيع استخدامها في البحوث الحيوانية. نحن هنا أثبتت هذه التقنية للحصول على صور عالية الدقة ICGA الوقت بالطبع في الفئران عن طريق الحقن الوريد الذيل ومتحد البؤر المسح تنظير العين بالليزر. استخدمنا هذه التقنية لصورة المشيمية جنيهالتوترات في نموذج الفأر من سن المتصلة تحلل البقعة الصفراء. على الرغم من أنه من الأسهل بكثير أن أعرض ICG إلى الأوعية الدموية الماوس عن طريق IP، البيانات المتوفرة لدينا تشير إلى أنه من الصعب الحصول على استنساخه ICGA الصور بالطبع الوقت عن طريق IP-ICGA. في المقابل، ICGA عبر حقن الوريد الذيل يوفر جودة عالية ICGA الوقت بالطبع الصور مماثلة لدراسات الإنسان. بالإضافة إلى ذلك، أظهرت لنا أن ICGA أجريت على الفئران البيضاء يعطي صورة أكثر وضوحا من الأوعية المشيمية من ذلك أجريت على الفئران المصطبغة. نقترح ينبغي أن يصبح ذلك الوقت بالطبع IV-ICGA من الممارسات المعتادة في البحث AMD بناء على النماذج الحيوانية.

أجرينا ICGA بالطبع الوقت في HTRA1 الفئران المعدلة وراثيا والسيطرة تتزاحم WT، وكلاهما على خلفية CD1. وقد تم اختيار الخلفية CD1 البيضاء لتسهيل تصوير الأوعية الخضراء الإندوسيانين (ICGA) التصوير (انظر المناقشة). تمدد الأوعية الدموية مثل بعض التوسعات بدأت تظهر في المرحلة المبكرة في...

Watch this Scientific Journal Video about Detecting Abnormalities in Choroidal Vasculature in a Mouse Model of Age-related Macular Degeneration by Time-course Indocyanine Green Angiography at JoVE.com

Detecting Abnormalities in Choroidal Vasculature in a Mouse Model of Age-related Macular Degeneration by Time-course Indocyanine Green Angiography

الإندوسيانين الأخضر تصوير الأوعية الدموية (أو ICGA) التي يؤديها حقن الوريد الذيل يوفر جودة عالية الصور ICGA بالطبع الوقت لتميز شذوذ في الماوس المشيمية.

الكشف عن شذوذ في الأوعية الدموية في غلاف العين المشيمي في نموذج الفأر من السن المتصلة تحلل البقعة الصفراء عن طريق التوقيت بالطبع الإندوسيانين الأخضر تصوير الأوعية الدموية

Indocyanine Green&#160;Angiography (or ICGA) is a technique performed by ophthalmologists to diagnose abnormalities of the choroidal and retinal ...

detecting-abnormalities-choroidal-vasculature-mouse-model-age-related

Research

JoVE Journal

Medicine

13.5K Views.  University of Utah Health Sciences Center.  الإندوسيانين الأخضر تصوير الأوعية الدموية (أو ICGA) التي يؤديها حقن الوريد الذيل يوفر جودة عالية الصور ICGA بالطبع الوقت لتميز شذوذ في الماوس المشيمية. 

Video: Detecting Abnormalities in Choroidal Vasculature in a Mouse Model of Age-related Macular Degeneration by Time-course Indocyanine Green Angiography

Noninvasive Assessment of Cardiac Abnormalities in Experimental Autoimmune Myocarditis by Magnetic Resonance Microscopy Imaging in the Mouse

Myocarditis is an inflammation of the myocardium, but only ~10% of those affected show clinical manifestations of the disease. To study the immune events of myocardial injuries, various mouse models of myocarditis have been widely used. This study involved experimental autoimmune myocarditis (EAM) induced with cardiac myosin heavy chain (Myhc)-&#945; 334-352 in A/J mice; the affected animals develop lymphocytic myocarditis but with no apparent clinical signs. In this model, the utility of magnetic resonance microscopy (MRM) as a non-invasive modality to determine the cardiac structural and functional changes in animals immunized with Myhc-&#945; 334-352 is shown. EAM and healthy mice were imaged using a 9.4 T (400 MHz) 89 mm vertical core bore scanner equipped with a 4 cm millipede radio-frequency imaging probe and 100 G/cm triple axis gradients. Cardiac images were acquired from anesthetized animals using a gradient-echo-based cine pulse sequence, and the animals were monitored by respiration and pulse oximetry. The analysis revealed an increase in the thickness of the ventricular wall in EAM mice, with a corresponding decrease in the interior diameter of ventricles, when compared with healthy mice. The data suggest that morphological and functional changes in the inflamed hearts can be non-invasively monitored by MRM in live animals. In conclusion, MRM offers an advantage of assessing the progression and regression of myocardial injuries in diseases caused by infectious agents, as well as response to therapies.

This study demonstrates the successful establishment of magnetic resonance microscopy imaging as a non-invasive tool to assess the cardiac abnormalities in mice affected with autoimmune myocarditis. The data indicate that the technique can be used to monitor the disease-progression in live animals.

تقييم موسع من القلب شذوذ في التجريبية المناعة الذاتية التهاب عضلة القلب بواسطة التصوير بالرنين المغناطيسي المجهر في ماوس

Myocarditis is an inflammation of the myocardium, but only ~10% of those affected show clinical manifestations of the disease. To study the immune events ...

A Mouse Model for Laser-induced Choroidal Neovascularization

The mouse laser-induced choroidal neovascularization (CNV) model has been a crucial mainstay model for neovascular age-related macular degeneration (AMD) research. By administering targeted laser injury to the RPE and Bruch&#8217;s membrane, the procedure induces angiogenesis, modeling the hallmark pathology observed in neovascular AMD. 
First developed in non-human primates, the laser-induced CNV model has come to be implemented into many other species, the most recent of which being the mouse. Mouse experiments are advantageously more cost-effective, experiments can be executed on a much faster timeline, and they allow the use of various transgenic models. The miniature size of the mouse eye, however, poses a particular challenge when performing the procedure. Manipulation of the eye to visualize the retina requires practice of fine dexterity skills as well as simultaneous hand-eye-foot coordination to operate the laser. However, once mastered, the model can be applied to study many aspects of neovascular AMD such as molecular mechanisms, the effect of genetic manipulations, and drug treatment effects. 
The laser-induced CNV model, though useful, is not a perfect model of the disease. The wild-type mouse eye is otherwise healthy, and the chorio-retinal environment does not mimic the pathologic changes in human AMD. Furthermore, injury-induced angiogenesis does not reflect the same pathways as angiogenesis occurring in an age-related and chronic disease state as in AMD.
Despite its shortcomings, the laser-induced CNV model is one of the best methods currently available to study the debilitating pathology of neovascular AMD. Its implementation has led to a deeper understanding of the pathogenesis of AMD, as well as contributing to the development of many of the AMD therapies currently available.

Here, we present the mouse laser-induced choroidal neovascularization (CNV) protocol, an experimental model that re-creates the vascular hallmarks of neovascular age-related macular degeneration (AMD). Once mastered, it can reliably and effectively induce CNV as a model system to test various experimental measures.

نموذج الفأر ليزر بفعل اتساع الأوعية الدموية المشيمية

The mouse laser-induced choroidal neovascularization (CNV) model has been a crucial mainstay model for neovascular age-related macular degeneration (AMD) ...

The Monoiodoacetate Model of Osteoarthritis Pain in the Mouse

A major symptom of patients with osteoarthritis (OA) is pain that&#160;is triggered by peripheral as well as central changes within the pain pathways. The current treatments for OA pain such as NSAIDS or opiates are neither sufficiently effective nor devoid of detrimental side effects. Animal models of OA are being developed to improve our understanding of OA-related pain mechanisms and define novel pharmacological targets for therapy. Currently available models of OA in rodents include surgical and chemical interventions into one knee joint. The monoiodoacetate (MIA) model has become a standard for modelling joint disruption in OA in both rats and mice. The model, which is easier to perform in the rat, involves injection of MIA into a knee joint that induces rapid pain-like responses in the ipsilateral limb, the level of which can be controlled by injection of different doses. Intra-articular injection of MIA disrupts chondrocyte glycolysis by inhibiting glyceraldehyde-3-phosphatase dehydrogenase and results in chondrocyte death, neovascularization, subchondral bone necrosis and collapse, as well as inflammation. The morphological changes of the articular cartilage and bone disruption are reflective of some aspects of patient pathology. Along with joint damage, MIA injection induces referred mechanical sensitivity in the ipsilateral hind paw and weight bearing deficits that are measurable and quantifiable. These behavioral changes resemble some of the symptoms reported by the patient population, thereby validating the MIA injection in the knee as a useful and relevant pre-clinical model of OA pain.
The aim of this article is to describe the methodology of intra-articular injections of MIA and the behavioral recordings of the associated development of hypersensitivity with a mind to highlight the necessary steps to give consistent and reliable recordings.

Osteoarthritis (OA), or degenerative joint disease, is a debilitating condition associated with pain that remains only partially controlled by available analgesics. Animal models are being developed to improve our understanding of OA-related pain mechanisms. Here we describe the methodology for the monoiodoacetate model of OA pain in the mouse.

نموذج Monoiodoacetate الألم في التهاب المفاصل في الماوس

A major symptom of patients with osteoarthritis (OA) is pain that&#160;is triggered by peripheral as well as central changes within the pain pathways. The ...

Detecting Anastasis In Vivo by CaspaseTracker Biosensor

Anastasis (Greek for &#8220;rising to life&#8221;) is a recently discovered cell recovery phenomenon whereby dying cells can reverse late-stage cell death processes that are generally assumed to be intrinsically irreversible. Promoting anastasis could in principle rescue or preserve injured cells that are difficult to replace such as cardiomyocytes or neurons, thereby facilitating tissue recovery. Conversely, suppressing anastasis in cancer cells, undergoing apoptosis after anti-cancer therapies, may ensure cancer cell death and reduce the chances of recurrence. However, these studies have been hampered by the lack of tools for tracking the fate of cells that undergo anastasis in live animals. The challenge is to identify the cells that have reversed the cell death process despite their morphologically normal appearance after recovery. To overcome this difficulty, we have developed Drosophila and mammalian CaspaseTracker biosensor systems that can identify and permanently track the anastatic cells in vitro or in vivo. Here, we present in vivo protocols for the generation and use of the CaspaseTracker dual biosensor system to detect and track anastasis in Drosophila melanogaster after transient exposure to cell death stimuli. While conventional biosensors and protocols can label cells actively undergoing apoptotic cell death, the CaspaseTracker biosensor can permanently label cells that have recovered after caspase activation - a hallmark of late-stage apoptosis, and simultaneously identify active apoptotic processes. This biosensor can also track the recovery of the cells that attempted other forms of cell death that directly or indirectly involved caspase activity. Therefore, this protocol enables us to continuously track the fate of these cells and their progeny, facilitating future studies of the biological functions, molecular mechanisms, physiological and pathological consequences, and therapeutic implications of anastasis. We also discuss the appropriate controls to distinguish cells that undergo anastasis from those that display non-apoptotic caspase activity in vivo.

Detecting Anastasis In Vivo by CaspaseTracker Biosensor

Anastasis is technically challenging to detect in vivo because the cells that have reversed the cell death process can be morphologically indistinguishable from normal healthy cells. Here we describe protocols for detecting and tracking cells that undergo anastasis in live animals by using our newly developed in vivo CaspaseTracker biosensor system.

الكشف عن القيامة في فيفو قبل بيوسينسور كاسباسيتراكير

Anastasis (Greek for &#8220;rising to life&#8221;) is a recently discovered cell recovery phenomenon whereby dying cells can reverse late-stage cell death ...

Regenerative Therapy by Suprachoroidal Cell Autograft in Dry Age-related Macular Degeneration: Preliminary In Vivo Report

This study is aimed at examining whether a suprachoroidal graft of autologous cells can improve best corrected visual acuity (BCVA) and responses to microperimetry (MY) in eyes affected by dry Age-related Macular Degeneration (AMD) over time through the production and secretion of growth factors (GFs) on surrounding tissue. Patients were randomly assigned to each study group. All patients were diagnosed with dry AMD and with BCVA equal to or greater than 1 logarithm of the minimum angle of resolution (logMAR). A suprachoroidal autologous graft by Limoli Retinal Restoration Technique (LRRT) was carried out on group A, which included 11 eyes from 11 patients. The technique was performed by implanting adipocytes, adipose-derived stem cells obtained from the stromal vascular fraction, and platelets from platelet-rich plasma in the suprachoroidal space. Conversely, group B, including 14 eyes of 14 patients, was used as a control group. For each patient, diagnosis was verified by confocal scanning laser ophthalmoscope and spectral domain-optical coherence tomography (SD-OCT). In group A, BCVA improved by 0.581 to 0.504 at 90 days and to 0.376 logMAR at 180 days (+32.20%) postoperatively. Furthermore, MY test increased by 11.44 dB to 12.59 dB at 180 days. The different cell types grafted behind the choroid were able to ensure constant GF secretion in the choroidal flow. Consequently, the results indicate that visual acuity (VA) in the grafted group can increase more than in the control group after six months.

Regenerative Therapy by Suprachoroidal Cell Autograft in Dry Age-related Macular Degeneration: Preliminary In Vivo Report

The goal of this study is to assess whether the suprachoroidal graft of adipose-derived stem cells included in the stromal vascular fraction and platelets derived from platelet-rich plasma by the Limoli Retinal Restoration Technique can improve visual acuity and retinal sensitivity responses in eyes affected by dry age-related macular degeneration.

العلاج التجديدي بخلية سوبراتشورويدال أوتوجرافت في الجافة المرتبطة بالسن البقعي: تقرير أولى في فيفو

This study is aimed at examining whether a suprachoroidal graft of autologous cells can improve best corrected visual acuity (BCVA) and responses to ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and drugs. It is widely used in many studies on the physiological functions of vascular smooth muscle, the pathogenesis of vascular diseases such as hypertension, and the development of smooth muscle relaxant drugs. The mouse is a widely used model animal with a large pool of disease models and genetically modified strains. We introduced this method to measure the isometric contraction of mouse mesenteric artery in detail. A 1.4-mm segment of mouse mesenteric resistance artery was isolated and mounted on a myograph chamber by passing two steel wires through its lumen. After equilibration and normalization steps, the vessel segment was potentiated by a high-K+ solution twice prior to the contraction assay. As an example of the application of this method in drug development, we measured the relaxant effect of a novel natural substance, neoliensinine, isolated from a Chinese herb, embryos of the lotus seed (Nelumbo nucifera Gaertn.) on mouse mesenteric arteries. The vessel segments mounted on the myograph chamber were stimulated with a high-K+ solution. When the force tension reached a stable sustained phase, cumulative doses of neoliensinine were added to the chamber. We found that neoliensinine had a dose-dependent relaxant effect on smooth muscle contraction, thus suggesting that it bears potential activity against hypertension. In addition, as the vessel segment can survive at least 4 hours after mounting and maintain contractility induced by the high-K+ solution for many times, we suggest that the wire myograph system may be used for the time-consuming process of drug screening.

The wire myograph technique is used to investigate vascular smooth muscle functions and screen new drugs. We report a detailed protocol for measuring the isometric contractility of the mouse mesenteric artery and for screening new relaxants of vascular smooth muscle.

متساوي القياس كونتراكتيليتي القياس الشريان المساريقي العلوي الماوس باستخدام أسلاك ميوجرافي

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

A Neonatal BALB/c Mouse Model of Necrotizing Enterocolitis

Necrotizing enterocolitis (NEC) is the most severe gastrointestinal (GI) disease that often occurs in premature infants, especially very low birth weight infants, with high mortality and unclear pathogenesis. The cause of NEC may be related to inflammatory immune regulatory system abnormalities. An NEC animal model is an indispensable tool for NEC disease immune research. NEC animal models usually use C57BL/6J neonatal mice; BALB/c neonatal mice are rarely used. Related studies have shown that when mice are infected, Th2 cell differentiation is predominant in BALB/c mice compared to C57BL/6J mice. Studies have suggested that the occurrence and development of NEC are associated with an increase in T helper type 2 (Th2) cells and are generally accompanied by infection. Therefore, this study used neonatal BALB/c mice to induce an NEC model with similar clinical characteristics and intestinal pathological changes as those observed in children with NEC. Further study is warranted to determine whether this animal model could be used to study Th2 cell responses in NEC.

Necrotizing enterocolitis (NEC) is the most severe gastrointestinal (GI) disease that often occurs in premature infants, especially very low birth weight infants, with high mortality and unclear pathogenesis. The cause of NEC may be related to inflammatory immune regulatory system abnormalities. An NEC animal model is an indispensable tool for NEC disease immune research. NEC animal models usually use C57BL/6J neonatal mice; BALB/c neonatal mice are rarely used. Related studies have shown that when mice are infected, Th2 cell differentiation is predominant in BALB/c mice compared to C57BL/6J mice. Studies have suggested that the occurrence and development of NEC are associated with an increase in T helper type 2 (Th2) cells and are generally accompanied by infection. Therefore, this study used neonatal BALB/c mice to induce an NEC model with similar clinical characteristics and intestinal pathological changes as those observed in children with NEC. Further study is warranted to determine whether this animal model could be used to study Th2 cell responses in NEC.

نموذج فأر BALB/c الوليدي لالتهاب الأمعاء والقولون الناخر

Necrotizing enterocolitis (NEC) is the most severe gastrointestinal (GI) disease that often occurs in premature infants, especially very low birth weight ...

Robotic Left Hepatectomy using Indocyanine Green Fluorescence Imaging for an Intrahepatic Complex Biliary Cyst

Biliary cysts (BC) are rare congenital dilatations of intra- and extrahepatic parts of the biliary tract and bear a significant risk of carcinogenesis. Surgery is the cornerstone treatment for patients with BC. While total BC excision and Roux-Y hepaticojejunostomy is the treatment method of the choice in patients with extrahepatic BC (i.e., Todani I-IV), patients with intrahepatic BC (i.e., Todani V) benefit the most from a surgical liver resection. In recent years, minimally invasive liver surgery (MILS) including robotic MILS has gained more acceptance as a feasible, safe, and effective procedure for the treatment of both benign and malignant indications. Robotic major MILS is still considered technically demanding and a detailed description of the technical approach during robotic major MILS has only been limitedly discussed in the literature. The current article describes the main steps for a robotic left hepatectomy in a patient with a large BC Todani Type V. The patient is in French position with 5 trocars placed (4 robotic, 1 laparoscopic assistant). After mobilizing the left hemiliver, the left and right hepatic artery are dissected carefully followed by a cholecystectomy. Intraoperative ultrasound is performed to confirm localization and margins of the BC. The Left hepatic artery and left portal vein are isolated, clipped, and divided. Indocyanine green (ICG) fluorescence imaging is used regularly during the entire procedure to visualize and confirm biliary tract anatomy and the BC. Parenchymal transection is performed with robotic cautery hook for the superficial part and robotic cautery spatula, bipolar cautery, and vessel sealer for the deeper parenchyma. The postoperative course was uncomplicated. A robotic left hepatectomy is technically demanding, yet a feasible and safe procedure. ICG-fluorescence imaging aids in delineating the BC and bile duct anatomy. Further, comparative studies are needed to confirm clinical benefits of robotic MILS for benign and malignant indications.

Robotic liver surgery has gained more acceptance as a feasible, safe, and effective procedure for the treatment of both benign and malignant indications. However, robotic left hepatectomy is still technically demanding. We describe our surgical technique of a robotic left hepatectomy using indocyanine green fluorescence imaging for a large biliary cyst.

استئصال الكبد الأيسر الروبوتي باستخدام تصوير الإندوسيانين الأخضر الفلوري لكيس نقاوي معقد داخل الكبد

Biliary cysts (BC) are rare congenital dilatations of intra- and extrahepatic parts of the biliary tract and bear a significant risk of carcinogenesis. ...

Fluorescent Laparoscopic Central Hepatectomy for Liver Cancer Using Indocyanine Green Negative Staining

Laparoscopic hepatectomy is an important treatment method for liver cancer. In the past, the resection boundary was usually determined by intraoperative ultrasound, important vascular structures, and surgeon experience. With the development of anatomical hepatectomy, visual surgery technology has gradually been applied to this type of surgery, particularly indocyanine green (ICG)-guided anatomical hepatectomy. As ICG can be specifically ingested by hepatocytes and used for fluorescence tracing, negative staining techniques have been applied according to different tumor positions. Under ICG fluorescent guidance, the surface boundary and deep resection plane can be more accurately displayed during liver resection. Thus, the tumor-bearing liver segment can be anatomically removed, which helps to avoid damage to important vessels and reduce ischemia or congestion of the remaining liver tissue. Finally, the incidence of postoperative biliary fistula and liver dysfunction is reduced; therefore, a better prognosis is obtained after the resection of liver cancer. Centrally located liver cancer is usually defined as a tumor located at segments 4, 5, or 8 that requires resection of the middle section of the liver. These are among the most difficult hepatectomies to perform because of the large surgical wounds and multiple vessel transections. Based on the specific tumor location, we formulated the required resection ranges by designing personalized fluorescent staining strategies. By completing anatomical resection based on the portal territory, this work aims to achieve the best therapeutic effect.

The present protocol describes fluorescent negative staining in laparoscopic central hepatectomy. This technique can make hepatectomy more accurate and precise.

استئصال الكبد المركزي بالمنظار الفلوري لسرطان الكبد باستخدام تلطيخ الإندوسيانين الأخضر السلبي

Laparoscopic hepatectomy is an important treatment method for liver cancer. In the past, the resection boundary was usually determined by intraoperative ...

استكشاف التألق الذاتي الكمي في التنكس البقعي المرتبط بالعمر

A Workflow to Quantitatively Determine Age-Related Macular Degeneration Lesion-Specific Variations in Fundus Autofluorescence

Fundus autofluorescence (FAF) imaging allows the noninvasive mapping of intrinsic fluorophores of the ocular fundus, particularly the retinal pigment epithelium (RPE), now quantifiable with the advent of confocal scanning laser ophthalmoscopy-based quantitative autofluorescence (QAF). QAF has been shown to be generally decreased at the posterior pole in age-related macular degeneration (AMD). The relationship between QAF and various AMD lesions (drusen, subretinal drusenoid deposits) is still unclear.
This paper describes a workflow to determine lesion-specific QAF in AMD. A multimodal in vivo imaging approach is used, including but not limited to spectral domain optical coherence tomography (SD-OCT) macular volume scanning and QAF. Using customized FIJI plug-ins, the corresponding QAF image is aligned with the near-infrared image from the SD-OCT scan (characteristic landmarks; i.e., vessel bifurcations). The foveola and the edge of the optic nerve head are marked in the OCT images (and transferred to the registered QAF image) for accurate positioning of the analysis grids.
AMD-specific lesions can then be marked on individual OCT BScans or the QAF image itself. Normative QAF maps are created to account for the varying mean and standard deviation of QAF values throughout the fundus (QAF images from a representative AMD group were averaged to build normative standard retinal QAF AMD maps). The plug-ins record the X and Y coordinates, z-score (a numerical measurement that describes the QAF value in relation to the mean of AF maps in terms of standard deviation from the mean), mean intensity value, standard deviation, and number of pixels marked. The tools also determine z-scores from the border zone of marked lesions.&#160;This workflow and the analysis tools will improve the understanding of the pathophysiology and clinical AF image interpretation in AMD.

تسليط الضوء على المؤلف: فهم الفيزيولوجيا المرضية للتنكس البقعي المرتبط بالعمر باستخدام سير عمل QAF 

This research describes a workflow to determine and compare autofluorescence levels from individual regions of interest (e.g., drusen and subretinal drusenoid deposits in age-related macular degeneration [AMD]) while accounting for varying autofluorescence levels throughout the fundus.

سير عمل لتحديد الاختلافات الخاصة بآفة التنكس البقعي المرتبطة بالعمر في التألق الذاتي لقاع العين

Fundus autofluorescence (FAF) imaging allows the noninvasive mapping of intrinsic fluorophores of the ocular fundus, particularly the retinal pigment ...