تثبيت الرئة تحت الضغط المستمر لتقييم انتفاخ الرئة في الفئران

الضغط المستمر داخل جهاز التثبيت يحافظ على الرئتين في حالة تضخم معقول توليد عينة الرئة النسيجية مناسبة لتقييم دخان السجائر المعتدلة الناجمة عن انتفاخ الرئة. والميزة الرئيسية لهذا النموذج هو أنه يمكن إصلاح العديد من الرئتين في نفس الوقت باستخدام نفس الضغط المستمر دون انهيار الرئة أو الانكماش. إثبات الإجراء سيكون ناوكو أرانو طالبة دراسات عليا من مختبري.

بعد التأكد من عدم وجود استجابة للحركة المنعكة جعل شق في الجلد والأنسجة العضلية على طول خط الماوس الأوسط, تهدف لمنطقة السيفال, وقطع في شكل آخر لخلق مساحة عمل أوسع. بعد تعريض طبقة الحجاب الحاجز ثقب الأنسجة مع ملقط وفتح الفضاء الصدري. قطع منطقة القص تسمح للرئتين والقلب أن يكون تصور.

وقطع الأذين الأيسر والبطين الأيمن. أدخل 24 من القنية قياس متصلة بمضخة ضخ في منطقة البطين الأيمن وتوجيه القنية إلى منطقة السيفاليك حتى تصل إلى الشريان الرئوي. ثم، تشغيل المضخة و perfuse الأنسجة مع ما يقرب من 200 ملليلتر من برنامج تلفزيوني لمدة ساعة واحدة حتى جميع أنسجة الرئة قد تغيرت إلى لون أبيض.

في نهاية الضخ قطع النسيج الضام المحيطة القصبة الهوائية والرئتين والقلب، واستخدام خياطة لادراك التعادل قبالة القصبات الرئيسية اليمنى. بعد ذلك ، حصاد كل من فصوص الفردية من الرئة اليمنى ووضع القلب وفصوص الرئة اليسرى في الفردية 10 ملليلتر الحقن التي تحتوي على تثبيت المناسبة. تراجع المكبس خلق فراغ في حقنة لتضخيم الرئتين وإزالة الرئة من الحقنة.

أدخل 20 من القنية في القصبة الهوائية واستخدم خياطة لتأمين القنية في مكانها. قم بتوصيل حقنة ملليلتر واحدة مليئة بالثبت إلى القنية وملء الرئة بمثبت إضافي للتحقق من وجود تسرب. تأكد من أن موقع الإدراج تم تأمينه لمنع عينة الرئة من الانفصال عن اللوح الرئوي أثناء التثبيت.

ثم نقل الأنسجة إلى معدات ضغط تثبيت الرئة، وإزالة العينة و ربط قبالة القصبة الهوائية مع عقدة في نهاية فترة التثبيت. يتم توصيل العنصر السفلي من معدات ضغط تثبيت الرئة التي يتم إدخالها في عينة الرئة عبر 20 قنية قياس إلى طرف تدفق الفورستين مع stopcock ثلاثية. يتم توليد الضغط من مستويات سطح مختلفة من المثبت بين المقصورات السفلية والعليا.

الفرق الضغط هو 25 سم من الماء ولكن يمكن استخدام مقبض تعديل الارتفاع لضبط الضغط إلى ما بين 25 و 30 سنتيمترا من الماء. مضخة يربط الحاويات السفلي والعلوي، والحفاظ على فارق 25 سم في ارتفاع سطح التثبيت، ويوجه تدفق العامل. بعد 48 ساعة من التثبيت الرئتين من SMP30 الفئران بالضربة القاضية المعرضة للهواء المحيط لا يحمل توسيع المجال الجوي ملحوظ.

ومع ذلك، لوحظ توسيع المجال الجوي الكبير وتدمير جدار السنخي في الفئران بالضربة القاضية SMP30 المعرضة لدخان السجائر المزمن. بالإضافة إلى ذلك ، فإن متوسط اعتراض الخطي ومؤشر مدمر لعينات الرئة هي أكبر بكثير في الدخان يتعرض SMP30 الفئران بالضربة القاضية مما كانت عليه في الهواء الحيوانات المكشوفة. يستخدم مختبرنا 10٪ formalin ولكن يمكن للباحثين استخدام عوامل التثبيت الأخرى وفقًا لاحتياجاتهم التجريبية.

كما أبلغنا باستخدام نظام تثبيت ثبت عينات الرئة يمكن حصادها من مختلف نماذج انتفاخ الرئة الماوس لتقييمهم morphometric. كما يمكن تحديد وكلاء تكون خطرة دائما ارتداء معدات الحماية المناسبة الموظفين والعمل في غرفة جيدة التهوية.