<p class="jove_content"معتمدة&gt; الدراسات الحالية القومي للقلب والرئة والدم المعهد المنحة R01 - HL0921 ، R01 - DK083385 وR01HL098294 Eltzschig لهونج كونج ، و1K08HL102267 - 01 إلى Eckle T. ، ومؤسسة للتعليم التخدير والمنح البحثية لEckle T. وهونج كونج Eltzschig ، وجمعية القلب الأميركية منحة للEckle T. Eltzschig وهونج كونج ودويتشه Forschungsgemeinschaft زمالة بحثية (DFG) لKoeppen م.</p

ملاحظات عامة : يجب أن يتم تنفيذ جميع العمليات تحت المجهر تستقيم تشريح (أوليمبوس ، مع مشاركة SZX10 الساعد مع المحور Z - قف قف STU2 بوم) وباستخدام مخثار الجراحية (11). وينبغي أن تكون مطابقة المجموعات التجريبية على أفضل وجه ممكن في العمر والوزن لضمان إمكانية المقارنة بين النتائج. وينبغي أن درجة الحرارة وضغط الدم والتخدير وسائل الإدارة أن تكون مستقرة طوال الوقت. 1. التخدير والتحضير القصبة الهوائية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام C57BL / 6 الفئران التي لا تقل عن 10 أسابيع من العمر ويكون الجسم من 22-25 غرام. حمل الصوديوم باستخدام التخدير بنتوباربيتال بجرعة 70 ملغم / كغم وزن الجسم الملكية الفكرية (6). الحفاظ على التخدير تقريبا مع 10 مغ / كغ / ح بنتوباربيتال الصوديوم. كن حذرا مع زيادة الجرعة لأن هذا قد أقل بكثير من ضغط الدم. إعادة الجرعات من بنتوباربيتال -- حتى بعد ساعة ، يمكن أن تؤدي إلى زيادات حادة في مستويات البلازما. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد تحريض التخدير ، والفئران الآمنة في موقف ضعيف مع الأطراف العليا والسفلى التي تعلق على الجدول باستخدام شريط خياطة وتثبيتها إلى الكعبين. تفعل الشيء نفسه بالنسبة للرئيس باستخدام الأسنان. الزجرية كافية هو أمر هام لنجاح التنبيب وتسيطر عليها بشكل جيد لعملية جراحية. قبل الجراحة ، وغطاء الماوس مع الزيوت المعدنية للحد من خطر الحساسية الشعر الماوس. من أجل التأكد من أن درجة حرارة الجسم لا تزال مستقرة تغطية الفئران مع التفاف الغذائية المتوافرة تجاريا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الفئران مكان على طاولة التحكم في درجة حرارته ساخنة (RT ، Effenberg ، ميونيخ ، ألمانيا) مع التحقيق الذي تجريه ترمومتر المستقيم المرفقة إلى وحدة تحكم ردود فعل الحرارية للحفاظ على درجة حرارة الجسم عند 37 درجة مئوية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> فضح القصبة الهوائية جراحيا. تشريح الجانبين الأفقي والظهرية من القصبة الهوائية من النسيج الضام ، ومكان اثنين خياطة الحرير 3.0 الجراحية (جهاز هارفارد ، الولايات المتحدة) كل 10 سم طويلة تحت القصبة الهوائية. يجب أن تكون الغرز حوالي 1 سم عن بعضها البعض. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> شق القصبة الهوائية بعناية 3-4 ملم تحت الحنجرة بين اثنين من غضاريف دائرية باستخدام مقص مكفرسون - Vannas (8 سم ، شفرة مستقيم ؛ الآلات الدقيقة العالم ، الولايات المتحدة). تأكد من عدم تسبب النزيف ، لأن هذا قد يشوش المعلمات النتيجة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التنبيب الرغامي إجراء صريحا باستخدام حقنة عادية البولي ايثيلين (Insyte 22g ، بيكتون ديكنسون ، الولايات المتحدة). إدراج غيض من البولي ايثيلين حقنة عادية في زاوية 85 درجة في القصبة الهوائية. إمالة ثم حقنة عادية بحيث يتماشى مع تجويف القصبة الهوائية. يتقدم ببطء الأنبوب مزيد من أسفل القصبة الهوائية حتى غيض من حقنة عادية قد اختفى في فتحة الصدر. يحملق الأنبوب في هذا الموقف مع خياطة الحرير two الجراحية وضعت الظهرية من القصبة الهوائية (انظر 1.4). </li></ol> 2. تقنية اصابة الرئة الناجم عن التنفس <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> توصيل أنبوب لجهاز التنفس الصناعي. للحث على إصابة الرئة نستخدم أسلوب الضغط التهوية التي تسيطر عليها باستخدام هيدروليك 900 C من شركة سيمنز (DRE البيطري ، الولايات المتحدة). وسيتم استخدام الحيوانات التهوية الضغط الشهيقي الذروة من 45 تردد ، ميليبار من 80 الأنفاس / دقيقة وتحت ضغط نهاية الزفير الإيجابي 0-3 من ميليبار مع FIO 2 = 1.0. ينبغي للإلهام لتكون نسبة انتهاء 1:1. على الرغم من حقيقة أن يتم بناء 900 C هيدروليك والتنفس الصناعي للبشر ، واستخدامه في جهاز التنفس الصناعي الإعداد الضغط تسيطر اعمالا جيدة للتهوية من الفئران. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> رصد معدل ضربات القلب مع تخطيط القلب (مثل هيوليت باكارد ، B blingen ، ألمانيا). تأكد من أن معدل ضربات القلب لا يقل عن 400. وينبغي للمرء أن يرى تحولا من محور القلب إلى الصواب ، عندما وضعت التهوية الميكانيكية كعلامة على زيادة الضغوط الشريان الرئوي لاحقة إلى زيادة في الضغط داخل الصدر. إذا كان الماوس بطء تطور ، والتحقق من درجة الحرارة وجرعة مخدر / الاعتقال. Xylacin / Ketamin التخدير يؤدي الى قلب القلب من 250 / دقيقة ، وبالتالي لا يوصى. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تطبيق استبدال السوائل المناسبة. ضخ المياه المالحة طبيعية مع 0.1 ينبغي أن يقوم مل / ساعة عن طريق قسطرة الشرايين أو الأوردة قبل تهوية كافية لضمان تقديم وريدي. بسبب الضغوط التهوية العالية هو ضعف العائد الوريدي إلى القلب ، مما قد يؤدي إلى انخفاض ضغط على الحاسمة الشرياني يعني. أيضا ، يمكن إعطاء بلعة المالحة من 500 ميكرولتر IP قبل الجراحة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع القسطرة في الشريان السباتي لتسجيل المستمر لضغط الدم (27). نعلق الذراع إلى الهيئة قبل البدء في تشريح الشريان. يتم كشفها عن طريق الشريان السباتي تشريح حادة في عضلات رغامى. عقب التعرض لمزيد من الحذر وتجنب أي صدمة الأنسجة (خاص للعصب المبهم) ، يتم إدخال القسطرة في الإناء باستخدام اثنين من الغرز والمشبك الصغير (37). وسوف يعرض هذا الجزء أطول من الشريان. وضع ربطة في نهاية جدا من الشريان السباتي. نعلق أكبر المشبك إلى نهاية خياطة للحصول على التوتر أو يحملق عشرالدرز الإلكتروني إلى الجدول باستخدام الشريط. مكان آخر الدرز حول تشريح الشريان والشريان حتى نهاية البعيدة جدا. هنا ، وضع المشبك الصغيرة. استخدام مقص لقطع صغيرة فتحة صغيرة في شريان قطري. عقد فتح مع ملقط غرامة (دومون ، WPI) ودفع القسطرة الحجم المناسب بيديك / ملقط. جعل عقدة مع خياطة بلدكم الثاني وتأمين الشريان. تخفيف المشبك ، ودفع المزيد من القسطرة. تأمين القسطرة مع عقدة عدة والشريط. بدلا من ذلك يمكن للقسطرة الشريان السباتي يكون المكان في نهاية التجربة لجمع عينات الدم الشرياني لتحليل غازات الدم. </li></ol> 3. استعادة عينات الأنسجة بعد 3 ساعات من التهوية الميكانيكية ، ويتم جمع عينات لتقييم مدى إصابة الرئة. نوصي جمع brochnoalveolar غسل السائل (BAL) ، الدم في الشرايين وأنسجة الرئة. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الحصول على السائل BAL في نهاية التجربة. بعد تعميق التخدير ، وتدفق أنبوب القصبة الهوائية مع الفوسفات مخزنة المالحة 1 مل (PBS). وينبغي أن يظل السائل في القصبة الهوائية / الرئة لمدة ثلاث ثوان قبل أن الانتعاش عن طريق حقنة متصلة. وBAL هو الإضافية مجمدة في النيتروجين السائل وتخزينه عند درجة -80 لمزيد من التحليل. أن تكون على علم بأن حجم استرداد يمكن أن يكون أقل بكثير من 1 ملم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إجراء تحليل غازات الدم في نهاية التجربة. من أجل ذلك ، ينبغي إجراء شق الحق دون القص. عقد القص مع ملقط ومدى طول شق القفص الصدري. المقبل ، هو قطعي الحجاب الحاجز عند الحواف وقطع من الاضلاع. الآن هناك وجهة نظر فتح في أسفل فتحة في القفص الصدري. رفع القص مع ملقط وفتح القفص الصدري بسبب انقطاع طويلة في الجهة اليمنى واليسرى (الوحشي ممكن) بحيث يتم تشغيل كامل جدار الصدر الأمامي يصل أجنحة. وينبغي القيام بذلك ، في حين لا يزال على حيوانات التجارب التهوية ميكانيكيا. هو ثقب في البطين الأيسر باستخدام 27 ½ يتم تنفيذ مجموعة الإبرة وتحليل الدم الشرياني باستخدام نظام I - STAT (ابوت ، الولايات المتحدة). إذا كان ينبغي إجراء تحليل غازات الدم الشرياني ، لا يمكن الحصول على BAL ، لأن هذا سيكون المحير كبيرا في النتائج. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بدلا من ذلك إلى الأسلوب أعلاه ، يمكن جمع عينات الدم الشرياني عن طريق قسطرة الشريان السباتي. ومع ذلك ينبغي أن يتم ذلك قبل الحصول على BAL. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استئصال الرئة EN - التكتل وسحب ما يصل للقلب وقطع القصبة الهوائية. وقطعة من النسيج على استعداد لامتصاص الدم ، وبالتالي فإن موقع الجراحية مرئيا. سحب القلب في اتجاه البطن وقطع بعناية على طول العمود الفقري لتعبئة جميع أجهزة الصدري. قطع الشريان الأورطي ، وإزالة الأجهزة الصدري ووضعها على طاولة جراحية نظيفة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطع القلب وعاء كبير من عينة الانسجة. تأكد من عدم وجود أنسجة الغدة الصعترية لا تزال تعلق في الرئة. فصل الرئتين مع مقص ومكان في أنابيب تجميد الفردية والمفاجئة. المحل في -80 درجة مئوية لمزيد من التحليل. </li></ol> 4. قياس إصابة الرئة نوصي باستخدام المعلمات النتيجة التالية لتقييم مدى إصابة الرئة : قم بإجراء ELISA الزلال (Bethyl مختبرات ، الولايات المتحدة الأمريكية) والميلوبيروكسيديز (MPO) ELISA (Hycult التكنولوجيا الحيوية ، الولايات المتحدة) لتقييم مدى ضعف الحاجز وكمية التهابات الخلايا الموجودة في السائل BAL. إجراء ELISA MPO شكل أيضا أنسجة الرئة. إذا الرطب الجاف إلى النسبة تقاس نحن لا يحصلون على السوائل BAL وليس مسح الدموية الرئوية (انظر 3.3). قياس الوزن في الرئتين بعد الختان. ثم يتم مجفد الرئتين لمدة 48 ساعة وأنسجة الرئة وتقاس مرة أخرى. ثم يتم قياس نسبة الرطوبة الى جفاف كما ملغ من الماء في الأنسجة الجافة ملغ من (5). <img src="/files/ftp_upload/2525/2525fig1.jpg" alt="الشكل 1" /> وكان الرقم 1. البروتين المتواجد في BAL ردا على الفئران. فيلي تم تخدير مع بنتوباربيتال ، وضعت التهوية الميكانيكية والتهوية والفئران باستخدام الضغوط التي تسيطر عليها الإعدادات (الضغط الشهيقي من 45 ميليبار ، سواء كان إيجابيا نهاية exspiratory ميليبار الضغط 3 ، 100 ٪ من وحي تركيز الأوكسجين). بعد 0 ، وكان حصادها 1 و 2 و 3 ساعات من BAL التهوية وكان محتوى البروتين كميا باستخدام حمض مقايسة bicinchoninic (BCA مقايسة). ويظهر هذا التغيير النسبي في محتوى البروتين تطبيع إلى 0 ساعة من التهوية (ن = 4 في المجموعة ، ويشير * ع &lt;0.05 مقارنة مع الرقابة ، يعني ± SEM)

<ol>
	<li>Eckle, T., Faigle, M., Grenz, A., Laucher, S., Thompson, L. F., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A2B+adenosine+receptor+dampens+hypoxia-induced+vascular+leak.">A2B adenosine receptor dampens hypoxia-induced vascular leak.</a> Blood. 111, 2024-2035 (2008).</li><li>Eckle, T., Fullbier, L. G. r. e. n. z., A, ., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Usefulness+of+pressure-controlled+ventilation+at+high+inspiratory+pressures+to+induce+acute+lung+injury+in+mice.">Usefulness of pressure-controlled ventilation at high inspiratory pressures to induce acute lung injury in mice.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 295, 718-724 (2008).</li><li>Eckle, T., Fullbier, L., Wehrmann, M., Khoury, J., Mittelbronn, M., Ibla, J., Rosenberger, P., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+ectonucleotidases+CD39+and+CD73+in+innate+protection+during+acute+lung+injury.">Identification of ectonucleotidases CD39 and CD73 in innate protection during acute lung injury.</a> J Immunol. 178, 8127-8137 (2007).</li><li>Eckle, T., Grenz, A., Kohler, D., Redel, A., Falk, M., Rolauffs, B., Osswald, H., Kehl, F., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systematic+evaluation+of+a+novel+model+for+cardiac+ischemic+preconditioning+in+mice.">Systematic evaluation of a novel model for cardiac ischemic preconditioning in mice.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 291, 2533-2540 (2006).</li><li>Eckle, T., Grenz, A., Laucher, S., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A2B+adenosine+receptor+signaling+attenuates+acute+lung+injury+by+enhancing+alveolar+fluid+clearance+in+mice.">A2B adenosine receptor signaling attenuates acute lung injury by enhancing alveolar fluid clearance in mice.</a> J Clin Invest. 118, 3301-3315 (2008).</li><li>Eckle, T., Krahn, T., Grenz, A., Kohler, D., Mittelbronn, M., Ledent, C., Jacobson, M. A., Osswald, H., Thompson, L. F., Unertl, K., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardioprotection+by+ecto-5'-nucleotidase+(CD73)+and+A2B+adenosine+receptors.">Cardioprotection by ecto-5'-nucleotidase (CD73) and A2B adenosine receptors.</a> Circulation. 115, 1581-1590 (2007).</li><li>Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adenosine:+an+old+drug+newly+discovered.">Adenosine: an old drug newly discovered.</a> Anesthesiology. 111, 904-915 (2009).</li><li>Eltzschig, H. K., Eckle, T., Mager, A., Kuper, N., Karcher, C., Weissmuller, T., Boengler, K., Schulz, R., Robson, S. C., Colgan, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ATP+release+from+activated+neutrophils+occurs+via+connexin+43+and+modulates+adenosine-dependent+endothelial+cell+function.">ATP release from activated neutrophils occurs via connexin 43 and modulates adenosine-dependent endothelial cell function.</a> Circ Res. 99, 1100-1108 (2006).</li><li>Eltzschig, H. K., Ibla, J. C., Furuta, G. T., Leonard, M. O., Jacobson, K. A., Enjyoji, K., Robson, S. C., Colgan, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coordinated+adenine+nucleotide+phosphohydrolysis+and+nucleoside+signaling+in+posthypoxic+endothelium:+role+of+ectonucleotidases+and+adenosine+A2B+receptors.">Coordinated adenine nucleotide phosphohydrolysis and nucleoside signaling in posthypoxic endothelium: role of ectonucleotidases and adenosine A2B receptors.</a> J Exp Med. 198, 783-796 (2003).</li><li>Eltzschig, H. K., Kohler, D., Eckle, T., Kong, T., Robson, S. C., Colgan, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Central+role+of+Sp1-regulated+CD39+in+hypoxia/ischemia+protection.">Central role of Sp1-regulated CD39 in hypoxia/ischemia protection.</a> Blood. 113, 224-232 (2009).</li><li>Frick, J. S., MacManus, C. F., Scully, M., Glover, L. E., Eltzschig, H. K., Colgan, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contribution+of+adenosine+A2B+receptors+to+inflammatory+parameters+of+experimental+colitis.">Contribution of adenosine A2B receptors to inflammatory parameters of experimental colitis.</a> J Immunol. 182, 4957-4964 (2009).</li><li>Grenz, A., Eckle, T., Zhang, H., Huang, D. Y., Wehrmann, M., Kohle, C., Unertl, K., Osswald, H., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+a+hanging-weight+system+for+isolated+renal+artery+occlusion+during+ischemic+preconditioning+in+mice.">Use of a hanging-weight system for isolated renal artery occlusion during ischemic preconditioning in mice.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 292, 475-485 (2007).</li><li>Grenz, A., Osswald, H., Eckle, T., Yang, D., Zhang, H., Tran, Z. V., Klingel, K., Ravid, K., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Reno-Vascular+A2B+Adenosine+Receptor+Protects+the+Kidney+from+Ischemia.">The Reno-Vascular A2B Adenosine Receptor Protects the Kidney from Ischemia.</a> PLoS Medicine. 5, e137-e137 (2008).</li><li>Grenz, A., Zhang, H., Eckle, T., Mittelbronn, M., Wehrmann, M., Kohle, C., Kloor, D., Thompson, L. F., Osswald, H., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+role+of+ecto-5'-nucleotidase+(CD73)+in+renal+ischemia.">Protective role of ecto-5'-nucleotidase (CD73) in renal ischemia.</a> J Am Soc Nephrol. 18, 833-845 (2007).</li><li>Grenz, A., Zhang, H., Hermes, M., Eckle, T., Klingel, K., Huang, D. Y., Muller, C. E., Robson, S. C., Osswald, H., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contribution+of+E-NTPDase1+(CD39)+to+renal+protection+from+ischemia-reperfusion+injury.">Contribution of E-NTPDase1 (CD39) to renal protection from ischemia-reperfusion injury.</a> FASEB J. 21, 2863-2873 (2007).</li><li>Grenz, A., Zhang, H., Weingart, J., von Wietersheim, S., Eckle, T., Schnermann, J. B., Kohle, C., Kloor, D., Gleiter, C. H., Vallon, V., Eltzschig, H. K., Osswald, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lack+of+effect+of+extracellular+adenosine+generation+and+signalling+on+renal+erythropoietin+secretion+during+hypoxia.">Lack of effect of extracellular adenosine generation and signalling on renal erythropoietin secretion during hypoxia.</a> Am J Physiol Renal Physiol. , (2007).</li><li>Haeberle, H. A., Durrstein, C., Rosenberger, P., Hosakote, Y. M., Kuhlicke, J., Kempf, V. A., Garofalo, R. P., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxygen-independent+stabilization+of+hypoxia+inducible+factor+(HIF)-1+during+RSV+infection.">Oxygen-independent stabilization of hypoxia inducible factor (HIF)-1 during RSV infection.</a> PLoS ONE. 3, e3352-e3352 (2008).</li><li>Hart, M. L., Gorzolla, I. C., Schittenhelm, J., Robson, S. C., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SP1-dependent+induction+of+CD39+facilitates+hepatic+ischemic+preconditioning.">SP1-dependent induction of CD39 facilitates hepatic ischemic preconditioning.</a> J Immunol. 184, 4017-4024 (2010).</li><li>Hart, M. L., Henn, M., Kohler, D., Kloor, D., Mittelbronn, M., Gorzolla, I. C., Stahl, G. L., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+extracellular+nucleotide+phosphohydrolysis+in+intestinal+ischemia-reperfusion+injury.">Role of extracellular nucleotide phosphohydrolysis in intestinal ischemia-reperfusion injury.</a> FASEB J. 22, 2784-2797 (2008).</li><li>Hart, M. L., Jacobi, B., Schittenhelm, J., Henn, M., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cutting+Edge:+A2B+Adenosine+receptor+signaling+provides+potent+protection+during+intestinal+ischemia/reperfusion+injury.">Cutting Edge: A2B Adenosine receptor signaling provides potent protection during intestinal ischemia/reperfusion injury.</a> J Immunol. 182, 3965-3968 (2009).</li><li>Hart, M. L., Kohler, D., Eckle, T., Kloor, D., Stahl, G. L., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+treatment+of+mouse+or+human+blood+with+soluble+5'-nucleotidase+inhibits+platelet+aggregation.">Direct treatment of mouse or human blood with soluble 5'-nucleotidase inhibits platelet aggregation.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 28, 1477-1483 (2008).</li><li>Hart, M. L., Much, C., Gorzolla, I. C., Schittenhelm, J., Kloor, D., Stahl, G. L., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+adenosine+production+by+ecto-5'-nucleotidase+protects+during+murine+hepatic+ischemic+preconditioning.">Extracellular adenosine production by ecto-5'-nucleotidase protects during murine hepatic ischemic preconditioning.</a> Gastroenterology. 135, 1739-1750 (2008).</li><li>Hart, M. L., Much, C., Kohler, D., Schittenhelm, J., Gorzolla, I. C., Stahl, G. L., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+a+hanging-weight+system+for+liver+ischemic+preconditioning+in+mice.">Use of a hanging-weight system for liver ischemic preconditioning in mice.</a> Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 294, 1431-1440 (2008).</li><li>Hartmann, H., Eltzschig, H. K., Wurz, H., Hantke, K., Rakin, A., Yazdi, A. S., Matteoli, G., Bohn, E., Autenrieth, I. B., Karhausen, J., Neumann, D., Colgan, S. P., Kempf, V. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypoxia-independent+activation+of+HIF-1+by+enterobacteriaceae+and+their+siderophores.">Hypoxia-independent activation of HIF-1 by enterobacteriaceae and their siderophores.</a> Gastroenterology. 134, 756-767 (2008).</li><li>Heinzelmann, F., Jendrossek, V., Lauber, K., Nowak, K., Eldh, T., Boras, R., Handrick, R., Henkel, M., Martin, C., Uhlig, S., Kohler, D., Eltzschig, H. K., Wehrmann, M., Budach, W., Belka, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Irradiation-induced+pneumonitis+mediated+by+the+CD95/CD95-ligand+system.">Irradiation-induced pneumonitis mediated by the CD95/CD95-ligand system.</a> J Natl Cancer Inst. 98, 1248-1251 (2006).</li><li>Koeppen, M., Eckle, T., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+deletion+of+the+A1+adenosine+receptor+abolishes+heart-rate+slowing+effects+of+intravascular+adenosine+in+vivo.">Selective deletion of the A1 adenosine receptor abolishes heart-rate slowing effects of intravascular adenosine in vivo.</a> PLoS One. 4, e6784-e6784 (2009).</li><li>Kohler, D., Eckle, T., Faigle, M., Grenz, A., Mittelbronn, M., Laucher, S., Hart, M. L., Robson, S. C., Muller, C. E., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CD39/ectonucleoside+triphosphate+diphosphohydrolase+1+provides+myocardial+protection+during+cardiac+ischemia/reperfusion+injury.">CD39/ectonucleoside triphosphate diphosphohydrolase 1 provides myocardial protection during cardiac ischemia/reperfusion injury.</a> Circulation. 116, 1784-1794 (2007).</li><li>Kuhlicke, J., Frick, J. S., Morote-Garcia, J. C., Rosenberger, P., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypoxia+Inducible+Factor+(HIF)-1+Coordinates+Induction+of+Toll-Like+Receptors+TLR2+and+TLR6+during+Hypoxia.">Hypoxia Inducible Factor (HIF)-1 Coordinates Induction of Toll-Like Receptors TLR2 and TLR6 during Hypoxia.</a> PLoS ONE. 2, e1364-e1364 (2007).</li><li>Morote-Garcia, J. C., Rosenberger, P., Kuhlicke, J., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HIF-1-dependent+repression+of+adenosine+kinase+attenuates+hypoxia-induced+vascular+leak.">HIF-1-dependent repression of adenosine kinase attenuates hypoxia-induced vascular leak.</a> Blood. 111, 5571-5580 (2008).</li><li>Morote-Garcia, J. C., Rosenberger, P., Nivillac, N. M., Coe, I. R., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypoxia-inducible+factor-dependent+repression+of+equilibrative+nucleoside+transporter+2+attenuates+mucosal+inflammation+during+intestinal+hypoxia.">Hypoxia-inducible factor-dependent repression of equilibrative nucleoside transporter 2 attenuates mucosal inflammation during intestinal hypoxia.</a> Gastroenterology. 136, 607-618 (2009).</li><li>Reutershan, J., Vollmer, I., Stark, S., Wagner, R., Ngamsri, K. C., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adenosine+and+inflammation:+CD39+and+CD73+are+critical+mediators+in+LPS-induced+PMN+trafficking+into+the+lungs.">Adenosine and inflammation: CD39 and CD73 are critical mediators in LPS-induced PMN trafficking into the lungs.</a> FASEB J. 23, 473-482 (2009).</li><li>Schingnitz, U., Hartmann, K., Macmanus, C. F., Eckle, T., Zug, S., Colgan, S. P., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Signaling+through+the+A2B+adenosine+receptor+dampens+endotoxin-induced+acute+lung+injury.">Signaling through the A2B adenosine receptor dampens endotoxin-induced acute lung injury.</a> J Immunol. 184, 5271-5279 (2010).</li><li>Thompson, L. F., Eltzschig, H. K., Ibla, J. C., Van De Wiele, C. J., Resta, R., Morote-Garcia, J. C., Colgan, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Crucial+role+for+ecto-5'-nucleotidase+(CD73)+in+vascular+leakage+during+hypoxia.">Crucial role for ecto-5'-nucleotidase (CD73) in vascular leakage during hypoxia.</a> J. Exp. Med. 200, 1395-1405 (2004).</li><li>Aherne, C. M., Kewley, E. M., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+resurgence+of+A2B+adenosine+receptor+signaling.">The resurgence of A2B adenosine receptor signaling.</a> Biochim Biophys Acta. , (2010).</li><li>Eckle, T., Koeppen, M., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+extracellular+adenosine+in+acute+lung+injury.">Role of extracellular adenosine in acute lung injury.</a> Physiology (Bethesda). 24, 298-306 (2009).</li><li>Koeppen, M., Feil, R., Siegl, D., Feil, S., Hofmann, F., Pohl, U., de Wit, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=cGMP-dependent+protein+kinase+mediates+NO-+but+not+acetylcholine-induced+dilations+in+resistance+vessels+in+vivo.">cGMP-dependent protein kinase mediates NO- but not acetylcholine-induced dilations in resistance vessels in vivo.</a> Hypertension. 44, 952-955 (2004).</li></ol>

ليس لدينا شيء في الكشف عنها.

هذه الدراسة توضح أسلوب أداء التنفس الناجم عن إصابة الرئة في الفئران. هذا النموذج يوضح إصابة استنساخه إلى حد كبير بسبب ارتفاع الضغط التهوية. يمكن للمحققين الذين يعتبرون دراسة الاصابة الحادة والرئة في الفئران الاستفادة من هذا النموذج.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><th> اسم كاشف </th><th> شركة </th><th> فهرس العدد </th><th> تعليقات (اختياري) </th></tr><tr><td> بنتوباربيتال الصوديوم (زائد فادح) </td><td> نوادي المضاربة والإستثمار صيدلية ليرة سورية المحدودة ، </td><td> VPL 9372 </td><td> 4mg/mL في المياه المالحة </td></tr><tr><td> Insyte 22 G </td><td> بيكتون ديكنسون </td><td> ن / أ </td><td></td></tr><tr><td> خياطة ، والحرير 4.0 </td><td> جهاز هارفارد </td><td> 517698 </td><td></td></tr><tr><td> خياطة ، Prolene 8.0 </td><td> Ethicon ، الولايات المتحدة الأمريكية </td><td> M8739 </td><td> يمكن إعادة استخدامها </td></tr><tr><td> سيمنز 900 درجة مئوية </td><td> DRE البيطري ، الولايات المتحدة الأمريكية </td><td> # 336 </td><td> تجديد </td></tr><tr><td> تشريح المجهر (SZX10) </td><td> اوليمبوس </td><td> ن / أ </td><td> النظر في المسافة السخي العمل </td></tr><tr><td> الجدول التدفئة </td><td> غ ، Effenberger ، ألمانيا </td><td> ن / أ </td><td> فقط واحد مزود </td></tr><tr><td> جهاز ضغط الدم </td><td> السيبرانية تحسس ، المؤتمر الوطني العراقي </td><td> BPM02 </td><td></td></tr><tr><td> أنا STAT </td><td> ابوت </td><td> ن / أ </td><td></td></tr></tbody></table>

pressure controlled ventilation to induce acute lung injury in mice

وتستخدم على نطاق واسع نماذج الفئران للتحقيق في الإصابات الحادة للأنظمة الأجهزة المختلفة (1-34). إصابة الرئة الحادة (علي) ، والذي يحدث مع التهوية الميكانيكية لفترات طويلة ، ويسهم في الاعتلال والوفيات من الأمراض الخطيرة ، ودراسات حول الرواية الأهداف الدوائية الجينية أو هي مجالات التحقيق المكثف (1-3 ، 5 ، 8 ، 26 ، 30 ، 33 -36). تعرف علي من بداية الحادة من المرض ، مما يؤدي إلى عدم القلب وذمة رئوية وضعف لاحقة من تبادل الغاز الرئوي (36). وقد طورنا نموذجا علي الفئران باستخدام التهوية الضغط التي تسيطر عليها للحث على التنفس الناجم عن إصابة الرئة (2). لهذا الغرض ، C57BL / 6 يتم تخدير الفئران ، ويتم تنفيذها لجراحة تليها تحريض علي طريق التهوية الميكانيكية. والتهوية الفئران في وضع الضغوط التي تسيطر عليها مع ضغط ذروة الشهيق من 45 ميليبار أكثر من 1 -- 3 ساعات. كما يتم تقييم نتائج المعلمات ، وذمة رئوية (الرطب إلى نسبة الجافة) ، الشعبى محتوى السوائل الزلال وسوائل القصبات والرئة المحتوى الميلوبيروكسيديز الأنسجة الرئوية وتبادل الغازات (2). باستخدام هذه التقنية يمكن أن نظهر أن يدفع بما فيه الكفاية التهاب حاد في الرئة ويمكن أن نميز بين مجموعات مختلفة أو علاج المورثات (1-3 ، 5). ولذلك قد تكون هذه التقنية مفيدة للباحثين الذين يسعون الى المشاركة في الآليات الجزيئية باستخدام نهج علي الجينية في الفئران مع الجينات المستهدفة الحذف.

Watch this Scientific Journal Video about Pressure Controlled Ventilation to Induce Acute Lung Injury in Mice at JoVE.com

Pressure Controlled Ventilation to Induce Acute Lung Injury in Mice

نموذج الفئران لإصابة الرئة الناجمة عن جهاز التنفس الصناعي هو أداة هامة لدراسة إصابة الرئة الحاد<em&gt; في الجسم الحي</em&gt;. هنا ، نحن تقرير اجب التطبيق سهل<em&gt; في الموقع</em&gt; نموذج لإصابة الرئة الحادة باستخدام الضغط العالي التهوية الميكانيكية للحث على فشل حاد في الرئة.

التهوية الضغط الشواهد للحث على إصابة الرئة الحادة في الفئران

Murine models are extensively used to investigate acute injuries of different organs systems (1-34). Acute lung injury (ALI), which occurs with prolonged ...

pressure-controlled-ventilation-to-induce-acute-lung-injury-in-mice

Research

JoVE Journal

Medicine

18.2K Views.  University of Colorado. نموذج الفئران لإصابة الرئة الناجمة عن جهاز التنفس الصناعي هو أداة هامة لدراسة إصابة الرئة الحاد في الجسم الحي. هنا ، نحن تقرير اجب التطبيق سهل في الموقع نموذج لإصابة الرئة الحادة باستخدام الضغط العالي التهوية الميكانيكية للحث على فشل حاد في الر?...

Video: Pressure Controlled Ventilation to Induce Acute Lung Injury in Mice

The CYP2D6 Animal Model: How to Induce Autoimmune Hepatitis in Mice

Autoimmune hepatitis is a rare but life threatening autoimmune disease of the liver of unknown etiology1,2. In the past many attempts have been made to generate an animal model that reflects the characteristics of the human disease 3-5. However, in various models the induction of disease was rather complex and often hepatitis was only transient3-5. Therefore, we have developed a straightforward mouse model that uses the major human autoantigen in type 2 autoimmune hepatitis (AIH-2), namely hCYP2D6, as a trigger6. Type 1 liver-kidney microsomal antibodies (LKM-1) antibodies recognizing hCYP2D6 are the hallmark of AIH-27,8. Delivery of hCYP2D6 into wildtype FVB or C57BL/6 mice was by an Adenovirus construct (Ad-2D6) that ensures a direct delivery of the triggering antigen to the liver. Thus, the ensuing local inflammation generates a fertile field9 for the subsequent development of autoimmunity. A combination of intravenous and intraperitoneal injection of Ad-2D6 is the most effective route to induce a long-lasting autoimmune damage to the liver (section 1). Here we provide a detailed protocol on how autoimmune liver disease is induced in the CYP2D6 model and how the different aspects of liver damage can be assessed. First, the serum levels of markers indicating hepatocyte destruction, such as aminotransferases, as well as the titers of hCYP2D6 antibodies are determined by sampling blood retroorbitaly (section 2). Second, the hCYP2D6-specific T cell response is characterized by collecting lymphocytes from the spleen and the liver. In order to obtain pure liver lymphocytes, the livers are perfused by PBS via the portal vein (section 3), digested in collagen and purified over a Percoll gradient (section 4). The frequency of hCYP2D6-specific T cells is analyzed by stimulation with hCYP2D6 peptides and identification of IFN&gamma;-producing cells by flow cytometry (section 5). Third, cellular infiltration and fibrosis is determined by immunohistochemistry of liver sections (section 6). Such analysis regimen has to be conducted at several times after initiation of the disease in order to prove the chronic nature of the model. The magnitude of the immune response characterized by the frequency and activity of hCYP2D6-specific T and/or B cells and the degree of the liver damage and fibrosis have to be assessed for a subsequent evaluation of possible treatments to prevent, delay or abrogate the autodestructive process of the liver.

Infection of mice with an Adenovirus expressing the major human autoantigen cytochrome P450 2D6 (hCYP2D6) recognized by sera of patients suffering from type 2 autoimmune hepatitis results in a persistent form of autoimmune-mediated liver disease characterized by extensive hepatitis, fibrosis and generation of a CYP2D6-specific immune response.

النموذج الحيواني CYP2D6: كيف للحث على كسرطان الكبد في الفئران

Autoimmune hepatitis is a rare but life threatening autoimmune disease of the liver of unknown etiology1,2. In the past many attempts have been made to ...

Controlled Cervical Laceration Injury in Mice

Use of genetically modified mice enhances our understanding of molecular mechanisms underlying several neurological disorders such as a spinal cord injury (SCI). Freehand manual control used to produce a laceration model of SCI creates inconsistent injuries often associated with a crush or contusion component and, therefore, a novel technique was developed. Our model of cervical laceration SCI has resolved inherent difficulties with the freehand method by incorporating 1) cervical vertebral stabilization by vertebral facet fixation, 2) enhanced spinal cord exposure, and 3) creation of a reproducible laceration of the spinal cord using an oscillating blade with an accuracy of &plusmn;0.01 mm in depth without associated contusion. Compared to the standard methods of creating a SCI laceration such as freehand use of a scalpel or scissors, our method has produced a consistent lesion. This method is useful for studies on axonal regeneration of corticospinal, rubrospinal, and dorsal ascending tracts.

A novel technique to create a reproducible in vivo model of cervical spinal cord laceration injury in the mouse is described. This technique is based on spine stabilization by fixation of the cervical facets and laceration of the spinal cord using an oscillating blade with an accuracy of &plusmn;0.01 mm.

تسيطر الاصابات تهتك عنق في الفئران

Use of genetically modified mice enhances our  understanding of molecular mechanisms underlying several neurological disorders  such as a spinal cord ...

Ischemia-reperfusion Model of Acute Kidney Injury and Post Injury Fibrosis in Mice

Ischemia-reperfusion induced acute kidney injury (IR-AKI) is widely used as a model of AKI in mice, but results are often quite variable with high, often unreported mortality rates that may confound analyses. Bilateral renal pedicle clamping is commonly used to induce IR-AKI, but differences between effective clamp pressures and/or renal responses to ischemia between kidneys often lead to more variable results. In addition, shorter clamp times are known to induce more variable tubular injury, and while mice undergoing bilateral injury with longer clamp times develop more consistent tubular injury, they often die within the first 3 days after injury due to severe renal insufficiency. To improve post-injury survival and obtain more consistent and predictable results, we have developed two models of unilateral ischemia-reperfusion injury followed by contralateral nephrectomy. Both surgeries are performed using a dorsal approach, reducing surgical stress resulting from ventral laparotomy, commonly used for mouse IR-AKI surgeries. For induction of moderate injury BALB/c mice undergo unilateral clamping of the renal pedicle for 26 min and also undergo simultaneous contralateral nephrectomy. Using this approach, 50-60% of mice develop moderate AKI 24 hr after injury but 90-100% of mice survive. To induce more severe AKI, BALB/c mice undergo renal pedicle clamping for 30 min followed by contralateral nephrectomy 8 days after injury. This allows functional assessment of renal recovery after injury with 90-100% survival. Early post-injury tubular damage as well as post injury fibrosis are highly consistent using this model.

We describe models of moderate and severe ischemia-reperfusion-induced kidney injury in which the mice undergo unilateral renal pedicle clamping followed by simultaneous or delayed contralateral nephrectomy, respectively. These models consistently give rise to renal dysfunction and post-injury fibrosis, but injury severity and survival are dependent on mouse background, age and surgical equipment.

نقص التروية-ضخه نموذج من إصابة الكلى الحاد والتليف آخر الاصابات في الفئران

Ischemia-reperfusion induced acute kidney injury (IR-AKI) is widely used as a model of AKI in mice, but results are often quite variable with high, often ...

Controlled Cortical Impact Model for Traumatic Brain Injury

Every year over a million Americans suffer a traumatic brain injury (TBI). Combined with the incidence of TBIs worldwide, the physical, emotional, social, and economical effects are staggering. Therefore, further research into the effects of TBI and effective treatments is necessary. The controlled cortical impact (CCI) model induces traumatic brain injuries ranging from mild to severe. This method uses a rigid impactor to deliver mechanical energy to an intact dura exposed following a craniectomy. Impact is made under precise parameters at a set velocity to achieve a pre-determined deformation depth. Although other TBI models, such as weight drop and fluid percussion, exist, CCI is more accurate, easier to control, and most importantly, produces traumatic brain injuries similar to those seen in humans. However, no TBI model is currently able to reproduce pathological changes identical to those seen in human patients. The CCI model allows investigation into the short-term and long-term effects of TBI, such as neuronal death, memory deficits, and cerebral edema, as well as potential therapeutic treatments for TBI.

Traumatic brain injuries (TBIs) remain a serious health problem. Using the controlled cortical impact surgery model, research on the effects of TBI and possible treatment methods may be performed.

تسيطر الموديل أثر القشرية لإصابات الدماغ الرضية

Every year over a million Americans suffer a traumatic brain injury (TBI).  Combined with the incidence of TBIs worldwide, the physical, emotional, ...

Cardiac Catheterization in Mice to Measure the Pressure Volume Relationship: Investigating the Bowditch Effect

Animal models that mimic human cardiac disorders have been created to test potential therapeutic strategies. A key component to evaluating these strategies is to examine their effects on heart function. There are several techniques to measure in vivo cardiac mechanics (e.g., echocardiography, pressure/volume relations, etc.). Compared to echocardiography, real-time left ventricular (LV) pressure/volume analysis via catheterization is more precise and insightful in assessing LV function. Additionally, LV pressure/volume analysis provides the ability to instantaneously record changes during manipulations of contractility (e.g., &#946;-adrenergic stimulation) and pathological insults (e.g., ischemia/reperfusion injury). In addition to the maximum (+dP/dt) and minimum (-dP/dt) rate of pressure change in the LV, an accurate assessment of LV function via several load-independent indexes (e.g., end systolic pressure volume relationship and preload recruitable stroke work) can be attained. Heart rate has a significant effect on LV contractility such that an increase in the heart rate is the primary mechanism to increase cardiac output (i.e., Bowditch effect). Thus, when comparing hemodynamics between experimental groups, it is necessary to have similar heart rates. Furthermore, a hallmark of many cardiomyopathy models is a decrease in contractile reserve (i.e., decreased Bowditch effect). Consequently, vital information can be obtained by determining the effects of increasing heart rate on contractility. Our and others data has demonstrated that the neuronal nitric oxide synthase (NOS1) knockout mouse has decreased contractility. Here we describe the procedure of measuring LV pressure/volume with increasing heart rates using the NOS1 knockout mouse model.

This article describes the measurement of murine left ventricular function via pressure/volume analysis at different heart rates.

قسطرة القلب في الفئران لقياس العلاقة حجم الضغط: دراسة تأثير بوديتش

Animal models that mimic human cardiac disorders have been created to test potential therapeutic strategies. A key component to evaluating these ...

Open Tracheostomy Gastric Acid Aspiration Murine Model of Acute Lung Injury Results in Maximal Acute Nonlethal Lung Injury

Acid pneumonitis is a major cause of sterile acute lung injury (ALI) in humans. Acid pneumonitis spans the clinical spectrum from asymptomatic to acute respiratory distress syndrome (ARDS), characterized by neutrophilic alveolitis, and injury to both alveolar epithelium and vascular endothelium. Clinically, ARDS is defined by acute onset of hypoxemia, bilateral patchy pulmonary infiltrates and non-cardiogenic pulmonary edema. Human studies have provided us with valuable information about the physiological and inflammatory changes in the lung caused by ARDS, which has led to various hypotheses about the underling mechanisms. Unfortunately, difficulties determining the etiology of ARDS, as well as a wide range of pathophysiology have resulted in a lack of critical information that could be useful in developing therapeutic strategies.
Translational animal models are valuable when their pathogenesis and pathophysiology accurately reproduce a concept proven in both in vitro and clinical settings. Although large animal models (e.g., sheep) share characteristics of the anatomy of human trachea-bronchial tree, murine models provide a host of other advantages including: low cost; short reproductive cycle lending itself to greater data acquisition; a well understood immunologic system; and a well characterized genome leading to the availability of a variety of gene deletion and transgenic strains. A robust model of low pH induced ARDS requires a murine ALI that targets mainly the alveolar epithelium, secondarily the vascular endothelium, as well as the small airways leading to the alveoli. Furthermore, a reproducible injury with wide differences between different injurious and non-injurious insults is important.
The murine gastric acid aspiration model presented here using hydrochloric acid employs an open tracheostomy and recreates a pathogenic scenario that reproduces the low pH pneumonitis injury in humans. Additionally, this model can be used to examine interaction of a low pH insult with other pulmonary injurious entities (e.g., food particles, pathogenic bacteria).

This protocol induces acute lung injury in a mouse that has close fidelity to the pathogenesis of acid pneumonitis observed in humans. We generate a maximal acute nonlethal low pH lung injury and account for differences in rodent-human anatomic respiratory structure using an open tracheostomy coupled with circumferential pressure release.

فتح القصبة الهوائية المعدة حمض الطموح فأري موديل الحاد الرئة إصابة النتائج في القصوى الحاد غير قاتل الرئة الإصابات

Acid pneumonitis is a major cause of sterile acute lung injury (ALI) in humans. Acid pneumonitis spans the clinical spectrum from asymptomatic to acute ...

Balloon-based Injury to Induce Myointimal Hyperplasia in the Mouse Abdominal Aorta

The use of animal models is essential for a better understanding of MH, one major cause for arterial stenosis.In this article, we demonstrate a murine balloon denudation model, which is comparable with established vessel injury models in large animals. The aorta denudation model with balloon catheters mimics the clinical setting and leads to comparable pathobiological and physiological changes. Briefly, after performing a horizontal incision in the aorta abdominalis, a balloon catheter will be inserted into the vessel, inflated, and introduced retrogradely. Inflation of the balloon will lead to intima injury and overdistension of the vessel. After removing the catheter, the aortic incision will be closed with single stiches. The model shown in this article is reproducible, easy to perform, and can be established quickly and reliably. It is especially suitable for evaluating expensive experimental therapeutic agents, which can be applied in an economical fashion. By using different knockout-mouse strains, the impact of different genes on MH development can be assessed.

This article demonstrates a murine model to study the development of myointimal hyperplasia (MH) after aortic balloon injury.

إصابة القائم على البالون لحمل ميوينتيمال تضخم في الشريان الاورطي البطني الماوس

The use of animal models is essential for a better understanding of MH, one major cause for arterial stenosis.In this article, we demonstrate a murine ...

A Closed-chest Model to Induce Transverse Aortic Constriction in Mice

Research on cardiac hypertrophy and heart failure is frequently based on pressure overload mouse models induced by TAC. The standard procedure is to perform a partial thoracotomy to visualize the transverse aortic arch. However, the surgical trauma caused by the thoracotomy in open-chest models changes the respiratory physiology as the ribs are dissected and left unattached after chest closure. To prevent this, we established a minimally invasive, closed chest approach via lateral thoracotomy. Herein we approach the aortic arch via the 2nd intercostal space without entering the chest cavities, leaving the mouse with a less traumatic injury to recover from. We perform this operation using standard laboratory settings for open chest TAC procedures with equal survival rates. Apart from maintaining physiological breathing patterns due to the closed chest approach, the mice seem to benefit by showing rapid recovery, as the less invasive technique appears to facilitate a fast healing process and to reduce immune response after trauma.

Here, we present a protocol of Transverse Aortic constriction (TAC) via a lateral thoracotomy. This technique is a minimally invasive, closed chest surgical procedure aiming to simulate pressure overload and heart failure in mice utilizing standard TAC laboratory settings.

نموذج الصدر مغلقة للحث على انقباض الابهري عرضية في الفئران

Research on cardiac hypertrophy and heart failure is frequently based on pressure overload mouse models induced by TAC. The standard procedure is to ...

Real-time Pressure-volume Analysis of Acute Myocardial Infarction in Mice

Acute myocardial infarction can lead to acute heart failure and cardiogenic shock. The evaluation of hemodynamics is critical for the evaluation of any potential therapeutic approach directed against acute left ventricular (LV) dysfunction. Current imaging modalities (e.g., echocardiography and magnetic resonance imaging) have several limitations since data on LV pressure cannot directly be measured. LV catheterization in mice undergoing coronary artery occlusion could serve as a novel method for a real-time evaluation of LV function.
At the beginning of the procedure, mice were anesthetized followed by endotracheal intubation. For LV catheterization, the right carotid artery was exposed via middle-neck incision. The catheter was introduced and placed into the LV cavity. Left thoracotomy was conducted and the left main coronary artery (LCA) was ligated. To induce reperfusion, the suture was released after 45 min. Pressure-volume data was recorded at all times.
Ligation of the LCA caused a decrease in LV systolic function as evidenced by a 30% reduction in stroke volume, LV ejection fraction (EF), and cardiac output. Maximum dP/dt as a parameter for LV contractility was also significantly reduced and diastolic function was severely impaired (minimum dP/dt -40%). Reperfusion over a period of 20 min did not lead to a complete recovery of LV function.
Real-time pressure-volume analysis served as a valid procedure for monitoring cardiac function during acute myocardial infarction in mice. Maintaining stable anesthesia and a standardized surgical approach was crucial to ensure valid results. As the early phase of acute myocardial infarction is critical for morbidity and mortality, the delineated method could be beneficial for preclinical evaluation of new strategies for cardioprotection.

Acute myocardial infarction in mice induces acute but incompletely characterized changes in left ventricular (LV) function. LV catheterization in mice undergoing coronary artery occlusion serves as a novel method for a real-time evaluation of LV function.

تحليل حجم الضغط في الوقت الحقيقي من احتشاء عضلة القلب الحاد في الفئران

Acute myocardial infarction can lead to acute heart failure and cardiogenic shock. The evaluation of hemodynamics is critical for the evaluation of any ...

Lung Fixation under Constant Pressure for Evaluation of Emphysema in Mice

Emphysema is a significant feature of chronic obstructive pulmonary disease (COPD). Studies involving an emphysematous mouse model require optimal lung fixation to produce reliable histological specimens of the lung. Due to the nature of the lung&rsquo;s structural composition, which consists largely of air and tissue, there is a risk that it collapses or deflates during the fixation process. Various lung fixation methods exist, each of which has its own advantages and disadvantages. The lung fixation method presented here utilizes constant pressure to enable optimal tissue evaluation for studies using an emphysematous mouse lung model. The main advantage is that it can fix many lungs with the same condition at one time. Lung specimens are obtained from chronic cigarette smoke-exposed mice. Lung fixation is performed using specialized equipment that enables the production of constant pressure. This constant pressure maintains the lung in a reasonably inflated state. Thus, this method generates a histological specimen of the lung that is suitable to evaluate cigarette smoke-induced mild emphysema.

Presented here is a useful protocol for lung fixation that creates a stable condition for histological evaluate of lung specimens from a mouse model of emphysema. The main advantage of this model is that it can fix many lungs with the same constant pressure without lung collapse or deflation.

تثبيت الرئة تحت الضغط المستمر لتقييم انتفاخ الرئة في الفئران

Emphysema is a significant feature of chronic obstructive pulmonary disease (COPD). Studies involving an emphysematous mouse model require optimal lung ...