وقد تم تمويل هذا العمل من قبل الكتلة التميز للمؤسسة الأبحاث الألمانية &quot;ميونيخ الكتلة لأنظمة الأعصاب (التآزر)&quot; ومؤسسة دايملر بنز لAL

بيان الأخلاق وأجريت التجارب ورد في هذا الفيديو وفقا لمبادئ توجيهية وطنية لاستخدام حيوانات التجارب والبروتوكولات وتمت الموافقة من قبل اللجان الحكومية الألمانية (Regierung فون Oberbayern، ميونيخ، ألمانيا). وتستخدم 10 أسبوع من العمر، والفئران C57BL/6J الذكور في هذه الدراسة. وتم إيواء الحيوانات تحت درجة حرارة للرقابة (22 ± 2 درجة مئوية)، مع ضوء الظلام دورة فترة 12 ساعة والحصول على الغذاء مكعبات وبالمال وبالشهرة أيضا الإعلانية المياه موصوفة. تسكين وتخدير البروتوكولات التي وافقت عليها اللجنة الحكومية المحلية ولكن قد تختلف من البروتوكولات المستخدمة في المختبرات الأخرى. 1. إعداد المواد والأدوات <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ربط بطانية الحرارة من أجل الحفاظ على المنطقة الدافئة العملية والحفاظ على درجة حرارة الجسم الماوس أثناء التخدير (37 درجة مئوية). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مقص إعداد تعقيمها، ملقط والأقطان، dexpanthإينول العين مرهم ومواد خياطة الجروح. تحضير حقنة مع محلول ملحي (بدون إبرة) للحفاظ على منطقة العملية رطب. تحضير غاز التخدير (70٪ N 2 O + 30٪ O 2 + isoflurane و). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حقن المسكنات الغشاء البريتونى: Metamizol 200 ملغم / كغم، كاربروفين 4 ملغ / كغ وBuprenorphin 0.1 ملغم / كغم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضع الماوس في غرفة الاستقراء مع معدل التدفق isoflurane وبنسبة 4٪ لتخدير حتى حركة عفوية من الجسم وvibrissae توقف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نقل الماوس في الموقف الجانبي مع أنفها في قناع التخدير والحفاظ على تركيز isoflurane وبنسبة 4٪ لحوالي دقيقة أخرى، ثم خفض وذلك في approx.1.5٪ للحفاظ على التخدير المناسبة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تطبيق ديكسبانتينول مرهم العين في كلتا العينين. </li></ol> 2. القاصي MCAO النموذجي <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جعل شق الجلد 1 سم بين الأذن والعين باستخدام مقص العملية قليلا بعد إعداد aseptical لموقع النقيب الجراحيةز الجلد مطهر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> فصل الجلد وتوطين عضلة الصدغي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حدد في مولد تردد عال وظيفة تجلط الدم، ووضع القطبين، حدد 12 W وربط الكهربي ملقط مع كابل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إضافة قطرة من المياه المالحة واستخدام ملقط لفصل العضلات الصدغي من الجمجمة في الجزء القمي والظهرية، وبالتالي، مما يجعل رفرف العضلات دون إزالة تماما العضلات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحديد MCA تحت الجمجمة شفافة، في جزء منقاري من المنطقة الزمنية، الظهرية إلى الجيوب الرجعية المدارية (الشكل 2A). إذا التشعب MCA غير مرئية (بسبب الاختلاف الطبيعي التشريحية) تحديد السفينة الأكثر منقاري. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إضافة بعض المالحة على الجمجمة ورقيقة من العظم مع الحفر الحق فوق فرع مولودية الجزائر حتى لديه نسيج رقيقة وشفافة (الشكل 2B). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> سحب بعناية العظم فوق الشريان مع ملقط رقيقة جدا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحديد وضع ثنائي القطب الأولن المولد عالية التردد في 7 دبليو تخثر الشريان مع ملقط الكهربي الداني القاصي وإلى التشعب (الشكل 2C). عندما التشعب غير مرئية بسبب متغير التشريحية، تخثر فرع MCA حددت بشكل صحيح (انظر أعلاه) في موقعين تقريبا. المسافة 1MM. فإنه ليس من الضروري لفهم الشريان مع ملقط لتجلط الدم، ولمس الشريان بعناية مع ملقط على كلا الجانبين من فوق يكفي ويدفع أقل الأضرار الميكانيكية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> انتظر 30 ثانية وتلمس بلطف الشريان مع ملقط اضعافها للتحقق من أي تدفق الدم بسبب إعادة الاستقناء العفوية. في حالة إعادة الاستقناء تكرار الكهربي مرة واحدة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> انتقال عضلة الصدغي لموقفها، الذي يغطي حفرة لدغ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> خياطة الجرح ووضع الحيوان في صندوق التمريض في 32 ° C للتعافي من التخدير وإعادته إلى القفص. بشكل عام فإنه يأخذ 5-10 دقيقة للحيوان للتعافي من anesthESIA. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حقن تسكين بعد العملية الجراحية (IP) بعد 24 ساعة وبعد ذلك يوميا حتى اليوم الخامس بعد العملية الجراحية: كاربروفين 4 ملغم / كغم. </li></ol> 3. عملية الشام تنفيذ كافة الإجراءات مماثل للعملية المذكورة أعلاه - بما في ذلك التخفيف من الجمجمة وزواله - باستثناء لعدم التخثر في الشريان عرضة للخطر. 4. اسطوانة اختبار 13 <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع الحيوان في اسطوانة شفافة زجاج الاكريليك (قطر: 8 سم، الطول: 25 سم) أمام اثنين من المرايا وشريط فيديو لمدة 5 دقائق. ضبط الكاميرا مركزيا أمام المرايا واثنين اسطوانة للحصول على الفيديو الأمثل (الشكل 3A). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لتقييم استخدام forelimb مستقلة، والنتيجة (1) الاتصال من جدار الاسطوانة مع forelimb واحدة خلال الخلفية الكاملة و(2) الهبوط مع forelimb واحد فقط على الكلمة بعد الخلفية الكاملة. عد لا يقل عن 20 اتصالات لforelimb واحد باستخدام الحركة البطيئة أو الإطار حسب الابوظيفة AME من العميل فيديو لان (VLC) برامج مجانية ( <a href="http://www.videolan.org/vlc">http://www.videolan.org/vlc</a> ). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لتحليل خط الأساس قبل الجراحة: أداء الاختبار مرتين في الماوس، مع فاصل 1 ساعة بين التجارب. وأعرب عن استخدام Forelimb كنسبة من اليمين / اليسار من جانب، واستخدام forelimb مستقلة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد تخثر MCA: أداء الاختبار مرة أخرى مرتين في الماوس، مع فاصل 1 ساعة بين التجارب كما هو مبين أعلاه. </li></ol> 5. الإرواء <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخدير الحيوانات (على سبيل المثال، من خلال الكيتامين وزيلازين 120/16 ملغم / كغم من وزن الجسم، على التوالي). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إصلاح الحيوان في موقف ضعيف وفتح تجويف البطن مع خفض متوسط. إزالة التشققات والقص. إجراء شق صغير في الأذين الأيمن. إدراج قنية التروية في البطين الأيسر ويروي ببطء مع 20 مل من المياه المالحة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطع رأس الحيوان، وفتح calvaria وفصل بلطف الدماغ من قاعدة الجمجمة. </li><li&gt; تجميد العقول في -40 درجة مئوية نظير البنتان البارد لمدة 10 دقيقة. بعد ذلك إزالة العقول من نظير البنتان وتخزين مزيد من التحليل حتى في -80 درجة مئوية. </li></ol> 6. عائق Volumetry <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Cryosectioning: قطع أدمغة متسلسل على ناظم البرد إلى 20 ميكرون أبواب سميكة كل 400 ميكرومتر على الشرائح وتخزين الشرائح في -20 درجة مئوية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> البنفسجي cresyl (CV) تلطيخ: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد الحل تلطيخ: مزيج 0.5 غرام من خلات CV في 500 مل H 2 O. اثارة والحرارة (60 درجة مئوية) حتى تذوب البلورات. اسمحوا الحل باردة وتخزين في زجاجة داكنة. يسخن إلى 60 درجة مئوية والتصفية قبل كل استخدام. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تجفيف الشرائح في RT لمدة 30 دقيقة. ثم وضعها في الايثانول 95٪ لمدة 15 دقيقة ثم في الايثانول 70٪ لمدة 1 دقيقة، وبعد ذلك في 50٪ من الإيثانول لمدة 1 دقيقة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع الشرائح في الماء المقطر لمدة 2 دقيقة، وتجديد الماء المقطر ووضعها في لمدة 1 دقيقة. بعد ذلك وضع الشرائح في حل تلطيخ (60 درجة مئوية) وأو 10 دقيقة، وغسلها مرتين في الماء المقطر لمدة 1 دقيقة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع الشرائح في الايثانول 95٪ لمدة 2 دقيقة. ثم وضعها في الإيثانول بنسبة 100٪ لمدة 5 دقائق، تحديث الإيثانول بنسبة 100٪ ووضعها في لمدة 2 دقيقة. بعد ذلك تغطية الشرائح مع تصاعد المتوسط. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحليل: مسح الشرائح وتحليل حجم احتشاء غير المباشرة من خلال طريقة سوانسون 14 لتصحيح ذمة: (منطقة الدماغية) = (منطقة اللحاء من الجانب المقابل) - (منطقة القشرة الدماغية من غير الجانب المماثل) (الشكل 4A). </li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Donnan, G. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stroke.">Stroke.</a> Lancet. 371, 1612-1623 (2008).</li><li>Di Carlo, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Frequency+of+stroke+in+Europe:+A+collaborative+study+of+population-based+cohorts.+ILSA+Working+Group+and+the+Neurologic+Diseases+in+the+Elderly+Research+Group.+Italian+Longitudinal+Study+on+Aging.">Frequency of stroke in Europe: A collaborative study of population-based cohorts. ILSA Working Group and the Neurologic Diseases in the Elderly Research Group. Italian Longitudinal Study on Aging.</a> Neurology. 54, 28-33 (2000).</li><li>Hacke, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thrombolysis+with+alteplase+3+to+4.5+hours+after+acute+ischemic+stroke.">Thrombolysis with alteplase 3 to 4.5 hours after acute ischemic stroke.</a> N. Engl. J. Med. 359, 1317-1329 (2008).</li><li>Jauch, E. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guidelines+for+the+early+management+of+patients+with+acute+ischemic+stroke:+a+guideline+for+healthcare+professionals+from+the+American+Heart+Association/American+Stroke+Association.">Guidelines for the early management of patients with acute ischemic stroke: a guideline for healthcare professionals from the American Heart Association/American Stroke Association.</a> Stroke. 44, 870-947 (2013).</li><li>Longa, E. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats.">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke. 20, 84-91 (1989).</li><li>Engel, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+stroke+in+mice+-+middle+cerebral+artery+occlusion+with+the+filament+model.">Modeling stroke in mice - middle cerebral artery occlusion with the filament model.</a> J. Vis. Exp. (47), e2423 (2011).</li><li>Zhang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+rat+model+of+thrombotic+focal+cerebral+ischemia.">A new rat model of thrombotic focal cerebral ischemia.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 17, 123-135 (1997).</li><li>Tamura, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focal+cerebral+ischaemia+in+the+rat:+1.+Description+of+technique+and+early+neuropathological+consequences+following+middle+cerebral+artery+occlusion.">Focal cerebral ischaemia in the rat: 1. Description of technique and early neuropathological consequences following middle cerebral artery occlusion.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 1, 53-60 (1981).</li><li>Chen, S. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+model+of+focal+ischemic+stroke+in+the+rat:+reproducible+extensive+cortical+infarction.">A model of focal ischemic stroke in the rat: reproducible extensive cortical infarction.</a> Stroke. 17, 738-743 (1986).</li><li>Tureyen, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Infarct+volume+quantification+in+mouse+focal+cerebral+ischemia:+a+comparison+of+triphenyltetrazolium+chloride+and+cresyl+violet+staining+techniques.">Infarct volume quantification in mouse focal cerebral ischemia: a comparison of triphenyltetrazolium chloride and cresyl violet staining techniques.</a> J. Neurosci. Methods. 139, 203-207 (2004).</li><li>Carmichael, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+models+of+focal+stroke:+size,+mechanism,+and+purpose.">Rodent models of focal stroke: size, mechanism, and purpose.</a> NeuroRx. 2, 396-409 (2005).</li><li>Howells, D. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Different+strokes+for+different+folks:+the+rich+diversity+of+animal+models+of+focal+cerebral+ischemia.">Different strokes for different folks: the rich diversity of animal models of focal cerebral ischemia.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 30, 1412-1431 (2010).</li><li>Schallert, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CNS+plasticity+and+assessment+of+forelimb+sensorimotor+outcome+in+unilateral+rat+models+of+stroke,+cortical+ablation,+parkinsonism+and+spinal+cord+injury.">CNS plasticity and assessment of forelimb sensorimotor outcome in unilateral rat models of stroke, cortical ablation, parkinsonism and spinal cord injury.</a> Neuropharmacology. 39, 777-787 (2000).</li><li>Swanson, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+semiautomated+method+for+measuring+brain+infarct+volume.">A semiautomated method for measuring brain infarct volume.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 10, 290-293 (1990).</li><li>Kitano, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhalational+anesthetics+as+neuroprotectants+or+chemical+preconditioning+agents+in+ischemic+brain.">Inhalational anesthetics as neuroprotectants or chemical preconditioning agents in ischemic brain.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 27, 1108-1128 (2007).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+intravenous+recombinant+tissue+plasminogen+activator+on+ischemic+stroke+lesion+size+measured+by+computed+tomography.+NINDS;+The+National+Institute+of+Neurological+Disorders+and+Stroke+(NINDS)+rt-PA+Stroke+Study+Group.">Effect of intravenous recombinant tissue plasminogen activator on ischemic stroke lesion size measured by computed tomography. NINDS; The National Institute of Neurological Disorders and Stroke (NINDS) rt-PA Stroke Study Group.</a> Stroke. 31, 2912-2919 (2000).</li><li>Sowell, E. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mapping+cortical+change+across+the+human+life+span.">Mapping cortical change across the human life span.</a> Nat. Neurosci. 6, 309-315 (2003).</li><li>Brott, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurements+of+acute+cerebral+infarction:+lesion+size+by+computed+tomography.">Measurements of acute cerebral infarction: lesion size by computed tomography.</a> Stroke. 20, 871-875 (1989).</li><li>Hacke, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Malignant'+middle+cerebral+artery+territory+infarction:+clinical+course+and+prognostic+signs.">Malignant' middle cerebral artery territory infarction: clinical course and prognostic signs.</a> Arch. Neurol. 53, 309-315 (1996).</li><li>Majid, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differences+in+vulnerability+to+permanent+focal+cerebral+ischemia+among+3+common+mouse+strains.">Differences in vulnerability to permanent focal cerebral ischemia among 3 common mouse strains.</a> Stroke. 31, 2707-2714 (2000).</li><li>Liesz, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Boosting+regulatory+T+cells+limits+neuroinflammation+in+permanent+cortical+stroke.">Boosting regulatory T cells limits neuroinflammation in permanent cortical stroke.</a> J. Neurosci. 33 (44), 17350-17362 (2013).</li><li>Liesz, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+lymphocyte+trafficking+shields+the+brain+against+deleterious+neuroinflammation+after+stroke.">Inhibition of lymphocyte trafficking shields the brain against deleterious neuroinflammation after stroke.</a> Brain. 134, 704-720 (2011).</li><li>Jones, B. J., Roberts, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rotarod+suitable+for+quantitative+measurements+of+motor+incoordination+in+naive+mice.">A rotarod suitable for quantitative measurements of motor incoordination in naive mice.</a> Naunyn Schmiedebergs Arch. Exp. Pathol. Pharmakol. 259, 211 (1968).</li><li>Bouet, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+adhesive+removal+test:+a+sensitive+method+to+assess+sensorimotor+deficits+in+mice.">The adhesive removal test: a sensitive method to assess sensorimotor deficits in mice.</a> Nat. Protoc. 4, 1560-1564 (2009).</li><li>Zhang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+test+for+detecting+long-term+sensorimotor+dysfunction+in+the+mouse+after+focal+cerebral+ischemia.">A test for detecting long-term sensorimotor dysfunction in the mouse after focal cerebral ischemia.</a> J. Neurosci. Methods. 117, 207-214 (2002).</li><li>Orset, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+of+in+situ+thromboembolic+stroke+and+reperfusion.">Mouse model of in situ thromboembolic stroke and reperfusion.</a> Stroke. 38, 2771-2778 (2007).</li><li>Farr, T. D., Whishaw, I. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+and+qualitative+impairments+in+skilled+reaching+in+the+mouse+(Mus+musculus)+after+a+focal+motor+cortex+stroke.">Quantitative and qualitative impairments in skilled reaching in the mouse (Mus musculus) after a focal motor cortex stroke.</a> Stroke. 33, 1869-1875 (2002).</li><li>Kassem-Moussa, H., Graffagnino, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nonocclusion+and+spontaneous+recanalization+rates+in+acute+ischemic+stroke:+a+review+of+cerebral+angiography+studies.">Nonocclusion and spontaneous recanalization rates in acute ischemic stroke: a review of cerebral angiography studies.</a> Arch. Neurol. 59, 1870-1873 (2002).</li></ol>

والكتاب ليس لديهم المصالح المتنافسة في الكشف عنها.

يصف هذا البروتوكول نموذج تجريبي من السكتة الدماغية البعيدة، MCAO دائمة بحلول الكهربي عبر الجمجمة - ما يسمى ب &quot;نموذج التخثر&quot;. هذا النموذج أصبح في الوقت نفسه واحدة من النماذج الحيوانية الأكثر استخداما في البحوث التجريبية السكتة الدماغية 12. بالمقارنة مع غيرها من نماذج نقص تروية الدماغ التنسيق، ونموذج تجلط الدم كما هو مبين في هذا الفيديو في الاستفادة من وقت العملية قصيرة جدا من ما يقرب من 10 دقيقة عندما يؤديها عالم المدربين. وبالتالي، لا يمكن أن يتحقق مرات التخدير وجيزة في هذا النموذج، الذي هو سمة مواتية لنموذج تجريبي السكتة الدماغية بسبب تأثير التخدير على العصبية والسكتة الدماغية النتيجة غير معروفة 15. علاوة على ذلك، كما هو موضح سابقا من قبل كارمايكل وآخرون 11، ونحن تثبت أن حجم احتشاء الناتجة عنها، وتوطين بعد القاصي التخثر دائمة MCA يتوافق مع آفات الدماغ الإقفاري في غالبية الإنسانالسكتات الدماغية على نحو يتناسب مع حجم الدماغ. السكتة الدماغية الإنسان هو أساسا صغيرة في الحجم مع الآفات حوالي 5-15٪ من نصف الكرة الأرضية، على أساس الدراسات السكانية السابقة والتجارب السريرية التصوير 16-18، على النقيض من الآفات السكتة الدماغية واسعة مع الضغط ذمة الدماغ التي تحدث في أقل من 10٪ من السكتات الدماغية السريرية 19. وبالتالي، يمكن اعتبار الآفات السكتة الدماغية في إقليم MCA من حوالي 12٪ من نصف الكرة الأرضية من النموذج المقدم يتحقق كوحدة تخزين السكتة الدماغية ذات الصلة translationally. ومع ذلك، فإنه يجب أن يؤخذ في الاعتبار أن سلالات مختلفة الماوس أو بروتوكولات التخدير المستخدمة قد يؤثر على حجم الآفة الناجمة 20. الوفيات أثناء فترة المراقبة بعد الاستقراء السكتة الدماغية في هذا النموذج غائب تقريبا. المعدل العام للوفيات أقل من 5٪ يتكون أساسا من الوفيات أثناء العملية بسبب حدوث مضاعفات anesthesiological أو التضحية لأن التوصل إلى معايير الاستبعاد. من أجل تبرير الخامس منخفضariability من هذا النموذج واستنساخ ممتازة، نقترح معايير الاستبعاد التالية: 1) أي نزيف تحت العنكبوتية خلال العملية. 2) وقت عملية أطول من 15 دقيقة. 3) إعادة الاستقناء من MCA بعد محاولتين لالكهربي مع عابرة فقط MCAO. علاوة على ذلك، تحتاج إلى أن تدرس يوميا بعد MCAO (السلوك الفسيولوجية الأساسية، والمظهر الفراء ووزن الجسم) للسيطرة على الألم، وعدم الراحة أو سلوك المرض الحيوانات. قد يتم تنفيذ عدة تدابير لتحليل نتائج السكتة الدماغية مثل قياس رقطة الليزر، والتصوير بالرنين المغناطيسي، والاختبارات السلوكية أو التحليل النسيجي. في هذا البروتوكول نقدم أساليب المثالية لتحليل السلوك وتحليل حجم احتشاء. وقد وضعت عدة لاختبار التحليل السلوكي بعد التنسيق نقص تروية الدماغ وتستخدم في البحوث التجريبية السكتة الدماغية. اختبارات مناسبة لضعف الحسية المستخدمة سابقا من قبل مجموعتنا في هذا النموذج السكتة الدماغية 21،22 نحنإعادة اختبار Rotarod 23، اختبار التسمية مثبت 24، ركن الاختبار 25 و 13 اسطوانة الاختبار، والذي يتجلى في هذا الفيديو. اختبار اسطوانة يصور باستمرار عدم التماثل السيارات في المرحلة الحادة بعد القاصي MCAO دائمة وأيضا بالكشف عن استعادة متتالية من وظيفة الحركة. على الرغم من مزايا واضحة، بعض القيود لهذا النموذج السكتة الدماغية يجب أن تؤخذ بعين الاعتبار. أولا، هناك حاجة إلى نقب من الجمجمة من أجل تخثر الشريان، مما ينتج عنه إمكانية الوصول لشبه التشغيلية التهابات في الدماغ، على الرغم من الالتهابات البكتيرية في الجروح والعضلات الزمانية أو الدماغ نفسه لم يتم اكتشاف من قبل أنفسنا أو موثقة من قبل الآخرين باستخدام هذا النموذج. علاوة على ذلك، الأضرار الميكانيكية إلى القشرة خلال إعداد وتجلط الدم لا يمكن استبعاد ولكن يمكن أن تكون محدودة بسبب الحذر الحفر وإزالة الجمجمة، الترطيب المستمر للموقع الجراحية والحد الأدنى من شمال شرق<html> cessary الكهربي (انظر معايير الاستبعاد). على الرغم من أن مسار MCA كما هو مبين في الشكل 2 تم العثور في معظم C57BL / 6 الفئران، وصفنا في البروتوكول كيفية المضي قدما في الاختلافات الطبيعية للدورة سفينة للحد من تقلب الطراز. وعلاوة على ذلك، فإننا نقترح استخدام متعددة (3 في حالة التشعب، 2 دون التشعب من MCA) مواقع انسداد للحد من خطر إعادة الاستقناء الجزئي للMCA، والتي في تجربتنا هو عامل مهم لتنوع هذا النموذج. من حيث الاختبارات السلوكية، ويمكن الكشف فقط العجز السلوكية الطفيفة في الاختبارات السلوكية المذكورة أعلاه ويمكن ملاحظة التجديد وظيفية خلال الأسبوع الأول بعد السكتة الدماغية. وبالتالي، وأنظمة الاختبار أكثر تقدما مع ارتفاع حساسية والمعلمات اختبار النوعية مثل اختبار التوصل المهرة 27 قد يكون أكثر ملاءمة للكشف عن نتائج وظيفية طويلة الأجل في هذا النموذج. ontent &quot;&gt; وأخيرا، وذلك بسبب تخثر الدائمين في MCA يمكن الحصول على أي ضخه، والتي هي ميزة لوحظ في نسبة كبيرة من مرضى السكتة الدماغية بسبب عفوية تحلل الجلطة أو العلاج 28. ومع ذلك، وهذا نموذج السكتة الدماغية الانسداد التجلطي موضح سابقا 26 يوفر الخيار لنموذج السكتة الدماغية مجانية مع ضخه من نقص تروية الدماغ القشرية. أخذت معا، واستنساخ عالية، والمراقبة على المدى البعيد بسبب الحد الأدنى من وفيات ومقارنة حجم احتشاء النسبية والتعريب فيما يتعلق السكتة الدماغية الإنسان تمييز &quot;نموذج التخثر&quot; باعتباره نموذجا قيما للأبحاث السكتة الدماغية الأساسية ومتعدية.

السكتة الدماغية هي ثالث سبب الأكثر شيوعا للوفاة واحد من الأسباب الرئيسية المكتسبة الإعاقة البالغين في الدول المتقدمة 1. ويتسبب حوالي 80٪ من هذا المرض العصبية الحادة عن نقص التروية الدماغية الناتجة عن انسداد تدفق الدم الدماغي بينما تسبب حوالي 15٪ من قبل نزيف داخل المخ 2. على الرغم من البحوث الجارية، الوريد من الأنسجة منشط البلازمينوجين هو العلاج الدوائي الوحيد المعتمد للسكتة الدماغية الإقفارية حتى الآن ومتاحة فقط لأقلية من مرضى السكتة الدماغية بسبب نافذة زمنية قصيرة وافقت من 4.5 ساعة بعد ظهور السكتة الدماغية 3،4. كما لا توجد في المختبر النماذج التي يمكن نموذج صحيح التفاعلات المعقدة بين الدماغ، الأوعية الدموية والآليات الفيزيولوجية المرضية النظامية أثناء السكتة الدماغية، والنماذج الحيوانية ضرورية لإجراء البحوث قبل السريرية السكتة الدماغية. لذا، وضعت عدة نماذج السكتة الدماغية في فاريإيتي الأنواع. واحد من النماذج السكتة الدماغية الأكثر شيوعا هو &quot;نموذج خيوط&quot; حيث يتم إدخال خيوط الدرز عابر في الشريان السباتي الداخلي وتوجيهها حتى occludes غيض أصل الشريان الدماغي الأوسط (MCA)، مما أدى إلى توقف تدفق الدم واحتشاء الدماغ اللاحقة أيضا المناطق تحت القشرية القشرية وفي حالة انسداد طويلة 5،6. في نماذج photothrombotic من السكتة الدماغية، يتم التوصل إلى انسداد الضوئية للسفينة القشرية المشع بعد حقن الضيائي مما أدى إلى آفات صغيرة مقيدة محليا 7. لا يمكن أن يتحقق انسداد دائم في القاصي MCA الشرايين lenticulostriatal قبل ربط الشريان، وضغط لعابرة أو دائمة 8،9 التخثر. واحتشاء مما أدى إلى هذا النموذج في الغالب يؤثر على القشرة المخية الحديثة 10 لأن انسداد MCA في هذا النموذج هو القاصي إلى lenticulostriatal الشرايين، التي تزود العقد القاعدية. لأن غالبية من الآفات السكتة الدماغية الإنسان تقع في إقليم الشريان الدماغي الأوسط، كل من نماذج السكتة الدماغية شيوعا تشبه انسداد للMCA أو أحد فروعها 11. وMCA هو واحد من الشرايين الرئيسية التي توفر إمدادات الدم إلى الدماغ؛ فإنه ينشأ من الشريان السباتي الداخلي، والطرق على طول التلم الوحشي حيث ثم الفروع والمشاريع إلى العقد القاعدية والسطوح الجانبية للالجبهي، الجداري والفص الصدغي، بما في ذلك المحرك الأساسي والقشرة الحسية. ترتبط اليمين واليسار MCA إلى الشرايين الدماغية الأمامية والخلفية التواصل الشرايين، والتي تتصل الشرايين المخية الخلفية، وخلق دائرة ويليس (الشكل 1). كما سبق وذكرت من قبل كارمايكل وآخرون 11، على غرار عوائق من قبل القاصي الدماغي الأوسط في ArTERY انسداد (MCAO) نموذج في الفئران تشمل حوالي 10-15٪ من نصف الكرة الأرضية، وبالتالي محاكاة أغلبية الآفات السكتة الدماغية الإنسان التي تقع في إقليم القشرية MCA 11،12. في عام 1981، تامورا وآخرون وصفت دائمة، عبر الجمجمة MCAO نموذج تجلط الدم في الفئران 8. ومع ذلك، فإن النموذج صفها تامورا ينطوي على انسداد القريبة من MCA من أجل الالتفاف على التشعب أكثر القاصي من الشريان. وبالتالي، الأصلي &quot;نموذج تامورا&quot; يحرض الآفات القشرية ولكن أيضا ليس فقط الجسم المخطط، على غرار الآفات التي حصلت عليها &quot;نموذج خيوط&quot; 6. هنا، نحن تصف نموذج MCAO القاصي دائمة بحلول الكهربي عبر الجمجمة في الفئران. بالإضافة إلى ذلك، ونحن التقرير النسيجية ذات الصلة والأساليب الفنية لتحليل نتائج السكتة الدماغية في هذا النموذج. وتستند جميع الأساليب على إجراءات التشغيل الموحدة المتقدمة والمستخدمة في مختبراتنا.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="948">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:281px;">Camera Canon Eos 500D</td>
			<td style="width:224px;">Canon</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:324px;">optics: 18-55 mm; 30 fps; 640x480 video function</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:281px;">Mirror</td>
			<td style="width:224px;">Kristallform</td>
			<td style="width:119px;">2677089</td>
			<td>30x30 cm&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:281px;">Transparent acrylic glass cylinder</td>
			<td style="width:224px;">H&#38;S Kunststofftechnik</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>diameter: 8 cm,&#160; height: 25 cm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:281px;">Heating blanket</td>
			<td>FHC DC Temperature Controller</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:281px;">Fine Scissors</td>
			<td style="width:224px;">FST</td>
			<td>15000-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:281px;">Mayor Scissors</td>
			<td style="width:224px;">FST</td>
			<td style="width:119px;">1410-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:281px;">Forceps</td>
			<td style="width:224px;">FST</td>
			<td style="width:119px;">11616-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:281px;">Cotons</td>
			<td style="width:224px;">NOBA Verbondmitel Danz</td>
			<td style="width:119px;">974116</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:281px;">Saline solution</td>
			<td style="width:224px;">Braun</td>
			<td style="width:119px;">131321</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:281px;">Bepanthen pomade</td>
			<td style="width:224px;">Bayer</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:281px;">Isoflurane</td>
			<td style="width:224px;">Abbot</td>
			<td style="width:119px;">B506</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Anesthesia system for isoflurane</td>
			<td>Drager</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:281px;">Stereomikroskop&#160;</td>
			<td style="width:224px;">Zeiss</td>
			<td>Stemi DV4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:281px;">Electrosurgical device</td>
			<td colspan="2">ERBETOM ICC 80/50 HF-Chirurgieger&#228;t</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:281px;">Drill</td>
			<td style="width:224px;">Proxxon&#160;</td>
			<td style="width:119px;">D-34343</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:281px;">Ketamine</td>
			<td style="width:224px;">Inresa Arzneimittel GmbH</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:281px;">Xylacine</td>
			<td style="width:224px;">Albrecht</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">5ml Syringe&#160;</td>
			<td style="width:224px;">Braun</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:281px;">Phosphate Buffered Saline PH: 7,4</td>
			<td>Apotheke Innestadt Uni Munchen</td>
			<td style="width:119px;">P32799</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:281px;">Isopentane</td>
			<td style="width:224px;">Fluka</td>
			<td style="width:119px;">59070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:281px;">Cryostat</td>
			<td>Thermo Scientific CryoStarNX70</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:281px;">Superfrost Plus Slides</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td style="width:119px;">J1800AMNZ</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:281px;">Cresyl violet</td>
			<td>Sigma Life Science&#160;</td>
			<td>C5042-10G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:281px;">Acetic Acid</td>
			<td>Sigma Life Science&#160;</td>
			<td>695092</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:281px;">Ethanol 70%</td>
			<td>CLN Chemikalien Laborbedorf</td>
			<td>521005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:281px;">Ethanol 96%</td>
			<td>CLN Chemikalien Laborbedorf</td>
			<td>522078</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Ethanol 99%</td>
			<td>CLN Chemikalien Laborbedorf</td>
			<td style="width:119px;">ETO-5000-99-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:281px;">Roti-Histokit mounting medium</td>
			<td style="width:224px;">Roth</td>
			<td style="width:119px;">6638.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:281px;">C57Bl/6J mice</td>
			<td style="width:224px;">Charles River</td>
			<td style="width:119px;">000664</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

modeling stroke in mice: permanent coagulation of the distal middle cerebral artery

السكتة الدماغية هي ثالث سبب الأكثر شيوعا للوفاة والسبب الرئيسي في العجز المكتسب البالغين في البلدان المتقدمة. تتوفر لنسبة ضئيلة من مرضى السكتة الدماغية في المرحلة الحادة الخيارات العلاجية محدودة جدا فقط. البحوث الحالية هو البحث بشكل مكثف لوضع استراتيجيات علاجية جديدة وتركز بشكل متزايد على مرحلة شبه الحادة والمزمنة بعد السكتة الدماغية لأن أكثر المرضى قد تكون مؤهلة للحصول على التدخلات العلاجية في نافذة الوقت لفترة طويلة. وتشمل هذه الآليات تأخر مسارات الفيزيولوجية المرضية الهامة مثل التهاب آخر السكتة الدماغية، الأوعية الدموية، اللدونة العصبية والتجدد. من أجل تحليل هذه الآليات وتقييم الأهداف في وقت لاحق المخدرات الرواية، وسعى نماذج السكتة الدماغية التجريبية مع أهمية سريرية، ووفيات منخفضة واستنساخ عالية بعد. وعلاوة على ذلك، والفئران هي أصغر الثدييات التي آفة السكتة الدماغية التنسيق يمكن أن يتسبب والتي طائفة واسعة من النماذج المعدلة وراثيا هيالمتاحة. لذلك، نحن هنا وصف نموذج الفأر من الجمجمة، تخثر الدائمين في الشريان الدماغي الأوسط عبر الكهربي القاصي الشرايين lenticulostriatal، ما يسمى ب &quot;نموذج التخثر&quot;. يقع احتشاء مما أدى إلى هذا النموذج أساسا في القشرة؛ حجم احتشاء نسبي في ما يتعلق بحجم الدماغ يتوافق مع غالبية السكتات الدماغية البشرية. وعلاوة على ذلك، فإن النموذج يفي المعايير المذكورة أعلاه لاستنساخ وفيات منخفضة. في هذا الفيديو ونحن لشرح الطرق الجراحية من السكتة الدماغية الاستقراء في &quot;نموذج التخثر&quot; والإبلاغ أدوات التحليل النسيجي والوظيفي.

بسبب الوقت والتخدير المعتدل الضرر قصيرة الدماغ، ما يقرب من 10 دقيقة بعد نقلها إلى أقفاصها وكانت جميع الحيوانات مستيقظا، والانتقال بحرية في القفص والتفاعل مع تتزاحم. كان معدل الوفيات أثناء الجراحة MCAO أقل من 5٪، وذلك أساسا نتيجة للنزف تحت العنكبوتية عرضي أو تخدير غير صحيحة. وفيات خلال فترة الملاحظة لمدة 7 أيام بعد السكتة الدماغية الحث يحدث إلا نادرا جدا في حوالي 1-2٪ من الحيوانات. في سلسلة من 10 عملية الحيوانات لهذا التقرير كل من الحيوانات على قيد الحياة العملية وفترة الملاحظة لمدة 7 أيام، وكان أيا منها لاستبعاد بسبب معايير الاستبعاد. تم تقييم العجز السلوكية بعد MCA التخثر عن طريق اختبار اسطوانة استخدام تحليل 13 forepaw عدم التماثل. في هذا الاختبار، يتم قياس نسبة استخدام forepaw مستقلة اليسار واليمين في نقاط الوقت المشار إليه بعد السكتة الدماغية تحريض ومقارنة القيم الأساسية التي تم الحصول عليها 24ساعة قبل MCAO (الشكل 3B). قدم الحيوانات تغييرا كبيرا في استخدام أطرافهم التماثل للتنقيب مجتمعة الجدار في ساعة اسطوانة اختبار 24 (1.72 ± 0.326، P &lt;0.05) و 3 أيام (1.36 ± 0.17، P &lt;0.05) بعد MCAO. على الرغم من أن نسبة تحسن خلال فترة الملاحظة 1 أسبوع، كان التماثل السيارات تزال كبيرة بعد 7 أيام MCAO (1.35 ± 0.29، P &lt;0.05) مقارنة مع القيم الأساسية. أجرينا احتشاء volumetry باستخدام البنفسجي cresyl الملون المسلسل أقسام الدماغ الاكليلية بعد 7 أيام السكتة الدماغية الاستقراء (الشكل 4B). وكان متوسط ​​حجم احتشاء 15.4 مم 3، مما يمثل 12٪ من واحدة نصف الكرة المخ (الشكل 4C). تباين هذا النموذج السكتة الدماغية هي منخفضة بشكل استثنائي مع انحراف معياري حوالي 10٪. يشمل منطقة الآفة الحسية الجسدية والقشرة الحركية مع المودة طفيفة فقط من الهياكل تحت القشرية. علاوة على ذلك، توطين احتشاءالمنطقة يمكن التنبؤ بها للغاية مع تقلب الحد الأدنى فقط كما هو مبين في الرسم البياني التخطيطي توزيع (الشكل 4D). <img alt="الشكل 1" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51729/51729fig1highres.jpg" width="500" /> الشكل 1. تمثيل تخطيطي للدائرة ويليس. يتم تشكيل الدائرة الشريانية ويليس من الشرايين الدماغية المتوسطة (MCA) والشرايين المخي الأمامي (ACA) التي فرع من الشريان السباتي الداخلي (ICA)، وكذلك من قبل الخلفي الشرايين الدماغية (PCA) والخلفي التواصل الشرايين (PComA). وMCA يعمل في التلم الوحشي حيث الفروع إلى القشرة المخية. فرع MCA المهيمنة تزويد جزء كبير من القشرة الحركية وجزء من القشرة الحسية الجسدية والمغطي بشكل دائم عن طريق نموذج أظهرت (اكوما = الأمامي الشريان التواصل؛ BA = الشريان القاعدي؛ SuCA = مخيخ العليا<html> الشريان لار). <img alt="الرقم 2" fo:content-width="3in" src="/files/ftp_upload/51729/51729fig2highres.jpg" width="400" /> الشكل 2. الرأي عبر الجمجمة بعد إزالة العضلات الزمنية وتخطيطيا من MCA انسداد. (A) بعد إزالة العضلات الصدغي يمكن الاطلاع الشرايين القشرية من خلال الجمجمة الماوس شفافة جزئيا (في الفئران 8-12 أسبوع من العمر). ويمكن تحديد فرع MCA المهيمنة في جزء منقاري من وجهة النظر الزمنية فضلا عن مزيد من الشرايين المتفرعة من القشرية MCA وPCA في الجزء الذيلية. (B) عرض تخطيطي على فرع MCA المهيمن في التباين السائد مع التشعب على القشرة الزمانية الجانبية بعد حفر حفرة لدغ وإزالة الجمجمة. (C) تمثل المربعات السوداء المواقع التخثر MCA في الجانبين الداني والقاصي من التشعب. في صفحة = &quot;دائما&quot;&gt; <img alt="الرقم 3" fo:content-width="4in" src="/files/ftp_upload/51729/51729fig3highres.jpg" width="500" /> الشكل 3. تحليل العجز السلوكية. (أ) اختبار اسطوانة انشاء: يتم وضع الماوس في اسطوانة الرأسي ويتم وضعها وراء المرايا من أجل تسجيل جميع حركات باستخدام كاميرا الفيديو (B) تم تحليل استخدام Forelimb التماثل باستخدام اختبار اسطوانة. تم حساب نسب يسار / يمين من استخدام forelimb مستقلة 24 ساعة قبل MCAO وعند نقاط الوقت المشار إليه بعد السكتة الدماغية الاستقراء. N = 10، * ع &lt;0.05 نقطة بين الوقت المشار إليه، والأساس (السيطرة) القيمة. <img alt="الرقم 4" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51729/51729fig4highres.jpg" width="500" /> الشكل 4. الحجمي التحليل واحتشاء نتيجة احتشاء بعد القاصي MCAO. (أ) صورة الممثل من البنفسجي cresyl الملون الصدرية الاكليليةفي القسم بعد 7 أيام MCAO. الخط الأصفر ويدل اختيار المقابل (يمين) القشرة والخط الأحمر هو اختيار غير احتشاء (الملون) قشرة الدماغ المماثل. منطقة شاحب في نصف الكرة المخية الأيسر يصور منطقة الأنسجة احتشاء. (B) تحليل حجم عائق من 10 العقول (كل نقطة تمثل الدماغ فرد واحد) على مدار 24 ساعة، 3 أيام و 7 أيام بعد القاصي MCA التخثر. الخط الأحمر الأفقي يمثل نفسه، أشرطة الخطأ تشير إلى الانحراف المعياري. (C) الممثل البنفسجي cresyl أقسام الدماغ الاكليلية الملون بعد كل 400 ميكرومتر في 7 أيام MCA التخثر. (D) توزيع تخطيطي لأنسجة المخ احتشاء بعد 7 أيام MCAO. كل شريحة يصور المعلومات المتراكمة التوزيع احتشاء (ونا مميزا كما هو مبين) في قسم معين فيما يتعلق bregma (صورة معدلة من: Liesz وآخرون، الدماغ، 2011؛ ​​بإذن من مطبعة جامعة أكسفورد). &lt;وأ href = &quot;https://www.jove.com/files/ftp_upload/51729/51729fig4highres.jpg&quot; الهدف = &quot;_blank&quot;&gt; الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.

Watch this Scientific Journal Video about Modeling Stroke in Mice: Permanent Coagulation of the Distal Middle Cerebral Artery at JoVE.com

Modeling Stroke in Mice: Permanent Coagulation of the Distal Middle Cerebral Artery

وتستخدم على نطاق واسع نماذج مختلفة من الفئران وسط انسداد الشريان الدماغي (MCAO) في أبحاث الدماغ التجريبية. هنا، علينا أن نظهر نموذج عبر الجمجمة دائمة القاصي MCAO التي تنتج احتشاء القشرية ثابت من حجم الموافق الضرر الذي تفرضه غالبية السكتات الدماغية الإقفارية الإنسان.

السكتة الدماغية النمذجة في الفئران: التخثر الدائم من الشريان الدماغي الأوسط القاصي

Stroke is the third most common cause of death and a main cause of acquired adult disability in developed countries. Only very limited therapeutical ...

modeling-stroke-mice-permanent-coagulation-distal-middle-cerebral

Research

JoVE Journal

Medicine

36.6K Views.  University Hospital Munich.  وتستخدم على نطاق واسع نماذج مختلفة من الفئران وسط انسداد الشريان الدماغي (MCAO) في أبحاث الدماغ التجريبية. هنا، علينا أن نظهر نموذج عبر الجمجمة دائمة القاصي MCAO التي تنتج احتشاء القشرية ثابت من حجم الموافق الضرر الذي تفرضه غالبية السكتات الدم...

Video: Modeling Stroke in Mice: Permanent Coagulation of the Distal Middle Cerebral Artery

Modeling Stroke in Mice - Middle Cerebral Artery Occlusion with the Filament Model

Stroke is among the most frequent causes of death and adult disability, especially in highly developed countries. However, treatment options to date are very limited. To meet the need for novel therapeutic approaches, experimental stroke research frequently employs rodent models of focal cerebral ischaemia. Most researchers use permanent or transient occlusion of the middle cerebral artery (MCA) in mice or rats.
Proximal occlusion of the middle cerebral artery (MCA) via the intraluminal suture technique (so called filament or suture model) is probably the most frequently used model in experimental stroke research. The intraluminal MCAO model offers the advantage of inducing reproducible transient or permanent ischaemia of the MCA territory in a relatively non-invasive manner. Intraluminal approaches interrupt the blood flow of the entire territory of this artery. Filament occlusion thus arrests flow proximal to the lenticulo-striate arteries, which supply the basal ganglia. Filament occlusion of the MCA results in reproducible lesions in the cortex and striatum and can be either permanent or transient. In contrast, models inducing distal (to the branching of the lenticulo-striate arteries) MCA occlusion typically spare the striatum and primarily involve the neocortex. In addition these models do require craniectomy. In the model demonstrated in this article, a silicon coated filament is introduced into the common carotid artery and advanced along the internal carotid artery into the Circle of Willis, where it blocks the origin of the middle cerebral artery. In patients, occlusions of the middle cerebral artery are among the most common causes of ischaemic stroke. Since varying ischemic intervals can be chosen freely in this model depending on the time point of reperfusion, ischaemic lesions with varying degrees of severity can be produced. Reperfusion by removal of the occluding filament at least partially models the restoration of blood flow after spontaneous or therapeutic (tPA) lysis of a thromboembolic clot in humans.
In this video we will present the basic technique as well as the major pitfalls and confounders which may limit the predictive value of this model.

Filamentous occlusion of the Middle cerebral artery is a common model for studying ischemic stroke in mice.

السكتة الدماغية النمذجة في الفئران -- الشرق انسداد الشريان الدماغي مع نموذج الشعيرة

Stroke is among the most frequent causes of death and adult disability, especially in highly developed countries. However, treatment options to date are ...

Mouse Model of Middle Cerebral Artery Occlusion

Stroke is the most common fatal neurological disease in the United States 1. The majority of strokes (88%) result from blockage of blood vessels in the brain (ischemic stroke) 2. Since most ischemic strokes (~80%) occur in the territory of middle cerebral artery (MCA) 3, many animal stroke models that have been developed have focused on this artery. The intraluminal monofilament model of middle cerebral artery occlusion (MCAO) involves the insertion of a surgical filament into the external carotid artery and threading it forward into the internal carotid artery (ICA) until the tip occludes the origin of the MCA, resulting in a cessation of blood flow and subsequent brain infarction in the MCA territory 4. The technique can be used to model permanent or transient occlusion 5. If the suture is removed after a certain interval (30 min, 1 h, or 2 h), reperfusion is achieved (transient MCAO); if the filament is left in place (24 h) the procedure is suitable as a model of permanent MCAO. This technique does not require craniectomy, a neurosurgical procedure to remove a portion of skull, which may affect intracranial pressure and temperature 6. It has become the most frequently used method to mimic permanent and transient focal cerebral ischemia in rats and mice 7,8. To evaluate the extent of cerebral infarction, we stain brain slices with 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) to identify ischemic brain tissue 9. In this video, we demonstrate the MCAO method and the determination of infarct size by TTC staining.

We demonstrate in the video a method for producing a middle cerebral artery occlusion in adult mice using an intraluminal monofilament. We also show how to evaluate the extent of cerebral infarction by 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) staining.

نموذج الفأر من انسداد الشريان الدماغي الأوسط

Stroke is the most common fatal neurological disease in the United States 1. The majority of strokes (88%) result from blockage of blood vessels in the ...

Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Mice

Stroke is the third leading cause of death and the leading cause of disability in the world, with an estimated cost of near $70 billion 
in the United States in 20091,2. The intraluminal middle cerebral artery occlusion (MCAO) model was developed by Koizumi4 in 1986 to simulate this 
impactful human pathology in the rat. A modification of the MCAO method was later presented by Longa3. Both techniques have been widely used to identify 
molecular mechanisms of brain injury resulting from ischemic stroke and potential therapeutic modalities5. This relatively noninvasive method in rats has been 
extended to use in mice to take advantage of transgenic and knockout strains6,7. To model focal cerebral ischemia, an intraluminal suture is advanced via 
the internal carotid artery to occlude the base of the MCA. Retracting the suture after a specified period of time mimics spontaneous reperfusion, but the 
suture can also be permanently retained. This video will be demonstrating the two major approaches for performing intraluminal MCAO procedure in mice in a 
stepwise fashion, as well as providing insights for potential drawbacks and pitfalls. The ischemic brain tissue will subsequently be stained by 
2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) to evaluate the extent of cerebral infarction8.

Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion MCAO Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Mice

The intraluminal middle cerebral artery occlusion (MCAO) model is the most frequent used model among experimental ischemic stroke models. Here we will demonstrate the entire model in detail with the guide of Laser Doppler flowmetry, and its representative results.

الشريان الدماغي الأوسط انسداد داخل اللمعة (MCAO) النموذجي للاصابة بالسكتة الدماغية مع توجيه الليزر دوبلر Flowmetry في الفئران

Stroke is the third leading cause of death and the leading cause of disability in the world, with an estimated cost of near $70 billion 
in the United ...

The Application Of Permanent Middle Cerebral Artery Ligation in the Mouse

Focal cerebral ischemia is among the most common type of stroke seen in patients. Due to the clinical significance there has been a prolonged effort to develop suitable animal models to study the events that unfold during ischemic insult. These techniques include transient or permanent, focal or global ischemia models using many different animal models, with the most common being rodents.
The permanent MCA ligation method which is also referred as pMCAo in the literature is used extensively as a focal ischemia model in rodents 1-6. This method was originally described for rats by Tamura et al. in 1981 7. In this protocol a craniotomy was used to access the MCA and the proximal regions were occluded by electrocoagulation. The infarcts involve mostly cortical and sometimes striatal regions depending on the location of the occlusion. This technique is now well established and used in many laboratories 8-13. Early use of this technique led to the definition and description of &#x201C;infarct core&#x201D; and &#x201C;penumbra&#x201D; 14-16, and it is often used to evaluate potential neuroprotective compounds 10, 12, 13, 17. Although the initial studies were performed in rats, permanent MCA ligation has been used successfully in mice with slight modifications 18-20 .
This model yields reproducible infarcts and increased post-survival rates. Approximately 80% of the ischemic strokes in humans happen in the MCA area 21 and thus this is a very relevant model for stroke studies. Currently, there is a paucity of effective treatments available to stroke patients, and thus there is a need for good models to test potential pharmacological compounds and evaluate physiological outcomes. This method can also be used for studying intracellular hypoxia response mechanisms in vivo. 
Here, we present the MCA ligation surgery in a C57/BL6 mouse. We describe the pre-surgical preparation, MCA ligation surgery and 2,3,5 Triphenyltetrazolium chloride (TTC) staining for quantification of infarct volumes.

Middle cerebral artery (MCA) ligation is a technique to study focal cerebral ischemia in animal models. In this method, the middle cerebral artery is exposed by craniotomy and ligated by cauterization. This method gives highly reproducible infarct volumes and increased post-operative survival rates compared to other methods available.

تطبيق الربط الدائم الشريان المخي الأوسط في الماوس

Focal cerebral ischemia is among the most common type of stroke seen in patients. Due to the clinical significance there has been a prolonged effort to ...

Endothelin-1 Induced Middle Cerebral Artery Occlusion Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Rat

Stroke is the number one cause of disability and third leading cause of death in the world, costing an estimated $70 billion in the United States in 20091, 2. Several models of cerebral ischemia have been developed to mimic the human condition of stroke. It has been suggested that up to 80% of all strokes result from ischemic damage in the middle cerebral artery (MCA) area3. In the early 1990s, endothelin-1 (ET-1) 4 was used to induce ischemia by applying it directly adjacent to the surface of the MCA after craniotomy. Later, this model was modified 5 by using a stereotaxic injection of ET-1 adjacent to the MCA to produce focal cerebral ischemia. The main advantages of this model include the ability to perform the procedure quickly, the ability to control artery constriction by altering the dose of ET-1 delivered, no need to manipulate the extracranial vessels supplying blood to the brain as well as gradual reperfusion rates that more closely mimics the reperfusion in humans5-7. On the other hand, the ET-1 model has disadvantages that include the need for a craniotomy, as well as higher variability in stroke volume8. This variability can be reduced with the use of laser Doppler flowmetry (LDF) to verify cerebral ischemia during ET-1 infusion. Factors that affect stroke variability include precision of infusion and the batch of the ET-1 used6. Another important consideration is that although reperfusion is a common occurrence in human stroke, the duration of occlusion for ET-1 induced MCAO may not closely mimic that of human stroke where many patients have partial reperfusion over a period of hours to days following occlusion9, 10. This protocol will describe in detail the ET-1 induced MCAO model for ischemic stroke in rats. It will also draw attention to special considerations and potential drawbacks throughout the procedure.

Several animal models of cerebral ischemia have been developed to simulate the human condition of stroke. This protocol describes the endothelin-1 (ET-1) induced middle cerebral artery occlusion (MCAO) model for ischemic stroke in rats. In addition, important considerations, advantages, and shortcomings of this model are discussed.

Endothelin-1 المستحثة انسداد الشريان الدماغي الأوسط نموذج للالسكتة الدماغية مع التوجيه بالليزر Flowmetry دوبلر في الجرذ

Stroke is the number one cause of disability and third leading cause of death in the world, costing an estimated $70 billion in the United States in ...

Utilizing a Cranial Window to Visualize the Middle Cerebral Artery During Endothelin-1 Induced Middle Cerebral Artery Occlusion

Creation of a cranial window is a method that allows direct visualization of structures on the cortical surface of the brain1-3. This technique can be performed in many locations overlying the rat cerebrum, but is most easily carried out by creating a craniectomy over the readily accessible frontal or parietal bones. Most frequently, we have used this technique in combination with the endothelin-1 middle cerebral artery occlusion model of ischemic stroke to quantify the changes in middle cerebral artery vessel diameter that occur with injection of endothelin-1 into the brain parenchyma adjacent to the proximal MCA4, 5. In order to visualize the proximal portion of the MCA during endothelin -1 induced MCAO, we use a technique to create a cranial window through the temporal bone on the lateral aspect of the rat skull (Figure 1). Cerebral arteries can be visualized either with the dura intact or with the dura incised and retracted. Most commonly, we leave the dura intact during visualization since endothelin-1 induced MCAO involves delivery of the vasoconstricting peptide into the brain parenchyma. This bypasses the need to incise the dura directly over the visualized vessels for drug delivery. This protocol will describe how to create a cranial window to visualize cerebral arteries in a step-wise fashion, as well as how to avoid many of the potential pitfalls pertaining to this method.

This article describes a method for visualizing rat cerebral arteries through a cranial window using temporal craniectomy in order to view proximal portions of the middle cerebral artery (Figure 1). This versatile method can be combined with various techniques of drug delivery to measure cerebral artery reactivity in vivo.

الاستفادة من وجود نافذة القحف لتصور الشريان الدماغي الأوسط خلال Endothelin-1 انسداد الشريان الدماغي الأوسط المستحثة

Creation of a cranial window is a method that allows direct visualization of structures on the cortical surface of the brain1-3. This technique can be ...

Optimized System for Cerebral Perfusion Monitoring in the Rat Stroke Model of Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion

The translational potential of pre-clinical stroke research depends on the accuracy of experimental modeling. Cerebral perfusion monitoring in animal models of acute ischemic stroke allows to confirm successful arterial occlusion and exclude subarachnoid hemorrhage. Cerebral perfusion monitoring can also be used to study intracranial collateral circulation, which is emerging as a powerful determinant of stroke outcome and a possible therapeutic target. Despite a recognized role of Laser Doppler perfusion monitoring as part of the current guidelines for experimental cerebral ischemia, a number of technical difficulties exist that limit its widespread use. One of the major issues is obtaining a secure and prolonged attachment of a deep-penetration Laser Doppler probe to the animal skull. In this video, we show our optimized system for cerebral perfusion monitoring during transient middle cerebral artery occlusion by intraluminal filament in the rat. We developed in-house a simple method to obtain a custom made holder for twin-fibre (deep-penetration) Laser Doppler probes, which allow multi-site monitoring if needed. A continuous and prolonged monitoring of cerebral perfusion could easily be obtained over the intact skull.

Cerebral perfusion monitoring has been demonstrated to improve accuracy in ischemic stroke models. Technical difficulties often limit the use of this essential tool for cerebrovascular research. In this video, an optimized system is shown to obtain a single or multi-site hemodynamic monitoring during intraluminal middle cerebral artery occlusion in rats.

الأمثل نظام لرصد الإرواء الدماغي في نموذج الفئران من السكتة الدماغية داخل اللمعة انسداد الشريان الدماغي الأوسط

The translational potential of pre-clinical stroke research depends on the accuracy of experimental modeling. Cerebral perfusion monitoring in animal ...

Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats

Clinically, thrombolytic therapy with use of recombinant tissue plasminogen activator (tPA) remains the most effective treatment for acute ischemic stroke. However, the use of tPA is limited by its narrow therapeutic window and by increased risk of hemorrhagic transformation. There is an urgent need to develop suitable stroke models to study new thrombolytic agents and strategies for treatment of ischemic stroke. At present, two major types of ischemic stroke models have been developed in rats and mice: intraluminal suture MCAO and embolic MCAO. Although MCAO models via the intraluminal suture technique have been widely used in mechanism-driven stroke research, these suture models do not mimic the clinical situation and are not suitable for thrombolytic studies. Among these models, the embolic MCAO model closely mimics human ischemic stroke and is suitable for preclinical investigation of thrombolytic therapy. This embolic model was first developed in rats by Overgaard et al.1 in 1992 and further characterized by Zhang et al. in 19972. Although embolic MCAO has gained increasing attention, there are technical problems faced by many laboratories. To meet increasing needs for thrombolytic research, we present a highly reproducible model of embolic MCAO in the rat, which can develop a predictable infarct volume within the MCA territory. In brief, a modified PE-50 tube is gently advanced from the external carotid artery (ECA) into the lumen of the internal carotid artery (ICA) until the tip of the catheter reaches the origin of the MCA. Through the catheter, a single homologous blood clot is placed at the origin of the MCA. To identify the success of MCA occlusion, regional cerebral blood flow was monitored, neurological deficits and infarct volumes were measured. The techniques presented in this paper should help investigators to overcome technical problems for establishing this model for stroke research.

Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion MCAO for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats

In this paper, we demonstrate a standard method for producing an embolic middle cerebral artery occlusion with homologous blood clots (fibrin-rich) in adult rat. This model closely mimics human ischemic stroke and is suitable for preclinical study of thrombolytic therapy for ischemic stroke.

صمي الأوسط انسداد الشريان الدماغي (MCAO) لالدماغية السكتة الدماغية مع مثلي تجلط الدم في الجرذان

Clinically, thrombolytic therapy with use of recombinant tissue plasminogen activator (tPA) remains the most effective treatment for acute ischemic ...

Quantification of Neurovascular Protection Following Repetitive Hypoxic Preconditioning and Transient Middle Cerebral Artery Occlusion in Mice

Experimental animal models of stroke are invaluable tools for understanding stroke pathology and developing more effective treatment strategies. A 2 week protocol for repetitive hypoxic preconditioning (RHP) induces long-term protection against central nervous system (CNS) injury in a mouse model of focal ischemic stroke. RHP consists of 9 stochastic exposures to hypoxia that vary in both duration (2 or 4 hr) and intensity (8% and 11% O2). RHP reduces infarct volumes, blood-brain barrier (BBB) disruption, and the post-stroke inflammatory response for weeks following the last exposure to hypoxia, suggesting a long-term induction of an endogenous CNS-protective phenotype. The methodology for the dual quantification of infarct volume and BBB disruption is effective in assessing neurovascular protection in mice with RHP or other putative neuroprotectants. Adult male Swiss Webster mice were preconditioned by RHP or duration-equivalent exposures to 21% O2 (i.e. room air). A 60 min transient middle cerebral artery occlusion (tMCAo) was induced 2 weeks following the last hypoxic exposure. Both the occlusion and reperfusion were confirmed by transcranial laser Doppler flowmetry. Twenty-two hr after reperfusion, Evans Blue (EB) was intravenously administered through a tail vein injection. 2 hr later, animals were sacrificed by isoflurane overdose and brain sections were stained with 2,3,5- triphenyltetrazolium chloride (TTC). Infarcts volumes were then quantified. Next, EB was extracted from the tissue over 48 hr to determine BBB disruption after tMCAo. In summary, RHP is a simple protocol that can be replicated, with minimal cost, to induce long-term endogenous neurovascular protection from stroke injury in mice, with the translational potential for other CNS-based and systemic pro-inflammatory disease states.

This protocol describes repetitive hypoxic preconditioning, or brief exposures to systemic hypoxia that reduce infarct volumes and blood-brain barrier disruption following transient middle cerebral artery occlusion in mice. It also details dual quantification of infarct volume and blood-brain barrier disruption after stroke to assess the efficacy of neurovascular protection.

الكمي لحماية عائية عصبية بعد المتكرر نقص الأوكسجين شروط مسبقة وعابر الأوسط الشريان الدماغي انسداد في الفئران

Experimental animal models of stroke are invaluable tools for understanding stroke pathology and developing more effective treatment strategies. A 2 week ...

Performing Permanent Distal Middle Cerebral with Common Carotid Artery Occlusion in Aged Rats to Study Cortical Ischemia with Sustained Disability

Stroke typically occurs in elderly people with a range of comorbidities including carotid (or other arterial) atherosclerosis, high blood pressure, obesity and diabetes. Accordingly, when evaluating therapies for stroke in animals, it is important to select a model with excellent face validity. Ischemic stroke accounts for 80% of all strokes, and the majority of these occur in the territory of the middle cerebral artery (MCA), often inducing infarcts that affect the sensorimotor cortex, causing persistent plegia or paresis on the contralateral side of the body. We demonstrate in this video a method for producing ischemic stroke in elderly rats, which causes sustained sensorimotor disability and substantial cortical infarcts. Specifically, we induce permanent distal middle cerebral artery occlusion (MCAO) in elderly female rats by using diathermy forceps to occlude a short segment of this artery. The carotid artery on the ipsilateral side to the lesion was then permanently occluded and the contralateral carotid artery was transiently occluded for 60 min. We measure the infarct size using structural T2-weighted magnetic resonance imaging (MRI) at 24 hr and 8 weeks after stroke. In this study, the mean infarct volume was 4.5% &#177; 2.0% (standard deviation) of the ipsilateral hemisphere at 24 hr (corrected for brain swelling using Gerriet&#8217;s equation, n = 5). This model is feasible and clinically relevant as it permits the induction of sustained sensorimotor deficits, which is important for the elucidation of pathophysiological mechanisms and novel treatments.

Here we present a protocol to produce permanent distal middle cerebral artery occlusion in elderly female rats with simultaneous occlusion of the carotid arteries to generate large cortical infarcts and sustained deficits. We show confirmation of the lesion size using structural MRI at 24 hr and 8 weeks after stroke.

أداء الدائم القاصي الأوسط الدماغي مع السباتي المشترك انسداد الشريان في الجرذان المسنين لدراسة القشرية نقص التروية ذوي الإعاقة المستديمة

Stroke typically occurs in elderly people with a range of comorbidities including carotid (or other arterial) atherosclerosis, high blood pressure, ...