وقد تم تمويل هذا العمل في جزء من جائزة تعليم العلوم الشراكة (المصلحة) R25 RR025066 بين 2008-2012 من المعاهد الوطنية للصحة والمركز الوطني للبحوث الموارد. شكرا للزملاء في مجال طعم للنقاش العميق للأدب، نتائجنا وردود الفعل على استخدام النيابة العامة في مختلف السيناريوهات المختبر: جون هايز، سو كولدويل، بول بريسلين، كارلا شوبرت. شكرا لك أيضا على القيادة في متحف دنفر للطبيعة والعلوم والموظفين في دعم العلم مواطن في علم الوراثة من طعم مختبر في القطب الصحة. أخيرا، شكرا لكم جميعا لدينا المتطوعين العلماء المواطن على وقتهم والتفاني في تطوير واستخدام هذا البروتوكول، بما في ذلك: الدب أراغون، مايك آرتشر، سو أتامان، مايكل باجلي، A&#39;nette برتراند، ديانا بويلز، ويندي السرية، ساشا دولي ، باتي Drever، جيسيكا ERN، لورا Harmacek، شون هيبارد، جويس Hutchens، مات جو، ليتا كين، ويليم Leenhouts، Stephania لوkjan، أشلي ماثيوز، مايك ماوزر، ستيفاني ميلر، هالى مورغان رودريجيز، غريفين Scherma، أليسا Schickedanz، تيري سيمون، ديلان توماس، رودي توريس، تايلر ويلسون، ديان Woltkamp.

<ol>
	<li>Miller, I. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+taste+bud+density+across+adult+age+groups.">Human taste bud density across adult age groups.</a> J Gerontol. 43 (1), B26-B30 (1988).</li><li>Miller, I. J., Reedy, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+fungiform+papillae+and+taste+pores+in+living+human+subjects.">Quantification of fungiform papillae and taste pores in living human subjects.</a> Chem Senses. 15 (3), 281-294 (1990).</li><li>Miller, I. J., Reedy, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variations+in+Human+Taste+Bud+Density+and+Taste+Intensity+Perception.">Variations in Human Taste Bud Density and Taste Intensity Perception.</a> Physiol Behav. 47 (6), 1213-1219 (1990).</li><li>Shahbake, M., Hutchinson, I., Laing, D. G., Jinks, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+quantitative+assessment+of+fungiform+papillae+density+in+the+human+tongue.">Rapid quantitative assessment of fungiform papillae density in the human tongue.</a> Brain Res. 1052 (2), 196-201 (2005).</li><li>Bartoshuk, L. M., Duffy, V. B., Miller, I. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PTC/PROP+tasting:+anatomy,+psychophysics,+and+sex+effects.">PTC/PROP tasting: anatomy, psychophysics, and sex effects.</a> Physiol Behav. 56 (6), 1165-1171 (1994).</li><li>Essick, G. K., Chopra, A., Guest, S., McGlone, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lingual+tactile+acuity,+taste+perception,+and+the+density+and+diameter+of+fungiform+papillae+in+female+subjects.">Lingual tactile acuity, taste perception, and the density and diameter of fungiform papillae in female subjects.</a> Physiol Behav. 80 (2-3), 289-302 (2003).</li><li>Delwiche, J. F., Buletic, Z., Breslin, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationship+of+papillae+number+to+bitter+intensity+of+quinine+and+PROP+within+and+between+individuals.">Relationship of papillae number to bitter intensity of quinine and PROP within and between individuals.</a> Physiol Behav. 74 (3), 329-337 (2001).</li><li>Kim, U. K., Jorgenson, E., Coon, H., Leppert, M., Risch, N., Drayna, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Positional+cloning+of+the+human+quantitative+trait+locus+underlying+taste+sensitivity+to+phenylthiocarbamide.">Positional cloning of the human quantitative trait locus underlying taste sensitivity to phenylthiocarbamide.</a> Science. 299 (5610), 1221-1225 (2003).</li><li>Hayes, J. E., Bartoshuk, L. M., Kidd, J. R., Duffy, V. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Supertasting+and+PROP+bitterness+depends+on+more+than+the+TAS2R38+gene.">Supertasting and PROP bitterness depends on more than the TAS2R38 gene.</a> Chem Senses. 33 (3), 255-265 (2008).</li><li>Garneau, N. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Crowdsourcing+taste+research:+genetic+and+phenotypic+predictors+of+bitter+taste+perception+as+a+model.">Crowdsourcing taste research: genetic and phenotypic predictors of bitter taste perception as a model.</a> Front Integr Neurosci. 8 (33), (2014).</li><li>Fox, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+relationship+between+chemical+constitution+and+taste.">The relationship between chemical constitution and taste.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 18 (1), 115-120 (1932).</li><li>Tepper, B. J., Nurse, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fat+Perception+is+related+to+PROP+taster+status.">Fat Perception is related to PROP taster status.</a> Physiol Behav. 61 (6), 949-954 (1997).</li><li>Duffy, V. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bitter+receptor+gene+(TAS2R38.),+6-n.-Propylthiouracil+(PROP)+bitterness+and+alcohol+intake.">Bitter receptor gene (TAS2R38.), 6-n.-Propylthiouracil (PROP) bitterness and alcohol intake.</a> Alcohol Clin Exp Res. 28 (11), 1629-1637 (2004).</li><li>Yackinous, C., Guinard, J. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relation+between+PROP+taster+status+and+fat+perception,+touch,+and+olfaction.">Relation between PROP taster status and fat perception, touch, and olfaction.</a> Physiol Behav. 72 (3), 427-437 (2001).</li><li>Fischer, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Factors+related+to+fungiform+papillae+density:+The+Beaver+Dam+Offspring+Study.">Factors related to fungiform papillae density: The Beaver Dam Offspring Study.</a> Chem Senses. 38 (8), 669-677 (2013).</li><li>Feeney, E. L., Hayes, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regional+differences+in+suprathreshold+intensity+for+bitter+and+umami+stimuli.">Regional differences in suprathreshold intensity for bitter and umami stimuli.</a> Chemosens Percept. 7 (3-4), 147-157 (2014).</li><li>Saito, T., Narita, N., Yamada, T., Manabe, Y., Ito, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphology+of+human+fungiform+papillae+after+severing+chorda+tympani+nerve.">Morphology of human fungiform papillae after severing chorda tympani nerve.</a> Ann Otol Rhinol Laryngol. 120 (5), 300-306 (2011).</li><li>Miller, I. J., Doty, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anatomy+of+the+peripheral+taste+system.">Anatomy of the peripheral taste system.</a> Handbook of Olfaction and Gustation. , 521-547 (1995).</li><li>Cheng, L. H. H., Robinson, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+distribution+of+fungiform+papillae+and+taste+buds+on+the+human+tongue).">The distribution of fungiform papillae and taste buds on the human tongue).</a> Arch Oral Biol. 36 (8), 583-539 (1991).</li><li>Cruickshanks, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measuring+taste+impairment+in+epidemiologic+studies-The+Beaver+Dam+Offspring+Study.">Measuring taste impairment in epidemiologic studies-The Beaver Dam Offspring Study.</a> Ann N Y Acad Sci. 1170, 543-552 (2009).</li><li>McNamara, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetics+of+Taste+summative+evaluation+report+prepared+for+Denver+Museum+of+Nature+&amp;+Science.">Genetics of Taste summative evaluation report prepared for Denver Museum of Nature &amp; Science.</a> Independent Evaluator. , (2012).</li><li>Arvidson, K., Friberg, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+taste:+Response+and+taste+bud+number+in+fungiform+papillae.">Human taste: Response and taste bud number in fungiform papillae.</a> Science. 209 (4458), 807-808 (1980).</li></ol>

تعلن الكتاب أنه ليس لديهم المصالح المالية المتنافسة.

عن طريق النيابة العامة، والتباين داخل صورة التهم عبر الهدافين مستقل وانخفاض في عدد ضمن هداف بشكل ملحوظ. في حين أن هذا الأسلوب يجعل تحليل كثافة FP البصرية دون videomicroscopy أقل شخصي، تجدر الإشارة إلى أن هذا الأسلوب فقط عشرات FP. DPP لا يمكن أن تضمن أن الهياكل تصنف على أنها FP لها طعم المسام وبالتالي فهي الحليمات الذوقية ولا أن التهم هي تعكس الذوق الحقيقي كثافة برعم 20،23. وطبيعة هذا الأسلوب هو أنه يضع الموثوقية من خلال الاتساق والدقة؛ ومع ذلك، فإنه يمكن أن يتحامل النتائج في اتجاه ثابت. لاختبار دقة بالنسبة لأساليب أخرى باستخدام المقياس الحقيقي للطعم كثافة برعم (على سبيل المثال، videomicroscopy) أن تتجاوز نطاق هذه study.However، من خلال تحديد خصائص مورفولوجية FP أكثر صرامة وإنشاء مفتاح بين شيئين، ويتناول هذا الأسلوب ميلر &amp; تهمة الريدي إلى الحقل الذي أكثر توصيف FPيجب القيام به من أجل الحصول على توافق في الآراء بشأن التشكل والكمي 2. بالإضافة إلى ذلك، فإنها أشارت إلى أن هذا التوصيف قد &quot;يوضح بعض الاختلافات بين الموضوعات وشرح بعض النتائج المتباينة بين المحققين 2.&quot; من خلال توفير طريقة موحدة لالكمي، فإن العديد من التناقضات حول دور FP في الذوق وبالتغذية يمكن تصحيح البحوث ذات الصلة. ويمكن تعديل المفتاح بين شيئين لمختلف تقنيات التقاط الصور. يمكن بسهولة أن يتم تعيين مسافة معروفة لالمقياس إلى القطر المستخدمة في كل مختبر والركود يمكن أن تكون مخفضة إذا وضعت التفاف ساران أو الزجاج على اللسان لالتقاط الصور. في مختبر حصلت، تبين أن اللسان محايد قدمت أفضل تعريف للالحليمات. قد يكون هذا بسبب كمية الضوء في المختبر مما تسبب التفاف ساران أو الزجاج لعكس الضوء مرة أخرى في الكاميرا خلق الوهج الذي جعل الحميرsment الصعب. وقال بعض المعامل وجدوا الصبغة أكثر تحديا لالعد، ولكن العثور على مختبر حصلت على المخفف صبغة الطعام الزرقاء بتركيز 01:36 قدمت النقيض المثالي بين كمئي الحليمات خيطية الشكل وعلى معظم الألسنة. سوف إنشاء مفتاح بين شيئين لFP توصيف تسمح للباحثين في مختبرات مختلفة، وذلك باستخدام مجموعة متنوعة من أساليب التقاط الصور، لتحليل باستمرار الهياكل على لسان ولدي ثقة في الإبلاغ عن نتائجها. وأخيرا، استخدام مفتاح شيئين أن تكون لها أغراض في مناطق أخرى من منهجية علمية حيث الصفات الهياكل أو الأجسام توفر أرقام متناسقة من دراسة إلى أخرى.

الحليمات هي المطبات مرئية على سطح اللسان. هناك أربعة أنواع من الحليمات: كمئي (FP)، تورق، محوط، وخيطية الشكل. بينما تنتشر الحليمات خيطية الشكل على سطح اللسان، ويتم ترجمة محوط فقط على الجزء الخلفي من اللسان، وتوجد تورق على الجانبين. في المقابل، FP تقع نحو الجزء الأمامي من اللسان. تعتبر FP، تورق، والحليمات الكأسية الذوقية لأن لديهم القدرة على احتواء براعم الذوق في حين خيطية الشكل لا. براعم الذوق هي مجموعات من الخلايا المسؤولة عن كشف tastants الكيميائية وtransducing المحفزات إلى إشارة الذوقية في الدماغ. اللعاب والطعام جزيئات تدخل في براعم الذوق من خلال فتحات تسمى المسامات طعم حيث ثم يكون جزيئات طعم إمكانات تفعيل الخلايا الذوقية. ومن المثير للاهتمام، وهناك فروق فردية كبيرة في كثافة براعم التذوق، كما لوحظ لأول مرة في دراسة النسيجية الألسنمن 18 جثة (ميلر، 1988) 1. براعم الذوق نفسها لم تكن مرئية على سطح اللسان، ومع ذلك، المسام طعم مرئية عند استخدام تقنيات التكبير، والإضاءة، وتلطيخ المناسبة مما أدى ميلر وريدي (1990) لتطوير وسيلة لتحديد المسام الذوق وكمئي الحليمات باستخدام videomicroscopy في المعيشة البشر 2. هناك عدد من المعامل قد عدلت تقنية videomicroscopy الأصلية، وذلك باستخدام التصوير الثابتة وضئيلة أو معدومة التكبير. ومع ذلك، منذ كمئي الحليمات هي أسهل بكثير لتصور من هم المسام باستخدام هذه التقنيات الأخيرة، تحولت مختبرات لعد كمئي الحليمات في مكان المسام الذوق. في القيام بذلك، فمن المفترض أن كثافة كمئي حليمة هي مقياس الوكيل معقول لكثافة طعم المسام، على الرغم من العديد من كمئي الحليمات لا تحتوي على مسام طعم أو براعم الذوق 3؛ ليس فقط هي FP أكثر وضوحا ويمكن الوصول إليها من محوط وتورق الحليمات، ولكن التقاط الصور الخاصة بهم هو أقل منظمة الشفافية الدوليةلي المستهلكة من تحليل طعم المسام من خلال طريقة بديلة لvideomicroscopy 2،4. في عام 1990، ميلر وريدي تستخدم هذه التقنية لتجد أن طعم وترتبط كثافة المسام ذات الكثافة FP 3 وهو الأمر الذي أكدته أيضا في بارتوشوكا وآخرون. 5 وبالإضافة إلى هذه العلاقة التشريحية، كما وجدت ميلر والريدي أن 8 أشخاص في الجزء العلوي نصف طعم توزيع كثافة المسام أيضا تصنيف السكروز، كلوريد الصوديوم، وبروبيل ثيوراسيل (دعامة) كما ملحوظ أكثر كثافة من فعل 8 أشخاص آخرين 3. لاحظ عمل لاحق من بارتوشوكا وآخرون (1994) وجود علاقة بين suprathreshold كثافة طعم PROP وكثافة كمئي حليمة، فضلا عن كثافة طعم المسام، في 42 موضوعات 5. أدت هذه الطريقة مريحة للدراسات مؤثرة التقارير أن الأشخاص الذين لديهم العديد من الحليمات ألسنة تثير رد فعل أقوى للعديد من tastants، بما في ذلك tastants فينيل ثيوكرباميد المر (PTC) ودعامة 6،7. المؤسسة العامة للاتصالات وPROP هي tastants مدروسة جيدا تستخدم كثيرا نظرا لارتباط واضح بين حساسية الذوق النمط الظاهري الشخص وراثى الخاصة بهم. وقد أظهرت الدراسات السكانية أن الناس الذين لديهم diplotype المتنحية متماثل من الجين، TAS2R38، لديها حساسية أقل بكثير لدعم من حاملي البديل مهيمن أو متخالف من الجين 10/08. وذكرت هذه الظاهرة وراثية لأول مرة في 1932 عندما أعلن آرثر L. فوكس اكتشافه من &quot;العمى طعم&quot; لPTC 11. بين الناس قادرة على تذوق هذه المركبات المريرة، ذكرت وشدة الطعم يمكن أن تختلف في أي مكان من غير سارة قليلا إلى المرير لايطاق 6. لحساب التباين التي لا يمكن تفسيرها من خلال TAS2R38، وضعت نظرية عليها أنه يمكن أن يعزى إلى كثافة FP على اللسان 4. ومع تقدم الأبحاث الذوق، وFIELتم تقسيم د في مدرستين في التفكير حول هذه النظرية فيما يتعلق بدور FP وحساسية الطعم المر. على الرغم من أن العديد من الدراسات هذا الزعم الأصلية التي الكثافة FP عاملا في PROP الحساسيات 4،6،12،13، كان هناك طوارئ صغير، ولكن المهم أن لديها ادلة لدحضها، وتقديم التقارير عدم القدرة على تكرار الدور 10، 14،15،16. Delwiche وآخرون. (2001) حذر من أن الاتجاه هو متغير بدرجة كبيرة. كثافة FP يفعل الاعتبار ليس موحد للاختلافات في الحساسية المرارة عبر الموضوعات، وكان يمكن إثباتها فقط بالنسبة للاشخاص الذين لا يقل حساسية معتدلة لدعم 7. بالإضافة إلى استخدام تعريف أقل صرامة ميلر وريدي طريقة حول كيفية تحديد FP، فمن المهم أن نلاحظ أنه مع استثناء من نسل سد قندس الدراسات 15 أجرته فيشر وآخرون، فإن معظم الدراسات السابقة كان عينة صغيرة الأحجام التي قد تسهم أيضا في النتائج غير متناسقة علىدور FP في الذوق. لفترة وجيزة، في ميلر وريدي في ورقة منهجية المنوية (1990)، والكتاب الملون ألسنة الزرقاء لتحديد FP بسبب FP تبقى الوردي أثناء الحليمات خيطية الشكل تمتص الصبغة وبدوره الزرقاء. أنها تصنف FP بأنها &quot;هياكل الوردي مدورة حوالي 0.5 ملم في القطر&quot; 2. في حين نصحت الكتاب أنه قبل استخدام هذا الأسلوب لمزيد من العمل التحليلي، وخصائص FP يجب أن تكون محددة بشكل صارم وخلصت إلى أن الاختلاف أشار بالفعل في الأدب &quot;قد تنسب إلى مجموعات سكانية مختلفة الموضوع، وأساليب مختلفة، والمحققين مختلفة&quot; 2، على وقد أدى البحث إلى خصائص المقبولة عموما أن FP هي الجولة 17،18، كبير 2، الوردي أو ملطخة أخف وزنا 2، و ارتق 4. تؤخذ على علاتها، ويبدو أن هذه الخصائص مباشرة جدا الى الامام. في علم الوراثة من طعم مختبر (معمل أو مختبر حصلت)، واستخدام والتقىتم هود تعقيدا بسبب المحاولات الفردية الهدافين &#39;في التصفيات وإعطاء الأولوية لأهمية الخصائص المذكورة أعلاه عند بعض، ولكن ليس كل شيء، من خصائص كانت موجودة. وتشمل هذه المضاعفات الحليمات الصغيرة التي ظهرت الوردي في خضم الحليمات أكبر من ذلك بكثير. اللسان كامل امتصاص الصبغة الزرقاء وبالتالي القضاء على التصنيف على أساس اختلاف اللون. الحليمات مستطيل بدلا من الجولة. والألسنة عدم وجود اختلاف في الارتفاع، ساهمت جميعها لالهدافين الإبلاغ عن التهم FP على نطاق واسع متنوعة من نفس الصورة. وأدت هذه الاختلافات في التحليل أن يراجعوا الأدب من أجل تحديد ذاتية، وتحديد أي استثناءات لخصائص FP المقبولة عموما، وفي نهاية المطاف وضع بروتوكول لبدقة وموضوعية تحديد وتسجيل FP. أولا، يتم وصف شكل FP في الأدب باعتباره مدورة، مثل الفطر هيكل 17،18. ومع ذلك، أبرز ما عداوأشير أيضا إلى أيونات. وأكد ميلر أن مصطلح &quot;كمئي&quot; هي تسمية خاطئة وأن العديد من FP لا تتشكل فطر، ولكن يمكن أن تختلف على نطاق واسع في حجم ومورفولوجية 18. ميليس وآخرون. (2013) كما وصفت العديد من الحليمات التي كانت تعتبر &quot;مشوهة&quot;، حيث كان قطر FP في اتجاه واحد اثنين على الأقل من الانحرافات المعيارية أطول مما كانت عليه في اتجاه آخر 19. وعلاوة على ذلك، تشنغ وروبنسون وجدت أنه عندما تشير FP قبل التلوين، فقد تراوحت من شقة وتصدرت لممدود في المظهر 20. مشيرا إلى الاستثناءات المذكورة أعلاه، وتوصيف وFP يجري جولة ويظهر على شكل فطر أيضا تضييق تعريف. الثانية، وصفت FP لون &quot;الدوائر وردي على خلفية زرقاء&quot; 7 بعد تلطيخ اللسان مع صبغة زرقاء. على الرغم من تلطيخ أخف وزنا وكان المعيار الأكثر ثباتا من FP طوال الأدب انه لم تصفيات موحدة. تشنغ &amp;<html> ؛ لاحظ روبنسون أن FP لم تكن دائما ملطخة طفيفة، مما يجعل من الصعب تحديد وغير مؤكد 20. يبدو إذن أن ألسنة امتصاص الصبغة بشكل مختلف وعلى الرغم من تباين واضح في العديد من اللغات، وأصبحت بعض الأزرق تماما دون أي تمييز حين أن البعض الآخر يفقد فورا عن أي أثر للصبغة زرقاء 21. السمة الثالثة، وحجم FP، يتفق إلى حد ما بين أوراق، تتراوح ما بين 0.5 مم إلى 0.97 مم 6،18. في الأدب وأشار ميلر إلى أن هناك نطاقات حجم اثنين من الحليمات على الأمامي الظهري للسان. كان الحليمات بأقطار أكبر في المقام الأول كمئي والحليمات المخروطية، بينما كان الحليمات التي يبلغ قطرها أصغر معظمهم خيطية الشكل 18. ومع ذلك، مع استثناء من نسل سد قندس دراسة 21، وحجم لم تظهر لتحديد ما إذا كان هيكل هو FP في الأدب، ولكن لم تقدم للالحليمات تصنيفها بالفعل بأنه &quot;كمئي&quot;. _content &quot;&gt; وأخيرا، يتم سرد الارتفاع كما FP الرابع مميزة 4 على الرغم أشار ميلر إلى أن التمييز بين خيطية الشكل وكمئي الحليمات من الصعب عند استخدام هذه المعايير بالقرب من هامش اللسان. وأعطى مثالين من FP التي تختلف كثيرا في الارتفاع، واحد يجري 0.8 مم في الارتفاع في حين كان آخر أقل من 0.1 ملم في الطول، ولكن لا تزال لديها اثنين من المسام الذوق التي لوحظت بشكل واضح (18). وأعقب هذه الملاحظة أيضا، وأكد من قبل Shahbake وآخرون. 4 هذه التعريفات والاستثناءات التي أبلغت عنها تبين أن حقل طعم وقد اعترف منذ وقت طويل التناقض في وصف FP وأوجه القصور في بروتوكول شائعة الاستخدام من ميلر وريدي. في الواقع، ميلر وريدي حض مجال لزيادة تحديد ملامح FP 2. افترضنا أن الهدافين تم إعطاء وزن مختلف لخصائص وإعطاء الأولوية أهميتها بشكل مختلف عند حلمة الثديفشل illae لتلبية كل معيار، كما هو الحال عندما كانت حليمة كبيرة وفطر على شكل، ولكن الملون الأزرق. كان منطقيا أن المحققين من الدراسات التي نشرت سابقا المرجح فعل الشيء نفسه والتي تشكل مجتمعة مع أحجام عينة صغيرة، قد تكون مسؤولة عن نتائج متنوعة قادمة من استخدام هذا الأسلوب. تناول مختبر حصلت هذه الفجوة في منهجية FP من خلال تطوير التوجيهي الذي يعرف كل سمة باستخدام قياسات موضوعية وتعطي الأولوية للخصائص التي تشير إلى الأسبقية في التحليل. هذا الأسلوب هو بروتوكول دنفر الحليمات (DPP)، مفتاح شيئين مع خصائص واضحة ومتميزة من FP لضمان التهم دقيقة وقابلة للتكرار من الصور الرقمية من اللسان. النيابة العامة هو الطريقة المقترحة لتوحيد المستخدمة سابقا ميلر وريدي الأسلوب، وبالتالي إزالة التفسير الفردي وضمان تحقيق نتائج أكثر اتساقا عند تحليل كثافة FP. من خلال القيام بذلك، DPP يمكن استخدامها لأكثر ثقة دetermine دور FP في الذوق. وقد تم تحليل الصور اللسان اتخذت من الموضوعات من قبل العلماء المواطن (الهدافين) من مختبر الذين الموضوعات الحقيقية لهذه الدراسة. وتتألف لاب الأساسية من العلماء مواطن من أعضاء من المجتمع تتراوح أعمارهم (سنة) في الفترة من 16 وحتى منتصف 80S. ويصف تقرير تقييم تلخيصي بتكليف من متحف في عام 2012 العلماء المواطن على أن لها مصلحة قوية في مجال العلوم ومع الثلثين بعد أن حصل على شهادة جامعية في تخصص علمي (22). يتم تجنيد العلماء مواطن مرشح حاليا عن طريق الكلمة من فمه، يجب بنجاح إكمال عملية مقابلة مع المتطوعين المخضرم في المتحف، والخضوع لفترة اختبار في معرض الصحة الدائم للمتحف، إكسبيديشن الصحة، قبل أن تتاح لهم الفرصة لتقديم طلب للحصول على وظيفة في مختبر. مرة واحدة مقبولة في المختبر، يخضع العلماء المواطن التدريب لمدة 12 أسبوعا لتصبح معتمدة على الانخراط موضوع الإنسانالصورة. وبعد هذه الشهادة، وهم قادرون على اتخاذ وحدات تدريبية على تقنيات مختلفة في مختبر (على سبيل المثال العد الحلمية، استخراج DNA) وبعد شهادات إضافية وتدابير مراقبة الجودة العادية، هؤلاء العلماء المواطن لديهم الفرصة للمشاركة بنشاط في تحليل البيانات. العلماء المواطن بوقتهم ولا تعويض عن مساهماتها في المتحف.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Image J</td>
			<td>National Institutes of Health</td>
			<td><a href="http://rsb.info.nih.gov/ij">http://rsb.info.nih.gov/ij</a></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Food dye, Deep Blue Shade</td>
			<td>Esco</td>
			<td>http://escofoods.com/blue-food-coloring.html</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Rayon Tipped OB/GYN Applicators</td>
			<td>Puritan</td>
			<td>25-808 1PR</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Grade 1 Filter Paper</td>
			<td>Whatman</td>
			<td>Whatman No.: 1001-325</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coolpix P100 (10.3 megapixels) and P500 (12.1 megapixels)</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>http://imaging.nikon.com/lineup/coolpix/</td>
			<td>neither model appears to be available on the website any longer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paper Hand Towels</td>
			<td>Kleenex</td>
			<td>https://www.kleenex.com/HandTowelsDetail.aspx</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

denver papillae protocol for objective analysis of fungiform papillae

الهدف من البروتوكول الحليمات دنفر هو استخدام مفتاح بين شيئين لتعريف وتحديد أولويات خصائص كمئي الحليمات (FP) لضمان تسجيل متناسقة بين الهدافين. هذا البروتوكول يبني الخروج من الحاجة التي نشأت من خلال العقدين الأخيرين من البحوث طعم باستخدام FP كوكيل لكثافة طعم المسام. تاريخيا تم تحليل كثافة FP باستخدام ميلر وريدي عام 1990 الأوصاف من التشكل: جولة، ملطخة أخف وزنا، بوجه عام، ومرتفعة. في هذا العمل، محذر المؤلفون أن تعريفات أكثر صرامة من FP التشكل اللازمة لتكون الخطوط العريضة. على الرغم من هذا دعوة إلى العمل، وقد تم متابعة الأدب نادرة، ومعظم الدراسات المستمرة في الاستشهاد ميلر وريدي في العمل الأصلي. ونتيجة لذلك، كانت تقارير كثافة FP متغير بدرجة كبيرة و، جنبا إلى جنب مع أحجام عينة صغيرة، يمكن أن تسهم في استنتاجات متباينة حول دور FP في حساسية الذوق. في علم الوراثة من طعم مختبر استكشاف هذه incon واضحsistency في العد وجدت أن الهدافين تم إعطاء الأولوية بشكل فردي على أهمية هذه الخصائص بشكل مختلف وليس لديه توجيهات لأنه عندما كان حليمة بعض، ولكن ليس كل شيء، من الصفات المبلغ عنها FP. ونتيجة لهذا الذاتية هي التهم FP شديدة التباين من نفس الصورة اللسان. وقد تم تطوير بروتوكول الحليمات دنفر الى تدارك هذه النتيجة من خلال استخدام مفتاح شيئين أن المزيد من يعرف وأولوياتها أهمية الخصائص التي وضعتها ميلر وريدي. الطريقة المقترحة يمكن أن تساعد في خلق وسيلة معيارية لقياس FP للباحثين في مجال الذوق والدراسات في مجال التغذية.

وسجلت هنا صورة تمثيلية من قبل اثنين من الهدافين الفردي عند استخدام منهجية ميلر وريدي شائعة الاستخدام لتحديد FP استنادا إلى المعايير مجال الجولة، كبيرة، وردي أو ملطخة أخف وزنا، ومرتفعة، ثم سجل نفس الصورة من قبل اثنين من الهدافين استخدام النيابة العامة. التهم المعروضة هي تمثيلية من التباين الملحوظ باستخدام طريقة الأصلي بالمقارنة مع تباين أقل باستخدام DPP. <img alt="الرقم 4" src="/files/ftp_upload/52860/52860fig4.jpg" /> الرقم 4: ميلر وريدي الكمي مقابل DPP الكمي الصورة على اليسار هو ممثل التهم اثنين من الهدافين &#39;باستخدام ميلر وريدي الطريقة. الصورة على اليمين تمثل تهمتين الهدافين &#39;باستخدام DPP. الأحمر هو هداف 1، الأصفر هو هداف 2، الأخضر هو الهدافين 1 و 2. الموثوقية الإحصائية لموانئ دبيوP درس سابقا باستخدام نموذج خطي مختلطة لتقييم التغير 10. لفترة وجيزة، لتوليد البيانات لتقييم الدور الذي تلعبه النيابة العامة في اتساق الدرجات، وسجل خمسة عشر الصور مرتين. في أول دفعة من عشرات، وتستخدم DPP الهدافين السذاجة ميلر وريدي طريقة 2. وكان الهدافين ثم تدريبهم على استخدام النيابة العامة وكان rescored الصور بشكل فردي دون توافق خطوة النهائية هو موضح في القسم 2.7 تفاصيل ضبط الجودة (الشكل 5). كان FP مجموعة البيانات النتيجة المستخدمة في النموذج المختلط لتقييم الاختلافات جنبا إلى جنب نظرا لبروتوكول (الشكل 6)، التباين داخل هداف والتفاعل بينهما. وأظهر هذا النموذج اختلاف كبير في التهديف عند استخدام الأسلوب ميلر وريدي مقارنة DPP (ع القيمة &lt;1 × 10 -6) مع النيابة العامة مما أدى إلى عدد أكبر من قبل 6.99 (SE = 0.99). كانت 5.2٪ من التباين في النتيجة بسبب التدريب، 25.9٪ نتيجة لهداف، والباقي بسببلتقلبه تحديدا إلى الصورة 10. المقبل، لتوليد البيانات لتحديد التباين داخل هداف، وسجل سلسلة من ثلاثين صورة في ترتيب عشوائي من قبل 11 شخصا. دون علم الهدافين، وتضمنت هذه السلسلة من الصور الثلاث الصور التي تكررت. لاحظنا الفرق الكبير في درجة تقلب مقارنة صور مميزة versusrepeated الصور. <img alt="الرقم 5" src="/files/ftp_upload/52860/52860fig5.jpg" /> توفر DPP-السذاجة مقابل المشاركة DPP تدريب الفريق boxplots عشرات المعلقين على 15 صورة قبل وبعد التدريب بروتوكول الحليمات دنفر: الرقم 5. لكل boxplot، وشغل في دائرة يشير إلى متوسط ​​في حين أن دائرة مفتوحة تشير عزلاء. <img alt="الشكل (6)" src="/files/ftp_upload/52860/52860fig6.jpg" /> الرقم 6: تغيير في هداف الفرق يمثل الرمادي ركان التباين الهدافين فردي قبل التدريب DPP. الأسود هو نفس المنصب هداف DPP التدريب.

Watch this Scientific Journal Video about Denver Papillae Protocol for Objective Analysis of Fungiform Papillae at JoVE.com

Denver Papillae Protocol for Objective Analysis of Fungiform Papillae

نحن هنا نقدم بروتوكول لقياس كثافة كمئي حليمة من الصور الرقمية. هذا الأسلوب يعتمد تحديد الأولويات والمقاييس مميزة الموضوعية في عمل وصفي الأصلي على كمئي الحليمات التي كتبها ميلر وريدي (1990).

بروتوكول الحليمات دنفر للتحليل الموضوعي لكمئي الحليمات

The goal of the Denver Papillae Protocol is to use a dichotomous key to define and prioritize the characteristics of fungiform papillae (FP) to ensure ...

denver-papillae-protocol-for-objective-analysis-of-fungiform-papillae

Research

JoVE Journal

Neuroscience

14.2K Views.  Denver Museum of Nature & Science.  نحن هنا نقدم بروتوكول لقياس كثافة كمئي حليمة من الصور الرقمية. هذا الأسلوب يعتمد تحديد الأولويات والمقاييس مميزة الموضوعية في عمل وصفي الأصلي على كمئي الحليمات التي كتبها ميلر وريدي (1990). 

Video: Denver Papillae Protocol for Objective Analysis of Fungiform Papillae

Isolation and Culture of Human Fungiform Taste Papillae Cells

Taste cells are highly specialized, with unique histological, molecular and physiological characteristics that permit detection of a wide range of simple stimuli and complex chemical molecules contained in foods. In human, individual fungiform papillae contain from zero to as many as 20 taste buds. There is no established protocol for culturing human taste cells, although the ability to maintain taste papillae cells in culture for multiple cell cycles would be of considerable utility for characterizing the molecular, regenerative, and functional properties of these unique sensory cells. Earlier studies of taste cells have been done using freshly isolated cells in primary culture, explant cultures from rodents, or semi-intact taste buds in tissue slices1,2,3,4. Although each of these preparations has advantages, the development of long-term cultures would have provided significant benefits, particularly for studies of taste cell proliferation and differentiation. Several groups, including ours, have been interested in the development and establishment of taste cell culture models. Most attempts to culture taste cells have reported limited viability, with cells typically not lasting beyond 3-5 d5,6,7,8. We recently reported on a successful method for the extended culture of rodent taste cells9. We here report for the first time the establishment of an in vitro culture system for isolated human fungiform taste papillae cells. Cells from human fungiform papillae obtained by biopsy were successfully maintained in culture for more than eight passages (12 months) without loss of viability. Cells displayed many molecular and physiological features characteristic of mature taste cells. Gustducin and phospholipase C &beta;2, (PLC-&beta;2) mRNA were detected in many cells by reverse transcriptase-polymerase chain reaction and confirmed by sequencing. Immunocytochemistry analysis demonstrated the presence of gustducin and PLC-&beta;2 expression in cultured taste cells. Cultured human fungiform cells also exhibited increases in intracellular calcium in response to appropriate concentrations of several taste stimuli indicating that taste receptors and at least some of the signalling pathways were present. These results sufficient indicate that taste cells from adult humans can be generated and maintained for at least eight passages. Many of the cells retain physiological and biochemical characteristics of acutely isolated cells from the adult taste epithelium to support their use as a model taste system. This system will enable further studies of the processes involved in proliferation, differentiation and function of mammalian taste receptor cells in an in vitro preparation.
Human fungiform taste papillae used for establishing human fungiform cell culture were donated for research following proper informed consent under research protocols that were reviewed and approved by the IRB committee. The protocol (#0934) was approved by Schulman Associates Institutional Review Board Inc., Cincinnati, OH. Written protocol below is based on published parameters reported by Ozdener et al. 201110.

We aimed to develop a reproducible protocol for isolating and maintaining long-term cultures of human fungiform taste papillae cells. Cells from human fungiform papillae obtained by biopsy were successfully maintained in culture for more than eight passages (12 months) without loss of viability.

العزلة والثقافة من خلايا الإنسان حليمات كمئية طعم

Taste cells are highly specialized, with unique histological, molecular and physiological characteristics that permit detection of a wide range of simple ...

Visualization and Genetic Manipulation of Dendrites and Spines in the Mouse Cerebral Cortex and Hippocampus using In utero Electroporation

In utero electroporation (IUE) has become a powerful technique to study the development of different regions of the embryonic nervous system 1-5. To date this tool has been widely used to study the regulation of cellular proliferation, differentiation and neuronal migration especially in the developing cerebral cortex 6-8. Here we detail our protocol to electroporate in utero the cerebral cortex and the hippocampus and provide evidence that this approach can be used to study dendrites and spines in these two cerebral regions.
Visualization and manipulation of neurons in primary cultures have contributed to a better understanding of the processes involved in dendrite, spine and synapse development. However neurons growing in vitro are not exposed to all the physiological cues that can affect dendrite and/or spine formation and maintenance during normal development. Our knowledge of dendrite and spine structures in vivo in wild-type or mutant mice comes mostly from observations using the Golgi-Cox method 9. However, Golgi staining is considered to be unpredictable. Indeed, groups of nerve cells and fiber tracts are labeled randomly, with particular areas often appearing completely stained while adjacent areas are devoid of staining. Recent studies have shown that IUE of fluorescent constructs represents an attractive alternative method to study dendrites, spines as well as synapses in mutant / wild-type mice 10-11 (Figure 1A). Moreover in comparison to the generation of mouse knockouts, IUE represents a rapid approach to perform gain and loss of function studies in specific population of cells during a specific time window. In addition, IUE has been successfully used with inducible gene expression or inducible RNAi approaches to refine the temporal control over the expression of a gene or shRNA 12. These advantages of IUE have thus opened new dimensions to study the effect of gene expression/suppression on dendrites and spines not only in specific cerebral structures (Figure 1B) but also at a specific time point of development (Figure 1C).
Finally, IUE provides a useful tool to identify functional interactions between genes involved in dendrite, spine and/or synapse development. Indeed, in contrast to other gene transfer methods such as virus, it is straightforward to combine multiple RNAi or transgenes in the same population of cells. 
In summary, IUE is a powerful method that has already contributed to the characterization of molecular mechanisms underlying brain function and disease and it should also be useful in the study of dendrites and spines.

Visualization and Genetic Manipulation of Dendrites and Spines in the Mouse Cerebral Cortex and Hippocampus using In utero Electroporation

This article describes in detail a protocol to electroporate in utero the cerebral cortex and the hippocampus at E14.5 in mice. We also show that this is a valuable method to study dendrites and spines in these two cerebral regions.

التصور والتلاعب الجيني من التشعبات والاعمده الفقريه في قشرة الدماغ والحصين ماوس باستخدام<em&gt; في الرحم</em&gt; Electroporation

In utero electroporation (IUE) has become a powerful technique to study the development of different regions of the embryonic nervous system 1-5. To date ...

Laser Capture Microdissection of Neurons from Differentiated Human Neuroprogenitor Cells in Culture

Neuroprogenitor cells (NPCs) isolated from the human fetal brain were expanded under proliferative conditions in the presence of epidermal growth factor (EGF) and fibroblast growth factor (FGF) to provide an abundant supply of cells. NPCs were differentiated in the presence of a new combination of nerve growth factor (NGF), brain-derived neurotrophic factor (BDNF), dibutyryl cAMP (DBC) and retinoic acid on dishes coated with poly-L-lysine and mouse laminin to obtain neuron-rich cultures. NPCs were also differentiated in the absence of neurotrophins, DBC and retinoic acid and in the presence of ciliary neurotrophic factor (CNTF) to yield astrocyte-rich cultures. Differentiated NPCs were characterized by immunofluorescence staining for a panel of neuronal markers including NeuN, synapsin, acetylcholinesterase, synaptophysin and GAP43. Glial fibrillary acidic protein (GFAP) and STAT3, astrocyte markers, were detected in 10-15% of differentiated NPCs. To facilitate cell-type specific molecular characterization, laser capture microdissection was performed to isolate neurons cultured on polyethylene naphthalate (PEN) membrane slides. The methods described in this study provide valuable tools to advance our understanding of the molecular mechanism of neurodegeneration.

Human neuroprogenitor cells (NPCs) were expanded under proliferating conditions. NPCs were differentiated into neuron-rich cultures in the presence of a combination of neurotrophins. Neuronal markers were detected by immunofluorescence staining. To isolate a pure population of neurons, NPCs were differentiated on PEN membrane slides and laser capture microdissection was performed.

لقطة ليزر تسليخ مجهري من الخلايا العصبية من الخلايا المتمايزة Neuroprogenitor الإنسان في الثقافة

Neuroprogenitor cells (NPCs) isolated from the human fetal brain were expanded under proliferative conditions in the presence of epidermal growth factor ...

Measuring Oral Fatty Acid Thresholds, Fat Perception, Fatty Food Liking, and Papillae Density in Humans

Emerging evidence from a number of laboratories indicates that humans have the ability to identify fatty acids in the oral cavity, presumably via fatty acid receptors housed on taste cells. Previous research has shown that an individual&#39;s oral sensitivity to fatty acid, specifically oleic acid (C18:1) is associated with body mass index (BMI), dietary fat consumption, and the ability to identify fat in foods. We have developed a reliable and reproducible method to assess oral chemoreception of fatty acids, using a milk and C18:1 emulsion, together with an ascending forced choice triangle procedure. In parallel, a food matrix has been developed to assess an individual&#39;s ability to perceive fat, in addition to a simple method to assess fatty food liking. As an added measure tongue photography is used to assess papillae density, with higher density often being associated with increased taste sensitivity.

Oral chemoreception of fatty acids and the association with diet and fatty food preferences may enable the identification of mechanisms involved with the development of obesity and why dietary changes may be difficult for many individuals.

قياس الأحماض الدهنية عن طريق الفم العتبات، الدهون الإدراك، الأغذية الدهنية الميل، والحليمات الكثافة في البشر

Emerging evidence from a number of laboratories indicates that humans have the ability to identify fatty acids in the oral cavity, presumably via fatty ...

Protocol for Three-dimensional Confocal Morphometric Analysis of Astrocytes

As glial cells in the brain, astrocytes have diverse functional roles in the central nervous system. In the presence of harmful stimuli, astrocytes modify their functional and structural properties, a condition called reactive astrogliosis. Here, a protocol for assessment of the morphological properties of astrocytes is presented. This protocol includes quantification of 12 different parameters i.e. the surface area and volume of the tissue covered by an astrocyte (astrocyte territory), the entire astrocyte including branches, cell body, and nucleus, as well as total length and number of branches, the intensity of fluorescence immunoreactivity of antibodies used for astrocyte detection, and astrocyte density (number/1,000 &#181;m2). For this purpose three-dimensional (3D) confocal microscopic images were created, and 3D image analysis software such as Volocity 6.3 was used for measurements. Rat brain tissue exposed to amyloid beta1-40 (A&#946;1-40) with or without a therapeutic&#160;intervention was used to present the method. This protocol can also be used for 3D morphometric analysis of other cells from either in vivo or in vitro conditions.

Astrocytes in the CNS change their functional and structural properties in response to harmful stimuli. This report presents a protocol for assessment of three-dimensional astrocyte morphology in diseased conditions or after therapeutic interventions.

بروتوكول للثلاثي الأبعاد متحد البؤر تحليل المظهرية من النجمية

As glial cells in the brain, astrocytes have diverse functional roles in the central nervous system. In the presence of harmful stimuli, astrocytes modify ...

Peering at Brain Polysomes with Atomic Force Microscopy

The translational machinery, i.e., the polysome or polyribosome, is one of the biggest and most complex cytoplasmic machineries in cells. Polysomes, formed by ribosomes, mRNAs, several proteins and non-coding RNAs, represent integrated platforms where translational controls take place. However, while the ribosome has been widely studied, the organization of polysomes is still lacking comprehensive understanding. Thus much effort is required in order to elucidate polysome organization and any novel mechanism of translational control that may be embedded. Atomic force microscopy (AFM) is a type of scanning probe microscopy that allows the acquisition of 3D images at nanoscale resolution. Compared to electron microscopy (EM) techniques, one of the main advantages of AFM is that it can acquire thousands of images both in air and in solution, enabling the sample to be maintained under near physiological conditions without any need for staining and fixing procedures. Here, a detailed protocol for the accurate purification of polysomes from mouse brain and their deposition on mica substrates is described. This protocol enables polysome imaging in air and liquid with AFM and their reconstruction as three-dimensional objects. Complementary to cryo-electron microscopy (cryo-EM), the proposed method can be conveniently used for systematically analyzing polysomes and studying their organization.

While ribosome structure has been extensively characterized, the organization of polysomes is still understudied. To overcome this lack of knowledge, we present here a detailed preparation protocol for accurate imaging of mammalian polysomes by atomic force microscopy (AFM) in air and liquid.

يطل في الدماغ Polysomes مع مجهر القوة الذرية

The translational machinery, i.e., the polysome or polyribosome, is one of the biggest and most complex cytoplasmic machineries in cells. Polysomes, ...

Protocol for Isolating the Mouse Circle of Willis

The cerebral arterial circle (circulus arteriosus cerebri) or circle of Willis (CoW) is a circulatory anastomosis surrounding the optic chiasma and hypothalamus that supplies blood to the brain and surrounding structures. It has been implicated in several cerebrovascular disorders, including cerebral amyloid angiopathy (CAA)-associated vasculopathies, intracranial atherosclerosis and intracranial aneurysms. Studies of the molecular mechanisms underlying these diseases for the identification of novel drug targets for their prevention require animal models. Some of these models may be transgenic, whereas others will involve isolation of the cerebro-vasculature, including the CoW.The method described here is suitable for CoW isolation in any mouse lineage and has considerable potential for screening (expression of genes, protein production, posttranslational protein modifications, secretome analysis, etc.) studies on the large vessels of the mouse cerebro-vasculature. It can also be used for ex vivo studies, by adapting the organ bath system developed for isolated mouse olfactory arteries.

We describe here a reproducible protocol for isolating the mouse circle of Willis.

بروتوكول لعزل الدائرة ماوس ويليس

The cerebral arterial circle (circulus arteriosus cerebri) or circle of Willis (CoW) is a circulatory anastomosis surrounding the optic chiasma and ...

An Objective and Reproducible Test of Olfactory Learning and Discrimination in Mice

Olfaction is the predominant sensory modality in mice and influences many important behaviors, including foraging, predator detection, mating, and parenting. Importantly, mice can be trained to associate novel odors with specific behavioral responses to provide insight into olfactory circuit function. This protocol details the procedure for training mice on a Go/No-Go operant learning task. In this approach, mice are trained on hundreds of automated trials daily for 2&#8211;4 weeks and can then be tested on novel Go/No-Go odor pairs to assess olfactory discrimination, or be used for studies on how odor learning alters the structure or function of the olfactory circuit. Additionally, the mouse olfactory bulb (OB) features ongoing integration of adult-born neurons. Interestingly, olfactory learning increases both the survival and synaptic connections of these adult-born neurons. Therefore, this protocol can be combined with other biochemical, electrophysiological, and imaging techniques to study learning and activity-dependent factors that mediate neuronal survival and plasticity.

Here, we train mice on an associative learning task to test odor discrimination. This protocol also allows for studies on learning-induced structural changes in the brain.

إجراء اختبار موضوعي واستنساخه من التعلم حاسة الشم والتمييز في الفئران

Olfaction is the predominant sensory modality in mice and influences many important behaviors, including foraging, predator detection, mating, and ...

Where You Cut Matters: A Dissection and Analysis Guide for the Spatial Orientation of the Mouse Retina from Ocular Landmarks

Accurately and reliably identifying spatial orientation of the isolated mouse retina is important for many studies in visual neuroscience, including the analysis of density and size gradients of retinal cell types, the direction tuning of direction-selective ganglion cells, and the examination of topographic degeneration patterns in some retinal diseases. However, there are many different ocular dissection methods reported in the literature that are used to identify and label retinal orientation in the mouse retina. While the method of orientation used in such studies is often overlooked, not reporting how retinal orientation is determined can cause discrepancies in the literature and confusion when attempting to compare data between studies. Superficial ocular landmarks such as corneal burns are commonly used but have recently been shown to be less reliable than deeper landmarks such as the rectus muscles, the choroid fissure, or the s-opsin gradient. Here, we provide a comprehensive guide for the use of deep ocular landmarks to accurately dissect and document the spatial orientation of an isolated mouse retina. We have also compared the effectiveness of two s-opsin antibodies and included a protocol for s-opsin immunohistochemistry. Because orientation of the retina according to the s-opsin gradient requires retinal reconstruction with Retistruct software and rotation with custom code, we have presented the important steps required to use both of these programs. Overall, the goal of this protocol is to deliver a reliable and repeatable set of methods for accurate retinal orientation that is adaptable to most experimental protocols. An overarching goal of this work is to standardize retinal orientation methods for future studies.

This protocol provides a comprehensive dissection and analysis guide for the use of deep ocular landmarks, s-opsin immunohistochemistry, Retistruct, and custom code to accurately and reliably orient the isolated mouse retina in anatomical space.

حيث قمت بقص المسائل: تشريح وتحليل دليل للتوجه المكاني للشبكية الماوس من معالم بصري

Accurately and reliably identifying spatial orientation of the isolated mouse retina is important for many studies in visual neuroscience, including the ...

Chronic Implantation of Whole-cortical Electrocorticographic Array in the Common Marmoset

Electrocorticography (ECoG) allows the monitoring of electrical field potentials from the cerebral cortex with high spatiotemporal resolution. Recent development of thin, flexible ECoG electrodes has enabled conduction of stable recordings of large-scale cortical activity. We have developed a whole-cortical ECoG array for the common marmoset. The array continuously covers almost the entire lateral surface of cortical hemisphere, from the occipital pole to the temporal and frontal poles, and it captures whole-cortical neural activity in one shot. This protocol describes a chronic implantation procedure of the array in the epidural space of the marmoset brain. Marmosets have two advantages regarding ECoG recordings, one being the homologous organization of anatomical structures in humans and macaques, including frontal, parietal, and temporal complexes. The other advantage is that the marmoset brain is lissencephalic and contains a large number of complexes, which are more difficult to access in macaques with ECoG, that are exposed to the brain surface.These features allow direct access to most cortical areas beneath the surface of the brain. This system provides an opportunity to investigate global cortical information processing with high resolutions at a sub-millisecond order in time and millimeter order in space.

We have developed a whole-cortical electrocorticographic array for the common marmoset that continuously covers almost the entire lateral surface of cortex, from the occipital pole to the temporal and frontal poles. This protocol describes a chronic implantation procedure of the array in the epidural space of the marmoset brain.

غرس المزمن من الصفيف اليكتروكورتيكوجرافيك الجامعة القشرية في مرموز المشتركة

Electrocorticography (ECoG) allows the monitoring of electrical field potentials from the cerebral cortex with high spatiotemporal resolution. Recent ...