This project was funded by the Government of Canada through Genome Canada and the Ontario Genomics Institute (OGI-046), and Ontario Research Fund&#8211;Global Leadership in Genomics and Life Sciences GL2-01-035 (to M.G. and V.G.). T.V.L. is a postdoctoral fellow of the Fund for Scientific Research Flanders (FWO).

1. صيانة العنكبوت سوس السكان ملاحظة: يتم تربيتها العث العنكبوت في كاليفورنيا الفاصوليا الحمراء (فاصيلوس الشائع). <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تنمو نباتات الفول من البذور لمدة 2-3 أسابيع قبل الإصابة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إختلط هذه النباتات مع النباتات المصابة؛ والعث الكبار استعمار بسرعة المواد النباتية الطازجة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة نباتات الفول المصابة القديمة كل 7-10 أيام، والاستعاضة عنها بالنباتات الطازجة. </li></ol> 2. جمع الكبار أنثى العث <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> سوس كوكتيل باستخدام طريقة الغسل <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لجمع العث، ضع نبات الفاصوليا الطازجة في اتصال مع النباتات المصابة 1-2 أيام قبل التجربة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام 20-30 نباتات الفول جديدة لجمع 1،000 إلى 2،000 العث الكبار من الإناث. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحضير محلول توين 20 في 0.001٪ باستخدام مياه الصنبور في RT. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> غسل نباتات الفول المصابة في محلول توين 20، وذلك باستخدام 2 إلى 3 محطات في كل مرة. </li><li&gt; يتم غسلها كل مصنع 2-3X لجمع كل العث من الأوراق. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> خطوة كاملة في غضون 10 دقيقة 2.1.4 لتجنب وفيات سوس. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عزل الكبار أنثى العث التي كتبها الترشيح للتعليق سوس من خلال شبكة من المناخل معرفة الحجم <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد المناخل من أحجام شبكة التالية: 500 ميكرومتر (لإزالة الحطام) و 300 ميكرومتر (لجمع العث الكبار الإناث) (الشكل 1A). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحديد تعليق من خلال ميكرون غربال 500. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يعيد الترشيح تعليق من خلال غربال 300 ميكرون. سيتم الاحتفاظ العث الإناث البالغات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تراجع منخل 300 ميكرون مع العث الإناث الكبار في مياه الصنبور نظيفة لإزالة توين 20. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تنتشر العث في طبقة واحدة في الجزء السفلي من الغربال. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام منشفة ورقية لإزالة المياه الزائدة من شبكة والجانبين من غربال. ملاحظة: يتم ذلك لأن العث بحاجة لتجف بسرعة من أجل التعافي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد التجمع كما هو مبين في الشكل 1باء؛ وهذا سوف يسمح العث للتحرك بحرية، ولكن منعهم من الهرب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع غربال مع العث على رأس المنخل الذي يستخدم كوسيلة لدعم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحيط غربال السفلي مع الماء لمنع العث من تشتيت. ملاحظة: سوف يبدأ في التعافي بعد العث حوالي 5 دقائق. بعد ما يقرب من 30 دقيقة، وعدد من العث تتحرك كافية لبدء جمع (1D الشكل). وينبغي جمع العث في حدود 1 ساعة، لأنها تنتج الحرير التي من شأنها أن تتداخل مع المجموعة. </li></ol></li></ol> 3. مصنع الإصابة مع العث ملاحظة: بمجرد أن تعافى العث الإناث البالغين، ويمكن استخدامها لغزو النبات. هناك 2 الأساليب المستخدمة لتصيب النباتات التجريبية مع العث الإناث الكبار: أ) باستخدام فرشاة غرامة (القسم بروتوكول 3.1) وب) باستخدام مضخة فراغ أو خط (القسم بروتوكول 3.2). <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> سوس الإصابة باستخدام فرشاة ملاحظة: العنكبوت سوس الإصابةمع ويستخدم فرشاة لتطبيق ما يصل إلى 30 العث في النبات. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام فرشاة مستديرة لينة الشعر فن حجم 00 أو الدقيقة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تبلل الفرشاة مع RT ماء الصنبور. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اختيار بلطف صعودا العث من غربال باستخدام رأس الفرشاة ونقلها إلى المصنع. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> سوس الإصابة باستخدام مضخة ملاحظة: يتم استخدام النبات الإصابة مع العث التي جمعتها خط مضخة / فراغ عندما يتم تطبيق أكثر من 30 العث. لهذا الأسلوب، ومضخة فراغ لمكونات الدقيقة لاقط أو خط فراغ يمكن استخدامها. فمن المهم للحفاظ على تدفق الهواء المستمر وقوة كافية (2-4 رطل). <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إرفاق ماصة 1 مل إلى الأنبوب الذي يربط لمضخة فراغ أو خط باستخدام قطع 1.5 مل أنبوب الطرد المركزي في أسفل كما محول بين أنبوب مضخة / فراغ وغيض. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع قطعة من منشفة ورقية بين طرف ماصة ومحول (1.5 مل أنبوب الطرد المركزي). ملاحظة: الغرض من هذا هو فخ العث داخل رانه غيض ماصة أثناء عملية الشفط وكذلك للحد من تدفق الهواء (الشكل 1C). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جمع العث مباشرة من غربال استخدام غيض ماصة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بدلا من ذلك، جمع العث واحدا تلو الآخر من الأوراق المصابة باستخدام المجسام. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عندما تم جمع العدد المطلوب من العث، وإزالة غيض ماصة من أنبوب، والتأكد من أن قطعة من منشفة ورقية في الجزء الخلفي من غيض ماصة ودون عائق. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جمع العث من خلال الاستفادة من غيض ماصة والتثاقل العث معا. ثم، ووضعها على ورقة؛ في غضون ثوان، وسوف تبدأ العث لتفريق على ورقة. </li></ol></li></ol> 4. تسجيل وتقييم الأضرار النباتية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تسجيل الأضرار النباتية ملاحظة: للحصول A. thaliana، يتم تقييم الضرر المصنع بعد 4 أيام من التغذية سوس. وسجلت الضرر كما المساحة الإجمالية من البقع داء الاخضرار. لقياس الضرر، هو قطع كامل ريدة ومسحها ضوئيا.المعلمات المسح الضوئي وصفها هي لV30 الماسح الضوئي إبسون ولكن سوف يكون بمثابة نقطة انطلاق جيدة لأي الماسحة الضوئية المسطحة مماثلة. إبقاء معلمات المسح المستمر لجميع التجارب السماح المقارنة بين أشواط التجربة الفردية. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تغطية السرير الماسح الضوئي مع ورقة الشفافية لمنع تلوث سطح الماسح الضوئي مع المواد النباتية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطع وريدة كامل ومكان على السرير الماسح الضوئي بحيث متجه نحو المحور (العلوي) جانب من الأوراق تواجه مصدر الضوء الماسح الضوئي والتقاط العنصر. بدلا من ذلك، إذا ريدات هي كثيفة جدا لالتقاط أوراق الفردية دون تداخل، تشريح ريدة في الأوراق أو مجموعات من الأوراق غير متداخلة مع مقص غرامة الفردية قبل وضع على السرير الماسح الضوئي. يمكن مسحها ريدات متعددة في نفس الوقت. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تغطية ريدات أو الأوراق مع قطعة من الورق الأبيض لمنع الالتزام وتلوث غطاء الماسح الضوئي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وثيقة غطاء الماسح الضوئي وإجراء فحص مع المعلمات التالية: القرار: 1،200 نقطة في البوصة؛ وضع اللون: أدوبي RGB؛ سطوع: +25؛ نوع الملف: JPEG الحد الأقصى الجودة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حفظ ملفات الصور لتحليل الأضرار اللاحقة. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الأضرار محطة الكمي ملاحظة: يتم احتساب مساحة الضرر يدويا باستخدام فوتوشوب. بسبب اختلافات كبيرة في شكل ورقة وكثافة اللون من الأعراض نتيجة لتغذية سوس، وبالطريقة الآلية لا يمكن الاعتماد عليها. وبالتالي، يتم استخدام طريقة شبكة لتقييم الضرر النبات: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> فتح الصورة من المصنع مع فوتوشوب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> خلق طبقة جديدة، ثم تراكب الصور الممسوحة ضوئيا مع شبكة من 0.25 مم × 0.25 مم الانقسامات (عرض أو العرض - عرض - الشبكة، اختصار لوحة المفاتيح على Ctrl + &#39;). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> على طبقة مضافين، بمناسبة المناطق أوراق التالفة باستخدام نقطة (استخدام &quot;أداة قلم رصاص&quot;، اختصار لوحة المفاتيح B). استخدام نقطة واحدة واحدة لكل مربع من الشبكة أدناه والتي كان هناك ضرر تغطي أكثر من نصف وحدة الشبكة. ويعرف حجم نقطة بالبكسل (أي، </eم&gt; 52 بكسل لكل نقطة). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عندما يتم وضع علامة على كافة الساحات من الشبكة التي تظهر الضرر مصنع تغطي ما لا يقل عن نصف وحدة الشبكة مع نقطة، استخدم أداة الرسم البياني (نافذة - الرسم البياني) لتحديد العدد الإجمالي للبكسل على طبقة. يسمح أداة الرسم البياني واحد لقياس عدد وحدات البكسل. لأن كل نقطة يمثله عدد ثابت ومعروف من بكسل، ستقوم الأداة الرسم البياني قياس عدد وحدات البكسل، التي تمثل العدد الإجمالي من النقاط، وبالتبعية، فإن العدد الإجمالي من المربعات ملحوظ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حساب عدد &quot;النقاط&quot; التي تميزت باستخدام الصيغة: عدد النقاط = مجموع عدد بكسل / عدد بكسل لكل نقطة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حساب المساحة الإجمالية للضرر عن طريق ضرب عدد من النقاط ملحوظ على الصورة التي مساحتها 1 متر مربع من الشبكة، كما يتوافق نقطة واحدة إلى المربع رقم واحد من الشبكة. </li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Jeppson, L. R., Keifer, H. H., Baker, E. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Mites injurious to economic plants. , (1975).</li><li>Migeon, A., Dorkeld, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spider+Mites+Web:+a+comprehensive+database+for+the+Tetranychidae.">Spider Mites Web: a comprehensive database for the Tetranychidae.</a> http://www.montpellier.inra.fr/CBGP/spmweb. , (2013).</li><li>Croft, B. A., Vandebaan, H. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ecological+and+Genetic-Factors+Influencing+Evolution+of+Pesticide+Resistance+in+Tetranychid+and+Phytoseiid+Mites.">Ecological and Genetic-Factors Influencing Evolution of Pesticide Resistance in Tetranychid and Phytoseiid Mites.</a> Exp Appl Acarol. 4, 277-300 (1988).</li><li>Van Leeuwen, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+heteroplasmy+and+the+evolution+of+insecticide+resistance:+Non-Mendelian+inheritance+in+action.">Mitochondrial heteroplasmy and the evolution of insecticide resistance: Non-Mendelian inheritance in action.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 105, 5980-5985 (2008).</li><li>Van Leeuwen, T., Vontas, J., Tsagkarakou, A., Dermauw, W., Tirry, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acaricide+resistance+mechanisms+in+the+two-spotted+spider+mite+Tetranychus+urticae+and+other+important+Acari:+A+review.">Acaricide resistance mechanisms in the two-spotted spider mite Tetranychus urticae and other important Acari: A review.</a> Insect Biochem Molec. 40, 563-572 (2010).</li><li>Dermauw, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+cys-loop+ligand-gated+ion+channel+gene+family+of+Tetranychus+urticae:+Implications+for+acaricide+toxicology+and+a+novel+mutation+associated+with+abamectin+resistance.">The cys-loop ligand-gated ion channel gene family of Tetranychus urticae: Implications for acaricide toxicology and a novel mutation associated with abamectin resistance.</a> Insect Biochem Molec. 42, 455-465 (2012).</li><li>Van Leeuwen, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Population+bulk+segregant+mapping+uncovers+resistance+mutations+and+the+mode+of+action+of+a+chitin+synthesis+inhibitor+in+arthropods.">Population bulk segregant mapping uncovers resistance mutations and the mode of action of a chitin synthesis inhibitor in arthropods.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 109, 4407-4412 (2012).</li><li>Dearden, P. K., Donly, C., Grbic, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+pair-rule+gene+homologues+in+a+chelicerate:+early+patterning+of+the+two-spotted+spider+mite+Tetranychus+urticae.">Expression of pair-rule gene homologues in a chelicerate: early patterning of the two-spotted spider mite Tetranychus urticae.</a> Development. 129, 5461-5472 (2002).</li><li>Khila, A., Grbic, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+silencing+in+the+spider+mite+Tetranychus+urticae:+dsRNA+and+siRNA+parental+silencing+of+the+Distal-less+gene.">Gene silencing in the spider mite Tetranychus urticae: dsRNA and siRNA parental silencing of the Distal-less gene.</a> Development genes and evolution. 217, 241-251 (2007).</li><li>Grbic, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mity+model:+Tetranychus+urticae,+a+candidate+for+chelicerate+model+organism.">Mity model: Tetranychus urticae, a candidate for chelicerate model organism.</a> BioEssays : news and reviews in molecular, cellular and developmental biology. 29, 489-496 (2007).</li><li>Grbic, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+genome+of+Tetranychus+urticae+reveals+herbivorous+pest+adaptations.">The genome of Tetranychus urticae reveals herbivorous pest adaptations.</a> Nature. 479, 487-492 (2011).</li><li>Kliebenstein, D., Pedersen, D., Barker, B., Mitchell-Olds, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+analysis+of+quantitative+trait+loci+controlling+glucosinolates,+myrosinase+and+insect+resistance+in+Arabidopsis+thaliana.">Comparative analysis of quantitative trait loci controlling glucosinolates, myrosinase and insect resistance in Arabidopsis thaliana.</a> Genetics. 161, 325-332 (2002).</li><li>Abe, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Function+of+jasmonate+in+response+and+tolerance+of+Arabidopsis+to+thrip+feeding.">Function of jasmonate in response and tolerance of Arabidopsis to thrip feeding.</a> Plant &amp; cell physiology. 49, 68-80 (2008).</li><li>Whiteman, N. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mining+the+plant-herbivore+interface+with+a+leafmining+Drosophila+of+Arabidopsis.">Mining the plant-herbivore interface with a leafmining Drosophila of Arabidopsis.</a> Molecular ecology. 20, 995-1014 (2011).</li><li>Goodspeed, D., Chehab, E. W., Min-Venditti, A., Braam, J., Covington, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arabidopsis+synchronizes+jasmonate-mediated+defense+with+insect+circadian+behavior.">Arabidopsis synchronizes jasmonate-mediated defense with insect circadian behavior.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 109, 4674-4677 (2012).</li><li>Kim, J. H., Lee, B. W., Schroeder, F. C., Jander, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+indole+glucosinolate+breakdown+products+with+antifeedant+effects+on+Myzus+persicae+(green+peach+aphid).">Identification of indole glucosinolate breakdown products with antifeedant effects on Myzus persicae (green peach aphid).</a> The Plant journal : for cell and molecular biology. 54, 1015-1026 (2008).</li><li>Adio, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biosynthesis+and+defensive+function+of+Ndelta-acetylornithine,+a+jasmonate-induced+Arabidopsis+metabolite.">Biosynthesis and defensive function of Ndelta-acetylornithine, a jasmonate-induced Arabidopsis metabolite.</a> Plant Cell. 23, 3303-3318 (2011).</li><li>Li, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+tomato+homolog+of+CORONATINE-INSENSITIVE1+is+required+for+the+maternal+control+of+seed+maturation,+jasmonate-signaled+defense+responses,+and+glandular+trichome+development.">The tomato homolog of CORONATINE-INSENSITIVE1 is required for the maternal control of seed maturation, jasmonate-signaled defense responses, and glandular trichome development.</a> Plant Cell. 16, 126-143 (2004).</li><li>Kant, M. R., Ament, K., Sabelis, M. W., Haring, M. A., Schuurink, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+timing+of+spider+mite-induced+direct+and+indirect+defenses+in+tomato+plants.">Differential timing of spider mite-induced direct and indirect defenses in tomato plants.</a> Plant Physiol. 135, 483-495 (2004).</li><li>Schneider, C. A., Rasband, W. S., Eliceiri, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NIH+Image+to+ImageJ:+25+years+of+image+analysis.">NIH Image to ImageJ: 25 years of image analysis.</a> Nat Methods. 9, 671-675 (2012).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

هذا الفيديو يوضح البروتوكولات المستخدمة لعزل وتصيب النباتات مع أعداد كبيرة من العث الإناث البالغات. على الرغم من أننا قدم هذا البروتوكول باستخدام A. thaliana، ويمكن استخدامها لأي النبات العنكبوت نظام التفاعل سوس ويجري حاليا تطبيقه بنجاح أيضا على نباتات الطماطم وال...

تفاعل النبات من الآفات هو موضوع من الأهمية العلمية والاقتصادية كبيرة. وقد درس تاريخيا باستخدام كل من نباتات المحاصيل (مثل الطماطم) ومحطة نموذجية، A. thaliana. في كلتا الحالتين، يمكن قياس قابلية النبات لعاشب إما مباشرة من خلال تقييم النمط الظاهري المصنع بعد هجوم عاشب أو بشكل غير مباشر من خلال تقييم الأداء الآفات. واستخدمت القياسات المباشرة من قابلية النبات سابقا لعدد من أنواع الآفات الحشرية باستخدام مجموعة من الأساليب. على سبيل المثال، يقاس الحيوانات العاشبة من اليرقات lepidopteran بمثابة تقدير جزء من الأنسجة النباتية التي يستهلكها إما Plutella xylostella (الماسي العثة) أو Trichoplusia ني (الملفوف وبير) بالعين المجردة بمساعدة شبكة 12. أيضا، هناك طرق التي تستخدم التصوير الرقمي من الأضرار اللاحقة رقة مع تحليل الصور الكمي. واستخدمت هذه الأساليب فيدراسات A. التفاعل مع thaliana Frankliniella occidentalis (التربس زهرة الغربية) 13، Scaptomyza الضبعة (ذبابة الفاكهة أوراق التعدين) 14، وT. ني 15. وتستخدم على نطاق واسع من القياسات غير المباشرة قابلية النبات في دراسات التفاعل النبات من الآفات. على سبيل المثال، حساسية A. ويتم تقييم thaliana إلى الخوخ المن Myzus بيرسيكا الحيوانات العشبية عادة من خلال تحليل خصوبة الآفات وصفا مورفولوجيا الجسيمة لمصنع بعد التفاعل 16،17. آخر مؤشر غير مباشر نموذجية من A. thaliana التعرض للآفة هو تقييم الوزن الجاف أو الرطب من النبات. يتم استخدام هذه المعلمة عادة لوصف الحيوانات العاشبة من lepidoterans، مثل Pieris rapae (بيضاء صغيرة)، P. xylostella، أو T. ني في اليرقات أو مراحل العذراء 15،17. العناكب هي الخلية محتوى الحديدeders. ومن المسلم به الضرر الناجم عن سوس كمجموعة من البقع داء الاخضرار التي تتراوح في اللون من الأبيض إلى الأخضر الشاحب. قابلية مجموعة مصنع لسوس العنكبوت الحيوانات العاشبة تم تقييم سابقا إما بشكل غير مباشر من خلال تحليل أداء سوس العنكبوت أيام آخر الإصابة، 18،19، أو مباشرة باستخدام التشكل الإجمالي من النباتات أسابيع بعد الإصابة 18 أو باستخدام التصوير الرقمي من الأوراق المكشوفة لالعث لعدة أيام لاحقة مع تحليل الصور الآلي 19. ويجري تطوير هذه الأساليب وتستخدم لدراسات التفاعلات بين نباتات الطماطم وT. urticae، والتي تستخدم عادة أعداد صغيرة من العناكب (5-15 في العلاج) التي تم جمعها من السكان سوس المختلطة ووضعت على سطح الورقة باستخدام فرشاة ناعمة. ومع ذلك، وهذه الأساليب ليست مناسبة للدراسات التي يحتاج فيها أعداد أكبر من العث ليتم تطبيقها. بالإضافة إلى ذلك، في حين أن معالجة مباشرة لأوراق الصور في برنامج تحليل الصورمثل أدوبي فوتوشوب (سان خوسيه، كاليفورنيا) أو يماغيج 20 يمكن استخدامها لتحليل الضرر الطماطم، وهذه البروتوكولات تحتاج إلى تعديل من أجل تطبيقها على الأوراق التي لديها أكبر انعكاسية السطح أو ملونة خفيفة ولها التريكوم واضح للغاية ( على سبيل المثال، A. thaliana) التي تتداخل مع اختيار الآلية من البقع التي تميز داء الاخضرار الضرر النبات. وعلاوة على ذلك، فإن المرحلة التنموية من العناكب التي يمكن استخدامها بسهولة مع الطرق السابقة يقتصر على الإناث الأكثر انتشارا والتي يسهل التعرف عليها الكبار ويحول دون الاستفادة من مراحل النمو الأخرى. الخطوة الحاسمة الأولى نحو تحليل الإنتاجية العالية من النبات العنكبوت سوس التفاعل هو وضع بروتوكولات استنساخه وبسيطة وقوية لتحدي النباتات مع العناكب وموثوق تقييم نتائج التفاعل. في هذا الفيديو، وسيلة فعالة لجمع سريعة وسهلة من الأسطوانات الكبيرةالبر من العث الإناث الكبار، موصوفة تطبيقها على المضيف محطة تجريبية، وتقييم الأضرار النباتية بسبب التغذية العنكبوت سوس. بروتوكول قدمت يتيح جمع سريعة وفعالة من مئات الأفراد في أي مرحلة التطوير (بيض، يرقات، الحوريات، الذكور البالغين، وإناث) التي يمكن استخدامها لتطبيق التجارب اللاحقة. بالإضافة إلى ذلك، هذه البروتوكولات يمكن تطبيقها على أي نبات المضيف سوس، ولكن أثبتت تحديدا في حالة A. thaliana.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1157">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td colspan="4" height="21" style="height:21px;width:231px;">Plant material:</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:231px;">California red kidney bean</td>
			<td style="width:275px;">Stokes, Thorold, ON, Canada</td>
			<td style="width:125px;">NA</td>
			<td style="width:527px;">Two week old, well infested with spider mites two or three days before use. Other cultivars of Phaseolus vulgaris can be used.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td colspan="4" height="21" style="height:21px;width:231px;">Chemicals:</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Tween 20</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:125px;">P9416</td>
			<td style="width:527px;">1% stock solution is prepared to simplify aliquoting</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:231px;">Tap water</td>
			<td>Any supplier</td>
			<td style="width:125px;">NA</td>
			<td style="width:527px;">At room temperature, heat- and cold-shock affect mite survival rate and peformance</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td colspan="4" height="21" style="height:21px;width:231px;">Other materials and equipment:</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Plastic tray</td>
			<td>Any supplier</td>
			<td style="width:125px;">NA</td>
			<td style="width:527px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Set of scissors</td>
			<td>Any supplier</td>
			<td style="width:125px;">NA</td>
			<td style="width:527px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">2 L beakers</td>
			<td>Any supplier</td>
			<td style="width:125px;">NA</td>
			<td style="width:527px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Paper towels</td>
			<td>Any supplier</td>
			<td style="width:125px;">NA</td>
			<td style="width:527px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Sets of sieves</td>
			<td style="width:275px;">Manufactured in house</td>
			<td style="width:125px;">NA</td>
			<td style="width:527px;">Detailed instructions are available</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Thin brush</td>
			<td>Any supplier</td>
			<td style="width:125px;">NA</td>
			<td style="width:527px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Pipettes</td>
			<td>Any supplier</td>
			<td style="width:125px;">NA</td>
			<td style="width:527px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Pipette tips</td>
			<td>Any supplier</td>
			<td style="width:125px;">NA</td>
			<td style="width:527px;">0.2 and 1 mL</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:231px;">1.5 mL centrifuge tubes</td>
			<td>Any supplier</td>
			<td style="width:125px;">NA</td>
			<td style="width:527px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:231px;">Air pump</td>
			<td>Any supplier</td>
			<td style="width:125px;">NA</td>
			<td style="width:527px;">Aquarium type pump with inverted air flow. Vacuum line can be used. Required pressure drop is approx. 2-4 psi</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Stereoscope</td>
			<td>Any supplier</td>
			<td style="width:125px;">NA</td>
			<td style="width:527px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:231px;">Scanner</td>
			<td>Epson</td>
			<td style="width:125px;">V30</td>
			<td style="width:527px;">Any flatbed scanner allowing necessary degree of control over scan quality. We use Epson V30 for our experiments.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:231px;">Computer</td>
			<td>Any supplier</td>
			<td style="width:125px;">NA</td>
			<td style="width:527px;">Windows or OS X PC which is compatible with scanner hardware and Adobe Photoshop software.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Adobe Photoshop software</td>
			<td style="width:275px;">Adobe Systems Inc., San Jose, CA, USA</td>
			<td style="width:125px;">various</td>
			<td style="width:527px;">Any version with Histogram tool included.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

application of two-spotted spider mite tetranychus urticae for plant-pest interaction studies

سوس العنكبوت رصدت اثنين، الخاشية urticae، هو في كل مكان عاشب المفصلية قارت التي تتغذى على مجموعة واسعة بشكل ملحوظ من الأنواع، مع أكثر من 150 من القيمة الاقتصادية. بل هو آفة كبرى من المحاصيل المسببة للاحتباس الحراري، وخاصة في الباذنجانية وقرعية (على سبيل المثال، الطماطم، الباذنجان، الفلفل، الخيار، الكوسة) ونباتات الزينة الدفيئة (على سبيل المثال، الورود، والأقحوان، والقرنفل) والمحاصيل الحقلية السنوية (مثل الذرة والقطن و فول الصويا، وبنجر السكر)، وفي الثقافات المعمرة (البرسيم، والفراولة، العنب، الحمضيات، والخوخ) 1،2. بالإضافة إلى polyphagy المدقع الذي يجعل من الآفات الزراعية الهامة، T. urticae لديه ميل لتطوير مقاومة لمجموعة واسعة من المبيدات الحشرية ومبيدات قراد التي تستخدم لسيطرتها 3-7. T. urticae هو كائن التجريبية ممتازة، كما أن لديها دورة الحياة السريعة (7 أيام في 27 درجة مئوية)ويمكن الحفاظ على كثافة عالية بسهولة في المختبر. وقد تم تطوير طرق لفحص التعبير الجيني (بما في ذلك الموقع التهجين وتلوين الأجسام المضادة في) وتعطيل التعبير عن جينات العنكبوت سوس الذاتية باستخدام تدخل الحمض النووي الريبي 8-10. في الآونة الأخيرة، وتسلسل الجينوم كله من T. وقد تم الإبلاغ عن urticae، وخلق فرصة لتطوير هذا النبات للآفات باعتبارها كائن النموذج مع الموارد الجيني يعادل موجودة بالفعل في بعض النباتات مضيفه (thaliana نبات الأرابيدوبسيس والطماطم مغد قوطة) 11. معا، يمكن لهذه الكائنات نموذج تقديم نظرة ثاقبة الأسس الجزيئية للتفاعلات النباتات من الآفات. هنا، يتم وصف وسيلة فعالة لجمع سريعة وسهلة لعدد كبير من العث الإناث الكبار، تطبيقها على المضيف محطة تجريبية، وتقييم الأضرار النباتية بسبب التغذية العنكبوت سوس. بروتوكول قدمت ENABLES جمع سريعة وفعالة من مئات الأفراد في أي مرحلة التطوير (بيض، يرقات، الحوريات، الذكور البالغين، وإناث) التي يمكن استخدامها لتطبيق التجارب اللاحقة.

باستخدام 20-30 نباتات الفول المصابة، يمكن للمرء أن جمع حوالي 2،000 العث الكبار الإناث باستخدام المناخل. الوقت اللازم لتصيب النباتات مع 10 20 العث في النبات ما يقرب من 15 دقيقة في حالة استخدام فرشاة لنقل العث. وتظهر مجموعات من أساليب جمع والتطبيق في الشكل 2. <p class="jov...

Watch this Scientific Journal Video about Application of Two-spotted Spider Mite Tetranychus urticae for Plant-pest Interaction Studies at JoVE.com

Application of Two-spotted Spider Mite Tetranychus urticae for Plant-pest Interaction Studies

بروتوكولات لإعداد كفاءة عينات متجانسة من العناكب، الإصابة من النباتات التجريبية، وتقييم الأضرار النبات، كما هو مطلوب للدراسات التفاعل النبات للآفات وضعت.

تطبيق رصدت اثنين من العنكبوت سوس<em&gt; الخاشية urticae</em&gt; للدراسات التفاعل النبات من الآفات

The two-spotted spider mite, Tetranychus urticae, is a ubiquitous polyphagous arthropod herbivore that feeds on a remarkably broad array of species, with ...

application-two-spotted-spider-mite-tetranychus-urticae-for-plant

Research

JoVE Journal

Environment

Application of Two-spotted Spider Mite Tetranychus urticae for Plant-pest Interaction Studies

17.6K Views.  The University of Western Ontario.  بروتوكولات لإعداد كفاءة عينات متجانسة من العناكب، الإصابة من النباتات التجريبية، وتقييم الأضرار النبات، كما هو مطلوب للدراسات التفاعل النبات للآفات وضعت. 

Video: Application of Two-spotted Spider Mite Tetranychus urticae for Plant-pest Interaction Studies

Physical, Chemical and Biological Characterization of Six Biochars Produced for the Remediation of Contaminated Sites

The physical and chemical properties of biochar vary based on feedstock sources and production conditions, making it possible to engineer biochars with specific functions (e.g. carbon sequestration, soil quality improvements, or contaminant sorption). In 2013, the International Biochar Initiative (IBI) made publically available their Standardized Product Definition and Product Testing Guidelines (Version 1.1) which set standards for physical and chemical characteristics for biochar. Six biochars made from three different feedstocks and at two temperatures were analyzed for characteristics related to their use as a soil amendment. The protocol describes analyses of the feedstocks and biochars and includes: cation exchange capacity (CEC), specific surface area (SSA), organic carbon (OC) and moisture percentage, pH, particle size distribution, and proximate and ultimate analysis. Also described in the protocol are the analyses of the feedstocks and biochars for contaminants including polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs), polychlorinated biphenyls (PCBs), metals and mercury as well as nutrients (phosphorous, nitrite and nitrate and ammonium as nitrogen). The protocol also includes the biological testing procedures, earthworm avoidance and germination assays. Based on the quality assurance / quality control (QA/QC) results of blanks, duplicates, standards and reference materials, all methods were determined adequate for use with biochar and feedstock materials. All biochars and feedstocks were well within the criterion set by the IBI and there were little differences among biochars, except in the case of the biochar produced from construction waste materials. This biochar (referred to as Old biochar) was determined to have elevated levels of arsenic, chromium, copper, and lead, and failed the earthworm avoidance and germination assays. Based on these results, Old biochar would not be appropriate for use as a soil amendment for carbon sequestration, substrate quality improvements or remediation.

Biochar is a carbon-rich material used as a soil amendment with the ability to sustainably sequester carbon, improve substrate quality and sorb contaminants. This protocol describes the 17 analytical methods used for the characterization of biochar, which is required prior to large scale implementation of these amendments in the environment.

الفيزيائية والكيميائية والبيولوجية توصيف ستة Biochars إنتاج لمعالجة المواقع الملوثة

The physical and chemical properties of biochar vary based on feedstock sources and production conditions, making it possible to engineer biochars with ...

Characterization and Application of Passive Samplers for Monitoring of Pesticides in Water

Five different water passive samplers were calibrated under laboratory conditions for measurement of 124 legacy and current used pesticides. This study provides a protocol for the passive sampler preparation, calibration, extraction method and instrumental analysis. Sampling rates (RS) and passive sampler-water partition coefficients (KPW) were calculated for silicone rubber, polar organic chemical integrative sampler POCIS-A, POCIS-B, SDB-RPS and C18 disk. The uptake of the selected compounds depended on their physicochemical properties, i.e., silicone rubber showed a better uptake for more hydrophobic compounds (log octanol-water partition coefficient (KOW) &#62; 5.3), whereas POCIS-A, POCIS-B and SDB-RPS disk were more suitable for hydrophilic compounds (log KOW &#60; 0.70).

A protocol about the characterization and application of five different passive sampling devices is presented.

توصيف وتطبيق العينات سلبية لمراقبة المبيدات في المياه

Five different water passive samplers were calibrated under laboratory conditions for measurement of 124 legacy and current used pesticides. This study ...

Remote Sensing Evaluation of Two-spotted Spider Mite Damage on Greenhouse Cotton

The objective of this study was to evaluate a ground-based multispectral optical sensor as a remote sensing tool to assess foliar damage caused by the two-spotted spider mite (TSSM), Tetranychus urticae Koch, on greenhouse grown cotton. TSSM is a polyphagous pest which occurs on a variety of field and horticultural crops. It often becomes an early season pest of cotton in damaging proportions as opposed to being a late season innocuous pest in the mid-southern United States. Evaluation of acaricides is important for maintaining the efficacy of and preventing resistance to the currently available arsenal of chemicals and newly developed control agents. Enumeration of spider mites for efficacy evaluations is laborious and time consuming. Therefore, subjective visual damage rating is commonly used to assess density of spider mites. The NDVI (Normalized Difference Vegetation Index) is the most widely used statistic to describe the spectral reflectance characteristics of vegetation canopy to assess plant stress and health consequent to spider mite infestations. Results demonstrated that a multispectral optical sensor is an effective tool in distinguishing varying levels of infestation caused by T. urticae on early season cotton. This remote sensing technique may be used in lieu of a visual rating to evaluate insecticide treatments.

This manuscript describes a multispectral optical sensor that effectively detected damage to early season cotton artificially infested with varying densities of the two-spotted spider mite populations.

تقييم استشعار عن بعد رصدت اثنين من الأضرار العنكبوت العثة على القطن الاحتباس الحراري

The objective of this study was to evaluate a ground-based multispectral optical sensor as a remote sensing tool to assess foliar damage caused by the ...

Modification and Application of a Leaf Blower-vac for Field Sampling of Arthropods

Rice fields host a large diversity of arthropods, but investigating their population dynamics and interactions is challenging. Here we describe the modification and application of a leaf blower-vac for suction sampling of arthropod populations in rice. When used in combination with an enclosure, application of this sampling device provides absolute estimates of the populations of arthropods as numbers per standardized sampling area. The sampling efficiency depends critically on the sampling duration. In a mature rice crop, a two-minute sampling in an enclosure of 0.13 m2 yields more than 90% of the arthropod population. The device also allows sampling of arthropods dwelling on the water surface or the soil in rice paddies, but it is not suitable for sampling fast flying insects, such as predatory Odonata or larger hymenopterous parasitoids. The modified blower-vac is simple to construct, and cheaper and easier to handle than traditional suction sampling devices, such as D-vac. The low cost makes the modified blower-vac also accessible to researchers in developing countries.

Assessment of arthropod abundance in crops is critical for investigating population dynamics and species interactions. Here we describe the modification and application of a leaf blower-vac for suction sampling of arthropods in rice.

تعديل وتطبيق ورقة المنفاخ-VAC لأخذ العينات مجال المفصليات

Rice fields host a large diversity of arthropods, but investigating their population dynamics and interactions is challenging. Here we describe the ...

Use of a Filter Cartridge for Filtration of Water Samples and Extraction of Environmental DNA

Recent studies demonstrated the use of environmental DNA (eDNA) from fishes to be appropriate as a non-invasive monitoring tool. Most of these studies employed disk fiber filters to collect eDNA from water samples, although a number of microbial studies in aquatic environments have employed filter cartridges, because the cartridge has the advantage of accommodating large water volumes and of overall ease of use. Here we provide a protocol for filtration of water samples using the filter cartridge and extraction of eDNA from the filter without having to cut open the housing. The main portions of this protocol consists of 1) filtration of water samples (water volumes &#8804;4 L or &gt;4 L); (2) extraction of DNA on the filter using a roller shaker placed in a preheated incubator; and (3) purification of DNA using a commercial kit. With the use of this and previously-used protocols, we perform metabarcoding analysis of eDNA taken from a huge aquarium tank (7,500 m3) with known species composition, and show the number of detected species per library from the two protocols as the representative results. This protocol has been developed for metabarcoding eDNA from fishes, but is also applicable to eDNA from other organisms.

We describe a protocol for filtration of water samples with a filter cartridge and extraction of environmental DNA (eDNA) without having to cut open the housing to remove the filter. This protocol is developed for metabarcoding eDNA from fishes, but is also applicable to eDNA from other organisms.

استخدام خرطوشة مرشح للترشيح المياه العينات واستخلاص الحمض النووي البيئي

Recent studies demonstrated the use of environmental DNA (eDNA) from fishes to be appropriate as a non-invasive monitoring tool. Most of these studies ...

Vegetated Treatment Systems for Removing Contaminants Associated with Surface Water Toxicity in Agriculture and Urban Runoff

Urban stormwater and agriculture irrigation runoff contain a complex mixture of contaminants that are often toxic to adjacent receiving waters. Runoff may be treated with simple systems designed to promote sorption of contaminants to vegetation and soils and promote infiltration. Two example systems are described: a bioswale treatment system for urban stormwater treatment, and a vegetated drainage ditch for treating agriculture irrigation runoff. Both have similar attributes that reduce contaminant loading in runoff: vegetation that results in sorption of the contaminants to the soil and plant surfaces, and water infiltration. These systems may also include the integration of granulated activated carbon as a polishing step to remove residual contaminants. Implementation of these systems in agriculture and urban watersheds requires system monitoring to verify treatment efficacy. This includes chemical monitoring for specific contaminants responsible for toxicity. The current paper emphasizes monitoring of current use pesticides since these are responsible for surface water toxicity to aquatic invertebrates.

This article summarizes the design attributes and the effectiveness of treatment systems that treat urban stormwater and agriculture irrigation runoff to remove pesticides and other contaminants associated with aquatic toxicity.

نظم معالجة الخضروات لإزالة الملوثات المرتبطة بالسمية السطحية للمياه في الزراعة والجريان السطحي في المناطق الحضرية

Urban stormwater and agriculture irrigation runoff contain a complex mixture of contaminants that are often toxic to adjacent receiving waters. Runoff may ...

The Plant Infection Test: Spray and Wound-Mediated Inoculation with the Plant Pathogen Magnaporthe Grisea

Plants possess a powerful system to defend themselves against potential threats by pathogenic fungi. For agriculturally important plants, however, current measures to combat such pathogens have proved too conservative and, thus, not sufficiently effective, and they can potentially pose environmental risks. Therefore, it is extremely necessary to identify host-resistance factors to assist in controlling plant diseases naturally through the identification of resistant germplasm, the isolation and characterization of resistance genes, and the molecular breeding of resistant cultivars. In this regard, there is need to establish an accurate, rapid, and large-scale inoculation method to breed and develop plant resistance genes. The rice blast fungal pathogen Magnaporthe grisea causes severe disease symptoms and yield losses. Recently, M. grisea has emerged as a model organism for studying the mechanisms of plant-fungal pathogen interactions. Hence, we report the development of a plant virulence test method that is specific for M. grisea. This method provides for both spray inoculation with a conidial suspension and wounding inoculation with mycelium cubes or droplets of conidial suspension. The key step of the wounding inoculation method for detached rice leaves is to make wounds on plant leaves, which avoids any interference caused by host penetration resistance. This spray/wounding protocol contributes to the rapid, accurate, and large-scale screening of the pathotypes of M. grisea isolates. This integrated and systematic plant infection method will serve as an excellent starting point for gaining a broad perspective of issues in plant pathology.

The Plant Infection Test: Spray and Wound-Mediated Inoculation with the Plant Pathogen Magnaporthe Grisea

Here, we present a protocol to test plant virulence with the plant pathogen Magnaporthe grisea. This report will contribute to the large-scale screening of the pathotypes of fungi isolates and serve as an excellent starting point for understanding the resistant mechanisms of plants during molecular breeding.

اختبار الإصابة بالنبات: الرش والجرح بوساطة التلقيح بمسببات الأمراض النباتية رمادية ماجنابورثي

Plants possess a powerful system to defend themselves against potential threats by pathogenic fungi. For agriculturally important plants, however, current ...

Rearing and Long-Term Maintenance of Eristalis tenax Hoverflies for Research Studies

With an estimated 6000 species worldwide, hoverflies are ecologically important as alternative pollinators to domesticated honeybees. However, they are also a useful scientific model to study motion vision and flight dynamics in a controlled laboratory setting. As the larvae develop in organically polluted water, they are useful models for investigating investment in microbial immunity. While large scale commercial breeding for agriculture already occurs, there are no standardized protocols for maintaining captive populations for scientific studies. This is important as commercial captive breeding programs focusing on mass output during peak pollination periods may fail to provide a population that is consistent, stable and robust throughout the year, as is often needed for other research purposes. Therefore, a method to establish, maintain and refresh a captive research population is required. Here, we describe the utilization of an artificial hibernation cycle, in addition to the nutritional and housing requirements, for long term maintenance of Eristalis tenax. Using these methods, we have significantly increased the health and longevity of captive populations of E. tenax compared to previous reports. We furthermore discuss small scale rearing methods and options for optimizing yields and manipulating population demographics.

Rearing and Long-Term Maintenance of Eristalis tenax Hoverflies for Research Studies

The overall goal of these procedures is to establish, maintain and refresh a captive population of Eristalis tenax in a research setting.

تربية والصيانة الطويلة الأجل من هوفيرفليس تيناكس اريستاليس "البحوث والدراسات"

With an estimated 6000 species worldwide, hoverflies are ecologically important as alternative pollinators to domesticated honeybees. However, they are ...

Experimental Protocol for Examining Behavioral Response Profiles in Larval Fish: Application to the Neuro-stimulant Caffeine

Fish models and behaviors are increasingly used in the biomedical sciences; however, fish have long been the subject of ecological, physiological and toxicological studies. Using automated digital tracking platforms, recent efforts in neuropharmacology are leveraging larval fish locomotor behaviors to identify potential therapeutic targets for novel small molecules. Similar to these efforts, research in the environmental sciences and comparative pharmacology and toxicology is examining various behaviors of fish models as diagnostic tools in tiered evaluation of contaminants and real-time monitoring of surface waters for contaminant threats. Whereas the zebrafish is a popular larval fish model in the biomedical sciences, the fathead minnow is a common larval fish model in ecotoxicology. Unfortunately, fathead minnow larvae have received considerably less attention in behavioral studies. Here, we develop and demonstrate a behavioral profile protocol using caffeine as a model neurostimulant. Though photomotor responses of fathead minnows were occasionally affected by caffeine, zebrafish&#160;were markedly more sensitive for photomotor and locomotor endpoints, which responded at environmentally relevant levels. Future studies are needed to understand comparative behavioral sensitivity differences among fish with age and time of day, and to determine whether similar behavioral effects would occur in nature and be indicative of adverse outcomes at the individual or population levels of biological organization.

Here, we present a protocol to examine larval zebrafish and fathead minnow locomotor activities and photomotor responses (PMR) using an automated tracking software. When incorporated in common toxicology bioassays, analyses of these behaviors provide a diagnostic tool to examine chemical bioactivity. This protocol is described using caffeine, a model neurostimulant.

بروتوكول تجريبي لفحص ملفات تعريف الاستجابة السلوكية في الأسماك اليرقات: تطبيق على الكافيين منشط للأعصاب

Fish models and behaviors are increasingly used in the biomedical sciences; however, fish have long been the subject of ecological, physiological and ...

Generating Homo- and Heterografts Between Watermelon and Bottle Gourd for the Study of Cold-responsive MicroRNAs

MicroRNAs (miRNAs) are endogenous small non-coding RNAs of about 20 - 24 nt, known to play important roles in plant development and adaptation. There is an accumulating evidence showing that the expressions of certain miRNAs are altered when grafting, an agricultural practice commonly used by farmers to improve crop tolerance to biotic and abiotic stresses. Bottle gourd is an inherently climate-resilient crop compared to many other major cucurbits, including watermelon, rendering it one of the most widely used rootstocks for the latter. The recent advancement of high-throughput sequencing technologies has provided great opportunities to investigate cold-responsive miRNAs and their contributions to heterograft advantages; yet, adequate experimental procedures are a prerequisite for this purpose. Here, we present a detailed protocol for efficiently generating homo- and heterografts between the cold-susceptible watermelon and the cold-tolerant bottle gourd, in addition to methods of tissue sampling, data generation, and data analysis. The presented methods are also useful for other plant-grafting systems, to interrogate miRNA regulations under various environmental stresses, such as heat, drought, and salinity.

Here we present a detailed protocol for efficiently making homo- and heterografts between watermelon and bottle gourd, in addition to methods of tissue sampling, data generation, and data analysis, for the investigation of cold-responsive microRNAs.

توليد هومو-وهيتيروجرافتس بين البطيخ والقرع زجاجة لدراسة MicroRNAs المراعية للبرد

MicroRNAs (miRNAs) are endogenous small non-coding RNAs of about 20 - 24 nt, known to play important roles in plant development and adaptation. There is ...