עבודה זו נתמכה על ידי מענק NIH 1R01EY022901, פיתוח פרס קריירה ממחקר למניעת עיוורון (RPB), קרן CMReeves &amp; MA ריבס, א &#39;מטילדה זיגלר קרן לעיוור, אבירי טמפלרים עיניים קרן, ומענק בלתי מוגבל למחלקה רפואת עיניים באוניברסיטת יוטה מRPB. אנו מודים Balamurali Ambati לקבלת סיוע טכני בשיטה רב מערכת Spectralis ההדמיה וטאו ז&#39;אנג לדיונים והערות על כתב היד.

1. הכנת מכשירים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ההליך מבוצע בהליך חדר במתקן בעלי חיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לובש מסכות, כובעי שיער, שמלות כירורגית, רגל כיסויים סטריליים, וכפפות לפני תחילת הניסוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מחממים מים בכוס ל~ 40 ° C על פלטה חמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח כרית כחולה סטרילי על גבי כרית חימום שישמש מאוחר יותר כדי לשמור על טמפרטורת הגוף של העכבר במהלך הדמיה. הפעל את כרית החימום. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן את מערכת ההדמיה: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את מכסה האבק ולהפעיל את הלייזר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להוציא את עדשת 55 ° ולהעלות אותו על גבי המכונה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פתח את תוכנת הדמיה מהמחשב וקלט את המידע של העכבר להדמיה מתחת לסדין של חולה חדש (למשל גנוטיפ, גיל, וכו &#39;.). תחת &quot;סוג ההתקן&quot;, בחר מצב אינפרא אדום (IR). </li></ol></li></ol> הערה: זה כבר דווח כי o השימושf עדשה אספריים כפולה חיצונית יכולה לשפר את איכות תמונת 17-20 אם כי אין לנו בעיה בקבלת תמונות באיכות גבוהה על ידי IV-ICGA ללא שימוש בעדשות חיצוניות (ראה תוצאות נציג, איורים 1-4). 2. הזרקה לוריד זנב של ICGA <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להתרחב עיני עכבר עם 1% פתרון עיני Tropicamide ולהמתין 5 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשקול את העכבר כדי לקבוע את הסכום של הרדמה (65-100/10-20/1-3 מ&quot;ג / קילוגרם קטמין / Xylazine / acepromazine) לפי צורך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אחזר מזרק 1 מ&quot;ל סטרילי יחד עם מחט G 32. הזרק את העכבר intraperitoneally עם ההרדמה (13 מ&quot;ג / מיליליטר קטמין, 2.6 מ&quot;ג / מיליליטר Xylazine, 0.3 מ&quot;ג / מיליליטר acepromazine בסטרילי PBS). חכה עד שהעכבר הוא בהרדמה מלאה (~ 5 דקות). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את זנב העכבר ל40 מים חמים C ° לגרום vasodilatation של הווריד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אחזר מזרק 1 מיליליטר עם מחט G 32. למשוך את הסכום הרצוי של ICG, בדרך כלל 50 μl של מ&quot;ג / מיליליטר ICG 1, שהוא סטרילי מסונן עם מסנן מזרק 0.2 מיקרומטר לתוך צינור סטרילי, לעכבר 25 g (2 מ&quot;ג / קילוגרם). היזהר שלא להציג את כל אוויר לתוך המזרק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נגב את הזנב עם ספוגית אלכוהול כדי לחטא את האזור להיות מוזרקים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החזק את הזנב ביד אחת, כך שוריד הזנב לרוחב הוא כלפי מעלה. עם השיפוע של המחט פונה כלפי מעלה, להזריק את המחט ~ 2 מ&quot;מ לתוך הווריד בזווית מינימאלית. היזהר שלא לחורר את הווריד. צייר את הבוכנה מעט ולחפש עקבות של זרימת דם לרכזת המחט, אשר מצביעה על כך שהמחט הוכנסה בהצלחה לווריד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאט לאט להזריק ICG לווריד. לא צריך להיות התנגדות מינימאלית כאשר הזרקה. הסר את המחט ולהחיל ספוגית אלכוהול ישירות לאתר הזרקה ל~ 5-10 שניות כדי לעצור את דימום. העכבר הוא אז מוכן הדמיה. על מנת לתפוס את השלב המוקדם (0-4 דקות לאחר הזרקה), זה הוא essential לתמונה את העכבר במהירות. </li></ol> הערה: עיני עכבר יכולות לקבל בקלות יבשה ויכולות לפתח קטרקט תחת הרדמה. זה חשוב לשמור על העיניים לחות על ידי יישום סטרילי PBS במהלך ההליך. נגב את PBS העודף עם מקלון צמר גפן סטרילי לפני הקלטת ICGA. מעבדות אחרות השתמשו בעדשות מגע כדי למנוע התייבשות של 17-20 הקרנית. 3. אנגיוגרפיה ICG <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להתחיל לקחת תמונות 30-40 שניות לאחר הזרקת ICG, המאפשרת לכידתו של השלב המוקדם של מילוי כורוידאלית עד תפוצה רשתית וכורוידאלית נמצאות בבהירות מקסימלית (0-4 דק &#39;). כלי הדם ברשתית הוא מדמיין הטוב ביותר במוקד ~ 35-45 דיופטריות וכלי דם כורוידאלית היא דמיינו ב10-15 דיופטריות. הערה: במהלך הבדיקה הראשונה של מודל חיה, מומלץ ללכוד תמונות מכל הזוויות (האף, זמני, הגב וגחון) לזהות את כל abno האפשריrmalities בכלי הדם. במהלך השלב המוקדם, שני עורקים כורוידאלית בינוניים וגדולים וורידים הם דמיינו היטב. במודל של בעלי החיים המשמשים בפרוטוקול זה, נגעים כורוידאלית (למשל polypoidal dilations) עשויים להתחיל להופיע 1 דקות לתוך השלב מוקדם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדר את מיקוד תמונה על כלי הדם. שליטה על בהירות ולהתמקד באמצעות מודול הבקרה וידית פוקוס, בהתאמה. ערכים אלה הם מתכווננת דיגיטלית ונשמרים בקלות קבועה. שמור על המרחק מהעין העכבר כדי קבוע עדשת מצלמה כדי להבטיח איכות תמונה היא שחזור תוך שימוש בטכניקה הבאה. הערה: מאחר והמכשיר יכול רק תמונה חלק של העין האחורית, אנחנו מנסים לשמור את הפוקוס, בהירות, ואת המרחק בין עדשת המצלמה ואת העין העכבר קבועה כפי שתמונת העין כולה האחורית מזוויות שונות. המפתח לכך הוא כדי ליישר את הארה בצורת העיגול הנפלטת על ידי ICG דרך עין עם השדה של view של המצלמה. המטרה זו מושגת על ידי הפיכת משמאל לימין, התאמות למעלה ולמטה, וב- and-out של מיקום המצלמה עד שיש את התמונה כולה אין אזורים כהים. כאשר הארה ואת שדה הראיה של המצלמה הן בשורה, המרחק מהעין לעדשה יהיה לשעתק לסדרה הבאה של תמונות, כמו גם במרחק אופטימלי להדמיה באיכות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע שכלי הדם הוא בפוקוס, ללכוד את מסגרות תמונה על ידי לחיצה על הכפתור השחור העגול במודול הרכישה. גם הכפתור העגול השחור יכול לשמש כדי להפחית או לשפר את האות של ICG לאיכות תמונה הטובה ביותר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לקבוע את הזווית האופטימלית תצוגה ועומק התמקדות לנגעים כורוידאלית תמונה. זה חשוב כדי לשמור על העמדה של העין, עומק ההתמקדות, והגדרות מכשיר אחרות שנקבעו לICGA זמן כמובן כולו. התמונות נשמרות על ידי לחיצה על לחצן לרכוש בפנל מסך מגע של מודול הרכישה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לרכוש תמונות בשלב ביניים ב6-15 ירכתי דקותהזרקה אה. הערה: שני כורוידאלית וכלי רשתית נעשים פחות ברורים. כלי דם Choroidal מופיע הקרינה מפוזרת כ. נגעי Choroidal מציגים hyperfluorescence לצוץ בניגוד לדהייה סביב הקרינה רקע נורמלית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לרכוש תמונות בשלב מאוחר ב17-25 דקות לאחר הזרקה. הערה: Hyperfluorescence נמוג. שני כלי כורוידאלית ורשתית הם כבר לא נראים לעין. ראש עצב הראייה הופך לשחור. יש נגעים כורוידאלית Hyperfluorescent ניגוד מקסימאלי עם רקע הדהיה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר שסיים את הרכישה של תמונות, להחיל ג&#39;ל עיני סיכה ברור לעיני עכבר ולעזוב את העכבר על כרית חימום להתאוששות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להחזיר עכברים לכלובים והאזור מחזיק. יצוא תמונות כקובצי TIFF או JPEG לניתוח נוסף. </li></ol> הערה: התזמון של כל שלב אינו מוחלט. מצאנו כי העיתוי של eaשלב ch עשוי להשתנות בהתאם לכמות של ICG המוזרק. יותר ICG נוטה להאריך כל שלב. הדרך הטובה ביותר להגדיר את השלב היא על פי התכונות העיקריות של כל שלב המפורט לעיל.

<ol>
	<li>Duane, T. D., Tasman, W., Jaeger, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Chapter 4a, Indocyanine Green Angiography. Duane's clinical ophthalmology on CD-ROM. , (2002).</li><li>Alfaro, D. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Age-related macular degeneration : a comprehensive textbook. , (2006).</li><li>Yannuzzi, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Indocyanine+green+angiography:+a+perspective+on+use+in+the+clinical+setting.">Indocyanine green angiography: a perspective on use in the clinical setting.</a> Am. J. Ophthalmol. 151, 745-751 (2011).</li><li>Destro, M., Puliafito, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Indocyanine+green+videoangiography+of+choroidal+neovascularization.">Indocyanine green videoangiography of choroidal neovascularization.</a> Ophthalmology. 96, 846-853 (1989).</li><li>Scheider, A., Schroedel, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+resolution+indocyanine+green+angiography+with+a+scanning+laser+ophthalmoscope.">High resolution indocyanine green angiography with a scanning laser ophthalmoscope.</a> Am. J. Ophthalmol. 108, 458-459 (1989).</li><li>Guyer, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Digital+indocyanine-green+angiography+in+chorioretinal+disorders.">Digital indocyanine-green angiography in chorioretinal disorders.</a> Ophthalmology. 99, 287-291 (1992).</li><li>Yannuzzi, L. A., Slakter, J. S., Sorenson, J. A., Guyer, D. R., Orlock, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Digital+indocyanine+green+videoangiography+and+choroidal+neovascularization.">Digital indocyanine green videoangiography and choroidal neovascularization.</a> Retina. 12, 191-223 (1992).</li><li>Regillo, C. D., Benson, W. E., Maguire, J. I., Annesley, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Indocyanine+green+angiography+and+occult+choroidal+neovascularization.">Indocyanine green angiography and occult choroidal neovascularization.</a> Ophthalmology. 101, 280-288 (1994).</li><li>Scheider, A., Kaboth, A., Neuhauser, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+subretinal+neovascular+membranes+with+indocyanine+green+and+an+infrared+scanning+laser+ophthalmoscope.">Detection of subretinal neovascular membranes with indocyanine green and an infrared scanning laser ophthalmoscope.</a> Am. J. Ophthalmol. 113, 45-51 (1992).</li><li>Kuck, H., Inhoffen, W., Schneider, U., Kreissig, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnosis+of+occult+subretinal+neovascularization+in+age-related+macular+degeneration+by+infrared+scanning+laser+videoangiography.">Diagnosis of occult subretinal neovascularization in age-related macular degeneration by infrared scanning laser videoangiography.</a> Retina. 13, 36-39 (1993).</li><li>Imamura, Y., Engelbert, M., Iida, T., Freund, K. B., Yannuzzi, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polypoidal+choroidal+vasculopathy:+a+review.">Polypoidal choroidal vasculopathy: a review.</a> Surv. Ophthalmol. 55, 501-515 (2010).</li><li>Ciardella, A. P., Donsoff, I. M., Yannuzzi, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polypoidal+choroidal+vasculopathy.">Polypoidal choroidal vasculopathy.</a> Ophthalmol. Clin. N. Am. 15, 537-554 (2002).</li><li>Spaide, R. F., Yannuzzi, L. A., Slakter, J. S., Sorenson, J., Orlach, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Indocyanine+green+videoangiography+of+idiopathic+polypoidal+choroidal+vasculopathy.">Indocyanine green videoangiography of idiopathic polypoidal choroidal vasculopathy.</a> Retina. 15, 100-110 (1995).</li><li>Coppens, G., Spielberg, L., Leys, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polypoidal+choroidal+vasculopathy,+diagnosis+and+management.">Polypoidal choroidal vasculopathy, diagnosis and management.</a> Bull. Soc. belge d'Ophtalmol.. , 39-44 (2011).</li><li>Tsujikawa, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pigment+epithelial+detachment+in+polypoidal+choroidal+vasculopathy.">Pigment epithelial detachment in polypoidal choroidal vasculopathy.</a> Am. J. Ophthalmol. 143, 102-111 (2007).</li><li>Jones, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+expression+of+multifunctional+serine+protease,+HTRA1,+in+retinal+pigment+epithelium+induces+polypoidal+choroidal+vasculopathy+in+mice.">Increased expression of multifunctional serine protease, HTRA1, in retinal pigment epithelium induces polypoidal choroidal vasculopathy in mice.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 108, 14578-14583 (2011).</li><li>Alex, A. F., Heiduschka, P., Eter, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retinal+fundus+imaging+in+mouse+models+of+retinal+diseases.">Retinal fundus imaging in mouse models of retinal diseases.</a> Methods Mol. Biol. 935, 41-67 (2013).</li><li>Seeliger, M. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+confocal+imaging+of+the+retina+in+animal+models+using+scanning+laser+ophthalmoscopy.">In vivo confocal imaging of the retina in animal models using scanning laser ophthalmoscopy.</a> Vision Res. 45, 3512-3519 (2005).</li><li>Fischer, M. D., Zhour, A., Kernstock, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phenotyping+of+mouse+models+with+OCT.">Phenotyping of mouse models with OCT.</a> Methods Mol. Biol. 935, 79-85 (2013).</li><li>Jian, Y., Zawadzki, R. J., Sarunic, M. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adaptive+optics+optical+coherence+tomography+for+in+vivo+mouse+retinal+imaging.">Adaptive optics optical coherence tomography for in vivo mouse retinal imaging.</a> J. Biomed. Opt. 18, 56007 (2013).</li><li>Ciardella, A. P., Donsoff, I. M., Huang, S. J., Costa, D. L., Yannuzzi, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polypoidal+choroidal+vasculopathy.">Polypoidal choroidal vasculopathy.</a> Surv. Ophthalmol. 49, 25-37 (2004).</li><li>Sasahara, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polypoidal+choroidal+vasculopathy+with+choroidal+vascular+hyperpermeability.">Polypoidal choroidal vasculopathy with choroidal vascular hyperpermeability.</a> Am. J. Ophthalmol. 142, 601-607 (2006).</li><li>Silva, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polypoidal+choroidal+vasculopathy+and+photodynamic+therapy+with+verteporfin.">Polypoidal choroidal vasculopathy and photodynamic therapy with verteporfin.</a> Graefes Arch. Clin. Exp. Ophthalmol. 243, 973-979 (2005).</li><li>Yannuzzi, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polypoidal+choroidal+vasculopathy+masquerading+as+central+serous+chorioretinopathy.">Polypoidal choroidal vasculopathy masquerading as central serous chorioretinopathy.</a> Ophthalmology. 107, 767-777 (2000).</li><li>Janssen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Abnormal+vessel+formation+in+the+choroid+of+mice+lacking+tissue+inhibitor+of+metalloprotease-3.">Abnormal vessel formation in the choroid of mice lacking tissue inhibitor of metalloprotease-3.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 49, 2812-2822 (2008).</li><li>Ding, X., Patel, M., Chan, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+pathology+of+age-related+macular+degeneration.">Molecular pathology of age-related macular degeneration.</a> Prog. Retin. Eye Res. 28, 1-18 (2009).</li><li>Grossniklaus, H. E., Kang, S. J., Berglin, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+choroidal+and+retinal+neovascularization.">Animal models of choroidal and retinal neovascularization.</a> Prog. Retin. Eye Res. 29, 500-519 (2010).</li><li>Pennesi, M. E., Neuringer, M., Courtney, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+age+related+macular+degeneration.">Animal models of age related macular degeneration.</a> Mol. Aspects Med. 33, 487-509 (2012).</li><li>Elizabeth Rakoczy, P., Yu, M. J., Nusinowitz, S., Chang, B., Heckenlively, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+of+age-related+macular+degeneration.">Mouse models of age-related macular degeneration.</a> Exp. Eye Res. 82, 741-752 (2006).</li></ol>

פותחי עתיד הוא ממציא של שני פטנטים בהמתנה שהם רלוונטיים למודל עכבר AMD משמש בעבודה זו. SK, ZB, ומתכוונן אין לי מה לחשוף.

במחקר זה, שהדגמנו את השימוש בICGA לנגעים כורוידאלית תמונה בעכברים הטרנסגניים HTRA1. המאפיינים של תחילת, האמצע ושלבים מאוחרים של ICGA במודל של העכברים שלנו להתאים את מהלך הזמן גם במחקרים בבני אדם 1. זה חשוב לעשות השוואות טובות יותר בין פנוטיפים פתולוגיה וחיה אנושיים, א?...

אנגיוגרפיה הירוקה Indocyanine (ICGA) היא בדיקת אבחון לבעיות של תמונה הקשורים לכלי דם בעין. ספקטרום הספיגה של ICG נע 790-805 ננומטר בעוד ספקטרום הפליטה נע 770-880 ננומטר עם פליטת השיא ב835 1 ננומטר. זה שונה מהצבע האחר הפופולרי, והעמסת נתרן, קשת שנופל בטווח הנראה לעין. ספקטרום האינפרה אדום מאפשר ICG לחדור דרך אפיתל הפיגמנט ברשתית (RPE), נוזל serosanguineous, ולפליטות שומנים בדם, כל מה שיכול בקלות לחסום את ההדמיה על ידי צנתור והעמסת המבוסס נתרן והעמסת (FA). ICG הוא בכלי הדם וכתוצאה מכך פחות extravasation מאוגד חלבון 98%, המאפשר הדמיה משופרת של כלי כורוידאלית ונגעים כורוידאלית 1,2. ICGA היא כמעט הברירה היחידה כדי לחזות בכלי דם כורוידאלית, שהוא אחורי לרשתית. איור 1 מציג ההשוואה של ICGA וFA בכלי דם הדמיה בעיני עכבר. FA יכול bדואר משמש לתמונה גם ברשתית כלי דם, אך לא בכלי הדם כורוידאלית. לעומת זאת, ICGA יכול לשמש לתמונת שני רשתית וכלי דם כורוידאלית. ICGA מתבצע עם מערכות ברזולוציה גבוהה הדמיה דיגיטלית או אומטלמוסקופ לייזר סריקה (SLO) יחד עם מצלמות וידאו אינפרא אדום רגישות, שאנו נשתמש במחקר זה. במרפאת, ICGA כבר המליץ ​​באבחון מספר הפרעות chorioretinal מעורב כלי הדם כורוידאלית כולל polypoidal Choroidal vasculopathy (PCV), רשתית Angiomatous למניעת הפצת נשק (RAP), פסי angioid, ניוון מקולרי vitelliform, chorioretinopathy הצפק המרכזי, כלי דם כורוידאלית, רשתית דימום macroaneurysms arteriolar, גידולים כורוידאלית, וצורות מסוימות של אובאיטיס אחורי 1,3. השילוב של ICGA עם FA והאופטי קוהרנטיות טומוגרפיה (אוקטובר) מספק כלים רבי עוצמה לרופאים באבחון והניהול של קולרים הקשור לגיל exudativeקולרים (AMD) 4-10. ICGA שימושי במיוחד לאבחון מצבים מעורבים דמית העין. למעשה, ICGA נחשב את תקן הזהב לאבחון PCV, וריאנט של יפליט AMD 11-13. PCV מאופיין על ידי רשת של הסתעפות כלי עם dilations polypoidal מסוף בכלי הדם כורוידאלית 11-13. PCV קשור לעתים קרובות עם פלוגות serosanguineous חוזרות ונשנות של הרשתית ורשתית עם דליפה ודימום מרכיבי polypoidal 11,14,15. לאחרונה דיווחו הדור של מודל החיה PCV תחילה על ידי transgenically להביע HTRA1 האנושי, פרוטאז סרין רב תפקודי, באפיתל הפיגמנט ברשתית עכבר (הרשתית) 16. הראינו כי HTRA1 המוגבר מושרה תכונות אופייניות של PCV, למשל נגעי polypoidal. כאן אנו מדגימים את השימוש בICGA זמן כמובן על ידי הזרקה לוריד זנב במחקר AMD שימוש במודל עכבר HTRA1 שלנו. הנתונים שלנו מראים כיIV-ICGA עדיף על ה-IP (או תת עורית (SC))-ICGA שכרגע נמצאים בשימוש בתחום 17,18 לאפיון נגעים בדמה העין. הצהרה על מחקר בבעלי חיים ניסויים בבעלי חיים בוצעו על פי פרוטוקולים שאושרו על ידי טיפול בבעלי חיים המוסדי ועדת שימוש (IACUC), ובוצעו בהתאם להצהרת ארוו לשימוש בבעלים חיים ברפואת עיניים וחזון מחקר.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="667">
	<tbody>
		<tr height="50">
			<td height="50" style="height:50px;width:216px;">Spectralis Multi-Modality Imaging System</td>
			<td style="width:152px;">Heidelberg Engineering, Germany</td>
			<td style="width:132px;">SPECTRALIS HRA+OCT</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Tropicamide ophthalmic solution (1%)</td>
			<td style="width:152px;">Bausch &#38; Lomb</td>
			<td style="width:132px;">NDC 24208-585-64</td>
			<td>for dilation of pupils</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">GenTeal Gel</td>
			<td style="width:152px;">Genteal</td>
			<td style="width:132px;">NDC 58768-791-15</td>
			<td>&#160;clear lubricant eye gel&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Ketamine</td>
			<td style="width:152px;">Vedco Inc</td>
			<td style="width:132px;">NDC 50989-996-06</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Xylazine</td>
			<td style="width:152px;">Lloyd Laboratories</td>
			<td style="width:132px;">NADA 139-236</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Acepromazine</td>
			<td style="width:152px;">Vedco Inc</td>
			<td style="width:132px;">NDC 50989-160-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">32-G Needle</td>
			<td>Steriject</td>
			<td style="width:132px;">PRE-32013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">1-ml syringe</td>
			<td style="width:152px;">BD</td>
			<td style="width:132px;">309659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Indocyanine Green</td>
			<td style="width:152px;">Pfaltz &#38; Bauer</td>
			<td style="width:132px;">I01250</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

detecting abnormalities in choroidal vasculature in a mouse model of age-related macular degeneration by time-course indocyanine green angiography

Indocyanine הירוק אנגיוגרפיה (או ICGA) היא טכניקה המבוצעת על ידי רופאי עיניים לאבחון מומים בכלי הדם של רשתית וכורוידאלית של מחלות עיניים שונות, כגון ניוון הקשורה לגיל (AMD). ICGA שימושי במיוחד לתמונת כלי הדם כורוידאלית האחוריים של העין בשל יכולתה לחדור דרך שכבת פיגמנט עם ספקטרום האינפרה אדום שלה. כמובן זמן ICGA ניתן לחלק לתחילה, אמצע ושלבים מאוחרים. שלושה השלבים לספק מידע רב ערך על הפתולוגיה של בעיות עיניים. למרות ICGA זמן כמובן על ידי תוך ורידי (IV) הזרקה היא בשימוש נרחב במרפאת לאבחון והניהול של בעיות דמית העין, ICGA ידי זריקת intraperitoneal (IP) הוא נפוץ במחקר בבעלי חיים. כאן אנו מדגימים את הטכניקה כדי להשיג תמונות ICGA זמן כמובן ברזולוציה גבוהה בעכברים על ידי הזרקה לוריד זנב וophthalmoscopy סריקת לייזר confocal. אנחנו השתמשנו בטכניקה זו לתמונה כורוידאלית leהוא קונה במודל של עכברים של ניוון מקולרי הקשור לגיל. למרות שזה הרבה יותר קל להציג את ICG לכלי דם העכבר על ידי ה-IP, הנתונים שלנו מצביעים על כך שקשה להשיג תמונות כמובן הזמן לשעתק ICGA ידי ה-IP-ICGA. לעומת זאת, ICGA באמצעות הזרקה לוריד זנב מספק תמונות באיכות גבוהה ICGA זמן קורס דומות למחקרים בבני אדם. בנוסף, הראינו כי ICGA שבוצע על עכברי בקן נותן תמונות ברורות יותר של כלי כורוידאלית מזה שבוצע על עכברי פיגמנט. אנו מציעים כי IV-ICGA זמן כמובן צריך להיות מקובל במחקר AMD מבוסס על מודלים של בעלי חיים.

ביצענו כמובן זמן ICGA בעכברים הטרנסגניים HTRA1 והמלטת WT שליטה, אשר שניהם על רקע CD1. רקע CD1 בקן נבחר כדי להקל על אנגיוגרפיה הירוקה indocyanine הדמיה (ICGA) (ראה דיון). חלק מהפרצה כמו dilations החלה להופיע בשלב מוקדם בעכבר HTRA1 (איור 2, חץ אדום מציין את התרחבות בקצה של כלי ועיגול אדום...

Watch this Scientific Journal Video about Detecting Abnormalities in Choroidal Vasculature in a Mouse Model of Age-related Macular Degeneration by Time-course Indocyanine Green Angiography at JoVE.com

Detecting Abnormalities in Choroidal Vasculature in a Mouse Model of Age-related Macular Degeneration by Time-course Indocyanine Green Angiography

Indocyanine הירוק אנגיוגרפיה (או ICGA) המבוצעת על ידי הזרקה לוריד זנב מספקת תמונות כמובן זמן ICGA באיכות גבוהה כדי לאפיין חריגות בדמו עין עכבר.

איתור ליקויים בChoroidal כלי דם במודל של עכברים של ניוון מקולרי הקשור בגיל בזמן הקורס Indocyanine הירוק אנגיוגרפיה

Indocyanine Green&#160;Angiography (or ICGA) is a technique performed by ophthalmologists to diagnose abnormalities of the choroidal and retinal ...

detecting-abnormalities-choroidal-vasculature-mouse-model-age-related

Research

JoVE Journal

Medicine

13.5K Views.  University of Utah Health Sciences Center.  Indocyanine הירוק אנגיוגרפיה (או ICGA) המבוצעת על ידי הזרקה לוריד זנב מספקת תמונות כמובן זמן ICGA באיכות גבוהה כדי לאפיין חריגות בדמו עין עכבר. 

Video: Detecting Abnormalities in Choroidal Vasculature in a Mouse Model of Age-related Macular Degeneration by Time-course Indocyanine Green Angiography

Noninvasive Assessment of Cardiac Abnormalities in Experimental Autoimmune Myocarditis by Magnetic Resonance Microscopy Imaging in the Mouse

Myocarditis is an inflammation of the myocardium, but only ~10% of those affected show clinical manifestations of the disease. To study the immune events of myocardial injuries, various mouse models of myocarditis have been widely used. This study involved experimental autoimmune myocarditis (EAM) induced with cardiac myosin heavy chain (Myhc)-&#945; 334-352 in A/J mice; the affected animals develop lymphocytic myocarditis but with no apparent clinical signs. In this model, the utility of magnetic resonance microscopy (MRM) as a non-invasive modality to determine the cardiac structural and functional changes in animals immunized with Myhc-&#945; 334-352 is shown. EAM and healthy mice were imaged using a 9.4 T (400 MHz) 89 mm vertical core bore scanner equipped with a 4 cm millipede radio-frequency imaging probe and 100 G/cm triple axis gradients. Cardiac images were acquired from anesthetized animals using a gradient-echo-based cine pulse sequence, and the animals were monitored by respiration and pulse oximetry. The analysis revealed an increase in the thickness of the ventricular wall in EAM mice, with a corresponding decrease in the interior diameter of ventricles, when compared with healthy mice. The data suggest that morphological and functional changes in the inflamed hearts can be non-invasively monitored by MRM in live animals. In conclusion, MRM offers an advantage of assessing the progression and regression of myocardial injuries in diseases caused by infectious agents, as well as response to therapies.

This study demonstrates the successful establishment of magnetic resonance microscopy imaging as a non-invasive tool to assess the cardiac abnormalities in mice affected with autoimmune myocarditis. The data indicate that the technique can be used to monitor the disease-progression in live animals.

הערכה לא פולשנית של לב חריגות בניסויית אוטואימוניות דלקת שריר לב על ידי תהודה מגנטית מיקרוסקופית הדמיה בעכבר

Myocarditis is an inflammation of the myocardium, but only ~10% of those affected show clinical manifestations of the disease. To study the immune events ...

A Mouse Model for Laser-induced Choroidal Neovascularization

The mouse laser-induced choroidal neovascularization (CNV) model has been a crucial mainstay model for neovascular age-related macular degeneration (AMD) research. By administering targeted laser injury to the RPE and Bruch&#8217;s membrane, the procedure induces angiogenesis, modeling the hallmark pathology observed in neovascular AMD. 
First developed in non-human primates, the laser-induced CNV model has come to be implemented into many other species, the most recent of which being the mouse. Mouse experiments are advantageously more cost-effective, experiments can be executed on a much faster timeline, and they allow the use of various transgenic models. The miniature size of the mouse eye, however, poses a particular challenge when performing the procedure. Manipulation of the eye to visualize the retina requires practice of fine dexterity skills as well as simultaneous hand-eye-foot coordination to operate the laser. However, once mastered, the model can be applied to study many aspects of neovascular AMD such as molecular mechanisms, the effect of genetic manipulations, and drug treatment effects. 
The laser-induced CNV model, though useful, is not a perfect model of the disease. The wild-type mouse eye is otherwise healthy, and the chorio-retinal environment does not mimic the pathologic changes in human AMD. Furthermore, injury-induced angiogenesis does not reflect the same pathways as angiogenesis occurring in an age-related and chronic disease state as in AMD.
Despite its shortcomings, the laser-induced CNV model is one of the best methods currently available to study the debilitating pathology of neovascular AMD. Its implementation has led to a deeper understanding of the pathogenesis of AMD, as well as contributing to the development of many of the AMD therapies currently available.

Here, we present the mouse laser-induced choroidal neovascularization (CNV) protocol, an experimental model that re-creates the vascular hallmarks of neovascular age-related macular degeneration (AMD). Once mastered, it can reliably and effectively induce CNV as a model system to test various experimental measures.

מודל עכבר לneovascularization Choroidal מושרה לייזר

The mouse laser-induced choroidal neovascularization (CNV) model has been a crucial mainstay model for neovascular age-related macular degeneration (AMD) ...

The Monoiodoacetate Model of Osteoarthritis Pain in the Mouse

A major symptom of patients with osteoarthritis (OA) is pain that&#160;is triggered by peripheral as well as central changes within the pain pathways. The current treatments for OA pain such as NSAIDS or opiates are neither sufficiently effective nor devoid of detrimental side effects. Animal models of OA are being developed to improve our understanding of OA-related pain mechanisms and define novel pharmacological targets for therapy. Currently available models of OA in rodents include surgical and chemical interventions into one knee joint. The monoiodoacetate (MIA) model has become a standard for modelling joint disruption in OA in both rats and mice. The model, which is easier to perform in the rat, involves injection of MIA into a knee joint that induces rapid pain-like responses in the ipsilateral limb, the level of which can be controlled by injection of different doses. Intra-articular injection of MIA disrupts chondrocyte glycolysis by inhibiting glyceraldehyde-3-phosphatase dehydrogenase and results in chondrocyte death, neovascularization, subchondral bone necrosis and collapse, as well as inflammation. The morphological changes of the articular cartilage and bone disruption are reflective of some aspects of patient pathology. Along with joint damage, MIA injection induces referred mechanical sensitivity in the ipsilateral hind paw and weight bearing deficits that are measurable and quantifiable. These behavioral changes resemble some of the symptoms reported by the patient population, thereby validating the MIA injection in the knee as a useful and relevant pre-clinical model of OA pain.
The aim of this article is to describe the methodology of intra-articular injections of MIA and the behavioral recordings of the associated development of hypersensitivity with a mind to highlight the necessary steps to give consistent and reliable recordings.

Osteoarthritis (OA), or degenerative joint disease, is a debilitating condition associated with pain that remains only partially controlled by available analgesics. Animal models are being developed to improve our understanding of OA-related pain mechanisms. Here we describe the methodology for the monoiodoacetate model of OA pain in the mouse.

מודל Monoiodoacetate של אוסטיאוארתריטיס כאב העכבר

A major symptom of patients with osteoarthritis (OA) is pain that&#160;is triggered by peripheral as well as central changes within the pain pathways. The ...

Detecting Anastasis In Vivo by CaspaseTracker Biosensor

Anastasis (Greek for &#8220;rising to life&#8221;) is a recently discovered cell recovery phenomenon whereby dying cells can reverse late-stage cell death processes that are generally assumed to be intrinsically irreversible. Promoting anastasis could in principle rescue or preserve injured cells that are difficult to replace such as cardiomyocytes or neurons, thereby facilitating tissue recovery. Conversely, suppressing anastasis in cancer cells, undergoing apoptosis after anti-cancer therapies, may ensure cancer cell death and reduce the chances of recurrence. However, these studies have been hampered by the lack of tools for tracking the fate of cells that undergo anastasis in live animals. The challenge is to identify the cells that have reversed the cell death process despite their morphologically normal appearance after recovery. To overcome this difficulty, we have developed Drosophila and mammalian CaspaseTracker biosensor systems that can identify and permanently track the anastatic cells in vitro or in vivo. Here, we present in vivo protocols for the generation and use of the CaspaseTracker dual biosensor system to detect and track anastasis in Drosophila melanogaster after transient exposure to cell death stimuli. While conventional biosensors and protocols can label cells actively undergoing apoptotic cell death, the CaspaseTracker biosensor can permanently label cells that have recovered after caspase activation - a hallmark of late-stage apoptosis, and simultaneously identify active apoptotic processes. This biosensor can also track the recovery of the cells that attempted other forms of cell death that directly or indirectly involved caspase activity. Therefore, this protocol enables us to continuously track the fate of these cells and their progeny, facilitating future studies of the biological functions, molecular mechanisms, physiological and pathological consequences, and therapeutic implications of anastasis. We also discuss the appropriate controls to distinguish cells that undergo anastasis from those that display non-apoptotic caspase activity in vivo.

Detecting Anastasis In Vivo by CaspaseTracker Biosensor

Anastasis is technically challenging to detect in vivo because the cells that have reversed the cell death process can be morphologically indistinguishable from normal healthy cells. Here we describe protocols for detecting and tracking cells that undergo anastasis in live animals by using our newly developed in vivo CaspaseTracker biosensor system.

גילוי Anastasis In Vivo מאת CaspaseTracker ביוסנסור

Anastasis (Greek for &#8220;rising to life&#8221;) is a recently discovered cell recovery phenomenon whereby dying cells can reverse late-stage cell death ...

Regenerative Therapy by Suprachoroidal Cell Autograft in Dry Age-related Macular Degeneration: Preliminary In Vivo Report

This study is aimed at examining whether a suprachoroidal graft of autologous cells can improve best corrected visual acuity (BCVA) and responses to microperimetry (MY) in eyes affected by dry Age-related Macular Degeneration (AMD) over time through the production and secretion of growth factors (GFs) on surrounding tissue. Patients were randomly assigned to each study group. All patients were diagnosed with dry AMD and with BCVA equal to or greater than 1 logarithm of the minimum angle of resolution (logMAR). A suprachoroidal autologous graft by Limoli Retinal Restoration Technique (LRRT) was carried out on group A, which included 11 eyes from 11 patients. The technique was performed by implanting adipocytes, adipose-derived stem cells obtained from the stromal vascular fraction, and platelets from platelet-rich plasma in the suprachoroidal space. Conversely, group B, including 14 eyes of 14 patients, was used as a control group. For each patient, diagnosis was verified by confocal scanning laser ophthalmoscope and spectral domain-optical coherence tomography (SD-OCT). In group A, BCVA improved by 0.581 to 0.504 at 90 days and to 0.376 logMAR at 180 days (+32.20%) postoperatively. Furthermore, MY test increased by 11.44 dB to 12.59 dB at 180 days. The different cell types grafted behind the choroid were able to ensure constant GF secretion in the choroidal flow. Consequently, the results indicate that visual acuity (VA) in the grafted group can increase more than in the control group after six months.

Regenerative Therapy by Suprachoroidal Cell Autograft in Dry Age-related Macular Degeneration: Preliminary In Vivo Report

The goal of this study is to assess whether the suprachoroidal graft of adipose-derived stem cells included in the stromal vascular fraction and platelets derived from platelet-rich plasma by the Limoli Retinal Restoration Technique can improve visual acuity and retinal sensitivity responses in eyes affected by dry age-related macular degeneration.

משובי טיפול על ידי תא Suprachoroidal בשתל ב ניוון מקולרי הקשור לגיל יבש: דוח ראשוני In Vivo

This study is aimed at examining whether a suprachoroidal graft of autologous cells can improve best corrected visual acuity (BCVA) and responses to ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and drugs. It is widely used in many studies on the physiological functions of vascular smooth muscle, the pathogenesis of vascular diseases such as hypertension, and the development of smooth muscle relaxant drugs. The mouse is a widely used model animal with a large pool of disease models and genetically modified strains. We introduced this method to measure the isometric contraction of mouse mesenteric artery in detail. A 1.4-mm segment of mouse mesenteric resistance artery was isolated and mounted on a myograph chamber by passing two steel wires through its lumen. After equilibration and normalization steps, the vessel segment was potentiated by a high-K+ solution twice prior to the contraction assay. As an example of the application of this method in drug development, we measured the relaxant effect of a novel natural substance, neoliensinine, isolated from a Chinese herb, embryos of the lotus seed (Nelumbo nucifera Gaertn.) on mouse mesenteric arteries. The vessel segments mounted on the myograph chamber were stimulated with a high-K+ solution. When the force tension reached a stable sustained phase, cumulative doses of neoliensinine were added to the chamber. We found that neoliensinine had a dose-dependent relaxant effect on smooth muscle contraction, thus suggesting that it bears potential activity against hypertension. In addition, as the vessel segment can survive at least 4 hours after mounting and maintain contractility induced by the high-K+ solution for many times, we suggest that the wire myograph system may be used for the time-consuming process of drug screening.

The wire myograph technique is used to investigate vascular smooth muscle functions and screen new drugs. We report a detailed protocol for measuring the isometric contractility of the mouse mesenteric artery and for screening new relaxants of vascular smooth muscle.

Contractility איזומטרי מדידה של עורק מצע המעי העליון העכבר באמצעות חוט Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

A Neonatal BALB/c Mouse Model of Necrotizing Enterocolitis

Necrotizing enterocolitis (NEC) is the most severe gastrointestinal (GI) disease that often occurs in premature infants, especially very low birth weight infants, with high mortality and unclear pathogenesis. The cause of NEC may be related to inflammatory immune regulatory system abnormalities. An NEC animal model is an indispensable tool for NEC disease immune research. NEC animal models usually use C57BL/6J neonatal mice; BALB/c neonatal mice are rarely used. Related studies have shown that when mice are infected, Th2 cell differentiation is predominant in BALB/c mice compared to C57BL/6J mice. Studies have suggested that the occurrence and development of NEC are associated with an increase in T helper type 2 (Th2) cells and are generally accompanied by infection. Therefore, this study used neonatal BALB/c mice to induce an NEC model with similar clinical characteristics and intestinal pathological changes as those observed in children with NEC. Further study is warranted to determine whether this animal model could be used to study Th2 cell responses in NEC.

Necrotizing enterocolitis (NEC) is the most severe gastrointestinal (GI) disease that often occurs in premature infants, especially very low birth weight infants, with high mortality and unclear pathogenesis. The cause of NEC may be related to inflammatory immune regulatory system abnormalities. An NEC animal model is an indispensable tool for NEC disease immune research. NEC animal models usually use C57BL/6J neonatal mice; BALB/c neonatal mice are rarely used. Related studies have shown that when mice are infected, Th2 cell differentiation is predominant in BALB/c mice compared to C57BL/6J mice. Studies have suggested that the occurrence and development of NEC are associated with an increase in T helper type 2 (Th2) cells and are generally accompanied by infection. Therefore, this study used neonatal BALB/c mice to induce an NEC model with similar clinical characteristics and intestinal pathological changes as those observed in children with NEC. Further study is warranted to determine whether this animal model could be used to study Th2 cell responses in NEC.

מודל עכבר BALB /c יילודים של דלקת אנטרוקוליטיס נמק

Necrotizing enterocolitis (NEC) is the most severe gastrointestinal (GI) disease that often occurs in premature infants, especially very low birth weight ...

Robotic Left Hepatectomy using Indocyanine Green Fluorescence Imaging for an Intrahepatic Complex Biliary Cyst

Biliary cysts (BC) are rare congenital dilatations of intra- and extrahepatic parts of the biliary tract and bear a significant risk of carcinogenesis. Surgery is the cornerstone treatment for patients with BC. While total BC excision and Roux-Y hepaticojejunostomy is the treatment method of the choice in patients with extrahepatic BC (i.e., Todani I-IV), patients with intrahepatic BC (i.e., Todani V) benefit the most from a surgical liver resection. In recent years, minimally invasive liver surgery (MILS) including robotic MILS has gained more acceptance as a feasible, safe, and effective procedure for the treatment of both benign and malignant indications. Robotic major MILS is still considered technically demanding and a detailed description of the technical approach during robotic major MILS has only been limitedly discussed in the literature. The current article describes the main steps for a robotic left hepatectomy in a patient with a large BC Todani Type V. The patient is in French position with 5 trocars placed (4 robotic, 1 laparoscopic assistant). After mobilizing the left hemiliver, the left and right hepatic artery are dissected carefully followed by a cholecystectomy. Intraoperative ultrasound is performed to confirm localization and margins of the BC. The Left hepatic artery and left portal vein are isolated, clipped, and divided. Indocyanine green (ICG) fluorescence imaging is used regularly during the entire procedure to visualize and confirm biliary tract anatomy and the BC. Parenchymal transection is performed with robotic cautery hook for the superficial part and robotic cautery spatula, bipolar cautery, and vessel sealer for the deeper parenchyma. The postoperative course was uncomplicated. A robotic left hepatectomy is technically demanding, yet a feasible and safe procedure. ICG-fluorescence imaging aids in delineating the BC and bile duct anatomy. Further, comparative studies are needed to confirm clinical benefits of robotic MILS for benign and malignant indications.

Robotic liver surgery has gained more acceptance as a feasible, safe, and effective procedure for the treatment of both benign and malignant indications. However, robotic left hepatectomy is still technically demanding. We describe our surgical technique of a robotic left hepatectomy using indocyanine green fluorescence imaging for a large biliary cyst.

כריתת כבד שמאלית רובוטית באמצעות הדמיה פלואורסצנטית ירוקה של אינדוקיאנין עבור ציסטה מרה תוך-הפטית מורכבת

Biliary cysts (BC) are rare congenital dilatations of intra- and extrahepatic parts of the biliary tract and bear a significant risk of carcinogenesis. ...

Fluorescent Laparoscopic Central Hepatectomy for Liver Cancer Using Indocyanine Green Negative Staining

Laparoscopic hepatectomy is an important treatment method for liver cancer. In the past, the resection boundary was usually determined by intraoperative ultrasound, important vascular structures, and surgeon experience. With the development of anatomical hepatectomy, visual surgery technology has gradually been applied to this type of surgery, particularly indocyanine green (ICG)-guided anatomical hepatectomy. As ICG can be specifically ingested by hepatocytes and used for fluorescence tracing, negative staining techniques have been applied according to different tumor positions. Under ICG fluorescent guidance, the surface boundary and deep resection plane can be more accurately displayed during liver resection. Thus, the tumor-bearing liver segment can be anatomically removed, which helps to avoid damage to important vessels and reduce ischemia or congestion of the remaining liver tissue. Finally, the incidence of postoperative biliary fistula and liver dysfunction is reduced; therefore, a better prognosis is obtained after the resection of liver cancer. Centrally located liver cancer is usually defined as a tumor located at segments 4, 5, or 8 that requires resection of the middle section of the liver. These are among the most difficult hepatectomies to perform because of the large surgical wounds and multiple vessel transections. Based on the specific tumor location, we formulated the required resection ranges by designing personalized fluorescent staining strategies. By completing anatomical resection based on the portal territory, this work aims to achieve the best therapeutic effect.

The present protocol describes fluorescent negative staining in laparoscopic central hepatectomy. This technique can make hepatectomy more accurate and precise.

כריתת כבד מרכזית לפרוסקופית פלואורסצנטית לסרטן הכבד באמצעות צביעה שלילית ירוקה אינדוציאנינית

Laparoscopic hepatectomy is an important treatment method for liver cancer. In the past, the resection boundary was usually determined by intraoperative ...

חקר אוטופלואורסצנטיות כמותית בניוון מקולרי תלוי גיל

A Workflow to Quantitatively Determine Age-Related Macular Degeneration Lesion-Specific Variations in Fundus Autofluorescence

Fundus autofluorescence (FAF) imaging allows the noninvasive mapping of intrinsic fluorophores of the ocular fundus, particularly the retinal pigment epithelium (RPE), now quantifiable with the advent of confocal scanning laser ophthalmoscopy-based quantitative autofluorescence (QAF). QAF has been shown to be generally decreased at the posterior pole in age-related macular degeneration (AMD). The relationship between QAF and various AMD lesions (drusen, subretinal drusenoid deposits) is still unclear.
This paper describes a workflow to determine lesion-specific QAF in AMD. A multimodal in vivo imaging approach is used, including but not limited to spectral domain optical coherence tomography (SD-OCT) macular volume scanning and QAF. Using customized FIJI plug-ins, the corresponding QAF image is aligned with the near-infrared image from the SD-OCT scan (characteristic landmarks; i.e., vessel bifurcations). The foveola and the edge of the optic nerve head are marked in the OCT images (and transferred to the registered QAF image) for accurate positioning of the analysis grids.
AMD-specific lesions can then be marked on individual OCT BScans or the QAF image itself. Normative QAF maps are created to account for the varying mean and standard deviation of QAF values throughout the fundus (QAF images from a representative AMD group were averaged to build normative standard retinal QAF AMD maps). The plug-ins record the X and Y coordinates, z-score (a numerical measurement that describes the QAF value in relation to the mean of AF maps in terms of standard deviation from the mean), mean intensity value, standard deviation, and number of pixels marked. The tools also determine z-scores from the border zone of marked lesions.&#160;This workflow and the analysis tools will improve the understanding of the pathophysiology and clinical AF image interpretation in AMD.

מחבר זרקור: הבנת פתופיזיולוגיה של ניוון מקולרי הקשור לגיל עם זרימת עבודה של QAF 

This research describes a workflow to determine and compare autofluorescence levels from individual regions of interest (e.g., drusen and subretinal drusenoid deposits in age-related macular degeneration [AMD]) while accounting for varying autofluorescence levels throughout the fundus.

זרימת עבודה לקביעה כמותית של שינויים ספציפיים לנגע ניוון מקולרי הקשור לגיל בפונדוס אוטופלואורסנציה

Fundus autofluorescence (FAF) imaging allows the noninvasive mapping of intrinsic fluorophores of the ocular fundus, particularly the retinal pigment ...